实验4 离体蛙心灌流
内容实验四 离体蛙心灌流
实验器材和药品
【实验对象】 蛙或蟾蜍。 实验对象】 蛙或蟾蜍。 实验器材和药品】 【实验器材和药品】 蛙类手术器械、玻璃蛙心插管、铁支架、蛙心 蛙类手术器械、玻璃蛙心插管、铁支架、 张力换能器、BL-420系统 任氏液、 系统、 夹、张力换能器、BL-420系统、任氏液、无钙任 氏液、 氯化钙溶液、 氯化钙溶液1%氯 氏液、3%氯化钙溶液、0.1%氯化钙溶液 氯化钙溶液 氯化钙溶液 氯 化钾溶液、 去甲肾上腺素溶液、 化钾溶液、l:10000 去甲肾上腺素溶液、l:10000 肾上腺素溶液、 乙酰胆碱溶液、 肾上腺素溶液、l:10000乙酰胆碱溶液、2.5%碳 乙酰胆碱溶液 碳 酸氢钠溶液、3%乳酸溶液、0.0125%毒毛花甙 酸氢钠溶液、 乳酸溶液、 毒毛花甙 乳酸溶液 K。 。
漳州卫生职业学院
基础医学部实验中心
内容:实验四 离体蛙心灌流 内容:
主讲教师：林艺
实验四、 实验四、离体蛙心灌流
目的和原理 实验对象 实验准备 实验器材和药品 实验步骤及观察项目 注意事项 思考与讨论
实验四、 实验四、离体蛙心灌流
目的和原理
正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋， 正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋， 如将离体的蛙心保存在适宜的环境中，在一定时间内 如将离体的蛙心保存在适宜的环境中， 仍能产生节律性兴奋和收缩活动。 仍能产生节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活 动还有赖于内环境因素的相对稳定， 动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成 分可引起心脏活动的改变。 分可引起心脏活动的改变。 本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法， 本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法，并观察 某些离子、递质和强心贰对心脏活动的影响。 某些离子、递质和强心贰对心脏活动的影响。
蛙心生理实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 探究心脏节律性活动的生理机制。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取出并置于人工灌流液中，使其在一定时间内保持节律性收缩。
实验中，通过改变灌流液的成分，可以观察不同理化因素对心脏活动的影响，从而了解心脏生理活动的调节机制。
蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：青蛙2. 实验器材：蛙心夹、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、套管夹。
3. 生理信号采集系统、计算机。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心：取一只青蛙，双毁髓后背位置于蛙板上，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管，在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
2. 插管：用斯氏蛙心插管法，将蛙心夹插入心脏，并通过蛙心夹上的管道与灌流系统连接。
3. 灌流：将蛙心置于任氏液中，开始灌流，调节灌流速度和压力，使心脏保持节律性收缩。
4. 观察与记录：观察心脏的收缩、舒张情况，记录心率和心搏曲线。
5. 改变灌流液成分：分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换任氏液，观察心脏活动的变化。
6. 分析与讨论：分析不同灌流液对心脏活动的影响，讨论心脏生理活动的调节机制。
五、实验结果与分析1. 在正常任氏液中，心脏保持节律性收缩，心率为60-100次/分钟。
实验四离体蛙心灌流
2、插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹 住少许心尖部肌肉(不要夹过多，以免因夹破心室而 漏液)。再将蛙心夹上的系线绕过一个滑枪与张力传 感器相连。注：勿便灌流液滴到传感器上。调节记录 仪上的收缩曲线的幅度适中。 3、实验观察（图11） (1)记录正常心搏曲线。 (2)改用0.65% NaCl溶液灌流，并作好加药标记，观 察心搏变化。待曲线出现明显变化时，立即吸去套管 中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清 洗2－3次，待心搏恢复正常，注意：换液时切勿碰套 管，以免影响描记曲线的基线，同时保持灌流液面一 致(以下同)。
(3)向套管内加1－2滴2% CaCl2溶液（较细的套管需 少加）溶液，作好加药记号，观察心搏曲线的频率及 振幅变化。当曲线出现明显变化时，应立即吸去套管 中的灌流液，并做好冲洗标记，迅速用新鲜任氏液清 洗2－3次，待心搏恢复正常。 (4)同法向套管内加入1－2滴1% KCl溶液，记录心搏 曲线的变化。当心搏曲线变化时，同法更换灌流液， 待心搏恢复正常公 (5)同法记录套管中加入1－2滴肾上腺素溶液(1/10000) 后心搏曲线的变化。 (7)同法记录套管中加入1－2滴乙酰胆碱溶液(1/10000) 后心搏曲线的变化。
