色谱固定相及其选择
气相色谱固定相的选择原则
气相色谱固定相的选择原则
选择气相色谱固定相的原则包括以下几个方面：
1、选择与待分析化合物物理化学性质相互配合的固定相。
固定相应具有足够的极性或非极性，以使待分析化合物与固定相发生相互作用，实现有效的分离与保持分离性能。
2、选择在分析温度下具有稳定性的固定相。
固定相应能够在高温下保持其固定性能和分离能力，不发生脱落、裂解或析出现象。
3、选择具有良好热稳定性的固定相。
固定相应能够在高温下稳定存在，不因蒸发或分解而无法有效分离待分析化合物。
4、选择与常见的分析条件（例如分析温度范围、样品类型等）相适应的固定相。
固定相应能够在常见的实验条件下保持其分离性能，以使分析结果准确可靠。
5、选择与分析方法要求相匹配的固定相。
固定相应满足分析要求，如高分辨率、高选择性、低背景噪声等，以提高分析效果和结果的可信度。
色谱柱固定相
色谱柱固定相色谱柱固定相，是指固定在色谱柱内壁的化学元素或化合物。
固定相是色谱分离的关键之一，对色谱柱的分离性能有着重要的影响。
一、固定相种类1.硅胶固定相硅胶固定相是一种常见的无定型材料，在色谱柱中的应用比较广泛。
硅胶固定相具有强吸附性和选择性，特别是对极性化合物的分离具有良好的效果。
2.聚合物固定相聚合物固定相是以聚合物为基础，利用交联网络固定在色谱柱内壁上。
聚合物固定相具有化学惰性、热稳定性好、强度高等特点，适用于分离非极性和弱极性化合物。
3.矽胶固定相矽胶固定相是一种常见的亲水性固定相。
它是以硅酸酯为基础，固定在色谱柱内壁。
矽胶固定相具有化学稳定性、亲水性强、表面积大等特点，适用于分离极性化合物。
4.金属氧化物固定相金属氧化物固定相是一种具有吸附性和离子交换性质的固定相。
金属氧化物固定相的种类较多，如氧化硅、氧化铝等。
金属氧化物固定相具有射电稳定性好、化学稳定性及选择性强等特点，适用于分离有机物和无机物的混合物。
二、固定相的选择1.选择合适的固定相在进行色谱分离时，首先需要选择一种适合的固定相。
一般来说，根据待分离的样品，选用具有良好的结构选择性及物化功能的固定相，以达到最佳分离效果。
2.考虑固定相容性在选择固定相时，还需要考虑固定相的稳定性和兼容性。
若固定相与待分离的目标物质具有反应性，会导致固定相的损坏和失活。
因此需要选择稳定性强、兼容性好的固定相。
3.考虑初始状态在选择固定相的同时，需要考虑固定相的初始状态。
不同种类的固定相具有不同的初始状态，如表面积、孔径大小、表面活性等。
对于一些需要实现特殊的色谱分离机制的分析，选择具有特定表面活性的固定相能够更好地提高分离效果。
总之，选择一种合适的固定相是影响色谱分离效率的重要因素。
根据不同的分析原理和待分离的目标物质，合理选择固定相可以达到最佳的分离效果。
气相色谱固定相的分类
气相色谱固定相的分类气相色谱（GC）是一种业界常见并且广泛应用的分离技术。
它通过分离和测量混合物中的各种化合物，为分析师提供了快速准确的结果。
而在气相色谱中，固定相是至关重要的组成部分。
固定相的种类多样，根据其化学性质和结构可以进行分类。
以下是对气相色谱固定相的分类的介绍。
1. 极性固定相极性固定相是指具有较高极性的材料，它们具有与样品分子间较强的相互作用能力。
这种相互作用主要是通过极性分子之间的氢键、范德华力和离子吸附等形式实现的。
极性固定相适用于分离极性化合物，如酸、酮、醇、醚等。
常见的极性固定相包括聚酯、聚醚、脲类化合物等。
2. 非极性固定相非极性固定相是指具有较低极性或无极性的材料，它们与样品分子间的相互作用能力较弱。
相对于极性固定相来说，非极性固定相更适用于分离非极性或弱极性化合物。
这些化合物通常在溶剂中具有较高的溶解度，并且在非极性固定相上更容易被保留。
常见的非极性固定相包括聚硅氧烷、聚烯烃、聚环烷化合物等。
3. 混合固定相除了单一的极性或非极性固定相外，还存在一种混合固定相，它由不同种类的功能相组成。
混合固定相的使用可以扩展色谱柱的应用范围，以适应更广泛的样品分离需求。
常见的混合固定相包括极性固定相与非极性固定相的组合，如聚酯-聚硅氧烷混合物、聚醚-聚硅氧烷混合物等。
4. 亲水性固定相亲水性固定相是一种特殊的固定相，它具有较高的亲水性，可以用于分离极性化合物。
对于极性化合物而言，在亲水性固定相上保留的时间较短，而对于非极性化合物而言，保留时间则较长。
