理化因素与药物对离体小肠运动的影响
离体小肠平滑肌生理特性实验报告
离体小肠平滑肌生理特性实验报告一、实验目的1、学习哺乳动物离体器官灌流的实验方法。
2、观察小肠平滑肌的一般生理特性，包括紧张性、自动节律性、兴奋性和收缩性。
3、观察并分析各种理化因素对小肠平滑肌生理特性的影响。
二、实验原理小肠平滑肌具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。
同时，小肠平滑肌还具有自身的特点，如紧张性和自动节律性。
小肠平滑肌的活动受到神经、体液和自身内在因素的调节。
紧张性是指小肠平滑肌经常保持一定的收缩状态，这是小肠进行消化和吸收等生理功能的基础。
自动节律性则使小肠平滑肌能够在没有外来神经支配的情况下，自发地产生节律性收缩和舒张。
兴奋性表现为对刺激产生反应的能力，其反应形式包括收缩和舒张。
收缩性是小肠平滑肌的重要功能之一，通过收缩和舒张推动食物在肠道内的移动。
各种理化因素，如温度、酸碱度、离子浓度、药物等，都可以通过影响细胞膜的离子通道、受体或细胞内的代谢过程，从而改变小肠平滑肌的生理特性。
三、实验材料与设备1、实验动物：健康家兔一只。
2、实验器材：恒温平滑肌槽、麦氏浴槽、张力换能器、生物信号采集处理系统、氧气袋、注射器、手术器械（剪刀、镊子等）、丝线等。
3、实验药品：台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品、盐酸、氢氧化钠等。
四、实验步骤1、制备离体小肠平滑肌标本家兔禁食 24 小时，击晕后迅速剖开腹腔，取出一段小肠，置于盛有台氏液的培养皿中。
小心去除肠管表面的系膜和脂肪组织，用剪刀将肠管剪成 2-3cm 的小段。
选取一段肠管，两端用丝线结扎，一端固定于浴槽内的挂钩上，另一端连接张力换能器。
2、连接实验装置将张力换能器与生物信号采集处理系统相连，调整张力换能器的位置，使其保持适当的张力。
向浴槽内加入适量的台氏液，保持 38℃恒温，并持续通入氧气。
3、观察小肠平滑肌的正常生理特性开启生物信号采集处理系统，记录小肠平滑肌的收缩曲线，观察其紧张性、自动节律性和收缩幅度。
4、观察理化因素对小肠平滑肌的影响向浴槽内滴加几滴肾上腺素，观察小肠平滑肌收缩的变化。
小肠平滑肌实验报告
1. 了解离体小肠平滑肌的基本生理特性。
2. 观察不同理化因素对离体小肠平滑肌收缩活动的影响。
3. 掌握离体小肠平滑肌实验操作技能。
二、实验原理小肠平滑肌是一种非随意肌，其收缩活动受神经和体液调节。
离体小肠平滑肌实验可以模拟体内生理条件，研究平滑肌的生理特性及其调节机制。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：家兔小肠组织、台氏液、生理盐水、HCl、NaOH、肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品等。
2. 实验仪器：手术显微镜、生物信号采集处理系统、手术器械、培养皿、剪刀、镊子等。
四、实验方法1. 将家兔小肠组织置于培养皿中，用剪刀剪成1-2cm长的小段。
2. 将小肠组织置于37℃的台氏液中，用手术显微镜观察其收缩活动。
3. 分别加入不同浓度的HCl、NaOH、肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品等药物，观察其对小肠平滑肌收缩活动的影响。
4. 记录各实验条件下小肠平滑肌的收缩幅度、频率和张力等指标。
五、实验结果1. 离体小肠平滑肌在37℃的台氏液中呈现自发性收缩活动，收缩幅度、频率和张力均较小。
2. 加入HCl后，小肠平滑肌收缩幅度和频率增加，张力上升；加入NaOH后，小肠平滑肌收缩幅度和频率降低，张力下降。
3. 加入肾上腺素后，小肠平滑肌收缩幅度和频率增加，张力上升；加入乙酰胆碱后，小肠平滑肌收缩幅度和频率增加，张力上升。
4. 加入阿托品后，乙酰胆碱引起的收缩反应消失。
1. 离体小肠平滑肌在37℃的台氏液中呈现自发性收缩活动，说明平滑肌具有一定的自律性。
2. HCl和NaOH对小肠平滑肌收缩活动的影响与pH值调节有关。
HCl降低pH值，使平滑肌收缩活动增强；NaOH升高pH值，使平滑肌收缩活动减弱。
3. 肾上腺素和乙酰胆碱对小肠平滑肌收缩活动的影响与神经递质调节有关。
肾上腺素激活α受体，使平滑肌收缩活动增强；乙酰胆碱激活M受体，使平滑肌收缩活动增强。
4. 阿托品阻断乙酰胆碱与M受体的结合，使乙酰胆碱引起的收缩反应消失。
七、结论1. 离体小肠平滑肌具有一定的自律性，其收缩活动受神经和体液调节。
药物对在体胃肠道蠕动和离体肠运动的影响
实验三药物对在体胃肠道蠕动和离体肠运动的影响一、药物对在体胃肠道蠕动的影响【目的】学习胃肠道推进运动实验法，观察药物对胃肠道蠕动的影响。
【原理】依文思兰是一种染料，其在胃肠道的推进距离可指示药物对胃肠道蠕动的作用（增强或抑制）及程度（强或弱），从而直观地观察药物对在体胃肠道蠕动的影响。
【材料】（一）动物小白鼠，体重18~22g。
（二）器材电子秤（或天平），小白鼠灌胃针头，1ml注射器，组织剪，眼科剪，眼科镊，直尺，搪瓷盘，烧杯，棉签。
（三）药品 0.001%乙酰胆碱，0.001%硫酸新斯的明，0.125%吗丁啉，0.01%盐酸肾上腺素，0.1%盐酸吗啡，生理盐水，0.4%依文思兰，苦味酸。
【方法】禁食12~24h的小白鼠6只，称重，标记。
按剂量0.2ml/10g给1~5号小白鼠分别灌胃0.001%乙酰胆碱，0.001%硫酸新斯的明，0.125%吗丁啉，0.001%肾上腺素和0.1%盐酸吗啡，6号鼠用生理盐水灌胃，记录给药时间。
给药5min后，各小鼠均灌胃0.4%依文思兰0.2ml，记录给药时间。
给药15min后，将各小鼠断颈椎处死，迅速破开腹腔，找到胃幽门和回盲部，剪断小肠肠管，分离肠系膜，小心置于湿润的搪瓷盘内，轻轻将肠管摆成直线。
