氨基酸分析系统
日立L-8900氨基酸自动分析仪
离子交换树脂
专用氨基酸分析仪的色谱柱主要是以磺酸型强酸性阳离子交换 树脂为柱填料。强酸型阳离子交换树脂,它是由苯乙烯和二乙 烯苯聚合而成的。该树脂是由苯乙烯和二乙烯基本聚合后磺化 而成,球状树脂的粒度一般在5-10μm之间,交联度多为8%12%。
交联度大,树脂的网状结构紧密,孔隙度小,对外界离子进入 树脂有阻碍作用,较大的离子根本不能进入树脂内部,这样就 可以提高树脂对离子的选择性。交联度大的适合用于分子量较 小的氨基酸分离;交联度小,树脂结构疏松,孔隙度大,适合 用于蛋白质、肽类的分离。
氨基酸在溶液中受溶液 pH 的影响存在着下列平衡
等电点(pI):在某一 pH 的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴 离子的趋势或程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时溶液 的pH成为该氨基酸的等电点。
不同氨基酸等电点
丙氨酸 Ala (A)6.02 天冬酰胺 Asn (N)5.41 半胱酰酸 Cys (C)5.02 谷氨酰胺 Gln (O)5.65 组氨酸 His (H)7.58 赖氨酸 Lys (K)9.74 苯丙氨酸 Phe (F)5.48 丝氨酸 Ser(S)5.68 色氨酸 Trp (W)5.88 缬氨酸 Val (V)5.97
缺点:水解时间长、而且不易水解完全。 提示:作为氨基酸全分析不可采用此法。 目前日本、欧洲和我国植物蛋白水解生产上采用的工艺均为酸水解法
4. 微波消解法:微波消解技术,近年来在化学领域尤其是在氨基酸 样品前处理方面显示出了良好的应用前景。
微波水解条件:体积30毫升左右高强度、耐腐蚀和透射微波的容器, 水解温度150-160℃,水解时间30分钟。
1.酸水解法:标准水解法,是普遍采用的水解方法,在水解过程中采 用6N 的盐酸作为水解剂,此方法的特点是水解彻底,水解后的氨基 酸全部以L-型形式存在,但色氨酸遭破坏。(6N HCL 、110℃真空 水解24小时)
Waters Kairos氨基酸试剂盒维护和使用手册说明书
目录I. II. III.IV. 入门指南 a.处理要求b.为氨基酸分析设置自动移液平台c.准备Tecan Freedom EVO 100/4d.试剂制备e.校准品、质量控制标准品、内标和 AccQ•Tag 复溶说明f.试剂布局g.样品分发和条形码h.执行自动样品制备脚本V. 推荐的分析方法VI. 工作流程概述VII.订购信息I. 简介收货后请核对试剂盒清单,如果包装被打开、损坏,内容物缺失或超出有效期,请勿使用本产品。
如需订购替换试剂盒或部件,请联系当地的销售代表。
订购时请提供所需产品的产品部件号和批号。
Waters Kairos 氨基酸试剂盒 - 自动Waters AccQ•Tag 试剂。
NNO NH OOO简介保存和稳定性使用Kairos氨基酸分析试剂盒a.Kairos 氨基酸LC 分析方法b.Kairos 氨基酸MS 分析方法非常感谢您购买Waters™ Kairos™氨基酸试剂盒,此试剂盒仅供研究使用。
本文将介绍Kairos 氨基酸试剂盒(仅供研究使用)的常规维护和使用信息,以期协助您精准测定血浆和尿液样品中的氨基酸。
本文中的方法已经使用AccQ•Tag™衍生化试剂、ACQUITY™ UPLC™ I-Class PLUS 系统、Xevo™ TQ-S micro 和ACQUITY QDa™质谱检测器进行了验证,但我们仍建议您根据具体样品优化分析条件并确认分析结果是否准确,尤其是当样品不完全符合工作站及脚本要求时。
为了确保通用性,该试剂盒中所有试剂的量都经过相应扩大,可适应不同自动移液工作站的残留体积要求。
沃特世不提供有关自动化的咨询服务。
如果需要根据特定工作站的要求进行任何调整,建议您直接联系移液工作站供应商寻求帮助。
如果偏离了脚本或工作站要求,用户应自行确保结果准确度得到确认。
本维护和使用手册针对该方案的实施提供了十分详细的分步操作说明。
如需观看该方案的完整培训视频,请访问:/Kairos 。
氨基酸分析仪仪器验证方案
日期:
****制药股份有限公司仪器验证文件
测值 Fm(mL/min) 。每测完一次,改变泵流量,几分钟后再恢复到原设定值,稳定后按上述方法收集流动 相、称重。重复测量三次,三次结果的平均值为流量的实测值。按式(2) 、 式 ( 3)计算泵 1 的 SS 和 SR。
Fm
=
W
W ρ t
****制药股份有限公司仪器验证文件
Sykam S433D 型氨基酸分析仪 验证报告
类 别: 部 门:验证委员会 编 号: 页 码: 共 15 页,第 1 页
版
次: �
新订
� 替代: 年 年 月 月 日 日
起草部门: 审 核:
审阅会签:
(验证委员会)
批
准: 年 月
年 日
月
日
实施日期:
复印数: 分发至:
(2) (3)
Fs—流量设定值; Fmax—3 次测量中流量最大值,mL/min; Fmin—3 次测量中流量最小值,mL/min。
泵 1 流量测量结束后,启动泵 2,按上述方法测量泵 1 和泵 2 的流量,由当时测得的缓冲液 B1 与印三 酮混合液的密度及流动相搜集时间,按(1)式计算泵 1 加泵 2 的流量,扣除泵 1 的流量,即得泵 2 的流 量,重复测量三次,按式(2) 、 式 ( 3)计算泵 2 的 SS 和 SR。 8.4.2 分离度 按仪器推荐的测量条件设置各种参数,启动仪器待稳定后,由进样系统注入氨基酸标准溶液(浓度 为 5nmol/L-20nmol/L)做色谱分析,由色谱图测量的数据按式(4)计算苏氨酸(Thr)-丝氨酸(Ser)、 甘氨酸(Gly)-丙氨酸(Ala) 、亮氨 酸(Leu)-异亮氨酸(Ile)的分离度 Rh。
生物化学经典实验——纸层析法分析氨基酸
2cm
图1. 点 样
展层剂 展层剂 图2. 滤纸的缝合
➢ 3、平衡 点样以后将滤纸与层析缸用配好的 溶剂系统蒸汽来饱和,这个过程称为平衡 (30min) ,否则,滤纸会从溶剂中吸收水分,溶 剂也会从滤纸表面挥发,使溶剂系统的组分发 生改变,严重时纸上会出现不同水平的溶剂前 沿,影响层析效果。
纸上层析的原理
常以水和有机溶剂作为展层剂;水和有机溶剂互 溶后形成两个相:一个是饱和了有机溶剂后的水相, 一个是饱和了水后的有机溶剂相。由于滤纸纤维素 上的羟基和水分子有较大的亲和力, 其吸附的水相 为固定相, 有机溶剂相为移动相。
由于物质的极性大小不同,在两相中分配比例有 所差异。极性小的物质在有机相中分配较多,随有 机相移动较快;而极性大的物质在水相中分配较多, 移动相对较慢,从而将极性不同的物质分开
➢ 4、展层 向层析缸中加入层析溶剂(高约
1.5cm) ,液层不要超过点样线,将滤纸点样点 朝下放入层析溶剂中,将层析缸密闭,待溶剂 到达滤纸上边线1-2cm时取出冷风吹干。
➢ 5、显色 用喷雾器向滤纸上均匀喷洒0.1%茚
三酮,热风吹干(加快反应)反应显色(或晾干后, 将滤纸放入烘箱中80-100℃,烘烤5分钟后 ),滤 纸上即显出紫红色或黄色的氨基酸斑点。
在相同的条件下,每种物质都有其固定 的Rf值。 Rf值的定义为:
原点到层析斑点中心的距离 Rf = 原点到溶剂前沿的距离
➢影响Rf值的因素有:
①物质本身的化学结构; ②展层所用溶剂系统; ③展层剂pH值; ④展层时的温度; ⑤展层所用滤纸; ⑥展层的方向(横向,上行或下行)。
氨基酸分析系统安全操作及保养规程
氨基酸分析系统安全操作及保养规程1. 安全操作1.1. 前置操作在操作之前,请确认以下几点:•检查设备是否正常运转;•关闭其它设备或电源,以免发生干扰;•配置好样品和试剂。
1.2. 操作流程1.打开仪器电源,并等待启动完成;2.在计算机上打开氨基酸分析仪软件;3.根据实验要求进行样品和试剂的配置;4.点击开始测试,等待测试完成;5.完成测试后,关闭电源和软件,清理仪器并归位。
1.3. 注意事项•操作过程中请勿随意触摸或拆卸设备;•加样试剂请注意化学品安全,避免吸入和皮肤接触;•标本在操作前需要进行预处理,保持洁净和干燥,以免造成测试结果不准确;•操作结束后请清理设备和工作区,避免样品残留和化学品混杂。
2. 保养规程2.1. 日常保养1.每次使用后,清理样品台和工作台,避免腐蚀;2.每周对设备进行维护保养,包括清洁各项零部件和接口、检查仪器运行状态和精度、更换损坏的部件以及稳定性测试等。
2.2. 设备保养1.定期进行设备维护和保养,包括清洗外观、更换滤芯、检查管路和阀门、校准仪器等;2.保持设备通风干燥,并避免长时间暴露在阳光下或潮湿环境中;3.不使用时关闭电源,并拔掉电源线。
2.3. 计算机保养1.定期进行杀毒和清理计算机垃圾;2.确保计算机处于干燥无尘的环境中;3.安装UPS保护电源,避免电源突然中断或电压波动对设备和数据造成影响;4.定期备份数据,以防数据丢失或损坏。
3. 总结以上就是氨基酸分析系统的安全操作和保养规程。
操作者在使用设备时,应严格按照规程进行操作,以确保实验结果的准确性和自身安全。
在规定时间内进行保养,可以延长设备的寿命,保证设备的正常使用和可靠性。
仪器设备的英文名
原子发射光谱仪 Atomic Emission Spectrometer AES电感偶合等离子体发射光谱仪 Inductive Coupled Plasma Emission Spectrometer ICP直流等离子体发射光谱仪 Direct Current Plasma Emission Spectrometer DCP 紫外-可见光分光光度计 UV-Visible Spectrophotometer UV-Vis微波等离子体光谱仪 Microwave Inductive Plasma Emission Spectrometer MIP 原子吸收光谱仪 Atomic Absorption Spectroscopy AAS原子荧光光谱仪 Atomic Fluorescence Spectroscopy AFS傅里叶变换红外光谱仪 FT-IR Spectrometer FTIR傅里叶变换拉曼光谱仪 FT-Raman Spectrometer FTIR-Raman气相色谱仪 Gas Chromatograph GC高压/效液相色谱仪 High Pressure/Performance Liquid Chromatography HPLC 离子色谱仪 Ion Chromatograph凝胶渗透色谱仪 Gel Permeation Chromatograph GPC体积排阻色谱 Size Exclusion Chromatograph SECX射线荧光光谱仪 X-Ray Fluorescence Spectrometer XRFX射线衍射仪 X-Ray Diffractomer XRD同位素X荧光光谱仪 Isotope X-Ray Fluorescence Spectrometer电子能谱仪 Electron Energy Disperse Spectroscopy能谱仪 Energy Disperse Spectroscopy EDS质谱仪 Mass Spectrometer MSICP-质谱联用仪 ICP-MS ICP-MS气相色谱-质谱联用仪 GC-MS GC-MS液相色谱-质谱联用仪 LC-MS LC-MS核磁共振波谱仪 Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer NMR电子顺磁共振波谱仪 Electron Paramagnetic Resonance Spectrometer ESR 极谱仪 Polarograph伏安仪 Voltammerter自动滴定仪 Automatic Titrator电导仪 Conductivity MeterpH计 pH Meter水质分析仪 Water Test Kits电泳仪 Electrophoresis System表面科学 Surface Science电子显微镜 Electro Microscopy光学显微镜 Optical Microscopy金相显微镜 Metallurgical Microscopy扫描探针显微镜 Scanning Probe Microscopy表面分析仪 Surface Analyzer无损检测仪 Instrument for Nondestructive Testing物性分析 Physical Property Analysis热分析仪 Thermal Analyzer粘度计 Viscometer流变仪 Rheometer粒度分析仪 