控制菌检查用培养基适用性验证方案

控制菌检查用培养基适用性验证方案

1．试验目的

控制菌检查用培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是为了确认麦康凯液体培养基、麦康凯琼脂培养基、RV沙门菌增菌液体培养基、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基、三糖铁琼脂培养基适合大肠埃希菌、沙门菌的控制菌检查。

2. 试验方法

照中国药典2015版四部非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法（通则1106）进行试验。

3.试验材料

3.1 培养基

3.2 菌种

3.3 仪器

XXXXX水平流净化工作台/生物安全柜、XXXXX立式压力蒸汽灭菌器、XXXXX电热恒温培养箱(30～35℃)、XXXXX生化培养箱（20～25℃）、XXXXX气浴恒温振荡器

3.4 稀释剂

0.9%无菌氯化钠溶液

4.试验过程

4.1菌液制备

用0.9%无菌氯化钠溶液制成每0.1ml含菌数为不大于100cfu的菌悬液，菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2〜8℃，可在24小时内使用。

4.2 适用性检查

4.2.1 麦康凯液体培养基适用性检查

取大肠埃希菌菌悬液各0.1 ml分别接种于被检培养基和对照培养基中，在35℃条

件下培养24h，进行促生长能力检查。

取金黄色葡萄球菌菌悬液各0.1 ml接种于被检培养基和对照培养基中，在35℃条

件下培养24h，进行抑制能力检查

4.2.2 麦康凯琼脂培养基适用性检查

取大肠埃希菌菌悬液各0.1 ml分别涂布被检培养基和对照培养基平板上，在35℃

条件下培养24h，进行促生长能力和指示特性检查

4.2.3 RV沙门菌增菌液体培养基适用性检查

取乙副伤寒沙门氏菌菌悬液各0.1 ml接种于被检培养基和对照培养基中，35℃条件下培养24h，进行促生长能力检查。

取金黄色葡萄球菌菌悬液各0.1 ml接种于被检培养基和对照培养基中，35℃条件

下培养24h，进行抑制能力检查。

4.2.4 木糖赖氨基酸脱氧胆酸盐琼脂培养基适用性检查

取乙副伤寒沙门氏菌菌悬液各0.1 ml分别涂布被检培养基和对照培养基平板上，在35℃条件下培养24h，，进行促生长能力和指示特性检查。

3.2.5三糖铁琼脂培养基适用性检查

取乙副伤寒沙门氏菌菌悬液各0.1 ml分别涂布被检培养基和对照培养基平板上，在35℃条件下培养24h，，进行指示能力检查。

3.2.6阴性对照

为确认试验条件符合要求，同时进行培养基阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。

5. 试验结果

被检培养基阴性对照结果：

表1麦康凯液体培养基适用性检查结果

表2麦康凯琼脂培养基适用性检查结果

表3 RV沙门菌增菌液体培养基适用性检查结果

表4木糖赖氨基酸脱氧胆酸盐琼脂培养基适用性检查结果

表5三糖铁琼脂培养基适用性检查结果

6．试验结论