【资料】骨科结核感染t细胞斑点检测spot汇编
骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件
根据感染部位，骨科结核感染可 分为脊柱结核、关节结核和骨结 核等。
临床表现与诊断
临床表现
早期症状可能不明显，随着病情发展 可能出现疼痛、肿胀、活动受限等症 状。
诊断
结合临床表现、影像学检查和实验室 检查进行诊断，其中T细胞斑点检测（ SPOT）是一种常用的实验室检查方法。
骨科结核感染的流行病学
采用其他检测方法进行确认。
05 SPOT检测的案例分享
案例一
患者情况
一位中年男性，因髋关节疼痛就诊，疑似髋 关节结核感染。
诊断结果
结合患者临床表现和SPOT检测结果，最终 诊断为髋关节结核感染。
SPOT检测
对患者进行T细胞斑点试验（SPOT），检测 结果显示阳性，提示存在结核感染。
治疗方案
患者接受抗结核药物治疗，并进行髋关节手 术治疗，术后恢复良好。
案例二
患者情况
一位青年女性，已确诊为脊柱结核感 染。
02
SPOT检测
对患者进行T细胞斑点试验（SPOT）， 检测结果显示阳性，提示结核感染活 动期。
01
治疗方案
继续抗结核药物治疗，并定期进行复 查。
05
03
病情变化
经过一段时间的抗结核药物治疗后， 患者病情得到控制，再次进行SPOT检 测。
04
检测结果
结合其他技术
扩大应用范围
探索将SPOT检测与其他诊断技术相结合， 提高诊断的全面性和准确性。
研究SPOT检测在骨科其他疾病诊断中的应 用价值，拓展其应用领域。
感谢您的观看
THANKS
监测疗效
治疗后，SPOT检测可以监测治疗效 果，评估病情恢复情况。
预测复发
通过长期监测SPOT检测结果，可以 预测结核感染的复发风险。
结核感染T细胞检测T-SPOT简介与临床应用
结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介与临床应用汇报人：XXX 单位：XXX结核病T-SPOT 临床应用A B C 目录A 结核病1结核-定义◆肺结核（pulmonary tuberculosis）是结核分枝杆菌复合群（mycobacterium tubercuolsis complex,简称结核分枝杆菌或结核菌）引起的慢性肺部感染性疾病，占各器官结核病总数的80%-90%，其中痰中排菌者称为传染性肺结核病。
1结核-流行病学◆结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，WHO已将其列为重点控制的传染病之一。
据WHO估计全球有1/3人口已感染了结核杆菌，每年约有800万感染者发展为活动性结核病。
◆中国是世界上22个结核病高疫情国家之一，患者总数仅低于印度而居世界第二位。
2000年全国第四次结核病流行病学抽样调查结果为：活动性肺结核患病率为367/10万，菌阳及涂阳肺结核患病率各为160/10万及122/10万。
◆结核病可侵及全身各器官，其中肺结核为最常见类型，约占85%，菌阳，尤其涂阳肺结核患者是主要传染源，是防治的主要对象。
在肺外结核病中，淋巴结结核、结核性胸膜炎、骨关节结核、泌尿生殖系结核病较多见，此外，还有结核性脑膜炎、结核性心包炎、肝、脾结核、脑结核等。
◆结核病常因各种不同的相关症状而首诊于综合医院临床各科，据统计，80%以上肺结核患者首诊于综合医院。
在内科日常诊疗工作中，无论是长期发热、慢性咳嗽、咳痰、咯血、胸腹腔、心包腔积液及肺部异常阴影等的病因学诊断，结核病是常需注意鉴別的重要病种之一。
2001年7月我国卫生部公布了新的【结核病分类】(WS196-2001)，将结核病分为：◆原发性肺结核；◆血行播散性肺结核；◆继发性肺结核；◆结核性胸膜炎；◆其他肺外结核。
◆原发性肺结核乃是指初次感染结核分枝杆菌而发病者，包括原发综合征及胸内淋巴结结核。
血行播散性肺结核乃是由于机体免疫功能低下，变态反应性增高，肺内原发灶、胸内淋巴结或其他脏器病变内的大量结核分枝杆菌于短期内进入血液循环而引起肺部乃至全身播散性结核病，共包括急性、亚急性及慢性血行播散性肺结核。
结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）临床研究进展
