卫生微生物月-食品微生物检验方法的国内外研究进展
国内外食品微生物快速检测技术应用进展
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食品微生物检测技术和方法研究进展
食品微生物检测技术和方法研究进展摘要：近年来，经济快速发展，社会不断进步，人们物质生活水平日渐提升，食品安全问题受到了广泛的关注。
由微生物造成的各种食品安全问题频发，应提高对预防和控制食源性疾病的重视，进一步完善微生物检验方法。
笔者在食品微生物检验内容、影响因素以及常用检验方法分析基础上，提出一些有效的控制策略。
关键词：食品微生物；检测技术；方法研究引言随着我国社会经济的不断发展，人们所能接触到的食品种类也在不断增多，这也使得食品产业逐渐成为我国众多产业当中最为重要的部分。
但在食品产业不断发展的过程当中食品安全事件的频发，导致食品安全成为当今社会当中最为基本的民生问题。
在这样一种大背景下，进行食物微生物检验是最妥当的解决办法，并通过控制食物微生物检验的质量来达到提高食品安全的目的。
1微生物检测技术在食品安全检测中的重要性微生物检测是食品安全保障中的重要环节，同时也是判断食品是否具备食用价值的根本性指标依据。
目前主要检测对象包括蛋制品、奶制品、罐头、淀粉制品以及食品调味品等。
其大多是人们生活中经常食用或使用的食品及配料，一旦其存在微生物污染，则会对人体健康产生较大的不利影响。
因此在相关食品检测中科学运用微生物检测技术是至关重要的，其有助于检验食品微生物类型与数量，筛查出不符合质量安全标准的食品，对食品行业的健康、持续发展具有积极意义。
2食品微生物检测技术和方法研究进展2.1快速酶促反应检测微生物在食品“提供”的生长环境中的繁殖速度非常快。
微生物在生长过程中会有大量酶合成，检测人员可以利用快速酶促反应检测其中的微生物，通过应用一些化学试剂，可以显出酶在化学反应中发生的一些颜色的变化，因此可以通过观察颜色变化分析微生物的数量与危害程度，这是一种相对而言较直观、快捷的微生物检验方法。
2.2电阻抗法微生物在生长繁殖的过程中会将培养皿中的营养物质分解，这样会增强培养基的导电性，导致其电阻抗性的降低，由此推断，根据培养基培养前后的电阻抗的变化可以测定微生物的生长繁殖情况，该方法已经普遍应用于食品微生物检测，不过很少有关于生鲜乳的微生物检测应用电阻抗法的研究。
食品微生物检验检测方法及进展
食品微生物检验检测方法及进展摘要：近年来，在食品领域由于食源性微生物没有得到有效控制导致食品安全问题形势严峻，食品直接关系到人们的身体健康，因此需要不断加强食品微生物检测以控制和提升检测质量，促进食品安全工作有序开展。
这也意味着在检测活动开展过程中，需要加大对最新检测技术的应用力度，提升检测活动的有效性。
关键词：食品微生物；检验检测；进展引言近年来，食品行业的发展越来越迅速，市场上涌现出多样化的食品，但随之而来的食品安全问题不容忽视。
微生物污染在食品安全问题中占有较大的比重，通过食品微生物检验工作，能确保食品中无病菌或病菌数量和种类处于安全范围内，微生物检验结果是衡量食品安全性的重要指标，因此提高食品微生物检验工作质量迫在眉睫[1]。
应加强对食品微生物检验工作的管理，从技术、标准、监管方面入手，不断提高食品微生物检验工作的规范性与合理性，从源头上避免不合格食品流入市场，切实有效地解决食品安全问题。
1.食品微生物检测内容法律法规中明确规定的检测内容主要包括食品中的重金属含量、病原性微生物含量、农药残留以及其他对消费者身体健康可能会造成威胁的残留物；食品添加剂的品种以及用量；食品是否符合国家行业质量标准；食品是否按照国家要求做好说明书以及外包装上各类信息的标识；特殊功能食品是否符合国家监管要求；食品在生产和销售等各个环节卫生标准是否符合国家要求[1]。
食品中的食源性致病菌含量是食品微生物检测的主要内容之一。
食源性致病菌是指在食物中含有的一种进入人体就能寄生和繁殖的微生物，当其在人体大量繁殖后，能引起人体出现各类疾病，正是由于食源性致病菌的危害性极大，且大多通过口腔途径进入人体，因此食源性致病菌是食品微生物检测的重点。
此类致病菌主要存在于禽畜蛋奶以及肉制品中，一旦食源性致病菌进入人体，就会导致人体出现呕吐、腹泻等症状，严重时还会危及人们生命安全。
2.食品微生物检验的现存问题食品检验机构良莠不齐，检验队伍配备不齐；目前，我国对食品安全问题高度重视，由国家市场监督管理总局负责食品安全检验工作，其中食品微生物检验工作主要由卫健委和市场监管局负责。
快速检测食品中微生物方法的进展研讨
快速检测食品中微生物方法的进展研讨快速检测食品中微生物的方法在食品行业中起着重要的作用，能够帮助食品生产商和监管部门及时发现食品中存在的微生物污染问题，保障食品安全。
近年来，快速检测方法的研究不断取得进展，本文将对这方面的研究进展进行探讨。
其次，免疫学方法也在快速检测食品中微生物方面得到了广泛应用。
酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫荧光法(IFA)和免疫层析法(IC)等免疫学方法可以通过检测微生物的抗原或抗体来进行快速检测。
同时，近年来还发展了一些新的免疫学方法，如免疫磁珠分离、荧光微球免疫分析法(FMIA)和表面等离子共振(SPR)等技术，提高了快速检测的准确性和性能。
此外，基于生物传感器的方法也在快速检测食品中微生物方面展现了巨大潜力。
生物传感器能够将生物分子与传感器技术有效结合，实现对微生物的快速检测。
例如，使用DNA或RNA探针修饰的电化学传感器、光学传感器和表面等离子共振传感器等，可以通过监测微生物与探针的特异性相互作用来实现快速检测。
此外，还可以利用纳米技术的进展，如纳米颗粒和纳米结构修饰的传感器，提高生物传感器的灵敏度和选择性。
最后，微流控芯片技术也在快速检测食品中微生物方面展现了潜力。
微流控芯片具有微型化、集成化和高通量等特点，可以在很短的时间内完成样品的处理、分离和检测，大大提高了检测的速度和效率。
例如，可以使用微流控芯片对微生物进行富集、分离和特异性检测，通过微流控芯片上的微通道和微阀门实现快速检测。
综上所述，快速检测食品中微生物的方法在食品安全监测中扮演着重要角色，能够及时发现食品中存在的微生物污染问题。