Particle Size Analyzer热物理性能测定仪 Thermal Physical Property Tester电性能测定仪 Electrical Property Tester光学性能测定仪 Optical Property Tester机械性能测定仪 Mechanical Property Tester燃烧性能测定仪 Combustion Property Tester老化性能测定仪 Aging Property Tester生物技术分析 Biochemical analysisPCR仪 Instrument for Polymerase Chain Reaction PCRDNA及蛋白质的测序和合成仪 Sequencers and Synthesizers for DNA and Protein传感器 Sensors其他 Other/Miscellaneous20升不锈钢自动发酵罐 20-litre stainless automatic fermentor300升不锈钢自动发酵罐 300-litre stainless automatic fermentor80升不锈钢自动发酵罐 80-litre stainless automatic fermentorDNA测序仪 DNA sequencerDV800核酸/蛋白分析仪 Nucleic acid protein analyzerPCR操作台 PCR chamberPX2多用途PCR仪 Multi-purpose PCR equipmentRCCS-批量式旋转细胞培养系统 Rotary cell culture system氨基酸分析仪 Amino acid analyzer氨基酸自动分析仪 Auto amino acid analyzer比浊仪 Turbidity comparator不锈钢板式滤器 Stainless steel filter超级潜水电泳仪 submarine electrophoresis unit超滤器 Ultra filter and 4 pieces of filtration垂直电泳系统 vertical electrophoresis system超声波细胞破碎仪 Ultrasonic Cell Disruption System成像检测系统 Chemiluminescent detection system程序降温仪 Programmable controlled rate cell freezing system垂直电泳装置 Clamping frame and electrode assembly for vertical electrophoresis粗纤维测定仪 Equipment for Raw Fiber determination单杯药物溶出仪 Single cup diffusion meter蛋白纯化交换柱盒 Protein purification sample set蛋白纯化系统 Protein Purification System蛋白核酸分析仪 Protein nucleic acid spectrophotometer蛋白快速纯化工作站 Protein purification apparatus等电聚焦电泳仪 Protein isoelectric system等电聚焦双向电泳系统 Isoelectric focal bidirection electrophoresis 电化学工作站 Electrochemical workstation电击转化仪 Pulse cell transfection system电激转化仪 Electroporation instruments电洗脱电泳槽 Electro-eluter电细胞融合仪 Cell electro fusion device电泳槽 Electrophoresis cells电泳系统 Electrophoresis system电泳系统 2-D electrophoresis apparatus电泳仪 electrophoresis System电转膜系统 Mini transfer tank for electrophoresis动物细胞培养反应器 Animal cell bioreactor多肽合成仪 Peptide synthesis apparatus多用蛋白电泳仪 Horizontal vertical electrophoresis多用途PCR仪 Multifunctional PCR二维图象分析仪 Spectral bio image system发酵罐 Fermentation system防震台 High performance lab table for microscope干胶仪 Gle dryer核酸提取仪 Nucleic Acid isolation machine基因扩增仪 PCR基因枪 Particle delivery system (PDS)近红外成分分析仪 Near-infrared content analyzer拉制仪 Glass Microelectrode puller连续黏度计 continuous流式CELL分析仪 Flow cytometer脉冲电泳槽 Pulse field electrophoresis cell脉冲电泳仪 Pulse field electrophoresis spectrometer毛细管电色谱仪 Capillary Electropharesis Spectramete毛细管电泳分析仪 Capillary electrophoresis apparatus毛细管电泳系统 Capillary electrophoresis system毛细管电泳仪 Capillary electrophoresis.酶标仪 Micro plate spectrophotometer酶标仪 Automatic microplate reader酶标仪 Micro plate reader膜片钳系统 Patch clamp system凝胶成相系统 Gel imaging system凝胶染色系统 Gle stainer system凝胶渗透色谱仪 Gel permeation chromatograph抛光仪 Microforge切片转移装置 Section transfer system全波长扫描酶标仪 Pan-wavelength micro plate reade全湿电转移装置 Tank transfer unit全自动DNA测序仪(配套软件) DNA sequencer全自动DNA遗传分析仪 Genetic analyzer全自动氨基酸分析仪 Automatic Amino acid analyzer全自动多功能化学发光分析系统 Automatic multifunction chemiluminescent analysis system全自动多功能酶标仪 Automatic microplate reader全自动发酵罐 Automatic fermenter全自动固相萃取系统 Automatic solid phaseextract system全自动菌落计数仪 Colony Counter全自动凝胶成像分析系统 Gel image analyzing system染色体自动识别分析测试系统 Genetic workstation三升六联自动发酵罐 3-litre hexa-automatic fermentor实时荧光定量PCR系统 Real-time Fluorescence实验常用电泳仪 electrophoresis System视频导电仪 Electroencephalograph数码凝胶成像分析系统 Digital gel image analysis system双相电泳槽 Protein 2-D electrophoresis双向电泳系统 Isoelectric Focusing system双向电泳仪 Double-direction electrophoresis spectrometer水平程序控制电极拉制器 Horizontal programmed puller索式抽提仪 Soxhlet extractor梯度PCR仪 Gradient thermal cycler(PCR)通用酶标仪 Universal microplate reader微电极操纵器 Pulse motor microdrive微电脑酸度计 Micro-computer acidometer微电泳仪 Micro electrophoresis微机化多功能电化学分析仪 Computerized electrochemical analyzer微生物快速自动鉴定系统 Auto identification system for Microorganism 洗板机 plate cleaning instrument细胞融合仪 Cell fusion System细胞遗传学工作站 Cytogenetics workstation纤维提取器 Cellulose extractor小动物行为活动记录分析系统 Video camera and analysis system for animal observation小型垂直电泳 vertical electrophoresis unit小型双垂直电泳槽 Mini double-sided vertical cell序列分析电泳系统 nucleic acid sequencing system液氮罐 Cryobiolgical inventory system遗传分析仪 Genetic analyzer荧光定量PCR Fluorescence quantitatiye PCR原位灭菌实验室级发酵设备 Laboratory Fermenter真空浓缩机 Speed vacuum concentration apparatus转移电泳槽 Trans-blot transfer紫外交联仪 Cross linking machine(UV)自动堆码器及培养基制备系统 Auto agar culture apparatus自动微量注射器 Auto-micro injector最新荧光酶标仪 Fluorescence microplate reader高速离心机 High Speed Centrifuge荧光分光光度计 Fluorescence SpectrophotometerKX-21全自动血液分析装置KX-21 The full-automatic blood analyzes to equip KX-21SQUID高精度磁学测量系统 SQUID MagnetometerXRD粉末衍射仪 X-Ray Diffraction Meter一氧化碳分析仪 Portable IR CO Analyzer三用紫外分析仪(暗箱式三用紫外分析仪) Tripurpose ultraviolet analyzer (Dark-box Triusage Ultraviolet Analysis Instrument)大流量TSP采样器 Grate flow TSP sampling instrument小型台式离心机 Benchtop Centrifuge双向电泳 2-D electrophoresis system双垂直电泳槽(两种电泳槽及配套电泳仪) Vertical Electrophoresis Tanks (Two Electrophoresis Tanks with an Electrophoresis Meter)双波长飞点扫描分析仪 Dual-wavelength Flying Spot Scanner双波长飞点薄层扫描仪 dual-wavelength flying spot TLC scanning instrumater双稳定时电泳仪及电泳槽 Electrophoresis Meter with Electrophoresis Tanks 心理CT Psychology Computer Test System心理测试软件系统 Psychology Test Software气相色谱-质谱联用仪 GC-MS气象色谱仪 Gas Chromatography水质监测仪 Water quality monitor水浴摇床 Water Baths Shaker加热磁力搅拌器 Magnetic Stirring Apparatus半自动生化分析仪 Semiautomatic biochemistry analyzer半微量电子分析天平 Analytical