离体蛙心灌流实验
离体蛙心灌流实验
离体蛙⼼灌流实验实验五离体蛙⼼灌流实验⼀实验⽬的1、了解蟾蜍离体⼼脏的灌流的⽅法。
2、观察细胞外液钾离⼦、钙离⼦浓度变化对⼼脏活动的影响。
⼆实验原理⼼脏离体后，如⽤⼈⼯灌流的⽅法，保持其新陈代谢的顺利进⾏，则⼼脏仍能有节律的⾃动收缩和舒张，并可维持较长的时间。
离体⼼脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起⼼脏活动的变化。
1、任⽒液：正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4和蒸馏⽔，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0.65%NaCl灌流：3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流5、1:10000 E 灌流6、1:10000 Ach灌流7、⼼得安β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作⽤。
8.、阿托品M受体阻断剂，抑制Ach减慢⼼率，加速房室传导，增加⼼房收缩⼒。
三实验器材微机⽣物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙⼼，任⽒液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，⼼得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。
四实验步骤1、标本制备（观看视频）2、仪器及标本的连接3、具体软件操作：1）离⼦试剂：任⽒液→0.65%NaCl溶液→任⽒液清洗→1%KCl溶液→任溶液→任⽒液清洗⽒液清洗→2%CaCl22）药物试剂：肾上腺素（E）→任⽒液清洗→⼼得安→任⽒液清洗→Ach，任⽒液清洗→阿托品→任⽒液清洗。
五实验结果表1 离体蛙⼼灌流数据记录六结果分析此实验说明⼼脏具有⾃律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体⼼脏静脉窦还能产⽣兴奋并传导到⼼房和⼼室，引起⼼脏有节律的兴奋和收缩。
体内细胞所直接⽣存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常⽣存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起⼼脏收缩的改变。
离体蛙心灌流实验
目的原理观察内环境理化因素相对稳定对维持心脏正常节律性活动的重要作用，了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调节意义。
实验对象与用品大蛙或蟾蜍。
斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架等(试剂见实验项目)。
方法步骤(一)实验准备操作对蛙行双刺毁，仰卧固定于蛙板上，用铁剪刀剪去胸壁，再用眼科剪小心地剪开心包膜，暴露心脏，识别心脏动脉球、静脉窦(背面)等结构(图17-1A、B、C)。
用蛙心夹夹住蛙心尖部，蛙心夹用线固定在蛙板上，松紧以动脉、心房、心室拉直呈水平位为合适。
于主动脉分支下预埋一条棉线做一虚结备用。
把主动脉左支上端结扎，在近动脉球处剪一向心斜切口(注意要剪破血管内膜，每次心缩时有血自切口涌出，但不要把血管剪断。
剪口位置视套管尖端长度与心脏大小而定)，左手用眼科镊提起切口缘，右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后走手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球；把蛙心夹上的连线从固定物上取下，提起心尖，使心室与动脉球约呈100°-200°的钝角，然后当心室缩紧时把套管平直往心室方向推进。
当感觉套管进入心室后再把心尖放平，随即将套管稍向心室推进，调整合适位置，可见套管内液面随心跳而升降。
即将已作虚结之丝线把血管和套管固定起来，余线则扎于套管的玻璃小钩上，以免心脏滑脱。
提起套管，剪断与心脏相连的血管和组织(注意勿损伤静脉窦及两心房)，摘出心脏。
用任氏液洗去心内外的余血后，注入新鲜任氏液备用。
可在套管的下1/3处结一线作为标志，每次换任氏液时使液面与此线相平。
接好二道生理仪和机械－电换能器(图17-2)选用适当参数，待记录。
(二)实验项目1.描记正常心跳曲线并分析其疏密、规律性、幅度、顶点及基线的含义。
2.温度的影响：把套管内换成4℃任氏液，同时作好标记，观察曲线变化，待效应明显后，即换入室温任氏液。
待曲线恢复正常后，再进行下一项目。
蛙心生理实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 探究心脏节律性活动的生理机制。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取出并置于人工灌流液中，使其在一定时间内保持节律性收缩。
