实验三茎段培养与茎尖剥离

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植物的茎尖培养脱毒技术

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（3）茎尖剥离在双筒解剖镜下。切除叶片使芽体暴露，用解剖针剥掉幼叶，直到只剩下2个最幼小的叶原基。
（4）茎尖培养用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃，光照 16小时，光照强度为2000lx，平均两周进行一次转接，5～7周可获得单个小植株。
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8Hale Waihona Puke 植物的茎尖培养脱毒技术优缺点：
• 茎尖生长点的培养成了去除植物病毒，使植物复壮的重要方法。茎尖培养还可以去除其他病原体，如细菌、真菌等。
• 茎尖越小，去病毒机会越大，脱毒效果就越好，但同时因为其含营养及水量太低，故培养时对培养基的要求就越高，对剥离技术要求也越高。
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植物的茎尖培养脱毒技术应用
• 茎尖脱毒培养对植物病毒的脱除效果好，后代遗传性稳定，是目前生产上最常用的脱毒措施，已在马铃薯、花卉、水果、蔬菜等作物脱毒快繁上得到了广泛应用。
• （2）切取茎尖的大小虽然切取茎尖越小，带有病毒的可能性就越小，但组织培养中，切取的茎尖太小，则不易成活。不同种类的植物和不同病毒，切取的最适茎尖大小也不同。
• （3）组织培养常用基本培养基是MS培养基，它有较高浓度的无机盐，对促进组织分化和愈伤组织生长有利；植物生长调节的种类和配比依培养种类和生长时期来调整。
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酒精擦拭手
外植体消毒
浸泡5-7min
器械消毒精选PPT课件
酒精灯灼烧
酒精擦拭培养皿 5
酒精擦拭
旋转灼烧
显微镜下获取茎尖
接种
盖好瓶塞
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几种方法的配合使用是提高植物脱毒效果：
• (1) 高温热处理与微茎尖脱毒培养技术 • (2) 高温热处理与微（体）茎尖嫁接培养技术 • (3) 化学处理与茎尖脱毒培养技术

植物的茎尖培养

植物的茎尖培养姓名: 李希东专业: 植物学学号: 200808201 日期: 2009.4.25 成绩:一、实验目的：1. 掌握茎尖培养的原理和方法；2. 练习使用实体显微镜剥离茎尖；二、实验原理：植物细胞具有全能性，即每个植物细胞含能产生完整植株的全部遗传基因。

理论上讲，只要条件合适，含全部遗传基因的细胞都能分裂分化，产生完整植株。

在茎尖和根尖的分生组织中一般是无毒或仅含极低浓度的病毒粒子，而较老的组织中，病毒含量随离茎尖距离的增加而提高。

据此原理采用茎尖组织培养可获得无毒植株。

三、实验材料、器皿：实验材料：冬青顶芽实验器皿：高压蒸汽灭菌锅、电子天平、微波炉、三角瓶、培养皿、超净工作台、实体显微镜、酒精灯、烧杯、量筒、移液器、pH试纸、橡皮筋、解剖针、滤纸、剪刀、容量瓶、长柄镊子、酒精四、实验步骤：1.培养基配制配制母液：（按照培养基配方，配置不同扩大倍数的培养基母液）大量元素：母液扩大20倍；微量元素：母液扩大1000倍；CaCl2·2H2O：母液扩大100倍；铁盐：母液扩大200倍。

培养基配制方案：1. MS2. MS+BA 0.5 mg/L3. MS+BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L4. MS+BA 1.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L5. MS+BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L6. MS+BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L按方案依次加入大量元素、微量元素、铁盐和有机物质，加入蔗糖30g/L，琼脂6.0g/L，肌醇50mg/L，水解乳清蛋白300 mg/L，和不同浓度的激素，定容到400ml，混合后微波炉加热溶解，再按配方加入各种激素，调节pH值为5.8-6.0，分装到锥形瓶中，每瓶20-25ml，用锡箔纸封口。

本实验选取1，4，6号培养基。

2. 灭菌：高压锅灭菌，121℃，保温20min，冷却，凝固，用于实验。

3. 接种（实体显微镜剥离茎尖－接种）（1）材料表面消毒：植物茎尖（顶芽或侧芽）用自来水水冲净，70％的酒精漂洗材料半分钟，然后放入0.1％的升汞中进行表面消毒8-10min，用无菌水冲洗材料3-5次。

