不同提取方法对苦参生物总碱的影响
绿色农药苦参碱的提取工艺研究
硫酸 滴定液 （．１ｍｏ／） １ ，摇 匀，置水 浴加 ０Ｏ ｌＬ ０ｍＬ 热 使残 渣完 全溶解 并 除尽 乙醚 ，放冷。加入 新煮 沸 后放 冷的蒸馏水 １ ５ｍＬ与 甲基红指 示液 ２滴 ，用氢 氧化钠滴定液 （． ｌ ）滴定至黄色 ，即得。每 ０ ２ｍｏ／ ０ Ｌ
１ｍＬ硫 酸滴定液 （ ．１ｍｏ／ ）相当于 ４９ ７ｍｇ的 ０Ｏ ｌ Ｌ ． ６ 苦参 碱 。
加 入 硫 酸滴 定液 （ ．１ｍｏ／ ） １ ０Ｏ ｌＬ ０ｍＬ，摇 匀，置 水 浴加 热 使 残 渣 完 全 溶 解 并 除尽 乙 醚 ，放 冷。加
入新 煮 沸后 放 冷 的蒸 馏 水 １ ５ ｍＬ与 甲基红 指 示 液 ２滴 ，用氢 氧 化钠 滴 定 液 （ ．２ｍｏ／ ）滴 定至 黄 ００ ｌＬ 色 ，即得 。每 １ ｍＬ硫 酸 滴定 液 （ ．１ｍｏ／ ）相 ０Ｏ ｌ Ｌ 当于 ４９ ７ｍｇ的苦 参碱 。 ． ６
１ 高温浸泡提取法生产工艺 ． ２ 将 苦 参根 干 燥 粉 碎 ，过 ０２ ． ｍｍ （０目）筛 ， ５ ６
按 照 １： ６～ １）的质量 比例 与 ６ ％乙 醇溶 液混 合， （ ０ ０ ８ ０℃搅拌过 夜。 过滤除去不溶物 ， 提取液于 ８ ０℃蒸干 取 上述干粉 ０５ｇ ． ，精密称 定，置具 塞锥 形瓶 中，
点，选用 浸泡超 声 提取 法、高 温浸 泡提取 法和 碱性
关键 词 ： 苦参碱 ； 超声波 ； 碱性醇 ； 提取率 ；
出膏率
苦参碱 （ ｔｎ ，Ｓｐ ｏａ ｉ ｎ）系从豆科植 Ｍａ ｉｅ ｏｈ ｃｒ ｄ ｅ ｒ ｐｉ
物苦 参 （ｏｈ ｒ ａｅｃｎ ｔ Ｓｐ ｏａｆ ｖｓｅｓＡｉ）或豆 科植物广豆根 ｌ ．
Ｖ ｇ ｔ ｂ ｅ ０ ２． ｅ ｅａ ｌｓ １ ９ ２
苦参碱的提取,分离与鉴定
中药苦参是豆科植物苦参(Sophors Flavescens Ait)的干燥根,味苦,性寒,有清热燥湿,杀虫等作用.临床上用于治疗痢病,黄胆和皮肤瘙痒症.近年还发现具有抗肿瘤,升白,抗病毒性肝炎等药理作用,苦参中主要含生物碱,此外还有黄铜类成分.一, 苦参中主要已知生物碱的结构和性质1.氧化苦参碱（oxymarrine）C12H24N2O2，白色棱晶，易溶于水，甲醇，乙醇，氯仿，不溶于乙醚，苯。
溶点：207～208℃（不含结晶水）162～163℃（含一个结晶水）77～78℃（含多个结晶水）结晶水可在145～150℃／0。
002mmHg下除去，可于许多金属离子如Fe2＋ Cu2+ Cr3+等生成沉淀，［α］？？＋47.7℃(乙醇).2.苦参碱(matrine)C15H24N2O在轻石油醚中结晶时，由于温度等条件不同，可以得到αβδ三种结晶（溶点分别为76℃ 87℃ 84℃）和一种流体即γ型。
通常室温下结晶得到的是α型，易溶于水，甲醇，乙醇，氯仿，溶于苯，在乙醚中溶解度小。
［α］？？＋39.11[乙醇]3.脱氢苦参碱(槐果碱)（sophocarpine）C15H24N2O白色棱晶。
溶点80～81℃，易溶于甲醇乙醇氯仿，略溶于苯和乙醚，在水中溶解度小。
［α］？-29.44(乙醇)4.槐定(sophoridine)C15H24N2O白色棱晶，溶点106～108℃，为苦参碱的一种空间异构体。
二．实验目的与要求（1）通过苦参生物碱的提取掌握用渗滤法和离子交换法提取生物碱的方法。
（2）掌握沙氏提取器的使用方法。
（3）掌握氧化铝吸附薄层层离法和柱层层离法鉴定和分离生物碱的方法。
三．原理氧化苦参碱为喹诺里西汀类生物碱，叔胺氮氧化合物与酸成盐溶于水与非生物碱分开，提取的生物碱盐的阳离子部分与H+型树脂发生交换生物碱吸附在柱上，吸附有生物碱的树脂，碱化呈游离生物碱，可被氯仿等有机溶剂提取。
R-SO3-Na+ ＋ H+CL- ――>R-SO3-H+ + NaCLSO3Na + H2O生物碱四. 实验方法.1 酸水提取和离子交换（1）渗漉法取苦参碱400克,加入适量0.5%(g/v)的盐酸湿润后放置一小时，装入渗滤液的PH值及生物碱反应，使渗滤液通过离子交换脂柱，待经过树脂柱的滤液生物碱反应或微弱的反应时，停止交换，将树脂倒入烧杯中，酮蒸馏水洗涤几次，滤干，树脂放入搪瓷盘中自然晾干。
苦参碱的提取研究
苦参碱的提取研究苦参碱是一种草本植物苦参中的主要生物碱成分，广泛应用于医药领域。
苦参碱具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用，因此成为现代医药研究的热门对象之一、以下是针对苦参碱的提取研究的一些内容，总字数超过1200字。
一、苦参碱的提取方法1.传统提取方法：一般采用传统的溶剂提取方法，包括水提、醇提和碱提等。
具体操作步骤为：将细粉状的苦参材料与适量的溶剂混合，置于提取设备中进行反应。
反应时间根据不同的提取溶剂和设备而异，通常为数小时至数十小时。
提取液经过过滤、浓缩、蒸馏等操作后，获得苦参碱的提取物。
2.超声波辅助提取：超声波具有高能量、高频率、高效率的特点，对于草本植物的提取具有较高的效果。
超声波提取方法主要是利用超声波的振荡作用使植物细胞壁破裂，增强苦参碱的释放。
超声波辅助提取的操作过程与传统提取方法相似，仅在提取过程中加入超声波器，并调节合适的超声波频率和功率。
3.超临界流体萃取法：超临界流体（常用的是二氧化碳）具有较好的渗透能力和溶解能力，与固体物质接触后能迅速渗透到物质内部，从而加快有效成分的释放。
超临界流体萃取法主要通过改变温度和压力等条件，使二氧化碳表现出超临界态，并对苦参材料进行提取。
该方法能够高效且选择性地提取苦参碱，并且操作过程中无需使用有机溶剂，对环境友好。
二、苦参碱提取研究的影响因素2.提取溶剂的选择和用量：提取溶剂的选择和用量直接影响到苦参碱的提取效果。
一般来说，具有较好极性的溶剂，如水、乙醇等，对苦参中的苦参碱具有较好的提取效果。
但是，有机溶剂的使用也会带来环境问题，因此需要在提取效果和环境友好之间进行权衡。
3.提取时间和温度：提取时间和温度是苦参碱提取研究中重要的操作参数。
通常情况下，提取时间和温度越长、越高，提取速度越快，但也可能加速苦参碱的降解。
因此，需要根据不同的实验要求和苦参材料的特性进行合理的调节。
三、苦参碱提取研究的现状和展望苦参碱的提取研究已经取得了一定的进展，但仍存在一些问题和挑战。
苦参生物碱的提取分离流程
苦参生物碱的提取分离流程苦参生物碱的提取分离可有意思啦！咱先来说说苦参生物碱为啥要提取分离呢。
苦参啊，它里面含有的生物碱有好多厉害的作用。
这些生物碱可能在医药呀，或者其他一些科研领域有着特殊的价值。
比如说可能对某些疾病有治疗的潜力之类的。
那怎么把这些生物碱从苦参里弄出来呢？这就涉及到提取的过程啦。
有一种方法呢，是溶剂提取法。
就像是把苦参当成一个宝藏盒子，我们要用合适的溶剂这个钥匙去打开它，把生物碱取出来。
一般会选择乙醇这类溶剂，把苦参放进去浸泡一段时间。
这个浸泡就像是给苦参泡个舒服的澡，让生物碱慢慢地从苦参里跑到溶剂里面。
浸泡的时间得合适，太短了生物碱还没来得及出来，太长了可能又会有其他杂质跟着跑出来了。
还有就是超声提取法。
这个就更酷啦！超声就像是给苦参做了个按摩，在超声的震动下，苦参生物碱就会比较快地从苦参里被“震”到溶剂里。