测量小肠的总长度和依文思兰在肠内移动的距离（即幽门至肠内依文思兰最前沿处的长度），计算依文思兰移动率。
公式如下：依文思兰移动率=依文思兰在肠内移动的距离/小肠的总长度×100％【实验记录】编号药物剂量（mg/kg）小肠总长度（mm）依文思兰移动长度（mm）依文思兰移动率（%）1 乙酰胆碱2 新斯的明3 吗丁啉4 肾上腺素5 吗啡6 生理盐水【注意事项】1. 给药量要准确，各鼠给药及处死时间要一致，测量肠管长度应避免过度牵拉。
2. 若依文思兰移动有中断现象，应以移动最远处为测量终点。
3. 取出小肠后如用甲醛固定，测量结果会更准确。
4. 为避免个体差异，可以总结全班各组的实验结果。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告(精选课件)
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的：①进一步熟悉ＢL-４１0/４20多媒体生物信号记录分析系统；②学习离体肠肌的实验装置和使用方法；③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理：消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节，所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下，利用BL-4１0／4２０多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
.四、.五、实验记录与分析㈠图（一）图（一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图（一）可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度，进而动作电位的产生速率和幅度就会下降，所以平滑肌的收缩程度会减弱。
..㈡图（二)图（二）表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图（二）可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化，从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降，所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
..㈢图(三)图（三）表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三）可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强，这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的Ｍ受体结合后，可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流，进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强...㈣图(四）图（四）表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与Ｍ受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱，乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合，就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应，所以其收缩没什么明显改变。
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物：家兔，2.0-2.5kg实验药品：台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材：恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作；2.标本制备；3.仪器连接与设置；4.启动计算机，打开BL-420生物信号系统，调节参数，开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩，描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线，观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
（1）乙酰胆碱的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后，洗涤三次，进行下一项实验。
（2）阿托品的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴，两分钟后，再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩有何变化。
与（1）比较结果后，洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴，观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。
4．观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴，观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。
5．观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴，观察平滑肌的反应，待作用出现明显后，在此基础上，加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴，观察平滑肌的反应。
