菌落计数检测操作规程
国标菌落总数检测方法
国标菌落总数检测方法引言：菌落总数是指在一定的培养条件下，菌落形成的数量。
菌落总数检测是食品微生物检验中的一个重要指标，用于评估食品中微生物的污染程度和卫生质量。
本文将介绍国标菌落总数检测方法的步骤和原理。
一、国标菌落总数检测方法的步骤国标菌落总数检测方法主要包括样品制备、平板计数和结果计算三个步骤。
1. 样品制备需要准备好待测样品。
样品通常是食品、水或其他物质，可以是液体或固体。
将样品称取一定的量，然后按照一定的比例与适量的生理盐水进行稀释，以降低样品中菌落的数量，使其适合于后续的菌落计数。
2. 平板计数将制备好的样品溶液均匀地倒入已经凝固的琼脂平板中，然后用无菌铲子或无菌玻璃棒将溶液均匀涂抹在琼脂平板表面。
待琼脂凝固后，将平板倒置放置在恒温培养箱中，以利于菌落的生长。
根据不同的样品特点和需求，可以选择适当的培养温度和时间。
3. 结果计算在菌落生长适宜的条件下，菌落会在琼脂平板上形成。
在菌落形成后，使用计数器或目视观察，对菌落进行计数。
计数时需要遵循一定的规则，如避免重复计数、避免边缘菌落等。
最后，根据计数结果和样品的稀释倍数，计算出菌落总数。
二、国标菌落总数检测方法的原理国标菌落总数检测方法基于微生物在适宜的培养条件下形成可见的菌落的特性进行。
其原理主要包括稀释平板法和菌落计数法。
1. 稀释平板法稀释平板法是菌落总数检测的一种常用方法。
通过将样品与一定量的生理盐水进行稀释，使菌落的数量适于计数。
然后将稀释好的样品均匀涂抹在琼脂平板上，使菌落在琼脂上生长形成可见的菌落。
根据样品的稀释倍数和计数得到的菌落数量，计算出菌落总数。
2. 菌落计数法菌落计数法是国标菌落总数检测方法的关键步骤。
在菌落生长适宜的条件下，菌落会在琼脂平板上形成。
然后使用计数器或目视观察，对菌落进行计数。
计数时需要遵循一定的规则，如避免重复计数、避免边缘菌落等。
最后，根据计数结果和样品的稀释倍数，计算出菌落总数。
三、国标菌落总数检测方法的应用国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、饮用水、药品、化妆品等领域。
简述菌落总数检测程序
菌落总数检测程序是一项常见的微生物检测方法，其目的是确定样品中存在的微生物数量，以评估食品、饮料、制药和环境等领域的卫生状况。
本文将介绍菌落总数检测程序的步骤、工具和注意事项。
1. 样品采集首先需要从待测样品中采集适量的样品，并保证样品的代表性和均匀性。
在采样过程中需要使用无菌器具，并避免手部接触样品，以避免污染。
2. 样品预处理为了减少菌落总数检测时的误差，需要对样品进行预处理。
不同样品的预处理方式不同，但通常包括以下步骤：（1）对固体样品进行破碎和混合，确保样品的均匀性；（2）对液态样品进行搅拌或振荡，使样品中的微生物均匀分布；（3）对含有大量背景杂质的样品，如土壤和食品等，需要进行稀释处理，以便于后续操作。
3. 制备培养基制备培养基是菌落总数检测中至关重要的一步。
各种微生物需要不同的培养基进行培养，但是通常使用通用培养基，如营养琼脂培养基、普通琼脂培养基等。
在制备培养基时需要注意以下几点：（1）使用高质量的培养基原料和纯水；（2）遵循制备指南，按照正确的比例和顺序添加各种原料；（3）将培养基加热至沸腾，以杀死其中的细菌和孢子。
4. 分装和接种将经过预处理的样品分装到无菌平板上，并将平板放置在无菌工作台上。
然后使用无菌技术将培养基倒在平板上，并将培养基均匀涂抹。
最后使用无菌的匙子或移液器接种样品，或者将样品滴入培养基中，并确保接种均匀。
5. 培养和计数将接种好的平板在恒温培养箱中培养，通常是在30-37℃下进行。
培养时间因不同的微生物而异，但通常是24-72小时。
在培养过程中需要注意以下几点：（1）确保培养箱内的温度和湿度稳定；（2）避免平板受到震动或移动；（3）遵守无菌技术，以避免污染。
在培养结束后，使用计数器对菌落进行计数。
菌落是指可见的单个微生物群体，通常呈圆形或不规则形状，并具有明显的色彩和质地。
每个菌落代表一个微生物单元，因此可以根据菌落数量来评估样品中的微生物总数。
6. 结果分析根据菌落总数检测结果，可以评估样品的微生物质量。
菌落总数检验操作规程
A.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST ）肉汤A.1.1成分胰蛋白胨或胰酪胨20.0 g氯化钠5.0 g乳糖5.0 g磷酸氢二钾（K2HPO4）2.75 g磷酸二氢钾（KH2PO4）2.75 g月桂基硫酸钠0.1 g蒸馏水1 000 mL pH 6.8±0.2 制法将上述成分溶解于蒸馏水中，调节pH。