这种方法速度比较快，而且相对来说提取的效率还挺高的呢。
提取出来之后，可不能就这么直接用呀，因为里面还有好多其他的东西混着呢，这就需要分离了。
分离的时候呢，可以用色谱法。
想象一下色谱法就像是一场比赛，不同的生物碱就像是不同的选手，它们在这个特殊的赛道（色谱柱）上奔跑，因为它们各自的性质不同，所以跑的速度就不一样，这样就可以把它们一个一个地分开啦。
比如说有的生物碱极性大，有的极性小，根据这个极性的差别，就能把它们很好地分开。
还有一种是利用生物碱的酸碱性来分离。
有的生物碱是碱性的，我们就可以用酸把它变成盐，然后再利用盐的性质把它和其他物质分开。
这就像是给生物碱穿上了一件特殊的衣服（变成盐），让它变得和其他东西不一样，这样就容易分开了。
在整个提取分离的过程中啊，有好多小细节得注意。
比如说温度呀，温度不合适的话，可能会影响生物碱的稳定性，它要是不稳定了，就可能在提取分离的过程中被破坏掉了。
还有就是提取和分离过程中的设备要干净卫生，要是有其他的脏东西混进去，那可就前功尽弃了。
苦参生物碱的提取分离虽然有点复杂，但就像探索一个神秘的小世界一样，每一步都充满了惊喜和挑战呢。
苦参中生物碱的提取及纯化工艺研究进展
苦参中生物碱的提取及纯化工艺研究进展苦参（Sophora flavescens Aiton）是一种常见的中药材，广泛应用于传统药物和中成药中。
苦参中的生物碱是其主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等药理作用。
因此，提取和纯化苦参中的生物碱具有重要的研究价值和应用前景。
本文将综述苦参中生物碱的提取和纯化工艺研究进展。
苦参中主要含有多种生物碱，如苦参碱、苦参素、大黄素等。
目前，常用的提取方法主要包括水煎膏剂提取法、溶剂提取法和微波辅助提取法等。
水煎膏剂提取法是一种常见的传统提取方法，主要通过将苦参粉末与水煎煮，然后浓缩、过滤和析出等步骤获得苦参提取物。
水煎膏剂提取法操作简单、成本低廉，但其提取效果有限，且存在易受环境条件影响、提取物稳定性差等缺点。
溶剂提取法是一种常规的苦参提取方法，常用的溶剂包括乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
该方法可以显著提高提取效果，但同时也会带来一些问题，如溶剂残留、环境污染等。
因此，需要对溶剂提取法进行优化和改进，减少对环境的影响。
微波辅助提取法是近年来发展起来的一种新型提取方法，其主要原理是利用微波的加热作用加速提取过程。
微波辅助提取法具有提取速度快、提取效果好的优点，已经在苦参提取中得到了广泛应用。
然而，目前关于苦参微波辅助提取法的研究仍较少，有待进一步深入研究。
苦参中生物碱的纯化工艺主要包括溶剂分配法、硅胶柱层析法、高效液相色谱法等。
其中，溶剂分配法是一种常用的纯化方法，通过溶剂的不同极性和沸点差异，实现苦参中生物碱的纯化。
硅胶柱层析法是一种较为经典的纯化方法，通过利用硅胶的吸附和解吸作用，将苦参中生物碱与其他杂质分离。
高效液相色谱法是一种高效、快速的纯化方法，已经得到了广泛应用。
值得注意的是，纯化工艺的选择需要根据苦参中生物碱的性质和目标纯度的要求来确定。
总的来说，针对苦参中生物碱的提取和纯化工艺，目前已有多种方法和技术可供选择。
然而，仍然存在一些问题需要进一步研究和改进，如提取效果和纯化效果的提高、环境友好性等。
苦参不同方法提取物抗鱼体车轮虫作用的研究
苦参不同方法提取物抗鱼体车轮虫作用的研究张继平;贺顺连;胡卫平【摘要】采用超声波、冷凝回流及常温浸泡3种方法从苦参中提取分离生物碱,经初步分析,其主要成分为苦参碱、氧化苦参碱等.运用药理学方法对得到的生物碱进行了抗鱼体车轮虫试验,结果显示:苦参生物碱能对鱼体鳃部车轮虫起到有效的驱杀作用;不同提取方法的提取物中由于生物碱的成分与含量有差异,对车轮虫的杀灭效果也有显著差异;超声波提取物中苦参碱的含量最高,对车轮虫的杀灭效果也最好,表明苦参生物碱中对车轮虫起驱杀作用的成分主要是苦参碱.【期刊名称】《长江大学学报（自然版）理工卷》【年(卷),期】2005(002)002【总页数】3页(P57-59)【关键词】鱼体车轮虫;苦参提取物;治疗作用【作者】张继平;贺顺连;胡卫平【作者单位】广东佛山科学技术学院动物科学系,广东,佛山,528231;广东佛山科学技术学院动物科学系,广东,佛山,528231;湖南五指峰生化有限公司,湖南,浏阳,410300【正文语种】中文【中图分类】S943近几年，全国各地的水产养殖中都不断发生因寄生虫病暴发流行而损失惨重的事件。
顺德、南海等地在1999年、2000年连续出现鳗鲡、鳜鱼的车轮虫病、指环虫病的暴发，由于缺乏有效药物治疗，损失很大，严重危害了水产养殖业的稳步健康发展。
目前，国内水产用杀虫药物大都以人工合成的化学药物为主(如有机磷杀虫剂、重金属类杀虫剂、菊酯类杀虫剂等)，此类化学药物毒性与残留都较大，虫体也易产生抗药性，不符合环保和健康食品要求[1]。
中草药商品制剂用于水产养殖主要见于防治水产动物细菌与病毒病[2]，针对水生动物寄生虫病的制剂很少，也主要是见于民间使用，因此，生产上用药常带有很大的盲目性。
由于植物源生物碱可通过破坏虫体的神经系统以及引起虫体拒食作用等起到驱虫杀虫效果[3]，因此，本试验尝试从苦参中提取生物碱用于抗鱼体车轮虫研究，旨在为探索研究及开发应用中草药防治水生动物寄生虫病提供理论参考。
苦参碱提取工艺与氧化苦参碱制备方法
1 简述苦参碱、氧化苦参碱(苦参素)是苦豆子、苦参、广豆根等豆科槐属植物中生物碱的主要成份。
苦参碱(matrine)和氧化苦参碱(oxymatrine)化学分子式分别为C15H24N2O 和C 15H24N2O2，分子量分别为248 和264，是苦参型生物碱的主要活性成分，二者在一定条件下可以转化.2 苦参碱提取工艺2.1溶剂提取法苦参碱的溶剂提取法, 常用水、酸水及乙醇等作为提取溶媒, 提取方法多为浸渍、渗滚、煎煮、回流等经典方法。
孔令明等川从酸水回流提取、乙醇回流提取两大苦参总碱方法的对比中发现,乙醇回流法对苦参总碱的提取效果较好, 是一种目前较为合适的苦参总碱溶剂提取方法。
其最佳工艺参数为: 采用筛分目数20—60 目的苦参粉, 以60 % 的乙醇溶液, 料液比为1 : 2 , 回流提取2 次。
谭桂莲分别对水煎法、乙醇回流法和渗滤法提取氧化苦参碱工艺进行优选研究, 结果表明, 渗滤法所得浸提物中, 氧化苦参碱含量明显高于水煎法和乙醇回流法, 故认为渗滤法为氧化苦参碱的最佳提取方法。
2.2 离子交换法利用生物碱盐通过强酸型阳离子交换树脂柱, 使生物碱盐阳离子交换在树脂上, 而非生物碱化合物则流出柱外, 将交换后的树脂晾干, 用氨水碱化, 氯仿提取的原理。
高拴平等研究了离子交换法提取分离苦参碱的工艺和过程, 技术路线是:苦参粉→甲醇回流提取→回收溶剂→粗提物→稀硫酸溶解→脱脂→水层→除鞣→上D201型阳离子交换树脂※碱化树脂→氯仿提取→回收溶剂→脱水→丙酮→苦参碱结晶。
采用上述提取分离方法, 苦参碱的产率最高, 结晶质量最好。
张存莉等采用不同浓度的乙醇和阳离子交换树脂对苦参碱进行提取和纯化, 并对不同的苦参碱纯化工艺进行比较和研究。