亲水性固定相的特殊性使得它在分析水溶性、极性药物等方面发挥了重要作用。
在气相色谱中，选择合适的固定相对于样品分离具有至关重要的意义。
通过对气相色谱固定相的分类，我们可以更好地理解固定相的特点和适用范围，从而优化分析方法并获得更准确的结果。
在今后的研究中，随着技术的不断发展，新的固定相材料也将被不断研发和应用，为分析领域带来更多的可能性。
气相色谱色谱柱的选择及分类
气相色谱色谱柱的选择及分类气相色谱色谱柱的选择及分类1.1 固定相的选择当面对一个未知物时，先试用现有GC 柱，如果该柱分离不理想，根据你对样品的了解，基本原则是分析物与固定相有相似化学性质时才会相互作用。
这说明对样品越了解，越容易找到合适的固定相。
非极性分子——通常仅由C和H组成并且无偶极矩，直联（正烷）是常见的非极性化合物的例子。
极性分子——主要由C和H组成同时也有其他原子，如：N、O、P、S或卤素。
样品包括有醇类、胺类、硫醇类、酮类、有机卤化物等。
可极化物质——主要由C和H组成同时包含不饱和键。
通常有：炔和芳香族化合物。
如果你的样品是具有相似的化学性质的非极性组分的混合物，比如大多数石油馏分中的烃，你可以试用OV-1毛细管色谱柱，它按沸点顺序分离。
如果你怀疑有芳族化合物，试着用有苯基的SE-52或SE-54柱。
极性或可极化组分样品能够在中极性和/或可极化固定相色谱柱上进行分析，如有苯基或类似基团固定相，比如OV-17或OV-225柱。
如果需要更高极性，可以选用聚乙二醇（P EG）固定相，即通常所说的WAX固定相。
1.2膜厚选择薄膜比厚膜洗脱组分快、峰分离好、温度低。
一般而言，色谱柱的膜厚为0.25到0.5μm。
对于流出达300℃的大多数样品（包括蜡、甘油三脂、甾族化合物等）能够很好的分析。
对于更高的洗脱温度，可以用0.1μm的液膜。
而厚液膜对于低沸点化合物有利，对于流出温度在100℃～200℃之间的物质，用1～1.5μm的液膜效果较好。
超厚膜（3～5μm）用于分析气体、溶剂和可吹扫出来的物质，以增加样品组分与固定相的相互作用。
另一个选择厚膜的原因是当用大口径柱时保持分离度和保留时间。
由于这个原因，大口径柱都只有厚膜。
厚膜的流失较大，温度极限必须随膜厚度增加而下降。
1.3长度选择一般情况，15m柱用于快速筛选简单混合物或分子量极高的化合物。
30m柱是最普遍的柱长。
超长柱（50、60或100m、150m）用于非常复杂的样品。
气固色谱固定相及选择
毛细管柱和填充色谱柱比较
填充色谱柱
不锈钢填充色谱柱 内经2mm，长度2-3米，外径1/8英寸 玻璃填充色谱柱 内经2mm，长度2米，外径1/8英寸
毛细管色谱柱 内经0.05-0.8mm，长度30-100米，常见的是30米。外
层涂聚酰脂，内表面硅烷化处理，内壁涂固定相。
二、老化方法：使用前通常在180℃通氮气活化3-4h，降温后
存于干燥器内备用。
分子筛
一、分子筛的组成 分子筛是在气固色谱中广泛使用的新型吸附剂，它是人工 合成的泡沸石，主要成分：硅酸铝的钠盐或者钙盐，可表 示为MO.AL2O3.xSiO2.yH2O。其中的M可以是K,Na,Ca等。
二、分子筛的分离原理： 当合成泡沸石加热时，结构水就从硅铝构架的空隙中溢出， 留下大小且分布均匀的空隙，孔径的大小取决于M离子半 径和它在此构架上的位置。当样品分子经过筛子时，比孔 径小的分子便被吸进去，而比孔径大的分子则通过筛子筛 出来，故分子筛实际上像一个“反筛子”。 分子筛的性能主要取决于孔径大小和表面特性。
示例1：溶液中甲醇和水含量的测定
四、分析过程及计算
1 、内标法分析:进样量 0.5mL
2、称取0.5g样品和0.5g意境混合均匀后，近样0.5ul。
3、计算
wi—组分含量% Ai—组分的峰面积 Fi/s—组分的相对校正因子 As—内标物的峰面积 Ws—内标物的质量，g W—样品的质量，g
Fi / s w i
三、分子筛的种类
分子筛
一般分为A型X型，常用的有4A,5A,13X。
四、分子筛的用途：
分离永久气体、H2、H2S、O2、CH4、CO和气
态烃分析等，
五、特点：分析气样中N2和O2有特效;能在高温下
液相色谱固定相种类、性质、选择原则和适用范围课件
压力限度比无机填料低。苯乙烯-二乙烯苯基质疏水性
强。使用任何流动相，在整个pH范围内稳定，可以用