茎尖培养脱毒技术

植物脱毒技术
一、茎尖培养脱毒 3．剥取茎尖与接种在超净工作台上，将已消毒的芽放在垫有无菌滤纸的培养皿中（已灭菌）。在双筒解剖镜下，用解剖针或镊子将材料固定于视野中，用解剖刀尖仔细剥去幼叶，至出现裸露的生长点。用刀尖切下带1～2个叶原基的生长点（约0.3～0.5mm)。用解剖针或解剖刀尖将切下的茎尖转至培养基上（顶部向上)，每管接 1～2个茎尖。为防止茎尖失水，可用无菌水润湿滤纸。操作中注意随时更换滤纸和接种工具，剥取茎尖时切勿损伤生长点。
植物脱毒技术
一、茎尖培养脱毒 5．生根诱导一些植物茎尖培养形成绿芽后，基部很快发生不定根。而另一些植物不产生不定根，必须将无根绿苗再诱导才能生根成为完整植株。诱导生根的方法是将2～3cm高的无根苗转入生根培养基，继续培养1～2个月即可形成根。一些植物茎尖离体培养极难生根，即使转入生根培养基诱导也难奏效（如桃、苹果），这类植物的无病毒绿芽可通过微体嫁接法获得完整植株。如果取茎尖脱毒试管苗的茎尖（可大于第一次切取的茎尖），再培养，即二次茎尖培养脱毒率可达 100％。
植物脱毒技术
一、茎尖培养脱毒
植物脱毒技术
一、茎尖培养脱毒 2．茎尖大小与脱毒效果
用于脱毒的茎尖外植体可以是顶端分生组织即生长点，最大直径 0.lmm ；通常是带 1 ～ 3 个叶原基的茎尖（约 0.3 ～ 0.5mm）。茎尖外植体的大小与脱毒效果成反比。但不带叶原基的过小，外植体离体培养存活困难，生长缓慢，操作难度大。茎尖分生组织不能合成自身需要的生长素，而分生组织以下的1～3 个幼叶原基可合成并供给分生组织生长素、细胞分裂素。因而带叶原基的茎尖生长快，成苗率高。但茎尖外植体过大，脱毒效果差。
植物脱毒技术

营养器官培养

番茄、胡萝卜、蝴蝶兰离体根的培养。
第二节茎的培养
一、茎培养的意义：
1、用于无性系快速繁殖：变异率低，增殖快。 2、用于脱除植物病毒：提高植物产量和品质 3、用于育种：茎尖遗传性稳定，可快速繁殖新品
种，加速优良品种推广
①传统的无性繁殖：繁殖系数一般为1:10，推广慢； ②离体繁殖：不受季节限制，繁殖系数为几十至几百倍，
3 、促进试管苗生根的措施？
养发育最终形成幼苗。（2）茎尖培养再生植株：外植体消毒茎尖剥离
2、用于脱除植物病毒：提高植物产量和品质
茎尖培养
2、用于脱除植物病毒：提高植物产量和品质
③添加吸附剂，加入适量活性炭有利于生根；
2、用于脱除植物病毒：提高植物产量和品质
2、离体根培养的试验系统：需特殊装置
①传统的无性繁殖：繁殖系数一般为1:10，推广慢；
液体培养，25℃黑暗条件
研究根系生理和代谢、器官分化与形态建成。
7-10d继代一次，取主根增殖
4、用于形态建成研究：取材便利，培养条件可严格控制，且可排除其它部位的影响，实验重复性强。
指利用植物的根、茎、叶等器官的 2、茎尖的发育方向及其调节：
（2）茎尖培养再生植株：外植体消毒茎尖剥离茎尖培养 ①降低基本培养基无机盐的浓度，一般采用1/2MS培养基或改良White基本培养基；
营养器官培养
第六章营养器官培养
教学目的：
掌握植物根、茎、叶培养的一般方法和技术，尤其是茎段培养的方法及其特点，熟悉植物营养器官培养的应用技术。
教学重点：
1、根的培养； 2、茎的培养； 3、叶的培养。
教学难点：
植物营养器官培养的应用。
②茎尖剥离：一般在解剖镜下剥离带两个叶原基的茎尖

