real time PCR操作步骤

⏹本机的用户名为eppendorf，开机密码为“e”。

⏹使用前，先将仪器打开预热30min。

⏹长期不使用仪器，应定期将仪器开机运行一次。

1、打开仪器和电脑，等仪器指示灯变为绿色后，点击桌面图标“realplex”进入，输入密码“e”进入系统。

2、建立一个新的检测项目，新的检测项目可以通过点击file菜单下的new assay项建立。

3、染料的确定，参考染料的选择，样本体积输入，探针类型的确定

4、样品类型的定义

点击plate Layout中相应的位置，右击进入样品类型定义

按照自己的要求输入名称等。

如果重复检测的样品，继续点击“Auto Series…>”进行设置

5、pcr程序的建立

点击”PCR program”进入如下图示

按照自己的要求设置温度，循环数等，如需插入溶解曲线等，请右键点击”Insert Step”插入”Melting Curve”等。

6、设置完成后，点击图标栏中绿色三角形开始程序，并保存。