酶标仪原理酶标仪使用说明
酶标仪的使用方法和注意事项
酶标仪的使用方法和注意事项酶标仪是一种用于检测生物样本中酶的活性的仪器,常用于生物化学、生物医学、生命科学等领域的研究和应用。
下面将介绍酶标仪的使用方法和注意事项。
一、使用方法1.准备工作在使用酶标仪之前,需要先进行一些准备工作。
首先,需要将检测板(通常是96孔板)放入酶标仪中,并将所需的试剂和样本准备好。
其次,需要根据实验的需要设置酶标仪的参数,如波长、温度、时间等。
2.加样和测定加样前,需要将试剂及样本搅拌均匀,然后按照实验方案将其加入到检测板的相应孔中。
加样完成后,将检测板放入酶标仪中,并启动仪器进行测定。
测定完成后,可通过酶标仪的软件进行数据处理和分析。
3.清洗和维护在使用完毕后,需要对酶标仪进行清洗和维护。
首先,需要将检测板从仪器中取出,并用适当的方法清洗和干燥。
其次,需要对酶标仪进行日常的维护和保养,如清洁、校准、更换灯管等。
二、注意事项1.样本准备在进行酶标检测之前,需要对样本进行适当的处理和准备,以确保其质量和稳定性。
例如,需要对样本进行冷冻保存、离心分离、过滤、稀释等操作。
2.试剂和标准品在进行酶标检测之前,需要对所使用的试剂和标准品进行充分的了解和掌握,以确保其质量和稳定性。
例如,需要对试剂的配制、保存和稀释等进行掌握,对标准品的选取和制备进行了解。
3.仪器校准在进行酶标检测之前,需要对酶标仪进行校准,以确保其准确性和可靠性。
例如,需要对仪器的波长、光强、温度等参数进行校准,对仪器的光路、光源等进行定期检查和维护。
4.数据处理和分析在进行酶标检测之后,需要对所得到的数据进行充分的处理和分析,以达到准确、可靠和合理的结果。
例如,需要对数据进行统计、分布、比较等分析,对结果进行解释和说明。
5.安全注意事项在进行酶标检测之前,需要注意安全问题,以保护实验人员的身体健康和生命安全。
例如,需要佩戴适当的防护用品,对实验室环境进行清洁和消毒,对化学品和生物样本进行正确的处理和处置。
酶标仪是一种重要的生物检测仪器,在生物科学和医学领域具有广泛的应用前景。
酶标仪的原理及应用
酶标仪的原理及应用酶标仪(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)是一种基于酶反应原理的生化分析方法。
它广泛应用于医学诊断、生物学研究、环境监测以及食品安全等领域。
下面将从酶标仪的原理、操作步骤以及应用等方面进行详细介绍。
酶标仪的原理酶标仪原理主要基于免疫学的“抗原-抗体”反应。
在酶标仪实验中,首先将待测物(如细菌、病毒、蛋白等)与特异性抗体结合,在固定的试剂盘或板上形成抗原抗体复合物。
然后,通过添加与抗体结合的酶标记物,例如酶标记的辣根过氧化酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP),使抗原抗体复合物与酶标记物进行特异性反应。
最后,通过加入底物使酶标记物发生催化反应,并转化为显色产物。
测量产物的光密度或发光强度,可以获得待测物的定量信息。
酶标仪的操作步骤酶标仪的操作步骤主要包括涂覆试样、孵育、洗涤、添加酶标物、孵育、洗涤和测定结果等几个主要过程。
1. 涂覆试样:将待测物(如蛋白、抗原、抗体等)溶液涂覆到微孔板上,通过静置或离心等方式将试样固定在孔底或表面。
2. 孵育:将标样或样品加入微孔板中,与已固定的待测物结合形成复合物,保温孵育一段时间,使反应充分发生。
3. 洗涤:通过加入缓冲液,用洗涤机或离心等方式清洗微孔板,去除未结合的物质,如杂质、底物残留等。
4. 添加酶标物:将酶标记的抗体或物质加入微孔板孵育,将其与已结合的待测物发生特异性反应。
5. 孵育:保温孵育一段时间,使反应充分发展。
6. 洗涤:通过加入缓冲液,用洗涤机或离心等方式清洗微孔板,去除未结合的物质。
7. 测定结果:加入合适的底物,使酶标记物发生催化反应,形成显色产物。
通过酶标仪测量光密度或发光强度,根据标准曲线或对照组数据计算出待测物的浓度。
酶标仪的应用酶标仪在医学诊断、生物学研究等领域具有广泛应用。
1. 医学诊断:酶标仪可用于检测特定抗体或抗原,例如检测病毒感染、肿瘤标志物、自身免疫疾病等。
通过测定样品中特定物质的浓度,可以帮助医生进行病情判断、疾病诊断和疗效评估。
酶标仪的工作原理
酶标仪的工作原理
酶标仪是一种用于检测酶反应的仪器。
其工作原理如下:
1. 准备试剂:首先,将酶底物(通常是一种用于酶反应的底物)加入到待测样品中,使其与样品中的酶发生反应。
然后,将待测样品与特定的试剂和缓冲液混合,以提供适宜的反应环境。
2. 加入酶底物:将加有试剂的待测样品加入到酶标仪的反应孔中。
每个孔中都包含一个微小的吸附性表面,用于捕获和固定待测样品。
3. 激活酶反应:通过对反应孔中的样品施加特定的温度和时间条件,可以使酶底物与样品中的酶发生反应。
这个过程会导致酶底物的转化,生成一个可探测的产物。
4. 读取光学信号:酶标仪使用一种特定的波长的光源照射被固定的酶底物和产物。
根据酶底物和产物的属性,被固定的酶底物或产物会发出特定的光学信号。
酶标仪会检测这些信号并进行分析。
5. 数据分析:最后,通过对检测到的光学信号进行数学计算和分析,酶标仪可以确定待测样品中酶的活性或浓度。
这些结果可以用于研究酶的功能、酶活性的变化等。
酶标仪在医学、生物学、生物工程等领域中广泛应用,可以用于酶活性测定、药物筛选、蛋白质检测和基因表达分析等。
酶标仪操作指南说明书
酶标仪操作指南说明书注意:本文为虚构内容,与实际产品或操作指南无关。
酶标仪操作指南说明书一、产品简介酶标仪是一种用于生物学实验的实验仪器,广泛应用于酶学研究、免疫学、生物化学等领域。
本产品操作指南旨在帮助用户正确操作酶标仪,提供准确可靠的实验结果。
二、安全使用须知1. 请确保工作环境干燥、通风良好,并避免阳光直射。
2. 操作酶标仪时,请戴好实验手套和护目镜,确保安全操作。
3. 如果发现任何异常情况,如电线损坏、烟雾、异味等,请立即停止使用并联系售后服务部门。
三、仪器准备1. 将酶标仪放置在平稳的工作台上,并连接电源线。
2. 打开酶标仪电源开关,并等待仪器启动完成。
在启动过程中,请勿进行任何操作。
3. 检查仪器是否处于正常工作状态,如液晶显示屏是否亮起,机械部件是否灵活运转等。
