微生物高考试题上课讲义
高考生物一轮复习 专题二微生物的培养与应用课件 新人教版选修1
5．该实验中的注意事项 (1)设立重复组：统计某一稀释度下平板上的菌落数 时，要至少涂布3个平板作重复组，增强实验结果的说 服力与准确性。
(2)对照原则 ①判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培 养基同时进行培养。 ②判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉 膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌 落数目，进行对比得出结论。
3．细菌分离与计数的实验流程 土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物的培养→ 观察并记录结果→细菌计数 4．课题延伸——菌种的进一步鉴定 (1)原因：由于分离分解尿素的细菌的选择培养基上 可能生长着以分解尿素的细菌的代射产物为氮源的其它 微生物。
脲酶 (2)原理：CO(NH2)2＋H2O――→ CO2＋2NH3；由于 NH3的产生，培养基碱性增强，pH升高，因此可通过检 测pH的变化来判断该化学反应是否发生。 (3)方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指 示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则pH升高，说明 该种细菌能分解尿素。
(3)强 (4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
方法
平板划线法
(1)接种环的灼烧
①第一次划线前：接种环上的微生物，避免污染培养物
②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌残留菌种，避免污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高
杀死菌种
(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连
C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越 有利
D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本 身合成这些生长因子的能力往往不足
答案 D
解析 本题是关于微生物培养的考查。微生物的营 养包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。乳酸菌的 碳源是有机物，而硝化细菌可以利用无机物作为碳源； 生长因子是微生物体内不能合成的，需要量很小的一些 有机物；培养基中营养物质浓度过高会造成微生物细胞 失水，不利于菌种生长。
2020版生物高考讲义：第33讲 微生物的培养与应用 Word版含答案.pdf
第33讲 微生物的培养与应用考纲考情——知考向核心素养——提考能最新考纲 1.微生物的分离和培养2.培养基对微生物的选择作用3.某种微生物数量的测定4.微生物在其他方面的应用科学思维分析培养基的成分及其作用，比较平板划线法和稀释涂布平板法的异同科学探究设计实验探究微生物培养的条件近三年考情2018·全国卷Ⅰ(37)、2018·全国卷Ⅱ(37)、2018·全国卷Ⅲ(37)、2017·全国卷Ⅰ(37)、2016·全国卷Ⅰ(39)、2016·全国卷Ⅲ(39)社会责任关注有害微生物的控制及宣传健康生活考点一 微生物的实验室培养1.培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH 、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)种类①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。
③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
2.无菌技术(1)含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)常用方法3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算称量溶化灭菌倒平板→→→→(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
如图所示b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
浙江生物高考专题二轮课件专题八第1讲微生物的利用和酶的应用
3.倒平板操作:
4.划线分离操作:划线分离法通过接种环在固体培养基表面连
续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 注意划线的方法(见图)。
5.涂布分离法:先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板,在稀 释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散到培养基
的表面,从而在培养基表面形成单个菌落。如图:
【解析】本题考查分离以尿素为氮源的微生物的过程 ,以操作 步骤为主线,考查对基础知识的识记和应用能力 ,题目难度较小。 (1)幽门螺杆菌含有脲酶,能分解尿素为菌体提供氮源,因此在
配制培养基时要加入尿素;加入酚红指示剂的目的是检验是否
有Hp存在,若有Hp存在,会分解尿素,培养基pH会升高,酚红指示 剂将变红。 (2)由于尿素在高温下会分解,所以对尿素溶液的灭菌要采用G6 玻璃漏斗过滤的方法。
(3)在实验操作过程中要先灭菌、倒平板,再进行接种。接种时
先将菌液稀释,再涂布到培养基上,以获得单菌落。 (4)培养时需将培养皿倒置并放在恒温箱中培养,倒置培养的目 的也是为了获得单一菌落。 (5)如果人体感染了Hp,能将尿素分解为NH3和CO2,因而标记尿 素中的C,通过呼吸产物可判断是否感染Hp。 满分答案:(1)脲酶 红 (2)D (3)接种 涂布 单
(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 A.高压蒸汽 B.紫外灯照射
C.70%酒精浸泡
D.过滤
(3)步骤X表示 菌液稀释,然后将菌液 上。菌液稀释的目的是为了获得
。在无菌条件下操作时,先将 到培养基平面 菌落。
(4)在培养时,需将培养皿倒置并放在
倒置培养,将导致 。
中。若不
(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是 Hp能将14C标记的 分解为NH3和14CO2。