实验中，通过改变灌流液的成分，可以观察不同理化因素对心脏活动的影响，从而了解心脏生理活动的调节机制。
蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：青蛙2. 实验器材：蛙心夹、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、套管夹。
3. 生理信号采集系统、计算机。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心：取一只青蛙，双毁髓后背位置于蛙板上，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管，在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
2. 插管：用斯氏蛙心插管法，将蛙心夹插入心脏，并通过蛙心夹上的管道与灌流系统连接。
3. 灌流：将蛙心置于任氏液中，开始灌流，调节灌流速度和压力，使心脏保持节律性收缩。
4. 观察与记录：观察心脏的收缩、舒张情况，记录心率和心搏曲线。
5. 改变灌流液成分：分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换任氏液，观察心脏活动的变化。
6. 分析与讨论：分析不同灌流液对心脏活动的影响，讨论心脏生理活动的调节机制。
五、实验结果与分析1. 在正常任氏液中，心脏保持节律性收缩，心率为60-100次/分钟。
蛙心灌流-机能实验
4. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后， 加入2％CaCl21~2滴，观察心搏曲线变化。
2 % CaCl2
5. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入1:10000 肾上腺素1~2滴，观察心搏曲线变化。
1:10,000 肾上腺素
6. 用任氏液换洗，待心搏曲线恢复正常后，加 入 1:100000 乙酰胆碱1~2滴，观察心搏曲线变化。
实验七
理化物质对离体灌流蛙心的影响
一、实验目的
1. 学习离体蛙心的灌流方法 （离体实验的优势？） 2. 用离体蛙心灌流的方法观察：
① 离子浓度(Na+、K+、Ca2+) ② 酸、碱度 ③肾上腺素（Adr）乙酰胆碱（ACh）
对心脏活动的影响
二、实验原理
正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋， 心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化 环境。
正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的强弱 曲线疏密 —— 心率 曲线规律性 —— 心跳的节律性 曲线基线 —— 舒张的程度
2. 完全等量置换0.65%NaCl溶液， 观察心搏曲线变化。
0.65 % NaCl
3. 用任氏液换洗三次，待心搏曲线恢复正常后， 加入1%KCl 1~2滴，观察心搏曲线变化。
心室 心房
白线 静脉窦
静脉窦
4. 将心脏翻回原位置，结扎右侧主 动脉干, 左侧主动脉干远心端结扎并剪口。
剪口
5. 蛙心插管向左后、向下旋转，于心缩期插入心室内。
泵血
6. 将预置线的活结扎死,并固定于插管壁的小钩 上,于各结扎线远端将心脏连同静脉窦一起剪下。
小钩
扎线
泵血
换液
7. 用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，将心脏机 械活动通过换能器转换为电信号输入到电脑 。
实验四离体蛙心灌流
2、插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹 住少许心尖部肌肉(不要夹过多，以免因夹破心室而 漏液)。再将蛙心夹上的系线绕过一个滑枪与张力传 感器相连。注：勿便灌流液滴到传感器上。调节记录 仪上的收缩曲线的幅度适中。 3、实验观察（图11） (1)记录正常心搏曲线。 (2)改用0.65% NaCl溶液灌流，并作好加药标记，观 察心搏变化。待曲线出现明显变化时，立即吸去套管 中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清 洗2－3次，待心搏恢复正常，注意：换液时切勿碰套 管，以免影响描记曲线的基线，同时保持灌流液面一 致(以下同)。
(3)向套管内加1－2滴2% CaCl2溶液（较细的套管需 少加）溶液，作好加药记号，观察心搏曲线的频率及 振幅变化。当曲线出现明显变化时，应立即吸去套管 中的灌流液，并做好冲洗标记，迅速用新鲜任氏液清 洗2－3次，待心搏恢复正常。 (4)同法向套管内加入1－2滴1% KCl溶液，记录心搏 曲线的变化。当心搏曲线变化时，同法更换灌流液， 待心搏恢复正常公 (5)同法记录套管中加入1－2滴肾上腺素溶液(1/10000) 后心搏曲线的变化。 (7)同法记录套管中加入1－2滴乙酰胆碱溶液(1/10000) 后心搏曲线的变化。
