生物反应器
生物反应器
3种酵母表达系统
• 甲醇营养型酵母表达系统：巴斯德毕赤酵 母(Pichia pastoris)表达系统最为常用；
• 巴斯德毕赤酵母具有翻译后修饰功能，如 信号肽加工、蛋白质折叠、二硫键形成和 糖基化作用等，其糖基化位点其他哺乳动 物细胞相同，适合于生产医药用重组蛋白 质。
3种酵母表达系统
• 裂殖酵母不同于其他酵母菌株，它具有许 多与高等真核细胞相似的特性，它所表达 的外源基因产物具有相应天然蛋白质的构 象和活性。遗憾的是，目前对它的研究较 少。
动物细胞生物反应器
• 昆虫细胞； • 哺乳动物细胞； • 鱼类细胞。
昆虫细胞生物反应器
• 昆虫杆状病毒表达系统( BEVS)： 病毒载体、昆虫细胞、宿主培养基； 与细菌 、酵母、 哺乳动物细胞表达系统相比，
具有易于操作和筛选， 较好的转录后加工 修饰以及安全等优点； 缺点：昆虫细胞的蛋白质加工过程并非同高 等的真核生物完全一致， 最终会影响到表 达产物的生物学活性。
家蚕丝腺生物反应器
• 家蚕是人工养殖的经济昆虫， 蚕的丝腺作 为生物反应器来表达重组的外源蛋白具有 极高的商业价值与应用前景。
家蚕丝腺生物反应器
• 存在的问题： 丝腺中主要以丝蛋白分泌为主，给目的蛋白
的下游分类纯化带来了困难； 与杆状病毒表达系统一样存在蛋白质转录后
修饰的问题； 如何将外源基因稳定的转入家蚕体内，同时
• 真核单细胞、结构简单、 因序列已经完全测 得, 序列结构比较清楚, 利于遗传操作;
• 培养条件简单, 可以大规模培养, 易于工业化 生产; 核转化与叶绿体转化方法成熟;
• 衣藻作为真核生物, 可以对真核蛋白质进行准 确的翻译后加工修饰( 如: 正确的折叠等) ;
• 衣藻本身不带有对人体有害的生物, 如病毒、 细菌等, 这就使得其表达的产物不会含有毒素 等有害物物质, 从而减少纯化步骤, 大大降低成 本。
生物反应器
生物反应器指以活细胞或酶为生物催化剂进行细胞增殖或生化反应提供适宜环境的设备，它是生物反应过程中的关键设备。
生物反应器的结构、操作方式和操作条件的选定对生物化工产品的质量、收率（转化率）和能耗有密切关系。
生物反应器的设计、放大是生化反应工程的中心内容，也是生物化学工程的重要组成部分。
分类从生物反应过程说，发酵过程用的反应器称为发酵罐；酶反应过程用的反应器则称为酶反应器。
另一些专为动植物细胞大量培养用的生物反应器，专称为动植物细胞培养装置。
发酵罐发酵罐若根据其使用对象区分，可有：嫌气发酵罐、好气发酵罐、污水生物处理装置等。
其中嫌气发酵罐最为简单，生产中不必导入空气，仅为立式或卧式的筒形容器，可借发酵中产生的二氧化碳搅拌液体。
若以操作方式区分，有分批操作和连续操作两种。
前者一般用釜式反应器，后者可用连续搅拌式反应器或管式及塔式反应器。
好气发酵罐按其能量输入方式或作用原理区分，可有：①具有机械搅拌器和空气分布器的发酵罐这类发酵罐应用最普遍，称为通用式发酵罐。
所用的搅拌器一般为使罐内物料产生径向流动的六平叶涡轮搅拌器，它的作用为破碎上升的空气泡和混合罐内的物料。
若利用上下都装有蔽板的搅拌叶轮，搅拌时在叶轮中心产生的局部真空,以吸入外界的空气,则称为自吸式机械搅拌发酵罐。
②循环泵发酵罐用离心浆料泵将料液从罐中引出，通过外循环管返入罐内。
在循环管顶端再接上液体喷嘴，使之能吸入外界空气的,称喷射自吸发酵罐。
③鼓泡塔式发酵罐以压缩空气为动力进行液料搅拌，同时进行通气的气升发酵罐。
目前，世界所发展的大型发酵罐是英国卜内门化学工业公司的发酵罐，它以甲醇为原料生产单细胞蛋白的压力循环气升发酵罐,其直径为7m，高为60m，总容量为 2300m□，自上至下有5000～8000个喷嘴进料。
目前，还有些发酵产品，如固体曲等，使用专门设计的能调节温、湿度的旋转式固体发酵装置。
生产甲烷（沼气）用的是嫌气发酵罐，也称消化器或沼气发生器，这种发酵罐装有搅拌器，顶部有的有浮顶。
《生物反应器》课件
。
新药研发中的应用实例
01
药物筛选
利用生物反应器进行药物筛选， 寻找具有药效的化合物或微生物 。
药物合成
02
03
药物改造
通过生物反应器合成药物，如蛋 白质、多糖等，提高药物的生产 效率和纯度。
利用生物反应器对药物进行改造 ，如蛋白质工程、基因工程等， 提高药物的疗效和安全性。
05
生物反应器的发展趋势与挑战
生产成本
生物反应器的生产成本较高，需要采取有效措施降低成本，提高经济 效益。
人才短缺
生物反应器技术的发展需要大量的专业人才和技术工人，但目前市场 上相关人才短缺，制约了产业的发展。
生物反应器的未来展望
广泛应用
随着生物技术的不断发展和 应用领域的扩大，生物反应 器将在医药、食品、化工等 领域得到更广泛的应用。
生物反应器应能高效地进行生物反应，确保 高转化率和产物浓度。
适应性原则
生物反应器应能适应不同的生物反应需求， 具备灵活性和可扩展性。
稳定性原则
生物反应器应具备稳定的操作性能，保证反 应的连续性和可靠性。
易于维护原则
生物反应器应便于清洁、维修和保养，降低 运营成本。
生物反应器的优化目标
提高转化率
通过优化反应条件和操作参数，提高生物反 应的效率。
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01
温度
维持适宜的温度，保证微生物的正 常生长和代谢。
溶解氧
维持适宜的溶解氧浓度，以满足微 生物的需氧需求。
03
02
pH值
维持适宜的pH值，保证微生物的正 常生长和代谢。
底物浓度
控制底物浓度，以调节微生物的生 长和产物生成。
04
生物反应器的效率评估
生物反应器
生物反应器生物反应器是一种生物技术设备，主要用于生物发酵、生物转化和生物固定化等过程的实现，是生物技术学领域中的核心设备之一。