高考生物 试卷讲义 第33讲 微生物的培养技术及应用
第33讲微生物的培养技术及应用内容要求——明考向近年考情——知规律（1）阐明无菌技术在微生物培养中的应用；（2）概述微生物分离和纯化及测定微生物数量的常用方法；（3）测定微生物数量；（4）通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落（活动）；（5）分离土壤中分解尿素的细菌，并进行计数（活动）。
2021·天津卷（1）、2021·北京卷（12）、2021·湖南卷（21）、2021·广东卷（21）、2020·全国卷Ⅰ（37）、2019·全国卷Ⅰ（37）、2019·全国卷Ⅱ（37）、2019·全国卷Ⅲ（37）考点一微生物的基本培养技术1.培养基的配制（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
（2）营养组成①一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等。
②需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
微生物对培养基的需求乳酸杆菌添加维生素霉菌将培养基调至酸性细菌将培养基调至中性或弱碱性厌氧微生物提供无氧的条件（3）种类：①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
培养基和鉴别培养基。
提醒（1）常见选择培养基举例①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物。
②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出真菌。
③无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物。
（2）几种微生物的营养和能量来源微生物碳源氮源能源蓝细菌CO2NH＋4、NO－3等光能硝化细菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖类等有机物N2有机物酵母菌糖类、蛋白质等有机物蛋白质等有机物2.无菌技术（1）含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
（2）常用方法（3）常见物品的消毒或灭菌方法①消毒方法及适用对象②灭菌方法及适用对象3.纯化酵母菌的方法和操作过程（1）方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
（2）酵母菌纯培养的操作步骤：（1）培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质（√）（2）由于物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型（×）（3）消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害（√）（4）无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料（如培养基、接种环等）都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌（×）（5）配制培养基时应先灭菌再调pH（×）（6）平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧（√）（7）倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上（×）（8）为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落（×）选择性必修3 P10“旁栏思考题”1.为什么培养基需要氮源？提示微生物细胞内有蛋白质、核酸、磷脂等多种含氮的营养物质或代谢产物，培养基中的氮源可以作为合成这些营养物质及代谢产物的原料。
2024年新人教版高考生物一轮复习讲义 第10单元 第2课时 微生物的培养技术及应用
第2课时2024年新人教版高考生物一轮复习讲义课标要求1.获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。
2.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的基础。
3.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品和无菌区域不被微生物污染的技术。
4.举例说明通过调整培养基的配方可有目的的培养某种微生物。
5.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。
6.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
考点一 微生物的培养技术及应用考点二 微生物的选择培养和计数内容索引重温高考 真题演练课时精练微生物的培养技术及应用1.培养基的配制(1)培养基的概念、用途和类型①概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出的供其_____的营养基质。
②用途：用以微生物或积累其 。
归纳 夯实必备知识营养物质生长繁殖培养、分离、鉴定、保存代谢物③种类：按物理性质分培养基↓(加入 ，如琼脂)培养基液体凝固剂固体(2)培养基的配方①主要营养物质：水、、氮源、。
②其他条件：pH、和氧气。
如下表：微生物乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物特殊需求添加_______pH调至______pH调至_____________________维生素酸性中性或弱碱性无氧碳源无机盐特殊营养物质2.无菌技术(1)目的：获得 的微生物培养物。
(2)关键：防止 污染。
(3)消毒与灭菌的比较纯净杂菌项目消毒灭菌作用强度较为的理化因素的理化因素作用程度杀死物体表面或内部____微生物杀死物体内外的微生物芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭温和强烈一部分所有(4)注意事项①实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与接触。
②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在附近进行。