百合茎尖脱毒培养流程

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准备无菌培养器具，如培养皿、镊子、剪刀等。

实验10 茎尖培养

三.试材
梨当年生枝条
四.培养方法
1．准备工作： 2．取材与消毒：用70%乙醇浸1分钟， 0.1%升汞溶液中浸15分钟，然后用无菌水冲洗3～5遍即可。
3．接种：
在超净工作台上用镊子剥去鳞片与幼叶，用解剖针剥去大的叶原基，暴露出圆滑的生长点部分，用解剖刀切取0.5mm左右，带有1～2个叶原基的生长点，迅速接种到事先准备好的培养基中，切面贴在培养基表面，每瓶接种4～6个生长点。盖好瓶口并在瓶口包纸上注明种类名称、接种日期和接种人姓名。注意接种过程中镊子、解剖针等用具经常在酒精灯上烧燎消毒，在接触茎尖前要稍凉一下，以免烫伤生长点，影响培养效果。
六、实验要求

1．接种前要将手洗刷干净。 2．接种时动作要快、要轻，减少培养基和外植体暴露在外的时间。 3．操作时不要讲话，手不要接触不洁之物，以免交叉感染。
七、作业观察记载茎尖分生组织的分化过程，每人交一份简述。。
实验10 茎尖培养小植株。二、仪器、用具与药品超净工作台、镊子、钳子、解剖刀、解剖剪、培养皿、酒精灯、火柴、培养基（1/2 MS + BA0.25-1.5mg· L-1 + IAA0.1-0.5 mg· L-1）、无菌水、70%乙醇、脱脂棉、0.1%升汞溶液、漂白粉、0.1%新洁而灭溶液。

茎段培养实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握茎段培养的方法和技术，理解茎段培养形成幼苗的基本原理。