结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）临床研究进展2.保山市人民医院感染科云南保山 678000摘要：结核感染T细胞斑点实验作为临床上日益普遍的肺结核诊断方法，具有检测结果不受患者临床症状干扰，能排除接种卡介苗引发的假阳性结果，检测标本易于获得，操作简便、灵敏度高等优点，临床价值得到肯定；但是作为单纯的检测方法还存在不能确定结核发病阶段、发病部位及假阳性等问题，需要与其他检测方法联合应用才能提高检测效果；进一步运用该检测方法诊断结核性胸膜炎、结核性脑膜炎、非典型肺结核等结核相关疾病，提升疾病诊断的准确性。
关键词：肺结核；结核感染T细胞斑点试验；临床研究肺结核是一种肺部常见慢性传染性疾病，主要致病因素是结核分枝杆菌，我国在党和政府的领导下对结核病的防治取得了巨大成效，但近年来结核病防治形势不容乐观。
目前我国作为世界上30个结核病高负担国家之一，2019年新发结核病例83.3万人，结核病发病率为58/10万。
带菌患者为其重要的传染源，大多数肺结核患者病程呈慢性过程，主要表现有低热、盗汗、消瘦、乏力等全身症状及咳嗽、咯血等呼吸系统表现。
1.T-SPOT.TB的概念在疾病早期尽早尽快确诊对疾病治疗具有关键指导意义。
针对早期快速诊断，结核感染T细胞斑点试验，又叫作结核感染干扰素释放试验，该检查方法的机理在于：结核分枝杆菌入侵人体后，T淋巴细胞会相应地留下印记，然后分离出T淋巴细胞，再进行培养增殖，同时通过特异抗原对其进行作用，使其分泌γ干扰素，再经过免疫染色后，进行斑点计数，计算干扰素的量，推算抗原特异性细胞的频率,判断是否存在结核感染。
该检测方法的标本需要采集患者的静脉血，因此摆脱了传统痰涂片、痰培养法受痰标本质量影响的弊端，并且不受机体免疫力及卡介苗接种的影响。
此法得到国内外专家的普遍认同，可以辅助早期诊断。
2.传统检测方法的不足目前肺结核主要通过症状体征，借助辅助检查，综合考虑为诊断提供依据。
结核感染T细胞斑点试验
阴性结果
空白对照
抗原A ESAT-6
抗原B CFP10
阳性对照 （PHA）
阳性结果
一个斑点=一个结核效应淋巴细胞
二 、Pa结rt 12核现 中T-感有 国SP检 结染O测 核T原T手 病理细段 疫不 情胞能 现斑满 状足点临试床需验求优 点
1、T-SPOT的高特异性
结核特异性抗原（ESAT-6、CFP-10）
涂片 镜检
• 耗时长4-8周 • 检出低50% • 肺外结核难 • 易受环境污染
细菌培养
接触史 临床症状 病原/病理
结核 诊断
X射线
抗体检测
• 特异性差 • 误诊肺炎、肺癌 • 肺外结核难
• 假阳/假阴性高； • 不能区分既往感染
和发病病人 • 卡介苗影响 • 2011WHO建议禁用
分子诊断
• 操作复杂技术要求高 • 肺外结核难取样 • 易受外源性DNA污染
一 、Pa现rt 1有现 中检有 国检 结测测 核手手 病段 疫段不 情不能 现满 状能足满临床足需临求 床 需 求
假阴性
免疫力低下或HIV人群，新生儿、老弱人群、药物影响
假阳性
BCG接种人群，其他环境分支杆菌感染，交叉污染
难诊断
肺外结核感染、儿童结核感染、潜伏性结核感染等
医疗事故
无法排筛结核感染，造成生物制剂或移植手术治疗后病患免疫 力下降，引起结核，形成医疗事故
步骤3
结核特异抗原（ESAT-6/CFP 10）刺激结核特异的效 应T淋巴细胞使其分泌γ-干扰素，孵育。
步骤4
效应T淋巴细胞分泌的γ-干扰素与膜板预包 被的抗γ-干扰素抗体结合并固定在细胞周围
洗板，加入酶标二抗，孵育1h
洗板，加入显色液，观察结果
骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)
骨科临床应用（二）
酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测在骨结核中的诊 断价值
Lai CC, et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 2011
C.-C. Lai, et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 2011
2007年3月至2010年6月，本研究共纳入台湾一所三级保健医院 36例疑诊骨结核的患者（21例排除结核）
ELISPOT检测可辅助诊断骨结核，阴性结果可排除脊柱结核
骨科临床应用（三）
Cho et al. Journal of Infection (2011) 63, 362-369
对疑似肺外结核患者进行 T-SPOT.TB 检测。 针对不同感染部位的 T-SPOT.TB 检测灵敏性如下表所示：