结果表明, 用60%的乙醇进行提取和用阳离子交换树脂进行纯化的工艺过程生物碱收率较高, 生产成本较低, 工序较为简单, 有一定的进步性, 适宜工业化生产。
2.3 树脂吸附法吸附树脂是近10年来发展起来的一类有机高分子聚合物, 它具有物理化学稳定性高、吸附选择性独特、不受无机物存在的影响、再生简便、解吸条件温和, 使用周期长、宜于构成闭路循环, 节省费用等诸多优点。
超声波法提取苦参总碱的研究
摘要 ： 以苦参 的根为原料 ， 通过改变超声时间 、 浓度 、 料液比、 超声频率等条件研究 了对 苦参 总碱 提取效果 的影 响， 从而可以确定
苦参 总碱最适合 的提取条件 。
关键 词 ： 苦参总碱 ； 提取 ； 超声
中图分类号 ： ８ ． Ｒ ２４２ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ：６ ４ ８４ （０ ２ ０ — ０ ９ ０ １ ７ — ６ ６ ２ １ ）１ ０ ０ — ３
有效 的缩短提取 时间， 节约了溶剂 ， 并且 防止 了高温 对有效成分的影响。
２１１ 在 不 同浓 度 的 盐 酸 的 作 用 下超 声对 苦 参 总 碱 ．．
提 取 率的 影响
称取 ２ 苦参粉 ５ ， ｇ 份 放入 ５ 个烧杯 中 ， 依次加人 ｐ Ｈ值为 １ ５ ～ 的盐酸 ， 搅拌均匀， 超声提取。提取后进 行过滤。 滤液静止过夜 ， 放在恒温水浴中蒸干。 在往残 渣 中加 ５ Ｌ ｍ 无水乙醇。 吸取待测液 ２ ｌ ０ 挥干无水乙 醇 ，在加人 １ｍ 缓 冲溶液 ，０ Ｌ的氯仿摇动 ２ ｉ， ０Ｌ １ｍ ｍｎ 静 置 ２ 。等 氯仿 与水 层 完全 分开 后 以 １ｍ ｈ ０ Ｌ氯仿 ＋０ Ｌ １ｍ 蒸馏水做为空白， 在苦参碱的最大波长 ４７ｍ １ｎ
苦参生物碱的提取与分离
０ 引言
苦参 又名苦骨 、 川参 、 凤凰爪 、 牛参 、 地槐 、 野槐 等 ， 为 豆科 多年生落 叶亚灌木植物 舌参 的根 ， 后去芦 头及须 采挖 根晒 干切 片入药 ， 国各地 均产 ， 全 功能 主要为 清热 、 燥湿 、 杀虫等 ， 主治热毒血痢 、 肠风 下血 、 黄疸 、 白带下 、 儿肺 赤 小 炎、 急性扁 桃 体 炎等 多种 炎 症 和痔 漏 、 癞恶 疮 、 肤 瘙 疥 皮
中图分类号 ： ２ Ｒ８ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ：６１ ９ ４２０ ）３ １３ ４ １７ —０２ （０ｒ ｏ —０１ —０ ７
Ｅ ｔａ ｔ ｎ ａ ｄ Ｓ ｐ ｒ ｔ ｎ ｏ ｏ ｈ ｒ ｌｖ ｓ ｅ ｓＡｌ ａ ｏｄ ｘ ｒ ｃｉ ｎ ｅ ａ ａ ｉ ｆＳ ｐ ｏ ａ Ｆ ａ ｅ ｃ ｎ ｋ ｌｉ ｏ ｏ
Ａｂ ｔａ ｔ ｈｓｅｐ ｒ ｎ ｏ ｄ ｃ ｄｔ ｘｒｃ ｎ ｅ ａａｅｍａｒ ｅｆ ｍ ｏ ｈ ｒ ａ ｅｅｎ ，ａ ｄｃｒｉ ｓｒｃ ：Ｔ ｉ ｘ ｅｉ ｔ ｓｃｎ ｕ ｔ ｅ ｔ ｔ ｄｓｐ ｒｔ ｔ ｎ ｏ Ｓ ｐ ｏａｆ ｖｓｅ ｓ ｎ ａｒ ｓ ｍｅ ｉ ｅ ｏ ａ ａ ｉ ｒ ｌ ｅ ｏ ｔｉ— ｅ ｔ ｙｔｍａｉ ｓ ｄｅ ｎ ｉ ｃ ｎ ｌｇ ，ｐ ａｍａｏｏｙ ｒ ｇｅ ｅ ｔ ｄ ｂｏｏ ｉａ ｔｉ ｔ ｎ．Ｔ ｉ ｕ ｄ：ｈ ｓｓｅ ｔ ｔ ｉ ｏ ｓｔ ｈ ｏｏ ｙ ｈ ｒ ｃｌｇ ，ｄｕ ｆ ｉｌｇｃｌｕｉｚ ｉ ｎ ｐ ｃ ｕ ｓ ｔ ｅ ｃ ａ ｎ ｌａ ｏ ｈｓ ｐ ｐ ｒｍａｎｙｅｐ ｔ ｔ ｎｔｅｍｅ ｏ ｓｏ ｍａｒ ｅｅ ｔ ｃｉｎａ ｄｓｐ ｒｔ ｎ ｎ ｄｉ ｈ ｒ ｃｌｇ ｎ ｔ ｎ ， ａ ｅ ｉｌ ｘ ａｉ ｅ ｏ ｔ ｄ ｆ ｔｎ ｘｒ ｔ ａａｉ ，ａ ｓｐ ａｍａ ｏｏｙｆ ｃｉ ｓ ａ ｓ ｈ ｈ ｉ ａ ｏ ｎ ｅ ｏ ｔ ｕ ｏ
苦参生物碱的提取实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除苦参生物碱的提取实验报告篇一：苦参生物碱的提取分离与鉴定最终版实验五苦参生物碱的提取分离与鉴定苦参是豆科槐属植物苦参的干燥根，含有多种生物碱，总碱含量高达约1%，其中以苦参碱、氧化苦参碱含量最高。
苦参碱可溶于水、乙醚、三氯甲烷、苯，难溶于石油醚。
氧化苦参碱为白色柱状结晶，可溶于水、三氯甲烷、乙醇‘难溶于乙醚、石油醚。
现代药理学研究表明，苦参中的生物碱具有消肿利尿、抗肿瘤和抗心律失常的作用。
一、实验目的本实验通过从苦参中提取苦参生物碱，考察盐酸的浓度和渗漉速度对提取产率的影响了解化学反应萃取分离在天然药物提取过程中的应用掌握渗漉法和离子交换提取生物碱的原理、方法与工艺过程，并熟悉用柱层析法分离生物碱。
二、实验内容（1）苦参总碱的提取。
①将苦参粗粉用不同浓度的hcl溶液润湿后渗漉，收集渗漉液；②将收集的渗漉液通过阳离子交换树脂柱，进行离子交换；③洗脱并回流提取苦参总碱。
（2）分别用柱层析法和溶解度差异法分离氧化苦参碱。
三、实验时间步骤所需时间/h渗漉2离子交换2回流5柱层析（或溶解度差异法）2.5鉴定0.5四、实验原理1.提取与分离方法利用苦参生物碱具有弱碱性，可与强酸结合成易溶于水的盐的性质，将总碱从药材中提取出来。
结合动态连接提取工艺过程，实现生物碱充分溶出。
然后，加碱碱化，即可得到苦参生物总碱。
以苦参碱为例：2.工艺流程五、实验材料与设备1.实验设备与仪器层析柱，渗漉桶，烧杯，布氏漏斗，医用搪瓷盘，恒温水浴箱，层析槽，索氏提取器，研钵。
2.实验材料与试剂苦参，强酸性阳离子树脂，层析用氧化铝，三氯甲烷，甲醇，浓氨水，乙醚，碘化铋钾，盐酸，氢氧化钠。
碘-碘化钾试剂，碘化汞钾试剂，碘化铋钾试剂，硅钨酸试剂。
六、实验步骤1.反应提取步骤（1）动态连续提取①取苦参粗粉200g加一定浓度的盐酸，拌匀，放置30min,使生药膨胀。
②然后装入渗漉桶中，边加边压，层层加紧，全部装完后，药面压平，盖一层滤纸，滤纸上压一些洗净的玻璃塞。
苦参生物碱的提取与分离
苦参生物碱的提取与分离张婷婷制药2班101310402290 引言苦参又名苦骨、川参、凤凰爪、牛参、地槐、野槐等，为豆科多年生落叶亚灌木植物舌参根，采挖后去芦头及须根晒干切片入药，全国各地均产，功能主要为清热、燥湿、杀虫等，主治热毒血痢、肠风下血、黄疸、赤白带下、小儿肺炎、急性扁桃体炎等多种炎症和痔漏、疥癞恶疮、皮肤瘙痒、阴疮湿痒等疾病研究得知，苦参的根含有多种生物碱，如氧化苦参碱、羟基苦参碱、甲基野靛碱、臭豆碱、赝靛叶碱、脱氢苦参碱（槐果碱）等多种生物碱及黄酮类化合物因为苦参碱具有多方面的药理作用，如抗肿瘤作用、抗癌作用、抗病毒作用，所以对苦参总碱的提取与分离具有重要的意义苦参总碱的提取方法相对较多，本文中主要侧重论述苦参提取水煎法。