NaOH或强碱来清洗色谱柱。甲基丙烯酸酯基质本质
上比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更强，但它可以通过适当
的功能基修饰变成亲水性的。这种基质不如苯乙烯-二
乙烯苯那样耐酸碱，但也可以承受在pH13下反复冲
( 1)将酸化过的色谱用SiO2 球
浸入到十二烷基硫酸钠( SDS)
表面活性剂溶液中, 待在SiO2
球表面组装一层有机单分子膜
后取出, 洗去表面物理吸附成分,
干燥。( 2)将已被膜包覆的SiO2
球放入氧化锆溶胶中, 磁力搅拌
3 h后分离, 用去离子水充分洗
涤, 干燥。重复进行( 1)、(2 )步
骤多次。( 3)将制备的ZrO2 /有
6.硅胶基质无机改性的色谱固定相
敦惠娟等[ 21, 22] 利用LbL－SA 方法在多孔硅胶微球表面
组装多层纳米氧化锆颗粒, 制备了比表面积为172.53m2 /g、
孔体积为0.378 4 cm3 /g、具有良好化学稳定性ZrO2/SiO2 核
－壳型色谱填料, 并对其进行了表征。
[ 19] Xu Q, MoriM, Tanaka K, IkedoM, HuW Z.JChromatog r A, 2004, 1 026: 191
80ml
含2%δ―葡萄糖酸内脂的乙醇溶液一
Company Logo
起加入反应瓶中80℃下反应24h 抽滤并依次用甲醇水
聚合物
该微球表面呈现强的疏水作用作为固定相可直接应用于反相色谱和以有机溶剂
为流动相的排阻色谱中如用于以盐水为流动相的排阻色谱分离就必须对其表面进行化
色谱柱 固定相 结构
色谱柱固定相结构
色谱柱固定相是指在色谱柱内部的一种固定材料，用于分离和分析混合物中的成分。
这种固定相通常是一种特定的化合物或材料，具有一定的化学性质和物理性质，能够与待分离样品发生特定的相互作用，从而实现分离效果。
色谱柱固定相的结构可以分为以下几种常见类型：
1. 非极性固定相：包括疏水性固定相和芳香性固定相。
疏水性固定相主要是由疏水性材料如石英或硅胶制成，能够与非极性分子发生弱相互作用；芳香性固定相则是由芳香环化合物制成，能够与芳香性或具有π电子结构的化合物发生相互作用。
2. 极性固定相：包括亲水性固定相和氢键性固定相。
亲水性固定相通常由疏水性基底上涂覆亲水性物质，能够与极性分子或带有官能团的化合物发生相互作用；氢键性固定相则是具有氢键供位点的材料，能够与氢键供体或受体发生氢键相互作用。
3. 离子交换固定相：通常是由带有功能团（如胺基、羧基等）的聚合物材料制成，能够与带有相反电荷的离子或离子化合物发生离子交换反应。
此外，还有一些特殊的固定相结构，如手性固定相、亚洲附固定相等，用于对手性化合物的分离和分析。
不同类型的固定相结构选择会影响色谱分离的选择性和效果，在实际应用中需要根据待分析样品的性质和分析目的进行选择。
气相色谱固定相及其选择
气相色谱固定相及其选择一、气-固色谱固定相在气—固色谱法中作为固定相的吸附剂，常用的有非极性的活性炭，弱极性的氧化铝，强极性的硅胶等。
它们对各种气体吸附能力的强弱不同，因而可根据分析对象选用。
一些常用的吸附剂及其一般用途均可从有关手册中查得。
二、气—液色谱固定相1．担体担体(载体)应是一种化学惰性、多孔性的颗粒，它的作用是提供一个大的惰性表面，用以承担固定液，使固定液以薄膜状态分布在其表面上。
对担体有以下几点要求：(1)表面应是化学惰性的，即表面没有吸附性或和吸附性很弱，更不能与被测物质越化学反应；(2)多孔性，即表面积较大，使固定液与试样的接触面较大；(3)热稳定性好，有一定的机械强度，不易破碎；(4)对担体粒度的要求，一般希望均匀、细小，这样有利于提高柱效。
气—液色谱中所用担体可分为硅藻土型和非硅藻土型两类。
常用的是硅藻土型担体，它又是可分为红色担体和白色担体两种。
在分析这些试样时，担体需加以钝化处理，以改进担体孔隙结构，屏蔽活性中心，提高柱效率。
处理方法可用酸洗、碱洗、硅烷化等。
2．固定液A．对固定液的要求(1)挥发性小，在操作温度下有较低蒸气压，以免流失。
(2)稳定性好，在操作温度下不发生分解。
在操作温度下呈液体状态。
(3)对试样各组分有适当的溶解能力，否则被载气带走而起不到分配作用。
(4)具有高的选择性，即对沸点相同或相近的不同物质有尽可能高的分离能力。
(5)化学稳定性好，不与被测物质起化学反应。
