提取分离鉴定方法

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提取分离鉴定方法

一、提取方法
溶剂法水蒸气蒸馏法升华法Fra bibliotek提取前药材的处理： 1．新鲜药材:应在采集后数小时内投入乙醇中。否则，迅速干燥（低温、通风），防止霉变、酶解。 2．干燥药料:须经适当粉碎,。 3．在进行提取之前,应对所用材料的基源、产地、药用部位、采集时间与方法等进行考查。确定药材来源的真实性，每次实验之前要将原料药材留样。
一般来说，具有很好溶解性能的溶剂，也往往是很好的夹带剂，例如，甲醇、乙醇、丙酮等。通常夹带剂的用量不超过15％。超临界流体萃取的主要设备是萃取器和分离器：
7.超声波提取法溶剂＋超声波用超声波作用于溶剂可产生空化现象（瞬间具有几千个大气压的压力，局部温度可达千度），使植物细胞壁及整个生物体瞬间破裂，溶剂能迅速渗透进去，溶解出化学成分，因而成为一种快速、高效、节能的新型提取方法。目前，在实验室中有逐渐取代传统提取方法的趋势。
超临界流体萃取法的应用 20世纪50年代起进入实验阶段；如从石油中脱沥青等。 70年代以来，大量专利涌现；咖啡豆中脱咖啡因、烟草中脱尼古丁等。 70年代末，食品工业中的应用日益广泛：从啤酒花中提取酒花精已形成了生产规模。 80年代以来，广泛地用于香精和香辛料成分的提取。从菊花、梅花、栀子花、米兰花、玫瑰花中提取天然花香剂；从胡椒、肉桂、芫荽、月桂、薄荷等中提取香辛料，对绿茶和红茶进行全成分提取等
3、注意事项
1.药材的粉碎度粉碎是为了增大与溶剂的接触面积，提高提取效率。但具体提取时粉碎的程度要根据药材质地、提取方法及提取溶剂来决定。质地坚硬的药材应粉碎较细，而质地轻薄的药材可用粗粉或不用粉碎。含大量黏液质的药材如果粉碎过细，则提出的杂质量增加。以水为溶剂进行提取时药材易膨胀，可用粗粉；以乙醇为溶剂可粉碎较细。用渗漉法提取时，药粉不可过细，否则，会导致渗漉困难。

生物碱提取分离鉴定

◆将混合生物碱溶于有机溶剂中，以酸液pH由大→小顺次萃取，可依次萃取出( )。
√A.碱性由强→弱的生物碱
B.碱性由弱→强的生物碱 C.极性由弱→强的生物碱 D.极性由强→弱的生物碱
一、选择判断题
◆用Hofmann降解反应鉴别生物碱基本母核时，要求结构中( )。
A.α位有氢 C.α、β位均有氢
√B.β位有氢
本章内容
四、提取分离
（一）提取 1.酸水提取法（离子交换树脂法、沉淀法） 2.醇类溶剂提取法 3.亲脂性有机溶剂提取法
四、提取分离（一）提取 1.酸水提取法：冷提法（渗漉法、冷浸法）酸性水——0.1% ~ 1%H2SO4、HCl、HOAc等
生药
H+/H2O
药渣弱碱及杂质
H+/H2O
OH-
H
表别育亨烷 3β-H， 20-αH
正、别育亨烷有Bohlmann吸收峰
六、生物碱的结构鉴定
3. MS 法此法在生物碱结构测定中多有应用。
(1) 母核稳定或由于取代基或边链裂解产生特征离子。
① 主体或整体由芳香结构组成，如：4－喹酮、吖啶酮、喹啉去氢阿朴菲等类：
OR
N
O
H
[ M - R]+
六、生物碱的结构鉴定
沉淀硫酸钡沉淀
滤液季铵碱的盐酸盐
四、提取分离（一）提取
2.醇类溶剂提取法
生药
醇或酸性醇
醇液
挥醇；加酸水
药渣
沉淀碱性较弱的碱
OH-/H2O 亲水性Alk
H+ / H2O
OH-/H2O CHCl3
CHCl3 Alk
四、提取分离（一）提取 3.亲脂性有机溶剂提取法

天然药物化学 _提取分离鉴定的方法和技术

快
更快
晶体小宜吸附杂质
注意点：水为溶剂易变质，必要时加防腐剂。
渗漉法
动态浸提法粉碎
浸润装筒
排气
浸渍
渗漉
提取范围：有效成分对热不稳定且易分解的成分如甘草，稀氨水渗漉液，提取甘草酸铵盐。优点：由于有较大的浓度差，提取效率较高。缺点：溶剂用量大，且耗时多。
煎煮法
溶剂：水
提取范围：对含挥发油及遇热不稳定的的成分不适合使用；含多糖类，因煎提液粘稠，难以过滤，不常用。如：甘草煎煮，甘草酸单钾盐。优点：操作简便易行，提取效率比冷浸高缺点：水溶性杂质较多，水提液易发霉变质。
• 最粗粉，指能全部通过一号筛，但混有能通过三号筛不超过20%的粉末。 • 粗粉，指能全部通过二号筛，但混有能通过四号筛不超过 40% • 中粉，指能全部通过四号筛，但混有能通过五号筛不超过 60% • 细粉，指能全部通过五号筛，并含能通过六号筛不少于 95% • 最细粉，指能全部通过六号筛，并含能通过七号筛不少于 95% • 极细粉，指能全部通过八号筛，并含能通过九号筛不少于 • 95% • 的粉末。
使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。
分配：成分以不同程度溶解于两相溶剂中的过程。分配系数K=Cu/CL：当分配达到动态平衡时，成分在两相溶剂中的浓度比。
• A、B两种物质用三氯甲烷及水萃取， Ka=10，Kb=0.1， • 一次萃取后 • 90%的A在水中 • 90%的B在三氯甲烷中
• 铅盐法曾被应用于分离具有酸性和中性的成分，目前已较少用。 • 在中性醋酸铅沉淀部分可得到含羧基及邻二酚羟基的成分，如有机酸、粘液质、鞣质、某些黄酮等。碱式醋酸铅沉淀部分得到只有一个酚羟基的成分以及中性皂苷等。经碱或醋酸铅沉淀后的水或醇液中有中性成分。因铅对人有害，生产中最好不用此法。

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤芦丁是一种常见的中药化合物，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理活性。

