核酸适配体在生化分离及检测领域的应用..

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会发生变性。
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二、核酸适配体在检测中的应用
核酸适配体能够特异性地识别靶 目标,这一性质使得适配体在检
测领域大有用武之地。
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目前核酸适配体已被应用在各类传感器中。比
如电化学传感器、光学传感器以及声学传感器。 其中针对核酸适配体在电化学传感器中的应用研 究最多。
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目前核酸适配 体 已 被 应 用
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AMP适配体的化学构型
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实验装置
微流体装置SPE的示意图
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应用实例:
基于核酸适配体的微流体装置温控分离AMP
设备基础: 样品与适配体间有特异亲和性 适配体构象受温度调控
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基于适体的微流体萃取的原理
AMP的分子构型
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2、 核酸适体的筛选技术被称为“配体指数
富集系统进化”(SELEX),它是以组合化学
技术、PCR技术以及基因克隆测序技术等为
基础的整合技术。
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二)核酸适配体的特点
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谢谢!
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二、核酸适配体在生化分离中的应用
核酸适配体结合了抗体亲和技术及分子印迹技术 两者的优点,不仅选择性专一而且具有性质稳 定、易合成、易标记、分子量较小、目标分子广泛 等优势,因此其在生化分离领域显示出广阔的应用 前景。
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三)核酸适配体的筛选过程
筛选方法的选择 寡核苷酸文库的建立 循环筛选 测序及特异性修饰
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SELEX筛选的基本过程:
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实验结果表明:当温度达到32.5℃时解析率已达到
93%,并且升温解析并不影响核酸适配体的循环使
用。
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局限性: 当待分离的靶目标是蛋白质时,复合物的解离就比较 困难。因为适配体对蛋白质的结合能力,比小分子大 约强三个数量级,解离常数在纳摩尔范围内,有的甚 至在皮摩尔范围内。这时复合物的解离就需要借助较 高的温度、高浓度的盐水、较高或较低的pH值等激烈 的条件,但在这样的条件下蛋白质的活性会降低甚至
样高效、温和地实现适配体、蛋白质复合物的解离是推动该方
向发展的关键。 2.尽管近年来适配体在传感器方向的研究取得了瞩目的成果, 但在实际应用中,还需进一步优化传感器的性能,并且多数研 究只是针对于一种目标物的检测,针对于多种分析物的同时检
测是未来适配体传感器发展的一大挑战。
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在了很多种检测手段中
。比 如色谱、毛细管电泳和
生物传感器等。其中关于核
酸适配体在亲和色谱和传感
器中应用的报道最为广泛。
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四、展望
1.有关适配体在生化分离领域中应用的研究还比较少,其中怎
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核酸适配体在生化分离及检测
领域的应用
目录
核酸适配体的简介
核酸适配体在生化分离中的应用 核酸适配体在检测中的应用
展望
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(1)适配体的分子结构:其是一种短链DNA或RNA序列
(2)适配体与靶物质的结合基础:核酸分子形成的特定 三 维结构 (3)适配体对靶分子有特异性和亲和力 (4)适配体有易修饰性和稳定性
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一、简介
一)基本概念
1、核酸适体(Aptamer) 是经体外筛选技
术( SELEX) 筛选出的能特异结合蛋白质或
其它小分子物质的寡聚核苷酸片段,对 可结合的配体有严格的识别能力和高度 的亲和力。
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