B．固定液的分离特征。
固定液的分离特征是选择固定液的基础。
固定液的选择，一般根据“相似相溶”原理进行，即固定液的性质和被测组分有某些相似性时，其溶解度就大。
如果组分与固定液分子性质(极性)相似，固定液和被测组分两种分子间的作用力就强，被测组分在固定液中的溶解度就大，分配系数就大，也就是说，被测组分在固定液中溶解度或分配系数的大小与被测组分和固定液两种分子之间相互作用的大小有关。
分子间的作用力包括静电力、诱导力、色散力、和氢键力等。
色谱柱的选择技巧与原则
色谱柱选择
参照标准
各种担体，名目繁多。
在常用硅藻土担体中：
红色担体（如6201、201），可用于非极性或弱极性物质的分离。
白色担体（如101）可用于极性物质或碱性物质。
釉化红色担体（如301）可用于中等极性物质。
硅烷化白色担体可用于强极性氢键型物质如废水测定。
分离酸性物质，如酚类，要用酸洗处理的担体。
分离碱性物质，如乙醇胺，要用碱洗处理的担体。
有些特殊的情况下要用特殊的担体，如氟担体分离异氰酸酯类。
但是在普通的常量分析中，对担体可以不必过份讲究，甚至如耐火砖粉粒，玻璃珠砂和海沙也可以使用。
第4节 色谱固定相及其选择
第四节 气相色谱固定相
stationary phases in gas chromatograph
2013-7-1
一、气固色谱固定相
在GC分析中，各组分能否完全分离，主要取决 于色谱柱的效能和选择性，固定相的选择是关键问 题。 气固色谱用的固定相是一种有一定活性的吸附 剂。 常用于分析永久性气体和低沸点的烃类。
2013-7-1
二、气液色谱固定相
在气液色谱中，固定相是液体，是一种高沸点的
有机液膜－称固定液。
固定相必须有两部分组成：①固定液 ②担体
1．组分和固定液之间的分子作用力
组分在柱中的保留时间主要决定于组分和固定
液之间的作用力。 静电力，诱导力，色散力 分子间的作用力
2013-7-1
氢键作用力
静电力：极性分子之间产生的作用力 。
分离极性物质，选择极性固定液。组分按极性从 小到大流出。
分离极性和非极性物质，一般选极性固定液。非 极性组分先出峰。 能形成氢键的物质，选择氢键型固定液。组分按 形成氢键能力大小分离。
2013-7-1
复杂的难分离物质，可选用两种以上的固定液。 研究和使用过的固定液有1000多种，但最常用 总之，应选择固定液与被测组分的作用力 的不到10种。 大，溶解度大，分配系数大，充分发挥色谱
1. 种类
活性炭：有较大的比表面积，吸 附性较强。适于永久性气体和低沸 点的烃类。
2013-7-1
活性氧化铝：有较大的极性。
适用于常温下O2、N2、CO、CH4、C2H6、C2H4
等气体的相互分离。CO2能被活性氧化铝强烈吸附
而不能用这种固定相进行分析。
硅胶：与活性氧化铝大致相同的分离性能。 除能分析上述物质外，还能分析CO2、N2O、 NO、NO2等，且能够分离臭氧。。
气相色谱法
气相色谱固定相 及其选择
• 气液色谱固定相： 载体(担体)和固定液组成 气液色谱固定相 • 决定气相色谱分离的主要因素是：组分与固定 相分子之间的相互作用力。 • 一、固定液 ：是高沸点有机物，涂布在惰性载 体表面构成固定相。 • 1．要求首先是选择性好()，还要求固定液有 良好的热稳定性和化学稳定性；对试样各组分 有适当的溶解能力；在操作温度下有较低蒸气 压，以免流失太快；粘度小，凝固点低(利于涂 布均匀)。
检测系统
• C．影响热导检测器灵敏度的因素 • l)桥电流 桥电流增加，使钨丝温度提高，钨丝和热导 池体的温差加大，气体就容易将热量传出去，灵敏度 就提高。响应值与工作电流的三次方成正比。所以， 增大电流有利于提高灵敏度，但电流太大会影响钨丝 寿命。 • 2)池体温度 池体温度降低，可使池体和钨丝温差加大， 有利于提高灵敏度。但池体温度过低，被测试样会冷 凝在检测器中。池体温度一般不应低于柱温。 • 3)载气种类 载气与试样的热导系数相差愈大，则灵敏 度愈高。故选择热导系数大的氢气或氦气作载气有利 于灵敏度提高。如用氮气作载气时，有些试样 (如甲烷) 的热导系数比它大就会出现倒峰。 • 4)热敏元件的阻值 阻值高、温度系数较大的热敏元件， 灵敏度高。
气相色谱固定相 及其选择