其提取分离与鉴定是中药研究和应用的重要环节之一、下面将介绍芦丁的提取分离与鉴定的实验步骤。

一、实验材料和仪器设备准备：1.实验材料：苦橙干燥植物材料、无水乙醇、石油醚、正己烷、醋酸乙酯、以及色谱柱填料等。

2.仪器设备：真空泵、旋转蒸发器、离心机、高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计等。

二、芦丁的提取：1.将苦橙植物材料粉碎成粉末，并称取适量的粉末样品。

2.将粉末样品加入具有提取性质的溶剂中（如乙醇），在室温下进行搅拌提取一定时间。

3.使用滤纸或过滤杯过滤掉植物残渣，得到提取液。

4.通过旋转蒸发器将提取液中的溶剂蒸发掉，得到精制的芦丁提取物。

三、芦丁的分离与纯化：1.将精制的芦丁提取物溶解在适量的溶剂中，制备样品溶液。

2.使用色谱柱装填适合的色谱填料（如硅胶），并将样品溶液注入柱上。

3.使用不同极性溶剂按梯度洗脱柱上的化合物。

4.通过比色法或紫外可见分光光度计测定洗脱液中芦丁的吸收强度，并收集含有目标化合物的部分。

5.通过旋转蒸发器将洗脱液中的溶剂蒸发掉，得到芦丁的分离纯化产物。

四、芦丁的鉴定：1.使用高效液相色谱仪对分离纯化产物进行分析。

2.调节适宜的流动相，并设定合适的检测波长和流速。

3.使用芦丁的标准品制备不同浓度的标准曲线，用于定量分析。

4.将分离纯化产物溶解在流动相中，进行色谱分析并记录色谱图。

5.通过比较分离纯化产物的保留时间和峰面积与标准曲线的关系，定量分析样品中芦丁的含量。

通过以上的步骤，可以完成芦丁的提取分离与鉴定工作。

实验过程中要注意实验条件的控制，如提取溶剂的选择、色谱柱填料的选择和流动相的调节等。

同时，还应注意实验操作的规范和安全，确保实验的准确性和可重复性。

芦丁的提取分离和鉴定11页

芦丁的提取分离和鉴定11页芦丁（rutin）是黄酮类化合物，具有多重药理活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖、抗过敏等。

由于其广泛应用，芦丁的提取分离及鉴定备受关注。

本篇文章主要介绍芦丁的提取分离及鉴定过程。

一、芦丁的提取分离1.提取方法芦丁的提取方法有多种，如超声波提取法、微波提取法、加热提取法、水提法、醇提法等。

其中最常用的是醇提法和水提法。

醇提法：将干燥的植物材料粉碎，加入适量的醇类溶剂（如95%乙醇），浸泡24小时，滤除渣物，将滤液浓缩至一定浓度，再用二甲苯提取，蒸干得到芦丁。

水提法：将干燥的植物材料粉碎，加水浸泡，加热水浴提取，滤去渣物，用非极性溶剂提取，蒸干得到芦丁。

2.分离方法芦丁的分离方法主要有两种，分别是硅胶柱层析和高效液相色谱。

硅胶柱层析：将提取得到的芦丁溶液加入硅胶柱中，用适当的溶剂进行洗脱，收集芦丁纯品。

高效液相色谱：高效液相色谱（HPLC）是目前广泛使用的分离技术。

该法可实现高效、快速、自动化的芦丁纯化，且纯品质量较好，长期保存无损失。

二、芦丁的鉴定1.质谱鉴定质谱鉴定是一种快速、简便、高效的无损鉴定方法。

目前常见的质谱方法有质谱联用技术和飞行时间质谱法。

质谱联用技术：质谱联用技术包括气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）等。

通过对芦丁的母离子或其碎片离子进行分析，可以确定芦丁的分子量、结构和定量信息。

飞行时间质谱法：飞行时间质谱法（TOF-MS）是一种高分辨率质谱分析技术，可以准确测定芦丁的分子量。

2.红外光谱鉴定红外光谱鉴定是一种无损鉴定方法，可以检测芦丁的特征吸收峰。

通过与标准参照物比较，可以确定芦丁的物质性质。

3.紫外光谱鉴定紫外光谱鉴定是一种常用的鉴定方法，可以分析芦丁的吸收光谱和波长。

通过与标准参照物比较，可以确定芦丁的含量。

4.核磁共振鉴定核磁共振鉴定可以测定芦丁的分子结构、质量以及定量信息。

该方法通常采用氢核磁共振（1H-NMR）和碳核磁共振（13C-NMR）。

提取分离与鉴定的方法与技术

水溶液（HA1、HA2、B）调 pH3，有机溶剂萃取
水层（BH+）调 pH10，有机溶剂萃取
有机层（HA1、HA2）调 pH9，缓冲溶液萃取
水层
有机层（B）
水层
pH ≥12 B A≤3 BH+ HA
水层（A1-）
有机层（HA2）
调 pH3，有机溶剂萃取调 pH13，
缓冲溶液萃取
有机层
（HA1）水层（A2-）有机层调 pH6，有机溶剂萃取
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• 适用范围：皂苷类化学成分的分离。 • 特点：使用溶剂较少，可定量回收试样，分离
效果比CCD法好。 • 提示：广泛用于分离纯化多种天然药物化学成
分，如：皂苷、生物碱、蛋白质、多肽、酸性成分及糖类等。分离效果好！
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复习思考题
1.两相溶剂萃取法的原理是什么？什么是分配系数？ 2.分次萃取如产生乳化，应如何“破乳”？
• ⑥中量萃取可使用下口瓶，工业生产上大量萃取可在密闭的萃取罐内进行。
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• (2) 逆流连续萃取法
• 逆流连续萃取法是一种连续的两相溶剂萃取法。是利用两相溶剂密度不同，即相对密度小的作为分散相（流动相）逆流连续穿过相对密度大的固定相，在相对运动中,使提取液中的不同成分因分配系数差异分溶于两相溶剂中而达到分离。
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The End
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• 提示：混合物各成分的分配系数很接近时，一般方法不易分离时可用此法。但操作繁琐，消耗溶剂多，含量微小的成分易损失于大体积的溶液中，易乳化等，极性过大或过小的成分，或分配系数受温度或浓度影响过大及易乳化的溶剂系统均不宜采用此法。