semi-micro-balance可见风光光度计 VIS Spectrophotometer四通道血凝仪 4 channels blood coagulometer生化培养箱 Biochemical生化培养箱 Biochemisty Incubators生物制品冷藏柜及真空干燥器(低温培养箱) ICP-incubator cooled with process controller生物制品冷藏柜及真空干燥器(真空干燥箱2) Vacuum drying oven电子天平 Electronic balance电化学工作站 Work station for electric chemistry电化学分析系统(恒电位仪) Electrochemical Analysis System (potentiostat / galvanostat)电动搅拌机 Agitator电泳仪 Electrophoresis电热恒温培养箱 Electro- thermal incubator电热恒温鼓风干燥箱 Electro- thermostatic blast oven电热鼓风干烘箱 Lab Oven电感耦合等离子体发射光谱仪 Simultaneous Inductively Coupled Plasma Atomic Emission Spectrometer(ICP—OES)石墨炉原子化器 Graphite furnace atomizer光谱仪用灯 Spectrum Instrument Lamp全功能型稳态瞬态荧光光谱仪 Combined Time Resolved&Steady State Fluorescence Spectrometer全自动生化分析仪 Automatic biochemical analyzer全自动免疫组化染色系统 Autostainer Universal Staining System全自动界面张力仪 Automatic tension apparatus全自动遗传分析系统(遗传分析系统) Automated Genetic Analysis System 全自动酶标检测仪 Auto ELISA detecter冰箱(无霜) Refrigerator (Frost Free)同步热分析仪 Simultaneous Thermal Analysis扫描探针显微镜 Scanning probe microscope红外干燥箱 Infrared Oven红外分光光度计 Infrares spectrophometer红外快速煤质分析仪 Computer Ir Celerity coal Analysis Instrument自动双重纯水蒸馏器 Automatical Double Pure Water Distillatory自动电位滴定仪 Automatic Titrimeter自动血球计数仪 automatic Blood Cell Counter血液生化分析仪 blood biochemical analyzer行星式和膏机 Material mixer低速大容量离心机 Low Speed Large Capacity Centrifuge事件相关诱发电位仪 Event related evoked potentials equipment事件相关诱发电位仪 Event related evoked potentials equipment实验室用制冰机 Ice Machine for Laboratory昆虫触角电位测量系统 Insect tactile electromagnetic wave analyzer表面吸附仪 Surface and aperture meter表面活性测定仪 Exterior Live Determiner便携式脑电图机 32ch Digital EEG System哈氏可磨性指数测定仪 Milling Exponent Determiner差热热重同步分析仪 TG/DTA meter恒温振荡培养器 Thermostatic oscillation incubator荧光分光光度计 Spectrofluorometer荧光分光光度计 Fluorescence Spectrophotometer荧光光度计 Fluorescence Photometer荧光酶标仪 Microplate System原子吸收分光光度计 Atomic Absorption Spectrometer火焰分光光度计 Flame Emission Spectrophotometer核酸蛋白纯化系统 Nucleic Acid Auto-purification System核酸提取仪 6100 Nucleic Acid PrepStation真空干燥箱 Vacuum Drying Apparatus机械真空泵 Vacuum Pump真空磁悬浮熔炼炉 Vacuum induction levitation melting furnace真空磁控溅射系统 Vacuum evaporative sputtering machine胶质量指数测定仪 Colloid Quality Exponent Determiner高效毛细管电泳仪 High Efficiency Capillary Electrophoresis高速冷冻离心机 high-speed refrigerated centrifuge(used for the laboratory)偏振赛曼原子吸收分光光度计 Polarization Atomic Absorption Spectrophotometer超低有机物型超纯水机 Ultrapure Water Machine二氧化碳培养箱 CO2 INCUBATORS高速冷冻多功能离心机 High speed refrigerated multifunction centrifuge 吹扫气体发生器 FT-IR Purge Gas Generator制冰机 System ice model旋转蒸发器 Rotary Evaporators傅立叶变换红外光谱仪 FTIR spectrometer喷雾干燥机 Spray Dryer循环水式多用真空泵 Vacuum Pump with Circulated Water System智能灰熔点测试仪 Intellectual Ash Melting Point Test Instrument智能液化硫测定仪 Fludified Sulfur Determiner温冰箱 Low temperature refrigerator焦炭反应性测定仪 Coke Reaction Determiner紫外/可见/近红外分光光度计 UV-Visible-NIR Spectrophotometer紫外分光光度计 UV Spectrophotometer紫外可见分光光度计 UV/VIS spectrophotometer紫外光栅分光光度计 VIS Spectrophotometer超级恒温水浴 Super ThermostaticWater-bath超声波细胞粉碎机 Ultrasonic Cell Crusher超纯水系统 Ultra Purified Water System超纯水系统 Hyperpure water system超滤装置(含超滤膜) Ultrafilaer Instrument微孔板液闪发光计数仪 Gradient Thermal Cycler微机控压密闭消解系统 Microvave Digestion System微颗粒测定仪 Micro particulate monitor数字图象分析系统 Micro-image analysis system数字显示旋转蒸发仪(垂直冷凝) Digital rotary evaporators (vertical condenser)瑞士梅特勒电位滴定仪(全自动多管电位滴定仪) Potential Titrator (Flexible Dual Driver General Autotitrator)熔点仪 Melting Point Apparatus磁力恒温搅拌器 Stirring hot plate精密电子天平 Precision electronic balance精密型便携式电导仪 Conductivity Meter膜片钳微操纵器 Patch-Clamp Micromanipulators膜片钳灌流系统 Patch Clamp Bath Perfusion System酶标仪 Microplate Reader酸度计 pH Meter膳食纤维测定仪 Dietary Fiber Determination System薄层色谱扫描分析仪 Thin-layer chromatogram流动分析与过程分析 Flow Analytical and Process Analytical Chemistry 气体分析 Gas Analysis基本物理量测定 Basic Physics样品处理 Sample Handling金属/材料元素分析仪 Metal/material elemental analysis环境成分分析仪 CHN Analysis发酵罐 Fermenter生物反应器 Bio-reactor摇床 Shaker离心机 Centrifuge超声破碎仪 Ultrasonic Cell Disruptor超低温冰箱 Ultra-low Temperature Freezer恒温循环泵 Constant Temperature Circulator超滤器 Ultrahigh Purity Filter冻干机 Freeze Drying Equipment部分收集器 Fraction Collector氨基酸测序仪 Protein Sequencer氨基酸组成分析仪 Amino Acid Analyzer多肽合成仪 Peptide synthesizerDNA测序仪 DNA SequencersDNA合成仪 DNA synthesizer紫外观察灯 Ultraviolet Lamp分子杂交仪 Hybridization OvenPCR仪 PCR Amplifier化学发光仪 Chemiluminescence Apparatus紫外检测仪 Ultraviolet Detector电泳 Electrophoresis酶标仪 Microplate Reader 或(ELIASA)CO2培养箱 CO2 Incubators倒置显微镜 Inverted Microscope超净工作台 Bechtop流式细胞仪 Flow Cytometer微生物自动分析系统 Automatic Analyzer for Microbes生化分析仪 Biochemical Analyzer血气分析仪 Blood-gas Analyzer电解质分析仪 Electrolytic Analyzer尿液分析仪 Urine Analyzer临床药物浓度仪 Analyzer for Clinic Medicine Concentration血球计数器 Hematocyte Counter菌落计数仪 Colony counters恒温·干燥器/恒温恒湿器 Drying Ovens/Humidity Chambers送风定温恒温器 Forced Convection Constant Temperature Ovens惰性气体恒温器 Inert Gas Ovens精密恒温器 Precision Constant Temperature Ovens洁净恒温器 Clean Ovens送风定温干燥器 Forced Convection Constant Temperature Drying Ovens 空气幕送风定温恒温器 Forced Convection Ovens With Air Curtain定温干燥箱 Constant Temperature Drying Ovens角形真空定温干燥器 Vacuum Drying Ovens恒温恒湿器 Constant Temperature and Humidity Chambers流水线设备 In-Line System for Underfill Adhesive and Encapsulation恒温培养器 Constant Temperature Incubators---可程式低温培养器 Low Temperature Program Type Incubators低温培养器 Low Temperature Incubators低温稳定性培养器 Low Temperature Stability