分装到有玻璃小倒管的试管中，每管10 mL 。
121 ℃高压灭菌15 min 。
菌落总数检验操作规程一、目的建立菌落总数检验的标准操作程序，使操作过程规范化。
二、适用范围适用于菌落总数的检验操作。
三、职责1.检验人员严格按检验操作规程进行检验。
2.QC主管监督检查执行情况。
四、程序1.范围本方法适用于食品中菌落总数（Aerobic plate count）的测定2.术语和定义菌落总数：食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
3. 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。
3.2冰箱：2 ℃～5 ℃。
3.3 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。
3.4天平：感量为0.1 g。
3.5均质器。
3.6振荡器。
3.7无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL。
3.9无菌培养皿：直径90 mm。
3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
3.11放大镜或和菌落计数器。
4.培养基和试剂4.1 平板计数琼脂培养基：见附录A 中A.1。
4.2 磷酸盐缓冲液：见附录A中A.24.3 无菌生理盐水：见附录A中A.3。
5.检验程序菌落总数的检验程序见图1。
图1 菌落总数的检验程序6.操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品：称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质 1 min～2 min，或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。
全自动菌落计数器安全操作及保养规程
全自动菌落计数器安全操作及保养规程概述全自动菌落计数器是一种广泛应用于生物科研、医疗、环保等领域的实验仪器。
使用全自动菌落计数器，能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定，提高实验效率和准确度。
为了更好地使用全自动菌落计数器，保障实验安全和设备使用寿命，本文提供了全自动菌落计数器安全操作和保养规程。
全自动菌落计数器安全操作规程1. 选择合适的环境充分了解实验特点，并保证在适宜的环境中操作仪器。
在使用前应保证仪器环境符合要求：干燥、清洁、无噪音和极少的振动。
2. 准备仪器在使用前，需要进行事先准备。
将仪器表面的灰尘和污垢除去，并连接电源。
操作人员应全程佩戴手套、防护眼镜等个人防护装备。
3. 操作前检查按照仪器说明书检查仪器的机械、电器和软件系统的运转是否正常。
特别需要检查的是，玻璃门、窗户和面板是否有破损或损坏。
如果发现异常情况，应及时整修或修理。
4. 样品的操作将需要检测的样品外转0.8mL的LB平板，自然晾干后，直接放在仪器样本架。
取样器轨道上放置含菌样品的架子，然后启动程序，开始自动检测和计数。
5. 操作完成后将样品架从样品架装置中取出，并断开电源。
检查操作位置是否清洁，如有样品残渣，则应及时清除干净。
全自动菌落计数器保养规程1. 日常保养除按照操作规程使用仪器外，要注意仪器表面的干净，并保持干燥。
使用后，要及时清除仪器表面的细颗粒。
2. 周期性维护在正常运行中，定期进行全自动菌落计数器的日清洁和消毒，避免积累过多的细菌或菌落。
3. 不适用时的处理当全自动菌落计数器长时间不使用，应放置在干燥、清洁、无噪音和极少的振动的环境中，不要暴露在阳光下，以免受到紫外线的侵蚀。
4. 维修保养如果全自动菌落计数器出现故障或其他异常情况，应及时找专业的技术人员进行维修保养，以免影响实验或造成二次污染。
总结全自动菌落计数器是一种实验室中常用的仪器，它能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定，提高实验效率和准确度。
在使用全自动菌落计数器时，需要遵守安全操作规程，并进行日常和周期性的保养维修，以保障实验安全和设备使用寿命。
菌落总数检测操作规程
微生物检测操作规范1范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法本标准适用于遂平克明面业有限公司方便面生产线微生物控制及验证计划。
