痰标本直接涂片镜检标准规程

2.2.2.3滴加亚甲蓝复染液，染色30秒，流水从玻片一端轻缓冲洗，冲去

复染液，沥去玻片上剩余的水，待玻片干燥后镜检。

2.2.3待检涂片检查

2.2.

3.1染色合格的涂片，由于被亚甲蓝染色而呈均匀亮蓝色，且无红色

斑块；染色后的痰膜脱落部分应小于整个涂布面积的10%

2.3镜检

2.3.1油镜下观察300个视野以上或者连续观察5分钟

2.3.2观察方法

2.3.2.1使用10×目镜双目显微镜读片；

2.3.2.2取染色完毕且已经干燥的玻片，痰膜向上放置在玻片台上并以卡

尺固定；

2.3.2.3首先使用40×物镜，转动卡尺移动玻片至痰膜左端，将光线调节

至适当亮度，调节焦距至可见细胞形态；

2.3.2.4移开40×物镜，在玻片上滴1-2滴镜油，使用100×油镜进行仔

细观察。但应注意避免油镜镜头直接接触玻片上的痰膜。

2.3.2.5读片时，首先应从左至右观察相邻的视野；当玻片移动至痰膜一

端时，纵向向下转换一个视野，然后从右至左观察，以此类推；

2.3.2.6在淡蓝色背景下，抗酸菌呈红色；其他细菌和细胞呈蓝色。

2.3.2.7仔细观察完300各视野，一般需要5分钟；每个工作日，一位镜

检人员阅读玻片量不超过25张，且连续阅读10-12张玻片后应

休息20分钟左右。

2.4结果判断

2.4.1阴性：镜检300个视野以上或连续观察5分钟未发现抗酸杆菌

2.4.2阳性：阳性（300个视野内有1~8条抗酸杆菌）

阳性1+（100个视野内有3~9条抗酸杆菌）

阳性2+（10个视野内有1~9条抗酸杆菌）

阳性3+（每个视野内有1~9条抗酸杆菌）

阳性4+（每个视野内有9条以上抗酸杆菌）

2.5结果报告与记录

2.5.1将检测结果填写入申请单报告栏，报告格式如下:

涂片1：阴性（-）

镜检结果：涂片2：阴性（-）

涂片3：阴性（-）

2.5.2将检测结果记录于结合门诊检测登记册中：

涂片号标本性状检测结果

例： 1： D 阴性（-）

2： D 阴性（-）

3： D 阴性（-）

2.6痰涂片的保存

2.6.1阅读完毕后的涂片，应及时用擦镜纸轻轻在涂片上揭取数次，彻底

去除玻片上的镜油。

2.6.2经脱油、干燥后的玻片，按实验室序号及涂片编号放置在玻片盒中，存放在阴凉干燥的环境中避光保存，以备复检或质控抽检。

3.质控

3.1质控周期

阅片人员更换或每批次阅片前

3.参考文献

3.1卫生部疾病预防控制局、中国疾病预防控制中心《痰涂片镜检标准化

操作及质量保证手册》200902第一版