结核感染t细胞检测tspottb

结核感染T细胞检测ppt课件

种类特异性
内容摘要
用T-SPOT.TB检测14例鸟分枝杆菌感染者，13例阴性，1例为临界值，复查也为阴性。
受试者数量
文献发表
14
Adams et al Sc. J Inf.
Dis..
2008;40(3):196-203.
经过结核筛查的无症状的受试者，T-SPOT.TB检测结果全部为
47
Clark et al. Clin. Exp.
阴性，特异性100%。
Imm.
2007; 150(2):238-44
在德国用T-SPOT.TB对健康的卫生保健工作者进行筛查。仅1 例阳性（1/95），为影像学工作者，接触病人超过35年。 TST检测假阳性结果34% （32/95）。
95
Barsegian et al.
J of Hospital Inf
结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异
抗原刺激后分泌γ 干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。检测外周血中受结核特异抗原刺激释放γ 干扰素的T淋巴细
胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数，1个斑点代表一个分泌细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。
空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效
在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为94%。
87
Lee et al.
ERJ 2006; 28:24–30
30
Clark et al. Clin. Exp.
Imm.
2007; 150(2):238-44
140
Kang et al Chest.
2007 Sep;132(3):959-65

T-SPOT.TB

优势
• 该检测方法采用的结核杆菌特异性抗原为ESAT-6和CFP-10，其编码基因RD1在BCG（卡介苗）和绝大多数非结核杆菌中是缺失的，因此较好的避免了交叉抗原反应，提高了特异性。
原理
1.从全血中分离出外周血单个核细胞PBMCs 2.将样本加入反应孔，每个样本需要4个检测孔：
①空白对照为了判断非特异细胞的活化反应 ②结核特异抗原A，Panel A(ESAT-6) ③结核特异抗原B，Panel B(CFP 10) ④植物血凝素PHA对照，用于判断PBMC活性
结果
前提：通常正常结果，空白对照孔没有或有很少的斑点而植物血凝素PHA对照孔斑点数超过20个。 1.阳性结果：
①空白对照孔斑点数为0～5个且（抗原A或抗原B斑点数)-（空白对照孔斑点数）≥6 ②空白对照孔斑点数6-10个时且（抗原A或抗原B斑点数）≥2倍空白对照孔斑点数
2.阴性结果：
不符合上述标准且对照孔正常
• 3.虽然ESAT-6和CFP10在所有的BCG菌株，以及绝大多数环境分枝杆菌中缺失，但TSPOT.TB的阳性结果有可能是堪萨斯、苏氏、戈登或海分枝杆菌的感染引起的。
临床应用
传染科/感染科： 1.2-3周以上的不明原因发热病人的结核感染排筛 2.免疫力低下患者肺外结核的辅助诊断卡介苗接种人群的结核感染筛查 3.HIV感染者并发结核的筛查 T-SPOT.TB不受CD4细胞计数水平的影响，避免了HIV感染后细胞免疫功能受损而导致的假阴性结果。
T-SPOT.TB
关于原理与临床应用的ຫໍສະໝຸດ 述• T: T细胞 • SPOT：ELISPOT (enzyme-linked immunospot assay；酶联免疫斑点技术)是一种从单细胞水平检测分泌抗体或细胞因子细胞的免疫学新技术。原理是用抗体捕获培养细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。 • TB：结核杆菌

结核感染T细胞检测T-SPOT简介与临床应用

结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介与临床应用汇报人：XXX 单位：XXX结核病T-SPOT 临床应用A B C 目录A 结核病1结核-定义◆肺结核（pulmonary tuberculosis）是结核分枝杆菌复合群（mycobacterium tubercuolsis complex,简称结核分枝杆菌或结核菌）引起的慢性肺部感染性疾病，占各器官结核病总数的80%-90%，其中痰中排菌者称为传染性肺结核病。

1结核-流行病学◆结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，WHO已将其列为重点控制的传染病之一。