本标准适用于遂平克明面业有限公司方便面产品菌落总数、大肠菌群检测。
2 规范性引用标准GB 4789.1-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验总则》。
GB/T 4789.3-2003《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。
GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》。
4 设备和材料恒温培养箱：36℃±1℃。
恒温水浴箱：46℃±1℃。
天平：感量为0.1g。
无菌吸管：1ml（具有0.01ml刻度）、10ml（具有0.1ml刻度）。
无菌培养皿：直径90mm。
无菌锥形瓶：容量500ml；或225ml塑料稀释瓶（带内垫，可高温灭菌）。
灭菌试管：16mm×160mm；或10ml-20ml无菌管。
显微镜：10×-100×4 培养基和试剂平板计数琼脂培养基：GB 4789.2-2016 附录A.1。
无菌生理盐水：GB 4789.2-2016 附录A.3。
乳糖胆盐发酵管：按GB/T 4789.3-2003中4.9规定。
伊红美蓝琼脂平板：按GB/T 4789.3-2003中4.25规定。
乳糖发酵管：按GB/T 4789.3-2003中2.2规定。
EC肉汤：按GB/T 4789.28-2003中4.11规定。
格兰仕染色液：按GB/T 4789.3-2003中4.9规定。
5菌落总数检验程序实验前准备移液管、三角瓶、试管包扎、灭菌移液管：洗净烘干后在吸管粗头顶端约0.5cm处，塞上一小段棉花，后用4-5cm宽的报纸或牛皮纸将其以下图所示包扎好。
三角瓶包扎图例将包扎后的器具放入灭菌锅，121℃ 15min灭菌。
a.样品处理面饼样品经粉碎机粉碎后，称取25g粉碎样加入装有225ml无菌生理盐水的稀释瓶内，充分振摇，做成1:10的均匀稀释液。
菌落总数检验操作规程
菌落总数检验操作规程一、实验室准备工作1.准备培养基：根据实验需求选择适当的培养基，如营养琼脂培养基、大肠埃希氏菌选择性培养基等。
注意培养基的成分和质量。
2.准备培养基平板：测量合适的培养基量并加入培养皿中，使用无菌技术将培养基均匀倒入培养皿，标明编号和日期。
二、样品处理1.准备样品：如食品样品，需要将样品称重并加入适当的生理盐水中，用搅拌器或均质仪进行均匀悬浮。
2.稀释样品：根据实验需要，对样品进行系列稀释。
取适量的悬浮样品，依次加入尺量瓶中的生理盐水，振摇均匀。
三、接种培养1.无菌操作：在无菌工作台内进行操作，穿戴好无菌手套，将培养皿放入工作台上，注意防止污染。
2.接种样品：使用无菌移液器，取适量的稀释样品均匀滴入培养皿上。
3.均匀涂布：使用无菌匀涂棒，将样品在培养皿上均匀涂抹，注意避免混入外来微生物。
四、培养条件1.始菌箱：将接种后的培养皿置于始菌箱中，设定适当的温度和湿度（如37℃，24小时）。
2.孵化箱：将始菌箱中的培养皿转移到恒温培养箱中适当孵育时间，保持适宜温度及湿度。
五、菌落计数1.观察菌落：取出培养好的菌落总数平板，放在均匀光源下观察菌落的形态、颜色、大小等特征，标记异常菌落。
2.计数菌落：使用计数器或显微镜对菌落进行计数，记录结果，并用公式计算菌落总数。
每个菌落总数平板至少计数两遍，计算平均值。
六、数据分析与结果判定1.数据分析：对不同样品的检测结果进行归类整理，统计菌落总数的分布情况。
2.结果判定：根据相应的标准或规定，比较样品的检测结果与标准要求，判定样品是否合格。
七、清洗和消毒1.清洗：将培养皿彻底清洗干净，清除残留的培养基和菌落。
2.消毒：将使用过的器材进行高温高压消毒或化学消毒，确保无菌环境。
以上就是菌落总数检验操作规程的简要示例，实验过程中需严格遵守无菌操作规范，并根据具体实验要求进行相应的调整。
在实验过程中，及时记录实验数据，注意安全操作。
实验完成后，对结果进行统计分析和归档保存。
简要概括菌落总数检验过程
简要概括菌落总数检验过程
菌落总数检验过程主要包括以下步骤：
采样与稀释：首先进行采样，然后对样品进行十倍梯度稀释，得到系列浓度梯度的待检液。
接种：取适宜浓度的待检液1ml，注入培养皿后再倾注降温的卵磷脂-吐温80营养琼脂，同时做空白对照，然后转动培养皿使其混匀。
培养：待培养基冷却后，将平板倒置，置于36°±1°C培养箱内培养48h±2h。
注意不同产品可能需要不同的培养时间和温度。
计数与报告：培养完成后，选择平均菌落数在30~300之间的平皿进行计数。
报告单位为CFU/g或CFU/mL。
如果菌落数不在这个范围内，需要进行适当的稀释或浓缩后再进行计数。