作者认为： “这 些结果表明，不 管免疫状态如何 和培养阳性与否， T-SPOT.TB 检测 有助于排除像淋 巴结结核和骨关 节结核一类的慢 性结核病。
24 小 时 报 告 结 果
阴性结 果
实验效果图
空白对照
抗原A ESAT-6
抗原B CFP10
阳性对照 （PHA）
阴性结果：A抗原或B抗原 斑点数均小于6
阳性结果：A抗原或B抗原
阳性结 果
斑点数任意一个大于等于6，
实验结果解释
•阴性结果意义
提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。
排除结核感染——排除结核病——帮助临床鉴 别诊断 •阳性结果意义
CDC指南 高危患者考虑TST和IGRA任何阳性结果应该被认为 LTBI的证据
使用抗TNF-a治疗前的抗结核治疗(北京
胸科医院）
• 仅仅T-SPOT结果阳性，无其它结核表现，可预防性抗结核治 疗3-6个月。
结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血
结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定对肺结核患者诊断的价值研究发布时间：2022-12-19T07:39:21.433Z 来源：《健康世界》2022年21期作者：鲁成娇1 杨艳1 鲁成志2 李彦娴1 彭晓云2 肖明英2 [导读] 目的：分析比较结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定对肺结核患者的临床诊断价值鲁成娇1 杨艳1 鲁成志2 李彦娴1 彭晓云2 肖明英21.保山中医药高等专科学校临床医学院云南保山 6780002.保山市人民医院感染科云南保山 678000摘要：目的：分析比较结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定对肺结核患者的临床诊断价值。
方法：回顾性分析2019年1月-12月期间在保山市人民医院分院感染科收治的结核病患者临床资料，比较痰涂片检测肺结核患者对应四种检查方法的诊断效能。
结果：肺结核患者痰涂片检测与结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定的灵敏度分别为92.6%（25/27）、63.3%（19/30）、68.9%（20/29）、81.6%（31/38），特异度分别为：22.9%（14/61）、73.6%（39/53）、73.4%（47/64）、36.5%（27/74）。
结论：结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）灵敏度明显高于其他检测方法，配合该病临床表现能够提升临床应用价值，该方法可用于肺结核诊断的重要辅助手段。
关键词：结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）；结核分枝杆菌IgG、IgM检测；结核DNA核酸测定；血沉（ESR）；痰涂片抗酸染色技术；肺结核结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，曾在世界范围内广泛传播，被称作“白色瘟疫”，我国是人口大国，结核病发病率高居世界前列。
结核感染T细胞斑点试验在骨与关节结核诊断中的临床应用
结核感染T细胞斑点试验在骨与关节结核诊断中的临床应用【摘要】目的：观察结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）应用于骨结核与关节结核诊断的临床应用价值。
方法：选取我院骨科病区于2012年2月至2014年7月期间收治的疑似骨结核与关节结核的患者127例，应用结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）与结核抗体（LAM-IgG）试验对患者进行诊断，比较两种诊断方法的特异度、灵敏度、阴性预测值（NPV）、阳性预测值（PPV）、阴性似然比（-LR）、阳性似然比（+LR）等指标的差异，探讨两种诊断方法在骨与关节结核诊断中的意义。
结果：结核感染T细胞斑点试验灵敏度、特异度、NPV、PPV显著高于结核抗体试验（P＜0.05），结核感染T细胞斑点试验中-LR显著低于结核抗体诊断，差异具有统计学意义（P＜0.05），+LR明显高于结核抗体诊断。