1 苦参碱以及其化学结构1.1 苦参碱的基本性质苦参碱系指从豆科植物苦参、苦豆子、山豆根中分离出来的生物碱，是上述3种传统中草的主要活性成分之一，是苦参类生物碱的代表.《中国药典》2010年版一部中，是以苦参碱的含量作为苦参药材的质量控制指标［1］；2005年版一部中，苦参碱的含量也是苦参药材的质量控制指标之一.1.2 苦参碱的化学结构苦参碱是白金雀儿碱的异构体，属于喹喏里西啶类衍生物，由2个喹喏里西啶环骈合而成，有2个氮原子，一个是叔胺氮，一个是酰胺氮，其分子式为C15H24N2O,分子量为245.37.苦参碱有4种形态：α-苦参碱为针状或柱状结晶，熔点为760C;β-苦参碱为斜方晶状，熔点为870 C; γ-苦参碱为液体，沸点为2230Cδ-苦参碱是柱状结晶，熔点为840 常用的是α-苦参碱,其结构见图1.苦参碱能溶于水、苯、氯仿、甲醇、乙醇，微溶于石油醚。
图一α-苦参生物碱的结构图[2]2. 苦参类生物碱的药理作用近年来发现苦参碱类生物碱在保护中枢神经系统和心血统、抗病毒、抗炎、免疫抑制及抗肿瘤等方面有重要的药理活性和应用前途［4］.2.1 苦参碱的抗肿瘤作用苦参碱类药物对于多种实验性肿瘤均有抑制作用，且多为移植性实体瘤. 苦参碱和氧化苦参碱同是苦参中抗癌有效成分，对癌细胞有直接杀伤作用. 电镜观察可见肿瘤细胞分裂呈中等抑制，瘤细胞膜和细胞质有明显改变. 此外，苦参碱类药物具有毒性低、无抑制骨髓和机体免疫功能的优点. 动物实验表明，氧化苦参碱对S -180有显著抑制作用. 日本报道它对 S -180 的治疗指数比丝霉素的治疗指数大7至8倍，临床效果类似于苦参碱. 另有发现：苦参碱对P815肿瘤细胞亦有直接毒性作用，能降低P815细胞的3H- Td R 掺入值，这从机制上可能说明苦参碱是一种直接细胞代谢抑制剂.2.1.1 对肝癌细胞的作用一定浓度的苦参碱对HepG2细胞的增生有抑制作用[5]，主要为直接杀伤作用，从而影响了HepG2细胞的代谢，使AFP 和PCN 分裂指数降低，恶性表型消失，肿瘤细胞恶性程度和侵袭力减弱，这说明苦参碱可能成为很好的抗癌药物2.1.2 对胃癌细胞的作用苦参碱在体外对胃癌细胞具有杀伤作用，且在一定剂量和时间范围内呈明显的量效和时效关系, 低分化的胃癌细胞 AGT 对苦参碱更为敏感, 苦参碱对胃癌细胞株的外杀伤作用与其诱导胃癌细胞凋亡有关, 将苦参碱作用于胃腺癌细胞SGC-7901 48h后，胃癌细胞Bcl-2表达量显著下降,可以推断出苦参碱对胃癌细胞凋亡的诱导作用可能与其影响Bcl-2的表达有关.2.1.3 对肺癌细胞的作用实验表明，三参冲剂（主要成分为苦参碱和川芎嗪）对肿瘤细胞与内皮细胞的粘附因子有明显抑制作用，并可明显抑制CD44和CD49粘附因子的表达，从而抑制肿瘤细胞与内皮细胞的粘附，还可减轻内皮细胞的通透性，保护内皮细胞的完整性，阻断了肿瘤细胞与基质的粘附，从而减少了肿瘤转移的形成. 这主要是因为三参冲剂对Tiam-l 基因具有一定调控作用.2.2 对中枢神经系统的作用研究发现氧化苦参碱、苦参碱等具有解热镇痛等中枢抑制性作用. 氧化苦参碱能明显抑制小鼠的自主活动，与水合氯醛等中枢抑制剂有协同作用，而对苯丙胺等中枢兴奋剂则有拮抗作用.苦参碱、氧化苦参碱对化学刺激和热刺激所致小鼠的疼痛反应均有明显抑制作用. 苦参碱腹腔注射或口服均能抑制酵母菌致小鼠直肠升温作用，而此作用不能被阿托品和羟甲丙基麦角酰胺所拮抗，但可被多巴胺受体拮抗剂氟哌啶醇完全拮抗. 观察并推测苦参碱的解热功能除了对产热过程的直接作用外，还具有多巴胺能样活性.2.3 对心血管系统的作用大量研究表明，苦参碱在强心和抗心率失常方面有显著的作用. 苦参碱和氧化苦参碱均能对抗乌头碱、哇巴因、氯仿- 肾上腺素、氯化钡及冠脉结扎等诱发的动物实验性心率失常，且多为室性心率失常，并且均呈剂量依赖性的正性肌力作用. 实验证明，这几种生物碱都可显著增强离体豚鼠右心室乳头状肌收缩力. 苦参碱作为潜在的强心药，一般同时具有增强心肌收缩力、减慢心率和拮抗心率失常的有益作用. 目前临床试用苦参碱和氧化苦参碱，发现对室性期前收缩、频发性期前收缩及阵发性心动过速效果较佳，这说明苦参碱类生物碱在强心和抗心率失常方面有着广阔的前景.2.4 抗病毒、抗炎作用2.4.1 在治疗乙型肝炎中的应用中药苦参碱治疗肝炎在《本草纲目》中已有记载. 中医认为，苦参碱性寒味苦，具有清热利湿、退黄利尿、消炎解毒等作用，可治疗多种疾病. 基础实验和临床研究表明，苦参碱具有多方面的药理作用及临床功能：①抑制胶原纤维增生而具有抗纤维化作用，这可能与其阻断PDGF（血小板源生长因子）和TGF-β1（转化生长因子β1）的作用，抑制储脂细胞增生和胶原合成有关［6］，苦参碱能够保护肝细胞，尤其是膜性结构，降低丙氨酸氨基转移酶、透明质酸、层黏蛋白水平，还可增加胆汁回流，消退黄疸；②抑制网状内皮系统吞噬功能，具有免疫调控作用. 苦参碱有免疫抑制活性，可抑制巨噬细胞胞浆、胞膜的PKC（蛋白激酶c）的活性，有可能成为一种有效的PKC 抑制剂. 实验证明苦参碱体内外均可抑制TNF 和IL-6的分泌，这可能与其抑制PKC 活性有关. 由于TNF 是肝脏炎症损伤中的重要介质，而对于LPS （细菌脂多糖）诱导的小鼠血清及培养的大鼠库普弗细胞的TNF 和IL-6升高，苦参碱都有抑制作用，这有可能是其消除肝脏炎症的机制之一. 苦参碱不仅有抗炎、抗肝损伤、改善肝脏微循环、促进肝细胞再生的作用，还有助于胆红素的摄取结合与排泄，起到降酶、退黄作用，并有抑制乙肝病毒复制和免疫抑制作用20世纪80年代以来干扰素被公认为有效的抗病毒药物，但其病毒学指标中HbeAG 率约40％, 且停药后易复发. 干扰素主要通过与靶细胞膜上特异受体结合诱导靶细胞产生抗病毒蛋白，从而破坏病毒的mRNA ，抑制病毒复制，但其免疫调节作用弱. 而慢性乙型肝炎患者普遍存在免疫紊乱的情况，不利于乙型肝炎病毒的最终清除. 苦参碱注射液能提高机体免疫力，有清热利湿、利尿退黄、解毒功能，能改善病理性肝炎症状与体征. 干扰素加苦参碱注射液治疗慢性乙型肝炎能起到互补协同作用，能明显提高干扰素的治疗效果，临床无不良反应，值得推广应用. 2.4.2 在治疗病毒型心肌炎中的应用陈曙霞等发现苦参碱具有独特的抗柯萨基B 组病毒（CVB）的显著作用，体内外实验均证实病毒性心肌炎模型小鼠经苦参碱治疗后存活期明显延长，有的完全治愈，心、肝组织无病变发生，脾脏T 淋巴细胞亚群及NK 细胞活性亦改变.提示苦参碱能抑制LWB 繁殖，而且尚有免疫调节功能［8］. 实验和临床证明苦参碱类生物碱还有多种抗炎作用，其机制不详. 已有临床应用苦参碱静脉滴注治疗病毒性心肌炎的报道.3 苦参碱的提取与分离3.1 传统煎煮法对苦参的提取在苦参中苦参总碱或苦参碱及氧化苦参碱的提取方法中较为常用的有溶剂提取法和离子交换法. 笔者在实验中首先采用了传统的煎煮法：将中药苦参粗粉置适宜煎煮器中，加适量水浸没原料，充分浸泡后加热至沸，保持微沸浸出一定时间. 此法较简便，而且经煎煮后，药中的大部分成分可被不同程度地提出，因此是提取有效成分特别是药物制剂的基本方法.3.1.1 实验仪器包括电子天平、旋转蒸发器、电炉、磁力搅拌器、超声波振荡器等.3.1.2 材料苦参（购于中药市场，批号：20050715）、乙醇（AR）、乙酸乙酯（AR）、HCL（AR）、氯仿（AR）、NaOH 、大孔吸附树脂、硅胶G 、纤维素钠、氧化苦参碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0402-200506）3.1.3 苦参提取水煎法首先用植物粉碎机粉碎苦参，并称取苦参粉100g加水1000ml 用电炉煮沸，煎煮1.5h，过滤收集药液. 