2. 学习并操作茎尖剥离的技巧，认识茎尖生长点的形态特征。

3. 了解不同植物激素对茎段生长的影响。

二、实验材料与仪器1. 材料：某植物幼嫩茎段、茎尖、愈伤组织诱导培养基、再生培养基、植物激素（生长素、赤霉素等）。

2. 仪器：无菌操作台、剪刀、镊子、解剖针、显微镜、培养箱、天平、酒精灯、高压灭菌锅等。

三、实验方法1. 茎段培养（1）选取健康的某植物幼嫩茎段，剪成约1-2cm长的切段。

（2）将切段放入75%酒精中消毒30秒，再用无菌水冲洗3次。

（3）将切段接种到愈伤组织诱导培养基中，置于培养箱中培养。

（4）观察并记录愈伤组织的形成和生长情况。

2. 茎尖剥离（1）选取健康的某植物茎尖，用解剖针剥离出茎尖生长点。

（2）将茎尖生长点放入75%酒精中消毒30秒，再用无菌水冲洗3次。

（3）将茎尖生长点接种到再生培养基中，置于培养箱中培养。

（4）观察并记录茎尖生长点的生长情况。

3. 植物激素对茎段生长的影响（1）将茎段接种到含有不同浓度生长素和赤霉素的培养基中。

（2）置于培养箱中培养，观察并记录茎段生长情况。

四、实验结果与分析1. 茎段培养结果经过一段时间的培养，愈伤组织诱导培养基中的切段逐渐形成愈伤组织，并逐渐生长。

2. 茎尖剥离结果经过一段时间的培养，再生培养基中的茎尖生长点逐渐生长，形成新的植株。

3. 植物激素对茎段生长的影响（1）生长素对茎段生长的影响：低浓度生长素能促进茎段生长，高浓度生长素则抑制茎段生长。

（2）赤霉素对茎段生长的影响：赤霉素能促进茎段生长，其促进作用随浓度增加而增强。

五、实验结论1. 通过茎段培养实验，掌握了茎段培养的方法和技术，理解了茎段培养形成幼苗的基本原理。

2. 通过茎尖剥离实验，学习了茎尖剥离的技巧，认识了茎尖生长点的形态特征。

3. 通过植物激素对茎段生长的影响实验，了解了生长素和赤霉素对茎段生长的促进作用及其浓度依赖性。

003实验三植物茎的培养

三、实验用品
1、 MS+0.5mg/L NAA(萘乙酸);也再可加入BA 16mg/L来合用. 2．材料：植物的茎（如10-15cm高芦荟幼苗） 3．消毒药品：用70%乙醇；10%次氯酸钠 4. 接种工具的准备：镊子（长）、剪刀、酒精灯。手术刀片 5. 培养容器的准备：三角瓶、试管、培养 6、组培室配套设备等
实验四植物茎的培养
一、实验目的:
掌握植物茎尖培养的方法掌握无菌操作技术
二、实验原理：
茎是植物的营养器官。常用植物的茎尖进行组织培养。茎尖培养是切取茎的尖端部分或茎尖分生组织部分，进行无菌培养。茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为微茎尖培养和普通茎尖培养。 1 微茎尖指带有1-2个叶原基的生长锥，其长度不超过0.5mm。 2 普通茎尖指较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽。这种培养技术简单，操作方便，茎尖察 10-14 天后继代一次
五思考讨论
1 离体茎培养的注意事项 2 那些植物最适合做离体茎培养
四芦荟茎的组织培养
1 将准备好的芦荟幼苗在无菌水中冲洗数次 2、取茎尖部分，再冲洗1-2次，淋干，紫外灭菌30 分钟 3、在超净台上，用75%的乙醇将茎尖浸泡30-60s 4、在次氯酸钠中浸8-l0min，最后用无菌水冲洗数次。无菌纱布吸干水份 5、用解剖刀取出茎尖生长点的组织切块，接种到愈伤组织诱导培养基上MS+0.5mg/L NAA。 6、培养条件：光照 10-16h，光照度为 1500一 2500Lx，温度(25士)2℃。

实验三茎

实验三、茎
一、实验目的
1、认识茎的基本特征，茎尖结构 2、掌握草本双子叶植物茎和禾本科植物茎的初生结构 3、掌握双子叶植物茎次生结构 4、掌握裸子植物茎的结构,识别具缘纹孔 5、通过简易方法探究植物体内水分的运输的速率及途经 6、了解根茎转换部位及过程 7、识别组织：输导组织、机械组织、次生保护组织，侧生分生组织
四、实验内容与方法：
（一）、茎的基本形态：毛白杨枝条观察（二）、茎尖结构：黑藻（或洋紫苏、草石蚕）茎尖纵切制片观察（三）、双子叶植物茎的初生结构： 1.向日葵幼茎横切制片观察 2.选作蓖麻、大豆及向日葵茎横切徒手切片（四）、双子叶植物茎的次生结构：椴树茎横切制片观察（五）、禾本科茎结构：小麦、玉米、水稻茎横切制片观察
五、作业拍摄所观察的典型结构图像（不同放大倍数），制作ＰＰＴ，注明每个图像的详细结构。
顶芽侧芽叶迹叶痕节节间皮孔
叶芽花芽
毛白杨枝条
芽鳞痕
黑藻茎尖纵切
双子叶植物茎的初生结构
表皮(epidermis) 皮层(cortex)
维管柱( vascul a der) r cylin
（六）、裸子植物茎的结构及茎的三切面：松树茎三切面制片观察（七）、茎的运输速度及途径（结构判断）：在红墨水中插入旱伞草、蓖麻，约1小时后作茎杆横切徒手切片，观察旱伞草及蓖麻茎的结构及红墨水的运输途径。（八）、根茎转换整体观察：取大豆芽从根端向茎端做横切面观察（九）、组织观察：结合以上内容观察输导组织、机械组织、次生保护组织、次生分生组织等 A. 输导组织：1.南瓜茎横、纵切制片观察横切制片中观察双韧维管束（外韧皮部、束中形成层、木质部、内韧皮部）,导管分子，筛管分子及伴胞。纵切制片中观察导管分子中的五种类型；筛管分子的筛板，筛孔及筛域等结构。 2.杨树茎木材离析、松树茎木材离析观察 3.大豆芽胚轴横、纵切徒手切片观察 B.次生保护组织：观察椴树茎的周皮结构（木栓层、木栓形成层和栓内层）和皮孔等结构。 C.侧生分生组织：各种茎横纵切面中观察维管形成层、木栓形成层特点

【精品】：马铃薯组织培养技术

马铃薯茎尖组织脱毒培养及植物激素在培养中的作用摘要：马铃薯茎尖组织脱毒培养,愈伤组织解除分化形成新个体时,体细胞有丝分裂的异染色质延迟复制行为较正常活体植株更严重,后代变异较自然群体变异高出500倍,若在培养过程添加辐射和化学诱变试剂变异率会更高。