生物反应器按规模大小可分为实验室规模、小型工业规模、大型工业规模及超大型规模，广泛应用于生物制药、食品工业、环保工程、化工领域及实验室研究等不同领域。
本文主要介绍生物反应器的基本概念、分类、结构、功能与应用等方面的内容。
一、生物反应器的基本概念生物反应器是一种专门用于维持和促进生物体生长繁殖，并对物质能量进行转化的设备。
是利用微生物生长代谢的能力，进行化学制品或生物制品的生产。
反应器内部常温度、氧气含量、pH值、营养物浓度等参数进行监测与控制，以维持接近理想的生长环境，从而提高微生物总体产量和单独化合物的产量。
二、生物反应器的分类按微生物名称分为真菌反应器和细胞反应器两种；按操作条件分为常压和高压反应器两种；按反应器内混合方式分为不同类型，如机械混合反应器、气液混合反应器、液相连续搅拌反应器、固相悬浮式反应器等；按生产工艺分则有批量式反应器、半连续式反应器和连续式反应器等。
三、生物反应器的结构生物反应器结构包括传质层、反应层和生物活性层三个部分。
传质层由反应器外壳和传质器件（气体传输系统与吸收液传输系统）组成，热量传递和质量传递的效率决定于传质器件的选择和设计。
反应层由反应器罐体、搅拌器、传热器、控制仪等组成，其内部环境的压力、温度、营养物浓度、气相浓度、氧含量、pH值等参数决定了反应的产物和效率。
生物活性层是一个重要的环节，是水生生物或微生物参与反应的主要部分。
其中，微生物是生物活性层的核心，它们根据营养状态发生生长、代谢和能量转换等复杂的反应，完成指定的反应目的。
四、生物反应器的功能生物反应器的主要功能是实现微生物生长代谢和化学过程，从而获得所需的生物制品或化学成品。
其次，需要满足反应器内环境的生物学和物理学参数要求，如空气、水、营养物、pH、pO2、温度、压力、流量等参数，确保最大的反应效率和最佳的反应条件。
生物反应器归类
生物反应器归类
生物反应器是一种用于承载和促进生物反应的装置或体系。
根据反应
器的实际应用和操作原理，可以将生物反应器分为几个类别。
1. 发酵反应器：用于微生物发酵过程的反应器，用于生产食品、饲料、药物和生物燃料等。
常见的发酵反应器包括批式发酵罐、连续式发酵
罐和气体提升式发酵罐。
2. 培养反应器：用于细胞培养和组织工程的反应器，用于生产生物药
物和细胞制品。
常见的培养反应器包括摇床培养器、旋转培养器和悬
浮培养反应器。
3. 污水处理反应器：用于处理废水和污水中的有机物和有毒物质。
常
见的污水处理反应器包括活性污泥法反应器、膜分离法反应器和生物
滤池。
4. 生物酶反应器：用于生产酶类产物和催化生物酶反应的反应器。
常
见的生物酶反应器包括固定床反应器、悬浮式反应器和液体-液体界面
反应器。
5. 生物电化学反应器：用于转化生物质和废弃物为电能的反应器。
常
见的生物电化学反应器包括微生物燃料电池、微生物电解池和生物燃
料池。
以上是一些常见的生物反应器类别，各类反应器在不同领域有广泛应用，以满足人类对食品、药物、能源和环境保护等方面的需求。
生物反应器技术及其应用
生物反应器技术及其应用生物反应器技术是一种利用生物体系来合成有机化合物或去除有机废水的生产技术。
生物反应器具有环保、高效等优点，因此在医药、化工、食品、环保等领域有着广阔的应用前景。
1.生物反应器技术概述生物反应器是一种生物化学反应器件，它是建立在生命哲学、生物科学、化学工程等基础上，为满足化学工业中合成某些化学品的需要，而人工构造出的一种封闭空间。
生物反应器技术的核心是生物反应器，它是一种用于控制生物体系物理和化学环境的装置；而生物体系则是一种可以代替化学反应剂的、可以利用微生物或植物转化为目的物质的生物催化剂。
对于生物反应器技术而言，其核心组成是生物反应器和生物体系。
生物反应器可以大致分为搅拌式反应器、固定床反应器、流化床反应器、膜反应器、喷雾干燥机等，而生物体系则包括微生物、植物等生物催化剂。
2.生物反应器技术的应用生物反应器技术有广泛的应用领域。
在医药领域，生物反应器技术被用于制造药物的原料、中间体和成品药。
例如，利用生物反应器技术，可以大规模生产青霉素、氨基酸、多糖、酶类等医药中间体和成品药，降低生产成本和减少环境污染。
另外，在化工领域，生物反应器技术可以用于生产生物基材料和化学合成原料等产品。
比如，生物反应器技术可以利用微生物发酵制备乙醇和葡萄糖等化学原料，并提高产品的品质和产量。
在食品领域，生物反应器技术可以用于生产各种功能性食品和保健品。
例如，利用生物反应器技术制作的乳酸菌、酵母等食品添加剂，可以增加食品的营养性、口感和品质。
此外，在环保领域，生物反应器技术可以用于处理含有有机污染物的废水。
生物反应器技术可以利用微生物和植物调节废水的化学成分，降低化学氧化需求量（COD）、氨氮、总磷等有机物排放量和水体中的有害物质，达到净化水体的目的。
3.生物反应器技术的发展趋势随着环保意识的提高和科技发展的不断进步，生物反应器技术及其应用也将迎来新的发展机遇。
其中，人工智能技术的应用将是未来生物反应器技术发展的一个重要趋势，其可以通过智能算法和模拟建模等方法实现反应器过程的优化实现，提高生产效率，节约能源和资源。
生物反应器工作原理
生物反应器工作原理生物反应器的工作原理生物反应器是一种能够利用生物转化过程进行生产的设备，它可以支持和促进生物体内的生化反应。
生物反应器一般由反应容器、搅拌装置、温控系统、通气系统等组成，其工作原理依赖于生物体的生长、代谢和微生物的作用。
1. 生物反应器的基本原理生物反应器是为了在控制条件下促进生物体内的生化反应而设计的。
它提供了一个适合于生物体生长和代谢的环境，以支持其在反应器内进行所需的生化反应。
关键因素包括温度、满足生物体需要的底物和营养物质、pH值的维持和氧气的供给等。