【注意事项】 1、制备离体心脏标本时，勿伤及静脉窦。 2、蛙心夹应在心室舒张期一次性夹住心尖，避免因夹伤心脏而导致漏液。 3、每一观察项目都应先描记一段正常曲线，然后再加药并记录其效应。 加药时应在心跳曲线上予以标记，以便观察分析。 4、各种滴管应分开，不可混用。 5、在实验过程中，插管内灌流液面高度应保持恒定；仪器的各种参数一 经调好，应不再变动。 6、给药后若效果不明显，可再适量滴加，并密切注意药物剂量添加后的 实验结果。给药量必须适度，加药出现变化后，就应立即更换任氏液， 否则会造成不可挽回的后果，尤其是K＋稍有过量，即可导致难以恢复的 心脏停跳。 7、标本制备好后，若心脏功能状态不好（不搏动），可向插管内滴加 1～2滴2%CaCl2或1：10000肾上腺素，以促进（起动）心脏搏动。在实 验程序安排上也可考虑促进和抑制心脏搏动的药物交换使用。 8、谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内而损坏其电子元件。
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。
2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。
5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。
实验4 离体蛙心灌流
【作业】
1.计算加入2滴2%KCl后的灌流液中KCl的摩 尔浓度。（其中KCl的摩尔质量为 74.5g/mol，假设2滴的体积相当于50ul， 灌流液的体积为5ml) 2.有兴趣的同学可查阅资料讨论高血钾症 时动物的心电图如何变化以及如何救治。
肾上腺素作用机制：
心脏，肾上腺素与β 肾上腺素能受体结合产生正性变 时、变力和变传导作用，导致心率加快，传导速度加 快，使心输出量增加，心肌收缩力增强。激活心肌细胞 膜上的腺苷酸还化酶，使细胞内 cAMP浓度增加，cAMP 能激活心肌细胞膜上的钙通道，使心肌动作电位平台期 的内流增加，心肌收缩力增强。
【仪器与设备】
蟾蜍， 蛙用手术器械，蛙心套管，蛙心夹，张 力换能器， RM6240 ， 任 氏 液 ， 2%CaCl2 ， 2%KCl ， 0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱。
三、实验内容与操作步骤
（一）离体蛙心灌流制作
1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，剪除 心包膜和肝系膜（不要损伤血管） 2.第1次结扎：双结扎右主动脉
实验项目 心收缩张力 （克） 心输出量 （滴/min） 心率 （次/min）
对照 1-2滴 2%CaCl2 1-2滴2%KCl 1-2滴10-4肾 上腺素 1-2滴10-4乙 酰胆碱
Ca2+作用机制：
1.使慢反应自率细胞0期去极化加强，传导性加 强。 2.慢反应自率细胞4期自动去极化速度加快，自 率性加强。 3.快反应工作肌细胞进入细胞内Ca2+多，心肌收 缩力加强。
Байду номын сангаас
【注意事项】
每次换液时液面应保持一定的高度。 每次换液或滴加试剂时应打标记。 每个试剂瓶的滴管不能混淆，以免沾污 试剂，影响结果。 心脏表面随时滴加任氏液，以免干燥。 待心跳恢复正常后进行下一项实验。
蛙类离体心脏灌流实验
蛙类离体心脏灌流实验蛙类离体心脏灌流实验一、实验目的1、探究不同溶液对心肌特性的影响2、掌握离体心脏灌流的技术二、实验原理（一）两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环，心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后，心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
（二）心肌对细胞外离子浓度和体液因素敏感（三）钾、钙和钠离子对心肌特性的影响由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关，因此，细胞外液中离子浓度升升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
（1）钾离子的影响K＋与静息电位的形成有关。
细胞外液K＋浓度[K＋]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾：[K＋]0轻度或中度增高时，膜内、外K＋浓度差减小，静息电位绝对值减小，与阈电位差距缩短，因此，兴奋性增高。
[K＋]0显著升高时，由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV 左右），Na＋通道失活，因而兴奋性降低甚至消失。
另外，还使0期去极化速度和幅度减小，传导性降低，导致兴奋传导减慢，甚至传导阻滞。
此外，[K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性，加速K＋外流，动作电位平台期缩短，因此，不应期缩短。
此外由于平台期缩短，减少了Ca2＋的内流，加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用，导致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。
[Ca2＋]0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2＋]0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。
Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。
[Ca2＋]0降低时，所引起的变化与高钙时相反。
