实验4 离体蛙心灌流
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5. 第4次结扎:在左主动脉下穿线→在动脉 上剪一斜口→插入动脉蛙心套管动脉插管 (不要插入动脉球内) →结扎固定
6. 在所有结扎处外缘远离心脏端剪除周围血 管,将与蛙心套管静脉插管和动脉插管的离 体蛙心固定在铁架台上
第1次结扎:双结扎右主动脉
第2次结扎:结扎左右肺静脉、前腔静脉
第3次结扎:左\右肝静脉\后腔静脉
录心搏曲线的变化。
实验项目
3.当心脏恢复正常时,向套管内加入2滴2%KCl溶液,
观察心搏变化频率和幅度,当曲线出现明显变化时,
立即更换任氏液。 4.当心脏恢复正常时,向套管内加入1滴0.01%肾上腺 素溶液,观察心搏变化频率和幅度,当曲线出现明 显变化时,立即更换任氏液。 5.当心脏恢复正常时,向套管内加入1滴0.01%乙酰胆 碱溶液,观察心搏变化频率和幅度,当曲线出现明 显变化时,立即更换任氏液。
来观察药物和电解质水平对心肌活动的影响。
离体蛙心循环回路
橡胶连接管
动脉插管 静脉插管
实验材料及仪器设备
蟾蜍 蛙用手术器械,蛙心套管,蛙心夹,张力 换能器,受滴-刺激两用电极 RM6240系统,任氏液,2%CaCl2 ,2%KCl, 0.01%肾上腺素,0.01%乙酰胆碱。
实验内容与操作步骤
(一)离体蛙心灌流制作
1.破坏蟾蜍脑和脊髓,暴露心脏,剪除心包膜和肝
系膜(不要损伤血管) 2.第1次结扎:双结扎右主动脉
3.第2次结扎:结扎左右肺静脉、前腔静脉(远离
静脉窦)
4.第3次结扎:在左右肝静脉和后腔静脉下
穿线→在右肝静脉(或左肝静脉、或后腔 静脉)上用眼科剪剪一斜口→用加有任氏 液的蛙心套管静脉插管插入剪口→结扎固 定(远离静脉窦)
实验要求
每一项实验记录出一段有代表性的曲线, 包括连续三部分: (1)正常对照 (2)加药后的反应 (3)更换灌流液后恢复至正常状态。
心收缩力
实验项目
心输出量
每搏输出 量(滴/ 搏)
最大 心率 记录滴 波谷 心输出 数(滴) 量(滴 收缩力 值(g) /分) (g)
1 2 3 4
正常曲线 2%CaCl2 更换任氏液 2%KCl
实验五
蟾蜍离体心脏灌流
实验目的
学习离体蛙心灌流法
观察K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对
离体心脏活动的影响。
实验原理
心肌具有自动节律性、传导性和兴奋性。
离体和脱离神经支配的动物心脏,保持在适当的环境 中,在一定的时间内,仍然能够有节律性地产生兴奋 和收缩。
利用心肌细胞的这一特性,可用来制作离体心脏模型,
点击“实验”菜单,选择“蛙心灌流”, 系统进入信号记录状态。
仪器参数:通道,时间常数:直流;滤波 频率10Hz;灵敏度3g,采样频率400Hz,
扫描速度1s/div。
实验项目
1. 正 常 蛙 心 收 缩 曲 线 和 每 搏 心 输 出 量 记 滴 (最大收缩力、心率、心输出量)。 2.向套管的任氏液中加2%CaCl21滴,观察并记
注意事项
每次换液时液面应保持一定的高度。 每次换液或滴加试剂时应打标记。 每个试剂瓶的滴管不能混淆。 心脏表面随时滴加任氏液。 待心跳恢复正常后进行下一项实验。
第4次结扎:插管并结扎左主动脉
离体蛙心循环回路
橡胶连接管
动脉插管 静脉插管
实验步骤
7.用蛙心夹在心室舒张时夹住心尖约1mm, 用丝线将蛙心夹与张力换能器相连。
8.在动脉套管与静脉套管之间放置记滴电极,
记录滴数。
蛙心灌流装置安装பைடு நூலகம்
受滴信号线
通道1
受滴-刺激-两用电极
RM6240记录系统