结论：结核感染T细胞斑点试验在对骨与关节结核的诊断中有较好的灵敏度与特异度，是骨关节结核重要辅助诊断指标。
【关键词】骨与关节结核；结核感染T细胞斑点试验；结核抗体（LAM-IgG）试验；诊断结核的患病人数近年来仍不断增加，除引起肺部结核类疾病外，结核杆菌也可侵入全身其他器官，骨结核与关节结核即是较多见的肺外结核。
骨结核与关节结核的临床表现早期缺乏特异性，经常发生误诊漏诊，导致患者错过最佳治疗时机延误病情，患者的健康受到严重损害甚至致残致畸[1]。
为了寻找快速准确的骨结核与关节结核的早期诊断方法，我院特进行了结核感染T细胞斑点试验与结核抗体检测诊断的对比实验，以期为未来骨结核与关节结核的早期诊断提供理论依据。
1资料与方法1.1一般资料选取我院骨科病区于2012年2月至2014年7月期间收治的疑似骨结核与关节结核的患者127例，其中男49例，女51例，年龄范围16～80岁，平均年龄（31.1±4.2）岁；所有患者入院主诉症状均为颈、胸背、腰背部疼痛及下肢活动受限、关节肿痛或活动受限等。
结核感染T细胞斑点试验在骨与关节结核诊断中的临床应用
结核感染T细胞斑点试验在骨与关节结核诊断中的临床应用【摘要】目的：观察结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）应用于骨结核与关节结核诊断的临床应用价值。
方法：选取我院骨科病区于2012年2月至2014年7月期间收治的疑似骨结核与关节结核的患者127例，应用结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）与结核抗体（LAM-IgG）试验对患者进行诊断，比较两种诊断方法的特异度、灵敏度、阴性预测值（NPV）、阳性预测值（PPV）、阴性似然比（-LR）、阳性似然比（+LR）等指标的差异，探讨两种诊断方法在骨与关节结核诊断中的意义。
结果：结核感染T细胞斑点试验灵敏度、特异度、NPV、PPV显著高于结核抗体试验（P＜0.05），结核感染T细胞斑点试验中-LR显著低于结核抗体诊断，差异具有统计学意义（P＜0.05），+LR明显高于结核抗体诊断。
结论：结核感染T细胞斑点试验在对骨与关节结核的诊断中有较好的灵敏度与特异度，是骨关节结核重要辅助诊断指标。
【关键词】骨与关节结核；结核感染T细胞斑点试验；结核抗体（LAM-IgG）试验；诊断结核的患病人数近年来仍不断增加，除引起肺部结核类疾病外，结核杆菌也可侵入全身其他器官，骨结核与关节结核即是较多见的肺外结核。
骨结核与关节结核的临床表现早期缺乏特异性，经常发生误诊漏诊，导致患者错过最佳治疗时机延误病情，患者的健康受到严重损害甚至致残致畸[1]。
为了寻找快速准确的骨结核与关节结核的早期诊断方法，我院特进行了结核感染T细胞斑点试验与结核抗体检测诊断的对比实验，以期为未来骨结核与关节结核的早期诊断提供理论依据。
1资料与方法1.1一般资料选取我院骨科病区于2012年2月至2014年7月期间收治的疑似骨结核与关节结核的患者127例，其中男49例，女51例，年龄范围16～80岁，平均年龄（31.1±4.2）岁；所有患者入院主诉症状均为颈、胸背、腰背部疼痛及下肢活动受限、关节肿痛或活动受限等。
骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件
04
SPOT检测的临床意义与 展望
SPOT检测对临床诊断
SPOT检测能够快速、准 确地检测出体内是否存在 结核感染，为临床医生提 供可靠的诊断依据。
鉴别诊断
与其他类似的感染性疾病 进行鉴别，有助于医生制 定更准确的治疗方案。
监测病情
通过定期进行SPOT检测 ，可以监测病情的发展和 治疗效果，及时调整治疗 方案。
预测复发风险
SPOT检测结果可以预测患者复发风险 ，有助于制定个性化的预防措施。
SPOT检测与其他诊断方法的比较
优势与不足
SPOT检测与其他诊断方法相比具有操作简便、快速、准确等优势，但也存在一 定的局限性，如对试剂的依赖性较强等。
互补关系
SPOT检测与其他诊断方法并非相互替代关系，而是互补关系，可以根据具体情 况选择合适的诊断方法。
骨科结核感染的流行病学特征 包括地域差异、人群分布和传 播途径等。
骨科结核感染的诊断方法
诊断骨科结核感染的方法包括临床表现、影像学检查、实验室检查和病理学诊断等 。
T细胞斑点检测（SPOT）是一种用于诊断结核感染的实验室检查方法，具有较高的 敏感性和特异性。