未来，随着分子生物学、免疫学、生物传感器和微流控芯片等技术的持续发展，相信快速检测食品中微生物的方法将得到进一步改进和优化，为食品安全提供更加可靠的保障。
关于食品微生物快速检测技术的研究进展
关于食品微生物快速检测技术的研究进展近年来，国内外的食品安全事件层出不穷，不仅严重影响了市场秩序，而且还给公众带来了无处不在的恐慌。
因此，建立食品病原微生物的快速检测方法对于食品安全及人类健康有着重要的意义。
本文笔者来谈一谈就对食品微生物快速检测技术的研究进展。
标签：食品微生物;快速检测;食品安全;研究进展随着食品工业的迅速发展和人们生活水平的不斷提高，食品安全问题越来越受到人们的重视，而食品的污染大多数是因为病原微生物引起的，这就迫切要求建立和研究食品病原微生物快速检测方法以加强对食品卫生安全的监测。
近年来，由于新技术新方法在食品微生物检验领域得到了广泛应用，有效的提高了检测效率和检验速度。
下面介绍几种食品微生物快速检测方法。
一、免疫学技术1、免疫荧光技术：免疫荧光技术（Immunofluorescence techIIique就是通常所说的荧光抗体技术，在该抗体或者抗原上加人含有荧光的物质，该物质不会影响机体的特性，通过显微镜下的观察，就会找到荧光标记的抗原或抗体，实现监督和鉴别的功能。
1）从待检样本中分离出抗体或者抗原，然后将样本跟抗体结合，让固相载体与其发生反应。
2）利用洗涤的方式将抗原抗体从固相载体中分离出来，以一定的比例让固相载体跟待检样本混合。
添加一些酶，与其发生反应，产生可以辨别的有色物质，根据有色物质的深浅来分析和判定待见样本中的微生物状况等。
该检测方式耗费时间短，灵敏度较高。
2、酶联免疫吸附技术：酶联免疫吸附技术中涵盖了荧光技术跟免疫技术，主要是通过抗体和抗原受固相载体的吸附作用而产生的免疫酶染色，如果底物出现颜色，定量的有色产物就会很容易从待检样本中脱离出来。
该方式特点为应用分为广、便捷操作、灵敏度高、定量分析、检测的速度快，且耗费较少的成本费用。
3、免疫层析技术：免疫层系技术可以有效的实现对金黄色葡萄糖球菌、霍乱杆菌、沙门氏菌、布氏杆菌和大肠杆菌的检测和鉴定，检测速度快、准确，方便快捷，无污染。
[研究进展,检测技术,微生物]食品微生物快速检测技术研究进展
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食品微生物快速检测技术研究进展摘要：近些年，由食品安全引发的问题已经引起了全社会的关注。
食品微生物作为评价食品安全的一项重要指标，越来越受到人们的重视。
相对于传统的食品微生物检测技术，快速检测技术对提高检测效率和应对突发事件具有重大意义，越来越受到检验人员的重视。
当前主流的快速检测技术有PCR技术、酶联免疫吸附技术、ATP生物发光技术、LAMP、阻抗法等，本文对以上几种快检技术进行分析总结和展望。
关键词：食品安全食品微生物快速检测伴随着科技的发展和人们对食品安全的重视，作为评价食品安全重要指标之一的食品微生物，其快速检测技术备受人们的关注。
国标中关于食品微生物的检验方法，不仅步骤繁琐，且耗时耗力，尤其面对突发食品安全事件时，检测结果往往滞后于监管需要。
因此，食品微生物快速检测技术备受人们的欢迎。
本文将对近些年来微生物快速检测技术，如PCR技术、酶联免疫吸附技术、ATP生物发光技术、LAMP、阻抗法等的研究进展进行分析、总结和展望。
1 PCR技术PCR（Polymerase Chain Reaction）技术，聚合酶链式反应，用于扩增放大特定DNA片段的分子生物学技术，是在体外的一种特殊DNA复制。
PCR技术能在短时间内将特定的基因片段扩增数百万倍。
由于其具有简便、快速、敏感性高和特异性强的优点，适用于时间紧的检测工作和突发食品安全事件。
PCR技术在不断的发展，多重PCR、荧光定量PCR、实时定量PCR等就是PCR技术的衍生[1]。
PCR技术耗材多为一次性，配套的仪器设备较为昂贵。
若能进一步降低使用成本，必定能扩大使用范围。
2 酶联免疫吸附技术酶联免疫吸附（ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到固相载体上，对免疫酶进行染色，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。
酶联免疫吸附技术集免疫荧光法和放射免疫测定法优点于一身，灵敏度高、特异性强、操作判断简单、实验设备要求简单[2]。
3 ATP生物发光技术ATP是活的生物体中的能量货币，普遍存在于所有活的生物体中。
微生物检测技术在食品检测中的应用研究进展 文献综述
微生物检测技术在食品检测中的应用研究进展摘要：食品问题关系国计民生，食品的安全越来越受到人们关注。
在食品工业迅速发展的今天，建立食品微生物快速检测方法，对食品质量进行检测、监控尤为重要。
近几年各国的许多机构和学者都很重视食品微生物检测技术和方法的研究，本文对此进行了详细的介绍。
关键词：检测技术微生物食品安全Progress of the research on the application of Microbial Detection Technology in food testingAbstract:Food is the people's livelihood. Food safety has received more and more attention. At present, the food industry is developing rapidly. Therefore, developing an rapid testing method of Microorganism in the food is especially important in detection and monitoring of food quality. In recente years, many institutes and researchers from different country attach great importance to the research of food microbiological testing techniques and methods. This article will give a detailed introduction to this below. Key words:the testing techniques Microorganism food safety1前言随着时代的不断发展，人们生活水平不断提高，食品安全问题也越来越受到人们的关注，近几年来，三聚氰氨、苏丹红、漂白剂等等一系列的食品安全问题使人们对食品产生了强烈的不信任感，因此，食品微生物检测技术的应用也越来越广泛，同时，食源性微生物的检测技术也趋向迅捷、准确、大通量的方向发展。