2. 温控系统温控系统是生物反应器中的一个重要组成部分，它通常由温度传感器、加热装置和温度控制器组成。
通过感测反应器内的温度变化，控制器可以自动调节加热装置的输出来维持所需的反应温度。
保持适宜的温度可以提供生物体生长所需的理想环境，加速生化反应速率。
3. 搅拌装置搅拌装置用于保持反应器内物质的均匀混合，促进物质传递过程。
对于生物反应器而言，搅拌装置的设计旨在防止生物体的沉降和死区形成，使反应器内物质分布更加均匀。
搅拌装置的形式多种多样，包括机械搅拌、气体搅拌、涡流搅拌等。
4. 底物和营养物质的供给生物反应器中的底物和营养物质是支持生化反应进行的重要因素。
底物通过给定的供给策略被添加到反应器中，以满足生物体生长和代谢的需求。
供给策略可以根据具体反应的要求进行调节，例如连续供给、批次供给或脉冲供给等。
5. pH值的维持pH值对于生物体内的生化反应非常重要，它可影响酶的活性、细胞壁的稳定性和底物的溶解度等。
生物反应器中通常使用缓冲液来维持适宜的pH值。
pH值的控制可以通过添加酸或碱来调节，通常借助于自动控制系统来维持所需的pH范围。
6. 氧气供给氧气是生物体进行代谢反应所必需的。
在许多生物反应器中，气体搅拌是将氧气与培养基混合的常见方法。
通过气体供给系统，可控制氧气的流速、溶解度和分布，以满足生物体对氧气的需求。
7. 生化反应生物反应器的工作原理依赖于生物体的生长和代谢过程。
生物反应器
流动特性
升、降液管中气含率不同导致的流体密度差是流体循
环的主要动力，通气率大小是影响流体速度的重要因 素。 升、降液管的横切面积相对大小对循环速度也产生影 响。
循环速度？
升液管内氧含量丰富，细胞生长旺盛；降液管氧含量
下降，易产生缺氧。 液体微元体在反应器内循环一周所需时间为一个循环 周期，
组合模型
微观混合的定量描述
微观混合通常用混合程度m和混合时间tm两个参数表示。
tm为达到m时的值，一般采用0.95或0.99。
机械搅拌反应器的混合模型
分室模型
再循环模型
气体搅拌塔式反应器
与机械搅拌通风反应器的不同在于无机械搅拌 特点是结构简单；氧传递效率高；耗能低；减少了剪
反应速率：
对于均相酶促催化反应
单底物酶促反应BSTR的反应器
对于细胞反应
分批培养细胞生长的六个阶段 停滞期
加速生长期 负生长 期 减速生长 期 平衡生长期
指数生长期
对数生长期细胞生长时间的计算
对数生长期，比生长速率达到最大
代入积分式后积分得到
对于间歇操作的反应器，反应物要达到一定的反应程
度，仅与过程的速率有关，而与反应器的大小无关。
产率是优化的目标函数 若以产物浓度最高为目标——总产率；若以最大产物
生成速率时为反应终止时间——最大产率。
连续操作搅拌反应器
操作特点： 进出料速率相同，且保持恒定 反应器内变量不随时间变化，处于稳态操作 反应器内物料在空间上达到完全混合，各处物系组成 相同。
轴流式搅拌器——叶面与轴成一定角度
径向流搅拌器——叶面平行于搅拌轴
反应器内挡板有利于次生流的产生，最佳的挡板设计 数目可根据以下公式：
第6章 生物反应器
第6章生物反应器生物反应器就是指提供适宜细胞生长和产物形成的各种条件，促进细胞的新陈代谢，在低消耗下获得高产量的一种反应设备。
一个优良的发酵罐应具备的条件：1)结构简单;2)不易染菌;3)良好的液体混合性能;4)较高的传质传热速率;5)单位时间单位体积的生产能力高;6)同时还应具有配套而又可靠的检测和控制仪表。
工业生产用的发酵罐趋向大型化和自动化。
6.1 通风发酵罐一、通用式发酵罐又称机械搅拌通气式发酵罐，使之既有机械搅拌装置，又有压缩空气分布装置的发酵罐。
1、工作原理是利用机械搅拌器的作用，使空气和发酵液充分混合，提高发酵液的溶解氧。
一个好的通用式发酵罐的基本条件：1)具有适宜的径高比；通常H/D = 2～4，罐身长有利于氧的溶解2)能承受一定压力；水压试验压力为工作压力的1.5倍，即0.38MPa3)搅拌通风装置要能使气泡分散细碎，气液充分混合，保证发酵液必须的溶解氧，提高氧的利用率4)具有足够的冷却面积；5)罐内应抛光，尽量减少死角，使灭菌彻底，避免染菌；6)搅拌器的轴封应严密，尽量减少泄漏。
2、结构特点发酵罐主要部件包括罐身、搅拌器、轴封、消泡器、联轴器、空气分布器、挡板、冷却装置、人孔及视镜等。
1) 罐体罐体由圆柱体及椭圆形或碟形封头焊接而成，材料为碳钢或不锈钢2) 搅拌器和搅拌轴其作用一是打碎空气气泡，增加气－液接触界面，以提高气－液间的传质速率；二是为了使发酵液充分混和，液体中的固形物料保持悬浮状态。
3) 挡板其作用是为防止发酵液随搅拌器运转而产生旋涡，以提高混合效果。
4) 空气分布器其作用是将无菌空气引入到发酵液中同时初步分散气泡。
5) 冷却装置在发酵过程中，细胞呼吸和机械搅拌都将产生一定热量，为了保证发酵在一定温度下进行，必须将这些热量及时移去，因此需要设置冷却装置。
6) 消泡器分耙式消泡器和半封闭涡轮消泡器二、机械搅拌自吸式发酵罐利用机械搅拌的高速旋转而吸入空气的一种发酵罐。
《生物反应器》课件
通过本课件，我们将深入探讨生物反应器的全貌。从定义，分类，结构和原 理，应用领域，优点和挑战，以及未来的发展趋势，让我们一起探索这个令 人着迷的领域。
什么是生物反应器？
生物反应器是一种用于控制和维持特定生物反应过程的装置。它提供了理想的环境条件，以促进 生物反应的进行。
1 定义
生物制药
环境修复
生物反应器在生产生物药物和医 疗相关产品方面发挥着重要作用。
通过利用生物反应器来处理和净 化废水和废气等环境污染物。
生物燃料
生物反应器可用于生产可再生能 源，如生物柴油和生物乙醇。
生物反应器的优点和挑战
优点
生物反应器具有高效、环保、可控性强等优点， 适用于多种生物反应过程。
挑战