药物对离体肠肌运动的影响
药物对离体肠肌运动的影响X X X（浙江中医药大学XXX（专业）XX（班级）XX（几组）XX（学号））摘要目的：观察NaOH、HCl、乙酰胆碱、肾上腺素、25℃的台氏液以及氧气对离体家兔肠肌运动的影响。
方法：采用微机生物信号采集处理系统和离体家兔肠肌标本制备方法，观察并记录到不同理化因素对离体家兔肠肌刺激之后其肠肌收缩情况，在每次刺激出现明显现象之后，要用换液冲洗。
结果：得到了NaOH、HCl、乙酰胆碱、肾上腺素、25℃的台氏液以及氧气这几个因素对离体家兔肠肌分别刺激之后其肠肌的收缩张力曲线。
结论：一定浓度的NaOH和乙酰胆碱促进肠肌的运动，一定浓度的HCl和肾上腺素能抑制肠肌的运动，温度降低先促进肠肌的运动，但马上又抑制肠肌的运动，缺氧能抑制肠肌的运动，但是在一定时间范围内复氧又能使肠肌运动水平恢复正常甚至高于正常关键词：离体肠肌；HCl; NaOH; 乙酰胆碱；肾上腺素；台氏液；缺氧；复氧。
1.材料和方法1.1 实验动物：家兔（由浙江中医药大学动物实验中心提供）1.2 实验器械：实验仪器麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、微机生物信号采集处理系统、空气泵、固定器、铁支架、家兔手术器械。
1.3 药品和试剂：台氏液、一定浓度的乙酰胆碱、一定浓度的肾上腺素、一定浓度的NaOH、一定浓度的HCl。
1.4实验系统连接和参数设置把台式液加在恒温器中加热并保持到37℃左右，然后在麦氏浴槽中加入一定量的37℃左右的台式液。
通气管接95%O2+5%CO2混合气体。
用换能器输出线接微机生物信号处理系统第一通道，然后在电脑上进入RM6240系统，选择“实验”菜单中的“不同药物对家兔离体肠肌运动的影响”。
1.5离体家兔肠肌制备：取家兔1只，用木槌击其头部，立即剖开腹腔，找到十二指肠，剪取十二指肠空肠约20cm，置于台氏液中，沿肠壁除去肠系膜，用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，然后穿线结扎2cm左右肠肌两端。
1.6标本固定：肠肌一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入38℃麦氏浴槽中。
实验五_离体小肠平滑肌的生理特性与药物作用的观察_(2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物：家兔，2.0-2.5kg实验药品：台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材：恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作；2.标本制备；3.仪器连接与设置；4.启动计算机，打开BL-420生物信号系统，调节参数，开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩，描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线，观察其节律性收缩及力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
（1）乙酰胆碱的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管力和收缩有何变化。
作用产生后，洗涤三次，进行下一项实验。
（2）阿托品的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴，两分钟后，再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管力和收缩有何变化。
与（1）比较结果后，洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴，观察肠管力和收缩有何变化。
然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。
4．观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴，观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。
5．观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴，观察平滑肌的反应，待作用出现明显后，在此基础上，加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴，观察平滑肌的反应。
药物对离体小肠的作用
哺乳类动物的消化 道平滑肌具有收缩性、 缓慢而不规则的自动节 律性、M受体兴奋药和 阻断药均可影响小肠收 缩活动。
操作步骤： 1.仪器准备：首先在平滑肌槽中加清 水至规定水位，在储槽中加入台氏液至规 定量，打开电源使水温预热至 38℃恒温。 2.小肠标本的制备：取小鼠一只，用 颈椎脱臼的方法处死，立即打开腹腔，剪 取十二指肠和回肠上段，在台氏液中洗去 内容物，剪成长为2~3cm的肠段备用。 3.移一段小肠至浴槽中固定，并连接记 录仪，开始记录小肠正常收缩曲线，稳定 10min。
药物 对离体小肠的作用
医学院机能实验室 2011年10月
目的：学习动物离体小肠的实 验方法；分析药物对肠平滑肌的作 用机制。 药品：1：10000乙酰胆碱、 1：10000阿托品。 器材：BL-410实验系统、平 滑肌恒温浴槽、张力换能器、剪刀、 镊子、培养皿。 动物：小白鼠一只，♀♂均可。
相关知识
化学药物对家兔离体小肠平滑肌电生理特性的影响[1].