再加水800ml电炉煮沸煎煮1h，过滤收集药液. 第3次加水600ml电炉煮沸，煎煮30min,过滤收集药液. 弃药渣合并三次药液，用纱布过滤冷却，并于3 000r/ min 离心5min，得上清液，于40C 冰箱冷藏备用. 旋转蒸发仪浓缩药液至50ml左右, 并过大孔吸附树脂（5ml/min）洗脱分离，得流出液，用80%的乙醇对大孔吸附树脂进行洗（2ml/min）再将流出液与洗脱液分别用氯仿、乙酸乙酯溶液萃取3次（8h次），用硅胶薄层层析，经显色鉴定表明流出液含有黄酮、洗脱液含有生物碱. 然后再用荧光显色鉴定，并与标准品对照，发现洗脱液中得到的生物碱至少含有3种.3.1.4 苦参碱的分离方法(1)准备吸附柱. ①取20AB-8树脂用清水浸泡15min;②取中小型柱子，洗净干燥，填入玻璃纤维；③将浸泡好的树脂与水一起转入柱子内，打开阀门排出多余水分；④用80%乙醇、5%盐酸溶液浸泡树脂过夜，再排出. 再第二次将上诉溶液加入柱子，浸泡4h. ⑤用清水洗净，直到洗后溶液PH 值为5为止；⑥用蒸馏水浸泡待用.2）薄层层析. ①将5g羧甲基纤维素钠加入100ml水溶解煮沸. ②将上诉溶液与硅胶G 以3：1的体积比调匀，并于1050C 下干燥40min. ③取一个载玻片，将干燥后的稠状液体均匀涂抹于上面, 干燥待用. ④在制备好的薄层上画一条基线，于中心点样药品原液数次. ⑤生物碱的展开剂为三氯甲烷、甲醇、氨水混合液，其中三氯甲烷：甲醇：氨水=5滴：0.6滴：6滴；对黄酮的展开剂为三氯甲烷和甲醇混合液，三氯甲烷：甲醇=8.5滴：1.5滴. ⑥用碘化铋钾对生物碱显色，发现有3个有色斑点. ⑦用5%三氯化铁对黄酮显色，发现没有有色斑点.3）让原药液流过吸附柱（速度为5ml/min），再用80%乙醇洗脱（速度为5ml/min），得到2部分溶液（流出液、洗脱液）. 分别对这2部分进行薄层层析，发现都有生物碱的存在. 说明生物碱在树脂上的吸附效果不好，准备调整PH 值及树脂进行再次吸附.4）用旋转蒸发仪对洗脱液进行浓缩，再用氯仿、乙酸乙酯分别进行萃取，得2部分溶液. 再对2部分溶液进行薄层层析，发现氯仿萃取的部分有生物碱的存在，而乙酸乙酯萃取的部分其中虽然有物质的存在，但是既不是黄酮也不是生物碱，需要进一步鉴定分析.3.2 酸水回流法提取苦参碱酸水回流法也是常用于苦参中苦参碱的提取方法，本次实验中采用了HCL 无机酸作为提取剂，用于对比传统煎煮法实验. 3.2.1 仪器包括METTL ERAE 240电子天平、RICA 旋转蒸发器、EYELA COOLACE CCA-1100冷凝水循环装置、Waters 2695高效液相色谱仪3.2.2 材料苦参（购于重庆中药饮片厂）、乙醇（AR）、甲醇（HPLC）、乙腈（HPLC）、氯仿（AR）、HCL（AR）、NaOH 、苦参碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0413-200506）、氧化苦参碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0402-200506）3.2.3 标准曲线的制作精密称取苦参碱对照品，以无水乙醇溶解，配制成含苦参碱0.492mg/ml 的溶液作为对照品溶液% 分别取1，5，9，13，15u以HPLC 测定峰面积［9］，每样进2针取平均值，色谱条件为：Xterra RP185um4.6x150mm柱，柱温200C，0.8ml/min,220nm,甲醇:水:三乙胺=480:520:0.4以峰面积为纵坐标，苦参碱量（)=）为横坐标，得回归方程：y=-34970.14999+1277796.646x；r=0.9999即苦参碱量在0.492到7.380ug范围内呈现良好的线性关系.3.2.4 酸水回流法提取苦参总碱选用L934,设计实验. 取苦参粉10g,按表1正交试验安排进行提取，以苦参碱得率为指标衡量提取效果. 试验流程如下：工艺液回流提取→ HCL 水溶合并回流溶液→过滤→滤液用10%NaOH调节，使PH 值为10到11 →过滤→滤液浓缩至小体积→以氯仿进行4段萃取（氯仿用量分别为用量体积的1倍、1/2倍、1/2倍、1/2倍）→合并氯仿层→蒸干→无水乙醇定容至25ml→测定苦参碱得率.4 未来展望近年来有关苦参类生物碱的药理研究工作已取得了很大进展，而临床上主要用于治疗肝炎的居多，对其他方面疾病的应用基本上还处于试验阶段. 在药物来源方面，我国以提取或提取后还原转化制备的工艺最为成熟，而合成方面虽然也有研究，但合成成本较高. 出于资源保护和经济效益考虑，由于中草药提取液苦参碱含量低，分离提纯麻烦，通过人工化学合成这类生物碱及其衍生物是非常必要的.参考文献：[1] 中华人民共和国国家药典委员会. 中国药典（Ι部）[M]北京：化学工业出版社，2000.[2] 刘文雅，刘汉清. 苦参碱的药理研究进展［J］. 中华实用中医杂志，2006（4）：473-475.[3] 刘北忠，蒋纪恺. 苦参碱与人类红血病细胞株K 562的结构特征研究［C］// 第五届西南三省一市生化学术会论文文集. 成都：［出版社不详］，1997.[4] 李弟，潘显道. 苦参碱类生物碱研究进展［J］. 医学研究通讯，2000(1)65-66.[5] 司维柯，肖元. 苦参碱对人肝癌细胞HepG2的形态影响和相关增殖因素的变化［J］. 第三军医大学学报，2000，22（6），[6] 张俊平，张珉. 苦参碱体内外抗大鼠肝纤维化的作用［J］.中国药理学报，2001,22(2),186.[7] 林文，张俊平. 苦参碱对细菌脂多糖诱导大鼠枯否细胞释放肿瘤坏死因子及白细胞介素-6的影响［J］. 药学报,1997,32(2): 186.[8] 陈曙霞. 苦参抗柯萨基B 组病毒的初步研究［J］. 上海第二医科大学学报，1991,11(2):140-142.。
苦参碱原药使用技术
苦参碱原药使用技术苦参碱（Matrine）是由苦参科植物苦参中提取得到的一种生物碱化合物，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎等多种药理活性。
该药物已经广泛应用于临床和农业领域，并取得了良好的疗效。
在这篇文章中，我们将详细介绍苦参碱的原药制备技术。
1. 苦参碱的提取工艺苦参碱的提取工艺主要包括以下几个环节：原料处理、浸提、精制、结晶等步骤。
1.1 原料处理选用新鲜、无病害的苦参植株作为原料，将苦参植株进行粉碎研磨，得到苦参粉末。
粉碎后的苦参粉末采用干式破碎或湿式破碎的方式进行加工处理，以提高苦参碱的提取效率。
1.2 浸提将苦参粉末与适量的有机溶剂（如乙醇、乙酸乙酯等）进行浸提反应。
浸提时间、浸提温度和浸提溶剂比例均对苦参碱的提取有一定影响。
通常情况下，浸提反应时间为6-8小时，浸提温度为60-80℃，浸提溶剂比例为1：5-1：10。
1.3 精制将得到的浸提液进行过滤、脱色、脱水等精制处理。
过滤是为了去除悬浮物和杂质，脱色是为了去除颜色深的杂质，脱水是为了提高苦参碱的纯度。
精制处理主要通过滤纸、活性炭、分子筛等材料进行。
1.4 结晶将精制液体进行浓缩和结晶处理，得到苦参碱结晶固体。
浓缩过程主要采用低压浓缩或真空浓缩技术，结晶过程主要通过晶种法、自然结晶法和温度控制法等进行。