食品微生物检测技术的研究与改进
食品微生物检测技术的研究与改进食品安全一直是人们关注的重要问题之一，生活中食品的安全性直接影响到人们的健康。
食品微生物检测技术的研究与改进，对于确保食品品质和消费者健康具有重要意义。
本文将探讨食品微生物检测技术的研究进展和改进方向。
第一部分：食品微生物检测技术的研究现状目前，常见的食品微生物检测技术包括传统培养法、分子生物学方法和光子学检测技术等。
传统培养法是一种经典的检测方法，它通过将食品样品培养于富含营养的培养基上，观察和计数细菌的生长情况来检测微生物的存在。
然而，传统培养法需耗费较长的时间，并且对某些难以培养的细菌无法有效检测。
分子生物学方法是一种新型的微生物检测技术，其基于核酸的特异性识别和扩增原理。
常见的分子生物学方法包括聚合酶链反应（PCR）、实时荧光定量PCR、核酸杂交等。
这些方法具有高灵敏度、高特异性和快速的优点，可以有效检测微生物污染。
然而，分子生物学方法的设备成本较高，操作技术要求较高，因此在实际应用中仍存在一定的局限性。
光子学检测技术是近年来快速发展的新兴食品微生物检测方法之一。
这种方法利用光的散射、透射或荧光等性质来检测微生物的存在。
光子学检测技术具有快速、无需培养、无需标记等优点，可用于实时在线检测。
然而，光子学检测技术在复杂食品样品中的应用仍存在一定的挑战，需要进一步完善。
第二部分：食品微生物检测技术的改进方向为了改进食品微生物检测技术，提高检测速度和准确性，研究人员不断探索新的方法和技术。
首先，应该进一步发展基于核酸技术的微生物检测方法。
在现有的PCR技术基础上，可以引入新的扩增技术和检测标记物，提高检测的特异性和灵敏度。
例如，引入等温扩增方法，如环介导等温扩增（LAMP），可以在简单的温度条件下进行高效的核酸扩增，减少仪器的复杂性和成本。
其次，应该加强纳米技术在食品微生物检测中的应用。
纳米技术可以将微观世界的特性应用于食品微生物检测中，具有更高的敏感性和选择性。
例如，可以利用纳米粒子来标记微生物，并利用其光学、电化学或磁性特性进行快速检测。
食品微生物检测技术和进展
食品微生物检测技术和进展摘要：随着食品工业的迅速发展 ,建立食品病原微生物的快速检测方法对于食品质量控制和监管及人们健康有着重要的意义。
本文综述了食品中微生物检测技术,详细阐述了最新发展起来的生物传感器技术的原理、应用及发展前景。
关键词：食品 ,微生物,检测技术 ,进展在食品生产、加工、储存、运输和销售的各个环节中,微生物的大量繁殖均会引起食品腐败变质、导致食源性感染或食物中毒,随着近年来环境污染的不断加剧,病原微生物对人类所造成的威胁越来越大。
尤其是近年来世界各国相继发生的重大食品安全事件,给食品安全敲响了警钟。
发展简易、快速的食品微生物检验方法对于食品质量控制和监管非常重要。
近年来随着分子生物学、微电子技术及生物技术的发展,食品微生物快速检验技术也有了很大的进展。
本文从培养生理特征、免疫学特征、遗传分子特征及生物传感器等4个方面对近年来食品微生物快速检测方法进展情况进行综述。
检测技术1 色谱法和荧光分析法细菌生长过程中会体现出一定的物理特性,因此可以通过检测微生物自身生长代谢物来鉴定细菌。
Newark微生物鉴定系统就是用气相色谱法检测一种饱和脂肪酸 (微生物代谢物 )的含量 ,达到检测鉴定微生物的目的。
微型自动荧光酶标分析法M I N I V I D I US 是利用酶联荧光免疫分析技术,通过抗原 -抗体特异反应 ,分离出目标菌 ,由荧光强弱判断样品的阳性或阴性。
细菌直接计数法通常以激光作为发光源 ,经过聚焦整形后的光束垂直照射在样品流上 ,被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。
光散射信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的强度则代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度 ,从而计算微生物的数量。
荧光分析法只能检测真核生物 ,与细胞大小、DNA的数量有关 ,而这些又和培养条件以及微生物来源有关。
色谱法和荧光分析法的检测成本较高。
2 PCR法聚合酶联反应 ( PCR)是通过基因扩增检测微生物的存在的方法。
食品病原微生物快速检测技术研究进展
食品病原微生物快速检测技术研究进展摘要：引起传染病、食品相关疾病、其他危害健康的病原微生物种类繁多，为了满足现代社会快速准确诊断的需求，我们对于病原微生物的检测进行了开发与革新。
在医疗、疾病预防控制、食品控制等领域的病原微生物我们不能掉以轻心，在病原微生物检测领域广泛使用的测定方法主要有直接涂片镜检、分离培养以及生物化学试验法、免疫学方法中的酶依赖免疫抑制技术（ELISA）法，免疫磁珠分离技术等聚合酶链反应等等，每种检查方法都有各自的优点和缺点及适用范围、应用领域，本文简要对上述检测技术做一个阐述。
关键词：食品卫生微生物检测技术微生物是经过多次放大观察的微生物组，其中可能引起人、动物、植物等疾病的微生物被称为病原微生物，如细菌、支原体、立克次体、螺旋体、菌类等，这类微生物可引起伤寒、痢疾、破伤风、麻疹、脊髓灰质炎、肝炎、艾滋等重大疾病，甚至导致霍乱、高致病性禽流感等传染病，这非常严重，可以引起全球范围内的大流行。
食品和饮用水中可导致疾病的微生物污染，使得食品安全和饮用水安全成为世界性的话题，对病原微生物的检测也提出了更高的要求。
随着医学微生物学检查技术的不断发展，已经在医学部门广泛普及，为了识别病原菌，用于疾病预防控制部门的传染病病原菌检查和食品安全检查，就有必要加强检测技术的研究。