据WHO估计全球有1/3人口已感染了结核杆菌，每年约有800万感染者发展为活动性结核病。

◆中国是世界上22个结核病高疫情国家之一，患者总数仅低于印度而居世界第二位。

2000年全国第四次结核病流行病学抽样调查结果为：活动性肺结核患病率为367/10万，菌阳及涂阳肺结核患病率各为160/10万及122/10万。

◆结核病可侵及全身各器官，其中肺结核为最常见类型，约占85%，菌阳，尤其涂阳肺结核患者是主要传染源，是防治的主要对象。

在肺外结核病中，淋巴结结核、结核性胸膜炎、骨关节结核、泌尿生殖系结核病较多见，此外，还有结核性脑膜炎、结核性心包炎、肝、脾结核、脑结核等。

◆结核病常因各种不同的相关症状而首诊于综合医院临床各科，据统计，80%以上肺结核患者首诊于综合医院。

在内科日常诊疗工作中，无论是长期发热、慢性咳嗽、咳痰、咯血、胸腹腔、心包腔积液及肺部异常阴影等的病因学诊断，结核病是常需注意鉴別的重要病种之一。

2001年7月我国卫生部公布了新的【结核病分类】(WS196-2001)，将结核病分为：◆原发性肺结核；◆血行播散性肺结核；◆继发性肺结核；◆结核性胸膜炎；◆其他肺外结核。

◆原发性肺结核乃是指初次感染结核分枝杆菌而发病者，包括原发综合征及胸内淋巴结结核。

血行播散性肺结核乃是由于机体免疫功能低下，变态反应性增高，肺内原发灶、胸内淋巴结或其他脏器病变内的大量结核分枝杆菌于短期内进入血液循环而引起肺部乃至全身播散性结核病，共包括急性、亚急性及慢性血行播散性肺结核。

结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)

1520文档结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)
一.临床意义：
结核病临床表现复杂多样，可累及全身各个系统，给临床诊断带来很大困难。

本项目检测通过将分离标本中的单个核细胞加入结核分枝杆菌特异性抗原A、B分别进行细胞培养后，分别检测分泌γ干扰素的特异性淋巴细胞的数量诊断结核感染。

本检测诊断结核感染的敏感性为90%-95%，特异性为93%-100%。

对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。

二.标本类型、采集及运送要求：
1.采集要求：标本采集后4小时内必须送到实验室，标本采集后如果超过4小时未送检将严重影响检测结果。

2.静脉血：肝素钠（绿头管）抗凝管采集静脉血4ml，立即颠倒数次，充分混匀，以免血液凝固。

采血后向试管中注入血液时请缓慢进行，避免用力过猛造成细胞破坏影响检测结果。

三．标本采集时间、结果发放时间及检测频率
1.标本采集时间：每周一上午12点之前采血；并于4小时之内送到临床微生物实验室。

（必要时可与临床微生物实验室联系）
2.结果发放时间：周二下午4点半检验报告发出。

3.检测频率：暂定每周检测一次。

. 1。

T-SPOT_TB操作说明电子版(中文版)

4．用PBS缓冲液200倍稀释浓缩标记抗体试剂。
4．不能用含有Tween或其它去污成分的PBS缓冲液，
这会导致高的本底结果。确保标记抗体工作液有少
量剩余（考虑到耗损）。因而，对于8孔板条（每孔
需要50ul），配制500ul标记抗体工作液，取2.5ul的
浓缩标记抗体试剂加497.5ul的PBS缓冲液
5．每个反应孔加入50ul标记抗体工作液，2-8℃孵 5．不按照推荐的孵育时间会导致检测结果的不正
3.每吸取100ul细胞终溶液前都必须保证彻底混匀。推荐每孔加样后都更换新的枪头以避免4个反应孔出现交叉污染。 4. 为避免干扰，培养板应立即放入孵育箱。不要把培养板堆叠，会导致温度的不均匀和空气的不流通。不按照推荐的时间孵育会导致不正确的检测结果。
2.斑点记数
在培养板的洗涤和斑点形成阶段，不要让移液枪枪头或洗板仪枪头触碰反应孔底部的膜。移液枪枪头或洗板仪枪头产生的凹
注意：细胞培养液使用前需预温至 37℃
步骤 1.依照说明书的要求采集全血样本。室温保存（18-25℃），不能冷冻或冷藏 2.对于使用CPT采血管的，根据厂家说明书要求来分离PBMCs。对于其它方法采集血样的，利用Ficoll-PaqueTMPlus 按照操作说明分离PBMCs
3.用吸液管吸取白色、云雾状PBMCs层并转移至15ml 尖底离心管中。加入细胞培养液至10ml。 4.600g离心7分钟。弃去上清液用1ml培养液重悬沉淀。 5.加培养液至10ml，350g离心7分钟。 6.弃去上清液加0.7ml培养液重悬沉淀。
痕会导致斑点假象，影响斑点记数。
步骤
注意点
1．从培养箱中取出培养板弃去细胞培养液。
1．此时从试剂盒取出底物显色溶液恢复至室温。