四、标准曲线设置1. 将标准品按照指定浓度依次加入标准曲线孔中,注意每孔加入的体积要相同。
2. 打开酶标仪软件,选择“标准曲线设置”功能,并按照提示进行设置。
3. 点击“开始测试”,酶标仪将自动进行吸光度测量与数据记录。
五、样品测试1. 将待测样品按照实验要求依次加入标本孔中,注意每孔加入的体积要相同。
2. 打开酶标仪软件,选择“样品测试”功能,并按照提示进行设置。
3. 点击“开始测试”,酶标仪将自动进行吸光度测量与数据记录。
六、结果分析1. 完成样品测试后,酶标仪将自动生成吸光度曲线和样品浓度数据。
2. 使用软件提供的分析工具,根据实验要求进行数据处理与结果分析。
七、仪器维护1. 每次使用后,请将酶标仪清洁干净,并保持仪器表面干燥。
2. 定期检查仪器电源线、数据线等连接部分,确保连接安全可靠。
3. 根据使用频率,按照操作手册中的要求更换相关耗材或维护配件。
八、故障排除如果在使用过程中遇到任何故障或异常情况,请参照以下步骤进行排除:1. 仔细阅读操作手册中的故障排除部分,检查是否符合常见故障情况。
2. 如果仍然无法解决问题,请联系售后服务部门并提供详细的故障描述。
酶标仪的原理及应用实验
酶标仪的原理及应用实验酶标仪的原理酶标仪是一种用于检测酶活性的实验仪器,原理是通过测量底物的反应产物与酶反应所生成的物质的量的比例,从而确定酶活性的强度。
它主要由光源、检测系统、温控系统和数据分析软件等组成。
光源酶标仪的光源通常是白炽灯或氙灯,其特点是亮度高、颜色均匀,并且能够提供稳定的光源。
光源的光波长范围决定了酶标仪的检测范围。
检测系统酶标仪的检测系统通常由光电检测器和滤光片组成。
光电检测器可以将光信号转换为电信号,常用的有光电二极管和光电倍增管。
滤光片用于选择特定波长的光信号,以消除其他干扰信号。
温控系统酶标仪的温控系统用于维持反应体系的温度稳定。
通常采用Peltier元件来控制温度,可以在较短的时间内快速升温或降温。
温控系统的稳定性对于酶标仪的实验结果至关重要。
数据分析软件酶标仪通常配备了专业的数据分析软件,可以对实验结果进行处理和分析。
这些软件可以进行数据的图形化显示、数据的导出和保存等功能,方便用户对实验结果进行进一步的研究和分析。
酶标仪的应用实验酶标仪在生物医学领域有着广泛的应用,可以用于检测酶活性、蛋白质含量、抗体浓度等各种实验。
酶活性检测酶标仪可以通过测量酶催化反应产物的浓度来确定酶活性的强度。
常见的酶活性检测实验包括酶动力学研究、酶抑制剂筛选等。
蛋白质含量检测酶标仪可以通过测量蛋白质与染色剂的反应产物的光吸收值来确定蛋白质的含量。
这种方法被广泛应用于蛋白质定量、蛋白质纯化等实验。
抗体浓度检测酶标仪可以通过测量抗体与抗原结合产生的信号强度来确定抗体的浓度。
这种方法被广泛应用于免疫学研究、疫苗开发等实验。
其他应用除了酶活性、蛋白质含量和抗体浓度检测外,酶标仪还可以用于DNA浓度检测、细胞增殖实验、荧光标记实验等多种实验。
酶标仪实验的步骤1.准备实验材料,包括底物、酶、抗体等。
2.设置酶标仪的参数,如波长、温度等。
3.加入适量的底物和酶或抗体到反应体系中。
4.将反应体系放入酶标仪中,启动实验。
酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪简介:酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。
可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶标仪原理:酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。
人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。
酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪使用方法及注意事项
操作过程
1.开启仪器电源开关,同时启动电脑。
2.启动程序,进入程序主界面。
3.根据不同的测量要求,设置测定波长和测量范围。
4.弹出板架,放入待测样品,启动检测,命名测试样品,进行检测。
5.导出excel表格数据,并保存数据。
6.关闭计算机和主机电源,登记使用记录。
注意事项
1.开机预热,待自检结束后方可使用。
2. 孔板底部需要保持干净,避免测量误差。
3. 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成注意做好清洁工作
4.侧紫外波段的吸光值,须使用特殊孔板。
5.加样的溶剂量应适当,太少影响测定结果,太多则容易溢出,推荐每孔至少使用100ul溶剂
6.仪器如果出现故障,请立即与技术人员,切勿擅自拆卸酶标仪。
7. 使用结束后必须关掉仪器和电脑,
8. 每次使用需要登记使用人姓名、时间以及仪器状态。
酶标仪使用详解范文
酶标仪使用详解范文酶标仪是一种常见的实验仪器,用于检测生物样本中特定分子的浓度。
它广泛应用于生物医学研究、药物研发和临床诊断等领域。
本文将详细介绍酶标仪的使用方法及注意事项。
一、酶标仪的基本原理酶标仪是通过光学测量来确定样本中特定分子浓度的仪器。
其工作原理是利用底物与酶的反应产生的物质颜色变化来测定样品中酶活性或者其中一种特定分子的浓度。
酶标仪通过测量底物产生的吸光度或荧光来确定管内样本中特定分子的浓度。
二、酶标仪的使用步骤1.准备工作:首先打开酶标仪电源,等待其预热。
然后根据需要选择合适的检测模式,如吸光度或荧光模式。
2.设定参数:按照实验要求,设定酶标仪的参数,包括波长、时间和增益等,这些参数取决于所使用的底物和样品类型。
通常需要根据实验所需设定不同的参数。
3.校准仪器:在进行测量之前,需要对酶标仪进行校准,以确保测量结果的准确性。
校准一般分为零点校准和标准曲线校准两个步骤。
零点校准是将酶标仪的读数归零,标准曲线校准则是使用已知浓度的标准样品制作标准曲线,以便后续测量时根据标准曲线确定待测样品中的物质浓度。
4.加样测量:用自动吸管器或移液器将样品加入酶标仪中,确保每个孔都有足够的样品进行测量。
加样完成后,将酶标板或孔板插入酶标仪的样品槽内,等待测量结果。