生物反应器的设计和操作需要专业知识和精细 调控，同时面临成本和规模扩展的挑战。
生物反应器是指能够维持生物反应过程的操作设备。
2 分类
根据反应器操作方式和反应类型，生物反应器可以分为不同的类别。
生物反应器的结构和原理
结构
生物反应器通常由反应容器、搅拌装置、进出料口 和传感器等组成。
原理
生物反应器的原理基于对生物过程中必要因素的控 制，如温度、氧气供应、营养物质和pH值。
生物反应器的应用领域
生物反应器的发展趋势
1
自动化与智能化
生物反应器将趋向自动化操作，并结合人工智能技术实现更智能的反应器将更加注重资源的有效利用和环境的可持续性。
3
多功能和定制化
生物反应器将能够满足不同反应过程的需求，实现定制化设计。
总结和展望
生物反应器作为一种核心技术，将不断推动生物科学和工程的进步。我们期 待未来的创新和发展，以应对全球的挑战。
生物反应器在生物制造中的应用
生物反应器在生物制造中的应用生物制造是利用生物技术生产化学品、药物和食品等生物产物的过程。
生物反应器作为生物制造的核心设备，可以有效地控制反应环境，提高产物的产量和纯度。
本文将介绍生物反应器在生物制造中的应用。
一、生物反应器概述生物反应器是在控制的环境中用于维持和增殖微生物或细胞的设备。
它包括固定化生物反应器、悬浮式生物反应器、压力发酵罐等多种形式。
生物反应器一般由反应容器、搅拌器、温度和pH 控制系统及其他配套设备组成。
二、生物反应器的应用（一）医药制造生物反应器在医药制造中广泛应用。
例如，利用细胞培养技术在生物反应器中生产单克隆抗体，可应用于各种疾病的治疗。
在疫苗的制备过程中，生物反应器也扮演着不可或缺的角色。
此外，生物反应器还可以用于生产重要药物如青霉素、链霉素等。
（二）食品生产生物反应器在食品生产中也有广泛应用。
例如，用于乳酸菌、酵母菌和酸奶菌等微生物的培养，生产酸奶、面包、酒类等产品。
另外，生物反应器还被用于大规模生产多种生物来源的添加剂，如单一细胞蛋白和微生物发酵的氨基酸等。
（三）化学品生产生物反应器在化学品生产中也有非常重要的作用。
利用生物反应器的优良特性，可以让微生物在化学反应中起到催化作用，从而提高合成反应效率。
例如，通过在生物反应器中进行生物催化反应，可以制备高价值的氨基酸和药物中的氨基葡萄糖等。
（四）环境清洁生物反应器在环境清洁方面也有应用。
例如，生态修复和废水处理等方面。
其中最常见的是废水处理，生物反应器可以通过利用微生物对废水中有机物和无机物的生物降解，以达到净化水质的目的。
此外，生物反应器也可以净化气体，例如，利用微生物对废气中的VOCs进行生物降解，从而减少对环境的污染。
三、生物反应器的优势（一）高效生物反应器可以有效地控制反应环境，以最大化产物的产量和纯度。
在生产工艺中，一般采用生物反应器来生产化学品、药品和食品等生物制品，因为其生产效率更高。
（二）安全生物反应器生产的产品相比化学合成等传统工艺的产品更安全可靠。
生物反应器是指什么
生物反应器，是指利用酶或生物体(如微生物、动植物细胞等)所具有的特殊功能，在体外进行生物化学反应的装置系统。
生物反应器与化学反应器不同。
化学反应器从原料进入到产物生成，常常需要加压和加热，是一个高能耗过程。
而生物反应器则不同，在酶和微生物的参与下，在常温和常压下就可以进行化学合成。
因此，生物反应器问世之后，就受到化工部门的重视。
化学工程专家认为，应该尽可能多地让化学合成过程由生物去完成。
设计理想的生物反应器，就成了现代生物技术产业的一个重要任务。
设计生物反应器时要考虑两点：一是选择特异性高的酶或适宜的活细胞作为催化剂，尽可能减少副产物，提高产品产量；二是尽可能提高产物的浓度，降低成本。
生物反应器首先在发酵工业中得到应用。
发酵工业中使用的生物反应器，实际上是发酵罐。
另一种是以固定化酶或固定化细胞为催化剂的酶反应器。
世界上最大的发酵罐高达100米，直径7米，容积为4000立方米。
《生物反应器》课件
REPORTING
生物反应器的结构设计
结构设计原则
生物反应器的结构设计应遵循简 单、稳定、高效的原则，确保工 艺流程的顺畅和生产效率的提高
。
结构种类
常见的生物反应器结构包括搅拌槽 式、固定床式、流化床式、膜式等 ，应根据生产需求和工艺特点选择 合适的结构形式。
结构设计要素
结构设计需考虑进出料、换热、消 泡、搅拌等装置的配置，以及反应 器容积和放大效应等因素。
PART 04
生物反应器的应用实例
REPORTING
工业生产中的应用实例
微生物发酵
利用生物反应器进行微生 物发酵，生产酒精、抗生 素、酶制剂等产品。
动物细胞培养
通过生物反应器大规模培 养动物细胞，生产疫苗、 单克隆抗体等生物药物。
植物细胞培养
利用生物反应器进行植物 细胞培养，生产天然植物 次生代谢产物。
生物反应器的应用领域
生物制药
用于生产各类抗体、疫 苗、细胞因子等生物药
物。
农业领域
用于植物细胞培养、动 物细胞培养等，以生产
转基因作物和动物。
环保领域
用于处理废水、废气等 环境污染问题，以及资
源回收和再利用。
食品工业
用于生产各类食品添加 剂、调味品、酶制剂等
。
PART 02
生物反应器的工作原理
REPORTING
定律。
酶的活性受到温度、pH值、底物浓度等多种因素的 影响，因此在生物反应器的操作过程中需要密切关注
这些参数的变化。
生物反应器的物质转化涉及到各种化学物质的 合成和分解过程，这些过程通常是由酶催化的 。
酶是生物反应器中最重要的物质转化催化剂之一 ，它能够加速化学反应的速率并降低活化能。
生物反应器
机械搅拌式生物反应器的进展
细胞提升桨生物反应器（1990） 双圆筒筛搅拌式生物反应器（1992） 脉冲混合式生物反应器（1993） 泡床式搅拌生物反应器（1994） 离心桨生物反应器（1996） 固定化酶搅拌桨反应器（2005）
