弹性蛋白酶检测方法

弹性蛋白酶，是由动物的胰脏用水提取而成，也可用细菌的培养液在低温下用水提取获得。

弹性酶是由240个氨基酸组成的多肽，其CAS:39445-21-1，分子从链走向和空间构造型与胰

凝乳蛋白酶相似。弹性酶是有丝氨酸的蛋白酶，它存在于所有动物的胰脏中。在人的动脉、

皮肤、血小板和白血球中也存在弹性酶活力的物质。除此之外，一些微生物和植物中也具有

弹性酶活力物质。

弹性蛋白是一种单纯蛋白、它不含辅助基和金属离子，其活性中心取决于特异的三维结构，

当其中发生兵役，构型将会改变、引起失活。

弹性蛋白酶制备提取：

一般由动物的胰脏用水提取而得，也可用细菌的培养液在低温下用水提取而得。

弹性蛋白酶检测步骤：（仅供参考）

（1）准备适当数量的包被微孔。标准品、稀释标本加样量均为100μl/孔。五个标准品浓度

依次为3000、1500、750、375 和0ng/ml（以标本稀释液作为0 标准）。

（2）用封片膜封板。以孵育振荡器（350 ～400rpm）室温（18 ～28℃）反应60min。

（3）弃去封板膜。洗板：以洗涤液注满微孔每次浸泡1min共洗板5 次。

（4）每孔加酶结合物100μl。用封板膜封板。以孵育振荡器（ 350 ～400rpm）室温

（18 ～28℃）反应45min。

（5）弃去封板膜。洗板：以洗涤液注满微孔，每次浸泡1min 共洗板5 次。

（6）每孔加显色液100μl 室温避光反应20min[显色液临用前配制。方法是：显色剂A: 显

色剂B按体积比40: 1混合（如显色剂A 400μl + 显色剂B 10μl）显色液配制后30min 内使用。（7）每孔加终止液100μl充分混匀。15min 内上酶标仪双波长450/630nm 比色。