5.数据处理:酶标仪会自动测量各个孔的吸光度或荧光值,并将结果显示在仪器屏幕上。
根据实验要求,将数据导出并进行数据处理,如制作标准曲线、计算浓度等。
三、酶标仪使用注意事项1.酶标仪是一种精密仪器,使用前需仔细阅读使用说明书,并按照操作步骤进行操作。
2.操作时要注意保持操作平台的清洁和无尘,避免杂质对测量结果的影响。
3.底物的选取应根据实验目的和样品特性进行选择,不同底物对于不同物质浓度的测定有其特定的敏感性和检测范围。
4.样品的加入量需要根据实验要求准确控制,加样时尽量避免泡沫的产生。
5.酶标仪在校准时需要使用标准样品,为确保准确性应使用不同浓度的标准样品制作标准曲线。
酶标仪的使用 酶标仪常见问题解决方法
酶标仪的使用酶标仪常见问题解决方法酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与紧要结构和光电比色计基本相同。
图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图。
光源灯发酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与紧要结构和光电比色计基本相同。
图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图。
光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本。
该单色光一部分被标本吸取,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果。
微处理机还通过掌控电路掌控机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程。
而另一些酶标仪则是接受手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和掌控电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单。
第一步,酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检,基础酶联,软件版本号第二步,等待数秒后,荧屏显示“基础酶联,准备和时间”,工作人员心须认真阅读仪器操作使用说明书,将被测样品板放入酶标盘中,同时打开与酶标仪相连的打印机开关第三步,“测量模式”键:进入选择波长程序,屏幕显示”:基础酶联单长波检测"",通过上下键选择单长波和双长波检测第四步,按开始开始键,启动阅读功能,酶标仪开始对样品板进行检测第五步,读数完毕,打印机开始打印结果一专业分析仪器服务平台,试验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣扬媒体。
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酶标仪的使用方法和注意事项
酶标仪的使用方法和注意事项一、酶标仪的基本介绍酶标仪是一种用于定量分析的仪器,可以测定生物样品中的蛋白质、核酸等生物分子的浓度。
其原理是利用特定酶促反应,将待测物质转化为可检测的产物,并通过光学方法进行测定。
二、酶标仪的使用前准备1.检查设备:在使用前,需要检查设备是否正常工作。
首先,检查电源线是否牢固连接;其次,检查光源和探测器是否干净无污染;最后,打开电源开关进行预热。
2.准备样品:根据实验需要,准备好待测样品,并按照实验方案进行处理。
3.调节波长:根据实验需要,选择合适的波长进行测量。
通常情况下,选择与产物吸光度最大值相对应的波长进行测量。
三、操作步骤1.打开软件:将电脑与酶标仪连接,并打开相应软件。
2.设置参数:在软件界面上设置相关参数,如波长、板型、样品类型等。
3.加入标准曲线:根据实验需要,在板子上加入标准曲线,通常选择不同浓度的标准品进行加入。
4.加入样品:将处理好的样品加入板子中,并记录每个孔的位置和名称。
5.开始测量:将板子放入酶标仪中,并按照软件提示操作,开始测量。
6.保存数据:测量完成后,将数据保存在电脑中,并进行必要的数据分析和处理。
四、注意事项1.保持清洁:在使用酶标仪前后,需要保持仪器和实验环境的清洁。
特别是光源和探测器等灵敏部件,需要定期清洗和消毒。
2.注意波长选择:选择合适的波长进行测量非常重要。
如果波长选择不当,可能会影响到测量结果的准确性。
3.注意样品稀释:如果样品过于稠密或者杂质过多,可能会影响到反应效果。
因此,在进行酶标实验前,需要对样品进行必要的稀释或者纯化处理。
4.注意安全操作:在使用酶标仪时,需要注意安全操作。
尤其是涉及到有毒有害物质时,需要采取必要的防护措施。
5.注意数据分析:在完成实验后,需要对数据进行必要的分析和处理。
特别是需要注意数据的可靠性和可重复性。
五、总结酶标仪是一种非常重要的实验仪器,可以用于定量分析生物样品中的各种生物分子。
在使用酶标仪时,需要注意设备维护、样品处理、波长选择等方面的问题,以确保实验结果的准确性和可靠性。
酶标仪的原理应用
酶标仪的原理应用1. 酶标仪的原理酶标仪是一种用于测定酶活性的仪器,它基于酶的特异性反应原理进行操作。
下面是酶标仪的原理:•酶的特异性反应酶是一种生物催化剂,可以加速生物体内化学反应的速率。
它具有高度的特异性,只能与特定的底物结合,并催化其转化为产物。
•酶标仪的工作原理酶标仪的工作原理基于酶底物与底物之间的特异性反应。
具体步骤如下:1.首先,将待测样本添加到酶标仪中的反应孔中。
2.酶标仪通过自动混匀系统,将酶底物和底物与待测样本充分混合。
3.然后,酶底物与底物发生特异性反应,酶催化底物转化为产物。
4.酶标仪通过检测系统,监测底物或产物的吸光度或荧光强度的变化。
5.最后,根据吸光度或荧光强度的变化,酶标仪计算出待测样本中酶的活性。
2. 酶标仪的应用酶标仪具有广泛的应用领域,以下是酶标仪的常见应用:•生物医学研究酶标仪在生物医学研究中起着重要的作用。
它可以用于:–酶活性的测定:酶标仪可以测定细胞或组织中特定酶的活性,从而评估生物体内某一特定过程的变化。
–蛋白质测定:酶标仪可以用于测定样品中的蛋白质浓度,用于研究蛋白质的表达与功能。