一、病原微生物最常规的检测方式微生物实验室的通常检查方法包括涂镜检查、分离培养、生物化学试验、血清学试验等。
各种传染病、食品相关疾病、医院和其他地区交叉感染病原体的基本方法是：对经过适当处理的样品进行采样和显微镜检查，在适当的情况下将其接种分离和培育成适当的培养基。
1.1对标本进行涂抹镜检适当处理的样品如排泄物的显微镜检查适合具有其形态和颜色特性的病原微生物。
如结核分枝菌、葡萄球菌或白喉杆菌引起的传染病的例子，显微镜中可以看到耐酸性的克阳性葡萄球菌和角膜细菌、有异染性的粒子等。
大便中的志贺菌等也可以通过荧光显微镜快速进行检测，它们只需要普通光学显微镜和革兰染色液进行检测，在医学、疾病控制、食品安全等初级生物学实验室中经常运用此方式。
食品微生物检测技术的进展及研究
食品微生物检测技术的进展及研究摘要：食品微生物是指与食品有关的微生物的统称，包括有食源性病原微生物、生产型食品微生物、食物变质。
由于食品微生物对人身体健康的重要影响，采用先进的检测技术对其进行准确、有效的检测也显得尤为重要。
本文简要分析了食品微生物检测技术的进展，以供参考。
关键词：食品微生物；检测技术；进展1目前我国食品微生物检测技术分析目前我国的食品微生物检测的重点项目包括大肠菌群、细菌总数以及致病细菌等等，这些指标都与人体的健康有着密切的关联，并且这些检测指标能够有效的反映食品生产企业的卫生管理水平，同时也能够准确的反映待检食品样品的卫生状况，是衡量食品健康安全质量的重要标准。
在通常的食品微生物检测过程中，对于上述指标，只要其中一项指标不符合相关的要求，则待检食品样品就可以被认定为不合格。
这些指标之中，大肠菌群指标是检测的重点，因为大肠菌群能够准确的反映出食品样品是否存在着变质现象。
目前我国食品微生物检测手段主要包括微生物生理生化试验、血清学分型鉴定、微生物形态观察、噬菌体分型、试管凝集试验以及急性病毒试验等等，通过这些手段能够准确的反映食品样品中的大肠菌群数量、致病菌种类和数量以及细菌总数量等等。
检测过程对于试验手段有着很高的要求，目前所采用的实验手段主要有三糖帖试验、硝酸盐还原试验、淀粉水解试验、Kovac试验、糖醇解试验、明胶试验等等。
目前食品微生物检测中所使用的试验手段虽然具有很高的准确性，但是相对比较的传统，而且操作不论是在繁琐程度还是在耗时方面都有着一定的劣势。
2食品微生物检测技术2.1 遗传学检测技术2.1.1 PCR检测技术PCR检测技术，即聚合酶链反应，是一种体外扩增DNA的检测方法，能够在短时间内，让某个微量DNA片断特异性快速扩增，最多可超过百万倍。
PCR检测技术，把模板DNA、Taq酶、镁离子、引物等物质进行有效的混合，并放入到PCR微型管内，在PCR编程调控仪作用下完成检测，其具有操作简便、检测迅速、特异性高等应用优势，可通过扩增DNA，以判断是否存在某类微生物[1]。
食品微生物快速检测方法研究进展
食品微生物快速检测方法的研究进展[摘要]本文从食品安全与卫生的角度出发，介绍了分子生物学方法中的核酸探针检测法、基因芯片检测法、pcr技术检测法的检测原理及优缺点、在食品微生物检测中的应用。
[关键词]食品微生物快速检测分子生物学中图分类号：ts207.4 文献标识码：a 文章编号：1009-914x （2013）07-0257-01随着世界食品开发、生产、销售的迅速发展与人们生活水平的不断提高，研究和建立食品微生物快速检测方法以加强对食品卫生安全的监测越来越受到各国科学家的重视，其关键是及时、准确地检测出食品中的微生物。
传统的检测方法准确性、灵敏性均较高，但有涉及的实验较多、操作繁琐、效率低等缺点。
近年来，微生物的快速检测和自动化研究进展声速，主要包括微生物学、分子化学、生物化学、生物物理学、免疫学和血清学等方面及其它们的结合应用。
本文主要介绍分子生物学方法中的核酸探针检测法、基因芯片检测法和pcr技术检测法分子生物学方法随着微生物学、生物化学和分子生物化学的飞速发展，对微生物的鉴定已不再局限于对它的外部形态结构及生理特性等一般检验上，而是从分子生物学水平上研究生物大分子，特别是核酸结构及其组成部分。
在此基础上建立的众多检测技术中，核酸探针和聚合酶链反应，以其敏感、特异、简便、快速的特点成为世人瞩目的生物技术革命的新产物，已逐步应用于信源性病原菌的检测。
1.核酸探针法细胞核酸dna和rna是唯一一类可以传递遗传信息的大分子，而每一种病原体都有独特的核酸片段，核酸探针是带有将已知核苷酸dna或rna片段用同位素或其它方法标记的基因特异片段，它主要利用碱基配对原理，使互补的2条核酸单链形成双链。
根据核酸探针中核苷酸成分的不同，可将其分为dna探针或rna 探针；根据选用基因的不同又可分为两种，一种探针能同微生物中全部dna分子中的一部分发生反应，它对某些菌属、菌种、菌株有特异性，另一种探针只能限制性同微生物中某一基因组dna发生杂交反应，它对某种微生物中的一种菌株或仅对微生物中某一菌属有特异性。
食品病原微生物快速检测技术研究进展
食品病原微生物快速检测技术研究进展摘要：随着环境污染的不断加剧，病原微生物对人类造成的威胁也越来越大。
近年来，国内外由病原微生物引起的食源性疾病事件频频发生，引起了社会各界的广泛关注。
在传统检测方法的基础上，目前已经改进开发了一些快速的检测工艺和技术，微生物检测技术已逐渐由传统的培养水平向更高水准的水平迈进。
微生物快速检测技术具有快速、经济、操作简单、适用广泛等诸多优点，显现出良好的商业应用前景。
关键词：食品安全；病原微生物；快速检测前言食品微生物是指与食品有关的微生物的统称，包括有食源性病原微生物、生产型食品微生物、食物变质。
由于食品微生物对人身体健康的重要影响，采用先进的检测技术对其进行准确、有效的检测也显得尤为重要。
1 食品中病原微生物概述病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，又称病原体。
病原体中，以细菌和病毒的危害最大。
病原微生物指朊毒体、寄生虫（原虫、蠕虫、医学昆虫）、真菌、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒。
病原微生物依附在食物上的过程中，短时间内无法通过肉眼观察出来。
在传统的病原微生物检测过程中，一般通过使用增菌培养基增加目的菌的数量，或使用选择性培养基达到获得单个纯化微生物的目的。