2. 苦参碱原药的分离和纯化苦参碱提取得到的原药往往含有其他生物碱、有机酸和杂质等，需要进行分离和纯化，以提高苦参碱的纯度和药效。
2.1 反渗透膜分离采用反渗透膜技术，对苦参碱原药溶液进行过滤分离。
反渗透膜是一种能够过滤溶质的薄膜材料，能够将小分子物质和水分离，从而得到高纯度的苦参碱溶液。
2.2 色谱分离采用色谱技术对苦参碱原药进行分离。
色谱是一种将混合物中的成分分离的方法，其原理是根据物质在固定相中的亲和性和分配系数的差异，利用液相或气相将混合物中的物质分开。
常用的色谱分离技术有柱层析、薄层层析等。
2.3 结晶纯化利用结晶过程对苦参碱原药进行纯化。
山豆根中苦参碱不同提取方法的对比研究
１ 实验材料
１ １ 实验 器材 ．
Ｑ 霸 譬隧 量■ 国
一 筒下 口开关后 ， Ｉ ｕ 加入溶媒（ ．％盐酸） ０４ 。待有流出液
时关 闭开关 。将流 出液倒 回筒 内。继续加入溶媒 ， 当溶媒加到 高出药 面 ４ ｍ处 ， ～５ｃ 加盖放置 ２ 。 ４ｈ 以 ５ｍ ｍ ｎ １ Ｌ・ ｉ－的流速渗漉。收集到 ｌ 倍量的溶液 ０ 时， 压渣取液合并。循环水真空泵抽滤。在恒温 ８ ０ ℃ 的水浴锅 内加热蒸发。浓缩干燥 ， 制成千浸膏 ， 干 膏得率为 ６ ８ ．％。其工艺流程图如图 １ 所示。 ２ １２ 温 浸法 从 山豆 根 中提取苦 参碱 ．．
９ ％乙醇 （ ５ 分析纯 ）３ ％的盐酸、 、７ 苦参碱 （ ｔｎ ， Ｍａ ｉ ｒｅ
收稿 日期：０ ７０ ．０ ２０ ．９１
Hale Waihona Puke 维普资讯 １ ８化
工 技
术
与
开 发
第 ３ 卷 ７
０４ ．％的盐酸， ６ 于 ０℃的恒温水浴锅 内加热提取 ４
燥， 制成干浸膏， 干膏得率为 ５７ ．％。
漉筒 、 烧杯 、 滤 瓶 、 氏漏 斗 、 量瓶 等 。 大 抽 布 容
１２ 药品与试剂 ． 使用的山豆根及实验 中使用的试剂均为市售。
取山豆根药材粗 粉 ５ ， ０ｇ 加入 ８ 倍量 的 ０ ４ ．％ 的盐酸水溶 液。放 置 ３ ｉ 后 ， ６ ０ｍ ｎ 于 ０℃的恒温水 浴锅 内加 热 提取 ４ ｈ 。过 滤后 ， 加入 ６倍量 的 再
压平（ 压紧些）上盖滤纸 ， ， 加玻璃珠压稳。打开渗漉
９ Ｚ１ 粉碎机 ， Ｍ ２１ Ｆ－ ４ Ｇ ３ ． 型超临界 Ｏ ２ ０ 萃取实 验装 置， 电热 恒 温 干 燥 箱 ， 分 之 一 电 子 天 平 ； 万 ＤＯ Ｅ Ｉ Ｎ Ｘ高效液相 色谱仪 （ 包括 Ｐ ８ ６０泵 ， Ｓ．０ ＡＩ ０ １ 自 动进样器 ， Ｄ ４ Ｕ检测器 ， 温控制系统 ）渗 ＵＶ ３ ０ 柱 ；
苦参不同炮制品生物总碱含量测定及HPLC指纹图谱研究
苦参不同炮制品生物总碱含量测定及HPLC指纹图谱研究目的：对苦参不同炮制品的生物总碱含量进行测定，并建立苦参生物碱HPLC指纹图谱。
方法：采用紫外分光光度法进行苦参生物碱含量测定，采用高效液相色谱法，以Inertsil NH2（5 μm，4.6 mm×250 mm）为色谱柱，乙腈-无水乙醇-3%磷酸（84∶10∶6）为流动相，流速为1.0mL/mim，检测波长为210 nm，柱温为30 ℃。
并利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版软件进行图谱对比。
结果：麸制品生物总碱含量最高，为 3.955%；炒炭品生物总碱含量最低，为2.604%；各炮制品共有峰的相对保留时间RSD26.0%，苦参炮制品指纹图谱相似度在0.231%～0.962%。
结论：苦参中主要生物碱成分差异不大，但其量有变化，炮制品的品质不一致，此方法较全面地反映苦参不同炮制品的差异，可用于评价苦参炮制品的质量。
标签：苦参；苦参生物碱；炮制；指纹图谱；质量控制Abstract：Objective Determination of different biologicalcontent of Matrine alkaloids，and establish the HPLC fingerprint of alkaloids in Sophora flavescens Ait.Methods Determination of alkaloids content by UV spectrophotometry，use the method of HPLC，a Inertsil NH2 （5μm，4.6 ×250mm）phase column was used with mobile phase consisited of acetonitrle-anhydrod alcohol- 3% acid solution phosphorie （84∶10∶6）at a flow rate ofthe mL/min. the wavelength of detector was hanol：3% phosphoric acid as mobile phase，the flow rate is 1.0mL/mim，the detection wavelength is 210nm，the column temperature is nm.the column at 30℃.The experimental data were analyzed by computer aided similarity evaluation software.Results Bran products total alkaloids content was the highest for 3.955%，content of total alkaloids was the lowest which was 2.604%.There are various processed products peak relative retention time RSD26.0%，Sophora processed products fingerprint similarity in 0.231%～0.962%. Conclusion The main alkaloids in Sophora little difference，but its content has changed and inconsistent quality.This method is more comprehensive response to the difference between different Sophora processed products can be used to evaluate the quality of processed products Sophora.Keywords：Sophora flavercens Ait.；Sophora alkaloids；Processing；Fingerprint；Quality control苦參是豆科植物苦参Sophora flavercens Ait.的干燥根[1] 。
实验三 苦参生物碱的提取与鉴识