适用对象实验操作的空间、操作者衣着和双手微生物培养器皿、接种用具和培养基等常用方法 消毒法、 消毒法等 灭菌法、 灭菌法、灭菌法等煮沸巴氏湿热干热灼烧周围的物品酒精灯火焰3.微生物的纯培养(1)概念辨析固体培养基一定形态结构(2)酵母菌纯培养的操作步骤15～20 g琼脂湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法干热灭菌酒精灯火焰灼烧灭菌平板划线法恒温培养箱28(3)平板划线法操作步骤下图是平板划线操作的示意图，据图回答下列问题：拓展 提升科学思维(1)用图中字母和箭头表示平板划线操作的正确步骤：________________。
2020版赢在微点高考生物人教版一轮复习讲义：第三单元第02讲ATP与细胞呼吸含答案
第02讲 ATP 与细胞呼吸考点一 ATP 的结构及功能1．ATP 的结构(1)图中各部分名称：A 腺嘌呤，①腺苷，②一磷酸腺苷，③ADP ，④ATP ，⑤普通化学键，⑥高能磷酸键。
(2)ATP 与RNA 的关系ATP 去掉两个磷酸基团后的剩余部分是组成RNA 的基本单位之一。
(3)结构特点①ATP分子中远离A的那个高能磷酸键容易水解断裂，释放出能量，ATP就转化为ADP，ADP也可以接受能量而重新形成ATP。
②高能磷酸键水解时释放的能量多达30.54kJ/mol，所以说ATP 是细胞内的一种高能磷酸化合物。
2．ATP和ADP的相互转化(1)转化基础ATP的化学性质不稳定，远离腺苷的高能磷酸键容易断裂和重建。
(2)ATP和ADP的相互转化过程比较3．ATP的作用(必修1 P90“思考与讨论”变式)如果把糖类和脂肪比作大额支票，ATP则相当于现金。
这种比喻的道理是什么？答案糖类和脂肪分子中能量很多而且很稳定，不能被细胞直接利用；这些稳定的化学能只有转化成ATP分子中活跃的化学能，才能被细胞直接利用。
诊断辨析(1)ATP去掉两个磷酸基团后剩余的物质，可参与细胞内某些酶的合成。
(√)提示ATP去掉两个磷酸基团后剩余物质是一个腺嘌呤核糖核苷酸，可参与某些RNA酶的合成。
(2)ATP是生命活动的直接能源物质，但它在细胞中的含量很少，ATP与ADP时刻不停地进行相互转化。
(√)(3)ATP水解释放的能量可用于细胞内的吸能反应，而细胞内放能反应释放的所有能量都可以用于合成ATP。
(×)提示例如C6H12O6彻底分解产生的能量，只有约40%用于合成ATP。
(4)ATP是所有生物体共同的唯一直接能源物质。
(×)提示ATP是主要的直接能源物质，除它之外还有CTP、GTP 等。
热图解读下列几种常见化合物的化学组成中，请写出“○”中所对应的含义。
提示①一磷酸腺苷AMP，也表示腺嘌呤核糖核苷酸，②腺嘌呤，③DNA分子上的腺嘌呤脱氧核苷酸，④RNA分子上的腺嘌呤核糖核苷酸，⑤腺苷，⑥腺苷，⑦DNA分子上的腺嘌呤脱氧核苷酸，⑧转运RNA中的腺嘌呤。
2020版赢在微点高考生物人教版一轮复习讲义：第一单元第02讲细胞中的元素及无机化合物含答案
第02讲 细胞中的元素及无机化合物考点一 组成细胞的元素和化合物1．组成细胞的元素助学巧记 谐音记忆元素的种类生物界和非生物界在元素种类和含量上的关系2．细胞中的化合物3．正确区分鲜重、干重的元素和化合物的含量答案玉米、小麦、水稻种子富含糖类(淀粉)；核桃、花生、油菜种子富含脂肪和蛋白质。
(1)植物体与动物体的干重相比较，植物含O元素多于动物体，含有的N、H 元素少于动物体。
(√)提示动物、植物干重相比，由于植物含糖类较多，动物含脂肪、蛋白质较多，故植物体中含氧元素较多，动物体中含氮、氢元素较多，另外动物含Ca、P元素也比植物多。
(2)Ca、Mg、Fe、Mn、Cu是组成细胞的微量元素。
(×)(3)细胞中的一种元素的作用能被其他元素替代。
(×)(4)细胞中的微量元素因含量极少而不如大量元素重要。
(×)(5)因为C是占细胞干重中最多的元素，所以其是最基本的元素。
(×)图A是组成人体细胞的主要元素及其比例，图B是细胞中几种化合物的含量。
请据图思考下列问题：(1)如果图A表示的是活细胞中的元素含量比例，则甲～丁依次为__________、__________、__________、________。
(2)若按干重计，图B中②为________，其标志性元素是图A中的________(填“甲”“乙”“丙”或“丁”)，按鲜重计②应为________(此时①为________)。
(3)图A所示元素在非生物界中________(填“一定能”“一定不能”或“不一定能”)找到。
(4)C、H、N三种元素在人体的化学成分中，质量分数共占73%左右(占细胞干重的百分比)，而在岩石圈的化学成分中，质量分数不到1%，这一事实说明生物界与非生物界具有________。
提示(1)O H C N(2)蛋白质丁水蛋白质(3)一定能(4)差异性考向一组成细胞的元素1．图Ⅰ是细胞中几种化合物含量的扇形图，图Ⅱ是活细胞中元素含量的柱形图，下列说法错误的是()A．若细胞代谢正常，则图Ⅰ中的甲化合物是水B．若细胞代谢正常，则图Ⅰ中的乙化合物是蛋白质C．若细胞代谢正常，则图Ⅱ中的b元素是氢D．若细胞完全脱水，则含量最多的元素不是图Ⅱ中的a解析若细胞代谢正常，说明是正常的活细胞，活细胞中含量最多的是水，其次是蛋白质；图Ⅱ中的b元素占18%，应为碳，不是氢；活细胞中含量最多的元素是氧，但如果细胞完全脱水，则含量最多的元素是碳(即图Ⅱ中的b)。
2019届高考生物专项复习讲义课件：26 微生物的应用(共22张PPT)
操作繁琐,加入刚果 生淀粉酶的微生物出现假阳性反应;
缺
红溶液时会使菌落 ②有些微生物具有降解色素的来自力,点之间发生混杂
长时间培养时会降解刚果红,从而形
成明显的透明圈,这些微生物与纤维
素分解菌不易区分
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高考复习讲义
微生物的应用
考点全通关
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三、微生物数量的测定 1.间接计数法(活菌计数法)
(1)原 理
紫外线消毒法:紫外灯照 射30 min
接种室、操作台
灭 菌
使用强烈 的理化因 素杀死物 体内外所 有的微生 物(包括芽 孢和孢子)
灼烧灭菌:酒精灯火焰
干热灭菌:在160~170 ℃ 下灭菌1~2 h 高压蒸汽灭菌:在压力为 100 kPa,温度为121 ℃ 的条件下,灭菌15~30 min
接种工具的灭菌 和试管口的灭菌 玻璃器皿、金属 工具的灭菌
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高考复习讲义
微生物的应用
考点全通关
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【通关秘籍】 分离纤维素分解菌所用的培养基