整个检测过程繁琐，需要耗费大量的人力物力，而且检测周期长、灵敏度低，难以满足国内外对食品安全检测的要求。
目前，国内外许多相关机构和学者都致力研究快速检测技术和方法，已改进开发了一些快速的检测工艺与技术，微生物检测技术已逐渐由传统的培养水平向更高水准的水平迈进。
2 传统微生物检验技术传统病原微生物的检查是以染色、培养和生化鉴定等为主，这些方法测试结果比较可靠，特别是微生物的分离培养，。
在当前形势下，该方法仍然是很多微生物病原体检测的"金标准"。
然而，细菌在生长繁殖时需要耗费不少的时间，这使得检测周期一直不能降低；与此同时，很多病原体的培养还会与营养需求、抗生素的使用以及病原体含量多少等因素相关。
食品中的微生物检验方法及研究进展
（１ 限制性长度多态性分析 （Ｆ Ｐ ； １） Ｒ Ｌ ） （２ 用于 Ｒ Ａ病 毒检测 的核酸扩增技术。 １） Ｎ
１ Ｐ Ｒ技术用于检测 的主要步骤 ． Ｃ ３
（） １运用化学手段对 目标 ＤＮ Ａ进行提取。 （） ２ 设计并合成引物， 引物设计或合 成的好坏直接 决定 Ｐ Ｒ扩增 的 Ｃ 成效 。
分。在此基础上建立的众 多检测技术中， 核酸探针和聚合酶链反应 ， 以其 用传统 的方法检测食 品中微生物要分离 出所有 的微 生物 敏感 、 特异 、 简便、 快速 的特 点成 为世人瞩 目的生物技术革命 的新产物 ， 种类也有很多， 可能很难用传统 的方 法检 测 已逐步应用于信源性病原菌的检测。本文主要对食 品中微生物的快速检 很 困难 。特别是在检测食 品中 的弱势菌时 ， 出来 ， 特别是有些微 生物很难培养 ， 用 Ｐ Ｒ技术检 测这些微生物可 以 而 Ｃ 测方法进展情况进行综述 ， 现将几种 方法概述如下 。 避免这些 问题， 因此， 利用 Ｐ Ｒ技术能够 比较准确地检测食品中微 生物。 Ｃ １ 聚 合酶链 反应 法（ Ｃ Ｐ Ｒ方法 ） 实施定量 Ｐ ＲＣ技术在食 品检测中应用越来越 多， 通过加入 荧光 Ｐ Ｒ是一种体外快速扩增特定基 因或 Ｄ Ａ序列的方法，又称 为基 近来年 ， Ｃ Ｎ 基 团， 对标准 曲线和模版进行定量分析， 从而准确得到检验结果 。 因的体外扩增法 。应用该方法可使极微量的特定 Ｄ Ａ片段在 几小时内 Ｎ 迅速扩增至百万倍 ， 因而一经问世便在短短的数 年 内就得 到了迅速 发展 ２ 基 因芯 片检 测法 生物芯 片是 ２ ０世纪 ８ ０年代末在 生命科学领 域 中迅速 发展起来 的 和实际应用， 并在原有基础 上结合 各种生化分子生物学技术衍 生出了许 项高新技术 ， 它主要是指通过微加工技术和微 电子技术在 固格 体芯片 多改 良技术。这些技术显示 出了巨大的潜力， 发挥着越来越大 的作用， 也
食品微生物检验技术研究进展
第 6 卷 第 5 期2020 年 10 月生物化工Biological Chemical EngineeringVol.6 No.5Oct. 2020食品微生物检验技术研究进展高翔，崔亚宁（陕西省食品药品监督检验研究院，陕西西安 710065）摘要：近年来，随着科技的不断进步，微生物检验技术也随之发展，免疫检测技术、可视化基因芯片技术、荧光标记技术、微滴数字PCR技术、代谢学检测技术等新技术更是层出不穷。
这些新技术的研发有效推动了食品微生物检验技术朝着便捷、高效、灵敏和精准的方向发展。
本文主要从利用免疫技术检测微生物含量、可视化基因芯片技术、荧光标记噬菌体技术、微滴数字PCR 技术、代谢学检测技术等方面对食品微生物检验技术的研究进展进行综述。
关键词：食品；微生物检验；研究进展中图分类号：TS207.4 文献标志码：AResearch Progress of Food Microbiological in Spection TechnologyGao Xiang, Cui Ya-ning(Shaanxi Provincial Institute for Food and Drug Control, Shaanxi Xi'an 710065)Abstract: In recent years, with the continuous progress of science and technology, microbial detection technology also develops, immune detection technology, visual gene chip technology, fluorescent labeling technology, droplet digital PCR technology, metabolic detection technology and other new technologies are emerging in an endless stream. The research and development of these new technologies effectively promote the development of food microbiological testing technology in the direction of convenience, efficiency, sensitivity and accuracy. In this paper, the research progress of food microbiological testing technology was reviewed.Key words: Food; Microbiological testing; Research progress随着社会各界对食品卫生的高度关注，研究食品微生物检验技术已成为必然趋势。
食品微生物检测技术的研究进展
食品微生物检测技术的研究进展作者：吴莹来源：《中国食品》2021年第21期现如今，随着社会大众生活质量与水平的不断提升，食品安全问题越来越受到重视，尤其是微生物污染问题，因为其普遍性、严重性得到了社会大众的广泛关注，因此，微生物检测技术成为行业研究的重点。
本文主要通过阐述近些年来几种常用食品微生物检验技术，为相关检验人员提供参考，方便他们更好地选择合适的检测技术，为社会大众的生命健康安全保驾护航。