实验三苦参生物碱的提取与鉴识背景1.1苦参的化学成分苦参,又名苦骨(见《本草纲目》川)、川参(见《贵州民间方药集》、凤凰爪(见翌广西中兽医药植))、牛参(见《湖南药物志》),陶宏景谓:“叶极似槐叶,花黄色,子作荚,根味至苦恶。
”李时珍谓:“苦以味名,参以功名。
”lz]始载于((神农本草经》,列为中品。
为豆科(Leg姗z'n 口sae)植物苦参(￡叩加rafla。
escensAz't.)的干燥根。
分布于我国南北各地Is],春秋两季采挖,除去根头及小支根,洗净,干燥、或趁鲜切片,干燥。
苦参性味苦寒,归心、肝、胃、大肠、膀肤经。
功能清热燥湿、祛风杀虫、利尿通淋。
用于热痢、便血、黄疽尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、湿疹、湿疮、皮肤癌痒、疥癣麻风等诸多病症。
苦参中含有多种有效成分,目前已知的主要有生物碱类、黄酮类、挥发油类化合物,还含有少量醒类、皂试类及氨基酸等其它化合物。
下面分别介绍各类化合物的主要成分。
1.LI生物碱国内外学者从苦参根、苦参茎和叶及其花【4一l0]中共分离出26种生物碱。
苦参生物碱大多数是哇诺里西咤类(quinolizidine一type),极少数为双呱陡类(dipiperidine--tyPe)。
喳诺里西陡生物碱多数为苦参碱型生物碱,另有两种金雀花碱型(eytisine一type)生物碱,两种无叶豆碱型(Sparteine一type)生物碱,一种羽扇豆碱型(lupinine一type)生物碱。
包括苦参碱(matrine),氧化苦参碱(oxymatrine),槐果碱(sophoearpine)、氧化槐果碱(N一oxysophoearpine)、异槐果碱(isosoph。
Carpine)、异苦参碱(isomatrine)、7,11一去氢苦参碱(7,11一dehydromatrine)、槐胺碱(Sophoramine)、异槐胺碱(isosophoramine)、新槐胺碱(neosophoramine)、■'3一去氢槐胺碱(■`3一dehydrosophoramine)、■`一去氢槐胺碱(■7-dehydrosophoramine)、槐醇(sophoranol),9。
32992886
药 ，０ ４ ，３ （ １ ：０ ． ２０ ４ １ ） ５ １
由表 ４可知 ， Ａ Ｂ Ｃ 条件下两栖蓼 总生 物碱提取率高于 在 ， 表 ３中的实验结果 ， 总生物碱得率 为 １ ．６ ％ ， ０４ ７ 在本实验 的范围 内， Ｂ ｃ 为最佳的工艺选择 。通过重复验证得知 ， 条件确实 。 该 为最佳条件。
６组 ， 即空 白组 ， 模型组 ， 肾调周低 、 高剂量组 ， 补 中、 阳性对 照组 ， 每组各 １ ０只。除空白组外其余各组采 用 Ｈ Ｇ＋胰岛素 Ｃ （Ｎ ） Ｉ Ｓ 建立 多囊卵巢（ ｏ ｃｓｃＯ ａ ，Ｃ 动物模型。补 肾调 周法序贯 治疗 １ Ｐ ｌ ｙｔ ｖｒ Ｐ Ｏ） ｙ ｉ ｙ ６ｄ后测 定血 清 Ｔ Ｌ 、 ２Ｉ Ｓ含量 ， 、 Ｈ Ｅ 、Ｎ 免疫 组化法检测胰 岛素样 生长 因子 一１ Ｉ Ｆ一１ 在 卵巢组织的表达 ， （Ｇ ） 并在光镜 下观 察 卵巢组 织形态。结果 补 肾调周 法能显
关键 词 ： 多囊卵巢综合征 ； 高雄激素血症 ； 高胰岛素血症； 补肾调周法； 胰岛素样生长因子 中图分类号 ： ２ ５ ５ Ｒ ８ ． 文献 标识码 ： 文章编 号 ：０ ８０ ０ （ ０ ０ ０ －３ ６０ Ａ １ ０ －８ ５ ２ １ ）２０ ６ －２
Ｅｆｅ ｔ ｆＭ ｅ ｈ ｄ ｏ ｎｖ ｇ ｒ ｔｎ ｄｎ ｙ ａ ｇ ａ ｉ ｇ Ｍ ｅ ｓ ｒ ａ ｉ ｎ ｏ ｘ Ｈｏ ｍ ｏ ｅ ｆ ｃｓ ｏ ｔ ｏ ｆＩ ｉ ｏ ａ ｉ ｇ Ｋｉ ｅ ｎｄ Ｒｅ ｕｌ ｔｎ ｎ ｔ ｕ ｔｏ ｎ Ｓｅ ｒ ｎ ａ ｄ Ｉ ｕｌ —ｌ ｏ ｈ ｃ ｏ ｎ ｎｓ ｉ ｎ ｉ Ｇｒ ｗｔ Ｆａ ｔ ｒ一１ Ｌｅ ｅｓ ｉ ｔ ｔ ｌ ｃ ｓｉ ａ ｙ ｋｅ ｖ ｌ ｎ Ｒａ ｓ ｗｉｈ Ｐｏ ｙ ｙ ｔｃ Ｏｖ ｒ
苦参总碱的提取方法
苦参总碱的提取方法一、苦参总碱提取的基础知识苦参总碱是从苦参这种植物里提取出来的东西。
苦参呢，在好多地方都能找到，它可是个好东西，里面的苦参总碱有着很多药用价值，所以我们才想要把它提取出来。
二、常见的苦参总碱提取方法1. 溶剂提取法原理这是一种比较常用的方法哦。
就是利用苦参总碱在不同溶剂里的溶解度不一样的原理。
比如说，苦参总碱在某些有机溶剂里溶解度比较大，我们就可以用这种有机溶剂把它从苦参里溶出来。
像乙醇就是一种比较常用的溶剂。
把苦参碾碎或者切成小块，然后放到乙醇里浸泡一段时间，苦参总碱就会慢慢跑到乙醇里面去啦。
操作步骤首先得把苦参处理一下，把它清洗干净，去掉泥土杂质这些东西。
然后可以把它晾干或者烘干，让它没有多余的水分。
接下来把苦参弄碎，可以用粉碎机或者手工碾碎，弄成粉末或者小颗粒状。
然后把处理好的苦参放到合适的容器里，加入乙醇，乙醇的量要合适哦，不能太多也不能太少。
一般来说，乙醇的量要能完全浸泡住苦参。
之后就把容器密封好，放在一个合适的地方，比如说常温下或者稍微有点温度的地方，让它浸泡一段时间，这个时间可能会比较长，可能要好几个小时甚至几天呢。
浸泡完了之后，就可以把含有苦参总碱的乙醇溶液过滤出来，把苦参的残渣去掉，这样就得到了初步含有苦参总碱的溶液啦。
2. 酸水提取法原理苦参总碱在酸性水溶液里也能有一定的溶解性。
我们利用酸水来破坏苦参的细胞结构，让苦参总碱能够释放出来并且溶解在酸水里。
操作步骤先把苦参处理干净，和前面溶剂提取法的前期处理差不多。
然后把苦参放到酸水里，酸水的酸度要调节好，一般可以用稀盐酸之类的。
把苦参放到酸水里之后，要不断搅拌，这样可以让苦参总碱更快地溶解到酸水里。
搅拌的时间也不能太短，要保证大部分的苦参总碱都能溶解出来。
搅拌完了之后，也是要进行过滤，把苦参的残渣去掉，得到含有苦参总碱的酸水溶液。
不过这个溶液里面还含有很多杂质呢，还需要进一步的提纯处理。
3. 超临界流体萃取法原理这个方法就比较高科技啦。
苦参提取生物碱
三、苦参的化学成分
苦参所含生物碱主要是苦参碱和氧化苦参碱。 此外还含有羟基苦参碱、氧化苦参碱、N-甲基金雀 花碱、安那吉碱、巴普叶碱和去氢苦参碱等。这些 生物碱都属于喹诺里西啶类衍生物，除N-甲基金雀 花碱外，均由两个喹诺里西啶环骈合而成。其分子 均有两个氮原子，一个是叔胺氮，另一个是酰胺氮。 其分子式为C15H24N2O,分子量为245. 37 。 苦参碱有4 种形态: A- 苦参碱为针状或柱状结晶, 熔 点为76 e ;B- 苦参碱为斜方晶状, 熔点为87 e ;C- 苦 参碱为液体, 沸点为223e ; D- 苦参碱是柱状结晶, 熔点为84e . 常用的是A- 苦参碱。 苦参碱能溶于水、 苯、氯仿、甲醇、乙醇, 微溶于石油醚。
苦参的研究进展
小组成员： 丁力 徐莹 刘文驹 王林 • • • 简介 药理作用及临床应用 化学成分 苦参的提取与纯化 苦参碱的检识 总生物碱的测定 实验设计 小结
二、药理作用及临床应用