![化学药物对家兔离体小肠平滑肌电生理特性的影响[1].](https://img.taocdn.com/s3/m/e5298324eff9aef8941e0645.png)
化学药物对家兔离体小肠平滑肌电生理特性的影响夏树林, 朱道立(南通大学生命科学学院, 江苏南通226007)小肠电活动与小肠运动形式之间的关系受到国内外学者的广泛重视与研究, 在消化道平滑肌电活动的观察中发现, 慢波不会引起平滑肌收缩, 仅在慢波之上重叠的峰波才引起平滑肌的收缩, 而且其收缩强度直接取决于峰波的大小[1 ,2 ] 。
但也有学者认为没有峰波也能引起收缩活动[3 ] 。
家兔小肠内在神经节位于粘膜下层的粘膜下麦氏神经丛和位于环行肌与纵行肌之间的肌间欧氏神经丛, 有神经元与神经纤维位于其间, 还受到外来神经即交感神经和副交感神经的支配, 以此调控小肠平滑肌的收缩与舒张。
本文试图观察分析不同浓度化学药物对模式动物家兔离体小肠平滑肌自发性活动的影响, 以探讨其对消化道平滑肌作功能合胞体的作用机制。
1 材料与方法111 材料11111 实验动物选用体重为2～4 kg 的健康家兔10 只,由南通大学实验动物中心提供, 雌雄不拘。
11112 试剂药品①硫代乙酰胆碱(粉剂10 g ,Fluka 公司) 配成10 - 5 、10 - 4 、10 - 3 、10 - 2 mol/ l ;②硫酸阿托品(注射液10 mg/ ml , 上海制药厂)配成0101 %、011 %、110 %、10 %浓度; ③磷酸组织胺( 10 g , Fluka 公司) 配成10 - 4 、10 - 3 、10 - 2 、10 - 1 mol/ l ; ④盐酸肾上腺素( 注射液1mg/ ml , 上海制药厂) 配成10 - 4 、10 - 3 、10 - 2 、10 - 1 mol/ l 。
11113 实验器材AP200L 序列高级商用电脑,微机化生理实验教学系统(Doctor295 Super Lab) ,张力换能器(南京生物医学工程学会, 量程为50g) , 麦氏浴槽, L 型通气钩, 恒温水浴锅, 氧气泵, 常用手术器械等。
不同处理因素对离体兔小肠平滑肌运动的影响
将兔禁食 24 h ,实验前 1 h 喂食 。击打兔后 脑部致死后 ,剖开腹腔 ,分别剪取 3～4 cm 的十二 指肠 、空肠 、回肠各三段放入 37～38 ℃台氏液中 , 充分洗去内窝物 ,边洗边通入气体 。然后把肠段 移入 37～38 ℃新鲜台氏液中继续通气备用[11 ] 。 1. 2. 2 生物信号采集与处理系统连接 取一肠 段用缝针在肠段两端各穿一丝线 ,一端系于张力 换能器的小孔上 ,另一端在通气沟上 ,以便固定肠 肌 。将通气沟连同肠肌放入麦氏浴皿中 ,通入空 气 (速度 1～2 个气泡/ 秒) 。张力换能器与 BL 310 生物信号采集与处理系统的输入接口 Ch1 连 接 。选择实验项目中的消化系统实验中“消化道 平滑肌的生理特性”实验模块 ,设置控制参数 :增 益 G(100) ,时间常数 T (DC) ,滤波 F (10 KHZ) ,扫 描速度依需要设定 (通常为 2. 5 s/ div 或 5. 0 s/ div) 。
0. 597 ±0. 202
2. 2 机械刺激对小肠运动的影响 在肠段舒缩活动平稳的基础上 ,用镊子轻捏
起肠管某一点 ,收缩曲线波形 2 ±0. 5 s 内立刻显 著变化 ,频率增加 ,振幅明显增大 ,十二指肠的收
16 卷第 1 期 吕锦芳等 不同处理因素对离体兔小肠平滑肌运动的影响 1 9
理化因素对离体小肠平滑肌运动的影响
理化因素对离体小肠平滑肌运动的影响实验分析[实验目的]通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解；学习动物离体组织器官灌流的实验方法。
[实验原理]消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均由平滑肌组成。
平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激敏感等生理特性。
在一定时间内，离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。
本实验将小肠平滑肌置于模拟内环境中，观察当模拟内环境因素发生变化时，离体小肠平滑肌运动的变化。
该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性，而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性，被称为生物学检定法。
[实验对象]兔或豚鼠。
[实验药品]台氏液、1:10 000肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱、1%CaCl2溶液、1 mol·L-1 HCl溶液、1 mol·L-1Na OH。
[仪器与器械]恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集处理系统（或二道生理记录仪）、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。
