肉毒梭菌毒素中毒病

肉毒梭菌毒素中毒症

肉毒梭菌毒素中毒症简称肉毒中毒,是因吸收肉毒梭菌毒素而发生的一种人畜共患的中毒病。临床上以运动神经中枢麻痹和延脑麻痹为特征。本病世界各国都有发生,但不常见。1960年新疆曾发生马的肉毒梭菌中毒症,1987年春节新疆塔城发生一起人的肉毒梭菌中毒症。

（一）病原

肉毒梭状芽孢杆菌(Clostridium botulinum,简称肉毒梭菌)属于为专性厌氧菌梭状芽胞杆菌属，革兰氏阳性杆菌，有鞭毛、形成芽孢，芽胞比繁殖体宽，呈梭状。单个或成短链排列，运动性较强，顶端芽孢呈网球拍状。肉毒梭菌广泛分布于自然界中，主要存在于腐败变质的肉类、鱼类等饲料中，它在厌氧环境下可产生一种强力的外毒素——肉毒毒素(botulinum toxin，BTX)，可抑制呼吸导致死亡，这是迄今为止所知的最毒的自然生成的毒素之一。按其抗原的不同可将肉毒毒素分为7个血清型即A、B、C、D、E、F和G型, 其中C型还分为Cα和Cβ两个亚型。各型毒素均能引起人或动物的中毒, 而在食物性肉毒中毒中, 因A 型毒素强烈的亲神经性, 故引起的中毒更为严重，C 型肉毒梭引发动物、禽类肉毒中毒，极大的影响了动物性蛋白食料的加工和储藏及使用安全性

（二）免疫

所有温血动物和冷血动物对肉毒毒素均有易感性。家畜中以马类动物易感性高，猪易感性低，其它畜禽易感性介于其间。各型肉毒梭菌毒素均可致病，C型肉毒梭菌毒素为各种畜禽及动物肉毒毒素中毒症的主要病因。用各型毒素或类毒素免疫动物，只能获得中和相应型毒素的特异性抗毒素。在C型毒素中，Cα毒素只能被本亚型抗毒素中和，Cβ毒素则既能被C β抗毒素中和，也能被Cα抗毒素中和。各型或亚型菌虽产生其特异性毒素，但也存在交叉产生毒素的现象。如Cα亚型除产生Cα毒素外，还能产生少量Cβ毒素和D型毒素；D型菌也可产生少量Cα毒素；F型菌和E型菌也能相互产生少量对方的毒素成分。同型的抗毒素能很好地保护动物抵抗肉毒毒素中毒。肉毒毒素制备成类毒素，具有良好的免疫原性，接种动物可有效地预防本病的发生

（三）疫苗

目前在肉毒疫苗开发上已经有了很大的进展, 类毒素疫苗已经应用于临床, 基因工程疫苗和DNA疫苗在动物实验中也取得了一定的成果。

1.类毒素疫苗

类毒素疫苗是最早研究的疫苗, 国外已有一种五价类毒素疫苗( 由福尔马林灭活后的A、B、C、D、E 型毒素组成) 和一种针对BoNT/ F的单价类毒素疫苗。研究表明, 这种五价疫苗并不能激发机体的高效免疫应答。另外, 这种内毒素疫苗存在如下缺陷: ( 1) 需要频繁接种, 增加了疫苗使用的危险性; ( 2) 毒素纯化困难; ( 3) 制备过程直接接触毒素, 危险性高, 如灭活不够, 则危险性更高; ( 4) 肉毒梭菌产生的BoNT 量相当少, 不适宜大批量制备类毒素疫苗; ( 5) 接种后有一定的副作用, 如超敏反应等。因此, 开发新一代的基因工程疫苗已经成为主要的研究方向。

2.亚单位疫苗:

研究表明，PCR 扩增的Hc 段基因在大肠杆菌中的表达产物对小鼠具有免疫原性, 可作为一种良好的免疫原。Hc 片段也成为当前开发亚单位疫苗的重点。除了以Hc作为候选疫苗

外, 也有以完整的H 链作为候选疫苗的研究。C、D 型毒素的H 链可作为预防动物肉毒毒素中毒的疫苗。但由于肉毒毒素基因组中含有大量的罕见密码子, A、T 含量高, 在异源表达时表达量低, 在原核表达时最多能达到2~ 3 mg/ L, 在一定程度上限制了其发展。

3.短肽及表位疫苗:

表位疫苗是基于抗原表位开发的疫苗, 可通过一定的手段如酶解法、噬菌体显示肽库技术、洗脱法、合成重叠肽法、计算机技术等直接预测病原体基因组中可能的抗原表位, 然后对获得的候选表位肽以实验方法验证, 从而快速准确地鉴定出抗原表位。在疟疾、HIV 和肿瘤疫苗的研究中, 表位疫苗已经显示出了强大的优势

4.DNA 疫苗:

近年来, 肉毒毒素的DNA 疫苗研究也有不少报道。通过检测DNA疫苗及亚单位疫苗免疫后产生的抗体IgG 的亚型发现,DNA 疫苗可同时诱导Th1 和Th2 型免疫应答。因此认为, 与亚单位疫苗单独免疫相比, 采用DNA 疫苗与亚单位疫苗联合免疫, 可以大大提高特异性抗体水平, 为免疫接种提供了一种新方式。在DNA 疫苗的设计中, 选择合适的启动子至关重要。DNA 疫苗研究中存在的最大问题是如何评估其安全性。

11级药制1班

王晓曼

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