–免疫学研究:酶标仪可以用于检测抗体与抗原的相互作用,从而评估免疫反应的强度和特异性。
•临床诊断酶标仪在临床诊断中被广泛应用。
它可以用于:–病毒检测:酶标仪可以检测体液中的病毒抗体或病毒核酸,用于判断感染的病毒种类和程度。
–药物浓度测定:酶标仪可以测定药物在体液中的浓度,用于判断药物的疗效和安全性。
–癌症标志物检测:酶标仪可以检测体液中的癌症标志物,用于早期发现和诊断癌症。
•食品安全检测酶标仪在食品安全检测中起着重要的作用。
它可以用于:–食品中毒素检测:酶标仪可以检测食品中的各种毒素,用于判断食品的安全性。
–食品成分检测:酶标仪可以测定食品中的营养成分或添加剂,用于评估食品的品质。
–食品标签检测:酶标仪可以检测食品中的标签成分,用于确认食品是否符合标签说明。
3. 酶标仪的优势酶标仪相比传统的方法具有以下优势:•高灵敏度酶标仪可以测定低浓度的分子,具有高灵敏度,能够检测微量的样品。
酶标仪作业指导书
酶标仪作业指导书一、引言酶标仪是一种用于测定酶活性的仪器,广泛应用于生物学、医学和生物化学等领域。
本作业指导书旨在匡助操作人员了解酶标仪的基本原理、操作步骤和注意事项,以确保正确、准确地进行实验操作。
二、酶标仪的基本原理酶标仪利用酶的催化作用测定样品中特定物质的含量。
其基本原理是将待测样品与特定底物反应,底物在酶的催化下发生颜色变化,通过测量颜色的强度来确定样品中特定物质的含量。
三、操作步骤1. 准备工作a. 打开酶标仪电源,并确保仪器处于正常工作状态。
b. 准备好所需的试剂和标准品,并按照实验方案的要求进行稀释。
c. 清洁工作台和使用的试剂瓶,以确保实验环境的清洁。
2. 样品处理a. 取出待测样品,并按照实验方案的要求进行处理,如离心、稀释等。
b. 将处理后的样品分别加入标准曲线的孔和待测样品的孔中。
3. 启动酶标仪a. 打开酶标仪软件,并选择相应的实验模式。
b. 设置所需的实验参数,如波长、吸光度范围等。
c. 点击“开始”按钮,启动酶标仪进行测量。
4. 数据分析a. 酶标仪完成测量后,软件会自动生成吸光度数据。
b. 根据实验方案中的标准曲线,将吸光度数据转化为待测样品中特定物质的含量。
c. 进行数据统计和分析,并记录结果。
四、注意事项1. 酶标仪操作前需进行预热,确保仪器处于稳定状态。
2. 操作过程中要注意实验室的卫生和安全,避免交叉污染。
3. 使用试剂时要按照要求进行稀释,避免浓度过高或者过低对实验结果的影响。
4. 操作人员应熟悉酶标仪的使用说明书,了解仪器的性能和操作方法。
5. 实验过程中要注意记录实验条件和操作步骤,以备后续分析和验证。
五、实验结果示例以测定血清中蛋白质含量为例,根据实验方案制备了一组标准曲线和待测样品。
经过酶标仪测量和数据分析,得到如下结果:标准曲线:样品编号吸光度值蛋白质含量(mg/ml)1 0.1 0.052 0.2 0.13 0.3 0.154 0.4 0.25 0.5 0.25待测样品:样品编号吸光度值A 0.35B 0.25C 0.15根据标准曲线,计算得到待测样品中蛋白质的含量如下:样品A:0.2 mg/ml样品B:0.12 mg/ml样品C:0.06 mg/ml六、总结酶标仪作为一种常用的实验仪器,其操作步骤和注意事项对于确保实验结果的准确性至关重要。
《酶标仪使用方法》课件
酶标仪的原理
酶标仪通过酶与底物反应产生的颜色变化或荧光变化来检测目标物质。
酶是一种生物催化剂,能够加速化学反应的速率,而底物则是酶作用的 物质。
在酶与底物反应过程中,会产生一种或多种产物,这些产物可以是颜色 变化或荧光变化,通过酶标仪可以检测这些变化并计算出目标物质的浓 度。
酶标仪的应用
01
02
观察测量过程
在测量过程中,应注意观察仪器的 运行状态和样本的反应情况,如有 异常应及时处理。
数据导出与处理
数据导出
测量完成后,应将数据导出到电 脑或其他存储设备中,以便后续
处理和分析。
数据处理
根据实验需求,对导出的数据进 行处理和分析,如计算浓度、绘
制图表等。
整理实验结果
将处理后的数据整理成实验报告 或图表的形式,以便于分析和汇
正确设置参数
在使用酶标仪进行测量前,应根据实验需求正确设置参数,如波 长、光程等。
校准仪器
为保证测量精度,每次使用前应进行仪器校准,确保测量结果的 准确性。
定期保养
应定期对酶标仪进行保养,如清洁表面、检查光源等,以延长仪 器使用寿命。
样品处理注意事项
样品准备
在将样品放入酶标仪测量前,应确保样品已经充分混匀,避免出 现测量误差。
加样操作
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02
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准备样本
根据实验需求,准备好待 测样本,并确保样本的浓 度、体积等参数符合酶标 仪的测量要求。
加样操作
按照酶标仪的说明书,使 用吸液管将样本加入到相 应的反应孔中,注意加样 的准确性和一致性。
清洗加样器
为了避免交叉污染,每次 加样操作后应及时清洗加 样器。
参数设置
选择测量模式
荧光酶标仪的用法
荧光酶标仪的用法荧光酶标仪是一种常用于生物医学研究、药物筛选和临床诊断等领域的高灵敏度检测仪器。
它通过检测样本中的荧光信号来定量分析生物活性物质,具有操作简便、检测快速、灵敏度高等优点。
本文将详细介绍荧光酶标仪的使用方法及其在各个领域的应用。
一、荧光酶标仪的基本原理荧光酶标仪的基本原理是利用荧光物质在受到激发光照射后发射出的荧光信号进行检测。
荧光酶是一种能够发射荧光的生物活性物质,其发射的荧光信号强度与酶活性成正比。
因此,通过检测荧光信号的强度,可以对生物活性物质进行定量分析。
二、荧光酶标仪的使用方法1.样本准备:根据实验需求,准备相应的样本,如细胞培养液、血清、血浆等。
确保样本的质量和数量符合实验要求。
2.试剂准备:选择适合的荧光酶底物和反应缓冲液。
底物应与目标酶具有高特异性,以减少背景干扰。
反应缓冲液的成分和pH值应根据目标酶的特性进行优化。
3.加样:将样本和试剂按照实验设计加入到酶标板中。
确保加样准确、均匀,避免产生气泡和交叉污染。
4.反应:将酶标板置于荧光酶标仪中,设置合适的温度和时间进行反应。