请注意，整个过程需要在无菌环境下进行，并且从采样到倾注最后一个平皿所用的时间不宜超过20min，以防止细菌繁殖影响结果。
同时，为了确保结果的准确性，建议进行多次重复实验。
菌落计数器标准操作规程
目的：本程序《菌落计数器使用说明书》规定了菌落计数器操作程序。
范围：本程序适用于JLQ—S型菌落计数器。
职责：质量管理部、QC内容：1接通200V电源，打开照明开关，将待检菌落平板翻转，底部朝上，放在灯光透射处，调节放大镜位置至菌落看的最清楚后固定镜头，探笔插入面板右上角孔中。
2按以下步骤操作计数计算器，先按一下ON/C键，显示器上显示“0”，再按一下“1”的数字键，显示器显示“1”，再按一下“+”号键，此时显示器显示“1”，再按一下“=”号键，显示器仍显示“1”，再按一下“0”字键，此时显示器显示“0”。
这时即可用探笔在菌落平板上进行累加计数。
3探笔使用方法：探笔是由三种不同颜色的针管尼龙笔和一支金属探笔头组成，在使用探笔时，需拔下尼龙笔的笔套、笔杆、将相同于笔杆颜色的彩色小墨水瓶剪开，对准储水芯徐徐挤入，墨水不宜加得太多，将加好墨水的储水芯连同笔尖套插入有带引线及插头的金属探笔头的套管内，使尖套塑料部分暴露在金属管外28mm左右，并有插入到底的感觉。
然后插入计数器插孔中进行计数器是否正常计数的试验。
探笔一般按平常书写钢笔时的握法（但不能握在笔尖塑料部分），宜倾斜一些，不能垂直于工作面，探笔在平板上进行碰触计数器时，能感觉到探笔有轻微的摆动。
计数完毕后，应将笔尖塑料杆连同储水芯从金属探笔头上取下，装入原来的塑料笔套中，以免墨水干掉，为了区别菌落在不同培养阶段的检测记录，仪器所备的三种颜色笔，后按上述方法换装不同的颜色。
4在计数时，将探笔在平板上碰触一下，计数器即计一个数，与此同时，探笔在平板上点上一个色点，表示此菌落已被数过。
以后每碰触一次，探笔点一个色点，计数器即累加一个数，直到所有的菌落都被点上色点，显示器中显示的读数即为该平板的菌落数。
5在计完某菌落平板后，如需再计其它平板的菌落数，可继续直接累加，待总的平板都数完后除以平板数即是平均数，也可使用存储键求平均数，在数完一个平板后，按一下M±键显示器上角显示“MEM”，表示此数已被存入，再按一下“0”字键，显示器上角显示“MEM”，右边显示“0”，即可继续计数。
菌落总数检验操作规程
菌落总数检验操作规程菌落总数检验操作规程一、目的建立菌落总数检验的标准操作程序，使操作过程规范化。
二、适用范围适用于菌落总数的检验操作。
三、职责1. 检验人员严格按检验操作规程进行检验。
2. QC主管监督检查执行情况。
四、程序1.范围本方法适用于食品中菌落总数（Aerobic plate count）的测定2.术语和定义菌落总数：食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
3. 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。
3.2冰箱：2 ℃～5 ℃。
3.3 恒温水浴箱：46 ℃ ±1 ℃。
3.4天平：感量为0.1 g。
3.5均质器。
3.6振荡器。
3.7无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL。
3.9无菌培养皿：直径90 mm。
3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
3.11放大镜或和菌落计数器。
4.培养基和试剂4.1 平板计数琼脂培养基：见附录A 中A.1。
4.2 磷酸盐缓冲液：见附录A中A.24.3 无菌生理盐水：见附录A中A.3。
5.检验程序菌落总数的检验程序见图1。
图1 菌落总数的检验程序6.操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品：称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～***** r/min 均质1 min～2 min，或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。
6.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液6.1.3用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用 1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。