中药化学成分提取分离和鉴定的方法

中药化学成分提取、分离和鉴定的方法一溶剂提取法：1．溶剂提取法的原理：溶剂提取法是根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性质,选用对活性成分溶解度大,对不需要溶出成分溶解度小的溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法;当溶剂加到中草药原料需适当粉碎中时,溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内,溶解了可溶性物质,而造成细胞内外的浓度差,于是细胞内的浓溶液不断向外扩散,溶剂又不断进入药材组织细胞中,如此多次往返,直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时,将此饱和溶液滤出,继续多次加入新溶剂,就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出;中草药成分在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关;溶剂可分为水、亲本性有机溶剂及亲脂性有机溶剂,被溶解物质也有亲水性及亲脂性的不同;有机化合物分子结构中亲水性基团多,其极性大而疏于油；有的亲水性基团少,其;极性小而疏于水;这种亲水性、亲脂性及其程度的大小,是和化合物的分子结构直接相关;一般来说,两种基本母核相同的成分,其分子中功能基的极性越大,或极性功能基数量越多,则整个分子的极性大,亲水性强,而亲脂性就越弱,其分子非极性部分越大,或碳键越长,则极性小,亲脂性强,而亲水性就越弱;各类溶剂的性质,同样也与其分子结构有关;例如甲醇、乙醇是亲水性比较强的溶剂,它们的分子比较小,有羟基存在,与水的结构很近似,所以能够和水任意混合;丁醇和戊醇分子中虽都有羟基,保持和水有相似处,但分子逐渐地加大,与水性质也就逐渐疏远;所以它们能彼此部分互溶,在它们互溶达到饱和状态之后,丁醇或戊醇都能与水分层;氯仿、苯和石油醚是烃类或氯烃衍生物,分子中没有氧,属于亲脂性强的溶剂;这样,我们就可以通过时中草药成分结构分析,去估计它们的此类性质和选用的溶剂;例如葡萄糖、蔗糖等分子比较小的多羟基化合物,具有强亲水性,极易溶于水,就是在亲水性比较强的乙醇中也难于溶解;淀粉虽然羟基数目多,但分子大大,所以难溶解于水;蛋白质和氨基酸都是酸碱两性化合物,有一定程度的极性,所以能溶于水,不溶于或难溶子有机溶剂;甙类都比其甙元的亲水性强,特别是皂甙由于它们的分子中往往结合有多数糖分子,羟基数目多,能表现出较强的亲水性,而皂甙元则属于亲脂性强的化合物;多数游离的生物碱是亲脂性化合物,与酸结合成盐后,能够离子化,加强了极性,就变为亲水的注质,这些生物碱可称为半极性化合物;所以,生物碱的盐类易溶于水,不溶或难溶于有机溶剂；而多数游离的生物碱不溶或难溶于水,易溶于亲脂性溶剂,一般以在氯仿中溶解度最大;鞣质是多羟基的化台物,为亲水性的物质;油脂、挥发油、蜡、脂溶性色素都是强亲脂性的成分;总的说来,只要中草药成分的亲水性和亲脂性与溶剂的此项性质相当,就会在其中有较大的溶解度,即所谓“相似相溶”的规律;这是选择适当溶剂自中草药中提取所需要成分的依据之一;2．溶剂的选择：运用溶剂提取法的关键,是选择适当的溶剂;溶剂选择适当,就可以比较顺利地将需要的成分提取出来;选择溶剂要注意以下三点：①溶剂对有效成分溶解度大,对杂质溶解度小；②溶剂不能与中药的成分起化学变化；③溶剂要经济、易得、使用安全等;常见的提取溶剂可分为以下三类：1水：水是一种强的极性溶剂;中草药中亲水性的成分,如无机盐、糖类、分子不太大的多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐及甙类等都能被水溶出;为了增加某些成分的溶解度,也常采用酸水及碱水作为提取溶剂;酸水提取,可使生物碱与酸生成盐类而溶出,碱水提取可使有机酸、黄酮、蒽醌、内酯、香豆素以及酚类成分溶出;但用水提取易酶解甙类成分,且易霉坏变质;某些含果胶、粘液质类成分的中草药,其水提取液常常很难过滤;沸水提取时,中草药中的淀粉可被糊化,而增加过滤的困难;故含淀粉量多的中草药,不宜磨成细粉后加水煎煮;中药传统用的汤剂,多用中药饮片直火煎煮,加温可以增大中药成分的溶解度外,还可能有与其他成分产生“助溶”现象,增加了一些水中溶解度小的、亲脂性强的成分的溶解度;但多数亲脂性成分在沸水中的溶解度是不大的,既使有助溶现象存在,也不容易提取完全;如果应用大量水煎煮,就会增加蒸发浓缩时的困难,且会溶出大量杂质,给进一步分离提纯带来麻烦;中草药水提取液中含有皂甙及粘液质类成分,在减压浓缩时,还会产生大量泡沫,造成浓缩的困难;通常可在蒸馏器上装置一个汽一液分离防溅球加以克服,工业上则常用薄膜浓缩装置;2亲水性的有机溶剂：也就是一般所说的与水能混溶的有机溶剂,如乙醇酒精、甲醇木精、丙酮等,以乙醇最常用;乙醇的溶解性能比较好,对中草药细胞的穿透能力较强;亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外,大多能在乙醇中溶解;难溶于水的亲脂性成分,在乙醇中的溶解度也较大;还可以根据被提取物质的性质,采用不同浓度的乙醇进行提取;用乙醇提取比用水量较少,提取时间短,溶解出的水溶性杂质也少;乙醇为有机溶剂,虽易燃,但毒性小,价格便宜,来源方便,有一定设备即可回收反复使用,而且乙醇的提取液不易发霉变质;由于这些原因,用乙醇提取的方法是历来最常用的方法之一;甲醇的性质和乙醇相似,沸点较低64℃,但有毒性,使用时应注意;3亲脂性的有机溶剂：也就是一般所说的与水不能混溶的有机溶剂,如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等;这些溶剂的选择性能强,不能或不容易提出亲水性杂质;但这类溶剂挥发性大,多易燃氯仿除外,一般有毒,价格较贵,设备要求较高,且它们透入植物组织的能力较弱,往往需要长时间反复提取才能提取完全;如果药材中含有较多的水分,用这类溶剂就很难浸出其有效成分,因此,大量提取中草药原料时,直接应用这类溶剂有一定的局限性;3．提取方法：用溶剂提取中草药成分,、常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等;同时,原料的粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响提取效率,必须加以考虑;1浸渍法：浸渍法系将中草药粉末或碎块装人适当的容器中,加入适宜的溶剂如乙醇、稀醇或水,浸渍药材以溶出其中成分的方法;本法比较简单易行,但浸出率较差,且如用水为溶剂,其提取液易于发霉变质须注意加入适当的防腐剂;2渗漉法：渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中,不断添加新溶剂,使其渗透过药材,自上而下从渗漉器下部流出浸出液的一种浸出方法小当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下移动时,上层的溶液或稀浸液便置换其位置,造成良好的浓度差,使扩散能较好地进行,故浸出效果优于浸渍法;但应控制流速,在渗渡过程中随时自药面上补充新溶剂,使药材中有效成分充分浸出为止;或当渗滴液颜色极浅或渗涌液的体积相当于：原药材重的10倍时,便可认为基本上已提取完全;在大量生产中常将收集的稀渗淮液作为另一批新原料的溶剂之用;3煎煮法：煎煮法是我国最早使用的传统的浸出方法;所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿,不宜用铁锅,以免药液变色;直火加热时最好时常搅拌,以免局部药材受热太高,容易焦糊;有蒸汽加热设备的药厂,多采用大反应锅、大铜锅、大木桶,或水泥砌的池子中通入蒸汽加热;还可将数个煎煮器通过管道互相连接,进行连续煎浸;4回流提取法：应用有机溶剂加热提取,需采用回流加热装置,以免溶剂挥发损失;小量操作时,可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器;瓶内装药材约为容量的％～％,溶剂