• 2．组分分子与固定液间的作用力 • 在气相色谱中，载气是情性的，且组分在气相中浓度很低，组 分分子间作用力很小，可忽略。在液相中，由于组分浓度低， 组分间的作用力也可忽略。液相里主要存在的作用力是组分与 固定液分子间的作用力，这种作用力反映了组分在固定液中的 热力学性质。作用力大的组分，由于溶解度大，分配系数大。 • 这种分子间作用力是一种较弱的分子间的吸引力，包括： • 定向力：存在极性分子之间； • 诱导力：存在极性分子与非极性分子之间；(环己烷和苯，由于 苯比环己烷容易极化，诱导力较大) • 色散力：存在非极性分子之间； • 氢键作用力：特殊定向力。 • 此外，固定液与被分离组分间还可能存在形成化合物或配合物 等的键合力，如银离子与不饱和化合物形成松弛的夹合物用来 改善分离。
薄层色谱的固定相
薄层色谱的固定相
薄层色谱（Thin Layer Chromatography，简称TLC）的固定相通常是在玻璃、金属或塑料板上涂覆一层薄的固体物质，常用的有硅胶（Silica Gel）、氧化铝（Alumina）和聚歧化硅（Polydimethylsiloxane）等。
硅胶是最常用的固定相材料之一，可作为极性固定相。
它在制备过程中具有较好的附着性和化学稳定性，并且提供了多种极性度的选择，可以适应不同的分析需要。
氧化铝也是常用的固定相材料，具有较高的热稳定性和机械强度，适用于分离不同极性化合物。
相对于硅胶，氧化铝的分离效果更好，但它也具有较高的吸附性和较低的选择性。
聚歧化硅是一种无机聚合物，具有很低的极性和较好的耐热性能，常用于分离非极性化合物。
它能够提供非极性条件下对化合物的有效吸附作用，适用于一些不耐受酸碱条件的分析。
除了以上固定相材料，还有一些其他少量使用的固定相，如聚丙烯酸酯、改性二氧化硅等。
这些不同的固定相材料可根据需要进行选择，以实现不同化合物的有效分离和分析。
色谱固定相及其选择
PEG20M 250
DEGS
225
乙 醇 氢 键 2308 醇 、 醛 酮 、 脂 肪 酸 、 酯
等极性化合物
氯 仿 氢 键 3430
2024/8/30
内容选择
2024/8/30
第一节 气相色谱仪
gas chromatographic instruments
第二节 气相色谱固定相及其选择
stationary phases in gas chromatograph
O V - 2诱2 导3 5力0 ；非甲 苯极性+ 2 分1子0 7 5 间的色散力；氢键等。
D N P 也可1 3以0 用五乙 醚个数+ 2 的总和来表示固定相的极性
O V - 2大1 0 小2 5，0 如：氯 仿β，+ 2 β1’5 0 0 —氧二丙睛五个常数的
O V - 2总2 5 和2 5为0 4427，是+ 3 强1极8 1 3 性固定相。
第三节 气相色谱检测器
detector of gas chromatograph
第四节 分离与操作条件选择
choice of chromatographic operating
condition
第五节 气相色谱分析法的应用
application technology of gas chromatograph
O V -101 350
表
O V -3
350
丙 酮 +1
229
优选固定液
甲 苯 +1
423
各类高沸点弱 极性有 机 化合物，如芳烃
麦氏常数：x’、y’、z’、u’、s’表示，
O V -7
350
高效液相色谱中柱选择性主要取决于固定相性质的作文
高效液相色谱中柱选择性主要取决于固定相性质的作文高效液相色谱法通常是根据固定相和流动相的性质来分类的，因此，有必要再讨论一下液相色谱法中所使用的固定相和流动相的一般特性。
固定相：高效液相色谱法所用的固定相按所承受的压力可分为硬胶、半硬胶或软胶三种。
固定相的选择在很大程度上取决于所要用的液相色谱法，在液固吸附色谱法、液液分配色谱、化学键合相色谱法中多使用硬胶固定相，离子交换色谱谱中常常使用半硬胶，而在凝胶色谱中，硬胶、半硬胶和软胶固定相都可以使用。
固定相按孔隙深度又可分为表面多孔型和全多孔型。
表面多孔型的基体是球形玻璃珠，在玻璃表面涂一层多孔活性物质，如硅胶、氧化铝、聚酰胺、离子交换树脂、分子筛等，也可以制成化学键合固定相，这种固定相的多孔层薄、孔浅、传质速度快，适合于快速分离，填充均匀紧密，机械强度高，能承受高压，适合于较简单的样品即常规分析。
由于多孔层较薄，进样量受到限制。