分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基,再用鉴别培养基。 (1)选择培养基为液体培养基,以纤维素作为碳源和能源的微生 物可以正常生长,而其他绝大多数微生物不能正常生长;因培养 基中无凝固剂,为液体培养基,利用液体培养基能使营养成分充 分被消耗,以增加纤维素分解菌的浓度。 (2)鉴别培养基含琼脂,为固体培养基,因为要在培养基上形成我 们肉眼可见的菌落。刚果红染色法就是应用的鉴别培养基。
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高考复习讲义 微生物的应用
考点全通关 2
3.培养基的种类及用途
划分标 培养基的 准 种类
特点或原理
用途
液体培养 基
不加凝固剂
高考生物 第2讲 微生物的利用课件 新人教版选修1
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• 3．实验流程
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4．鉴定分解尿素的细菌 (1)原理：CO(NH2)2＋H2O―脲―酶→CO2＋2NH3；由于 NH3 的产生，培养基碱性增强，pH 升高，因此可通过检测 pH 的变 化来判断该化学反应是否发生。 (2)方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂， 培养某种细菌，若指示剂变红，则 pH 升高，说明该种细菌能 分解尿素。
第二讲 微生物的利用
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课前自主学习
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• 二、微生物的利用
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课堂互动探究
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•微生物的培养与应用
• 1．培培养养基基种的类种类 特点 • 液(1体)按培物养理基状态分不类加剂凝固
固体培养基
加凝固剂
(如琼脂)
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• A．一个平板，统计的菌落数是230
• B．两个平板，统计的菌落数是220和260， 取平均值240
• (3)获得的菌种如果需要长期保存，可以采 用________的方法。
• 答案：(1)平板划线 稀释 接种环 (2)纤 维素粉 刚果红 (3)甘油管藏
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• 土壤中分解尿素的细菌的分 • 1．筛选离菌与株的计原算理
• 微生物的选择培养：在选择培养基的配方 中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原
维生素、氨基酸、12
• 4.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏
• (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算、 称量、溶化、灭菌、倒平板。
• (2)纯化大肠杆菌
【高考生物】微生物讲义整理打印资料
（生物科技行业）微生物讲义整理打印资料微生物培训主要三点：一、微生物是什么？（包括微生物的学科发展、微生物定义、特点等。
以及详细介绍细菌，霉菌，酵母菌这三大类菌。
还有点细菌的增殖原因。
）二、为什么要控制微生物？（有什么危害）食品变质以及各种菌引起的疾病。
三、怎么抑制微生物？食品中微生物污染源（水，空气，土壤，人和动植物）抑制方法介绍，详细介绍杀菌方法：加热、药剂控制微生物污染食品微生物学及其发展史1．微生物学（microbiology），micro“小”，bios“生命”，logy“研究”——研究那些小得必须借助显微镜才能看见的活生物体。
我们研究微生物的生命活动，达到控制腐败微生物和病原微生物的活动，以防止食品变质和杜绝因食品而引起的病害。
2．微生物学发展简史：2.1．公元前二千多年夏禹时代，就有酿酒的记载，酿酒的记载，酿酒就必须有酵母菌参与。
2.2．十七世纪荷兰人吕文虎克，用自制显微镜首先观察到微生物（细菌）。
2.3．十九世纪，法国科学家斯德，发现发酵和腐败是微生物的作用结果，为了防止酒类变质，他创造加温处理方法“巴氏消毒法”。
2.4．现代随着科学技术的日益发展，对微生物的研究日益深入。
微生物的定义所谓微生物是指个体微小，必须借助于显微镜才能看清它们外形的一群低等的、原始的微小生物，如细菌。
（体型微小，必须借助于光学显微镜或电子显微镜才能看到它们的结构，结构简单，有的具有细胞构造，有的甚至没有细胞构造，生长繁殖快，对物质具有非常强烈的转化作用；容易引起变异，以致微生物的种类特别繁多，并且新的种类还在不断产生；数量多，分布广，对自然环境的适应性强，以致在自然界的任何地方如土壤、空气、水以及人和动植物体上都有微生物生活或生存）2\\微生物的特点微生物是结构简单、繁殖快、分布广、个体最小的生物。
2.1结构简单：微生物多数是单细胞；2.2生长旺，繁殖快（大肠杆菌在它的适宜37-44℃之间，20-30分钟繁殖一代）2.3分布广.种类多（10万多种）：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等。
高中生物高考一轮总复习讲义 选修1 专题2 微生物的培养与应用
(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂， 若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌。( )
三、分解纤维素的微生物的分离[填空] 1．纤维素酶 (1)组成：一种________酶，它至少包括三种组分，即 ________。 C1酶 葡萄糖 (2)作用：纤维素――→________ ――→ 葡萄糖 CX酶 苷酶 2．筛选方法 (1)方法：刚果红染色法，即通过是否产生________来 筛选纤维素分解菌。 (2)培养基：以________为唯一碳源的选择培养基。
高中生物高考复习讲义
选修部分
选修1
生物技术实践
专题2 微生物的培养与应用
忆教材 溯本源
研考点 破疑难
明题型 析典例
练真题 悟考情
课时作业
研
基础导学
一、微生物的分离与培养 1．培养基[判断正误] (1)据物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体 培养基两种类型。( )
(2)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种 成分。( )