浸过药材表面约1～2cm;在水浴中加热回流,一般保持沸腾约：小时小放冷过滤,再在药渣中加溶剂,作第二、三次加热回流分别约半小时,或至基本提尽有效成分为止;此法提取效率较冷浸法高,大量生产中多采用连续提取法;5动连续提取法：应用挥发性有机溶剂提取中草药有效成分,不论小型实验或大型生产,均以连续提取法为好,而且需用溶剂量较少,提取成分也较完全;实验室常用脂肪提取器或称索氏提取器;连续提取法,一般需数小时才能提取完全;提取成分受热时间较长,遇热不稳定易变化的成分不宜采用此法;二水蒸气蒸馏法：;水蒸气蒸馏法,适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏的中草药成分的提取;此类成分的沸点多在100℃以上,与水不相混溶或仅微溶,且在约100℃时存一定的蒸气压;当与水在一起加热时,其蒸气压和水的蒸气压总和为一个大气压时,液体就开始沸腾,水蒸气将挥发性物质一并带出;例如中草药中的挥发油,某些小分子生物碱一麻黄碱、萧碱、槟榔碱,以及某些小分子的酚性物质;牡丹酚paeonol等,都可应用本法提取;有些挥发性成分在水中的溶解度稍大些,常将蒸馏液重新蒸馏,在最先蒸馏出的部分,分出挥发油层,或在蒸馏液水层经盐析法并用低沸点溶剂将成分提取出来;例如玫瑰油、原白头翁素protoanemonin等的制备多采用此法;三升华法：固体物质受热直接气化,遇冷后又凝固为固体化合物,称为升华;中草药中有一些成分具有升华的性质,故可利用升华法直接自中草药中提取出来;例如樟木中升华的樟脑camphor,在本草纲目中已有详细的记载,为世界上最早应用升华法制取药材有效成分的记述;茶叶中的咖啡碱在178℃以上就能升华而不被分解;游离羟基蒽醌类成分,一些香豆素类,有机酸类成分,有些也具有升华的性质;例如七叶内酯及苯甲酸等;升华法虽然简单易行,但中草药炭化后,往往产生挥发性的焦油状物,粘附在升华物上,不易精制除去,其次,升华不完全,产率低,有时还伴随有分解现象;分离和纯化：上述提取法所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物,需进一步除去杂质,分离并进行精制;具体的方法随各中草药的性质不同而异,以后将通过实例加以叙述,此处只作一般原则性的讨论;一溶剂分离法：一般是将上述总提取物,选用三、四种不同极性的溶剂,由低极性到高极性分步进行提取分离;水浸膏或乙醇浸膏常常为胶伏物,难以均匀分散在低极性溶剂中,故不能提取完全,可拌人适量惰性填充剂,如硅藻土或纤维粉等,然后低温或自然干燥,粉碎后,再以选用溶剂依次提取,使总提取物中各组成成分,依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离;例如粉防己乙醇浸膏,碱化后可利用乙醚溶出脂溶性生物碱,再以冷苯处理溶出粉防己碱,与其结构类似的防己诺林碱比前者少一甲基而有一酚羟基,不溶于冷苯而得以分离;利用中草药化学成分,在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化,是最常用的方法;广而言之,自中草药提取溶液中加入另一种溶剂,析出其中某种或某些成分,或析出其杂质,也是一种溶剂分离的方法;中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化淀粉等,可以加入一定量的乙醇,使这些不溶于乙醇的成分自溶液中沉淀析出,而达到与其它成分分离的目的;例如自中草药提取液中除去这些杂质,或自白及水提取液中获得白及胶,可采用加乙醇沉淀法；自新鲜括楼根汁中制取天花粉素,可滴人丙酮使分次沉淀析出;目前,提取多糖及多肽类化合物,多采用水溶解、浓缩、加乙醇或丙酮析出的办法;此外,也可利用其某些成分能在酸或碱中溶解,又在加碱或加酸变更溶液的pH后,成不溶物而析出以达到分离;例如内酯类化合物不溶于水,但遇碱开环生成羧酸盐溶于水,再加酸酸化,又重新形成内酯环从溶液中析出,从而与其它杂质分离；生物碱一般不溶于水,遇酸生成生物碱盐而溶于水,再加碱碱化,又重新生成游离生物碱;这些化合物可以利用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取分离;一般中草药总提取物用酸水、碱水先后处理,可以分为三部分：溶于酸水的为碱性成分如生物碱,溶于碱水的为酸性成分如有机酸,酸、碱均不溶的为中性成分如甾醇;还可利用不同酸、碱度进一步分离,如酸性化台物可以分为强酸性、弱酸性和酷热酚性三种,它们分别溶于碳酸氢钠、碳酸钠和氢氧化钠,借此可进行分离;有些总生物碱,如长春花生物碱、石蒜生物碱,可利用不同rH值进行分离;但有些特殊情况,如酚性生物碱紫董定碱corydine在氢氧化钠溶液中仍能为乙醚抽出,蝙蝠葛碱dauricins在乙醚溶液中能为氢氧化钠溶液抽出,而溶于氯仿溶液中则不能被氢氧化钠溶液抽出；有些生物碱的盐类,如四氢掌叶防己碱盐酸盐在水溶液中仍能为氯仿抽出;这些性质均有助于各化合物的分离纯化;二两相溶剂萃取法：1．萃取法：两相溶剂提取又简称萃取法,是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法;萃取时如果各成分两相溶剂中分配系数相差越大,则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质,一般多用亲脂性有机溶剂,如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取,如果有效成分是偏于亲水性的物质,在亲脂性溶剂中难溶解,就需要改用弱亲脂性的溶剂,例如乙酸乙酯、丁醇等;还可以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增大其亲水性;提取黄酮类成分时,多用乙酸乙脂和水的两相萃取;提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取;不过,一般有机溶剂亲水性越大,与水作两相萃取的效果就越不好,因为能使较多的亲水性杂质伴随而出,对有效成分进一步精制影响很大;两相溶剂萃取在操作中还要注意以下几点：1先用小试管猛烈振摇约1分钟,观察萃取后二液层分层现象;如果容易产生乳化,大量提取时要避免猛烈振摇,可延长萃取时间;如碰到乳化现象,可将乳化层分出,再用新溶剂萃取；或将乳化层抽滤,或将乳化层稍稍加热；或较长时间放置并不时旋转,令其自然分层;乳化现象较严重时,可以采用二相溶剂逆流连续萃取装置;2 水提取液的浓度最好在比重1．1～1．2之间,过稀则溶剂用量太大,影响操作;3 溶剂与水溶液应保持一定量的比例,第一次提取时,溶剂要多一些,一般为水提取液的1/3,以后的用量可以少一些,一般1/4-1/6;4一般萃取3～4次即可;但亲水性较大的成分不易转入有机溶剂层时,须增加萃取次数,或改变萃取溶剂;萃取法所用设备,如为小量萃取,可在分液漏斗中进行；如系中量萃取,可在较大的适当的下口瓶中进行;在工业生产中大量萃取,多在密闭萃取罐内进行,用搅拌机搅拌一定时间,使二液充分混合,再放置令其分层；有时将两相溶液喷雾混含,以增大萃取接触,提高萃取效率,也可采用二相溶剂逆流连续萃取装置;2．逆流连续萃取法：是一种连续的两相溶剂萃取法;其装置可具有一根、数根或更多的萃取管;管内用小瓷圈或小的不锈钢丝圈填充,以增加两相溶剂萃取时的接触面;例如用氯仿从川楝树皮的水浸液中萃取川楝素;将氯仿盛于萃取管内,而比重小于氯仿的水提取浓缩液贮于高位容器内,开启活塞,则水浸液在高位压力下流入萃取管,遇瓷圈撞击而分散成细粒,使与氯仿接触面增大,萃取就比较完全;如果一种中草药的水浸液需要用比水轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取,则需将水提浓缩液装在萃取管内,而苯、乙酸乙酯贮于高位容器内;萃取是否完全,可取样品用薄层层析、纸层析及显色反应或沉淀反应进行检查;3．