（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
只有当[Na＋]0明显增高时，膜内外钠的浓度差梯度增大，因此，快反应细胞Na＋内流加快，0期去极速度和幅度均增加，导致传导性和自律性增高。
实验4-4 蛙类离体心脏灌流
实验4-4 蛙类离体心脏灌流引言离体心脏灌流实验是生理学中常用的方法之一。
不同种类的动物可以通过体表切口或开放胸骨来取出其心脏进行灌流。
而离体心脏灌流实验可以帮助研究者了解心脏的解剖学和生理学特征。
本实验将讲解如何进行蛙类离体心脏灌流实验。
实验器材和试剂1.蛙类（建议使用大型蛙类）。
2.离体心脏灌流系统，包括：- 离体心脏灌流装置（含灌流缓冲液、温度控制器等）。
- 稳压泵。
3.灌流缓冲液，常用的为Tyrode's盐溶液。
实验步骤1. 先将离体心脏灌流系统检查一遍，保证各项设备均运转正常。
2. 杀死一只蛙类，立即进行解剖，取出心脏，并将其迅速转移到灌流装置中。
在移植心脏时应注意不损伤其血管和肌肉组织。
在灌流系统中，除了心脏，不能有其他生物组织残留。
3. 确认灌流系统中的灌流缓冲液温度为20~25℃。
在开始灌流之前，要先排除灌流管路中的空气。
4. 打开灌流泵，根据所选择的灌流缓冲液flow rate控制注入速度，一般建议在3~8ml/min。
确保满足心脏需求的氧气和营养物质可以通过灌流液输送到心脏内部。
5. 注入灌流缓冲液的同时，对心脏进行观察，确认心脏速率、收缩波幅度等生理特征。
6. 加入适当的药物来研究心脏对药物的反应性。
此时应读取每个添加药物后的心脏特征和响应（如速率、波幅等）。
7. 在实验结束时，切断灌流管路和心脏连接，灌流系统中的灌流液应该被排除并清洁。
结果和分析离体心脏灌流实验可以观察心脏的生理学特征和对不同药物的反应，这有助于研究者了解心脏的生理学机制。
在进行本实验时，需要注意不仅仅是心脏的特征，还要关注灌流流量和药物导致的生理反应。
在实验的过程中，如果发现心脏节律不齐或收缩波幅度明显下降，这可能是灌流流量不足造成的。
而添加不同的药物，可以帮助研究者了解心脏的调控机制，同时也可以评估药物的疗效。
需要注意的是，不同种类的动物其心脏组织的特征也是不同的，因此需要根据具体的实验目的选择合适的动物进行实验。
离体蛙心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体器官（蛙心）灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验，通过人工灌流的方法，使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。
实验原理如下：1. 蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素，可以观察蛙心活动的变化，了解理化因素对心脏活动的影响。
三、实验对象与用品1. 实验对象：蟾蜍2. 实验用品：斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备：将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪开胸壁，暴露心脏。
用蛙心夹夹住蛙心尖部，固定在蛙板上。
2. 动脉插管：在主动脉分支下预埋一条棉线，结扎主动脉左支，剪一向心斜切口，插入斯氏蛙心套管，送入动脉球。
3. 连接实验装置：将蛙心套管与二道仪相连，记录蛙心活动。
4. 灌流液准备：配制正常灌流液（任氏液）和实验灌流液（分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等）。
5. 实验操作：a. 将蛙心置于正常灌流液中，观察蛙心活动，记录心率、收缩幅度等指标。
b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中，观察蛙心活动的变化，记录心率、收缩幅度等指标。
c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下，蛙心以正常节律收缩和舒张，心率适中，收缩幅度适中。
2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后，蛙心收缩幅度稍微减小，收缩力稍微减弱。
分析原因：相当于细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。
蛙心灌流实验实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技能，提高实验观察和分析能力。
二、实验原理蛙心灌流实验是研究心肌细胞生理特性的常用方法。
通过离体蛙心灌流，可以观察和比较不同理化因素对心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的影响。
实验中，利用任氏液作为灌流液，维持蛙心的正常生理活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心夹、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙板、蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹等。
四、实验步骤1. 制备蛙心标本：将蟾蜍放入装有冰块的容器中，使其昏迷。
在蟾蜍背部剪一小口，暴露心脏。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
将心脏与动脉分离，用任氏液冲洗，置于蛙心夹上。
2. 连接实验装置：将蛙心夹固定于支架上，连接张力传感器和计算机采集系统。