Incubators培养器 IncubatorsCO2培养器 CO2 Incubators振荡培养器 Shaking Incubators冻结干燥器 Freeze Dryers---冻结干燥器 Freeze Dryers离心形冻结干燥器 Centrifugal Freeze Dryers灭菌器 Sterilizers---干热灭菌器 Drying Sterilizers高压灭菌器 Autoclaves Sterilizers低温等离子灭菌器 Low Temperature Plasma Sterilizers环形燃烧管灭菌器 Loop Cinerator纯水制造装置 Water Purifiers---纯水制造装置 Water Stills超纯水制造装置 Ultra-pure Water Purifiers简易纯水制造装置 Water Purifiers超纯水制造装置系统 Ultra-pure Water Purifier System大容量纯水制造装置 Water Purifiers System洗净器 Washers---实验室玻璃器皿清洗机 Laboratory Glassware Washers超声波清洗机 Ultrasonic Cleaners大型超声波清洗机 Aqueous Ultrasonic Cleaning Systems超声波试管清洗机 Ultrasonic Pipet Washers超声波清洗机 Ultrasonic Cleaners恒温液槽 Constant Temperature Baths---投入式恒温装置 Constant Temperature Devices油槽 Oil Baths振荡式低温水槽 Low Constant Temperature Shaking Baths深槽形恒温水槽 Constant Temperature Water Baths粘度测定槽 Kinematic Viscosity Baths液压式恒温水槽 Constant Temperature Water Baths精密低温恒温水槽 Precision Low Constant Temperature Water Baths低温恒温水槽 Low Constant Temperature Water Baths试验管加热板 Heating Blocks冷却液体循环器 Cooling Liquid Circulators冷却水循环器 Cooling Water Circulators便携式冷却器 Immersion Cooler寒流捕获器 Cooling Trap冷却水外部循环器 Cooling Water Circulators试验槽 Thoughs高温炉 High Temperature Furnaces Heating Apparatus---马弗炉 Muffle Furnaces超高温电气炉 Ultra-High Temperature Electric Furnaces高温电气炉 High Temperature Electric Furnaces真空气体置换炉 Gas Replacement Vacuum Furnaces造粒干燥装置 Granulating and Drying Apparatus for Wet Powder Body and Liquid---喷雾干燥器 Spray Dryer有机溶剂喷雾干燥器 Spray Dryer生产线喷雾干燥器 Spray Dryer for Product Line浓缩器 Evaporators---旋转蒸发仪 Rotary Evaporators溶媒回收装置 Solvent Recovery Unit乳化·搅拌·振荡器 Homogenizers, Stirrers, Shakers---磁力搅拌器 Magnetic Stirrers加热板 Hot Plates振荡器 Shakers送液·减压·加压装置 Aspirators, Pumps, Compressors搅拌器 Stirrers实验室自动乳钵 Laboratory Mill/Universal Ball Mill粉碎器 Cutting Mills生命科学关连仪器 Life-Science Related Instruments生物技术关连仪器·食品分析仪器 Bio-Technology Related Instruments, Food Analysises Instruments—形态观察分析系统 Mapping Analyzer生物分子间相互作用分析系统 Biomioleculer Interaction Analysis System高速液相色谱仪 LC-CE/CEC System血管壁细胞混合培养系统 Dynamic Coculture System动植物破碎机基因检查仪器 Genopattern AnalyzerATP测定器 ATP Measuring Instrument分光光度计 Microplate Spectrophotometer细胞培养·发酵用自动分析系统 Automated Chemistry Analyzer for Monitoring Cell Culture and Fermentation Processes细胞生死判别系统 Cell Vital Analyzer细胞计数分析装置 Cell Scaler/Analyzer2元电泳仪荧光 Spot Cutter高速冷却离心机 High Speed Refrigerated,Centrifuges微量高速离心机 High Speed micro-Centrifuges液体中微生物简单测试仪 Simple Germ Test Kit “simple Tester”试料混合器 Blender防爆冷藏柜 Explosion proof Freezer and Refrigerator杀菌水生成系统 Sterilization Water Production Device膜式脱气装置 Filter-type Air Extractor抗酸化机能水制造装置 Acid-Resistant Water Purifier高性能净水器反渗透式高性能净水器分析仪器 Analytical Instruments---分光光度计 Spectrophotometer元素分析装置 Atomic Absorption SpectrophotometerICP发光分光分析 ICP Atomic Emission SpectrophotometerX线光分析计 X-Ray Fluorescence Analysis气体分析计 Gas Analyzers回折/散乱式粒度分布测定装置 Analyzer,Particle Size Distribution Laser Diffraction Device低真空走查电子显微镜 Scanning Probe Micro Scope高速液相色谱仪 Liquid Chromatograph滴定装置 Automatic Titration大塚电子制品电位计膜厚计散乱光光度计 LCD测定·评价装置热量计天平 Balances物性试验·测定器 Physical Properties Measuring Apparatus, Testing, and Measuring Apparatus---近红外分析装置 Fourier Transform Near Infrared Spectrometer融点测定仪 Melting Point Measuring Instrument热分析系统 Thermo System自动反应装置 Automatic Reactor水分计 Moisture Analyzer引张压缩试验机 Tester,Tension and Compression数字粘度计 Digital Viscometer振动式粘度计 Vibro Viscometer浸透压测定装置 Osmotic Pressure Meters超临界水酸化系统 Small SCWO Systems重金属排液处理装置 Heavy Metal Eliminator简易水质检查试验纸 Water Quality Tester StripsPH计 Phmeter导电率计 Conductivity Meters湿度计 Hygrothermometers过滤器 Filter试验研究设备 Laboratory Design and Engineering---通风柜 Fume Hoods排风机 Blowers实验台 Laboratory Furniture保管柜 Storage Cabinets实验台用附属器具 Carts and Laboratory Table Attachments环境制御设施 Research Facilities, Product Lines, Environment control Devices---生物安全柜 Biohazard Safety Equipment废水处理系统 Waste Water Treatment试验动物饲养室 Bio Clean Room for Animal experiment环境实验设施 Research Facilities, Product Lines, Environment Experiment Facilities---电磁波室隔音室恒温室/恒温恒湿室 Constant Temperature and Humidity Facilities低温室 Constant Low Temperature Facilities人工气候室 Artificial Atmospheric Phenomena Simulator动物研究用高压蒸汽灭菌装置 Sterilization Systems, for Animal Research。
氨基酸分析仪培训讲义
3、在交换位置上进行离子交换,这个平衡 是瞬间的。被交换的离子带的电荷越多, 它与树脂的结合越紧密,被其它离子取 代就越困难。
4、被交换的离子通过树脂扩散到表面。
5、用洗脱液洗脱,被交换的离子扩散到
溶液中去。
氨基酸与树脂间的交换主要决定于带 有相反电荷之间的引力作用。阳离子树 脂本身带有负电荷,在低PH条件下,氨 基酸带正电荷,两者正负吸引而结合, 并且氨基酸所带正电荷越多,结合得越 紧密,被Na离子置换就越困难,碱性氨 基酸就是如此。
其理论塔板数越高,其分离效果也越好, 而且此种填充柱还可以在高流速下进行 工作,大大提高了分辨率和工作效率。
(3)专利的反应柱技术:日立氨基酸 分析仪采用仅长4cm内填惰性均匀小颗粒 金刚砂日立公司专利的反应柱,此种柱 中小颗粒填料不但令液体流动平缓均匀, 而且在135度最佳反应温度下大大提高了 比表面积,完全避免了样品峰的扩散及 重叠现象,从而保证了样品在高灵敏度、 快速分析过程中很好的进行最佳
4、反应单元(反应柱、反应温度加 热设备)
作用:被分离的单一组分物质与反应液 在反应单元反应、生成可检测物质。
5、检测单元(分光光度计) 作用:准确检测单一组分物质的电能信 号(mv).
6、程序控制、数据处理(工作站)
作用:仪器的运行程序控制、检测结果 的处理。
从图、表面看(1)自动进样器(2)泵1、 泵2单元(3)电磁阀(4)除气(5)废 液槽(6)检测器(7)氮气单元(8)柱 温箱(9)过滤器(10)混合器(11)反 应柱单元(12)试剂和清洗液(13)保 护罩。左侧:电源开关。后部
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含内标的校正标样在 -20℃可保存 1 个月。
3.3 衍生校正标样
衍生反应将标样中的氨基酸转化为稳定的 AQC 衍生物,衍生方法如下(图 3-4):
衍生方法
1. 将加热装置预热至 55℃, 2. 用清洁的注射器移取 10µL 校正标样注入清洁的 6×50mm 样品管底部, 3. 用微量移液器加入 70µL AccQ·Fluor 硼酸盐缓冲液(Buffer 1)到样品管中,涡旋混合, 4. 用另一清洁的微量移液器吸液头加入 20µL AccQ·Fluor 衍生剂到样品管中,立即涡
1.1 衍生化学简介
AccQ•Tag 方法的基础在于专为氨基酸分析而开发的衍生试剂。Waters AccQ•FIuor 衍 生 试 剂 ( 6- 氨 基 喹 啉 基 -N- 羟 基 琥 珀 酰 亚 氨 基 甲 酸 酯 6 - aminoquinoIyI - N hydroxysuccinimidyl carbamate,即 AQC ) 是含 N - 羟基琥珀酰亚氨基的活性杂环氨基甲酸 酯,它是一种新型氨基衍生化合物,结构如下(图 1-1).