微藻培养中光生物反应器的研究进展
开放式光生物反应器
(1)易受外界环境影响，难以保持较适宜的温度与光 照； (2)会受到灰尘、昆虫及杂菌的污染，不易保持高质 量的单藻培养 (3)光能及CO2 利用率不高，无法实现高密度培养
软骨组织工程生物反应器研究进展
软骨组织工程技术的发展已进入体外构建的关键阶段。生物 反应器能在体外动态模拟体内微环境中物质转运和流体应力刺激 反应,从而实现体外经生物力学途径调控软骨细胞的基因表达和增 殖。传统的二维或静态压力型生物反应器难以构建功能接近于正 常的软骨,各种可即时智能调控的微重力、灌流液压、微载体等新 型生物反应器使得培养基环境的调控更加高效、精确化,培养的三 维软骨组织在形态、基因表达及力学特性上均更接近于正常软骨 组织。
研究方向
1.利用生物反应器, 特别是植物反应器生产药用蛋白和疫苗已成为制 药产业重点开发的热点领域。 2.开发活性高、选择性好及寿命长的生物催化剂。 3.改进生物反应器的传质、传热的方法。 4.生物反应器向大型化和自动化方向发展。 5.特殊要求的新型生物反应器的研制开发，如基因产品生产、细胞固 定化及动植物细胞培养的工业反应器，固体发酵反应器、边发酵 边分离反应器等的开发研制已获得广泛重视。 6.降低设备投资方面，对连续过程更加重视。
进展情况
空间生物反应器的进展
早期发展成熟的空间生物培养反应器的操作方式主要是灌流 式。
旋转壁式生物反应器、细胞培养单元反应器、单 环路细胞培养反应器、微型连续培养反应器。
生物反应器原理
生物反应器原理生物反应器是一种利用生物体进行化学反应的装置，它在生物工程领域中扮演着至关重要的角色。
生物反应器的原理主要包括反应器类型、反应器的操作原理和反应器的应用。
本文将从这三个方面对生物反应器的原理进行详细介绍。
首先，我们来看一下生物反应器的类型。
生物反应器的类型多种多样，常见的有批量式反应器、连续式反应器和循环式反应器等。
批量式反应器是将反应物一次性加入反应器中，然后进行反应，适用于小规模实验。
连续式反应器则是在反应过程中持续加入反应物和取出产物，适用于大规模生产。
循环式反应器则是将反应物循环使用，以提高反应效率。
不同类型的反应器在不同的场合有着各自的优势和局限性，选择合适的反应器类型对于反应的效率和产物的纯度至关重要。
其次，我们来了解一下生物反应器的操作原理。
生物反应器的操作原理主要包括反应条件的控制、生物体的生长和代谢以及产物的提取等。
在进行生物反应时，需要控制好反应温度、pH值、氧气供应和营养物质的供给等条件，以提供良好的反应环境。
此外，生物体的生长和代谢过程也是生物反应器操作的关键，需要合理控制生物体的生长速率和代谢产物的生成速率。
最后，对产物的提取也需要进行精确的操作，以保证产物的纯度和产量。
最后，我们来探讨一下生物反应器的应用。
生物反应器在生物工程领域中有着广泛的应用，包括生物制药、生物能源、环境保护和食品加工等方面。
在生物制药中，生物反应器被用于生产抗生素、激素、酶和疫苗等药物；在生物能源领域，生物反应器被用于生产生物柴油、生物乙醇和生物气等可再生能源；在环境保护中，生物反应器被用于处理污水、废气和固体废物等；在食品加工中，生物反应器被用于发酵食品的生产，如酸奶、酒精和酱油等。
总的来说，生物反应器作为一种利用生物体进行化学反应的装置，在生物工程领域中有着广泛的应用前景。
通过对生物反应器的类型、操作原理和应用进行深入了解，可以更好地应用生物反应器进行工程实践，推动生物工程领域的发展。
生物反应器操作指南
生物反应器操作指南简介：生物反应器（bioreactor）是一种生物化学工程中常用的设备，用于在控制的环境条件下进行生物反应和培养。
本文档将为您提供一份详细的生物反应器操作指南，旨在帮助您正确、安全地操作生物反应器，以获得最佳的实验结果。
一、安全操作指南1. 穿戴个人防护装备：在操作生物反应器时，必须佩戴适当的个人防护装备，包括实验室外套、手套、护目镜和鞋套。
这些装备能够有效地降低意外伤害的风险。
2. 确保设备安全：在使用生物反应器之前，务必检查设备的安全性能。
确保设备的密封性良好，机械部件正常运转，电源接线无异常，从而避免潜在的危险。
3. 准备紧急应对措施：在操作生物反应器的同时，随时保持警惕并准备好应对紧急情况的措施。
熟悉实验室的紧急停机程序、防触电和急救方法，以及应急电话号码等信息。
二、准备工作1. 清洗和消毒：在开始使用生物反应器之前，必须对其进行彻底的清洗和消毒。
使用适当的清洁剂和消毒剂，彻底清洗所有表面和零件，以确保实验样品不受到污染，并减少生物反应器内环境的细菌和病毒的存在。
2. 添加培养基：根据实验需求，准备好适当的培养基，并按照生物反应器的容量和要求进行添加。
务必严格遵守培养基制备和配制的标准操作程序，确保培养基的质量和浓度。
3. 设置操作参数：在准备阶段，您需要根据实验的要求和目标设置合适的操作参数，如温度、pH值、搅拌速度和气体流量等。
这些参数将直接影响到生物反应器的反应和培养效果。
三、生物反应器操作步骤1. 启动生物反应器：合理连接生物反应器的电源和气源，保证电源接线正确、电压稳定，并确保气源无泄漏。
按照操作手册中的启动程序，依次打开电源开关、气体阀门和液体进料阀门，实现生物反应器的启动。
2. 监控和调节参数：在生物反应器运行期间，密切关注监控参数的变化，并根据需要进行及时调节。
通过观察液位、温度、pH值、溶氧度等参数的变化，及时对液体进料、温度控制、pH调节和气体供应进行调整。
生物反应器类型
生物反应器类型生物反应器是指一个用来模拟和控制生物过程的装置，常用于生物学、生化工程等领域。
生物反应器广泛应用于制药、化工和环保等领域，是一个非常重要的工具。