将任氏液滴入培养皿中，用滴管控制液面高度。
3. 观察正常蛙心活动：打开计算机采集系统，观察蛙心在任氏液中的正常收缩和舒张活动。
4. 改变灌流液成分，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
c. 在灌流液中加入1%KCl溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
d. 在灌流液中加入1:10000肾上腺素，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
e. 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
f. 在灌流液中加入3%乳酸，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
5. 记录观察结果，分析实验现象。
五、实验结果与分析1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性稍微减小，表现为心跳频率和幅度降低。
蛙心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是研究心脏生理功能的一种常用方法。
在实验中，通过离体蛙心灌流装置，将蛙心置于人工灌流液中，模拟心脏在体内的生理环境，观察和分析不同理化因素对心脏活动的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液。
2. 实验仪器：手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹。
四、实验方法与步骤1. 制备蛙心标本：将青蛙进行双毁髓处理后，置于蛙板上，暴露心脏。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
游离心脏，用蛙心夹固定于支架上。
2. 连接实验装置：将蛙心标本与张力传感器连接，张力传感器连接计算机采集系统。
3. 灌流液准备：将任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液分别装入培养皿中。
4. 观察不同灌流液对蛙心活动的影响：a. 以任氏液作为正常对照组，观察蛙心收缩活动。
b. 将灌流液更换为0.65%NaCl溶液，观察蛙心收缩活动变化。
c. 将灌流液更换为2%CaCl2溶液，观察蛙心收缩活动变化。
d. 将灌流液更换为1%KCl溶液，观察蛙心收缩活动变化。
e. 将灌流液更换为1:10000肾上腺素溶液，观察蛙心收缩活动变化。
f. 将灌流液更换为1:10000乙酰胆碱溶液，观察蛙心收缩活动变化。
g. 将灌流液更换为3%乳酸溶液，观察蛙心收缩活动变化。
五、实验结果与分析1. 任氏液灌流：蛙心收缩活动正常，表现为规律性的收缩和舒张。
2. 0.65%NaCl溶液灌流：蛙心收缩幅度稍微减小，舒张幅度稍微减弱，表现为细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。
离体蛙心灌流实训报告
一、实验目的1. 熟悉离体蛙心灌流实验的基本原理和操作步骤。
2. 学习观察和分析理化因素对蛙心活动的影响。
3. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中常用的方法之一，主要用于研究心脏的生理功能和调节机制。
实验过程中，将蛙心从体内取出，通过人工灌流的方式，模拟心脏在体内的生理环境，观察和分析理化因素对心脏活动的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛙、任氏液、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、心得安、阿托品等。
2. 实验仪器：蛙心夹、蛙心套管、显微镜、二道生理记录仪、张力传感器、滴管、培养皿等。
四、实验步骤1. 蛙心提取：将蛙处死，剪开胸腔，取出心脏。
2. 蛙心插管：将蛙心夹夹住心脏尖部，用线固定在蛙板上，松紧以动脉、心房、心室拉直呈水平位为合适。
在主动脉分支下预埋一条棉线做一虚结备用。
将主动脉左支上端结扎，在近动脉球处剪一向心斜切口，左手用眼科镊提起切口缘，右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后走手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球。
3. 蛙心灌流：将蛙心套管与张力传感器相连，通过滴管向套管内加入任氏液，使心脏在灌流液中保持正常生理活动。
4. 观察和分析：观察心脏的活动情况，记录心脏收缩频率、幅度等指标。
分别向灌流液中加入不同浓度的KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、心得安、阿托品等，观察和分析理化因素对心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常心脏活动：在正常灌流液中，心脏保持节律性收缩，收缩频率约为60-80次/分钟，收缩幅度较大。
2. KCl溶液对心脏活动的影响：加入低浓度KCl溶液后，心脏收缩频率减慢，幅度减小；加入高浓度KCl溶液后，心脏出现纤颤，最终停止跳动。
3. CaCl2溶液对心脏活动的影响：加入低浓度CaCl2溶液后，心脏收缩频率加快，幅度增大；加入高浓度CaCl2溶液后，心脏出现纤颤，最终停止跳动。
机能学实验---离体蛙心灌流
碳酸氢钠
乳酸
九、结论
离体心脏的活动受环境理化因素的影响。
Thank you!