【注意事项】 1、制备离体心脏标本时，勿伤及静脉窦。 2、蛙心夹应在心室舒张期一次性夹住心尖，避免因夹伤心脏而导致漏液。 3、每一观察项目都应先描记一段正常曲线，然后再加药并记录其效应。 加药时应在心跳曲线上予以标记，以便观察分析。 4、各种滴管应分开，不可混用。 5、在实验过程中，插管内灌流液面高度应保持恒定；仪器的各种参数一 经调好，应不再变动。 6、给药后若效果不明显，可再适量滴加，并密切注意药物剂量添加后的 实验结果。给药量必须适度，加药出现变化后，就应立即更换任氏液， 否则会造成不可挽回的后果，尤其是K＋稍有过量，即可导致难以恢复的 心脏停跳。 7、标本制备好后，若心脏功能状态不好（不搏动），可向插管内滴加 1～2滴2%CaCl2或1：10000肾上腺素，以促进（起动）心脏搏动。在实 验程序安排上也可考虑促进和抑制心脏搏动的药物交换使用。 8、谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内而损坏其电子元件。
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。
2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。
5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。
离体蛙心灌流
离体蛙心灌流一、实验目的1、学习离体蛙心灌流的方法；2、观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的影响。
3、观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
二、动物与器材动物：蟾蜍器材：斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、0.65%NaCl溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液三、方法与步骤1、离体蛙心的制备：双毁髓→左主动脉结扎→左右两主动脉下方活结备用→剪口，插管（管内盛任氏液与肝素）→结扎备用线（套管＋左右主动脉）→剪断动脉→结扎并剪断静脉。
2、固定套管并用任氏液换洗血液；进入RM6240系统。
3、观察并记录正常心搏曲线；4、向套管内分别加入以下溶液（0.65%NaCl溶液2d 、5%NaCl溶液2d、1%KCl溶液1-2d 、2%CaCl2溶液1d 、1:5000肾上腺素溶液1-2d 、1:10000乙酰胆碱溶液1-2d ），观察并记录曲线变化。
四、注意事项制备蛙心标本时，勿伤静脉窦；各溶液作用一旦出现，应立即用新鲜任氏液换洗，以免心肌受损，而且待心跳恢复正常后方能进行下一步实验；蛙心插管内液面应保持恒定；每次更换或滴加溶液必须做标记；五、实验结果：实验项目实验现象0.65%NaCl 加入后心搏曲线振幅变小5%NaCl 心搏曲线振幅下降，达正常曲线振幅一半以下（图二）更换溶液后恢复，（图三）但恢复后曲线振幅减小。
2%CaCl2 心搏曲线振幅首先变大（图三）然后出现异常的停止搏动。
1%KCl 后期心肌停止搏动于舒张期（图四）肾上腺素心搏曲线幅度明显增大（图五）更换溶液后恢复正常水平乙酰胆碱心搏曲线振幅急剧下降，最后达基线以下0搏动（实验图另附）由于实验操作上及设备仪器等存在误差，记录曲线有一定偏差。
且由于只记录了部分曲线，蟾蜍心脏有时又会出现异常停搏现象，所以所记录结果未能完整反映出不同溶液对心搏曲线影响情况。
实验4-4 蛙类离体心脏灌流
实验4-4 蛙类离体心脏灌流引言离体心脏灌流实验是生理学中常用的方法之一。
不同种类的动物可以通过体表切口或开放胸骨来取出其心脏进行灌流。
而离体心脏灌流实验可以帮助研究者了解心脏的解剖学和生理学特征。
本实验将讲解如何进行蛙类离体心脏灌流实验。
实验器材和试剂1.蛙类（建议使用大型蛙类）。
2.离体心脏灌流系统，包括：- 离体心脏灌流装置（含灌流缓冲液、温度控制器等）。
- 稳压泵。
3.灌流缓冲液，常用的为Tyrode's盐溶液。
实验步骤1. 先将离体心脏灌流系统检查一遍，保证各项设备均运转正常。
2. 杀死一只蛙类，立即进行解剖，取出心脏，并将其迅速转移到灌流装置中。
在移植心脏时应注意不损伤其血管和肌肉组织。
在灌流系统中，除了心脏，不能有其他生物组织残留。
3. 确认灌流系统中的灌流缓冲液温度为20~25℃。
在开始灌流之前，要先排除灌流管路中的空气。
4. 打开灌流泵，根据所选择的灌流缓冲液flow rate控制注入速度，一般建议在3~8ml/min。
确保满足心脏需求的氧气和营养物质可以通过灌流液输送到心脏内部。
5. 注入灌流缓冲液的同时，对心脏进行观察，确认心脏速率、收缩波幅度等生理特征。