一、生化检测技术在微生物检测中的应用在对食品中病原菌进行检测时，通常情况下会利用生化技术来进行最终的确认。
现如今已经生产出很多比较微型的生化试剂盒，以此来尽可能地节省样品的分析时间与投入成本。
除了生化试剂盒，还有机构进行了细菌生化检测仪器的开发，利用这些仪器能够检测出细菌的具体种类。
二、免疫技术在微生物检测中的应用免疫技术中比较常用的方法有免疫扩散法、免疫沉淀法等等。
相关领域的科学研究者们通常使用的都是电化学发光免疫学技术，通过与生物素等技术结合在一起，可以在较短的时间内取得比较显著的效果。
另外，这种方法下生产出来的检测试剂盒，也可以检测出一些病原菌。
尽管免疫检测方法有很多的优势，但是在应用的过程中还有很多问题，有很多地方都需要改善，比如灵敏度比较低、假阳性较多。
三、代谢检测技术在微生物检测中的应用1.微热量计检测技术。
微热量计检测技术主要就是通过测定细菌在生产过程中热量出现的变化，从而对细菌进行检测。
微生物在实际生长的过程中会产生热量，可以利用相应的仪器来测量具体的热量数据，并将其存储在计算机中，通过信号数字模拟界面在纪录器上绘制对应的热曲线图。
根据具体的实验所得的热曲线图对细菌进行鉴别，从而能够更好地抑制细菌的生长。
2.放射测量检测技术。
这种技术主要是根据细菌在生长过程中代谢的碳水化合物的基本原理，将待检测的细菌样本放入碳水化合物，或者是盐类等分子中进行检测。
细菌在生长的过程中，这些底物会被利用，并且释放出相应的碳水化合物。
食品中微生物快速检测方法研究进展
食品中微生物快速检测方法研究进展摘要:本文介绍了近年来新发展的食品中微生物快速检测及其自动化技术,主要包括分子生物学方法、免疫检测技术、快速测试片法和基因芯片技术并对各自优点和缺点进行了比较。
关键词:食品微生物检测;分子生物学方法;免疫检测技术;快速测试片法;基因芯片技术多年以来,对食品微生物的检测,通常采用琼脂平板培养法,这种方法既费时费力又繁杂。
快速检测及其自动化则是通过综合引用微生物学、化学、生物化学、生物物理学、免疫学以及血清学试验技术对微生物进行分离、检测、鉴定和计数,与传统方法比较,更快、更方便、更灵敏。
本文主要介绍分子生物学方法、免疫检测技术、快速测试片法和基因芯片技术。
1分子生物学方法1.1核酸探针法细胞核酸DNA和RNA是唯一一类可以传递遗传信息的大分子,利用其可作为检测的标靶。
标靶通常是一个特异性的核酸序列,它可以通过补体核酸分子作为探针来检出。
探针需要附加适当的标记,如放射性同位素、酶或者发光的标识物。
现在比较热门的是以核酸杂交为基础的第二代技术—比色计。
这种方法依赖于核糖体RNA(tRNA)发育过程中储存的核酸成分进行检测,使得无辐射检测成为可能,同时又保持了与放射性同位素方法相当或者更高的灵敏度。
但是该方法每检测一种菌就需要制备一种探针,而且尚未建立所有菌种的探针,所以还有待进一步发展。
1.2聚合酶链反应法(PCR方法)PCR检测技术是利用耐热DNA聚合酶的作用,通过变性-延伸-复性的循环操作,在体外将DNA模板迅速扩增数百万倍后,再通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增DNA产物的荧光条带,以确定微生物的特定种类的技术。
用此方法已经对乳酸菌、双歧杆菌以及啤酒中淀粉酵母和啤酒酵母、水体中大肠杆菌和大肠菌群等进行了精确的检测和鉴定。
该方法可以快速、灵敏的检测样品中是否存在某些细菌或致病菌,尤其是人工无法培养的细菌,但它仅限于核酸序列已知的微生物的鉴定,并且不能区分活细胞和死细胞,定量能力较差。
食品微生物检测技术和方法研究进展
食品微生物检测技术和方法研究进展作者：秦俊莲徐宁宁来源：《食品安全导刊》2021年第11期摘要：随着我国经济发展和社会进步，食品安全质量已经成为当今备受关注的社会问题之一。
食品微生物检测是食品安全与质量评价的重要技术手段之一，本文对食品微生物检测的方法进行了概述，包括传统检测方法、改进后的培养检测法、代谢技术法、生物传感器法、免疫学技术法、分子生物学方法等，以期为食品微生物监测提供参考。
关键词：食品安全;食品微生物;检测技术;方法Study on Technology and Methods of Food Microbial DetectionQin Junlian1，2， XU Ningning2（1.GDZC Foods and Cosmetics Safety Test Center Co.， Ltd.， Zhongshan 528437， China;2.Institute of Analysis， Guangdong Academy of Sciences （China National Analytical Center，Guangzhou）， Guangzhou 510070， China）Abstract： With the development of economy and society， food safety has become an important issue in the current social development process. Food microbial detection is one of the important technical means of food hygiene and safety evaluation. In this paper， we focus on the technology and methods of food microbial detection， including conventional detective method，improved culture detective method， metabolism technical method， biosensor method，immunology technical method， molecular biological method， in order to make reference for the food microorganism monitoring.Keywords： food safety; food microorganisms; detection; methods隨着国际食品经济和贸易的发展，食品安全问题受到社会的广泛关注。