确保所有的玻璃仪器都是清洁的。对于高灵敏度的分析,全部玻璃容器都应在 500℃至 少热解 4 小时。
在 Pico·Tag 工作台中水解样品
1. 在清洁的 6×50mm 样品管中真空干燥样品溶液, 2. 加 200µL 恒沸盐酸至反应瓶的底部,往酸中加入结晶的酚, 3. 用真空——氮气吹扫反应瓶三次,以排除瓶中的空气, 4. 用瓶塞密封瓶子, 5. 在 112~116℃水解 20~24 小时, 6. 冷却反应瓶,小心打开瓶塞,擦去样品管外过量的盐酸,并在真空下干燥。
watersaccq?tag化学试剂包使用手册中文翻译版仅供内部使用原文版权为waters公司所有目录第一章accq?tag方法简介衍生化学简介accq?tag化学试剂包第二章配制accq?fluor衍生剂第三章制备校正标样制备外标法校正标样制备内标法校正标样衍生校正标样第四章样品制备测算样品用量水解样品衍生样品第五章分离氨基酸衍生物设置检测器准备洗脱液和梯度表进样量准则评价标样分离情况第六章问题解答衍生反应问题解答色谱分离问题解答附录色谱分离使用紫外检测器氨基酸名称缩写及分子量分子式第一章accq?tag方法简介本章包括以下小节衍生化学简介accq?tag化学试剂包accq?tag方法简介本手册介绍watersaccq?tag氨基酸分析方法
氨基酸分析仪操作方法
氨基酸分析仪的操作流程及注意事项
操作流程
• 打开自动进样器,放入样品。 • 设置分析参数,如色谱柱、洗脱液、检测器等。 • 启动仪器,进行样品分析。 • 查看分析结果,进行数据处理。
注意事项
• 样品处理过程中,要保证样品的均匀性和代表性。 • 分析过程中,要保证仪器各部件的正常运行。 • 数据处理过程中,要保证数据的准确性和可靠性。
CREATE TOGETHER
SMART CREATE
氨基酸分析仪操作方法详解
01
氨基酸分析仪简介及工作原理
氨基酸分析仪的发展历程与应用领域
氨基酸分析仪的发展历程
• 20世纪50年代初期,出现了第一代氨基酸分析仪,主要用于蛋白质水解液中氨基酸的定量 分析。 • 20世纪60年代,出现了第二代氨基酸分析仪,采用了柱前衍生技术,提高了分析速度和灵 敏度。 • 20世纪80年代,出现了第三代氨基酸分析仪,采用了高效液相色谱技术,实现了氨基酸的 高灵敏度、高准确度分析。
氨基酸分析仪在医药领域的应用实例及案例分析
医药领域的应用实例
• 生物制品中氨基酸的纯度分析,评价生物制品的质量。 • 血液制品中氨基酸的分析,评价血液制品的营养价值。 • 药物研究中氨基酸的分析,评价药物的效果和安全性。
案例分析
• 某品牌奶粉中氨基酸的分析,发现某种氨基酸含量偏低,可能影响奶粉的营养质量。 • 某品牌酱油中氨基酸的分析,发现某种氨基酸含量偏高,可能影响酱油的风味和品 质。
氨基酸分析仪的分类
• 高效液相色谱法(HPLC):采用高压液相色谱技术,实现了氨基酸的高灵敏度、 高准确度分析。 • 气相色谱法(GC):采用气相色谱技术,分析了氨基酸的挥发性成分。 • 离子交换法(IE):采用离子交换技术,分析了氨基酸的阴离子成分。
S433D氨基酸分析仪特点介绍
茚三酮与氨基酸的衍生反应
茚三酮 + 伯胺型氨基酸 还原茚三酮 + 仲胺型氨基酸
兰紫色化ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ物 黄绿色化合物
O OH
OH O O
OH
OH O
水合茚三酮
O
R CH COOH NH2
还原茚三酮
H OH O
RCHO
O
O
H NH3
HO
O
兰紫色化合物
N O
CO2 O O
NH3
伯 胺 型
O OH
OH O
O
仲
COOH N
➢配缓冲液更简单即使所配缓冲液的pH值或离子强度略有偏差,也只
需简单的调整梯度程序。而传统的等度洗脱则必须重新配液
➢可获得更佳的分离度如果某峰附近出现干扰峰,可针对此峰进行
局部梯度调整使其不受干扰,而传统的等度洗脱只能重新配缓冲液才可分 离干扰峰,但重新配液后又会影响其它峰的分离
➢优异的定性定量重复性理论上等度的重复性更好。然而,得益于
短 繁琐 18-26种 低
高
柱后(专用仪) 高
高
长 简单 40种以上
高
低
S-433D原理图
S-433D特点介绍
带制冷功能长时间连
续分析不受环境温差影响
全部溶液惰性保护
溶液存放期更长
溶液瓶带独立阀门
可在使用过程中加液
S-433D特点介绍
内置在线脱气消除溶
液中微小气泡的不良影响
高精度梯度混合缓冲
液种类只需2-3种,配液更 简单;可获得最佳分离度; 可调整出峰顺序及保留时间, 便于研究
义仪器的最佳工作状态
谢 谢!
出类拔萃的设计和加工,sykam采用梯度洗脱时,其重复性仍优于(至少不 低于)所有竞争对手,因而sykam会采用此成本较高但却方便用户的设计
实验五、氨基酸分离与鉴定--双向层析
实验八、氨基酸分离与鉴定--双向层析1、目的要求(1)学习双向纸层析的原理。
(2)掌握纸层析法分离混合氨基酸的操作方法。
2、实验原理纸层析是以滤纸作支持物,用一定的溶剂系统展开,使混合样品达到分离分析的层析方法。
其一般操作是将样品溶解在适当溶剂中,点样在滤纸的一端;再选用适当的溶剂系统,从点样的一端通过毛细现象向另一端展开,展开完毕,取出滤纸晾干或烘干,再以适当的显色剂或紫外灯、荧光灯下观察其图谱。
样品经展开后某一物质在纸层析谱上的位置常用比移值Rf来表示。
Rf=纸层析可看作是溶质(样品)在固定相与流动相之间的连续抽提,由于溶质在两相之间的分配系数不同而达到分离。
一定的物质在两相间有固定的分配系数,因而在恒定条件(液剂、PH、温度)下,各物质有固定的Rf值,据此可达到分析鉴定的目的。
由于滤纸纤维可吸收20~25%的水分;且其中6~7%以氢键形式与纤维素上羟基结合,一般条件下难脱去;所以纸层析实际上是以水相作固定相,展开的溶剂作流动相。
纸层析操作按溶剂展开方向可分为上行、下行和径向三种。
氨基酸分离一般用上行法。
上行法又分单向(成分较为简单的样品)和双向(单向时斑点重叠分离不开,于是在其垂直方向用另一种溶剂系统展层)。
双相层析谱可分辨十几种以上的样品。
层析溶剂要求:(1)被分离物质在该溶剂系统中Rf在0.05~0.8之间,各组分之Rf值相差最好能大于0.05,以免斑点重叠。
(2)溶剂系统中任一组分与被分离物之间不能起化学反应。
(3)被分离物质在溶剂系统中的分配较恒定,不随温度而变化,且易迅速达到平衡,这样所得斑点较圆整。
本实验采用八种混合氨基酸为样品,用酸性和碱性两种溶剂进行双向层析,以茚三酮为显色剂,可获得分离清晰的层析图谱,如图3.2所示。
图3.2 八种混合氨基酸双向层析图谱3、试剂和器材一、试剂0.1%(W/V)茚三酮丙酮液。
溶剂系统:第一相:正丁醇∶88%甲酸∶水=15∶3∶2(V/V);第二相:正丁醇∶吡啶∶95%乙醇∶水=5∶1∶1∶1(V/V)。
HPLC方法测定甘氨酸的研究方法第三组
HPLC方法测定甘氨酸的研究方法第三组甘氨酸是一种重要的氨基酸,在生物化学和医学研究中有广泛的应用。
为了准确快速地测定甘氨酸的含量,高效液相色谱(HPLC)是一种常用的分析方法。
以下是一种可用于测定甘氨酸含量的HPLC方法的详细步骤。
材料和设备:1.HPLC系统(包括色谱仪、流动相槽、注射器和检测器)2.反相色谱柱(C18柱)3.甘氨酸标准品4.甘氨酸样品5.溶剂:多甲醇、乙腈6.pH2.5磷酸溶液步骤:1.准备样品:将甘氨酸样品溶解在pH2.5的磷酸溶液中,摇匀并过滤以去除杂质。
2.准备标准曲线:取不同浓度的甘氨酸标准品(例如10、20、40、60、80和100μg/mL),分别进行HPLC分析,并绘制标准曲线。
3.准备流动相:将多甲醇和乙腈按照一定比例混合,作为流动相。
4.设置HPLC参数:将色谱柱安装到HPLC系统中,并设置流动相槽的流速和梯度淋洗方案。
典型的梯度方案是以多甲醇和乙腈为流动相,初始时使用多甲醇,然后在一定时间内逐渐增加乙腈的浓度。
5.注射样品:将甘氨酸样品注入HPLC系统的注射器中,设定合适的体积。
6.分析样品:将样品通过色谱柱进行分离和检测,通过检测器测量甘氨酸的峰高度或面积。
7.计算结果:使用标准曲线来计算甘氨酸样品中的含量。
通过峰高度或面积与标准曲线上的相应浓度进行比较,可以计算出甘氨酸的含量。
优化HPLC方法的关键点:1.选择适当的柱:根据需要选择适当的色谱柱,C18柱是常用的反相柱,较好地保留和分离甘氨酸。
2.流动相的选择:根据甘氨酸的性质和溶解度,选择合适的流动相组成。
3.优化分析条件:包括流速、梯度方案和检测器灵敏度等,以获得最佳的分离和检测效果。