4.肾上腺素（Adr）
Adr
心肌细胞膜β1受体结合 Ca2＋ 与肌钙蛋白亲 和力↓，肌浆网摄 钙速度↑ 复极期肌浆Ca2 ＋ 浓 度降低速度↑ 舒张速度↑ 细胞膜对Ca2＋ 通透性↑
肌 浆 网 对 Ca2 ＋ 通透性↑
动作电位期间 Ca2＋内流性↑ 收缩力↑
4期自动除极 化速度↑
自律性↑ 心率↑
5. 乙酰胆碱 （Ach） ACh
3.蛙心插收缩时插入心室
A B
4.连接仪器记录蛙心搏动曲线
五、观察项目
（一）描记正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的程度 曲线疏密 —— 心率 曲线基线 —— 舒张的程度
（二）观察离子、药物和酸碱的影响
1. 换成无钙任氏液灌注，冲洗（下同） 2. 加入3%氯化钙溶液1～2滴 3. 加入1%氯化钾溶液1～2滴
六、实验结果
观察项目
1．无钙任氏液 2． 2%CaCl2 3． 1%KCl 4．Adr 5．Ach 6． 2.5%NaHCO3 7． 3%乳酸
心率
收缩程度
观察项目 无钙任氏液 3%CaCl2 1%KCl Adr
Ach 2.5%NaHCO3 3%乳酸
心率
↓ ↑ ↓ ↑ ↓ ↑ ↓
收缩幅度（收缩力）
心肌细胞膜M受体结合 细胞膜对K＋ 通透性增加
窦房结细胞4期K+ 外流增加、最大复 极电位增大 自律性降低 心率减慢 细 胞 膜 对 Ca2 ＋ 通透性下降 动作电位期间 Ca2＋内流减少 抑制钙通道
心肌收缩力降低
6. 2.5％NaHCO3 中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结合，心肌收缩力恢复。 7. 3%乳酸 H+与Ca2+竞争肌钙蛋白， Ca2+不能与肌钙蛋白结 合，心肌收缩力↓。
娃心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心脏生理学基本知识，提高实验操作技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取离体后，采用人工灌流的方法，模拟心脏在体内的血液供应，观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。
蛙心灌流实验中，常用的灌流液为任氏液，其中含有与心脏内环境相似的离子成分，如Na+、K+、Ca2+等。
改变灌流液中这些离子的浓度，可以观察到心脏活动的变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。
2. 实验方法：（1）将蟾蜍处死，剥皮，暴露心脏，用蛙心夹固定心脏。
（2）将心脏的动脉插管，连接灌流管，并调整灌流速度。
（3）用生理盐水冲洗灌流管，使灌流液充满管内。
（4）观察心脏在任氏液中的正常活动，记录心率、振幅等指标。
（5）分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度，观察心脏活动的变化，记录心率、振幅等指标。
（6）对实验结果进行分析和讨论。
四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动：心率适中，振幅适中，处于与内环境相似的任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张。
2. 改变灌流液中Na+浓度：当灌流液中Na+浓度降低时，心率减慢，振幅减小；当灌流液中Na+浓度升高时，心率加快，振幅增大。
3. 改变灌流液中K+浓度：当灌流液中K+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中K+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
4. 改变灌流液中Ca2+浓度：当灌流液中Ca2+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中Ca2+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
五、结论与展望1. 结论：通过本实验，我们掌握了离体蛙心灌流的方法，观察到理化因素对蛙心活动的影响，进一步了解了心脏生理学的基本知识。
2. 展望：本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。