在反应过程中,荧光酶底物被目标酶催化产生荧光信号。
5.检测:反应结束后,使用荧光酶标仪进行检测。
设置合适的激发波长和发射波长,以获取最佳的荧光信号。
根据需要,可以选择单点检测、动力学检测或扫描检测等模式。
6.数据分析:将检测数据导出至电脑,使用专业软件进行数据分析。
根据实验目的和要求,选择合适的统计方法和模型进行处理,得出实验结果。
三、荧光酶标仪的应用领域1.生物医学研究:荧光酶标仪在生物医学研究中具有广泛应用,如蛋白质相互作用研究、酶活性检测、基因表达分析等。
通过检测样本中的荧光信号,可以对生物过程进行深入研究,揭示生命活动的奥秘。
2.药物筛选:荧光酶标仪可以用于药物筛选过程中的活性检测。
通过对候选药物与生物活性物质的相互作用进行检测,可以快速筛选出具有潜在治疗作用的候选药物,为新药研发提供有力支持。
酶标仪的使用方法和实验操作技巧
酶标仪的使用方法和实验操作技巧酶标仪(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是一种广泛应用于生物学领域的分析方法,能够对特定抗原或抗体进行灵敏、快速的检测。
本文将介绍酶标仪的使用方法和实验操作技巧,帮助读者更好地了解和应用这一技术。
一、酶标仪的基本原理酶标仪基于酶的催化作用来检测分子的存在。
其基本原理是将待测分子与特异性抗体结合,在酶标记抗体的作用下,通过酶反应产生可视化的信号。
常见的酶标记包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP),通过其催化底物的转化,可以得到颜色或荧光信号。
二、酶标仪的使用步骤1. 酶标仪的预热和设置在开始实验前,酶标仪需要预热至合适的温度,并设置所需的波长和光强。
一般情况下,450 nm的波长被广泛应用于酶标仪实验。
2. 样品制备和反应板处理样品的制备包括对待测物体的收集、处理和提取。
蛋白质的浓度测定、稀释和标准曲线的制作也属于这一步骤。
反应板则需根据实验设计选择合适的板型并进行预处理,如洗涤、孵育等。
3. 样品的加样和反应将待测样品、标准品和对照加入准备好的反应孔中,控制好反应时间并按照实验要求进行孵育。
注意避免交叉污染和误操作。
4. 反应终止和底物加入根据实验需要,在合适的时间点将反应终止剂加入反应孔中,阻断酶反应的进行。
接着,加入合适的底物,使颜色或荧光信号表现出来。
5. 数据采集和分析使用酶标仪读取反应孔中的信号,记录吸光度或荧光强度数值。
根据实验设计,采集所需的数据并进行统计和分析,包括标准曲线的拟合、样品浓度的计算等。
三、实验操作技巧1. 严格遵循操作规程在操作酶标仪时,必须遵循严格的操作规程,包括个人防护、培训和实验室安全等。
遵循实验设计、正确操作仪器设备,确保实验的准确性和重复性。
2. 反应条件的优化反应时间、反应温度和底物浓度等条件的优化对于获得准确、灵敏的结果至关重要。
通过试验调整这些条件,找到最佳工作范围,提高实验结果的可靠性。
全自动酶标仪操作说明书
全自动酶标仪操作说明书操作说明书1. 引言全自动酶标仪是一种广泛应用于生物医学实验室中的重要设备,用于高效、精确地检测生物样本中的蛋白质或其他生物分子的浓度。
本操作说明书旨在向用户详细介绍全自动酶标仪的操作步骤和使用方法,以确保准确、高效的实验结果。
2. 设备概述全自动酶标仪由样本加样系统、试剂加样系统、光谱读取系统和控制系统等主要部件组成。
其操作过程简便,仅需按照以下步骤进行。
3. 操作步骤3.1 准备工作在进行任何操作之前,务必仔细阅读全自动酶标仪的用户手册,并确保操作人员具备必要的实验室安全知识。
3.2 打开设备使用电源键将全自动酶标仪打开,并在启动界面加载完成后进入主界面。
3.3 样本加样将待测样本按照标准操作流程加入样品盘中,确保使用正确的容器和标签以避免混淆。
3.4 试剂加样预先准备好的试剂通过试剂进样机构加入到试剂盘或试剂孔中。
确保试剂标签清晰可辨,加样量准确。
3.5 实验设置进入操作界面,根据实验要求设置相关参数,如样本体积、酶标板孔数、激发波长和发射波长等。
3.6 实验运行按下启动按钮,全自动酶标仪将按照预置步骤自动开始实验,包括混匀、孵育、洗涤、显色等过程。
3.7 数据记录和分析实验完成后,在数据管理界面对实验结果进行记录,并进行必要的数据分析和图形绘制,以便进行后续实验和结果评估。
4. 注意事项4.1 实验前校正在进行实验之前,应当对全自动酶标仪进行校正和检验,确保各项参数准确可靠。
4.2 样品处理样品的处理应遵循标准规程,避免受到污染或其它影响实验结果的因素。
4.3 安全操作操作人员需佩戴合适的实验室防护用品,遵循实验室安全操作规范,避免发生事故。
4.4 设备维护定期对全自动酶标仪进行维护和保养,清洁仪器表面和光学部件,并及时更换耗材。
5. 故障排除全自动酶标仪在使用过程中可能会遇到一些故障,如设备无法开机、读取数据错误等。
在遇到故障时,操作人员应及时查阅设备的用户手册或联系售后服务部门进行故障排除。
酶标仪应用的原理
酶标仪应用的原理1. 引言酶标仪(enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA)是一种常用的生物化学分析技术,广泛应用于医学、生物科学、环境监测等领域。
其原理基于酶的催化作用和特异性抗原-抗体反应,能够高灵敏、高精确地检测分析目标物质。
2. ELISA的基本原理ELISA的基本原理是将待测分析物质通过特异性抗原-抗体反应与酶标记结合,利用酶的催化作用产生可检测的信号,进而定量或定性分析目标物质的存在量。
3. ELISA的工作步骤ELISA分为直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等多种类型,下面以间接ELISA为例,介绍ELISA的工作步骤:3.1 涂被试样品将用于分析的样品涂在固相酶标板的孔上,待样品中的目标物质在固相表面吸附。
3.2 孵育反应将已吸附的样品孔加入特异性抗体,使其与目标物质在固相表面发生特异性结合反应,形成抗原-抗体复合物。
3.3 酶标记抗体的孵育反应加入与抗体特异性结合的酶标记二抗,形成抗体-酶标记二抗复合物。