全多孔型固定相比表面积大，柱容量大；小颗粒全多孔型固定相孔洞浅传质速度快，柱效高，分离效果好，适合于复杂样品和痕量组分的分离分析。
流动相：在气相色谱中，可供选择的载气只有三四种，它们的性质差别不大，所以要提高柱的选择性，主要是改变固定相的性质。
在液相色谱中，与气相色谱不同，当固定相选定时，流动相的种类、配比能显著地影响分离效果，因此流动相的选择很重要，当色谱柱和待测样品确定以后，选择什么样的试剂做流动相，直接影响组分的分离度。
通常要考虑作为流动相的溶剂的物理性质和溶剂强度以及溶剂的种类和配比。
所以，高效液相色谱中柱选择性主要取决于固定相性质。
液相色谱柱的分类、选择及维护
液相色谱柱的分类、选择及维护一、液相色谱柱的分类(按色谱固定相基质分)1、硅胶基质1.1、反相色谱柱：反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
1.2、正相色谱：正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)，以及其他具有极性官能团，如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN，CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform)，二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
1.3、离子交换色谱柱：以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱，常用规格：强阴离子色谱柱(SAX)，强阳离子交换色谱柱(SCX) 2、聚合物基质聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要优点是在PH值为1-14均可使用。
相对与硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的疏水性；大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。
所有聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。
用于HPLC的高交联度聚合物填料，其膨胀和收缩要有限制。
溶剂或小分子容易渗入聚合物基质中，因为小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢，所以造成小分子在这种基质中柱效低。
对于大分子像蛋白质或合成的高聚物，聚合物基质的效能比得上陶瓷性基质。
因此，聚合物基质广泛用于分离大分子物质。
3、其他无机填料其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。
气相色谱色谱柱的选择及分类
气相色谱色谱柱的选择及分类之欧侯瑞魂创作1.1 固定相的选择当面对一个未知物时，先试用现有GC柱，如果该柱分离不睬想，根据你对样品的了解，基来源根基则是分析物与固定相有相似化学性质时才会相互作用。
这说明对样品越了解，越容易找到合适的固定相。
非极性分子——通常仅由C和H组成而且无偶极矩，直联（正烷）是罕见的非极性化合物的例子。
极性分子——主要由C和H组成同时也有其他原子，如：N、O、P、S或卤素。
样品包含有醇类、胺类、硫醇类、酮类、有机卤化物等。
可极化物质——主要由C和H组成同时包含不饱和键。
通常有：炔和芳香族化合物。
如果你的样品是具有相似的化学性质的非极性组分的混合物，比方大多数石油馏分中的烃，你可以试用OV-1毛细管色谱柱，它按沸点顺序分离。
如果你怀疑有芳族化合物，试着用有苯基的SE-52或SE-54柱。
极性或可极化组分样品能够在中极性和/或可极化固定相色谱柱上进行分析，如有苯基或类似基团固定相，比方OV-17或OV-225柱。
如果需要更高极性，可以选用聚乙二醇（PEG）固定相，即通常所说的WAX固定相。
薄膜比厚膜洗脱组分快、峰分离好、温度低。
一般而言，色谱柱的膜厚为0.25到0.5μm。
对于流出达300℃的大多数样品（包含蜡、甘油三脂、甾族化合物等）能够很好的分析。
对于更高的洗脱温度，可以用0.1μm的液膜。
而厚液膜对于低沸点化合物有利，对于流出温度在10 0℃～200℃之间的物质，用1～1.5μm的液膜效果较好。