简述食品中菌落总数测定流程
简述食品中菌落总数测定流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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菌落总数检验操作规程
菌落总数检验操作规程目的：该操作规程用于规范公司产品及原料的活菌数量检验操作。
范围：该操作规程适用于公司要求检查该项的产品和原料的菌落总数检验责任人：微生物检验员，QC主管内容：1 技术依据及原理菌落总数计数采用平板菌落计数法，这是活菌计数方法之一。
该方法以在琼脂平板上，样品经过处理在一定条件下培养后，所得1ml（或1g）检样中形成菌落的总数。
测定结果只反映在规定条件下，只包括一群在平板计数琼脂生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。
在进行本法测定时，必须严格按本法规定的条件操作，以免产生实验误差。
2 材料、仪器、试剂的准备及基本要求2.1 无菌室2.1.1 结构和要求无菌室面积不超过10m2，高度不超过2.4m，应采光良好、避免潮湿、远离厕所所及污染区，有缓冲间（2个）、操作间组成。
操作间与缓冲间之间应有样品传递窗（箱），出入操作间和缓冲间的门不应直对。
无菌室应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。
墙与地面及墙壁、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，不留死角。
操作间内不得安装下水道。
无菌室照明灯应嵌装在天花板内，室内光照分布均匀，光照度不低于300勒克斯。
缓冲间和操作间均应设置紫外线杀菌灯（2～2.5W/m3）, 紫外线杀菌灯距实验台面高度不超过1 m，并定期检查其辐射强度，辐射强度不低于70µW·cm-2（1 m距离），不符合要求的紫外线杀菌灯应即使更换。
2.1.2 温度、湿度无菌室内温度和相对湿度直接影响紫外线杀菌灯的杀菌效果，故应控制温度18～26℃，相对湿度40～60%。
操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正压，压差不低于4.9Pa。
2.1.3 操作间操作间应安装空气除菌过滤层流装置。
洁净度应不低于10000级，局部净化度100级，或放置同等级净化工作台，并准备药物天平，乙醇灯、打火机、大小橡皮乳头等。
2.1.4 缓冲间缓冲间应有洗手盆，无菌衣、帽、口罩、拖鞋等。
物体表面微生物污染检测标准操作规程
物体表面微生物污染检测标准操作规程一、采样方法
二、检测方法
充分震荡采样管后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0 ml接种平皿，将冷却至40~45 ℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15~20 ml，36±1 ℃恒温箱培养48小时，计数菌落数。
三、结果计算
物体表面菌落总数计算方法：
1、规则物体表面：
细菌菌落总数（CFU/ cm²）：平均每皿菌落数×稀释倍数/
采样面积（cm²）；
2、不规则物体表面的结果计算，用CFU/件表示。
四、判定标准
1、Ⅰ、Ⅱ类环境：洁净手术部、其他洁净场所、非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器
官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等，物体表
面细菌菌落总数≤5 CFU/cm²。
2、Ⅲ、Ⅳ类环境：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人工流产室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心检
查包装灭菌区和无菌物品存放区、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室等，物体表面细菌菌落总数≤10 CFU/cm²。
五、采样中的注意事项
1、采样时机：日常常规检测时可在消毒后采样，怀疑医院感
染暴发、进行医院感染暴发调查或工作中怀疑物体表面被污染时，应随机采样。
2、常规对环境物体表面消毒效果检测时可不进行致病性微生物检测，疑似医院感染暴发、进行医院感染暴发调查或工作中怀疑物体表面被微生物污染时，应进行目标微生物的检测。
3、采样、接种中严格遵守无菌技术操作规程。