酶标记抗体可以是辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)等。
3.4 显色反应加入合适的显色底物,酶标记的底物与酶催化的显色反应发生,产生有色产物。
酶的活性与目标物质浓度呈正相关关系。
3.5 反应终止加入反应终止液停止显色反应,产生的有色产物停止进一步反应。
3.6 光度测量使用酶标仪测定各孔的吸光度,反映出产物的光密度。
4. ELISA的优点和应用ELISA具有以下优点: - 高灵敏度:ELISA可检测达到纳克量级的目标物质,对追溯低浓度物质非常敏感。
- 高特异性:利用特异性抗体-抗原结合反应,可指定检测特定目标物质。
- 高通量:一个ELISA酶标板可以同时检测多个样本,提高实验效率。
- 易于操作:ELISA操作简单可靠,不需要昂贵的设备。
ELISA在医学、生物科学和环境监测等领域具有广泛应用,例如:- 临床医学:用于检测血清中的生物标志物,如病毒、细菌、抗体等,用于疾病的早期诊断和疫苗效果评估。
酶标仪的原理及应用
酶标仪的原理及应用引言酶标仪是一种常用的实验仪器,用于测定化学反应中酶的活性和浓度。
它主要通过测量酶与底物反应产生的颜色变化来进行分析,具有灵敏、准确和高通量的特点,被广泛应用于生物医药、食品安全和环境监测等领域。
本文将介绍酶标仪的基本原理和应用。
一、酶标仪的基本原理酶标仪的基本原理可以分为三个步骤:底物反应、产物检测和数据分析。
1. 底物反应在底物反应阶段,酶和底物发生特定的化学反应,并产生反应产物。
这个化学反应的速率与酶的活性和浓度成正比。
2. 产物检测产物检测是酶标仪的核心步骤,它可以通过光学或电化学方法来量化产物的信号。
常用的光学方法包括吸光度法、荧光法和发光法。
其中,吸光度法是酶标法最常用的方法,通过测量反应溶液的吸光度来确定产物的浓度。
荧光法和发光法则利用反应产物的荧光或发光信号进行定量测定。
3. 数据分析数据分析是酶标仪实验的最后一步,它包括对产物信号的定量测定和数据处理。
常见的数据处理方法包括计算标准曲线、计算酶活性和浓度、绘制图表等。
二、酶标仪的应用酶标仪作为一种常用的实验仪器,在生物医药、食品安全和环境监测等领域有着广泛的应用。
1. 生物医药酶标仪在生物医药领域广泛应用于生物标志物的检测和药物研发。
例如,它可以用于测定血中肿瘤标志物、酶活性和蛋白质浓度,从而实现早期癌症诊断和药物疗效评估。
2. 食品安全酶标仪在食品安全领域用于检测食品中的有害物质和微生物污染。
例如,它可以用于测定食品中的农药残留、重金属含量和细菌水平,以确保食品的安全性。
3. 环境监测酶标仪在环境监测领域用于检测水质和大气污染物。
例如,它可以用于测定水中的重金属、有机物和微生物,以及大气中的颗粒物和气体成分。
4. 其他领域除了上述应用领域,酶标仪还可以应用于植物病害诊断、生物燃料生产和药物筛选等领域。
结论酶标仪是一种重要的实验仪器,它通过测量酶与底物反应产生的信号来分析酶的活性和浓度。
酶标仪的应用范围广泛,可以在生物医药、食品安全和环境监测等领域发挥重要作用。
酶标仪工作原理
酶标仪工作原理一、引言酶标仪(ELISA)是一种常用的实验技术,用于检测和测定样品中特定分子的存在和浓度。
它的工作原理基于酶的催化作用和免疫学原理,具有高灵敏度和高特异性的特点。
本文将介绍酶标仪的工作原理,包括直接法、间接法、竞争法和间接酶标法。
二、酶标仪的基本原理酶标仪的基本原理是利用酶作为信号放大器,将检测目标物与酶标记的抗体或抗原结合,通过酶的催化作用产生可定量测量的信号。
通常,酶标仪使用底物和显色剂来测量酶的活性或产生的产物,并将其与目标物的浓度相关联。
三、直接法直接法是酶标仪中最简单的方法之一。
它利用酶标记的抗体直接与目标物结合。
首先,在酶标板的孔中涂覆待测物质,然后加入酶标记的抗体。
如果目标物存在,酶标记的抗体将与其结合。
接下来,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与目标物的浓度成正比。
四、间接法间接法是酶标仪中最常用的方法之一。
它利用酶标记的二抗与目标物结合。
首先,在酶标板的孔中涂覆待测物质,然后加入一抗。
一抗与目标物结合后,再加入酶标记的二抗。
二抗与一抗结合形成免疫复合物。
最后,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与目标物的浓度成正比。
五、竞争法竞争法是酶标仪中用于测定抗原或抗体浓度的常用方法。
首先,在酶标板的孔中涂覆固定浓度的抗原或抗体,然后加入酶标记的抗原或抗体样品。
如果样品中含有目标物,它将竞争性地与固定在酶标板上的抗原或抗体结合。
接下来,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与目标物的浓度成反比。
六、间接酶标法间接酶标法是酶标仪中用于检测抗体的常用方法。
首先,在酶标板的孔中涂覆待测物质,然后加入抗原。
抗原与待测物质结合后,再加入酶标记的抗体。
酶标记的抗体与抗原结合形成免疫复合物。
最后,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。
颜色的强度与待测物质的浓度成正比。
七、总结酶标仪是一种常用的实验技术,通过利用酶的催化作用和免疫学原理,可以检测和测定样品中特定分子的存在和浓度。
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酶标仪原理酶标仪使用说明酶标仪的检测原理光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光, 400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。
人们只所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收了光中的红色光谱。
酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。
检测:光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。