超厚膜（3～5μm）用于分析气体、溶剂和可吹扫出来的物质，以增加样品组分与固定相的相互作用。
另一个选择厚膜的原因是当用大口径柱时坚持分离度和保存时间。
由于这个原因，大口径柱都只有厚膜。
厚膜的流失较大，温度极限必须随膜厚度增加而下降。
一般情况，15m柱用于快速筛选简单混合物或分子量极高的化合物。
30m柱是最普遍的柱长。
超长柱（50、60或100m、150m）用于非常复杂的样品。
柱长度在柱性能上不是一个重要参数，例如：加倍柱长，恒温分析时间则加倍但峰分辨率仅增大约40%。
液相色谱固定相与流动相
4. 空间排阻分离固定相
（1）软质凝胶 葡聚糖凝胶、琼脂凝胶等，多孔网状结构。 水为流动相，适用于常压排阻分离。 （2）半硬质凝胶 苯乙烯-二乙烯基苯交联共聚物，有机凝胶； 非极性有机溶剂为流动相，不能用丙酮、乙醇等极性溶剂 （3）硬质凝胶 多孔硅胶、多孔玻珠等； 化学稳定性、热稳定性好、机械强度大，流动相性质影响 小，可在较高流速下使用。 可控孔径玻璃微球，具有恒定孔径和窄粒度分布。
2018/11/17
4.3.2 液相色谱的流动相
1. 流动相特性
（ 1）流动相组成改变，极性改变，可 显著改变组分分离状况。
（2）亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性 小于固定相的极性，正相，极性柱也称正相柱。 （3）若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液液 色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上 的出峰顺序相反。
4.3.1 液相色谱固定相
1. 液-液分配及离子对分离固定相
（1）全多孔型担体 氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体；早期采用 100μm的大颗粒，表面涂渍固定液，性能不佳已不多见。 现采用10μm以下的小颗粒，化学键合制备柱填料。 （2）表面多孔型担体 （薄壳型微珠担体） 30 ～ 40 μ m 的玻璃微球， 表面附着一层厚度为1 ～ 2μm的多孔硅胶。 表面积小，柱容量低。
2018/11/17
3. 流动相选择
在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。 采用正相液-液分配分离时，首先选择中等极性溶剂， 若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。 也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使 保留时间缩短。 常用溶剂的极性顺序： 水(最大) > 甲酰胺> 乙腈> 甲醇> 乙醇> 丙醇> 丙酮>二氧六环> 四氢呋喃> 甲乙酮> 正丁醇> 乙酸乙酯> 乙醚> 异丙醚> 二氯甲烷>氯仿>溴乙烷>苯>四氯化碳>二硫 化碳>环己烷>己烷>煤油(最小)
第十章高效液相色谱分析法第三节高效液相色谱固定相与流动相
第十章高效液相色谱分析法第三节高效液相色谱固定相与流动相高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种使用高压泵将样品溶液通过固定相柱进行分离和分析的方法。
在HPLC中，固定相和流动相是非常重要的组成部分，对于分离和分析的效果起着决定性的作用。
1.高效液相色谱固定相高效液相色谱固定相是指填充在色谱柱中的材料，它起到分离样品的作用。
常见的固定相有：（1）硅胶固定相：硅胶是一种多孔材料，具有较大的比表面积，能够有效地吸附样品分子，是一种通用的固定相材料。
（2）反相固定相：反相色谱是基于样品中非极性化合物与反相固定相之间的亲水作用力不强而进一步分离的一种方法。
常见的反相固定相有碳链固定相（如C18、C8等）和脂肪酸链固定相（如ODS、ODPS等）。
（3）离子交换固定相：离子交换色谱是通过固定相中的离子交换基团与样品中的离子之间的相互作用来实现分离的一种方法。
常见的离子交换固定相有阴离子交换基团和阳离子交换基团。
（4）亲和层析固定相：亲和层析是一种根据样品中分子与固定相中的特殊结构之间的亲和作用力来实现分离的方法。