结核感染T细胞检测

T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs
T-SPOT.TB高灵敏度
种类
活动性结核/ 灵敏度
内容摘要
将T-SPOT.TB的检测结果与最后通过涂片和培养确诊的结果进行比较。包括牛型结核杆菌和非洲型结核杆菌感染的患者。T-SPOT.TB的灵敏度为97.2%。（CI 90.3-99.7%）
在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为94%。
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Lee et al.
ERJ 2006; 28:24–30
30
Clark et al. Clin. Exp.
Imm.
2007; 150(2):238-44
140
Kang et al Chest.
2007 Sep;132(3):959-65
抗原刺激后分泌γ 干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。检测外周血中受结核特异抗原刺激释放γ 干扰素的T淋巴
细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数，1个斑点代表一个分泌细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。
空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效
Immunol 2008; 15;168-
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T-SPOT.TB高特异性检测所用的ESAT-6＆CFP 10抗原均来自结核
分枝杆菌基因组RD1区域，RD1区基因仅存在于结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）。卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因因此 T-SPOT.TB不会受卡介苗或者非结核分枝杆菌影响。
32
Kim et al. Arch Intern
Med.

结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)简介与临床应用

结核菌的特性和临床检测的现状又是如何？
1、结核病疫情严重
全球 • 20亿人口感染结核 • 现有活动性结核病患者2000万 • 新增活动性结核病人约900万/年 • 每年200-300万患者死亡
我国
结核病高负担国家之一，患者人数仅次于印度，居全球第二位
• 约5.5亿人口感染过结核菌 • 现有活动性肺结核患者450万 • 新发患者145万/年 • 死亡人数13万/年
- 胸部的 X-光或 CT 扫描显示异常
- 肺外结核难以诊断 (特别是儿童)
活动性结核
• 新发TB病例来自潜伏性结核感染人群
• 潜伏性结核感染（latent TB Infection, LTBI）人群数量巨大——“定时炸弹”
全面性
目前检测方法是否满足临床需求？
• 细菌学 • 免疫学
灵敏度性能不稳定
结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介与临床应用
什么是结核病
• 结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病。结核菌能侵入全身各个器官，但80% 发生在肺部，常称肺结核。
• 结核病又称为“痨病”和“白色瘟疫”，是一种古老的传染病。
• 人与人之间呼吸道传播是本病传染的主要方式。传染源是接触排菌的肺结核患者，而肺外结核病则不具有传染性。
暴露程度不足，结核杆菌被机体免疫力清除
- 没有症状,结核杆菌仍旧存在而不能被侦测
- X-光/ CT 扫描显示正常
- 没有抗体应答
- 诊断困难
- 传统的结核感染检测只有 TST（PPD）
机体被感染
受机体免疫力抑制没有临床症状
终身处于感染状态
潜伏感染
5%
5%
再次激活
有临床症状具有传染性

探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病中的诊断价值

探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病中的诊断价值探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病中的诊断价值引言：结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，全球范围内仍然是重大公共卫生问题之一。

早期和准确的结核病诊断对于控制疾病的传播和提供有效的治疗举措至关重要。

近年来，结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）逐渐成为结核病的主要诊断工具之一，本文将探讨T-SPOT.TB在结核病中的诊断价值。

一、T-SPOT.TB的原理与技术：T-SPOT.TB是一种利用酶联免疫斑点法检测结核分枝杆菌特异性T细胞反应的技术。

该方法基于测量体外T细胞的干预和测量干预期间T细胞产生的干预细胞因子的原理，通过寻找和计数结核分枝杆菌特异性T细胞的干预斑点来判断人体是否感染了结核分枝杆菌。

二、T-SPOT.TB的优势：与传统的结核诊断方法相比，T-SPOT.TB具有以下显著的优势：1. 高度特异性：T-SPOT.TB能有效区分结核病与非结核分枝杆菌感染，降低了假阳性率，提高了诊断的准确性。