根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算:E=OD=C×D×EC为检测物的浓度D为检测物的厚度E为摩尔因子在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。
如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。
因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。
在参照波长下,检测物光的吸收最小。
检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
Anthos 酶标仪检测值计算仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,最大为4095。
仪器定义没有光源下的透光值为 0%,没有检测物的透光值为100%。
则实际检测中,检测物的透光值均在 0%一100%之间。
透光值的计算如下:T=(Meas—Min)/(Max—Min)其中T为透光值, Meas为检测的二进位数值, Min为在 0%的情况下检测的二进位数值, Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:MaX=3600 Mn=20 Meas=30T=(30-20)/3600-20)=0.0028OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552Anthos 酶标仪的中心定位仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。
在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。
光源的参照通道参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
酶标仪的用途和其它提示用于ELISA试剂的测定,广泛用于各种实验室,包括临床实验室。
质量控制质量控制是试剂检测的重要因素。
请按照试剂说明书的要求进行质量控制。
空白校正有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气,其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的,请按照试剂盒的说明书要求进行。
检测结果的解释由于有相当多的因素会影响检测的结果,如不同的酶标板,检测试剂的体积,都会造成OD值的不,因此,只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。
对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。
酶标仪的使用注意事项1、工作环境酶标仪是一种精密的光学仪器,因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性,还能够延长其使用寿命。
根据DIN VDE 0871条例,仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。
依据DIN 45 635 -19条例:仪器应放置在低于40分贝的环境下。
为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。
操作时环境温度应在15℃-40℃之间,环境湿度在15%-85%之间。
操作电压应保持稳定。
操作环境空气清洁,避免水汽,烟尘。
保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。
2、操作注意事项酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果,因此要得到准确结果,试剂盒的使用必须规范。
许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。
在酶标仪的操作中应注意以下事项:使用加液器加液,加液头不能混用。
洗板要洗干净。
如果条件允许,使用洗板机洗板,避免交叉污染。
严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。
在测量过程中,请勿碰酶标板,以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。
如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格按照试剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。
如果仪器接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒。
不要在测量过程中关闭电源。
对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到最佳效果。
使用后盖好防尘罩。
出现故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。
酶标仪及洗板机选购指南酶标仪(Microplate Reader)是对酶联免疫检测( EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。
酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,特别在近几年中,由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用,使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛,同时促进了生殖健康技术水平提高。
目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目,如:乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。