因此,组织培养环境不只是现代生物技术辅助育种的一个重要条件,更是诱变育种的一个有效途径,对于以营养体繁殖的马铃薯作物效果更好。

本文介绍了马铃薯茎尖培养的意义和方法，综述了植物激素在马铃薯生长中的作用。

关键词：茎尖体细胞组织培养变异植物激素Abstract: Potato virus-free cultivation of the tip meristem, callus formation of new individual remove differentiation, somatic cell mitosis heterochromatin delay of normal living plant copy behavior more serious than natural group, variation and variation of 500 times higher in the training process, if add radiation and chemical mutagenesis reagent mutation rate is higher. Therefore, tissue culture of modern biological technology environment is not only an important supplementary conditions, is an efficient way of mutation breeding for excessive n-redistribution breeding, potato crop effect is better. The paper introduces the significance of potato meristem-tip culture were reviewed, and the method of plant hormone role in growth of potatoes.Key words: Stem cells; Tissue culture; variation; Plant hormones1马铃薯生态习性和种类对土壤的适应性很强，但对气候要求凉、冷、燥，在湿热地区虽然也能生长，不过一代以后品种就会演化，需要经常从寒冷地区引进新的种。

茎尖培养实验报告

实验名称：茎尖培养实验课程名称：植物组织培养学学院：生命科学学院专业班级：植物科学专业姓名：[你的姓名]小组成员：[小组成员姓名]日期：[实验日期]指导老师：[指导老师姓名]一、实验目的1. 掌握植物组织培养技术的基本原理和方法。

2. 熟悉无菌操作技术，提高实验操作技能。

3. 观察茎尖在培养基上的生长和分化过程，了解植物细胞全能性及再生机制。

4. 分析影响茎尖培养的因素，为植物繁殖和育种提供理论依据。

二、实验原理1. 植物组织培养技术：通过在无菌条件下，将植物器官、组织或细胞等在人工培养基上进行培养，使其再生出完整植株的过程。

2. 茎尖培养：利用茎尖细胞的全能性，将其接种到含有植物激素的培养基上，诱导其分化成完整植株。

3. 植物激素：植物激素在植物生长和发育过程中起着重要作用，如生长素、细胞分裂素等。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜植物茎尖、无菌水、70%酒精、无菌滤纸、无菌手术刀、镊子、培养皿、培养箱、显微镜等。

2. 试剂：MS培养基、生长素、细胞分裂素、琼脂、葡萄糖等。

四、实验步骤1. 材料准备：选取新鲜植物茎尖，用70%酒精消毒后，用无菌滤纸吸干水分。

2. 茎尖接种：将消毒后的茎尖用无菌手术刀切成约0.5cm长的小段，接种到含有生长素和细胞分裂素的MS培养基中。

3. 培养条件：将接种后的培养基放入培养箱中，保持温度25℃、光照12小时/天。

4. 观察记录：定期观察茎尖的生长和分化情况，记录生长速度、叶片颜色、根系发育等。

5. 数据分析：对实验数据进行统计分析，分析不同处理对茎尖培养的影响。

五、实验结果与分析1. 茎尖生长：接种后3-5天，茎尖开始生长，出现明显的芽点；接种后7-10天，芽点逐渐增多，茎尖高度达到1-2cm。

2. 茎尖分化：接种后10-15天，茎尖分化出叶片，叶片颜色逐渐变绿；接种后20-25天，茎尖分化出根系，根系发达。

3. 影响因素分析：生长素和细胞分裂素浓度对茎尖培养有显著影响。

茎尖剥离实验报告

实验名称：茎尖剥离实验课程名称：植物学实验学院：XXX学院专业班级：XXX班姓名：XXX小组成员：XXX、XXX、XXX日期：XXXX年XX月XX日指导老师：XXX教授一、实验目的1. 学习并掌握茎尖剥离的技术方法。

2. 观察茎尖的形态结构，了解其生长分化过程。

3. 掌握茎尖分生组织的特征和功能。

4. 培养学生的实验操作技能和科学思维能力。

二、实验原理茎尖是植物生长的重要部位，其分生组织细胞具有较强的分裂和分化能力。

茎尖剥离实验可以观察到茎尖分生组织的结构、形态和功能，有助于理解植物的生长发育过程。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜的植物茎尖、刀片、解剖针、镊子、显微镜、载玻片、盖玻片、染色剂等。