其他常用的诊断方法包括X线、CT、MRI等影像学检查和结核菌素试验等。
加强国际合作与交流
促进不同国家和地区在SPOT检 测领域的合作与交流，共同推 动该技术的发展和应用。
05
SPOT检测实验操作流程
实验前的准备
实验器材
确保实验室具备进行SPOT 检测所需的器材，如显微 镜、细胞培养板、细胞培 养瓶、离心机等。
试剂准备
根据实验需求，准备好细 胞培养基、抗体、洗涤液 等试剂，确保其质量和有 效性。
骨科结核感染T细胞斑 点检测（SPOT课件
结核感染T细胞斑点试验
T-SPOT-TB—应用
在活动性结核病中的诊断意义 1.敏感性86-94%，特异性89-99% 2.在肝移植术后、艾滋病、血液肿瘤等免疫抑制患
者中， T-SPOT-TB阳性率略低于免疫正常组，但仍具有 较高的敏感性，且优于结核菌素试验。
3.在肺外结核患者诊断中的，敏感性优于结核菌素 试验。
4.对小于4岁儿童，与结核菌素实验比较敏感性无优 势，美国CDC更推荐结核菌素实验。
结核感染T细胞斑点试验 （T-SPOT-IGRAs）
在2001年前，美国仅批准结核菌素 皮肤试验（TST）用于结核分支杆 菌的检测。在认识到IFN-γ在调节 对结核分支杆菌的细胞介导的免疫 反应中起重要作用，从而使得 （interferon gamma release assays） IGRAs用于检测结核感染。IGRAs通 过检测代表结核分支杆菌的抗原刺 激T淋巴细胞反应后释放IFN-γ的量 来判断是否存在结核杆菌感染。
T-SPOT-TB—示意
T-SPOT-TB—解释
非黄金标准 定性检测而不是定量检测 敏感性95.3%-98.8% 特异性94.1%-100% 萨斯分枝杆菌( My cobacter ium kans asii ) 、海
分枝杆菌(My cobacter ium mar inum ) 、斯氏分枝 杆菌( My cobacter ium sz ul gai ) 等少数分枝杆 菌中也存在完整RD1区，编码ESAT������ 6 和CFP������ 10, 可造成检测结果成假阳性。
T-SPOT-TB—应用
在结核性脑膜炎、结核性胸膜炎中的诊断意义 1.敏感性优于ADA、TB-DNA，约在62-75%，特异性无
统计学差异。 • 在结核病治疗中的评价意义
细胞斑点试验
基于T淋巴细胞检测 结核感染的原理
结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结 核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细 胞
当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释 放r干扰素
r干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中 最重要的细胞因子
基于T淋巴细胞检 测结核感染的原理
基于T淋巴细胞检测 结核感染的原理
结核的传统诊断手段
结核菌素皮试：
低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。 低特异性：与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易 造成“假阳性”结果。
细菌学检查：常规培养：2月；快速培养：1周；
阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。
病理学检查：阳性率低，对取材标本有较高要求，有创
T-SPOT.TB的临床意义
T-SPOT.TB高灵敏度
提问 出报告时间：一、三、五检测三个工作日出。 标本类型：肝素抗凝全血两管 需注意:4小时内送检，8小时内完成检测 价格：660元 方法学：酶联免疫斑点法 英文：T-SPOT
T-SPOT.TB
结核感染T细胞斑点检测
T细胞斑点试验（T-SPOT），又叫作结核感染干扰 素释放试验（Interferon Gamma Release Assays， IGRAs
结核的现状
结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据WHO 统计，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约 200万人死于结核。
基于T淋巴细胞检测 结核感染的原理