4.样品预处理:样品的预处理步骤(如pH调节和过滤)对于获得准确结果至关重要。
总结:HPLC是一种快速、准确、灵敏的方法,可用于测定甘氨酸含量。
根据上述步骤和关键点指导,可以成功地开展甘氨酸的HPLC分析。
同时,建议在进行实验前,对所使用的方法进行验证,以确保方法的准确性和重复性。
国家食品药品监督管理局关于临床分析用氨基酸分析仪等产品分类界定的通知
国家食品药品监督管理局关于临床分析用氨基酸分析仪等产品分类界定的通知文章属性•【制定机关】国家食品药品监督管理局(已撤销)•【公布日期】2007.02.16•【文号】国食药监械[2007]93号•【施行日期】2007.02.16•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】药政管理正文国家食品药品监督管理局关于临床分析用氨基酸分析仪等产品分类界定的通知(国食药监械[2007]93号)各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局(药品监督管理局):为适应医疗器械监督管理工作的需要,现将临床分析用氨基酸分析仪等63种产品的分类界定通知如下:一、临床分析用氨基酸分析仪。
产品预期用途:通过分析生理体液中氨基酸含量来判断人体代谢状况,并对多种氨基酸代谢病进行诊断。
作为Ⅱ类医疗器械管理。
分类编码代号6840。
二、牙胶尖:齿科根管治疗术中根管充填时使用的固体填充物。
产品预期用途:与糊剂充填物配合使用,达到封闭根管的目的。
作为Ⅲ类医疗器械管理。
分类编码代号6863。
三、高渗盐溶胶:质量比为20%的氯化钠胶体溶液。
组成成分为水、氯化钠、黄单胞菌胶。
产品预期用途:用于需要软化并清除的干性坏疽伤口,使坏死组织水化,易于常规清疮。
作为Ⅲ类医疗器械管理。
分类编码代号6864。
四、等渗盐水凝胶:质量比为0.9%的氯化钠胶体溶液。
组成成分为水、氯化钠、黄单胞菌胶。
产品预期用途:使创口保持湿润,从而使伤口产生自溶性清创。
作为Ⅲ类医疗器械管理。
分类编码代号6864。
五、显色基质法鲎试剂:由冻干鲎试剂、鲎三肽、偶氮化试剂、细菌内毒素检查用水组成。
产品预期用途:临床上定量检测细菌内毒素。
作为Ⅲ类医疗器械管理。
六、一次性使用可吸收固定夹:由聚乳酸制成。
产品预期用途:用于腹腔镜下无张力疝修补。
作为Ⅲ类医疗器械管理。
分类编码代号6846。
七、高温灭病毒面具:包括过滤装置及面罩,在面罩与过滤装置之间串联有加热装置和降温装置。
产品预期用途:通过加热装置达到迅速杀灭各种病毒,如流感、禽流感、非典病毒等。
氨基酸的纸层析实验报告
氨基酸的纸层析实验报告氨基酸的纸层析实验报告摘要:本次实验旨在通过纸层析法对不同氨基酸溶液进行分离和检测,以研究其迁移率和相对极性的差异。
通过选取适当的溶剂系统和纸层析条件,我们成功地分离了五种常见氨基酸,并确定了它们在纸上的迁移程度。
实验结果表明,纸层析法是一种简单、快速且有效的技术,可用于氨基酸的分离和鉴定。
引言:氨基酸是生物体中构成蛋白质的基本组成单元,对于研究生物体的代谢、结构和功能具有重要意义。
为了快速、准确地分离和检测氨基酸,科学家们发展出了多种分析技术,其中之一就是纸层析法。
纸层析法是一种基于物质在吸附剂(纸)上的迁移差异进行分离的技术,被广泛应用于生物化学和药物研究领域。
本实验旨在通过纸层析法对氨基酸进行分离和鉴定,以深入了解氨基酸的性质和特点。
材料与方法:1. 实验材料:- 氨基酸样品:丙氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸。
- 层析纸:常规过滤纸。
- 层析溶剂:正丁醇/蒸馏水(7:3)混合液。
2. 实验步骤:1. 准备样品溶液:将每种氨基酸样品分别加入适量的蒸馏水中,制备浓度为0.1 mol/L的氨基酸溶液。
2. 准备层析纸:在纸层析仪中放置一条纸带,细细地描绘线8 cm以上,标明起始点和结束点。
3. 样品加载:使用吸管或微量注射器,将每种氨基酸溶液滴于纸带的起始点上,注意避免溶液的扩散。
4. 层析过程:将纸带放入层析仪中,加入适量的层析溶液至稍高于纸带的底部,待溶液达到上端时取出纸带,立即标记氨基酸的悬浮位置。
5. 结果分析:测量标记点距离起始点的距离,并计算各氨基酸的迁移率。
结果与讨论:在本次实验中,我们成功分离了丙氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸和甘氨酸这五种常见氨基酸。
根据实验结果,我们发现不同氨基酸在纸上的迁移率存在一定差异。
迁移率较大的氨基酸,其在纸上的可见位置相对靠近起始点;而迁移率较小的氨基酸,则迁移较慢,位置较远。
这种差异主要与氨基酸的极性有关。
极性较大的氨基酸更容易与层析纸上的极性团结合,从而减缓其迁移速度;而极性较小的氨基酸则与层析纸上的极性团的作用较弱,迁移速度较快。
氨基酸双向纸层析实验报告
氨基酸双向纸层析实验报告一、实验目的本实验旨在通过氨基酸双向纸层析技术,对不同氨基酸进行分离与鉴定,探究其在生物体内的作用及应用。
二、实验原理氨基酸是构成蛋白质的基本单位,其分子结构中含有羧基和氨基。
通过在纸层析板上涂覆两种不同极性的溶剂系统,可以使得不同极性的氨基酸在两个溶剂系统中具有不同的迁移速率,从而实现氨基酸的分离。
在显色试剂的作用下,各种氨基酸会呈现出不同颜色,进一步帮助进行鉴别与定量。
三、实验步骤1.制备双向纸层析板:将滤纸剪成大小合适的矩形,在其中心画一条粗线,将滤纸沿着该线对折,并将两侧各自涂覆一种溶剂系统(如丙酮-水和正丁醇-冰乙酸),待干燥后即可使用。
2.样品制备:取少量已知浓度的氨基酸标准品,加入显色试剂(如二硫化钠-醋酸溶液),振荡混合均匀。
3.纸层析操作:将样品滴于纸层析板中心线上,待样品渗透进滤纸后,放置于含有适量显色试剂的容器中,等待显色反应完成。
4.结果分析:根据不同氨基酸的迁移距离和颜色特征,进行鉴别与定量分析。
四、实验注意事项1.制备双向纸层析板时要注意两侧溶剂系统的涂覆均匀性和干燥程度。
2.样品制备时需注意浓度的准确性和显色试剂的添加量及混合均匀性。
3.纸层析操作时要注意样品滴加量、滤纸渗透程度、显色试剂的选择和添加量等因素对结果产生的影响。
4.实验过程中应注意安全,避免溶剂挥发、化学品接触皮肤等情况发生。
五、实验结果本次实验使用丙酮-水和正丁醇-冰乙酸作为两侧溶剂系统,在已知浓度为0.01mol/L的氨基酸标准品中,通过纸层析技术成功分离出甲、丙、谷、天冬氨酸等氨基酸,并通过显色试剂呈现出不同的颜色特征,进一步进行鉴别和定量。
六、实验总结本次实验通过氨基酸双向纸层析技术,成功地对不同氨基酸进行了分离和定量分析。
该技术在生物化学研究中具有广泛应用价值,可用于分离和纯化蛋白质、检测生物体内代谢产物等方面。
同时,在实验过程中也需要注意安全操作和结果准确性,以保证实验的顺利进行。
氨 基 酸 自 动 分 析 仪 简 介
氨基酸自动分析仪氨基酸是蛋白质的组成成分,是蛋白质化学研究的主要内容之一。
蛋白质是一切生命物质的基础,因此,探讨和揭示生命现象的发生、生长、新陈代谢、遗传变异过程,都与氨基酸的研究有关。
随着近代物理学、化学和电子学的飞速发展,氨基酸的分析技术亦在不断更新。
氨基酸分析仪是本世纪50年代研制的,仅40多年,已发展到现在的进样、分离、检测和数据处理全部自动化的程度。
检出量由微克分子到毫微克分子,分析时间由原来的24小时到现在的半个小时,分析技术的提高促进了其他科学领域的发展。
一、氨基酸自动分析仪的进展用于氨基酸分析的方法很多,有纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法、电泳法及气相色谱法等。
一般认为离子交换柱色谱法是较为精确的检测方法,氨基酸分析仪就是在此基础上研制成功的。
1951年Moor和Stein采用离子交换树脂色谱,用茚三酮试剂显色和分光光度计检测而设计,后来在Spaekman的协助下,使分析操作自动化。
迄今氨基酸分析仪的条件和自动程度有了很大的改观,其特点主要表现以下几个方面。
⒈树脂粒径减小近年来制成的小颗粒球状树脂,使氨基酸分析仪得到很大改进。
由于树脂粒径减小就对应地增加等量树脂的总面积,使现在少量树脂达到过去大量树脂的分离效果,从而减小了树脂柱的内径和体积,节省了试剂用量,缩短了分析时间。
树脂的粒径从200→20→10→5µm。
⒉色谱柱内径缩小树脂粒径减小使填充树脂床的色谱柱内径减小,由过去的粗长柱变为微柱。