6. 加入适当的药物来研究心脏对药物的反应性。
此时应读取每个添加药物后的心脏特征和响应（如速率、波幅等）。
7. 在实验结束时，切断灌流管路和心脏连接，灌流系统中的灌流液应该被排除并清洁。
结果和分析离体心脏灌流实验可以观察心脏的生理学特征和对不同药物的反应，这有助于研究者了解心脏的生理学机制。
在进行本实验时，需要注意不仅仅是心脏的特征，还要关注灌流流量和药物导致的生理反应。
在实验的过程中，如果发现心脏节律不齐或收缩波幅度明显下降，这可能是灌流流量不足造成的。
而添加不同的药物，可以帮助研究者了解心脏的调控机制，同时也可以评估药物的疗效。
需要注意的是，不同种类的动物其心脏组织的特征也是不同的，因此需要根据具体的实验目的选择合适的动物进行实验。
离体蛙心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体器官（蛙心）灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验，通过人工灌流的方法，使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。
实验原理如下：1. 蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素，可以观察蛙心活动的变化，了解理化因素对心脏活动的影响。
三、实验对象与用品1. 实验对象：蟾蜍2. 实验用品：斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备：将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪开胸壁，暴露心脏。
用蛙心夹夹住蛙心尖部，固定在蛙板上。
2. 动脉插管：在主动脉分支下预埋一条棉线，结扎主动脉左支，剪一向心斜切口，插入斯氏蛙心套管，送入动脉球。
3. 连接实验装置：将蛙心套管与二道仪相连，记录蛙心活动。
4. 灌流液准备：配制正常灌流液（任氏液）和实验灌流液（分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等）。
5. 实验操作：a. 将蛙心置于正常灌流液中，观察蛙心活动，记录心率、收缩幅度等指标。
b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中，观察蛙心活动的变化，记录心率、收缩幅度等指标。
c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下，蛙心以正常节律收缩和舒张，心率适中，收缩幅度适中。
2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后，蛙心收缩幅度稍微减小，收缩力稍微减弱。
分析原因：相当于细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。
机能学实验---离体蛙心灌流
碳酸氢钠
乳酸
九、结论
离体心脏的活动受环境理化因素的影响。
Thank you!
4.肾上腺素（Adr）
Adr
心肌细胞膜β1受体结合 Ca2＋ 与肌钙蛋白亲 和力↓，肌浆网摄 钙速度↑ 复极期肌浆Ca2 ＋ 浓 度降低速度↑ 舒张速度↑ 细胞膜对Ca2＋ 通透性↑
肌 浆 网 对 Ca2 ＋ 通透性↑
动作电位期间 Ca2＋内流性↑ 收缩力↑
4期自动除极 化速度↑
自律性↑ 心率↑
5. 乙酰胆碱 （Ach） ACh
3.蛙心插收缩时插入心室
A B
4.连接仪器记录蛙心搏动曲线
五、观察项目
（一）描记正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的程度 曲线疏密 —— 心率 曲线基线 —— 舒张的程度
（二）观察离子、药物和酸碱的影响
1. 换成无钙任氏液灌注，冲洗（下同） 2. 加入3%氯化钙溶液1～2滴 3. 加入1%氯化钾溶液1～2滴
六、实验结果
观察项目
1．无钙任氏液 2． 2%CaCl2 3． 1%KCl 4．Adr 5．Ach 6． 2.5%NaHCO3 7． 3%乳酸
心率
收缩程度
观察项目 无钙任氏液 3%CaCl2 1%KCl Adr
Ach 2.5%NaHCO3 3%乳酸
心率
↓ ↑ ↓ ↑ ↓ ↑ ↓
收缩幅度（收缩力）
心肌细胞膜M受体结合 细胞膜对K＋ 通透性增加
窦房结细胞4期K+ 外流增加、最大复 极电位增大 自律性降低 心率减慢 细 胞 膜 对 Ca2 ＋ 通透性下降 动作电位期间 Ca2＋内流减少 抑制钙通道
心肌收缩力降低
6. 2.5％NaHCO3 中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结合，心肌收缩力恢复。 7. 3%乳酸 H+与Ca2+竞争肌钙蛋白， Ca2+不能与肌钙蛋白结 合，心肌收缩力↓。
离体蛙心灌流