《神农本草经》, 卜记述：“ 苦参性苦、寒”,“ 主心腹 结气、症痛积聚”。历代本草亦相继记载苦参能“安五脏、 平胃气, 疗恶疮, 利九窍, 令人嗜食轻身, 定志益精。” 苦参类生物碱主要为喹诺里西啶类生物碱，该类生物 碱主要属于苦参碱型、金雀花碱型、奥豆碱型（鹰爪豆碱 型）和羽扇豆碱型，此外，MurakoshiI等从其苦参花中还 分离得到了两个胡椒啶碱型的生物碱。 国内外学者对其中所含的喹诺里西啶类生物碱的药理 作用作了深入的研究，发现它们具有抗肿瘤、抗心律失常、 升白细胞等多方面的药理作用。
表面活性剂有降低表面张力及增溶作用。在提取剂中 加入表面活性剂，一方面相互聚集形成胶束，从而增加了 提取剂对药材的浸提能力；另一方面可降低提取剂与药材 间的界面张力，促进润湿，在胶束作用下有效成分易被解 吸、提取。应用表面活性剂于苦参碱的提取，一般选用毒 性相对较小，对皮肤刺激性较低的非离子型表面活性剂吐 温类。鲁传华等以多种浓度的乙醇、稀盐酸溶液、胶束分 散系及水为提取溶剂，常温浸渍法提取苦参中苦参碱，考 察表面活性剂吐温80的水及醇溶液正向胶束体系提取苦参 碱的效 率。结果表明，含有表面活性剂的提取剂能更快地 达到最大提取量，提高生产率。李晓梅在提取溶剂(水或乙 醇)中分别加入0.2%吐温20或吐温80提 取苦参碱，以苦参 碱含量为考核指标，考察非离子型表面活性剂在苦参碱提 取中的实际应用价值。 结果表明，在苦参碱提取中应用吐温20和吐温80，可 以降低药 材与溶剂之间的表面张力，增加药材中细胞渗透 性，使溶剂最大限度地溶解或增溶药材中有效成分，显著 增加苦参碱提取率，降低成本，提高经济效益。
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不同提取方法对苦参生物总碱的影响
摘要：目的：考察不同方法对苦参中苦参生物总碱提取效率的影响。
方法：采用酸性染料比色法，对苦参酸水回流、乙醇回流、酸水超声提取三种方法的提取液中的生物总碱进行含量测定。
结果：水回流、乙醇回流、酸水超声提取液中苦参总碱含量分别为0.573%、0.652%、0.634%。
结论：以苦参总碱作为评价指标，乙醇回流结果较好，酸水超声提取次之，酸水回流最低。
关键词：不同提取方法苦参生物总碱影响
【中图分类号】r-3 【文献标识码】b 【文章编号】1008-1879（2012）12-0393-01
苦参又名地槐、野槐、牛参等，为豆科槐属植物（sophora flavescens ait）的干燥根，分布于我国南北各地[1]。
近年来医学界对苦参有效成分提取、分析及其药理等方面进行大量的研究并取得很大进展。
苦参中苦参总碱的提取方法较为常用的有溶剂提取法，包括水提和醇提，加热回流和超声提取。
目前，其总生物碱的含量测定方法有重量法、酸碱滴定法、酸性染料分光光度法[2]。
为了充分研究不同方法的生物总碱提取效率，我们分别采用酸水回流、乙醇回流、酸水超声三种方法，并采取酸性染料比色法，测定不同提取方法中苦参总生物碱的含量。
该研究为工业化生产苦参总碱提供了科学的方法。
1 材料与方法
1.1 仪器试剂。
uv2100紫外分光光度计（美国惠普公司），ph精
密数显酸度计（上海天达仪器有限公司），微量进样器（上海玻璃仪器厂）。
苦参碱由广东梅州嘉应制药有限公司提供，苦参（广东康美股份有限公司），其它试剂均为分析纯。
1.2 试液配制。
①溴麝香草酚蓝缓冲溶液的配制：量取0.1m的磷酸二氢钾50ml转移至于100ml容量瓶中，加入0.1m氢氧化钠4
2.2ml，再加蒸馏水7.6ml，用酸度计校正为7.6。
并精密称取溴麝香草酚蓝0.0125g，加入上述配制溶液使溶解，摇匀即得。
②苦参碱标准品溶液配制：精密称取苦参碱标准品15.00mg用甲醇定容到5ml，即为
3.0mg/ml。
1.3 比色法最大吸收波长。
苦参碱酸性染料比色法的最大吸收波长在400～420nm之间，以2nm为单位左右移动波长，确定最大吸收度的波长所在位置，结果显示410nm处为其最大吸收波长。
1.4 标准曲线的绘制。
取已配制好的上述苦参碱标准品溶液20、30、40、50、60ul分别置于25ml的带塞磨口锥形瓶中，置于水浴80℃蒸干溶剂，加入溴麝香草酚蓝ph=7.6闭塞剧烈振摇3min，分别转入25ml分液漏斗中，静置2h，使水层与氯仿层完全分层后，分取氯仿层，在410nm波长处测定吸收度，以未加生物碱的氯仿萃取液为空白对照[3]。
建立苦参碱含量x与吸光度a间的线性关系，采用spss作回归分析，得到方程为：
a=0.0226x+0.0122，r=0.991
说明苦参碱在60ug～180ug之间线性关系良好。
1.5 稳定性实验。
取苦参碱标准溶液40ul，按
2.3标准曲线下方法每隔1h测定其吸收度，结果表明，苦参碱和溴麝香草酚蓝在
ph=7.6缓冲溶液中形成的离子对，在氯仿中8h内是稳定的。
2 结果与分析
2.1 苦参总碱的提取。
2.1.1 酸水回流法提取苦参总碱。
将苦参药材粉碎成80目粉末，取10g，加0.3%的hcl溶液回流提取3次，提取时间分别为1.5h、1h、1h，加入hcl溶液量依次为40ml、30ml、30ml，总料液比为1∶10。
合并提取液于真空旋转浓缩至10ml，过滤，冷却，加蒸馏水定容到50ml。
2.1.2 乙醇回流法提取苦参总碱。
将苦参药材粉碎成80目粉末，取10g用95%的工业酒精回流提取3次，提取时间分别为1.5h、1h、1h，加入工业酒精的量依次为40ml、30ml、30ml，总料液比为1∶10。
合并提取液于真空旋转浓缩至10ml，过滤，冷却，加蒸馏水定容到50ml。
2.1.3 酸水超声法提取苦参总碱。
将苦参药材粉碎成80目粉末，取10g，用0.3%的hcl溶液超声提取3次，提取时间分别为1.5h、1h、1h，加入hcl溶液量依次为40ml、30ml、30ml，总料液比为1∶10。
合并提取液于真空旋转浓缩至10ml，过滤，冷却，加蒸馏水定容到50ml。
2.2 样品液总生物碱的含量测定。
分别用微量进样器吸取酸水回流、乙醇回流、酸水超声样品液各20ul，置于25ml带塞磨口锥形
瓶中，于水浴80℃蒸干溶剂，分别加入溴麝香草酚蓝ph=7.6缓冲溶液6ml，氯仿6ml，闭塞剧烈振摇5min，分别转入25ml分液漏斗中，静置2h，使水层与氯仿层完全分层后，分取氯仿层，在410nm 波长处测定吸收度，以未加样品液的氯仿萃取液为空白对照。
用工作曲线法进行定量。
结果见表1。
3 讨论
本实验采用工作曲线法进行定量，方法简单，可靠，重现性好。
用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线，求出斜率、截距。
在完全相同的条件下，准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度，或用回归方程计算。
酸性染料比色法测定样品生物总碱含量时，为了防止氯仿层中的水分测定结果的影响，应通过加吸水剂无水硫酸钠方法除去氯仿萃取液中的水分。
酸性比色法的ph值要求较高，本实验所用的溴麝香草酚蓝缓冲液，配制好必须用ph酸度计进行校正，否则会对测定结果带来影响。
参考文献
[1]辛海量，赵玉海，林峰，等.苦豆草中总生物碱含量测定[j].解放军药学学报，2002，18（2）：113-115
[2]郑虎占，董泽宏，佘靖.中药现代研究与应用[m].第3版.北
京：学苑出版社，1998.270。