逆流分配法CounterCurrentDistribution,CCD：逆流分配法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法;逆流分配法与两相溶剂逆流萃取法原理一致,但加样量一定,并不断在一定容量的两相溶剂中,经多次移位萃取分配而达到混合物的分离;本法所采用的逆流分布仪是由若干乃至数百只管子组成;若无此仪器,小量萃取时可用分液漏斗代替;预先选择对混合物分离效果较好,即分配系数差异大的两种不相混溶的溶剂;并参考分配层析的行为分析推断和选用溶剂系统,通过试验测知要经多少次的萃取移位而达到真正的分离;逆流分配法对于分离具有非常相似性质的混合物,往往可以取得良好的效果;但操作时间长,萃取管易因机械振荡而损坏,消耗溶剂亦多,应用上常受到一定限制;4．液滴逆流分配法：液滴逆流分配法又称液滴逆流层析法;为近年来在逆流分配法基础上改进的两相溶剂萃取法;;对溶剂系统的选择基本同逆流分配法,但要求能在短时间内分离成两相,并可生成有效的液滴;由于移动相形成液滴,在细的分配萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新的表面,促进溶质在两相溶剂中的分配,故其分离效果往往比逆流分配法好;且不会产生乳化现象,用氮气压驱动移动相,被分离物质不会因遇大气中氧气而氧化;本法必须选用能生成液滴的溶剂系统,且对高分子化合物的分离效果较差,处理样品量小1克以下,并要有一定设备;应用液滴逆流分配法曾有效地分离多种微量成分如柴胡皂甙原小檗碱型季铵碱等;液滴逆流分配法的装置,近年来虽不断在改进,但装置和操作较繁;目前,对适用于逆流分配法进行分离的成分,可采用两相溶剂逆流连续萃取装置或分配柱层析法进行;三沉淀法：是在中草药提取液中加入某些试剂使产生沉淀,去杂质的方法;1.铅盐沉淀法：铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经典方法之一;由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中,能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀,故可利用这种性质使有效成分与杂质分离;中性醋酸铅可与酸性物质或某些酚性物质结合成不溶性铅盐;因此,常用以沉淀有机酸、氨基酸、蛋白质、粘液质、鞣质、树脂、酸性皂甙、部分黄酮等;可与碱式醋酸铅产生不溶性铅盐或络合物的范围更广;通常将中草药的水或醇提取液先加入醋酸铅浓溶液,静置后滤出沉淀,并将沉淀洗液并入滤液,于滤液中加碱式醋酸铅饱和溶液至不发生沉淀为止,这样就可得到醋酸铅沉淀物、碱式醋酸铅沉淀物及母液三部分;然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中,通以硫化氢气体,使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀;含铅盐母液亦须先如法脱铅处理,再浓缩精制;硫化氢脱铅比较彻底,但溶液中可能存有多余的硫化氢,必须先通人空气或二氧化碳让气泡带出多余的硫化氢气体,以免在处理溶液时参与化学反应;新生态的硫化铅多为胶体沉淀,能吸咐药液中的有效成分,要注意用溶剂处理收回;脱铅方法,也可用硫酸、磷酸、硫酸钠、磷酸钠等除铅,但硫酸铅、磷酸铅在水中仍有一定的溶解度,除铅不彻底;用阳离子交换树脂脱铅快而彻底,但要注意药液中某些有效成分也可能被交换上去,同时脱铅树脂再生也较困难;还应注意脱铅后溶液酸度增加,有时需中和后再处理溶液,有时可用新制备的氢氧化铅、氢氧化铝、氢氧化铜或碳酸铅、明矾等代替醋酸铅、碱式醋酸铅;例如在黄芩水煎液中加入明矾溶液,黄芩甙就与铝盐络合生成难溶于水的络化物而与杂质分离,这种络化物经用水洗净就可直接供药用;2.试剂沉淀法：例如在生物碱盐的溶液中,加入某些生物碱沉淀试剂见生物碱性质下,则生物碱生成不溶性复盐而析出;水溶性生物碱难以用萃取法提取分出,常加入雷氏铵盐使生成生物碱雷氏盐沉淀析出;又如橙皮甙、芦丁、黄芩甙、甘草皂甙均易溶于碱性溶液,当加入酸后可使之沉淀析出;某些蛋白质溶液,可以变更溶液的pH值利用其在等电点时溶解度最小的性质而使之沉淀析出;此外,还可以用明胶、蛋白溶液沉淀鞣质；胆甾醇也常用以沉淀洋地黄皂甙等;可根据中草药有效成分和杂质的性质,适当选用;四盐析法：盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐至一定浓度,或达到饱和状态,可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出,而与水溶性大的杂质分离;常用作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等;例如三七的水提取液中加硫酸镁至饱和状态,三七皂甙乙即可沉淀析出,自黄藤中提取掌叶防己碱,自三颗针中提取小檗碱在生产上都是用氯化钠或硫酸按盐析制备;有些成分如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大,在提取时,亦往往先在水提取液中加入一定量的食盐,再用有机溶剂萃取;五透析法：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物质不能通过半透膜的性质,达到分离的方法;例如分离和纯化皂甙、蛋白质、多肽、多糖等物质时,可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质;反之也可将大分子的杂质留在半透膜内,而将小分子的物质通过半透膜进入膜外溶液中,而加以分离精制：透析是否成功与透析膜的规格关系极大;透析膜的膜孔有大有小,要根据欲分离成分的具体情况而选择;透析膜有动物性膜、火棉胶膜、羊皮纸膜硫酸纸膜、蛋白质胶膜、玻璃纸膜等;油常多用市售的玻璃纸或动物性半透膜扎成袋状,外面用尼龙网袋加以保护,小心加入欲透析的样品溶液,悬挂在清水容器中;经常更换清水使透析膜内外溶液的浓度差加大,必要时适当加热,并加以搅拌,以利透析速度加快;为了加快透析速度,还可应用电透析法,即在半在半透膜旁边纯溶剂两端放置二个电极,接通电路,则透析膜中的带有正电荷的成分如无机阳离子、生物碱等向阴极移动,而带负电共荷的成分如无机阴离子、有机酸等则向阳极移动,中性化合物及高分子化合物则留在透析膜中;透析是否完全,须取透析膜内溶液进行定性反应检查;一般透析膜可以自制：动物半透膜如猪、牛的膀胱膜、用水洗净,再以乙醚脱脂,,即可供用；羊皮纸膜可将滤纸浸入50％的硫酸15～60分钟,取出铺在板上,以水冲洗制得;其膜孔大小与硫酸浓度、浸泡时间以及用水冲洗速度有关；火棉胶膜系将火棉胶溶于乙醚及无水乙醇,涂在板上,干后放置水中即可供用,其膜孔大小与溶剂种类、溶剂挥发速度有关,溶剂中加入适量水可使膜孔增大,加入少量醋酸可使膜孔缩小；蛋白质胶明胶膜可用20％明胶涂于细布上,阴干后放水中,再加甲醛使膜凝固,冲洗干净即可供用;近来商品有透析膜管成品出售,国外习称“ViskingDialysisTubing”,有各种大小厚度规格,可供不同大小分子量的多糖、多肽透析时选用;六结晶、重结晶和分步结晶法：鉴定中草药化学成分,研究其化学结构,必须首先将中草药成分制备成单体纯品;在常温下,物质本身性质是液体的化台物,可分别用分馏法或层析法进行分离精制;一般他说,中草药化学成分在常温下多半是固体的物质,都具有结晶他的通性,可以根据溶解度的不同用结晶法来达到分离精制的目的;研究中草药化学成分时,一旦获得结晶,就能有效地进一步精制成为单体纯品;纯化台物的结晶有一定的熔点和结晶学的特征,有利于鉴定;如果鉴定的物质不是单体纯品,不但不能得出正确的结论,还会造成工作上的浪费;因此,求得结晶并制备成单体纯品,就成为鉴定中草药成分、研究其分子结构重要的一步;1．杂质的除去：中草药经过提取分离所得到的成分,大多仍然含有杂质,或者是混合成分;有时即使有少量或微量杂质存在,也能阻碍或延缓结晶的形成;所以在制备结晶时,必须注意杂质的干扰,应力求尽可能除去;有时可选用溶剂溶出杂质,或只溶出所需要的成分;有时可用少量活性炭等进行脱色处理,以除去有色杂质;有时可通过氧化铝,硅胶或硅藻土短柱处理后,再进行制备结晶;但应用吸附剂除去杂质时,要注意所需要的成分也可能被吸附而损失;此外,层析法更是分离制备单体纯品所常用的有效方法;如果一再处理仍未能使近于纯品的成分结晶化,则可先制备其晶态的衍生物,再回收原物,可望得到结晶;例如游离生物。