在今后的实验中，我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响，如pH值、温度等，以深入了解心脏生理学的基本原理。
离体蛙心灌流-第四组
交大医学院：离体蛙心灌流设计实验第四组：【实验目的】1．学习离体蛙心灌流法。
2．观察内环境变化因素的相对恒定对维持心脏正常节律性活动的重要作用。
3．对递质、受体阻断剂的概念有初步的感性认识。
【实验原理】1.心肌具有自动节律性收缩的特点，离体蛙心在任氏液中仍能较长时间保持其生理特性（自动节律性、兴奋性、传导性、收缩性）。
2.心收缩力和心输出量是衡量心肌生理功能的重要影响指标。
采用离体蛙心灌流装置可以向任氏液中加Na+、K+、Ca2+、肾上腺素、乙酰胆碱等化学递质来学习和掌握影响心肌生理功能、心收缩力、心输出量的体液因素。
【实验动物】蟾蜍【实验器材和用品】PowerLab 8S主机，桥式放大器，蛙类手术器械，玻璃蛙心插管，铁支架，张力换能器，蛙心夹，任氏液，0.65%NaCl溶液，3%CaCl2溶液，1%KCL溶液，1:10000肾上腺素溶液，1:10000乙酰胆碱溶液，3%乳酸溶液，2.5%NaHCO3溶液。
【实验步骤】1.暴露心脏：损毁蟾蜍脑和脊髓，将其仰卧位固定在蛙板上，用镊子提起胸骨后端腹部的皮肤，用粗剪刀剪一小口，然后由切口将剪刀伸入皮下，向左右两侧锁骨外侧方向剪开皮肤，并向头端掀开皮肤。
用镊子提起胸骨后端腹肌，在腹肌上剪一小口，将手术剪伸入胸腔内，紧贴胸壁（以免损伤下面的心脏和血管），沿皮肤切口方向剪开肌肉，再用粗剪刀剪断左右鸟喙骨和锁骨，使创口呈一个倒三角形。
用眼科镊提起心包膜，并用眼科剪将心包膜剪开，暴露出心脏。
2.观察心脏的解剖：在腹面可以看到一个心室，其上方有两个心房。
心室右上角连着一个动脉干，动脉干根部膨大称为动脉圆锥，也称主动脉球。
动脉向上分成左右两支，用玻璃分针从动脉干背面穿过，将心脏翻向头侧。
在心脏背面两心房下端可看到颜色较紫红的膨大部分，为静脉窦。
静脉窦是两栖类动物心脏的起搏部位，它与下腔静脉相连。
静脉窦与心房的交界处称窦房沟，而心房与心室的交界处称房室沟3.心脏插管：用蛙心夹于心舒期夹住心尖，手提蛙心夹上连线将心脏轻轻提起，看清结构，准备插管。
蛙心灌注实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流实验的操作方法。
2. 观察不同理化因素对蛙心活动的影响。
3. 了解心肌细胞自律性、兴奋性、传导性和收缩性之间的关系。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学研究中常用的一种方法。
通过将蛙心取出并置于适宜的环境中，在一定时间内保持其节律性收缩和舒张。
通过改变灌流液的成分，观察其对心脏活动的影响，从而了解心肌细胞自律性、兴奋性、传导性和收缩性之间的关系。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹。
四、实验方法与步骤1. 取一只青蛙，双毁髓后背位置于蛙板上，按实验方法暴露心脏。
2. 仔细识别心脏周围的大血管，于左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
3. 将蛙心游离，插入蛙心夹，连接计算机采集系统和张力传感器。
4. 将蛙心置于任氏液中，观察心脏的节律性收缩和舒张。
5. 分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸替换任氏液，观察心脏活动的变化。
6. 记录不同灌流液对心脏活动的影响，包括心率、心收缩力和心舒张力等指标。
五、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中呈现正常的节律性收缩和舒张。
2. 当用0.65%NaCl溶液替换任氏液时，心脏跳动频率和幅度略微减小，说明细胞外液中缺乏Ca2+，导致心肌收缩力降低。
3. 当向灌流液中加入2%CaCl2溶液时，心脏跳动频率和幅度略微增大，心率加快，说明细胞外液浓度升高，动作电位2期Ca2+内流增加，心肌收缩力增强。