2. 高敏感性：T-SPOT.TB能更早地检测出结核感染，尤其是对于免疫缺陷患者和隐性感染者具有更高的敏感性。

3. 快速结果：T-SPOT.TB的检测结果通常在24小时内可得，对于紧急情况和迅速诊断起到了关键作用。

4. 无交叉反应：T-SPOT.TB不受BCG疫苗和其他非结核分枝杆菌感染因素的影响，避免了传统诊断方法的交叉反应。

三、T-SPOT.TB在结核病中的诊断价值：1. 早期诊断：由于T-SPOT.TB的高敏感性，它能够早期检测出结核感染，避免了疾病的进一步传播，为尽早治疗提供了依据。

2. 预测疾病进展：通过监测T细胞反应的变化，T-SPOT.TB可以评估结核感染的严重程度和预测患者的疾病进展，以便采取及时的干预措施。

3. 监测治疗效果：T-SPOT.TB可以用于评估结核患者的治疗效果，及时调整治疗方案，提高治疗的效果。

4. 作为筛查工具：T-SPOT.TB可以作为结核病的筛查工具，在高感染风险群体中进行广泛的应用，以便早期发现结核感染，减少疾病传播。

T-SPOT.TB产品简介

结核感染T细胞检测试剂盒（T-SPOT.TB）一、T-SPOT.TB产品介绍我国是世界上仅低于印度的第二大结核病国家。

受限于检测手段，中国的结核感染率较难准确统计，2009年流行病调查结果为总人口的44.5% （因采用PPD检测，假阳性较多）。

而年新发活动性结核患者超过107万人次，年死亡人数达13万。

结核病的早期快速诊断已经成为制约结核病控制的关键因素。

目前，常规结核感染实验室检测方法诊断检出率不到50％。

2011年7月20日，世界卫生组织（WHO）发出正式声明，要求禁止将血清学检测方法用于肺结核和肺外结核的诊断。

因此，开发特异、敏感、快速、简便的结核病感染的诊断方法已经成为全球共识。

结核感染T细胞检测试剂盒（T-SPOT.TB））是由英国Oxford Immunotec 公司研发生产的体外诊断产品，用于结核感染的筛查，结核病辅助诊断及疗效评价等。

它改变了以往的结核检测方法特异性低，敏感度差，耗时长的缺点。

作为当前全球最先进的结核感染诊断产品，该产品已经成为发达国家结核感染检测的首选方法，获得欧盟CE 认证、美国FDA认证。

美国CDC、美国胸科学会、英国及欧洲的结核病防治指导原则中，均已将本试剂盒方法列为结核感染诊断的推荐实验室诊断标准，并已经在欧洲（英国、德国、法国、意大利、瑞士、西班牙、爱尔兰、荷兰、丹麦、挪威、瑞典）、北美洲(加拿大、美国)、非洲（南非）、澳大利亚、亚洲（韩国、新加坡、日本、中国）等国家均已上市销售，并写入部分国家的诊疗指南中。

T-SPOT.TB用于结核感染的诊断与鉴别诊断具有独特优势：高灵敏度和特异性:特异性达到97.1％（美国FDA临床研究数据），敏感度达到95.6％（美国FDA临床研究数据），不受环境分枝杆菌感染和卡介苗（BCG）接种影响基本不受机体免疫抑制影响，适用于HIV感染和免疫抑制剂治疗人群简单的实验室血液检查，24小时快速报告结果结核感染T细胞检测试剂盒（T-SPOT.TB）应用的方法学为酶联免疫斑点技术（ELISPOT）。

结核感染T细胞检测方案

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Kim et al. Arch Intern
Med.
2007; 167;20:2255-2259
186
Kim et al. Am J Med
2009；122, 189-195
58
Janssens et al ERJ
2007；30(4):722-8
32
Dominguez et al Clin
Vacc
结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异
抗原刺激后分泌γ 干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。检测外周血中受结核特异抗原刺激释放γ 干扰素的T淋巴细
胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数，1个斑点代表一个分泌细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。
空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效
Diseases
2009,9:60
6.结论
T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷的今天， T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。
基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点， T-SPOT.TB的检测物已不局限于静脉血，支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。
受试者数量
72
文献发表
Meier et al Eur J Microbiol Infect Dis (2005)；24: 529-536
在经培养确诊的活动性结核受试者中，T-SPOT.TB的灵敏度为96.6%。其中29例免疫力低下患者，T-SPOT.TB的灵敏度为100%
在确诊病例（涂片或培养阳性）和临床诊断病例（有临床症状和抗痨治疗有效）中，T-SPOT.TB的灵敏度为90.3% ，并且不受CD4细胞数量影响。