中药化学提取、分离与鉴定方法

中药化学提取、分离与鉴定方法上述提取法所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物，需进一步除去杂质，分离并进行精制。

具体的方法随各中草药的性质不同而异，以后将通过实例加以叙述，此处只作一般原则性的讨论。

(一)溶剂分离法:一般是将上述总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步进行提取分离。

水浸膏或乙醇浸膏常常为胶伏物，难以均匀分散在低极性溶剂中，故不能提取完全，可拌人适量惰性填充剂，如硅藻土或纤维粉等，然后低温或自然干燥，粉碎后，再以选用溶剂依次提取，使总提取物中各组成成分，依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。

例如粉防己乙醇浸膏，碱化后可利用乙醚溶出脂溶性生物碱，再以冷苯处理溶出粉防己碱，与其结构类似的防己诺林碱比前者少一甲基而有一酚羟基，不溶于冷苯而得以分离。

利用中草药化学成分，在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化，是最常用的方法。

广而言之，自中草药提取溶液中加入另溶剂，析出其中某种或某些成分，或析出其杂质，也是一种溶剂分离的方法。

中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化淀粉等，可以加入一定量的乙醇，使些不溶于乙醇的成分自溶液中沉淀析出，而达到与其它成分分离的目的。

例如自中草药提取液中除去这些杂质，或自白及水提取液中获得白及胶，可采用加乙醇沉淀法;自新鲜括楼根汁中制取天花粉素，可滴人丙酮使分次沉淀析出。

，提取多糖及多肽类化合物，多采用水溶解、浓缩、加乙醇或丙酮析出的办法。

此外，也可利用其某些成分能在酸或碱中溶解，又在加碱或加酸变溶液的pH后，成不溶物而析出以达到分离。

例如内酯类化合物不溶于水，但遇碱开环生成羧酸盐溶于水，再加酸酸化，又重新形成内酯环从溶液中析出，从而与其它杂质分离;生物碱一般不溶于水，遇酸生成生物碱盐而溶于水，再加碱碱化，又重新生成游离生物碱。

这些化合物可以利用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取分离。

一般中草药总提取物用酸水、碱水先后处理，可以三部分:溶于酸水的为碱性成分(如生物碱)，溶于碱水的为酸性成分(如有机酸)，酸、碱均不溶的为中性成分(如甾醇)。

银杏叶色素类化合物的提取分离及结构鉴定

银杏叶色素类化合物的提取分离及结构鉴定银杏叶是一种常见的中药材，具有多种药理活性成分，其中银杏叶色素类化合物是其重要成分之一。

本文将介绍银杏叶色素类化合物的提取分离及结构鉴定方法。

一、提取分离方法1.超声波辅助提取法将银杏叶粉末与乙醇混合，置于超声波水浴中进行提取。

超声波能够破坏细胞壁，促进药物成分的释放，提高提取效率。

2.微波辅助提取法将银杏叶粉末与水混合，置于微波炉中进行提取。

微波能够加速药物成分的扩散和渗透，提高提取效率。

3.超临界流体萃取法将银杏叶粉末与超临界二氧化碳混合，进行提取。

超临界流体具有高渗透性和高扩散性，能够快速提取药物成分。

二、结构鉴定方法1.紫外-可见吸收光谱法银杏叶色素类化合物具有明显的吸收峰，可通过紫外-可见吸收光谱法进行鉴定。

一般来说，银杏叶色素类化合物的吸收峰位于280-300nm 处。

2.红外光谱法银杏叶色素类化合物的分子结构中含有多种官能团，可通过红外光谱法进行鉴定。

一般来说，银杏叶色素类化合物的红外光谱图中会出现C-H伸缩振动、C=O伸缩振动、C-O伸缩振动等峰。

3.质谱法银杏叶色素类化合物的分子量较大，可通过质谱法进行鉴定。

一般来说，银杏叶色素类化合物的质谱图中会出现分子离子峰和碎片离子峰。

4.核磁共振法银杏叶色素类化合物的分子结构中含有多个原子核，可通过核磁共振法进行鉴定。

一般来说，银杏叶色素类化合物的核磁共振谱图中会出现多个峰，代表不同的原子核。

综上所述，银杏叶色素类化合物的提取分离及结构鉴定方法有多种，可根据实际需要选择合适的方法进行研究。

这些方法不仅适用于银杏叶色素类化合物的研究，也可用于其他中药材的研究。

中药化学成分提取分离和鉴定方法

中药化学成分提取分离和鉴定方法中药化学成分的提取、分离和鉴定是中药研究的重要环节，也是中药科学的核心内容之一、在中药研究中，通过提取分离和鉴定化学成分，可以探寻中药的药理作用、药效物质基础，以及优化中药制剂的配方和给药途径等。

