植物染色体倍性鉴定方法概述

相关 陡， 据统计可得 出其正相关系数 ， 据此可作 为植 物 染色体倍性研究 。利用形态学性状来 鉴定倍性 的一个
优点是简便 、 快速 ， 无需任何仪器设 备 ， 可在苗期进 行 。 该方法的另一个优点是实用性强 ，只要熟悉花培 的人
就很容易掌握该测定方法 ， 准确率也较高。 不足之处是 经验因素过多 ， 可 能会 因人而异。 而且部分材料要在植 株生长发育较 晚时期鉴定 ， 难以及时采取加倍 等措施 ，
使育种材 料不 能得 到充分利用 。
作 为植株倍性鉴定的直接方法 ，染色体制片法虽 ⑩
２ ０ １ ４年第 ２ 期
现代 园艺
廊坊市果 品现状与发 展探究
彰雪松 ’ ， 贾会茹
ｆ １ 河北 省廊坊 市林 业局 ０ ６ ５ ０ ０ ０ ； ２ 廊坊职业技术学院 ）
披 要： 通过对果品生产现状的调查 ， 剖析廊坊 市果品生产 中存在 的突出问题 ， 从 而提 出能 够有效解决廊坊 市果品业健康发展 的
以提高植物体内各种有效成分 的含量 。 利用倍性鉴定 ， 准确地辨认多倍体并将其挑选 出来 ，也是 多倍体 育种 中的重要一环。 另外 ， 倍性鉴定也可用 于分析细胞分裂
检测 ， 然后 经仪器 附设计算机 自动统计分析 ， 最后绘 制 出Ｄ Ｎ Ａ含量（ 倍性） 的分布 曲线图。利用流式细胞分 析
现代园艺
２ ０ １ ４ 年第 ２ 期
植物染色体倍性鉴定方法概述
杨清淮
（ 河南省信 阳市平桥 区林业局
４ ６ ４ １ ０ ０ ）
摘 要： 综述 了 植物细胞染 色体倍性 鉴定的染色体计数法、 流式细胞分析法、 植物形态 以及细胞形态学方法等各种检 测法， 并对其
优 缺 点 进 行 了评 述 。
要有较昂贵的专 门设备 ，并且 维护人员需较高 的专 业 水平以及 仪器操作 复杂 。
即染色体计数方法 ，这是确定倍性最 基本 和最精 确的方法。 直接鉴定法根据不 同材料各步骤略有不同。 它包括常规压片法和去壁低渗法 。 １ ． １常规 压 片法 目前染色 体标 本制 备通 常以根尖 为材料 ， 也可选择卷须 、 愈伤组织 、 茎尖和胚乳 为材料。 常规压片法相对来说直接易理解 ，但 是要 注意不 同植 物的不同器官其结果会存在差异性 ，各个 器官的试验
植物染色体进行观察 。但是酶解 去壁成功 与否的关键 在于对 酶液浓度 、 酶解时间、 酶解 温度等几个 因素的把 握。 所 以， 这种方法需要装备 良好 的实验室条件和富有 经验的技术人员 ， 而且操作 过程 比较繁琐 ， 工作量 大。
２ 间接鉴定法
其植物根 、 茎、 叶、 花等生物学表现也呈 现 规压片法具有若干优点 ，是 当前植 物染色体研究 中的 倍 性的增加 ，
活动等生理和遗传研究 。倍性鉴定特别是苗期倍 性鉴
定， 不仅可以大大减少育种工作量 ， 而且可以减少 土地
仪的特点是快速 、 简便 、 准确。该方法不受植物体取材
部位 和细胞所 处时期限制 ， 取材部 位可 以是 叶片 、 茎、
和资金的投入。 国内外 关于各种鉴定方法 的报道不少 ， 但较分散。本 文综述 了各种倍性鉴定方法并对其 优缺
关键词 ： 植物 ； 倍性 ； 染色体 ； 流式细胞 分析
植 物染色体倍性鉴定 在植物遗传育种 中具有 十分 重要 的作用。 在育种过程 中， 通过花药 宅 粉小孢子） 、 未
Байду номын сангаас
然直观可信 ， 但操作过程 比较繁琐 ， 工作量 大 ， 费 时费 力， 需要较 高的细胞学操作技术 ， 不能适应多倍 体产 业
２ ． ２ 细胞形 态学鉴定法 不 同倍性 细胞在形 态上存
在差异 ， 因此可根据不 同倍性植物叶片气孔 大小 、 气孔 密度 、气 孔保卫细胞长度 、气孔保卫细胞 中叶绿体数 目、 花粉粒 发芽孑 Ｌ 数 目、 花粉母 细胞 四分体时 的小孢 子 数及小孢 子所含 的核仁数等的不同进 行倍性判定【 ３ 】 。 与 根尖压片观察染 色体数和开花结实验证相 比 ，细胞 形 态学鉴定 法简便 、 快速 、 准确。 但缺点是技术难度大 ， 此 外， 采用花粉 判别需在开花期进行 ， 占地且 费时 ； 对 于 特定植物 的某些细胞 ， 由于其细胞 长度重叠 问题 ， 易造 成测定结果 的不确定性 。 ２ ． ３植 株形 态指 标鉴定 随着植 物特定细 胞染色 体
快速 、 准确鉴 定 受精子房等途径再生 出的植株 ， 往往是单倍 体 、 双单倍 化的需要 。所 以人们一直在探索简便 、 体及其他倍性植株 的混合群体 ，有效的倍性鉴定 是了 染 色体倍性 的方法 。细胞染色体倍性 间接 的鉴定方 法
解其遗传背景和进一 步应用 的基础 。多倍体育种是植
结果可能出现 混倍性现象 ，对此应 该综合 不同器 官倍
性进行综合分析 。
１ ． ２去壁低渗法 卷须属于体细胞 ， 其染色体计数稳
定可靠 ，相对 于植株的其它器官 ，取卷须 造成损 伤最
小， 并且 呈现 出简便 、 快捷和有效性 。去壁低 渗法 比常 重要方法 。 该方法 既可用于染色体计数 ， 还可用于染色 体组型分析 Ｇ ｉ ｍ ｓ ａ 分带等研究 ，并 可借助 扫描电镜对
点进行了评述 。不 同倍性植 株在细胞学和形态解 剖学 上具有明显差异 ， 目前主要有两大类 型。
１ 直接鉴定法
根、 花、 果 皮、 种子等 。特别是在离体培养过程 中 ， 试 管 中的芽或小植株很小 和很 嫩时 ， 此方法仅用 ｌ ｃ ｍ 的样
品就很容 易决定其材料倍性 ， 而且准确率高 。 缺点是 需
物育种的途径之一 ， 它不仅可 以对性状进行改 良， 还可
主要有以下几种 ： ２ ． １流式 细胞 分析 ￣（ Ｖ － ｌ ｏ ｗ Ｃ ｙ ｍｍ ｅ ｔ ｒ ｙ ） 不同倍性 细 胞的 Ｄ Ｎ Ａ含量有所不 同Ｉ ｌ Ｉ 。该方法 即是通过 流式 细胞 分析仪对大量 的处 于分裂间期 的细胞 Ｄ Ｎ Ａ含量口 ｌ ｉ 茳行