空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑 点数大于20时视为试验有效
T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形 成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs
TSPOT介绍总结
• 特异性好
只针对结核分枝杆菌复合群敏感，与绝大多数环境分枝杆菌和卡介苗 （BCG）无交叉反应
美国FDA数据：特异性97.1%(297/306) 国内临床数据：特异性94.1%(478/508)
• 灵敏度高
阴性预测值：93.9%（478/509） 阳性预测值：95.4%（624/654）
基本不受免疫力低下/受抑制影响，在肺外结核患者中有很高的检出率
Meier e1t6al EJCMID 2005 24;529-536
TOTAL
Sensitivity
90.0% (36/40) 84.2% (32/38) 98.4% (62/63) 95.9% (47/49) 94.6% (53/56) 50.0% (5/10) 61.5% (8/13) 80.8% (80/99) 85.7% (36/42) 94.1% (254/270) 100.0% (9/9) 87.5% (42/48) 89.9% (62/69) 92.2% (59/64) 98.3% (57/58) 90.0% (27/30) 92.9% (26/28) 92.9% (26/28) 84.6% (11/13) 87.2% (34/39) 100.0% (10/10) 100.0% (22/22) 100.0% (12/12) 83.3% (20/24) 96.6% (84/87) 91.3% (21/23) 95.9% (70/73) 91.5% (1205/1317)
实验效果图
阴性结果
空白对照
抗原A ESAT-6
抗原B CFP10
阳性对照 （PHA）
阳性结果
报告单
斑点数的意义—活动性or潜伏性
• 多少个斑点是活动性结核？ 结果阳性说明患者结核感染，是潜伏性还是活动性需要 CIn结hfeeec合teDt 临aisl (E2床u0r0症J8)C（状linIFM=。3ic.0r因o2b）io个l 体差异，Jan没sse有ns具et a体l E的RJ 斑(20点07)（数IF字=6.可35） 以依据。但斑点数越多越倾向于活动性结核
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
骨科临床应用（一）
γ干扰素释放试验在骨关节结核病诊断中的 应用价值研究
贾红彦, 张宗德等，北京胸科医院，Diagn Microbiol Infect Dis, 2013
特点 H. Jia, et al. Diagn Microbiol Infect Dis, 2013
➢ 确诊病例（培养阳性者）、 疑似结核病（组织活检或 发现干酪性肉芽肿并且抗 结核治疗有效）和非活动 性结核病患者（确诊为其 他疾病、未抗结核治疗而 病情好转）
24 小 时 报 告 结 果
阴性结 果
实验效果图
空白对照
抗原A ESAT-6
抗原B CFP10
阳性对照 （PHA）
阴性结果：A抗原或B抗原 斑点数均小于6
阳性结果：A抗原或B抗原
阳性结 果
斑点数任意一个大于等于6，
实验结果解释
•阴性结果意义
提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。
排除结核感染——排除结核病——帮助临床鉴 别诊断 •阳性结果意义
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
CDC指南 高危患者考虑TST和IGRA任何阳性结果应该被认为 LTBI的证据
使用抗TNF-a治疗前的抗结核治疗(北京
胸科医院）
• 仅仅T-SPOT结果阳性，无其它结核表现，可预防性抗结核 治疗3-6个月。
• 化疗方案： 三联方案：异烟肼：0.3 /日 利福平 0.45/日 乙胺丁醇0.75 /日 两联方案：异烟肼：0.3 /日 利福平 0.45/日 用药前查肝、肾功能、血、尿常规，用药后2W、4W，以后 每4W复查一次。疗程3-6个月。抗结核治疗4W后开始抗 TNF-a治疗。
Cho OH, Kim SH, et al. J Infect, 2011（IF=4.073）