实验一离体蛙心灌流（八木氏）一、目的在维持离体心脏循环的条件下，观察不同的阳离子（Na+、K+、Ca2+）；酸、碱及肾上腺素，乙酰胆碱等神经递质对心脏活动的影响，同时记录心输出量与心率的变化。
二、原理心脏离体后，如用人工灌流法保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍能有节律地自动收缩和舒张，且可维持较长的时间。
离体心脏活动所需的灌流液。
应同动物内环境一致改变灌流液的成分，则可引起心脏活动的改变。
三、实验用品蛙（蟾蜍）、蛙心夹、蛙板、蛙心套管、常规手术器械（蛙）、试管夹、双凹夹、铁支架、小烧杯、滴管、张力换能器。
D-95生理记录系统、任氏液、5%NaCl、l%KCl、1%CaCl2、0.01%肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、3%乳酸、2.5%NaHCO3、滴管、棉球、棉线等。
四、方法与步骤（一）离体蛙心的制备1、暴露心脏取青蛙（或蟾蜍）一只，用蛙针从枕骨大孔插入破坏延髓后，仰卧固定于蛙板上，依次剪开胸前区皮肤和肌肉。
开胸暴露心脏。
然后用镊子提起心包膜，再用虹膜剪刀将其剪破，使心脏完全暴露出来。
2、蛙心插管用蛙心夹在心舒张期夹住心室尖。
将心脏轻轻提起，辨认与心脏相连的诸血管。
出入蛙心脏的血管共有九条（左主动脉、右主动脉、左、右前腔静脉、后腔静脉，左、右肺静脉，左、右肝静脉）然后将蛙心夹之连线用胶泥（或胶布）固定在蛙板上，以便操作。
用虹膜剪将连在左肝静脉上的心包膜剪去（注意：不要损伤静脉窦）。
用镊子将已浸湿任氏液的一条线穿过左肝静脉的下方，用另一条线穿过左主动脉下面，尽量向远端结扎，并结扎除左主动脉及左肝静脉外的全部血管。
左主动脉做输出管（动脉插管）。
左肝静脉做输入管（静脉管）插管。
首先用小镊子提起左肝静脉，用虹膜剪刀朝向心端剪一“V”型切口，把盛有任氏液的蛙心静脉从此插入，注意勿损伤静脉窦。
用线结扎固定。
冲洗心脏，洗净余血。
再翻正心脏，在左主动脉上离动脉圆锥1厘米处，朝向心端剪一“V”形切口，将蛙心动脉插管插入，用线结扎固定。
离体蛙心灌流实习课件
CONTENTS
• 实验原理 • 实验材料与器具 • 实验步骤与方法 • 实验结果分析 • 实验注意事项与安全防护
01
实验原理
蛙心灌流实和生理学研究中的经典 实验，用于研究心脏的生 理功能和药物作用机制。
历史背景
该实验方法自19世纪中叶 以来一直被广泛应用于学
术研究和教学。
实验目的
通过离体蛙心灌流实验， 观察心脏的收缩活动和药 物对心脏的影响，了解心 脏的生理功能和药物作用
机制。
实验的基本原理
蛙心离体
将蛙类的心脏取出并置于适宜的灌流液中 ，保持其生理活性。
灌流系统
建立有效的灌流系统，确保心脏得到足够 的氧气和营养物质，同时排除代谢废物。
观察指标
通过心电图机或心脏张力记录仪等设备， 观察和记录心脏的收缩活动。
实验安全注意事项
01 7
实验操作前应熟悉实验步骤和
操作规程，确保实验过程的安
全性。
7
02
7
实验过程中应佩戴适当的防护
用具，如实验服、手套、护目
7
镜等，以防止意外伤害。
03
避免使用未经消毒的器具直接 接触实验对象，以免引起感染 。
04
在操作过程中，应保持安静， 避免干扰和影响实验结果。
实验废弃物处理
记录仪
用于记录蛙心活动 数据。
试剂与药品
肾上腺素
用于增强心肌收缩力，提高心 率。
CaCl2
用于提高灌流液中的Ca2+浓 度，增强心肌收缩力。
任氏液
常用的灌流液，维持蛙心离体 状态下的生理功能。
乙酰胆碱
用于降低心肌收缩力，减缓心 率。
MgSO4
用于降低灌流液中的Mg2+浓 度，增强心肌收缩力。
娃心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心脏生理学基本知识，提高实验操作技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取离体后，采用人工灌流的方法，模拟心脏在体内的血液供应，观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。
蛙心灌流实验中，常用的灌流液为任氏液，其中含有与心脏内环境相似的离子成分，如Na+、K+、Ca2+等。
改变灌流液中这些离子的浓度，可以观察到心脏活动的变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。
2. 实验方法：（1）将蟾蜍处死，剥皮，暴露心脏，用蛙心夹固定心脏。
（2）将心脏的动脉插管，连接灌流管，并调整灌流速度。
（3）用生理盐水冲洗灌流管，使灌流液充满管内。
（4）观察心脏在任氏液中的正常活动，记录心率、振幅等指标。
（5）分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度，观察心脏活动的变化，记录心率、振幅等指标。
（6）对实验结果进行分析和讨论。