Tspot结核感染T细胞斑点试验的临床应用

反应性”时，该实验结果被认为是“并不确定”，应当复查。
“有反应性”结果表明样本中存在针对结核杆菌特异的效应T细胞 “无反应性”结果表明样本中可能不存在针对结核杆菌特异的效应
T细胞
二、结果的判断(影响因素分析)
既往结核病史或影像学提示陈旧性肺结核、有结核密切接触史或高潜伏性结核感染率可使其诊断活动性结核病的特异性降低。
一、T-SPOT.TB的原理
外周血T-SPOT即利用酶联免疫斑点技术（ELISPOT）通过检测结核分枝杆菌特异性抗原刺激后外周血单个核细胞释放的γ-干扰素来检测抗原特异性Ｔ淋巴细胞的应答反应，从而判断结核感染状态。
每一个斑点代表一个分泌细胞因子的T细胞，记数斑点数量可以获得外周血中结核致敏的T 细胞数量。
二、结果的判断
试验分四组：空白对照组、抗原组(ESAT-6和CFP-10)、阳性对照组(植物血凝素PHA)。
通常正常结果，空白对照孔没有或有很少的斑点而PHA对照孔斑点数超过20个。
空白对照孔斑点数超过10个时结果被认为是“不确定”。
当PHA对照孔斑点数少于20个时，检测结果被认为是“不确定”。
二、结果的判断
如果抗原A和/或抗原B有应答，检测结果为“有反应性”，参照以下标准：
空白对照孔斑点数为0-5个时且（抗原A或抗原B孔的斑点数）（空白对照孔斑点数）≥6；
空白对照孔斑点数为6-10个时且（抗原A或抗原B孔的斑点数） ≥2×（空白对照孔斑点数）；
检测结果为“无反应性”：不符合上述标准且PHA对照孔正常。当PHA对照孔结果为“不确定”且抗原A和抗原B孔结果都为“无
有学者指出：
诊断活动性结核病患者外周血T-SPOT.TB斑点形成细胞中位数为442SFCs/10^6 PBMC 。

T-SPOT.TB在结核病诊断中的临床意义 (2)

T-SPOT.TB在结核病诊断中的临床意义目的：探讨基于γ-干扰素释放的T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）在结核病诊断中的意义。

方法：首先对2013年1月-12月间在我院住院的肺结核病人30例，结核性胸膜炎30例，结核性脑膜炎9例进行T-SPOT.TB检测，并分别对他们的血清、胸腔积液和脑脊液进行腺苷脱氨酶（ADA）检测，在某医院职工进行年底查体时，采用T-SPOT.TB对他们进行检测，对他们的血清进行ADA检测，在保密个人信息的前提下，调查所有进行T-SPOT试验的职工的健康状况。

结果：肺结核病人30例，T-SPOT.TB阳性30例,ADA阳性25例，结核性胸膜炎30例，T-SPOT.TB阳性30例，ADA阳性27例，结核性脑膜炎9例，T-SPOT.TB阳性9例，ADA阳性5例。

某医院共有420名工作人员查体，做T-SPOT试验的共291人，阳性54人，阳性率为18.6%，阴性237人，经调查及询问本人发现，54人中有3人曾先后患肺结核并治疗，现已治愈停药。

其他51人皆无症状（如：午后低热，盗汗等）、无体征（如：胸部X光片无病变，包括钙化灶、无胸腔积液）、内科、外科检查无淋巴结肿大，无关节肿大、疼痛等，基本排除活动性结核病。

结论：T-SPOT.TB作为结核菌感染检测的最为准确的方法之一，敏感性极高，各种结核病病人都表现阳性，而感染过结核菌未发病的人一般也都表现为实验阳性，由此可见：T-SPOT.TB阳性对结核病的诊断具有强大的支持作用，但存在一定的假阳性，而通过ADA阳性诊断结核病存在一定的假阴性，两者联合，能明显提高阳性率和特异性；但T-SPOT.TB检测阴性，基本可排除结核病（HIV 病人除外）［1］，对结核病的排除具有十分重要的意义。