[实验方法与步骤]1.实验的准备(1)恒温平滑肌浴槽装置向中央标本槽内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。
外部容器为水浴锅加自来水。
启开电源，恒温工作点定在38℃(图9.1-1)。
(2)标本制备向耳缘静脉注射空气(或用木棒猛击兔的后脑部)使其致死，将兔背位固定于手术台上，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃,以胃幽门与十二指肠交界处为起点, ,快速沿肠缘剪去肠系膜,然后再剪取20～30 cm长的十二指肠置于4℃左右的温台氏液中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠腔内壁，并置于低温(4～6℃)台氏液中备用。
实验时将肠管剪成2～3 cm的肠段，用棉线结扎肠段两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端连于张力换能器，适当调节换能器的高度，使其与标本之间松紧度合适。
实验四 家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
离体小肠平滑肌生理特性 及药物作用的观察
药理学教研室 陆远富 姚寅
【实验目的】
1．学习一种离体组织器官实验方法。
2．观察乙酰胆碱（acetylcholine,ACh）、阿托品 （atropine）、去甲肾上腺素(noradrenaline,NA)、 酚妥拉明（phentolamine）、CaCl2、温度、酸碱 度等对离体小肠平滑肌的作用。
控制消化道运动
消化道腺体分泌、肠内物质 吸收、局部血流控制
交感神经
外来神经
副交感神经
NA（－）运动、分泌 Ach（＋）运动、分泌
【实验动物】
家兔 体重？Kg 雌/雄
【实验材料】 试剂和药品
器材
恒温平滑肌槽 BL-420F系统 张力换能器 手术剪 眼科剪 眼科镊（两端用细 线结扎，一端系于通气管的 挂钩上，另一端与张力换能 器相连）
启动计算机
“实验”菜单中选择 “消化”中“消化 道平滑肌生理特性” 项
调节参数 开始记录
【观察项目】
1.自动节律收缩 2.观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 3.观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 4.观察无钙台式液对肠段收缩的影响 5.观察温度对肠段收缩的影响 6.观察酸碱度对肠段收缩的影响
思考题
1．哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良 好状态需具备哪些基本灌流条件？
2．钙离子在平滑肌收缩中起什么作用? 3．取肠时为什么采用击昏家兔而不在麻醉下进
行？ 4. 为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的
变化？其机理是什么？
【注意事项】
1．在穿线系肠管的时候，要速度快，结扎牢固，不能提出台 氏液 ，且要用温热台氏液。
2．肠管勿牵拉过紧或过松，且连线必须垂直，且不得与浴槽 的管壁、通气塑料管接触，以免磨擦。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
㈠
图（一）
图（一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况
从图（一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱，因为平滑肌收缩需要酶催化，而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低，这就可以影响钠钾钙等离子的转运，继而影响去极化和复极化的速度，进而动作电位的产生速率和幅度就会下降，所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈤
图（五)
图（五)为在正常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠收缩曲线变化情况
由图（五)可知在滴加盐酸后小肠平滑肌收缩明显减弱，这是因为加入盐酸后，小肠所处环境的氢离子浓度升高，氢离子可以影响慢钙通道的开放，是钙离子内流减少，进而影响动作电位产生的频率；另外氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白结合的位点，使肌凝蛋白ATP酶活性下降、肌纤蛋白对钙离子的敏感性下降，肌质网释放钙离子的量减少，能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程，所以小肠的平滑肌收缩显著减弱。当过几秒后加入氢氧化钠后中和了氢离子，使小肠所处的环境恢复正常，所以其收缩慢慢趋于正常。
㈢
图（三）
图（三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况