自动菌落计数仪安全操作及保养规程
自动菌落计数仪安全操作及保养规程自动菌落计数仪广泛应用于医学、环境监测、食品卫生等领域，它可以快速、准确地检测食品、水质和药品等样品中的细菌数量。
因此，正确使用和维护自动菌落计数仪是保证实验结果准确和保证操作人员的安全的关键之一。
本文将从安全操作和保养规程两个方面，提供自动菌落计数仪的使用和维护指南。
安全操作规程1. 仪器安装自动菌落计数仪应该放置在通风良好、无尘、温度适宜的实验室中，同时应该放置在平稳的工作台上。
在安装过程中，必须确保电源和电压都符合仪器的要求。
注意：不要在湿度过大的场所放置仪器，否则会影响其正常工作。
2. 样品处理在进行实验前，样品必须进行处理和准备。
所有的试剂必须是干燥的，并确保它们没有变质和过期。
在处理样品时，必须戴上手套和口罩，以避免样品对操作人员产生危害。
注意：不要将有害、有毒、易燃的样品用于自动菌落计数仪实验。
3. 仪器启动前的准备在启动自动菌落计数仪之前，应该检查仪器的配件是否齐全，仪器内部是否存在异物，同时也要保证仪器所连接的电源和通讯线路都是稳定和可靠的。
注意：在打开自动菌落计数仪之前，我们必须查阅使用说明书以了解正常操作的程序和注意事项。
4. 仪器开启在进行仪器开启操作时，必须按照使用说明书中的步骤进行，以避免因操作错误而导致的仪器故障或人员伤害。
注意：操作人员在使用自动菌落计数仪的过程中，必须严格遵守安全操作规程，否则将会对人员造成伤害。
5. 实验完成后的清理工作在实验完成后，我们需要将所有的配件和仪器清理干净。
废液和废物需要进行隔离、分类和妥善处理。
同时，还需要定期对仪器进行保养和维护。
注意：将废物随意堆放和处理，将会对环境造成巨大的污染。
仪器保养规程1. 仪器清理我们必须保证仪器的清洁和干净。
在进行清理时，我们必须使用配有干净、软质布片。
清洁时，必须避免使用稀释剂、酸、碱等物质，因为它们可能会损坏仪器的有效部分。
注意：不要直接在仪器上喷洒清洁剂，这将会对仪器的有效部分造成损害。
菌落总数测定操作规程
1规范性引用文件：下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，起随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用与本标准，然而，鼓励根据本标准达成的协议的各方研究是否适用这些文件最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
中华人民共和国药典2005版附录2 抽样方法成品同一批号的产品中至少随机抽取3包装样品，取好的样品应用无菌袋装好，检验前不得打开。
3设备和材料3.1 冰箱 0℃～4℃。
3.2 恒温培养箱：36℃±1℃和25±1℃3.3 恒温水浴锅：46℃±1℃。
3.4 电子天平：0g～500g，精确至0.01g.3.5 可调试移液枪：1ml～5ml3.6 旋涡混匀器3.7 薄膜过滤器：三联3.8 灭菌吸管：1ml(具0.01ml刻度)、10ml（0.1ml刻度)。
3.9 灭菌锥形瓶：500ml,250ml.3.10 灭菌培养皿：直径约90mm3.11 灭菌剪子、镊子、滤头、移液枪头等。
4试剂和培养基4.5 0.1%2，3，5-三苯基氯化四氮咗溶液121℃，15min灭菌备用。
4.2 磷酸24.1 营养琼脂培养基：取15.2g营养琼脂培养基溶于400ml水中，装入500ml锥形瓶121℃，15min灭菌备用。
4.2 沙氏琼脂培养基：取25.6g沙氏琼脂培养基溶于400ml水中，装入500ml锥形瓶121℃，15min灭菌备用。
4.3 洗脱液：取0.9g氯化钠溶于100水中（加入2 g山梨酸脂80），装入100ml锥形瓶，另外再取0.9%氯化钠溶液分别以9ml/支分装于试管中121℃，15min灭菌备用。
4.4 75%乙醇溶液4.5 0.1%2，3，5-三苯基氯化四氮咗溶液121℃，15min灭菌备用。
5 操作步骤5.1检样稀释及培养5.1.1以无菌操作将检样10g(ml) 放于含有100mL灭菌生理盐水灭菌玻璃瓶，经充分振摇制成1：10的均匀稀释液。
菌落计数器操作规程
菌落计数器操作规程
《菌落计数器操作规程》
一、概述
菌落计数器是用于计算微生物菌落数量的仪器，通常应用于食品、药品、环境等领域。
正确的操作规程对于准确测得样品中的微生物菌落数量至关重要。
二、操作规程
1. 准备
在进行菌落计数之前，应确保工作台面干净整洁，使用紫外线灯或75%酒精擦拭工作台面。
同时确认菌落计数器灯管是否正常工作，灯管是否需要更换。
2. 样品处理