下面介绍一些常用的中药化学成分提取、分离和鉴定方法。

提取方法：1.水提取法：将中药材样品浸泡在适量的水中，通过温度、时间等因素促进药物成分的溶解，然后蒸馏或浓缩得到提取物。

2.醇提取法：将中药材样品浸泡在适量的醇溶剂（如乙醇、甲醇等）中，利用醇的溶解性，提取药物成分。

3.超临界流体提取法：在高压、高温下将超临界流体（如二氧化碳）与中药材接触，强化了药物成分的溶剂力。

4.萃取法：使用有机溶剂与中药材进行萃取，如乙醚、丙酮等。

分离方法：1.薄层色谱法：将提取物吸附于薄层色谱板上，然后通过溶剂的上升作用，利用不同成分在色谱板上的迁移性差异，实现成分的分离。

2.柱层析法：将提取物通过柱层析填料（如硅胶、分子筛等）进行分离，根据成分在填料上的迁移速度差异，实现成分的分离。

3.高效液相色谱法：利用液相色谱仪分离和检测样品中的化合物，根据成分在固定相和流动相之间的相互作用不同来实现成分的分离。

4.气相色谱法：通过将样品挥发成气体，利用气相色谱仪对气体中的化合物进行分析和检测。

鉴定方法：1.紫外-可见光谱法：利用中药成分对紫外-可见光的吸收作用，通过测量药物溶液对特定波长光线的吸收强度，推断其中的成分。

2.红外光谱法：通过测量中药样品对红外光的吸收和透射来分析和鉴定中药成分。

3.质谱法：通过分析和测量中药样品中的质子或离子分子的质量-荷电比（m/z）比值，推断其中的成分。

4.核磁共振谱法：通过测量中药样品中核磁共振现象的有关参数（如化学位移、耦合常数等），来分析和鉴定中药成分。

综上所述，中药化学成分提取、分离和鉴定方法博大精深，研究人员可以选择合适的方法进行实验，并结合多种方法对中药样品进行综合分析，以揭示中药的化学成分和药理活性物质基础。

天然药物化学成分的提取、分离和鉴定

1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
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2. 根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离
(1) 分配比K
(2) 分离因子β
K= CU / CL
β =KA / KB （KA KB ）
上层
下层
β 100
1次萃取，基本分离
10β 100 1012次 β 2 β 1 100次以上无法分离
C．上样：
D．洗脱：
干法上样/湿法上样；
等度/梯度（洗脱剂极性递增）； Rf=0.2～0.3。
E．洗脱系统的选择： TLC
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（5）聚酰胺柱色谱
• 高分子聚合物
• 不溶于常见有机溶剂
聚酰胺性质
• 对碱稳定
• 对酸特别是无机酸稳定性差
可溶于浓盐酸、冰乙酸、甲酸中
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吸附原理
分子间氢键——半化学吸附
• 球形颗粒，不溶于水，可在水中溶胀； • 由两个部分组成： • 母核（苯乙烯通过二乙烯苯交联而成的大分子网状结构） • 离子交换基团
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3. 离子交换树脂的种类
• 阳离子交换树脂：强酸性（-SO3-H+）弱酸性（-COO-H+）
• 阴离子交换树脂：强碱性（-N+（CH3）3Cl-）弱碱性（-NH2，-NH-，-N=）
二、天然药物有效成分的分离与精制
分离依据：共存成分的性质差异
1. 溶解度差异
2. 分配比不同
3. 吸附性差异
4．分子大小差异
5．离解程度不同
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（1）吸附的类型
• 物理吸附：分子间力，无选择性，可逆。
如硅胶、氧化铝、活性炭

中药化学成分提取分离和鉴定的方法

中药化学成分提取分离和鉴定的方法一、提取方法中药的有效成分一般分布在天然产物中，通过提取可以将其集中起来，常用的提取方法有：1.水浸提取：将中药粉末与适量的水混合，使用热水或冷水浸泡一定时间后，过滤、浓缩，得到中药水提取液。

2.醇提取：将中药粉末与乙醇或其他有机溶剂混合，浸泡一段时间，过滤、浓缩，得到中药醇提取液。

3.超声波提取：通过超声波的机械作用，使溶剂渗入叶片和组织细胞中，加速物质的扩散和溶解，提高提取效率。

二、分离方法提取液中含有多种成分，需要进行分离，常用的分离方法有：1.疏水色谱法：利用不同成分在非极性固定相上的亲疏水性差异进行分离，如硅胶柱色谱、C18柱色谱等。

2.离子交换色谱法：利用各种带电的成分与离子交换树脂之间的相互作用进行分离，如阴离子交换色谱、阳离子交换色谱等。

3.层析法：利用固定相的颗粒特性进行分离，如薄层色谱、高效液相色谱等。

三、鉴定方法分离后的化合物需要进行鉴定，常用的鉴定方法有：1.紫外-可见吸收光谱：通过测量物质在紫外或可见光区域的吸收特性，判断物质的化学结构和含量。

2.红外光谱：利用物质对红外辐射的吸收和散射特性，推断化学结构。

3.质谱：通过分子的分解产物质谱图，确定分子的相对分子量、结构和化学式。

4.核磁共振波谱：通过核磁共振信号的强度、位置和形状，测定化合物的结构和相对分子量。

综上所述，中药化学成分的提取、分离和鉴定方法涵盖了水浸提取、醇提取、超声波提取、疏水色谱、离子交换色谱、层析法、紫外-可见吸收光谱、红外光谱、质谱和核磁共振波谱等一系列实验技术。

这些方法的选用需要根据具体的中药材和目标成分的特点来决定，以获得准确、可靠的结果。

同时，为了提高方法的效率和可重复性，对仪器设备和实验条件的选择与控制也是非常重要的。

天然药物化学成分提取分离鉴定方法

表1天然药物提取方法小结提取方法提取方法溶剂溶剂操作操作提取效提取效使用范围使用范围备注备注浸渍法浸渍法水或有机溶剂不加热效率低各类成分尤遇热不稳定成分水或有机溶剂不加热脂溶性成分消耗溶剂量大费时长煎煮法煎煮法水溶性成分易挥发热不稳定不宜用回流提取回流提取有机溶剂水浴加热脂溶性成分热不稳定不宜用溶剂量大连续回流连续回流提取法提取法有机溶剂水浴加热节省溶剂效率最高亲脂性较强成分用索氏提取器时间长水蒸气蒸水蒸气蒸挥发性成分与水不相混溶工艺简单但适用范围较窄升华法升华法升华性成分操作时间长物质易分解3334天然药物粗提液是多种物质的混合需要进行进一步的分离和精制
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二、两相溶剂萃取法﹡
原理：利用混合物中各成分在互不相溶的两相溶剂中分配系数的差异而达到分离的方法。
分配系数 K=CU/CL
CU、CL 分别为溶质在上相、下相的平衡浓度。 K相差越大,分离效率越高。
举例： A 、 B 两种溶质在 CHCl3/H2O 中进行分配，如 A 、 B 均为 1 克， KA=10 ， KB=0.1，两相溶剂体积比为VCHCl3/VH2O=1，在分液漏斗中作一次振摇分配平衡后， 90%以上的溶质A将分配在上相溶剂（水）中，不到10%的A分配到下相溶剂（氯仿）中。同样的道理，溶质B分配将与A相反。
优点：操作方便，简单易行。缺点：浸出效率较低，故对贵重、有效成分含量低、需制成高浓度制剂的药材的提取不宜采用；耗时长，溶剂用量大，水提液易发霉。
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2、渗漉法：
动态提取良好的浓度差
将药材粉末装在渗漉筒中，不断添加新溶剂，使其渗透过药材，自上而下从渗漉筒下部流出浸出液的一种浸出方法。
本法适用于有效成分遇热易破坏的药材及有效成分含量低的药材。

