天然药物化学显色反应
最新天然药物化学鉴别反应总结
糖 邻二羟基--银镜反应、斐林反应、硼酸形成络合物糠醛衍生物+芳胺或酚类 缩合 显色 Molish反应：样品+浓硫酸+α萘酚-------棕色环（多糖、低聚糖、单糖、苷类均阳性）香豆素： 试剂：Gibb ——2,6-二氯(溴)苯醌氯亚胺Emerson ——氨基安替匹林和铁氰化钾条件：有游离酚羟基，且其对位无取代者——呈阳性异羟肟酸铁反应（识别内酯）醌类 颜色反应①Feigl 反应：醌类化合物在碱性加热条件下与醛类及临二硝基苯反应生成紫色化合物（反应前后醌类化合物无变化，只起到电子传作用）②Bornträger 反应：羟基蒽醌类遇碱显红-紫红色羟基醌类遇碱颜色加深，呈橙、红、紫红及蓝色蒽酚、蒽酮、二蒽酮需氧化成羟基蒽醌后才显色③无色亚甲蓝反应：苯醌及萘醌，用于PC,TLC 的喷雾剂，显蓝色斑点④与活性次甲基试剂的反应：苯醌及萘醌类：醌环上有未被取代的位置，可在氨碱性条件下与活性次甲基试剂（乙酰醋酸酯、丙二酸酯等）反应生成蓝绿或蓝紫色。
⑤与金属离子的络合反应：具有α-OH 或临二酚OH 的蒽醌，与Pb2+、Mg2+络合显色与醋酸镁络合具有一定的颜色-----鉴定黄酮类HCl-Mg 反应含黄酮（醇）、二氢黄酮（醇） （+）橙红色-紫红色查耳酮、橙酮、黄烷（醇）类 （-）不显色操作方法：1ml 样品 + Mg 粉 + 几滴浓HCl（花色素及部分橙酮、查耳酮在浓盐酸中会变色，故需做对照）香豆素Gibb Emerson 试剂与酚羟基对位活性氢缩合蓝色红色铝盐：1% AlCl3或Al （NO2）3 黄色定性、定量铅盐：1%醋酸铅或碱式醋酸铅黄~红色沉淀锆盐：2%ZrOCl2的甲醇溶液黄色游离的3，5-羟基锆-枸橼酸反应：黄绿色荧光镁盐：二氢黄酮（醇）类天蓝色5-酚羟基色泽更明显氯化锶：氨性甲醇溶液（具有邻二酚羟基）绿色~棕色~黑色沉淀三氯化铁：酚类显色剂三氯化铁-铁氰化钾碱性试剂显色反应：（碱：氨蒸汽可逆；碳酸钠水溶液不可逆）二氢黄酮类开环橙色~黄色黄酮醇类黄色~棕色（通入空气）其他黄酮无次反应含有邻二羟基或3,4’-二羟基取代的黄酮类不稳定易氧化黄色~深红色~绿棕色萜类不饱和萜类与亚硝酰氯反应;生成的氯化亚硝基衍生物多呈蓝色至绿色结晶挥发油功能团的鉴定：酚类：三氯化铁乙醇溶液——蓝色、蓝紫或绿色羰基化合物：硝酸银氨溶液——银镜反应——醛类挥发油的乙醇溶液+2,4-二硝基苯肼、氨基脲、羟胺等试剂——结晶性衍生物沉淀——醛或酮类不饱和化合物和薁类衍生物：挥发油的三氯甲烷+溴的三氯甲烷溶液——红色褪去——含有不饱和化合物，继续滴加，如果产生蓝、紫、绿——含有薁类化合物挥发油的无水甲醇溶液加浓硫酸——蓝色、紫色——含有薁类衍生物内酯类化合物：挥发油的吡啶溶液+亚硝酰氰化钠及氢氧化钠溶液——出现红色并逐渐消失——含有不饱和内酯类化合物三萜化合物（萜类）显色反应强心苷：1）甾体母核颜色反应与三萜类相同（但全饱和的甾体、C3无羟基的呈阴性）2）不饱和内酯环产生的反应：样品硼酸草酸枸橼酸黄色并有绿色荧光黄色，无荧光丙酮3) 2-去氧糖产生的反应：A Keller-Kilianli反应强心苷Fe3+-冰醋酸溶液要有游离2-去氧糖或能水解出2-去氧糖的强心苷才发生反应，醋酸层渐呈蓝色。
天然药物化学显色反应总结
醌类化同颜色反应鉴别特点及意义香豆素显色反应的鉴别特点和意义判断香豆素的C－6位是否有取代基的存在，可先水解，使其内酯环打开生成一个新的酚羟基，然后再用Gibbs或Emerson反应加以鉴别，如为阳性反应表示C-6位无取代。