标签：T-SPOT.TB，结核病，阴性排除TO investigate the Clinical significance of T-SPOT.TB assay in thediagnosis of TuberculosisObjective: To investigate the significance thatT-SPOT.TB assay based on the release of interferongamma in the diagnosis of tuberculosis.Methods :First, Random select 30 Pulmonary tuberculosis cases,30 Tuberculous pleurisy cases and 9Tuberculous meningitis cases inpatient during 2013 Jan. to 2013 Dec. using T-SPOT.TB and ADA to detect them . When one hospital staffs check their bodies, in the case of informed consent, using T-SPOT.TB to detect them .Then survey their health status and pledge myself to a top secret. At the same time using T-SPOT.TB to detect 30 patients that been diagnosed and are receiving treatment for tuberculosis.Results: T-SPOT.TB Positive numbers are:30 cases, 30 cases, 9 cases. ADA Positive numbers are 25 cases, 27 cases, 5 cases, There are 420 hospital staffs that check their bodies this time, andin the experiment of a total of 291 people, There are 54 people was positive, the positive rate was 18.6%, There are 237 people was negative. In fact, there are 3 people in 54 people had been suffered from tuberculosisand have now been cured. The other 51 people had no symptoms (such as: afternoon fever, night sweats), no signs (such as: no lesions after X ray chest, including calcification，no pleural effusion) , surgical, medical examination no lymph node swelling, no joint swelling or pain, Say in another way, the 51 people are ruled out active tuberculosis. At the same time using T-SPOT.TB to detect 30 patients that were suffered from tuberculosis and are receiving treatment, all the 30 cases were positive.Conclusion: T-SPOT.TB is one of the most accurate methods for detecting latent TB infection, it is high sensitivity. People infected with TB are usually manifested positive, Whether or not he has TB disease at that time. T-SPOT.TB test is negative have very important meanings for eliminating TB: T-SPOT.TB test was negative can exclude tuberculosisKey words:T-SPOT.TB，tuberculosis，negative test can exclude the disease在全球公共衛生问题中，慢性传染性疾病结核病的形势是异常严峻和迫切的，我国的结核病疫情更显严重，属全球22个结核病高负担国家之一，结核病的患病人数在全球仅次于印度居第二位。

结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血

结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定对肺结核患者诊断的价值研究发布时间：2022-12-19T07:39:21.433Z 来源：《健康世界》2022年21期作者：鲁成娇1 杨艳1 鲁成志2 李彦娴1 彭晓云2 肖明英2 [导读] 目的：分析比较结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定对肺结核患者的临床诊断价值鲁成娇1 杨艳1 鲁成志2 李彦娴1 彭晓云2 肖明英21.保山中医药高等专科学校临床医学院云南保山 6780002.保山市人民医院感染科云南保山 678000摘要：目的：分析比较结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定对肺结核患者的临床诊断价值。

方法：回顾性分析2019年1月-12月期间在保山市人民医院分院感染科收治的结核病患者临床资料，比较痰涂片检测肺结核患者对应四种检查方法的诊断效能。

结果：肺结核患者痰涂片检测与结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）、结核分枝杆菌IgG、IgM检测、结核DNA核酸测定、血沉（ESR）测定的灵敏度分别为92.6%（25/27）、63.3%（19/30）、68.9%（20/29）、81.6%（31/38），特异度分别为：22.9%（14/61）、73.6%（39/53）、73.4%（47/64）、36.5%（27/74）。

结论：结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）灵敏度明显高于其他检测方法，配合该病临床表现能够提升临床应用价值，该方法可用于肺结核诊断的重要辅助手段。

关键词：结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）；结核分枝杆菌IgG、IgM检测；结核DNA核酸测定；血沉（ESR）；痰涂片抗酸染色技术；肺结核结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，曾在世界范围内广泛传播，被称作“白色瘟疫”，我国是人口大国，结核病发病率高居世界前列。