方法 平板划线法 (1)接种环的灼烧： 注 意 事 项 ①第一次划线前：杀死接种环上的 微生物，避免污染培养物 ②每次划线前：杀死残留菌种，保 证每次划线菌种来自上次划线末端 ③划线结束后：杀死残留菌种，避 免污染环境和感染操作者 稀释涂布平板法 (1)稀释操作时：每支 试管及其中的9 mL
水、移液管等均需灭 菌；操作时，试管口和 移液管应在离火焰1～2 cm处
3．实验流程 土壤取样：富含________的环境 ↓ 选择培养：用________培养，以增加纤维素分解菌的 数量 ↓ 梯度稀释 ↓
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基 上 ↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生________的菌落周围出 现透明圈
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（全国卷一）34．(12分)下列是与微生物培养有关的问题，请回答：（1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是________，碳源是_____________,氮源是____________。
已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于_____________培养基。
按照化学成分分类，该培养基属于______________培养基。
从同化作用类型看，用该培养基培养的细菌属于________________。
（2）将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的_____曲线。
该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是___________________________。
实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在____________期取材；在生产中，常收集培养至_________期的细菌用于次生代谢产物的提取。
解析：本题主要考查学生的理解能力，考查微生物的营养。
第（1）小题，该培养基中，琼脂为凝固剂，葡萄糖为碳源，尿素为氮源；由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成脲酶的细菌，在功能上称为选择培养基；由于其化学成分明确，故又称为合成培养基；由于该培养基中存在着有机碳源葡萄糖，故可推测从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于异养型。
第（2）小题，在恒定容积的液体培养基上培养微生物，定期取样，然后以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，所得的曲线称为微生物的群体生长曲线，之所以以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是菌体数目往往非常大，且变化率也很高，直接以菌体数目为纵坐标不利于作图。
实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在对数期取材；在生产中，常用培养至稳定期的细菌用于次级代谢产物的提取。
答案：(1)琼脂葡萄糖尿素选择合成异养型（2）生长培养中的细菌以指数形式增长，取对数便于反映细菌群体的生长规律对数期稳定期新课标卷39.[生物—选修1：生物技术实践]（15分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。
某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。
回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和____________。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_____________和______________。
无菌技术要求实验操作应在酒精灯_______________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
39．（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（3）强（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰山东卷 34.（8分）（生物—生物技术实验）研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。
（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。
对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。
实验前需对超净工作台进行____________处理。
（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。
电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。
（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。
可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
答案：（1）压榨过滤（2）稀释涂布平板法高压蒸汽灭菌锅紫外线消毒（3）碳源和氮源越慢（4）大小39（上海）．(9分)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。
某研究小组依照下图所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。
培养基配方如表1。
(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1％的______________。
(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是______________________。
(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________________培养基和______________培养基。
在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是____________________。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_______________。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如下图所示。