四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动：心率适中，振幅适中，处于与内环境相似的任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张。
2. 改变灌流液中Na+浓度：当灌流液中Na+浓度降低时，心率减慢，振幅减小；当灌流液中Na+浓度升高时，心率加快，振幅增大。
3. 改变灌流液中K+浓度：当灌流液中K+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中K+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
4. 改变灌流液中Ca2+浓度：当灌流液中Ca2+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中Ca2+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
五、结论与展望1. 结论：通过本实验，我们掌握了离体蛙心灌流的方法，观察到理化因素对蛙心活动的影响，进一步了解了心脏生理学的基本知识。
2. 展望：本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。
在今后的实验中，我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响，如pH值、温度等，以深入了解心脏生理学的基本原理。
实验六 蛙类离体心脏灌流
五、注意事项
1. 向套管中加入药物之前，套管中应保留 少量的任氏液； 2．吸去的药液和清洗的任氏液应滴入废液 缸，切记不能污染新鲜的任氏液和其他 药液； 3. 实验记录要完整，即有头有尾，要记得 作标记。
六、结果和目标
观察并记录各灌流成分对心搏的影响。
七、思考题 1． 此实验说明心肌有哪些生理特性？ 2. 以本实验为例说明内环境相对恒定 的重要意义。
四、实验内容 （步骤）
看示范和录像） （一）离体蛙心的制备 （看示范和录像） （二）暴露心脏 （三）连接实验装置 （四）记录心搏曲线
（五）向套管内加2-6滴5%NaCl溶液，加液时 按一下“enter”键作标记记录的曲线出现变化 时，立即吸套管中的灌流液（作好冲洗标记）， 用新鲜任氏液清洗2-3次，待心搏恢复正常。 （2）向套管内加入1滴2%Cacl2溶液观察心搏 曲线的变化（方法同上）。 （3）向套管中加1-2滴1%Kcl溶液观察心转曲 线的变化（方法同上）。 （4）向套管中加入1-2液1:100,000肾上腺素 溶液，观察心搏曲线的变化（方法同上）。 （5）向套管中加入1-2滴1:1000,000乙酰胆碱 溶液，观察心搏曲线变化（方法同上）。
动物生理实验模块
实验六
蛙类离体心脏灌流
一、实验目的 1#43;、Ca2+、肾 上腺素、乙酰胆碱等对离体心 脏活动的影响。
二.原理
心肌具有自动节律性，可用人工灌流的方 法研究心脏活动的体液调节。
三、试剂与器材
蛙、微机、生物信号处理系统、解剖针、 手术剪、眼科剪、尖头手术镊、蛙心套 管、圆头手术镊、蛙板、张力换能器、 蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、长胶头 滴管、5%NaCl溶液、2%CaCl溶液， 1%Kcl溶液、1:100,000肾上腺素溶液、 1:1000,000乙酰胆碱溶液、烧杯
蛙类离体心脏灌流实验
蛙类离体心脏灌流实验蛙类离体心脏灌流实验一、实验目的1、探究不同溶液对心肌特性的影响2、掌握离体心脏灌流的技术二、实验原理（一）两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环，心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后，心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
（二）心肌对细胞外离子浓度和体液因素敏感（三）钾、钙和钠离子对心肌特性的影响由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关，因此，细胞外液中离子浓度升升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
（1）钾离子的影响K＋与静息电位的形成有关。
细胞外液K＋浓度[K＋]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾：[K＋]0轻度或中度增高时，膜内、外K＋浓度差减小，静息电位绝对值减小，与阈电位差距缩短，因此，兴奋性增高。
[K＋]0显著升高时，由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV 左右），Na＋通道失活，因而兴奋性降低甚至消失。
另外，还使0期去极化速度和幅度减小，传导性降低，导致兴奋传导减慢，甚至传导阻滞。