生物反应器一般分为多种类型，本文将详细介绍这些类型。
一、批式反应器批式反应器是最简单最基本的类型，它是一个封闭的容器，里面装有生物材料、培养基和所需的气体。
通常情况下，反应器会以一定温度、pH值和氧气浓度下进行反应。
时间到后，反应器会被打开，产物被取出。
批式反应器优点：操作简单，成本较低。
批式反应器缺点：生产周期长，产量小。
二、连续搅拌式反应器连续搅拌式反应器对批式反应器进行了改进，其关键在于通过搅拌系统不断输入新鲜的培养基和气体，同时也会将产物不断排出。
这种类型通常用于生产大量的微生物和酶。
连续搅拌式反应器优点：生产周期短，产量大。
连续搅拌式反应器缺点：会对微生物和酶产生一定的压力，需要考虑控制温度和pH值等，生产成本较高。
三、柱床反应器柱床反应器通常被用于某些特殊的生产需求，如病毒制备、蛋白质纯化等。
这种类型的反应器是通过填充物质，如树脂、磁性珠等构成一定的反应体系。
当培养基流过柱床时，反应体系中的微生物或酶与培养基发生反应，产生物质被吸附在柱床材料上。
柱床反应器优点：高效、高纯度。
柱床反应器缺点：成本高昂。
四、固定床反应器固定床反应器类似于柱床反应器，只是其填充物是生物材料。
在固定床反应器中，微生物或酶被固定在固体支架上，并与流经反应器的培养基相互作用。
固定床反应器优点：生产周期短，产量大，适用于大规模生产。
固定床反应器缺点：操作和控制比较复杂，成本较高。
五、膜反应器膜反应器是将微生物或酶放在半透膜上进行反应。
通过这种方式，微生物或酶可以在两个不同介质之间进行反应，并且可以控制分子的输送速度。
膜反应器常用于生产分离、浓缩或净化蛋白质、细胞等物质。
膜反应器优点：高效、产物纯度高、操作简单。
膜反应器缺点：膜的选择非常关键，成本较高。
综上所述，各种类型的生物反应器都有其优点和缺点，在实际应用中需要根据不同生产需求和特殊情况进行选择。
生物反应器基础及应用
生物反应器基础及应用生物反应器是指将生物体（如微生物、动植物细胞）培养在一定条件下进行生长、代谢和产物产生的装置。
生物反应器被广泛应用于生物工程、食品工程、医药生产、环境保护等领域。
一、生物反应器的组成生物反应器主要由容器、搅拌器、控制系统、传感器、传热系统、通气系统、底部排放系统等基本组成部分构成。
其中，容器是整个生物反应器的主体，用于盛放培养物体积，通常由不锈钢或玻璃等材料组成。
搅拌器作用在于保证培养物中的细胞能够均匀分布并得到充分的养分供应。
传感器和控制系统共同起到监测和调控反应器的各种参数的作用，如控制反应器中的物质浓度、温度、酸碱度等。
传热系统和通气系统主要作用在于保持培养物中的细胞生存所必需的理想环境。
底部排放系统可以控制反应器内的副产物和废物排放，保持反应器的稳定性和纯度。
二、生物反应器中微生物的生长和代谢微生物培养的生长和代谢通常分为四个阶段：起始阶段、指数期、稳定期和衰退期。
在起始阶段，微生物吸收和利用外源性养分来满足生长所需，但此时细胞密度仍较低，细胞分裂率也较低。
指数期是典型的生长期，此时微生物细胞数量急剧增多，细胞分裂率也明显提高。
在稳定期，微生物分裂率逐渐减少，但仍保持相对稳定的生长速度。
衰退期是指生物反应器中的微生物细胞密度逐渐降低，进入死亡阶段，这通常是由于细胞密度过高、养分不足等原因造成的。
微生物代谢通常分为两种方式：葡萄糖的有氧代谢和无氧代谢。
有氧代谢是指微生物消耗有氧条件下的养分进行代谢，通常产生二氧化碳和水。
无氧代谢是指微生物在缺氧情况下进行代谢，通常产生乳酸或酒精等产物。
三、生物反应器的应用生物反应器可以应用于多个领域，如生物制药、环境治理、食品加工等。
在生物制药领域，生物反应器被广泛应用于药物的大规模生产和品质稳定性研究。
例如，利用生物反应器培养大肠杆菌生产胰岛素、重组酪蛋白等。
生物反应器还被用于细胞培养和重组DNA技术相关的实验研究。
在环境保护领域，生物反应器可以用于废水处理和废弃物处理。
生物反应器
•
•
生物 反应器 生物 反应器
• 生物反应器潜在的社会价值是 无可估量的。在未来几年内， 将有多种动物乳腺生物反映器 重组蛋白上市，从而形成市场 前景广阔和利润巨大的新生物 制药行业。
张 鑫
王 吟
霍 博 超
目
录
• • • • • 概念 动物反应器 微生物反应器 植物反应器 家蚕反应器
概
•
念
生物反应器是利用生物体所具有的生物功能，在体外或 体内通过生化反应或生物自身的代谢获得目标产物的装 置系统、细胞、组织器官等等。 生物反应器听起来有些陌生，基本原理却相当简单。 生物工程上的生物反应器是在体外模拟生物体的功能， 设计出来用于生产或检测各种化学品的反应装置。或者 说，生物反应器是利用酶或生物体（如微生物）所具有 的生物功能，在体外进行生化反应的装置系统，是一种 生物功能模拟机，如发酵罐、固定化酶或固定化细胞反 应器等。
家蚕 反应器
桑蚕生物反应器主要有两种形式
1.转基因桑蚕(transgenic silkworm) 2.杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression Vector System,BEVS)。
技术
力量
• 国内现有技术力量包括中科院上海生化与细胞研 究所、浙江理工大学、浙江大学、中山大学、中 科院武汉病毒所、中国农科院、南京大学、西北 农业大学等单位已基本建立工作基础。 • 中科院上海生化所在昆虫（家蚕）杆状病毒系统 和高效表达载体等上游工作具有较强优势。浙江 理工大学在家蚕生物反应器生产基因工程口服药 物及产业化和家蚕蛋白功能组学研究积累许多工 作基础，“家蚕生物反应器生产生物制品的方法” 获得了2004年国家技术发明二等奖。
• •
植物
生物反应器原理