从图中可知，SP1菌在______________培养条件下最早停止生长，其原因是_____________________________。
39．(9分)(1)琼脂(2)先调pH，后灭菌(3)通用选择硝酸铵(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗尽40（宁夏卷）.【生物——选修1生物技术实践】（15分）（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。
由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。
（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。
对于固体培养基应采用的检测方法是_________。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
40.【生物——选修1生物技术实践】（1）温度酸碱度易培养生活周期短（2）灭菌消毒损伤DNA的结构（3）比较合适（4）鉴定（或分类）（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。
（6）灭菌33.（10分）（全国理综2）利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。
但现有野生菌株对淀粉的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。
（1）实验步骤：①配置________（固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为________。
②将_____________接入已灭菌的培养基平板上。
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是_______________。
④菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。
周围出现_______________现象的菌落即为初选菌落，经分离、纯化后即可达到实验目的。
（2）若已得到二株变异菌株I和II，其淀粉转化率较高，经测定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉酶蛋白含量高，经进一步研究发现，突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区，可推测出菌株I的突变发生在_________区，菌株II的突变发生在____________区。
33、答案：（1）①固体、玉米淀粉；②野生菌株；③（诱发野生菌株发生基因突变）对野生菌株进行诱变；④（透明圈）浅色范围大；（2）编码区、非编码区6. （安徽）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37°C恒温培养24-48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数3. (理综1卷)下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是A．发酵时需要不断通入无菌空气，否则会积累乳酸B．发酵时常采用的培养基为液体天然培养基C．从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产D．当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量3（重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是A．大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状DNA分子B．在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源C．用大肠杆菌工程菌生产干扰素时．应及时添加核酸等生长因子D．处于对数期的大肠杆菌．常作为生产用的菌种和科研的材料6．D 3．C 3．D（海南卷）25．（18分）［选修模块1：生物技术实践］葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是_________________。
（2）该微生物通过无氧呼吸可分解__________，产生的终产物是___________和____________。
（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。
发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。
据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是_________________________________，导致发酵中出现的主要异常现象是_________________________。
丙同学的错误是_________________，导致发酵中出现的主要异常现象是_______________________。
上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是___________、_____________、______________。
（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是__________________________。
解析：（1）酿酒所用的微生物主要是酵母菌，它进行无氧呼吸的产物是酒精与二氧化碳。
（2）在进行酒精发酵时应为无氧的环境，所以进气口与排气口都要关闭，每隔一段时间打开排气口，以排出产生的二氧化碳。
答案：（1）酵母菌（2分）（2）葡萄糖乙醇CO2（每空1分，共3分）（3）未夹住发酵瓶的充气管（2分）发酵液从充气管流出，发酵液变酸（1分）瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口（2分）排气时发酵液从排气管流出葡萄醋（或果醋）（2分）葡萄酒（或果酒）（1分）葡萄酒（或果酒）（1分）（4）未及时排气（2分）（山东卷）34. 【生物—生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。