4. 当向灌流液中加入1%KCl溶液时，心脏跳动频率和幅度略微增大，心率加快，说明K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制，细胞外液中K+浓度升高，Ca2+内流减少，心肌的兴奋性降低。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告
实验目的，通过离体蛙心灌流实验，观察心脏在不同药物作用下的生理变化，
为心脏药理学研究提供实验数据。
实验材料与方法，取新鲜的蛙心，进行离体灌流实验。
首先，将蛙心置于离体
心脏灌流装置中，通过主动脉插管进行心脏灌流。
然后，分别加入不同药物溶液，如肾上腺素、乙酰胆碱等，观察心脏的生理变化。
实验过程中，记录心脏的心率、收缩力、舒张力等指标，并进行统计分析。
实验结果，在加入肾上腺素后，观察到蛙心的心率明显增加，心脏收缩力增强，舒张力减弱；而在加入乙酰胆碱后，心率明显减慢，心脏收缩力减弱，舒张力增强。
这些结果表明，肾上腺素具有增强心脏收缩力和加快心率的作用，而乙酰胆碱则具有减慢心率和减弱心脏收缩力的作用。
实验讨论，离体蛙心灌流实验是一种常用的心脏药理学研究方法，通过模拟体
内环境，观察心脏在不同药物作用下的生理变化。
本实验结果与心脏药理学理论相符，说明离体蛙心灌流实验是一种可靠的实验方法，能够为心脏药理学研究提供重要数据。
结论，通过离体蛙心灌流实验，我们观察到了心脏在不同药物作用下的生理变化，验证了心脏药理学理论。
这为心脏药物的研发和临床应用提供了重要参考，也为心脏疾病的治疗提供了新的思路和方法。
在今后的研究中，我们将进一步探索心脏药物的作用机制，寻找更多有效的心
脏药物，并将离体蛙心灌流实验应用于心脏药理学研究的更多领域，为心脏疾病的治疗和预防做出更大的贡献。
通过本次实验，我们对离体蛙心灌流实验有了更深入的了解，并对心脏药理学
研究有了更加清晰的认识。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。
离体蛙心灌流
离体蛙心灌流[实验原理]1．心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动。
本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境，观察心脏活动有何变化。
2．心肌细胞分类快反应细胞：心房肌，心室肌，浦肯野细胞：主要由快钠通道被激活，Na快速内流引发动作电位，去极速度快慢反应细胞：窦房结细胞，房室交界区细胞：主要由慢钙通道被激活，Ca内流引发动作电位，去极速度慢3．心肌细胞的生理特征：电生理特征：自律性，兴奋性，传导性机械生理特征：收缩性影响心肌细胞电生理因素心肌细胞兴奋－收缩耦联过程所需的Ca要从细胞外液转运，细胞兴奋时，膜上Ca通道开放，因此：细胞外液Ca浓度↑――细胞兴奋时内流Ca↑――心肌收缩力↑反之亦然４．1％KCl：即１３４ｍｍｏｌ/ L（正常：４ｍｍｏｌ／Ｌ）轻，中度高钾：细胞外K↑――Ｋ与Ｃａ在细胞膜上有竞争性抑制――Ｋ抑制细胞膜对Ｃa转运――进入细胞内Ca↓――心肌的兴奋收缩联过程减弱――心肌收缩力↓[K]↑――膜内外ｋ浓度梯度减小――静息电位绝对值减小――兴奋性↑[K]↑――细胞膜对k通透性增加――K通道失活V↓――自动去极化V↓――自律性↓[K]↑――细胞膜对k通透性增加――K外流增加――最大复极电位↑――自律性↓[K]↑――Ca内流受抑制――0期去极速度和幅度降低――传导性降低重度高钾：[K]↑↑――RP↓――Ｎａ通道失活――兴奋性丧失５．2％CaCl2：即１８０ｍｍｏｌ/L（正常：２ｍｍｏｌ／Ｌ）细胞膜外Ｎａ与Ｃａ有竞争性抑制细胞外液Ca浓度↑――细胞兴奋时内流Ca↑――心肌收缩力↑快反应细胞：高Ｃａ――Ｎａ内流抑制――０期去极化速度及幅度下降――传导性↓慢反应细胞：高Ｃａ――Ca易进入细胞，Ｃａ内流增加――０期去极化速度增加――传导性↑６．O. 65％NaCl：１１１ｍｍｏｌ／Ｌ细胞外Ca↓――2期内流Ca↓――胞浆Ca浓度↓――心肌收缩↓[Ｃａ]↓――Ｃａ内流减少――０期去极化速度减慢――传导性↓[Ca]↓――Ca不易进入细胞――4期自动除极的速度减慢――自律性↓7：肾上腺素正性变化肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合――心肌细胞和肌浆网膜Ca通透性↑――肌浆中Ca浓度增加――心肌收缩↑使K通道，Ｎａ通道，Ca通道都开放，------慢Ca通道-----8：乙酰胆碱负性变化乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合――心肌细胞膜K通道的通透性↑――促k外流――1：窦房结细胞复极时K外流↑――最大复极电位水平↑――自律性↓2：复极时K外流↑――AP 2,3期缩短――Ca进入细胞内↓――心肌收缩↓乙酰胆碱可直接抑制Ca通道――Ca内流↓――心肌收缩↓3．观察项目(1)记录心脏在仅有任氏液时的收缩曲线，观察心率及收缩幅度，作为正常对照。