生物反应器原理生物反应器是一种用于生物过程的设备，它能够提供适宜的环境条件，使生物体能够进行繁殖、生长、代谢和产生有用产物等活动。
生物反应器原理是指通过控制和优化反应器内的环境参数，以实现最佳生物反应过程的基本理论和方法。
一、生物反应器的基本构成和工作原理生物反应器由反应器本体、控制系统以及传感器组成。
反应器本体通常由容器、进出料口、搅拌装置、温度调节装置和通气系统等组件组成。
控制系统是用来监测和调整反应器内的温度、压力、酸碱度和营养物浓度等参数，以保持反应器内的环境稳定。
传感器用于实时监测和传输反应器内的各种参数数据。
生物反应器的工作原理是通过提供适宜的温度、pH值、溶解氧以及养分等条件，使微生物或细胞在反应器中进行代谢和生长，从而实现有机物的生物转化或产物的生物合成。
在反应器内，微生物或细胞与底物进行接触、酶促反应或代谢反应，并在适当的环境和资源供给下完成所需的生物过程。
二、典型的生物反应器类型1. 批量型生物反应器批量型生物反应器是最简单的反应器类型，它在反应开始时一次性放入所有的反应物，反应过程没有进料或排放。
它适用于小规模实验室研究和部分生物制药工艺。
2. 连续型生物反应器连续型生物反应器是将底物连续地输送到反应器中，同时将产物连续地排放出来。
它有稳定的温度、pH值和营养物浓度等产出，适用于大规模生产。
3. 循环型生物反应器循环型生物反应器是将反应物和生物体连续地循环，使反应物始终与生物体接触。
这种反应器能够获得更高的产物含量，并减少废物的排放。
4. 固定化生物反应器固定化生物反应器是将微生物或细胞固定在固体载体上，用来提高微生物或细胞的稳定性、降低操作成本和提高产物纯度。
三、生物反应器的参数控制和优化生物反应器的参数控制包括温度控制、pH值控制、氧气供应控制和营养物浓度控制等。
温度控制是生物反应器中最重要的参数之一，适宜的温度有利于微生物或细胞的生长和代谢。
pH值控制是确保反应器内酸碱度稳定的关键，不同微生物或细胞对pH值有不同的要求。
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在补料的同时间断地采出一定量的发酵液体产物， 延长发酵培养周期，发酵周期常常由于菌体的老 化而结束。
第四节 生物反应器的放大
生物反应器的放大是指在反应器的设计与 操作上，将小型反应器中的最优反应结果 转移至工业规模生物反应器中重现的过程。 传统上生物反应过程的开发，通常经历实 验室小型试验、中间试验和工厂化规模放 大的3个阶段。
工厂化规模放大
一般是在完成设计工作后进行一段时间的 试验生产，最终建立合理的工艺条件。
在上述3个阶段的不同大小的反应器中进 行相同的生物反应时，由于规模的不同， 生物反应器的流体流动与动量传递、热 量传递和质量传递特性存在差异，有可 能导致在生产反应器上不能达到实验室 反应器的最优反应结果。 如何通过估计不同规模生物反应器中的 过程状态，对放大的反应器进行合理配 置，使其进行的反应过程与实验反应器 的细胞生长与代谢过程相似，这就是生
由表中数据看出体积增加、频率下降及无挡板对传氧都是不 利的，实验室数据在放大成罐操作时还是很有参考价值的。
(2)搅拌罐中的传氧系数kLα
搅拌罐中的传氧系数与体系的特性、罐及 搅拌桨的几何尺寸、操作参数等有关，不 少研究者得出了许多关联式，因所用的罐 体系和几何尺寸不同得到的式子有些是矛 盾的。下面只介绍几个文献上常引用的关 联式。
如荷兰的 GenPharm 公司用转基 因牛生产乳 铁蛋白，预 计每年从牛 奶生产出来 营养奶粉的 销售额是50 亿美元。
研究生物反应器的目的
要确定为达到一定的生产目的需要多大的 生物反应器，什么样的结构更好； 对已有的生物反应器进行分析，达到优化 的目的； 分析各种生物反应器的数据，从而对细胞 的生长、代谢等过程有更深入的理解。
第一章
生物反应器 （Bioreactor ）
第一节
概述
传统生物工业中使用的生物反应器称为“发酵罐” （fermenter）。20世纪70年代， Atkinson提出了生化反应器（biochemical reactor）一词，其含义除包括原有发酵罐外， 还包括酶反应器、处理废水用反应器等。与此同 时，Ollis提出了另一术语－生物反应器 （biological reactor）。进入80年代，生物 反应器（bioreactor）一词在专业期刊与书籍 中大量出现。
1.机械搅拌式反应器
机械搅拌式反应器
优点：适用性好，适应性强，从小型到 中型、到大型的细胞培养过程都可以用， 放大容易。 缺点：罐内的机械搅拌剪切力容易损伤 娇嫩的细胞，造成某些细胞培养过程减 产
2. 气升式反应器
优点：反应器内整体混合均匀，而且因不 用机械搅拌桨，减少了剪切作用对细胞的 伤害。由于液体循环流动速度较快，因此 反应器内供氧及传感都较好。 缺点：较高（从十几米到几十米高），因 而空气压缩机出口的压力较高。对反应器 设计要求较高，外循环困难。
根据上述两方面的考虑，对细胞群体可以 有4种模型。
在工程上应用最多的是非结构非离散模 型，通常简称均衡生长模型。
特点：不考虑细胞内部的结构（组分），
又不考虑各种细胞之间有任何差异，因 此可以把细胞用“浓度”这一个量来描 述，即把细胞看成一种“溶质”，从而 简化了胞内外的传递过程分析，也简化 了过程的数学描述。
第二节 细胞生长及代谢过程动力学
一、细胞生长的特点、描述方法的分类度的变化量。 （2）得率系数：两种物质得失之间的计量比。 （3）比速率：单位浓度的菌体单位时间引起某 物质浓度的变化量。
在作动力学分析时比速率的概念是很重要的，它 表示菌体活力的大小，能力的大小。
牛顿型流体和非牛顿型流体
服从此定律的流体称为牛顿型流体。所有 气体和大多数液体都属于这一类； 不服从牛顿粘性定律的称为非牛顿型流体。 如某些高分子溶液，胶体溶液、泥浆都属 于这一类。