结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)在结核性疾病中的诊断意义

论著
结核感染 T 细胞检测 (T-SPOT.TB) 在结核性疾病中的诊断意义
朱晓颖
天津市海河医院结核科天津津南 300000
【摘要】目的：探讨结核感染 T 细胞检测 (T-SPOT.TB) 在诊断结核性疾病中的应用价值。方法：选取我院 2015 年 1-6 月收治的 60 例结核病患者作为观察组，另外选取 30 例健康筛查者作为对照组，分别对上述病例进行痰涂片、结核抗体检测、结核菌素试验和结核感染 T 细胞检测 (T-SPOT.TB)，分析比较不同方法的检测结果。结果：60 例结核病患者中，有 52 例患者经 T-SPOT.TB 呈阳性，敏感性为 86.67%，经 TST 检测，43 例患者呈阳性，敏感性为 71.67%，两者的敏感性比较，差异具有统计学意义（P<0.05）；对照组的 30 例中，1 例经 T-SPOT.TB 呈阴性，特异性为 96.67%，经 TST 检测，特异性为 80.00%，两者之间差异具有统计学意义（P<0.05）. 结核感染 T 细胞检测 (T-SPOT.TB) 诊断阳性率明显高于痰涂片法和结核抗体法，且组间差异具有统计学意义（P<0.05）；经痰涂片镜检阳性标本中 T-SPOT.TB 的阳性率为 90.00%，阴性标本的阳性率为 85.00%，两者检测结果无明显差异（P>0.05）。结论：结核感染 T 细胞检测能快速准确诊断结核性疾病，在临床诊断中具有重要意义。
60 例结核病患者作为研究对象，另外选取 30 例健康筛查者作为对照组，探讨结
核感染 T 细胞检测试验（T-SPOT.TB）在诊断结核性疾病中的应用价值，现报道如下。
1．资料与方法
1.1 临床资料：选取我院收治的 60 例结核病患者作为研究对象，其中继发性肺结核患者 25 例、血行播散性肺结核患者 3 例、结核性胸膜炎患者 20 例、结

QB—SPOT结核实验

QB—SPOT结核实验
结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）是一种运用IGRA技术，检测被结核分枝杆菌特异的早期分泌靶抗原6（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP 10）分别刺激后释放γ-干扰素的效应T淋巴细胞，以辅助诊断结核感染的实验室检测技术。

TBspot试验通常指T-SPOT试验，即结核杆菌感染T细胞斑点试验，又称为结核菌感染干扰素释放试验，是利用结核特异性抗原，通过酶联免疫斑点技术，检测受试者体内是否存在结核效应的T淋巴细胞，从而判断被检查者是否感染结核杆菌。

该检查的原理是结核杆菌感染之后，T淋巴细胞会形成免疫记忆。

通常在体外分离到T淋巴细胞之后，培养增殖T细胞的同时，用相应的特异性抗原，进行刺激，激活T细胞记忆，有记忆的细胞则会分泌大量的干扰素。

结核T-SPOT检查即为结核菌T细胞斑点检测，是临床用于诊断结核病的新型检查方法。

通过检测干扰素的量，判断该细胞是否存在结核感染形成的记忆，进而通过进一步的反应判断是否存在结核菌感染。

但它的结果不能作为单独或决定性诊断活动性结核的证据，阳性结果仅提示患者体内存在结核杆菌特异性的效应T细胞。

但是否为活动性结核，则需要结合患者的临床症状及其他检测指标，进行综合判断。

现在已经有多项研究的结果显示，T-SPOT试验只能判断是否感染过结核，但无法鉴别活动性结核与潜伏性结核，因此对于活动性结核的诊断价值有限。

胸腔积液结核感染T细胞斑点试验(T—SPOT.TB)用于结核性胸腔积液(TBPE)诊断的临床价值分析

胸腔积液结核感染T细胞斑点试验（T—SPOT.TB）用于结核性胸腔积液（TBPE）诊断的临床价值分析目的探讨胸腔积液结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）对结核性胸腔积液的临床诊断价值。

方法选取我院2011年4月～2014年5月收治的78例结核性胸腔积液患者为观察组，另选同期非结核性胸腔积液患者75例为对照组，分别对两组患者实施T-SPOT.TB检查，对检测准确情况进行分析。

结果观察组检出阳性率为92.31%，对照组为8.00%，差异存在统计学意义（P＜0.05），T-SPOT.TB诊断特异性为92.54%，灵敏度为91.21%。

结论T-SPOT.TB在结核性胸腔积液诊断中，检出率高，具有较高敏感性与特异性，可作为首选辅助诊断方式，值得临床推广。

标签：结核；胸腔积液；T细胞斑点试验结核性胸腔积液与肺结核性胸腔积液均为常见胸腔积液类型，针对两种不同积液的鉴别方式，目前尚无确切手段[1]。

对患者进行体格检查，确定存在胸腔积液，需要经CT、B超等诊断方式，确定体积、位置。

随后经胸腔穿刺判断积液性质，最后作胸腔膜活检，才能确诊。

病理活检创伤大，且诊断时间长，因此，有效的实验室诊断，是临床研究的关键。

近年随着细菌学、生化学、细胞学检查逐渐发展，实验室鉴别胸腔积液性质也成为可能[2]。

本组研究对结核性胸腔积液采取结合感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）诊断，其诊断价值如下。