色谱柱内径的变化为18→6→2.8→1.75mm。
⒊输压泵压力增高一般氨基酸分析仪采用低压泵,其施加于输液的压力只有几9.80665×104Pa,以后增加至几十9.80665×104Pa,现在发展到2068×104Pa。
⒋分析时间缩短由于树脂粒径的改善,色谱柱内径缩小和泵压增高,使分析时间大大缩短。
蛋白质水解液的分析时间从过去的24小时缩短到现在的半个小时左右。
薄层色谱法氨基酸
薄层色谱法氨基酸薄层色谱法是一种常用的分离和检测技术,广泛应用于化学、生物化学和药学等领域。
本文将介绍薄层色谱法在氨基酸分析中的应用。
1.薄层色谱法原理薄层色谱法基于分配作用和吸附作用实现物质的分离。
其原理可以简单概括为:样品溶液在固定相上经过分配和吸附作用,不同成分会因相互作用力的不同而在固定相上表现出不同的迁移速度,从而实现分离。
在薄层色谱法中,通常使用硅胶或者氧化铝作为固定相,涂布在玻璃、铝板或塑料片等载体上形成薄层。
样品溶液通过毛细管作用被带上薄层,然后放置在合适的溶剂系统中,待溶剂沿薄层上升至一定高度后,取出晾干,最后使用染色剂或显色剂进行可视化检测。
2.氨基酸分析中的薄层色谱法应用薄层色谱法在氨基酸分析中得到广泛应用,其主要包括以下方面:2.1氨基酸定性分析薄层色谱法可以用于氨基酸的定性分析。
首先,将待测样品中的氨基酸经过适当的前处理步骤(如水解、衍生化等),得到能够在薄层上显示明显色斑的化合物。
然后,在薄层色谱板上涂布固定相,并将样品溶液加在起点处。
通过与已知标准氨基酸进行比较,根据色斑的位置和颜色来确定待测样品中存在的氨基酸种类。
2.2氨基酸含量测定薄层色谱法也可用于氨基酸的含量测定。
这需要事先制备一系列含有不同浓度氨基酸的标准曲线。
然后,将待测样品和标准曲线的氨基酸溶液分别涂布在薄层上,并使用相同的溶剂系统进行开发。
通过比较待测样品和标准曲线上色斑的相对强度,可以计算出待测样品中各种氨基酸的含量。
2.3氨基酸纯度检验薄层色谱法还可用于检验氨基酸的纯度。
将纯净氨基酸和待测样品溶液分别涂布在薄层上,并使用相同的溶剂系统进行开发。
比较两者的色斑位置和颜色,如果一致则说明待测样品为纯净氨基酸,否则可能存在杂质或其他成分。
3.TLC与其他方法的比较与其他氨基酸分析方法相比,薄层色谱法具有以下优点:快速:薄层色谱法分析时间短,通常只需要数分钟至数小时。
灵敏度高:对于某些氨基酸,薄层色谱法的检测限可以达到微克甚至亚微克的级别。
S-433D型氨基酸分析仪
S-433D型氨基酸分析仪产品广泛应用于氨基酸分析技术参数1.分析柱电子恒温(制热或制冷)温度梯度可编程 20℃~99℃温度稳定性 0.1℃柱 PEEK,4.6 x 150mm, 7um,10%交联安全保护过热保护,泄漏报警2.自动进样器(S-433D型*)进样模式同时具备环进样及变量进样模式进样体积1μl~500μl1μl~5000μl(选配)样品衍生(选配) 三种试剂,三种反应时间样品清洗最高5000μl清洗液,1μl增量重现性10μl变体积进样时变异低于1%记忆效应 <0.01%进样/样品瓶可设置不同进样量样品盘两个盘,每盘60个样品位,1.5ml样品瓶温度控制 +5℃~70℃(电子恒温)3.溶液存放单元惰性气体隔离保护所有溶液内置电子制冷装置(S-433D型)4.四元梯度泵活塞双活塞短行程技术,自动清洗流速 0.00ml/min~9.99ml/min流速稳定性 RSD<0.1%最大压力 40MPa (400bar,6000psi)操作方式恒流,恒压材料 PEEK5.衍生检测系统检测器 570nm, 440nm(同时检测)荧光检测器(选配)信号输出双通道同时输出,信号可叠加流动池体积8μl试剂泵流速 0.01 ml/min~2.00ml/min流速稳定性 RSD<0.1%反应器温度范围室温~180℃温度稳定性 0.1℃标准反应器 1.5mm x 0.3mm x15m,FEP安全装置过热保护6.系统控制和数据处理软件图形化的控制软件符合GLP、21CFR规范,具有日志记录功能操作系统Windows 98以上,输出报告兼容Excel预置有不同格式用户可编辑的报告模板根据预先设置,可自动对结果进行计算并输出报告自动液面监控,操作错误或系统异常可告警并自动调用系统保护程序(S-433D 型)7.系统指标缓冲液种类 2种(蛋白水解)或3种(游离氨基酸)保留时间重复性 RSD<0.5%,水解标样RSD<0.3%,Arg峰面积重复性 RSD<1%,水解标样峰分离度平均大于1.5,全部大于1.2(>99%),水解标样平均大于1.5,全部大于1.0,游离标样最低检测限 8pmol,水解标样3pmol(Asp,S/N=2)分析时间蛋白水解 30分钟~50分钟游离氨基酸 70分钟~180分钟产品特点- 配置齐全:标配试剂冷藏室、全部溶液惰性保护、在线真空脱气、变量进样、样品恒温- 指标高:水解蛋白氨基酸最小分离度大于1.2(99%),平均大于1.5(99.7%);定性重复性RSD全部小于0.5%,定量重复性RSD全部小于1.0%- 适合多样性应用:可调整出峰顺序、可更好的分离干扰峰- 操作简便:只需配2种缓冲液;图形化操作软件- 寿命长:缓冲除氨、长分离柱及适合氨基酸分析的树脂粒径、PEEK惰性材料、具备完善预警保护功能的软件- 用户自由度高:此仪器的各个模块都可单独设置,可由用户定义仪器的最佳工作状态符合国标及国际仲裁标准仪器自动化水平高衍生时间、衍生温度等无样品间差异,稳定性、分辨率、分离度具佳色谱柱寿命长单样成本低。
气相色谱法检测蛋白质中的氨基酸
气相色谱法检测蛋白质中的氨基酸氨基酸是构成蛋白质分子的基本组成单元,具有重要的生物学功能。
了解蛋白质样品中氨基酸的组成及含量对生物医学研究、药物研发和食品安全等领域具有重要意义。
气相色谱法(Gas Chromatography,GC)是一种常用的分离和定量分析方法,广泛应用于蛋白质中氨基酸的检测。
一、气相色谱法原理气相色谱法利用气态载气作为溶剂,通过样品挥发性物质在固定相柱上的分离,进而实现定量检测。
对于氨基酸的分析,需要先将蛋白质样品水解为氨基酸,并进行衍生化处理以提高检测灵敏度。
常见的氨基酸衍生化方法包括甲氧基化、甲胺基化等。
二、气相色谱仪器设备气相色谱法检测蛋白质中的氨基酸需要使用气相色谱仪。
一般而言,气相色谱仪由进样系统、分离系统和检测系统组成。
进样系统负责将衍生化后的氨基酸溶液注入气相色谱柱,分离系统通过柱上固定相的特异性分离,将不同的氨基酸成分进行纵向分离。
检测系统则利用检测器对分离后的组分进行定量检测。
三、气相色谱法的优点相比于其他分析方法,气相色谱法在氨基酸分析中具有一些明显的优势。
首先,气相色谱法分离效果好,能有效地分离复杂的氨基酸混合物。
其次,气相色谱法具有较高的灵敏度和准确度,可以实现对微量氨基酸的检测。
此外,气相色谱法的操作相对简便,且分析速度快,适用范围广。
四、气相色谱法在蛋白质氨基酸分析中的应用气相色谱法在蛋白质氨基酸分析中有着广泛的应用。
首先,气相色谱法可以通过对不同蛋白质样品中氨基酸组成和含量进行分析,来评估蛋白质的相对含量及质量。
其次,气相色谱法可以用于鉴定蛋白质样品中氨基酸的结构和序列,为蛋白质结构及功能的研究提供重要信息。
在药物研发领域,气相色谱法可以用于检测药物中的氨基酸残基,帮助确定药物的结构和纯度。
对于食品安全方面,气相色谱法可以用于检测蛋白质食品中的氨基酸含量,判断食品的质量和安全性。
总结:气相色谱法作为一种常用的分离和定量方法,在蛋白质中氨基酸的检测中发挥了重要的作用。
常用生态学实验仪器介绍
36
3. HPFM植物导水率测量仪
37
植物导水率高压测量仪是野外快速 定量分析植物根部和茎秆导水率的新工具, 可以测量枝条、叶柄以及根系导水率,进 行树体和农作物根系的压力分析,建立根 茎水分传输模型和蒸腾模型等,帮助植物 生理学家和农学家进行根茎生长、植物蒸 腾、植物茎流、植物与土壤水势以及土壤 改良等方面的研究。
7
由于光照强度、CO2等对环境条件的 影响与气体交换测量之间的时间延迟不再 存在,消除了时间的滞后,因此,即使在 植物的呼吸速率发生变化时,仍然可以按 照实验的要求,快速自动地控制叶室内的 相对湿度。
8
由于消除了通往分析器的循环管道, 缩短了水分在管道的平衡时间。在实验过 程中可以控制叶片周围的CO2浓度、H2O浓度、 温度、相对湿度、光照强度和叶室温度等 所有相关的环境条件;配置6400-40荧光叶 室,L1-6400系列便携式光合仪还可以同时 测量植物叶片的光合作用和荧光参数指标。
45
2.