由图（三）可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强，这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后，可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道，使大量的钙离子内流，进而使动作电位产生的频率增加，所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣
图（四）
图（四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品，三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况
由图（四）可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化，这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了，在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱，乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合，就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应，所以其收缩没什么明显改变。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察[目的]了解体外组织器官检测方法；观察离子组成、pH值、温度、乙酰胆碱肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律和很强的延展性，可以刺激化学物质、温度和拉伸较为敏感等生理特性。
将离体的组织、器官至于模拟的内环境中，可在一定时间内保持其功能，从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提供了便利的条件。
功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。
[实验步骤]1.恒温浴槽的准备工作2.标本制备3.仪器连接与设置4.启动计算机开始记录[观察项目]1.自动节律收缩2.观察胆碱能受体激动剂对肠收缩的影响和阻断剂的影响（1）乙酰胆碱的影响（2）阿托品的影响3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)肾上腺素的作用(2)去甲肾上腺素的作用4.观察钙离子对肠断收缩的影响5.观察温度对肠断收缩的影响6.观察酸碱度对肠断收缩的影响[结果分析]1.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)乙酰胆碱的作用向浴中加入乙酰胆碱后，离体肠道的活性增强，范围增大。
目前认为乙酰胆碱能与肌膜上的M受体结合，开放两种通道：一种是潜在敏感的Ca2+专用通道，另一种是特异性受体激活的Ca2+专用通道。
第一类通道对乙酰胆碱敏感，小剂量乙酰胆碱引起开放；后一种通道对乙酰胆碱相对不敏感，只有高剂量乙酰胆碱能引起开放。
这两种通道的开放增加了肌浆中的Ca2+，然后激活肌原纤维-肌球蛋白ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。
(2)阿托品的作用将阿托品溶液加入浴样管中，2分钟后加入乙酰胆碱（ACh）。
结果发现，小肠管的张力和收缩力没有显著变化。
原因是阿托品是一种乙酰胆碱阻滞剂，使乙酰胆碱的作用消失。
因此，添加乙酰胆碱后没有效果。
因此，当两者都加入时，曲线没有明显变化。
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消化道平滑肌的特点：
兴奋性——较低 传导性 收缩性——微弱持续收缩，即具一定紧张性 自律性——良好，但不规则 对理化因素或药物敏感
【实验目的】
学习哺乳动物离体器官的灌流方法。
观察消化道平滑肌的生理特性，以 及各种理化因素对其活动的影响。
【实验对象】
家兔的离体小肠
【实验步骤】
【结果分析与讨论】
一、结பைடு நூலகம்分析
请两位同学总结实验结果。
二、讨论
加入阿托品，再加入乙酰胆碱，肠段张力及 收缩活动有何变化？与直接加入乙酰胆碱 有何不同？为什么？
肌肉收缩的分子机制
【实验结果】
观察项目 收缩性
加入1：10000ACh（2滴 ） 加入1：10000肾上腺素（2滴） 加入1mol/ml NaOH（2滴） 加入1mol/ml HCl（2滴）
【注意事项】
加药前，准备好更换用的预热台氏液。保 持浴槽内温度在38℃，温度勿过高或过低。 上述药液加入量为参考剂量，效果不明显 时，可以增补，但防止一次加药量过多。 每次实验项目效果明显后，立即更换台氏 液，冲洗肠段，待肠段恢复稳定活动后， 再观察下一实验项目。
1、预热平滑肌槽
2、用木椎猛击家兔的头枕部使其昏 迷
3、剖开腹腔，取约12cm十二指肠置于 38℃的台氏液中
4、每组取2-3cm十二指肠置于 38℃的台氏液中，穿线固定小肠标 本，连接装置。
5、观察项目
（1）正常小肠运动曲线 （2）加入乙酰胆碱两滴，描记肠段运动 （3）加入肾上腺素两滴，描记肠段活动 （4）加入NaOH两滴，观察肠段活动变 化。 （5）加入HCl两滴，观察肠段活动变化。