食品微生物检验方法和技术研究进展
食品微生物检验方法和技术研究进展
刘英语;程爱迪;吴酉芝;彭飞
【期刊名称】《农产品加工》
【年(卷),期】2022()24
【摘要】伴随着社会持续改善和经济快速发展的影响,人民生活日益改善,食品安全检测基准也需逐渐提高。
食品安全是食品中的不稳定因素,在世界范围内发生了各种各样的食品安全事故,因此食品安全问题十分令人担忧。
近年来,国际卫生机构一直致力于解决食品中的微生物污染问题。
食品微生物检测已成为食品安全监测的主要手段。
鉴于以往的诊断程序已经不能满足当前食品安全的要求,其存在的问题有实验条件不满足、检验标准不统一等,食品微生物检测技术需要根据食品类型、微生物种类和仪器技术发展等不断地重建和改进,以达到预期标准。
首先,从食品微生物检验技术研究现状出发,简述食品微生物检测的定义及内容,进而归类食品微生物检测的技术及判断发展趋势,最后做出结论。
【总页数】5页(P63-66)
【作者】刘英语;程爱迪;吴酉芝;彭飞
【作者单位】上海中侨职业技术大学食品药品学院;南昌大学食品学院;华南理工大学食品科学与工程学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.3
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食品微生物检验技术的国内外研究进展陆杰明摘要：近30年来，随着国际食品经济和贸易的发展，全球性食品安全问题备受关注，故对食品微生物的检验技术越来越重视。
本文介绍了近几年来国内外对食品微生物的检验技术，以及提出对检验方法方向的展望。
关键词：食品微生物检验；分子生物学技术；免疫学；仪器化Research progress of food microbiological testing methods at home andabroadLu Jie-MingAbstract:In the past 30 years, with the development of international food economy and trade, the global food safety problem has attracted much attention. This paper introduces the research progress of food microbiological inspection methods in recent years and puts forward the prospect of testing methods.Keywords:Food microbe testing;Molecular biology technology;immunology; Instrumentation.1.引言随着人们生活水平的不断提高，食品安全问题逐渐成为各国政府、公众关注的焦点问题。
食品达到细菌学的卫生条件是最终制品中不允许存在致病菌，即使存在食物中毒菌，也必须达到不损害人体健康的安全水平。
由于食品微生物污染的广泛发生，严重影响人民的健康，因此食品微生物检验工作对评价食品卫生质量，保证消费者饮食卫生有着极为重要的作用，并且研究灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的食品安全检测技术和方法，建立和完善食品安全微生物检测技术和体系越来越重要。
本文将介绍近几年来国内外食品微生物检验中具有代表性的几种检验方法2. 国内外食品微生物检验方法的进展2.1电阻抗法电阻抗法的原理是电阻抗法的主要原理是检测培养基中的大分子在电中性或弱离子条件下的微弱电位变化。
从而在未出现菌落之前就能检测到微生物的存在『1』。
电阻抗法一次可同时测定128份试样,操作简便、快捷,可避免人工操作造成的主观判断差异,全部结果量化并由打印机自动打出。
但是电子讯号、食品配方、培养基、温度等变化都会影响检测结果,因此制作校正曲线必须在同一配方试样间进行,也就是说校正曲线的服务对象必须是单一的,该方法对食品中菌落总数测定的改进和对食品生产企业快速监测食品中细菌污染有很大的作用［2］。
2.2分子生物学技术（1）核酸探针技术1.以DNA为靶目标的检验中国开展的食品微生物检验项目主要包括细菌总数、大肠菌群、沙门菌、霉菌和酵母以及毒素等[3]。
所以,有关的检测有很多是针对细菌而来的。
DNA是细菌的主要遗传物质,所以设计的探针一般是目标DNA的互补序列。
在设计探针时要依照待检测微生物特异的DNA序列。
比如在设计检测产气荚膜梭菌的探针时,克隆的是产气荚膜梭菌的产毒基因[4]。
致肠病的大肠杆菌则针对其致肠病的基因序列来设计。
这种检验在食品微生物检测中的应用研究十分活跃,例如食品中的大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门菌(Salmonella)、志贺菌(Shigella spp)、小肠结肠炎耶尔森(Yersinia enterocoliti-ca)、产单核细李斯特菌(Listeria monocytogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的检测等。
2.以rRNA为靶目标的检验该种检验方法常使用AccuProbe基因作为探针,其原理是利用Acridinium ester作为荧光发光物质,标记特异性单链作为探针,与待测细菌中的核糖体RNA(rRNA)互补,形成稳定的DNA:RNA杂交体。
选择试剂再将未结合的多余探针破坏掉,最后通过发光仪检测标记的杂交体。
翁文川等应用该方法检测食品中产单核细胞李斯特菌,结果表明,采用该基因探针方法检测食品中产单核细胞李斯特菌特异性强,需要的时间短。
吴仲梁等也用AccuProbe检测食品中的产单核细胞李斯特菌,同样证明该方法具有正确、灵敏、快速、简便等优点,适于推广应用.［6］（2）聚合酶链式反应(PCR)技术聚合酶链反应，是一种在体外模拟自然DNA复制过程，对特定的DNA或DNA 片段进行快速扩增的方法。
PCR技术除了具有核酸分子杂交的优点如特异性强、可从基因水平进行诊断和同时检测大量样品等外，比核酸分子杂交更加敏感、更加快速和简便，且易自动化操作。