将待测样品放入灭菌的培养皿中，转动培养皿使样品均匀地分布在培养基表面。
3. 计数
将培养皿放入菌落计数器中，使用放大镜观察培养皿中的微生物菌落。
注意：在观察过程中要避免培养皿与灯管直接接触，以免造成灯管污染。
4. 记录结果
使用计数器进行菌落计数，记录每个培养皿中的菌落数量。
注意：每个培养皿中大于300个菌落的样品，应选取少于300个菌落的培养皿进行计数。
5. 结果分析
根据计数结果计算出菌落的数量，并根据需求制作相应的报告。
6. 清洁消毒
使用75%酒精或其他消毒液清洁菌落计数器的工作台面，确
保下次使用前的卫生条件。
三、注意事项
1. 在操作时要做到轻拿轻放，避免碰撞造成培养皿破裂。
2. 观察过程中注意保持适当的距离，避免过多照射紫外线对人体健康造成伤害。
3. 每次使用后及时进行清洁消毒，保持设备的卫生条件。
通过严格按照菌落计数器的操作规程进行操作，可以保证结果的准确性，为食品、药品、环境等领域的微生物检测提供可靠的数据支持。
初始污染菌检验操作规程
初始污染菌检验操作规程方法：每个培养皿上菌落数超过300个，以最近的一个稀释级计数。
每个培养皿上菌落数在30-300个之间，以最近的两个稀释级计数，如最近的两个稀释级计数相差大于10倍，则应重新进行稀释。
4.6.3结果判定：若每个培养皿上菌落数均小于规定标准，则样品合格；若有一定数量的培养皿上菌落数超过规定标准，则进行进一步检验。
若进一步检验结果仍然超过规定标准，则样品不合格。
初始污染菌检验操作规程目的：本规程的目的是为了测定样品细菌总数，以判断样品细菌污染的程度，并评估生产单位的卫生状况，为下一步的灭菌提供参考依据。
适用范围：本规程适用于所有需要消毒灭菌前的产品和洁净车间。
作业条件：1.无菌检测需要在洁净度为100级单向流空气区域内进行，严格遵守无菌操作，避免污染。
2.超净台及工作台面必须进行洁净度验证。
作业方法与步骤：1.制作营养琼脂培养基，并按要求培养16-18小时后，检查无菌生长方可使用。
2.进行无菌室洁净度验证。
3.进行产品采集与样品处理，制备供试液。
4.进行供试液的10倍递减稀释。
5.进行接种检验。
6.进行培养。
结果与判定：1.计数方法：每个培养皿上菌落数超过300个，以最近的一个稀释级计数。
每个培养皿上菌落数在30-300个之间，以最近的两个稀释级计数，如最近的两个稀释级计数相差大于10倍，则应重新进行稀释。
2.结果判定：若每个培养皿上菌落数均小于规定标准，则样品合格；若有一定数量的培养皿上菌落数超过规定标准，则进行进一步检验。
若进一步检验结果仍然超过规定标准，则样品不合格。
菌落计数是食品微生物学检验中常用的方法之一。
在进行菌落计数时，需要注意以下基本规则。
首先，不宜采用菌落层片状生长的平板。
其次，计数符合要求的平板上的菌落，按照公式计算结果。
具体而言，菌数除以每件次（或g）的重量，等于件次或重量（g）。
选取平均菌落数在30～300之间的稀释级作为报告菌落数测定范围。
如果只有一个稀释级平均菌落数在30～300之间，则将该稀释级的菌落数乘以稀释倍数进行报告。
菌落总数操作手册
菌落总数操作手册一、引言菌落总数是一种常用的微生物检测方法，用于评估食品、水源和医药产品的微生物污染情况。
本操作手册旨在提供详细的步骤和技巧，帮助实验人员正确、准确地进行菌落总数测试。
二、实验室准备1. 实验室环境：确保实验室内的空气清洁，减少空气中微生物的干扰。
2. 实验室设备准备：2.1 培养基：使用适宜的培养基，如TSA（Trypticase Soy Agar）。
2.2 培养基平板：准备含有适量的培养基的平板，用于菌落生长。
2.3 微量移液器和吸头：用于取样和移液，确保无菌。
2.4 灭菌器：用于灭菌实验室工具和试剂。
2.5 培养箱：用于保存培养基平板在适宜的温度下孵育。
三、样品采集和处理1. 样品采集：根据需要采集待测样品，注意采样工具和容器的无菌处理，防止外界污染。
2. 样品处理：2.1 固体样品：将固体样品称量，加入适量的生理盐水或缓冲液中，进行均匀悬浮。
2.2 液体样品：取适量的液体样品，按照一定比例加入生理盐水或缓冲液中进行稀释。
2.3 混合样品：按照比例混合不同样品，确保样品的均匀分布。
四、菌落计数操作步骤1. 稀释处理：1.1 取适量的悬浮液，加入无菌试管中，加入适量的生理盐水或缓冲液进行一定倍数的稀释，如10^-1、10^-2、10^-3等。
1.2 使用无菌移液器，吸取适量的菌液，均匀涂布在培养基平板表面，用无菌酒精灯杀菌吸头。
1.3 等待菌液均匀渗入培养基平板后，用倒置培养后的平板。
2. 孵育：2.1 将培养基平板放置在培养箱中，设置适当的温度和时间，让菌落生长。