2. 实验仪器：显微镜、解剖显微镜、显微镜载物台、培养皿、酒精灯、烧杯、滴管等。

四、实验步骤1. 取新鲜的植物茎尖，用刀片将其切割成约1cm长的小段。

2. 将茎尖放入培养皿中，用解剖针轻轻剥离茎尖的外层组织，暴露出内部的分生组织。

3. 将剥离后的茎尖放在载玻片上，用盖玻片覆盖。

4. 使用染色剂对茎尖进行染色，以便于观察。

5. 将载玻片放在显微镜下观察，记录茎尖分生组织的形态、结构及功能。

五、实验结果与分析1. 茎尖分生组织形态：茎尖分生组织呈椭圆形或梭形，细胞排列紧密，细胞核大而明显。

2. 茎尖分生组织结构：茎尖分生组织分为外层和内层。

外层细胞呈扁平状，细胞核较小，细胞质较厚；内层细胞呈柱状，细胞核较大，细胞质较薄。

3. 茎尖分生组织功能：茎尖分生组织负责植物的生长发育，包括细胞分裂、细胞伸长和细胞分化。

细胞分裂使茎尖不断产生新的细胞，细胞伸长使茎尖不断延伸，细胞分化使茎尖形成不同的组织结构。

六、实验结论通过本次实验，我们成功剥离了植物茎尖，观察到了茎尖分生组织的形态、结构和功能。

实验结果表明，茎尖分生组织在植物生长发育过程中起着至关重要的作用。

七、实验讨论1. 茎尖剥离实验中，如何保持茎尖的新鲜度和活性？2. 在观察茎尖分生组织时，如何选择合适的染色剂？3. 茎尖分生组织的功能与其他部位的分生组织有何区别？八、实验建议1. 在进行茎尖剥离实验时，应尽量减少对茎尖的损伤，以保证实验结果的准确性。

植物组织培养6-4

到诱导培养基上。
小贴士.eps
(2)茎尖剥离与培养将消毒后的材料放在10～40倍的双筒解剖镜下，用解剖针剥去外部幼叶，直至露出圆亮的生长点，用解剖刀切取0.1～0.3mm、带有1～2个叶原基的茎尖，并迅速接种
到诱导培养基上。
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(3)病毒检测病毒检测是马铃薯茎尖脱毒不可缺少的环节，检测方法有指示植物鉴定法、目测法、抗血清鉴定法及电镜检测
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(5)驯化移栽马铃薯试管苗生根容易，一般在增殖扩繁过程中就能形成有根苗，所以可以不需再进行生根培养即可移栽。
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(5)驯化移栽马铃薯试管苗生根容易，一般在增殖扩繁过程中就能形成有根苗，所以可以不需再进行生根培养即可移栽。
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(5)驯化移栽马铃薯试管苗生根容易，一般在增殖扩繁过程中就能形成有根苗，所以可以不需再进行生根培养即可移栽。
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1.茎尖培养脱毒
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2.病毒检测
(1)目测法甘薯病毒为系统感染，薯苗、薯块均可带毒。 (2)指示植物鉴定法常用指示植物有巴西牵牛，该植物对多种侵染甘薯的病毒敏感，受病毒侵染后叶片上易产生系统性症状。
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2.病毒检测
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(3)血清学检测法将待检测的茎尖苗叶片制样，用几种病毒的抗血清做琼脂双扩散(SDS)酶联免疫吸附法(ELISA)或斑点结合酶联免疫法(Dot-ELISA)检测，呈阳性反应的为带毒苗。
(1)试管内生产微型薯试管内生产微型薯要求条件较严格，费用较高，但产品的质量好，整齐度一致，一般只有1～5g。
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(1)试管内生产微型薯试管内生产微型薯要求条件较严格，费用较高，但产品的质量好，整齐度一致，一般只有1～5g。

马铃薯脱毒苗组培快繁技术

马铃薯脱毒苗组培快繁技术(酒泉职业技术学院秦晓萍甘肃?酒泉 730500) 摘要本论文主要从培养基的制作、脱毒苗的制取、继代培养、培养条件、瓶装苗污染控制等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁技术，为马铃薯快繁生产提供参考。