1 资料与方法1.1一般资料选取我院2011年4月～2014年5月收治的78例结核性胸腔积液患者为观察组，男性41例，女性37例，年龄28～74岁，平均年龄（50.6±4.8）岁；痰液、胸液培养显示结合分歧杆菌；经抗结核治疗后，显示胸腔积液有吸收；另选同期非结核性胸腔积液患者75例为对照组，男性39例，女性36例，年龄31～75岁，平均年龄（51.6±4.7）岁；经病理、细胞学检查，确诊为非结核性胸腔积液。

所有患者均有气急、胸闷等症状，超声检查与X线检查，确定有胸腔积液存在。

结核感染T细胞检测

47
在德国用T-SPOT.TB对健康的卫生保健工作者进行筛查。仅1 例阳性（1/95），为影像学工作者，接触病人超过35年。 TST检测假阳性结果34% （32/95）。
95
在接触结核的健康医务工作者和健康对照受试者中用TST和TSPOT.TB检测。155健康医务工作者中，TST阳性的27例，而 T-SPOT.TB仅3例阳性。健康对照组T-SPOT.TB全部阴性而 TST有3例阳性。
186
Kim et al. Am J Med 2009；122, 189-195
58 32
Janssens et al ERJ 2007；30(4):722-8 Dominguez et al Clin Vacc Immunol 2008; 15;16871
T-SPOT.TB高特异性检测所用的ESAT-6＆CFP 10抗原均来自结核
218
Storla et al. BMC Infectious Diseases 2009,9:60
6.结论
T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷的今天， T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点， T-SPOT.TB的检测物已不局限于静脉血，支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。
分枝杆菌基因组RD1区域，RD1区基因仅存在于结
核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）。
卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因因此 T-SPOT.TB不会受卡介苗或者非结核分枝杆菌影响。
种类
内容摘要
受试者数量 14
文献发表
特异性

T-SPOT.TB检验在活动性肺结核诊断中的临床意义

T-SPOT.TB 检验在活动性肺结核诊断中的临床意义【摘要】目的：观察分析活动性肺结核行T-SPOT.TB（结核感染T细胞）检验的临床价值。

方法：选取2020年1月-2020年12月本院收治的110例疑似活动性肺结核患者作为研究对象，入院后均给予PPD结核菌素试验以及T-SPOT.TB检验。

比较不同检验方法的准确度、特异性、灵敏度。

结果：与PPD试验相比，T-SPOT.TB检验准确度、特异度、灵敏度明显更高，结果差异显著（p<0.05）。

结论：相较于PPD试验，T-SPOT.TB检验效能相对更高，能够准确诊断活动性肺结核，且操作便捷，值得推广应用。

【关键词】活动性肺结核；PPD试验；T-SPOT.TB；诊断价值肺结核传染性较强，是因感染结核分枝杆菌所致，是我国重视程度较高的一类慢性传染病，尤其是活动性肺结核，传染性强，给患者身心健康带来了严重影响。

由于活动性肺结核初期症状不典型，易被患者忽略，以致于患者错过最佳治疗时机。

另外，活动性肺结核引起的咯痰以及咳嗽等症状容易与呼吸道感染混淆，所以临床误诊率较高。

若患者咯血，则说明病情已经步入了中晚期，需要临床尽快给予诊断、干预治疗，以改善疾病预后[1]。

痰培养具有一定的诊断效果，但是标本污染问题严重。

有必要探索一种更加可靠高效的检验方法，为临床准确诊断活动性肺结核提供依据。

1.一般资料与方法1.1一般资料本研究纳入110例疑似活动性肺结核患者作为研究对象，纳入时间2020年1月-2020年12月，包括56例男性、54例女性，年龄22-75岁，均龄（48.6±13.5）岁。

均伴有咳痰、高热不退、咳嗽、气喘以及咯血等呼吸道症状；征得当事人同意前提下签署研究同意书；与医学伦理要求相符。

排除精神病史、呼吸道感染、视听障碍或认知异常而不能正常配合的患者。

1.2方法所有入组的观察对象均行PPD试验、T-SPOT.TB检验，其中（1）PPD试验：选取结核菌素稀释液0.2ml，经皮内注入进行皮肤试验；通常注入左前臂掌侧下方1/3处；结束注射操作之后，局部表层便会产生一个皮丘，2-3d之后测量皮丘范围。