过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏科学的依据。
例如:某弓形虫检测试剂盒中,临界值规定为:阴性对照品的 OD 值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。
肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行,但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构,如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性,并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读,酶免试剂的质控也应使用酶标仪,并提供酶标仪测定的原始数据,而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。
同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如:肝炎、爱滋病、优生优育等),判读更要求严谨,由误诊引起的纠纷很难处理。
另外,住院手术病人术前的丙肝、爱滋等 EIA 试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段,正逐渐被许多单位所采用。
我国免疫诊断方法主要有如下三种:酶免(EIA)、放免(RIA)和发光,在市场上的情况如下:方法所处市场周期放免衰退期酶免成长期发光进入期放免技术由于试剂的污染和有效期等问题在国际和国内市场逐渐被淘汰,而化学发光试剂和设备比较昂贵,使得其在国内的普及特别在计生系统普及需要较长时间,EIA 技术稳定,试剂价格合理,供应充,酶免技术在中国市场处于成长期,因此购买酶标仪正合适宜。
尤其要提到的是,在中国的计划生育和妇幼保健系统配备酶标仪已经迫在眉睫。
早在几年以前, 世界卫生组织已建议对孕妇进行 TORCH五项常规筛查,但是遗憾的是由于缺乏酶标仪和洗板机等设备,RCH的检测在中国还未能普遍开展。
TORCH 感染在围产医学中称为TORCH综合症,由于孕妇, 胎儿和新生儿都易被感染, 它已受到全世界妇产科和儿科的极大重视。
妊娠期感染不仅危害母体,往往还可对胎儿和新生儿产生严重影响。
通过胎盘可引起子宫内感染而导致流产、早产、死胎或胎儿生长迟缓和畸形,通过产道和母乳可引起新生儿感染。
如累及神经系统可造成不同程度的智力障碍以及各种瘫痪、失聪、失明等严重后遗症,影响人口素质,因而 TORCH 感染与优生优育有极为重要的关系。
因此,RCH(IgG和gM)检查通常也称为优生优育十项检查。
目前,TORCH的检测方法主要有放免(RIA)和酶免(EIA)。
由于放免方法需要特殊仪器,且有放射危害,目前正被酶免(EIA)方法取代。
EIA方法具有特异性强,灵敏度高,简单快速,成本低等优点,只要配备有酶标仪和其他相应的设备,多数普通实验室均可方便地开展。
很显然, 尽快在计生系统普及酶标仪等设备是一个迫切的需求。
这项工作的落实将有助于提高诊治水平,降低母婴发病率,从而提高整个国民的健康素质。
目前市场上提供的EIA试剂越来越多,如:T3、T4、TSH、TORCH 系列、不孕系列、各种癌症标志物、伤寒、副伤寒等,另外通过母婴传播的性传播疾病(如淋病、梅毒、HIV)和肝炎(如HBV、HCV),以及胎儿的抗体,新生儿TSH的测定,疫苗反应等,市场上也都有成套 EIA 试剂盒供应。
使用酶标仪有利于拓展检测项目,提高检测水平,其社会效益和经济效益并举。
酶标仪单、双波长检测的比较发布时间04年05月10日 13时59分邹荣良在用酶联免疫法测定抗原或抗体时,不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。
一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式,并且采用的都是垂直光路。
但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择,对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解,并且实际工作中也出现了使用单波长检测导致抗HCV部分弱阳性的漏检。
因此,本人就酶标仪在选择单、双波长使用方面谈谈个人的体会,供同道参考。
一和方法1.材料由上海科华公司提供的乙肝表面抗原测定试剂盒;eppendorf 20-20ul的移液器。
2.仪器上海科华公司的ST-360酶标仪和BIO-RAD 550酶标仪。
3.方法底物液配制:底物液A、B各5ml混合,加入微量酶标记物,再加入5ml终止液,呈微黄色,混匀待用;利用上海科华公司提供的乙肝表面抗原试剂盒的酶标板,用94孔中准确加入150ul配制好的上述底物液,另2孔中加入150ul已终止的空白底物液作空白。
在BIO-RAD 550酶标仪上分别进行450nm单波长和450nm及655nm(无630nm)的双波长检测,在ST-360上分别进行450nm单波长和450nm 及630nm的双波长检测吸光度各两次。
二结果1.分别对所得结果进行统计,发现单、双波长测定结果有较大的差异,双波长测定结果的CV值远小于单波长测定,结果见表1。
2.对ST-360两次重复测定结果进行分析,结果基本一致,见表2。
表1 酶标板吸光度在两台酶标仪上的测定统计结果表2 ST-360酶标仪两次吸光度测定统计结果三讨论1.酶标仪与分光光度计、自动生化分析仪等的吸光度测定有所不同,一般分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路,但测定原理相同,都是使用朗伯-比耳定律,测定的都是样本的吸光度。
垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。
2.酶标仪在用单波长测定吸光度时,除受到测定干扰(样本的浊度、干扰色等)和电路干扰(包括噪音、漂移、电压等)等因素外,受液体表面张力的影响也很大。