关键词马铃薯脱毒苗快繁技术马铃薯是我国主要的粮食、蔬菜及工业原料作物，其国民经济意义十分重要，在保证粮食安全生产方面发挥了重大作用。

随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量也在不断的增加。

但在连年的栽培过程中，病毒或类病毒不断的侵染和积累，从而导致马铃薯种性变劣，长势逐步减弱，产量逐年降低。

马铃薯快繁是在短时间内利用组织培养技术获得大量高质量的试管苗，应用种薯脱毒技术，[1]培养无毒组培苗，在提高产量、保证品质、耐贮藏方面体现出了独特的优势。

1 培养基的制作1.1培养基的配方利用提供的母液和材料MS+0.01mg/L NAA+3%蔗糖+0.56%的琼脂，PH为5.8，配置培养基1000ml,并均匀分装到24个培养瓶，进行灭菌。

母液浓度/扩大倍数配置体积(ml) 母液吸取量(ml) 称取量(g) 大量元素 20 50 —钙盐母液 20 50 —磷酸盐溶液 20 50 —铁盐 100 10 —微量元素 100 10 — 1000有机物 100 10 —萘乙酸(NAA) 0.1mg/L 0.1 —蔗糖 3% — 30琼脂粉 0.56% — 5.6 1.2 培养基的配制1.2.1仪器、用具与试剂(1)仪器:PH试纸、电磁炉、高压灭菌锅(2)用具:移液抢、移液管、量筒、容量瓶、培养瓶、玻璃棒、洗瓶、烧杯、搪瓷缸、镊子、钥匙、称量纸、胶头滴管、抹布、卷纸、标签纸、(3)试剂:配置MS培养基的各种母液、激素母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、0.1mol/LHCL、0.1mol/LNaOH1.2.2 培养基制作(1)准备工作将配置好的MS培养基母液从冰箱中取出，检查是否沉淀或变色，避免使用已失效的母液。

微茎尖剥离

技能5-1微茎尖的剥离技能要求●掌握微茎尖剥离操作程序●切取茎尖准确，操作规范、熟练、快捷●训练前准备1.材料与试剂香石竹等各种植物材料的嫩茎、75%酒精、脱脂棉、95%酒精、0.1%次氯酸钠、无菌水、模拟培养基(只加琼脂，已灭菌)等。

2.仪器与用具超净工作台、医用小剪刀、解剖镜（8~40倍）、解剖刀、解剖针、平底试管、酒精灯、培养皿、滤纸、镊子、磁力搅拌器、烧杯(500ml、100ml)、量筒（100ml）、容量瓶（500ml、1000ml）、各类移液管、冰箱、标签纸、记号笔等。

所有仪器与用具使用前消毒或灭菌。

●方法步骤1.切取茎芽任选几种植物嫩茎，用医用小剪刀剪取3～5cm长、带顶芽或腋芽的短茎10个，去掉叶片，仅保留护芽的嫩叶柄，置于灭菌过的培养皿中。

2.茎芽消毒用洗涤液或洗衣粉水洗涤，尤其是腋芽的叶柄处用软毛刷涮擦，用清水反复冲洗干净，然后移入超净台，用0.2%次氯酸钠浸渍10min，无菌水冲洗3~5次后备用。

3.剥离茎尖将芽置于衬有无菌湿滤纸的培养皿内，在解剖镜下，一只手用镊子按住嫩叶柄或芽，另一只手用解剖刀或解剖针将叶片和叶原基层层剥除，到茎尖初露为止，再用解剖刀切下0.3~0.5mm的微茎尖(带2个叶原基)。

选用不同的材料反复练习，达到熟练操作。

●注意事项1.接种时最好使茎尖向上，不能埋入培养基内。

2.为了防止茎尖变干，应在一个衬有无菌湿滤纸的培养皿内剥离茎尖，而且从剥离到接种的间隔时间越短越好。

整个剥离过程中，要注意常将解剖针和解剖刀蘸入90%酒精中，并用火焰灼烧灭菌，冷却后使用。

3.剥离微茎尖时双眼要同时睁开，调整好解剖镜的焦距，并且手、眼与工具间配合默契。

4.切割微茎尖要用锋利的解剖刀，并做到随切随接。

马铃薯茎尖剥离与试管苗培养技术

马铃薯茎尖剥离与试管苗培养技术摘要：在无菌环境下对马铃薯茎尖进行剥离，并分步接种到特定的培养基上，在25 ℃±2 ℃的温度、1 000lx～4 000lx的光照条件下培养，并经病毒鉴定后可生产出健康的马铃薯脱毒试管苗。