天然药物化学第二章提取分离鉴定

常用溶剂极性大小顺序：石油醚＜苯＜无水乙醚＜氯仿＜乙酸乙酯亲脂性有机溶剂＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水亲水性有机溶剂
溶剂的选择应综合考虑溶剂的极性、被提取成分及共存的其他成分的性质三方面的因素来决定，同时还应兼顾考虑溶剂是否使用安全、价廉易得、浓缩方便等特点。
提取方法
1、浸渍法
静态
一、溶剂提取法
最普遍的方法。
概念：根据天然药物中各化学成分的溶解性能，选用对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂，用适当的方法将有效成分尽可能完全地从药材组织中溶解出来。
基本原理:是在渗透、扩散作用下，溶剂渗透入药材组织细胞内部，溶解可溶性物质，形成细胞内外溶质的浓度差而产生渗透压，在渗透压的作用下，细胞外的溶剂不断进入药材组织中，溶解可溶性成分，细胞内的浓溶液不断向外扩散，如此反复，直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡。
缺点：受热时间长
取，充分将有效成分浸
出完全的一种方法。索氏提取器
6、超声提取法
是一种利用超声波浸提有效成分的方法。
优点：（1）提取时间短
（2）无需加热，适于提取对热不稳定成分。
适于各种溶剂。
（3）提取效率高缺点：设备问题有待解决
二、水蒸气蒸馏法
水蒸气蒸馏法系指将含有挥发性成分的药材与水共蒸馏，使挥发性成分随水蒸气一并馏出，经冷凝分取挥发性成分的提取方法。
2、三要素固定相：反相色谱常用C18、C8硅胶移动相：复合溶剂系统被分离物质 3、操作装柱上样洗脱
Ⅲ、离子交换柱色谱法

是利用离子交换树脂上的功能基在水溶液中能与溶液的其他离子进行可逆性交换的性质，以离子交换树脂为固定相，使混合成分中离子型与非离子型物质得到分离的方法。根据功能基性质的不同，树脂分为两大类：

中药化学成分提取分离与鉴定方法.

（2）提取温度：煮沸1小时左右，2-3次（3）优点：操作简单，提取效率高（4）提取时应避免使用铁器
4、回流提取法
（1）适用范围：有效成分对热稳定，易溶于低沸点有机溶剂的天然药材
（2）优点：提取效率高（3）缺点：溶剂消耗量大，对热不稳定的药
材不适用
5、连续回流提取法
（1）用少量溶剂进行连续循环回流提取，充分将有效成分浸出；
二、水蒸气蒸馏法
（1）基本原理：水和与水互不相溶的液体成分共存时，其总的蒸气压升高，但沸点降低（低于水的沸点），使有效成分在较低的温度下随水蒸气蒸馏出来；
（2）适用范围：具有挥发性，沸点高能随水蒸气馏出而不被破坏，不溶或难溶于水，与水不发生化学反应的天然药物化学成分。如挥发油、麻黄碱、丹皮酚等。
2、渗漉法（动态浸提方法）
（1）适用范围：遇热不稳定的成分或含大量多糖类药材的提取
（2）提取温度：常温（3）提取时间：较长（4）优点：保持较好的浓度差，提取效率高（5）缺点：操作不方便，提取溶剂用量大，
时间长。（6）连续渗漉装置
3、煎煮法
（1）适用范围：有效成分能溶于水且不易被水、热破坏的天然药材，不宜用于含挥发性成分、遇热不稳定及含多糖类的药材
2、基本原理（渗透扩散原理）
粉碎后的药材，加入适宜的溶剂 → 溶剂渗透、进入药材，溶解可溶性成分 → 药材细胞内外，可溶性成分形成浓度差，产生渗透压 → 扩散 → 再不断地渗透、扩散 → 最终达到动态平衡
3、影响因素
影响提取效率的因素：
（1）溶剂的选择：相似相溶的原理，根据溶剂
的极性，被提取成分及共存的其他成分的性质来决定，同时兼顾考虑溶剂是否使用安全、易得、价廉、浓缩方便等问题；

中药化学成分提取分离和鉴定方法

中药化学成分提取分离和鉴定方法一、中药提取方法中药提取方法是指将中药材中的有效成分溶解或萃取出来的过程。

常用的提取方法包括水浸提、乙醇提、超声波提、微波提等。

水浸提是指将中药材与适量的水浸泡，使其溶解于水中，随后经过过滤、浓缩得到提取物。

该方法适合提取水溶性物质，如多糖类、黄酮类等。

乙醇提是指将中药材用乙醇溶解，得到提取物。

乙醇提取适用于提取脂溶性物质，如挥发油、生物碱等。

超声波提是将中药材置于适量的溶剂中，通过超声辅助作用使溶剂中各种物质迅速溶解出来。

超声波可以提高提取速度和提取率，并且不会破坏有效成分的活性。

微波提是利用微波辐射对中药材进行加热，使其中的有效成分被溶解出来。

微波提取时间短、效果快，适用于提取热敏感物质。

二、中药分离方法中药分离方法是指将提取物中的复杂成分通过分离技术分离开来，以得到单一化合物或纯净化合物。

常用的分离方法包括薄层色谱法、柱层析法、液相色谱法等。

薄层色谱法是将提取物溶解于适当溶剂中，然后在薄层硅胶或薄层纸上进行分离。

通过溶剂在固定相上的上升方式，使待测物分离成若干斑点，并用目视或检出物征显色剂检测。

薄层色谱法操作简单、分离效果好，被广泛应用于中药成分分离。

柱层析法是将已提取物溶解于适当溶剂中，填充在柱子中，经由分配作用在固定相上发生分离，得到目标化合物。

柱层析法分为预柱和正柱两个步骤，预柱是为了除去杂质，正柱是为了分离纯化目标化合物。

液相色谱法是利用样品在固定相上的不同亲和性而进行分离的一种方法。

常用的液相色谱法有高效液相色谱法、气相色谱法等。

高效液相色谱法被广泛应用于中药成分分离，具有分离效果好、分离时间短等优点。

三、中药鉴定方法中药鉴定方法是通过对提取物或分离物进行各种实验手段，确认其化学性质、物理性质和结构特征。

常用的鉴定方法包括红外光谱法、核磁共振法、质谱法等。

红外光谱法可以检测样品中各种有机化合物的化学键和官能团。

通过比较待测物的红外光谱和参照物的红外光谱，可以确定待测物的结构特征和官能团。

提取分离鉴定方法