C.H.N元素分析仪
46
47
它的主要作用是测试纯净的有机 化合物中碳、氢、氮的质量分数。它 采用经典的分析技术,纯氧的环境里, 在相应的试剂存在下燃烧分解,产生 气体产物分离,根据不同的热导率函 数而被测量。
48
元素分析仪原理:CHN操作模式, 元素分析仪通过燃烧方式将样品转化成 (CO2 , H2O, 和N2)。样品先在一个纯氧 的环境用传统试剂氧化,在燃烧区的氧 化产物包括CO2, H2O, 和N2。如卤素、硫 等元素被洗涤试剂从燃烧区转移走。产 生的其他被均匀化后,转移到一个气压、 温度和体积都受到严格控制的条件下, 在这个条件下,被分离的气体通过它们 的热传导率被测定。
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戴安公司AAA-Direct氨基酸分析系统
一、实验设备及试剂
1.仪器
1)BioLC GS50带脱气功能分析泵+LAN (P/N 059493)
2)LC30/LC25柱温箱
3)ED50A/ED50电化学检测器
4)安培池AAA-Certified Electrochemical Cell带金工作电极,其中,
LC30(P/N 055828); LC25(P/N 055827); AS50(P/N 055826)
5)AminoPac PA10 2mm Column (P/N 055406)
6)AminoPac PA10 2mm Guard Column (P/N 055407)
7)Peaknet6 色谱工作站
8)AAA-Direct Installation Kit ( P/N 059539)
2.试剂
1)50% NaOH 优级纯
2)醋酸钠 (P/N 059326)
3)18种氨基酸标准溶液
4)高纯水(电阻≥ 18.0 MΩΩ)
5)pH试纸(广泛)
二、仪器安装
1.连接仪器,
2.将GS50/GP50泵头的所有内径为0.01mm的黑色peek管全部更换为内径为0.005mm
棕色peek管。
如果使用GP50泵,还需要在泵的主菜单内将设定的流速100μl改为25μl。
或使用戴安公司Low Delay Volume Configuration Conversion Kit ( P/N 056967)进行改装。
3.安装色谱工作站软件
4.用去离子水开机,排除各通道内的气泡
5.使用25μl的进样管,进样管过大会使分离度下降
6.检测池出口使用黑色peek管
三、淋洗液的配制
1.50%NaOH 储备液-称取50克优级纯NaOH加入50mL去离子水定溶至100毫升,储存于一塑料瓶内保存。
2.2N NaOH 500mL 取52 mL 50% NaOH 定容至500mL。
3.0.250M NaOH -取13.1mL50%NaOH 至1升容量瓶中,用去离子水定容至刻度并立即盖上瓶塞,以防吸入二氧化碳。
4.1.0M 醋酸钠-于750mL去离子水中溶解82.04克醋酸钠,完全溶解后用水定容至1升。
建议此淋洗液最好用0.2μm滤膜过滤。
四、pH参比电极标定液
1. pH =7.0 将50mL 0.1 M KH2PO4和29.1 mL 0.1M NaOH 置于100mL容量瓶中,定容
至刻度。
2. pH = 10.0 将50mL 0.05M NaHCO3和10.7 mL 0.1M NaOH置于100mL容量瓶中,定容
至刻度。
其中: 0.1M KH2PO4 称 1.3609克定容至100mL;
0.05M NaHCO3 称 0.4201克定容至100mL;
0.1M NaOH 称 0.4000克定容至100mL;
五、氨基酸标准溶液
1. O.1M HCL含20mg NaN3/L 氨基酸稀释液
2.用氨基酸稀释液稀释氨基酸标准浓度至5μM或10μM。
此溶液放在冰箱内可保存1
周,在室温下,可保存48小时。
六、系统清洗
1.用2N NaOH清洗所有需要使用的淋洗液瓶、泵头管路,至少使用40mL。
清洗液自泵头处直接排出(此时色谱柱暂不安装)。
2.用去18.0 MΩ去离子水冲洗系统30分钟。
七、安装淋洗液瓶
1. 将淋洗液 E1、E2、E3分别加到淋洗液瓶内,立即通入高纯氮气,密封保存。
2. 分别排除各淋洗液通道内的气泡,以保证系统压力稳定。
3.用新配制的淋洗液清洗每一通道和比例阀,体积不少于30mL,时间约至少12分钟。
4.淋洗液瓶内不安装过滤头。
八、系统平衡
1.按照氨基酸分析的淋洗液色谱条件,开泵用淋洗液(76%/ 24%)(A/B)平衡系统,并打开检测池的开关。
选择pH测量模式。
此时pH读数应在12.1~ 13.0之间。
如果不在此范围内,则需要检查淋洗液的比例是否正确(76%/ 24%)(A/B)。
如果淋洗液正确,则需要重新校正参比电极。
2. 系统平衡30分钟后,背景信号应< 90 nC, 大于此数,建议用2 N NaOH重新冲洗系统。
九、在PeakNet6中输入所使用的波形和梯度程序。
见表1,表2
十、在PeakNet中运行氨基酸分析方法,开始分析。
见图1.
十一、注意事项
1.在安装色谱柱、管路、配制淋洗液和分析的过程中都应戴表面无滑石粉的塑胶手套,
以防止沾污。
2.所有实验用水的纯度都应达到18.0MΩ。
3.所使用的NaOH淋洗液必须要用50%NaOH液体配制。
4.淋洗液最好要真空脱气,或用经过煮沸的高纯水配制。
图1. 氨基酸标准分析谱图
进样体积: 25µL
标准: NIST=2.5µmol/mL in 0.1 M HCl 溶液
稀释标准(用去离子水): 20nmol/mL
色谱柱: AminoPac PA10 分离柱与保护柱(2mm)
柱温: 30℃
系统操作反压: < 3,000 psi
淋洗液:
E1: 去离子水
E2: 250mM NaOH
E3: 1M 醋酸钠
淋洗液流速: 0.25mL/min
ED50操作参数: AAA Au 工作电极;pH参比电极;电位波型见表1.
梯度淋洗: 见表2.
色谱峰1- 精氨酸(Arginine); 2- 赖氨酸(Lysine); 3-丙氨酸(Alanine);4-苏氨酸(Threonine);5- 甘氨酸(Glycine);6-缬氨酸(Valine);7- 丝氨酸(serine); 8- 脯氨酸(Proline); 9- 异亮氨酸(Isoleucine);10- 亮氨酸(Leucine);11- 蛋氨酸(Methionine);12-组氨酸(Histidine);13- 苯基丙氨酸(Phenylalanine);14- 谷氨酸(Glutamate);15- 天冬氨酸(Asparate);16- 胱氨酸(Cystine); 17- 酪氨酸(Tyrosine)
下面是我的仪器实验条件,你可参考
0.000 ECD.Autozero
Flow = 0.22
%B = 20.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 5
Load
Wait CycleTimeState
Inject
Wait InjectState
IntAmp_1.AcqOn
Flow = 0.22
%B = 20.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 5
2.000 Flow = 0.22
%B = 20.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 5
8.000 Flow = 0.22
%B = 32.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 8
11.000 Flow = 0.22
%B = 34.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 8
18.000 Flow = 0.22
%B = 20.0
%C = 40.0
%D = 0.0
Curve = 8
21.000 Flow = 0.22
%B = 16.0
%D = 0.0
Curve = 5
23.000 Flow = 0.22
%B = 16.0
%C = 70.0
%D = 0.0
Curve = 8
42.000 Flow = 0.22
%B = 16.0
%C = 70.0
%D = 0.0
Curve = 8
42.100 IntAmp_1.AcqOff
Flow = 0.22 %B = 80.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 5
44.100 Flow = 0.22
%B = 80.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 5
44.200 Flow = 0.22
%B = 24.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 5
60.000 Flow = 0.22
%B = 20.0
%C = 0.0
%D = 0.0
Curve = 5
75.000 Flow = 0.22
%B = 20.0
%C = 0.0
Curve = 5 End。