对试管苗进一步切段繁殖，可生产大量的脱毒苗。

关键词：马铃薯；茎尖脱毒；试管苗；培养技术马铃薯在种植过程中易感染病毒，当条件适合时，就会在植株体内增殖、转运和积累于所结的薯块中，并且世代传递，逐年加重。

造成植株生长势明显变差，块茎变小，产量不断下降，品质逐年变劣，食用性和商品性受到严重影响，品种失去了原有的优良种性，这就是马铃薯的退化现象。

马铃薯病毒的增殖与植株正常代谢极为密切，目前尚未发现既能杀死病毒又不损伤植株的药剂，因此，病毒危害一度成为马铃薯的不治之症。

茎尖组织培养无病毒植株技术的迅速发展，为解决马铃薯病毒危害提供了有效途径。

利用组织培养技术生产健康无病毒种薯，成为目前生产中解决马铃薯退化最先进的技术措施之一。

在马铃薯植株体内，病毒的分布极不均匀，其中茎尖部分带病毒最少或不带病毒，并且越靠近尖端，病毒浓度越低。

根据这一特性，在无菌条件下借助解剖镜剥离茎尖分生组织，并接种到装有特定培养基的试管（或三角瓶）内进行培养，经病毒鉴定后可获得脱毒小苗。

对脱毒苗进一步切段繁殖，当达到所需数量时，通过基质栽培可生产大量的脱毒种薯。

种植经过脱毒的种薯，其产量、质量以及抗逆性都有很大程度的提高，因此，组织培养技术成为提高马铃薯生产力的一个重要手段。

下面将马铃薯茎尖剥离与试管苗培养技术介绍如下：1茎尖剥离1.1材料的选取与消毒供培养用的茎尖最好取自活跃生长的芽，顶芽的茎尖生长要比腋芽的快，成活率也高。

材料的选取。

最好是在马铃薯生长季节选择具有原品种特征特性的单株，收获后对入选的块茎用0.50~1mg/kg的赤霉素浸种20min，然后置于温室内的砂床上或种在无菌的盆土中育芽。

管理中应注意浇水时要直接浇在土壤中，切忌浇在叶片上，以防止水分感染茎尖。

3 实验三茎

二、实验材料
1. 新鲜材料：大豆，蚕豆，蓖麻，向日葵等植株、毛白杨枝条、旱伞草; 杨茎、松茎木材的离析材料;黄豆芽。 2. 永久制片：草石蚕茎尖、黑藻茎尖；向日葵或棉幼茎横切、玉米茎横切、小麦、水稻茎横切；3-4 年椴树茎横切、松茎木材三切面制片，南瓜茎纵、横切制片
三、实验用品显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，双面刀片，培养皿吸水纸等. 试剂：红墨水
实验三、茎的结构与物质运输
一、实验目的：
1、认识茎的基本特征，茎尖结构
2、掌握双子叶植物茎的初生生长过程和初生结构 3、掌握禾本科植物茎结构 4、掌握双子叶植物茎的次生生长过程和次生结构 5、掌握裸子植物茎的结构,识别具缘纹孔
6、通过简易方法探究植物体内水分的运输的速率及途经
7、了解根茎转换部位及过程 8、识别组织：输导组织、机械组织、次生保护组织，侧生分生组织
毛白杨木材离析，示导管、管胞（输导组织）、木纤维（机械组织）及木薄壁细胞（薄壁组织）Ａ导管；Ｂ管胞；Ｃ木纤维；Ｄ薄壁细胞
杨茎木材离析的导管、管胞和纤维等
松茎木材离析的管胞
束间形成层
维管束
厚角组织
什么植物？双子叶？单子叶？
实验预习自查题
1.借助枝条上的可以判断其生长年限。 2.茎尖生长锥表面1-2层细胞主要进行垂周分裂称为，其内方细胞进行各向分裂，称为。 3.双子叶植物茎的初生结构由表皮，，和组成。初生木质部为发育方式，初生韧皮部为发育方式。 4.茎中维管形成层形成时由和两部分组成，从细胞类型角度出发，由细胞和细胞组成。 5.玉米茎中散布在基本组织细胞间。 6.维管射线是射线。 7.茎中木栓形成层第一次发生可由细胞脱分化而形成。 8.温带生长的木本茎一个生长季形成的次生木质部构成