木脂素没有特征性的理化检识方法，常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。
1．三氯化铁反应——检查酚羟基2．Labat反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色）3．Ecgrine反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）表6-3 黄酮类化合物的还原显色反应3-OH、5-OH的存在。
若有3-OH和（或）5-OH，加二氯氧锆显黄色。
若只有5-OH，加枸橼酸后黄色减褪，若有3-OH，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。
用于鉴别3-OH的存在。
二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构的化合物反应生成沉淀。
而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。
①二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构体查耳酮，显橙色至黄色。
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。
1）、甾体母核的显色反应图9-3 强心苷的显色反应2）、C-17位不饱和内酯环的颜色反应 甲型强心苷的特征反应，因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲基乙型强心苷为六元不饱和内酯环，故不能反应。
3）、α-去氧糖反应 作用于五元不饱和内酯环分离含有羰基的甾体皂苷元，常用季铵盐型氨基乙酰肼类试剂，如吉拉尔T（Girard T）或吉拉尔P（Girard P）两种试剂。
借此与不含羰基的皂苷元分离。
氨基酸的显色反应蛋白质的显色反应表10-3 生物碱沉淀反应类型及特点表3-2 苷的显色反应。
天然药物化学常用鉴别反应,试剂及现象
Molish反应--是糖和苷类的检识反应。
样品+浓硫酸+a萘酚=界面处紫色环。
碳苷和糖醛酸与Molish阴性。
Smith降解—检测糖的种类，连接方式，氧环大小·特点：反应条件温和、易得到原苷元适用：苷元不稳定的苷和碳苷，不适合苷元上有邻二醇羟基或易被氧化的基团的苷。
样品（含稀醇）+ NaIO4=糖开裂成醛+ NaBH4=伯醇，再调pH=2，放置。
Smith裂解获得连一个醛基的苷元异羟肟酸铁反应---鉴定内酯环的存在：碱性条件下，香豆素内酯开环，并与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸，再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。
酚羟基反应：具酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与三氯化铁试剂络合而产生不同的颜色。
酚羟基的对位未被取代，6-位上没有取代，内酯环碱化开环后，可与Gibb’s试剂、Emerson试剂反应。
Gibb’s反应：2,6-二氯(溴）苯醌氯亚胺试剂蓝色。
Emerson反应： 2%的4-氨基安替匹林和8%的铁氰化钾试剂红色。
.Feigl反应碱性加热与醛类及邻二硝基苯紫色化合物。
无色亚甲基蓝显色反应—苯醌及萘醌类的专用显色剂（蓝色斑点）与蒽醌区别。