此外，[K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性，加速K＋外流，动作电位平台期缩短，因此，不应期缩短。
此外由于平台期缩短，减少了Ca2＋的内流，加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用，导致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。
[Ca2＋]0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2＋]0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。
Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。
[Ca2＋]0降低时，所引起的变化与高钙时相反。
（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
只有当[Na＋]0明显增高时，膜内外钠的浓度差梯度增大，因此，快反应细胞Na＋内流加快，0期去极速度和幅度均增加，导致传导性和自律性增高。
离体蛙心灌注实验的原理和步骤
离体蛙⼼灌注实验的原理和步骤试题研究：最近的模拟试题中，有离体蛙⼼灌注实验试题，许多学⽣对该实验试题理解上有⼀定的难度。
查找了资料《丁⾹通》，摘录该实验有关的内容。
【实验原理】动物的离体⼼脏，⽤理化特性类似于其⾎浆的代体液灌流时，在⼀定的时间内，仍然保持有节律的舒张活动。
改变灌流液的理化特性，这种节律的舒缩活动也随之发⽣改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持⼼脏正常节律活动的必要条件。
【器材与药品】⼆道⽣理记录仪、肌张⼒换能器、蛙⼼陶罐、蛙⼼夹、常⽤蛙⼿术器械、铁架台、双凹夹、滴管、⼩烧杯、氯化钠溶液（1%NaCl）、2%氯化钙溶液、氯化钾溶液（1%KCl）、肾上腺素（1/10000Ad）、⼄酰胆碱（1/100000Ach）、任⽒液（Ri/lger’s solution新鲜配制）等。
【实验步骤】（1）取⼀只蟾蜍或蛙，⽤探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区⽪肤，剪去胸⾻，暴露⼼脏。
⽤眼科镊提起⼼包膜，再⽤眼科剪在⼼脏收缩时将其剪破，使⼼脏完全暴露出来。
（2）识别⼼脏的各个部分，包括⼼房、⼼室、静脉窦等，并观察⼼跳。
（3）插蛙⼼插管，制备离体蛙⼼。
先在左右主动脉下⽅穿⼀线，并打⼀松结留作固定插管⽤。
再在左主动脉下穿⼀线结扎。
⽤⼿提起结扎线，⽤眼科剪在左侧主动脉距分叉3mm处向⼼脏剪⼀斜⼝，右⼿将盛有少量任⽒液的蛙⼼插管由此⼝插⼊，先进⼊动脉圆锥，然后在⼼室收缩时，向前略向左推动蛙⼼插管，使之经主动脉瓣插⼊⼼室腔内（注意：为了使蛙⼼插管顺利插⼊⼼室，应使⼼室与动脉圆锥成⼀条直线）。
进⼊⼼室的标志是随着⼼室搏动，均有⾎液喷⼊插管，插管的液⾯随着⼼搏⽽升降。
结扎插管并将结扎线固定于插管侧⾯的⼩钩上，以防⽌标本滑脱。
注意在蛙⼼插管插⼊⼼室后，⽤吸管及时吸出管内的⾎液，更换新鲜任⽒液。
提起插管，剪断主动脉左、右侧分⽀，轻轻提起插管和⼼脏，在静脉窦下⽅绕⼀线，将左右肺静脉及前后腔静脉⼀起结扎（切勿损伤静脉窦），在结扎线下⽅剪去所有牵连的组织，将⼼脏摘出。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告
实验目的，通过离体蛙心灌流实验，观察心脏在不同药物作用下的生理变化，
为心脏药理学研究提供实验数据。
实验材料与方法，取新鲜的蛙心，进行离体灌流实验。
首先，将蛙心置于离体
心脏灌流装置中，通过主动脉插管进行心脏灌流。
然后，分别加入不同药物溶液，如肾上腺素、乙酰胆碱等，观察心脏的生理变化。
实验过程中，记录心脏的心率、收缩力、舒张力等指标，并进行统计分析。
实验结果，在加入肾上腺素后，观察到蛙心的心率明显增加，心脏收缩力增强，舒张力减弱；而在加入乙酰胆碱后，心率明显减慢，心脏收缩力减弱，舒张力增强。
这些结果表明，肾上腺素具有增强心脏收缩力和加快心率的作用，而乙酰胆碱则具有减慢心率和减弱心脏收缩力的作用。
实验讨论，离体蛙心灌流实验是一种常用的心脏药理学研究方法，通过模拟体
内环境，观察心脏在不同药物作用下的生理变化。
本实验结果与心脏药理学理论相符，说明离体蛙心灌流实验是一种可靠的实验方法，能够为心脏药理学研究提供重要数据。
结论，通过离体蛙心灌流实验，我们观察到了心脏在不同药物作用下的生理变化，验证了心脏药理学理论。
这为心脏药物的研发和临床应用提供了重要参考，也为心脏疾病的治疗提供了新的思路和方法。
在今后的研究中，我们将进一步探索心脏药物的作用机制，寻找更多有效的心
脏药物，并将离体蛙心灌流实验应用于心脏药理学研究的更多领域，为心脏疾病的治疗和预防做出更大的贡献。
通过本次实验，我们对离体蛙心灌流实验有了更深入的了解，并对心脏药理学