骨科——适T-应SP范O围T.TB在骨科的应用
➢ 骨结核的辅助诊断和鉴别诊断
如脊柱结核与强直性脊柱炎、化脓性脊柱炎、腰椎间盘突出、脊柱 肿瘤、退行性脊柱骨关节病等的鉴别诊断
➢ 结核感染筛查
• 大剂量激素使用 • 抗TNF-a、生物制剂使用前后 • 不明原因发热患者的结核排筛
提示患者体内存在针对结核杆菌特异的效应T细胞，患者存在结核感染。 但是否是活动性结核病，需结合临床症状和其它检测指标综合判断。
结核感染——结合临床综合判断——怀疑
检测结果判读
T-SPOT.TB临床数据
182名ATB疑似患者中，71名分作肺部疾病组，111名分作肺外疾病组 （包括中枢神经系统、外周淋巴结、胸膜、骨骼、生殖泌尿系统等）
T-SPOT®.TB 诊断性能
方法学优点
1. 特异性好，不受卡介苗（BCG）接种与环境分枝杆菌影响； 2. 灵敏度高，几乎不受个体免疫功能低下影响； 3. 快速，24h报告结果； 4. 对肺外结核的诊断尤其有帮助； 5. 降低医疗事故风险，减少带药诊断的医患纠纷风险。
T-SPOT®.TB临床性能指标
结核病诊断技术
细菌学
免疫学
分子 生物学
结核病 诊断
影像学
病理学 介入诊断
免疫学检测手段
1. 结核抗原、抗体诊断—简便、快速，可以作为结核病的辅助诊断方法之一， 但诊断价值有限。2011年WHO正式公告禁止
2. PPD（TST）试验—传统的结核感染检测方法 •易受BCG接种史和非结核分枝杆菌干扰，特异性低 •免疫低下患者中，诊断敏感性低 • 需要2-3 天等待时间
• 特异性 只针对结核分枝杆菌复合群敏感，与绝大多数环境分枝杆菌 和卡介苗（BCG）无交叉反应。
美国FDA数据：特异性97.1%(297/306) 国内临床数据：特异性94.1%(478/508)
• 灵敏度 基本不受免疫力低下/受抑制影响，在肺结核 与肺外结核患 者中均有很高的检出率。
美国FDA数据：灵敏度95.6%(175/183) 国内临床数据：灵敏度95.3%(624/655)
非结核 n(%) n=24
0 0
14(58.3) 2(8.3) 2(8.3) 3(12.5) 1（4.2） 0 0 0 0 2（8.3）
H. Jia, et al. Diagn Microbiol Infect Dis, 2013
T-SPOT.TB(酶联免疫斑点法ELISPOT)
列入美国、英国等欧美20多个国家结核诊疗指南；美国 CDC推荐：BCG接种人群结核感染检测首选；国内专家 指南
CFDA批准的使用范围：检测血液样本中效应T细胞产生 IFN-γ的能力，用于诊断结核杆菌感染。
适应症：结核感染的诊断和活动性结核病的辅助诊断
T-SPOT.TB在肺疾病组和肺外疾病组中的灵敏度分别为95.6%和
93.3%，特异性分别为69.2%和88.9%。
冯云, 张文宏等. PLOS ONE, 2012（IF=3.53）
T-SPOT.TB临床数据
Cho 等在 368 例疑诊肺外结核的患者中研究显示，T-SPOT. TB在诊 断淋巴结核和骨结核的敏感性为 93% ，在诊断急性肺外结核(结核性 脑膜炎和粟粒性肺结核)的敏感性为 79% 。
确诊骨关节结核病 非活动性 结核病
例
86
24
数
分 细菌培养 疑似结
类 确诊
核病
26
60
合并其他部位结核 肺结核 肾脏结核
病灶位置 脊柱 髋关节 膝关节 肘关节 手关节 踝关节 骶髂关节 肩关节 肋骨 股骨
结核n(%)
n=86
11（12.8） 4（4.7）
59(68.6) 8(9.3) 6(7.0) 3(3.5) 1（1.2） 3(3.5) 2（2.3） 2（2.3） 1（1.2） 1（1.2）
骨科结核感染T细胞斑点检测 SPOT
新疆结核病疫情
• 我区仍然是全国结核病高发省区之一，每年报告肺结核 发病人数近5万例。
• 根据2010年结核病流行病学调查结果，我区活动性肺结 核患病率、涂阳肺结核患病率、菌阳肺结核患病率分别 为全国平均水平的3.3倍、3倍和3.6倍。
关于印发新疆维吾尔自治区结核病防治 规划（2011-2015年）的通知
WHO潜伏结核感染管理指南(2014)
定义(LTBI) 机体对结核分枝杆菌抗原刺激产生的持久性的免疫反 应，临床上没有任何活动性结核的征象.
高风险人 群
HIV感染者、实体器官移植者、接受TNF-a抑制剂指 治疗的患者和免疫介导的炎症性疾病（RA/SLE和其 他自身免疫病）、透析患者、血液系统恶性肿瘤患者 ，包括HSCT者