一般细菌、酵母在低浓度下为牛顿型流体， 丝状菌或高密度培养时发酵液呈非牛顿型 流体性质。
研究搅拌功率往往从最简单的情况开始： 先研究牛顿型流体不通气时功耗Po，再研 究牛顿型流体通气时功耗Pg，再研究非牛 顿型流体不通气及通气时的功耗。
生物反应器的定义
生物反应器就是为适应生物反应的特点而 设计的反应设备。而所谓生物反应则是由 各种不同的或一系列的生物催化剂——酶 在各种不同条件下催化的一个或一系列的 反应，从本质上说都是酶反应，故生物反 应器实质上就是酶反应器。
因为历史原因，人们往常将适合于利用 生长的和非固定化的细胞进行反应的生 物反应器称为发酵罐、其余各类称为酶 反应器。 国外有学者认为，生物反应器不同于传 统发酵罐的一个要点是“新”，就是指 采用固定化生物催化剂（无论酶或细胞、 组织）的反应器。 国内有权威人士提出，生物反应器即是 酶反应器、微生物反应器（发酵罐）和 动植物细胞培养用反应器的统称。
注意：
（4）理想流动与非理想流动
在研究小型反应器时根据其流动特点分为两种理想流 动模式： 一、全混式：反应器内各点浓度及其他条件均一； 二、活塞流式：反应器内物质沿一定方向流动， 完全没有反向混合。
（5）细胞生长的特点及细胞群体的描述
细胞的生长（繁殖）、代谢是一个复杂的 生物化学过程，既包含有各种细胞内的生 化反应，胞内与胞外的物质交换也包含有 胞外的物质传递及生化反应。这个反应体 系的特点是它是一种多相、多组分、非线 性的体系。
生物反应器
细胞 生物反 培养液（养分） 应器
蛋白质、疫苗…
组织…
转基因动物是指 通过实验方法，人工 地把外源基因导入动 物的受精卵（或早期 胚胎细胞），使外源 基因与动物本身的基 因组整合在一起，因 而外源基因能随细胞 的分裂而增殖，并能 稳定地遗传给下一代 的一类动物。
1982年，R.D.Palmiter 等科学家将金属硫蛋白 基因的启动子和大白鼠 生长激素基因拼接成融 合基因，把这种基因导 入小白鼠的受精卵，再 将这一受精卵移植到一 借腹怀孕的母鼠体内， 生下来的小鼠比正常小 鼠体格大一倍，称为 “巨鼠”。
2. 氧的传递
前面已讲过，氧的传递能力的好坏是由 kLα（传氧系数）来衡量的，它受流体物 性、反应器尺寸、操作条件等各方面的影 响。氧的传递又常限制细胞的生长，所以 这里我们先研究一下摇瓶培养中的传氧， 再研究发酵罐中的传氧。
(1) 摇瓶培养中的传氧
氧的传递除受流体物性的影响外，主要受 摇动频率(r／min)、装料体积及有无档 板的影响，下表给出用亚硫酸钠溶液测得 的传氧系数、供氧速率(OTR)与各因素的 关系。
物反应器放大的基本任务。
成功放大的例子
中国维生素C的两步发酵过程正在使用单
台容量为200～300m3的气升式反应器； 国际上乙酸生产的塔式反应器单台容量 已达到1000m3； 酵母单细胞蛋白的单台塔式反应器容量 达到2000m3。
一、 概述
1. 氧的供给 在发酵过程中，氧是如何得到供应的呢？
多相：体系内常含有气相、液相以及菌体 （固）相。 多组分：在培养液中有各种营养成分。 非线性：细胞的代谢过程通常不能用线性 方程或方程组来描述，即使简化模型中 的参数也常具有时变性。
对这样复杂的体系进行描述几乎 是不可能的。
通常对细胞群体所进行简化假设
是否考虑细胞内部复杂的结构？
是否考虑细胞之间的差别？
New Brunswick Scientific Co., Inc. (American, NBS Co.)
Biostat B2
Biostat ED10
Pilot Biostat UD50
各类生物反应器
机械搅拌式反应器
气升式反应器
鼓泡反应器 膜生物反应器 固定床和流化床反应器
实验得知，在深层培养中菌体摄取的是溶 解的氧，即气相的氧先溶在发酵液中再传 递给菌体。根据化工原理得知氧从气泡传 给发酵液的速率：
2. 罐内流体的混合
罐内流体的混合一方面是为了加强氧的传 递，另一方面使流体混合均匀避免局部过 浓或过稀的现象并强化菌体与营养物的接 触。 显然混合时间短些好。在反应器放大时混 合时间往往要要加长．通常小罐的混合时 间仅为几秒，而大罐的混合时间往往需要 几十秒以至分钟级。
小型试验阶段
主要任务是根据酶或细胞的生物学特性和催化 能力，研究生物反应的规律，选择合理的反应 器型式，确定其最优操作方式和操作条件。此 阶段的试验常在1～50L的实验室反应器中进 行。
中间试验（中试）
试验的重点是检验小型试验得出的最优设 计方案的可靠性，研究反应器几何尺度对 反应器操作性能的影响，之后对设计方案 进行一定的修正，并提出工业规模反应器 的设计与操作条件。中试研究一般在50～ 1000L的反应器中完成。
二、细胞浓度及其测量
1.直接测定法 2. 间接测定法
1.直接测定法 （1）细胞干重法:把一定体积的培养液离心、 收集细胞、洗涤、干燥、称重。 （2）显微计数法：利用显微镜和血球计数器 测定单位体积培养液中的细胞个数。 （3）平板计数法：将微生物培养液样品用无 菌生理盐水进行一系列的稀释（通常每次稀释 一个数量级），取一定量的稀释液均匀涂布在 培养皿中的固体平板培养基上，经一段时间的 培养，从平板上长出的菌落数、涂布的稀释液 体积以及稀释倍数可以算出原培养液中的微生 物浓度。 （4）浊度法：培养液的浊度或光密度与细胞 浓度成正比，因而可通过比色测定培养液中的 细胞浓度。
2.间接测定法
从图中可以看出，DNA含量的变化最小。
培养基中存在较多不溶性物质时，可以 通过测定构成细胞的大分子物质（如蛋 白质、RNA、DNA等)来确定细胞浓度。 采用这种方法来估计细胞浓度时，须确 定在培养过程中，这种组分在细胞中的 含量基本保持不变。