研究有了更加清晰的认识。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。
蛙心离题实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法和步骤。
2. 观察并分析理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验数据记录和分析的方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是一种常用的生理学实验方法，通过将蛙心取出体外，在人工灌流条件下观察和分析心脏活动的规律和影响因素。
实验过程中，通过改变灌流液的成分，可以观察不同理化因素对心脏活动的影响，从而了解心肌细胞在生理和病理条件下的功能状态。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：手术显微镜、手术刀、剪刀、镊子、解剖剪、生理盐水、任氏液、注射器、量筒、试管、酒精灯、加热器、温度计。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将青蛙麻醉，暴露心脏，并用剪刀剪去心脏周围的组织，使心脏暴露出来。
2. 插管：在心脏左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
将动脉插管插入心脏，固定在支架上。
3. 灌流：将蛙心放入培养皿中，加入适量的任氏液，用加热器维持恒温。
开始灌流，观察心脏活动。
4. 改变灌流液成分：在灌流过程中，依次改变灌流液的成分，如0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸等，观察心脏活动的变化。
5. 数据记录与分析：记录心脏活动的频率、幅度、节律等数据，并进行比较分析。
五、实验结果与分析1. 在正常灌流条件下，蛙心呈现节律性收缩和舒张，频率和幅度适中。
2. 当灌流液改为0.65%NaCl时，心脏活动频率和幅度稍微减小，说明细胞外液Ca2+浓度降低，心肌收缩力减弱。
3. 当灌流液加入2%CaCl2时，心脏活动频率和幅度稍微加大，说明细胞外液Ca2+浓度升高，心肌收缩力增强。
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实验五离体蛙心灌流实验
一实验目的
1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。
2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。
二实验原理
心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。
离体心脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。
1、任氏液：正常对照
含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4
和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0.65%NaCl灌流：
3、2%CaCl2灌流
4、 1%KCl灌流
5、1:10000 E 灌流
6、1:10000 Ach灌流
7、心得安
β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。
8.、阿托品
M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。
三实验器材
微机生物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙心，任氏液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，心得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。
四实验步骤
1、标本制备（观看视频）
2、仪器及标本的连接
3、具体软件操作：
1）离子试剂：任氏液→0.65%NaCl溶液→任氏液清洗→1%KCl溶液→任
溶液→任氏液清洗
氏液清洗→2%CaCl
2
2）药物试剂：肾上腺素（E）→任氏液清洗→心得安→任氏液清洗→Ach，任氏液清洗→阿托品→任氏液清洗。
五实验结果
图1 离体蛙心灌流
表1 离体蛙心灌流数据记录
六结果分析
此实验说明心脏具有自律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体心脏静脉窦还能产生兴奋并传导到心房和心室，引起心脏有节律的兴奋和收缩。
体内细胞所直接生存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起心脏收缩的改变。