PCR技术在基因诊断方面比基因探针法更敏感。
PCR即聚合酶链反应是在体外酶促扩增特定DNA或RNA片段的技术。
这种技术被誉为近半世纪来生命科学中最伟大的发明。
PCR具有如下特点：由于以碱基配对原则使引物与模板DNA特异正确结合， DNA聚合酶合成反应的忠实性和靶基因的特异性与保守性，共同决定了 PCR的高特异性；PCR具有高敏感性，因为PCR 产物量是以指数方式增加的，能将皮克量级的起始待测模板扩增到微克水平。
能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在细菌检测中，最小检出率可达3个细菌；简便、快速，通过使用耐高温的 TaqDNA聚合酶，一次性将反应液加好后，在DNA 扩增仪上进行变性 - 退火 - 延伸反应，一般在 2~4 小时完成扩增反应，扩增产物易分析，不一定使用放射性核素，无放射性污染、易推广，对标本的纯度要求低，适应范围广［4］。
更有研究发现，将PCR技术和核酸杂交技术综合起来应用,可以增强检验的灵敏度。
因为通过PCR可以将要检测的核酸扩增得很多,从而使核酸杂交的靶序列得到了增强。
A Ingianni等曾报道用PCR与核酸杂交结合的办法进行了180多个样品中产单核细胞李斯特菌的检测,同时比较了直接PCR,单独的核酸分子杂交及其它相关的检测方法,表明两种方法结合相比其它方法更加快速和特异[6]。
2.3 抗体的方法(1)乳胶凝集反应利用抗原与抗体特异性结合的特性，加上人工大分子的乳胶颗粒而发生肉眼可见的凝集反应。
Au-reus Test用于食品样品中金黄色葡萄球菌的检测，该试剂盒中含有对免疫抗蛋白A IgG和鞭毛蛋白敏感的聚苯乙烯乳胶粒子，因细菌蛋白A 和IgG结合，凝聚酶和鞭毛抗原结合，所以当含有金黄色葡萄球菌的样品悬浮液加人含乳胶粒子的试剂盒中时1 min内将产生凝集反应。
该法的灵敏度和特异性均较高。
(2)酶联免疫吸附法这是用于定性或定量测定特异抗原抗体的一种技术，它多采用“夹心式”设计，即用抗体包被聚苯乙烯孔捕获抗原，用另一个结合了酶的抗体与抗原结合形成抗原抗体复合物，再用一种生色酶底物通过肉眼观察或比色法记录结果。
随着单克隆抗体酶联免疫技术的出现，免疫检测法的特异性有了明显的提高。
2. 4仪器法随着微生物快速检测法的不断发展，很多检验技术日趋成熟和完善，并被人们进一步开发、研制成自动或半自动微生物检测仪。
(1)流式细胞术(FCM )该技术是用流式细胞仪对细胞悬液进行自动快速定量分析和分选的新技术，具有速度快、精确度高、记数细胞量大以及参数分析、全面测量细胞和分选细胞等优点。
由于FCM检测到的荧光强度的强弱与DNA片段的大小成比例，根据荧光浓度的直方图就可知道细菌的DNA指纹图谱，从而确定细菌的种类。
现在该技术已经能够检测纯化的DNA可达Pg级水平，在10 min内可以完成数据的收集和分析。
近年来在临床实验室已经逐步用于病毒、细菌的检测、计数、鉴定等。
(2)免疫磁性微球免疫磁性分离技术不但广泛用于医学的各个领域，而且在食品卫生检测方面的应用也见端倪。
由于食品检样常为固液多相混合体，采用常规方法难以将少量的致病微生物分离出来。
借助免疫磁性分离技术，可以达到快速分离的目的。
免疫磁性分离技术与常规检验方法相比具有显著的优点，可以很快地在含有大量杂菌的悬液中有选择性地分离出目的微生物，并节省时间。
(3)电阻电导检测器原理是当细菌生产繁殖时，将蛋白质、糖类等大分子物质分解成氨基酸、有机酸等带电荷的小分子物质，改变培养液的导电度，这样，测量电阻和导电度的变化，就可推算出样品原来的含菌数。
(4)VITEK一AMS该系统为用于微生物鉴定及药敏试验的设备，其原理是将微生物数码鉴定的方法与计算机技术结合起来，实现了从读数、编码、解码、打印结果的鉴定全过程的自动化。
其特点为:①鉴定细菌类型广;②具有最大的准确性;③鉴定时间短;④高度可重复性;⑤仪器操作方便。
(5)VIDAS全自动免疫分析仪VIDAS全自动化荧光酶标免疫测试系统的特点和优点为:全自动操作，所有样品的洗涤、结合、基质读数及报告说明等都是全自动操作;快速测定:由样品进人仪器计算，约需1一2. 5 h即可出结果及报告，容量大，可同时测定30个标本。
(6)ATP生物发光法ATP生物发光法快速，甚至可以将细菌计数时间缩短至几分钟，操作简便、灵敏度高，具有其他微生物快速检测方法不可比拟的优势，曾被称为是检测环境中微生物最方便可靠的方法。
［3］3.食品微生物的检验技术发展方向通过上面的介绍可见，各种方法各有各的优点和不足。
但随着分子生物学和微电子技术的飞速发展，快速、准确、特异检验微生物的新技术、新方法不断涌现，微生物检验技术由培养水平向分子水平迈进，并向仪器化、自动化、标准化方向发展，提高了食品微生物检验工作的高效性、准确性和可靠性。
特别是近年来兴起的基因芯片技术及自动微生物检测系统，将从根本上改变微生物的检测方法，一些新的微生物检验方法和手段将不断涌现。
现更有联合几种检测技术来提高灵敏度或特异度的联合试验。
4.结语随着近几年的新技术、新方法的涌现，食品微生物检验技术将向高效率、高标准、高精度和高灵敏度的方向发展，必定对人类公共卫生、食品安全、营养健康与疾病预防等做出巨大贡献。
参考文献：［1］刘秀梅.我国食品卫生微生物学30年来的热点研究及主要进展［J］.中国食品卫生杂志,2009，21（4）:289-295.［2］赖蔚苳，黄吉成，戴昌芳等.电阻抗法快速测定食品中菌落总数的应用研究［J］.中国食品卫生杂志,2001,13（4）:13-15.［3］王云国,李怀燕.食品微生物检验内容及检测技术［J］.粮油食品科技,2010,18(3):40-43.［4］张洁梅.食品微生物检验技术的研究进展［J］.现代食品科技,2005,21(2):221-222.［5］Ingianni A, FlorisM, Palomba P,et al1Rapid detection ofListeriamonocytogenesin foods, by a combination ofPCR andDNA probe[J].MolCellProbes, 2001, 15: 275-2801.［6］何宏艳.核酸杂交技术在食品微生物检验中的应用［J］.中国卫生检验杂志,2005,15(6):767-768.。