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5. 第4次结扎：在左主动脉下穿线→在动脉 上剪一斜口→插入动脉蛙心套管动脉插管 （不要插入动脉球内） →结扎固定
6. 在所有结扎处外缘远离心脏端剪除周围血 管，将与蛙心套管静脉插管和动脉插管的离 体蛙心固定在铁架台上
第1次结扎：双结扎右主动脉
第2次结扎：结扎左右肺静脉、前腔静脉
第3次结扎：左\右肝静脉\后腔静脉
注意事项
每次换液时液面应保持一定的高度。 每次换液或滴加试剂时应打标记。 每个试剂瓶的滴管不能混淆。 心脏表面随时滴加任氏液。 待心跳恢复正常后进行下一项实验。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
来观察药物和电解质水平对心肌活动的影响。
离体蛙心循环回路
橡胶连接管
动脉插管 静脉插管
实验材料及仪器设备
蟾蜍 蛙用手术器械，蛙心套管，蛙心夹，张力 换能器，受滴-刺激两用电极 RM6240系统，任氏液，2%CaCl2 ，2%KCl， 0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱。
实验内容与操作步骤
录心搏曲线的变化。
实验项目
3.当心脏恢复正常时，向套管内加入2滴2%KCl溶液，
观察心搏变化频率和幅度，当曲线出现明显变化时，
立即更换任氏液。 4.当心脏恢复正常时，向套管内加入1滴0.01%肾上腺 素溶液，观察心搏变化频率和幅度，当曲线出现明 显变化时，立即更换任氏液。 5.当心脏恢复正常时，向套管内加入1滴0.01%乙酰胆 碱溶液，观察心搏变化频率和幅度，当曲线出现明 显变化时，立即更换任氏液。
实验五
蟾蜍离体心脏灌流
实验目的
学习离体蛙心灌流法
观察K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对
离体心脏活动的影响。
实验原理
心肌具有自动节律性、传导性和兴奋性。
离体和脱离神经支配的动物心脏,保持在适当的环境 中,在一定的时间内,仍然能够有节律性地产生兴奋 和收缩。
利用心肌细胞的这一特性,可用来制作离体心脏模型,
点击“实验”菜单，选择“蛙心灌流”， 系统进入信号记录状态。
仪器参数：通道，时间常数：直流；滤波 频率10Hz；灵敏度3g，采样频率400Hz，
扫描速度1s/div。
实验项目
1. 正 常 蛙 心 收 缩 曲 线 和 每 搏 心 输 出 量 记 滴 （最大收缩力、心率、心输出量）。 2.向套管的任氏液中加2%CaCl21滴，观察并记
第4次结扎：插管并结扎左主动脉
离体蛙心循环回路
橡胶连接管
动脉插管 静脉插管
实验步骤
7.用蛙心夹在心室舒张时夹住心尖约1mm， 用丝线将蛙心夹与张力换能器相连。
8.在动脉套管与静脉套管之间放置记滴电极，
记录滴数。
蛙心灌流装置安装
受滴信号线
通道1
受滴-刺激-两用电极
RM6240记录系统
实验要求
每一项实验记录出一段有代表性的曲线， 包括连续三部分: (1)正常对照 (2)加药后的反应 (3)更换灌流液后恢复至正常状态。
心收缩力
实验项目
心输出量
每搏输出 量（滴/ 搏）
最大 心率 记录滴 波谷 心输出 数（滴） 量（滴 收缩力 值（g） /分） （g）
1 2 3 4
正常曲线 2%CaCl2 更换任氏液 2%KCl
（一）离体蛙心灌流制作
1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，剪除心包膜和肝
系膜（不要损伤血管） 2.第1次结扎：双结扎右主动脉
3.第2次结扎：结扎左右肺静脉、前腔静脉（远离
静脉窦）
4.第3次结扎：在左右肝静脉和后腔静脉下
穿线→在右肝静脉（或左肝静脉、或后腔 静脉）上用眼科剪剪一斜口→用加有任氏 液的蛙心套管静脉插管插入剪口→结扎固 定（远离静脉窦）