药检检测乙酸含量方法2010317142938403

合成多肽中的醋酸测定方法
《中华人民共和国药典 2010版二部》新增附录 VII N：合成多肽中的醋酸测定方法，方法全文如下：
本方法系用液相色谱法测定合成多肽中醋酸或醋酸盐的含量。

除另有规定外，按下列方法测定。

对照品溶液的制备取冰醋酸适量，精密称定，用流动相A-流动相B（95：5）的混合溶液定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液（对照品溶液的浓度可随供试品中醋酸的含量作适当调整）
供试品溶液的制备照各品种项下规定的方法制备（取样量应根据其醋酸含量而定）
色谱条件及系统适用性实验用十八烷基键合硅胶为填充剂（250mm×4.6mm，5μm），以磷酸溶液（在1000ml水中加磷酸0.7ml，用氢氧化钠试液调节pH至3.0）为流动相A，甲醇为流动相B；流速为每分钟1.2ml；检测波长为210nm。

按下表进行梯度洗脱。

理论塔板数按醋酸峰计算不低于2000。

醋酸峰的保留时间约在3~4分钟。

梯度洗脱开始后，多肽被洗脱，基线急剧升高。

测定法精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算多肽中的醋酸含量。

博纳艾杰尔科技的Venusil XBP C18色谱柱按照上述方法，用于合成多肽中的醋酸测定，经过对不同品种多肽样品中醋酸的测定，结果非常稳定，准确。

结果见下图。

色谱条件：色谱柱：Agela Venusil XBP-C18柱，100Å，4.6×250mm，5µm (订货号:VX952505-0)；流动相A：取0.7ml磷酸，加水至1000ml，以浓氢氧化钠溶液调节pH值至
3.0。

流动相B：甲醇；流速： 1.2 ml/min；进样体积：10µl；检测波长210nm。

洗脱梯度：
时间(min) 流动相A( %) 流动相B( %)
0 95 5
5 95 5
10 50 50
20 50 50
22 95 5
30 95 5
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一、醋酸奥曲肽中醋酸含量测定
图1、醋酸对照品溶液色谱图
图2、醋酸奥曲肽供试品溶液色谱图
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二、 鲑降钙素醋酸含量测定
图3、醋酸对照品溶液色谱图
图4、鲑降钙素供试品溶液色谱图
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三、胸腺法新醋酸含量测定
图5、醋酸对照品溶液色谱图
图6、胸腺法新供试品溶液色谱图
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