常见的亲和层析固定相有金属离子螯合固定相、抗体亲和固定相等。
2.高效液相色谱流动相高效液相色谱流动相是指用于输送样品溶液的溶剂。
它在分离和分析过程中起到溶解和移动样品分子的作用。
根据溶剂的极性不同，可以分为非极性溶剂、极性溶剂和离子对溶剂。
（1）非极性溶剂：如正己烷、甲苯，主要用于非极性物质的分离。
（2）极性溶剂：如乙醇、乙酸乙酯，主要用于极性物质的分离。
（3）离子对溶剂：如甲酸和甲醇的混合物，主要用于离子性物质的分离。
离子对溶剂一般用于反相色谱中，可以增加色谱的选择性。
高效液相色谱固定相和流动相的选择主要根据被分离物的性质、分析的需求和设备的特点来确定。
对于样品中多种成分的分离，可以采用多种固定相和流动相的组合，以达到最佳的分离和分析效果。
第4节 色谱固定相及其选择——【分析化学】
③分离非极性和极性的（或易被极化的）混 合物，一般选用极性固定液。此时，非极性 组分先出峰，极性的（或易被极化的）组分 后出峰。
④醇、胺、水等强极性和能形成氢键的化合物 的分离，通常选择极性或氢键性的固定液。
练习：1.分离苯和环己烷 ，用哪种极性的固定液？ 2. 用SE-30分离二氯甲烷、三氯甲烷和四氯化碳，判断
2.固定液
高沸点、难挥发的有机化合物
(1) 对固定液的要求
a.应对被分离试样中的各组分具有不同的溶解能 力;
b.较好的热稳定性，
c.不与被分离(组2)分固发定生液不的可最逆高的最化低学使反用应温。度
a.高于最高使用温度易分解;
2021/2/5 Friday
b. 温度低呈固体。
(3)固定液的相对极性
出峰顺序。
1. 80.10, 80.81 °C 2. 40、62、77 °C
2021/2/5 Friday
Summary of The key Points
• 气固色谱固定相常用：活性炭，分子筛，氧化铝和硅胶； • 气液色谱固定液非常多，高沸点、难挥发的有机化合物
都可； • 固定液的选择原则：相似相溶；
二.气液色谱固定相
stationary phases in gas-liquid chromatography
固定液 + 担体（支持体） ： 小颗粒表面涂渍上一薄层固定液
1.担体 (1)比表面积大，孔径分布均匀； (2)化学惰性，表面无吸附性，与组分不反应；
(3)具有较高的热稳定性和机械强度。
2021/2/5 Friday
规定：角鲨烷（异三十烷）的相对极 性为零，β，β’—氧二丙睛的相对极性为 100。
§2-4 固定相及其选择
分离的物质 极性 非极性 极性+非极性 形成氢键 复杂组分
固定液 极性 非极性 极性
出柱顺序 极性小的先出柱 低沸点的先出柱 非极性的先出柱
极性或氢键型 不易形成氢键的先出柱 混合固定液
• 注：有个别情况不符合上述原则，如： 苯和环已烷均是非极性化合物，两者沸 点相近（苯：80.1℃、环已烷：80.7 ℃）， 可是用非极性固定液很难分开。如果利用诱 导力，即用极性固定液，苯有大派键易极化， 环已烷只有键，不能极化，所以苯与固定液 能产生较强的作用力，就能同环已烷分开， 当固定液极性越强时，分离的越好。
化学分类法：按化学结构分 极性分类法：按相对极性分
④固定液的选择（选择原则）： a.分离非极性物质选用非极性固定液，各组分 按沸点顺序流出，低沸点先出柱； b.分离极性物质选用极性固定液，各组分按 极性顺序分离，极性小的先出柱；
c.试样中有非极性和极性组分时，选用极性 固定液，非极性组分先出柱； d.试样中有能形成氢键的组分时，选用极性 或氢键型固定液，不易形成氢键的组分先 出柱； e.复杂组分时，选用混合固定液。
气液色谱固定相
1、固定液 ①对固定液的要求： • a)在操作温度下呈液态，蒸气压低，热稳定 性好； • b)对样品各组分有足够的溶解能力（分配系 数K 适当）； • c)对各组分具有良好的选择性； • d)化学稳定性好——与样品组分不产生化学 反应。
②固定液的分离特征：
在色谱分离中，固定液的应用是根据 “相似相容”原理选择的，组分与固定液分 子极性相似时，二者之间的作用力就强，组 分在固定液中溶解度就大，分配系数就大。 ③固定液的分类：
它是一些多孔、大表面，具有吸附活性
的固体物质。
常用固体吸附剂：硅胶 ( 强极性 ) 、氧化
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。