2.2 在孵育期间避免移动或震动培养基平板，以免影响菌落形成。
3. 菌落计数：3.1 使用显微镜观察培养基平板上的菌落，选择合适放大倍率。
3.2 通过目视法或使用计数器进行菌落计数，确保每个菌落仅计数一次。
3.3 记录每个稀释倍数对应的菌落数。
五、结果分析和报告1. 结果计算：1.1 根据需要计算出初始样品中的菌落总数，考虑稀释倍数和计数范围。
自动菌落计数仪操作规程
文件制修订记录一、目的建立规范的自动菌落计数仪使用操作规程，使操作规范化、标准化。
二、适用范围适用于SCAN-500型自动菌落计数仪的使用、维护与保养。
三、内容1使用方法1.1连接电源，打开灯光，在自动菌落计数仪上放置一个培养皿或者其他的支持物；1.2运行软件；1.3设置参数1.3.1在软件中已有几种预设好的参数，在预置参数窗口，选择所需要的，如果没有一种适合的参数，请参照第1.4进行操作；1.3.2按照屏幕上的灯光和背景的设置，并将其应用到设备；¬1.3.3右键单击“Test”做第一次的测试。
每个被检测的菌落都有十字标记。
如果需要，可以通过单击鼠标右键来增加或删除菌落；1.3.4如果界面上所有菌落都被检测到了，单击“Count”按钮。
图像和结果会被自动保存；1.3.5如果想修改预置参数，单击“Modify”按钮，然后单击“保存”按钮；1.4个性化设置1.4.1自行设置所需的参数，在设置参数的下拉菜单中点击第一行的“Add”按钮，给参数命名；1.4.2平板培养：选择一种平板培养的方法，然后单击“Next”；1.4.3培养基：在培养基的菜单中，选择一种最接近于现在的培养基的，然后单击“Next”；1.4.4显示：显示最佳的显示选择，单击“Next”；1.4.5颜色：可通过双击菌落来设置它的颜色，可设置7中颜色。
可以调整颜色灵敏度。
然后单击“Next”；1.4.6灯光：检查照明参数1.4.6.1为了得到最佳的对比度，背景颜色白色菌落—选择黑色背景黑色菌落—选择白色背景1.4.6.2顶部/底部灯光不透明琼脂—开顶部灯光中性光琼脂—开顶部+底部灯光透明琼脂—开底部灯光单击“Save”按钮1.4.7结果窗口，图像和计数结果被保存下来。
可导出PDF格式结果和图片，或者Excel和PDF格式的结果，或BMP，PNG，JPG格式的照片；1.4.8关闭软件，关闭Scan电源；四、编制依据自动菌落计数仪使用说明书。
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1. 目的：规范菌落计数检测操作
2. 范围：适用于抗菌肽、沃土元活菌数检测
3. 职责：实验室人员对本操作规程的实施负责。
4. 内容：
4.1 系列稀释
待测液V
0取1ml加入9ml无菌水（或生理盐水）中，充分混匀，即成母液菌悬液V
1
（基
础液）。
用灭菌过移液枪头分别吸取1.0ml上述母液菌悬液，加入9ml无菌水（或生理盐水）中，安1→10进行系列稀释，分别得到1→1*101、1→1*102、1→1*103、1→1*104……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换灭菌枪头）。
4.2 加样及培养
每个样品取3个连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液V
2
=0.1ml，加至预先制备好的固定培养基平板上，分别用无菌玻璃珠将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
每个稀释度重复3次，同时以无菌水（或生理盐水）作为空白对照，于28℃下培养24h。
4.3 菌落计数
以出现20个～300个菌落数的稀释度的平板为技术标准，分别统计有效活菌数目和杂菌数目。
当只有一个稀释度，其平均菌落数在20个～300个之间时，则以该平均菌落数计算。
若有两个稀释度，其平均菌落数均在20个～300个之间时，应按两者菌落总数之比值决定。
若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算
4.4 计算公式
N v =xkV1
V0V2
∗10−8
式中：
x——菌落平均数，单位为个；
k——稀释倍数；
V
1
——基础液体积，单位为毫升（mL）；
V
2
——菌悬液加入量，单位未毫升（mL）；
N
v
——体积有效活菌数，单位为亿每毫升（亿/mL）；
V
——样品量，单位为毫升（mL）
5. 注意事项
5.1 注意无菌操作
5.2 涂布必须涂布均匀，计数时分区或用记号笔点出计数，防止计数错误5.3 注意灭菌必须彻底，严格按照方案执行。