Borntrāger`s反应，羟基醌碱性溶液颜色加深，多呈橙，红，紫红色，蓝色。
活性次甲基试剂的反应（K-C法）苯醌及萘醌类环上有未被取代的位置氨碱性 ==蓝绿色或蓝紫色。
与金属离子的反应（α-酚羟基、邻位二酚羟基；Pb2+,Mg2+）。
盐酸-镁(锌)粉反应黄酮(醇) 二氢(醇)红色至紫红色异黄酮、查尔酮无色四氢硼钠(钾)反应---二氢（醇）专属反应（红色、紫红色）锆盐-枸椽酸显色反应。
区别3，5-OH 3-OH+ZrOCl2黄色褪5-OH+ZrOCl2黄色不褪氯化锶(SrCl2)。
具邻二酚羟基生成绿-棕色、黑色沉淀Sabety反应：挥发油1 滴→1ml氯仿＋5%溴的氯仿溶液→产生蓝紫色或绿色与Ehrlich试剂(对-二甲胺基苯甲醛浓硫酸)反应产生紫色或红色浓硫酸-醋酐（L-B反应）：三萜-红甾体-绿三氯化锑反应：三萜显黄色、灰蓝、灰紫斑点，UV下蓝紫色荧光。
天然药物化学 显色反应整理
名称试剂条件阳性反应鉴别结构碘化铋钾KBiI4稀酸水溶液黄至橘红色沉淀生物碱碘化汞钾K2Hg4同上白色沉淀同上碘-碘化钾KI-I2同上红棕沉淀同上硅钨酸SiO.12WO3.nH2O同上淡黄或灰白同上磷钼酸H3PO4.12MO3.nH2O同上白色，黄褐沉淀同上苦味酸2,4,6-三硝基苯酚酸或中性黄色同上雷氏铵盐NH4[Cr（NH3）2(SCN)4]同上红色同上Molishα-萘酚-浓硫酸浓硫酸产生有色化合物糖硼酸（钼酸，碱土金属）络合邻二羟基Feigl醛类及邻二硝基苯碱，加热紫色化合物醌类无色亚甲蓝无色亚甲蓝蓝色苯醌，萘醌专用显色剂Bornträger碱单OH、非邻，橙-红；1,4，紫；邻二，蓝羟基蒽酮Kesting-Craven 活性次甲基（乙酰乙酸酯etc）碱性蓝绿色或蓝紫色苯醌，萘醌专用显色剂与金属离子乙酸镁蒽醌：1,4 紫；1，2蓝；其他 橙-红/二氢黄酮（醇），天蓝色荧光；黄酮（醇），异黄酮-（橙）黄，褐色蒽醌OH基取代/黄酮类区别对亚硝基二甲苯胺对亚硝基二甲苯胺紫绿蓝灰等蒽酮异羟月亏酸铁异羟月亏酸铁碱-酸红色内酯三氯化铁三氯化铁绿，墨绿沉淀。
蓝（黑）（沉淀）水鞣；绿→缩合酚羟基重氮化试剂红，紫红酚羟基（邻对位无取代）Gibb's反应2,6-二氯苯醌氯亚胺（gibb's试剂）碱蓝色酚羟对位无取代Emerson Emerson试剂（4氨基安替比林和铁氰化钾）红色酚羟对位无取代Labat反应浓硫酸-没食子酸蓝绿色亚甲二氧基盐酸-镁粉浓盐酸-镁粉橙红-紫红（少数蓝）NaBH4NaBH4,1min，浓酸紫，紫红二氢黄酮三氯化铝三氯化铝颜色加深（紫外天蓝荧光）酚羟基锆盐-枸橼酸ZrOCl2-枸橼酸3OH,5OH鲜绿色，加枸橼酸5OH 褪色3/5OH氨性氯化锶SrCl2，氨气绿色-棕色-黑色沉淀邻二酚羟基乙酸铅（碱性-酚类都可）乙酸铅黄-红色沉淀邻二、3/5羟基碱性黄酮→橙；查耳酮、橙酮、二氢△→（紫）红；黄酮醇空气→棕色；邻三酚→暗绿纤维沉淀与蛋白质蛋白质沉淀鞣质与重金属盐醋酸铅等NaOH溶液沉淀鞣质与生物碱生物碱同上同上与三氯化铁三氯化铁参照18与铁氰化钾氨溶液铁氰化钾氨溶液深红转棕双键加成HX,Br2，亚硝酰氯（Tilden试剂）结晶（溴红色退去），紫蓝绿含薁类双键伯胺、仲胺常用六氢吡啶结晶萜烯的亚硝基衍生物DA反应顺丁烯二酸酐结晶共轭二烯亚硫酸氢钠加成亚硫酸氢钠结晶（加成物，酸或碱下复原）醛，甲基酮或环酮C<8吉拉德试剂加成吉拉德试剂（带季铵的酰肼）水溶加成物(酸下还原）含羰基萜硝酸银的氨溶液硝酸银的氨溶液银镜反应醛基等还原2,4-二硝基苯/氨基脲/羟胺结晶形沉淀醛酮无水甲醇-浓硫酸无水甲醇-浓硫酸紫或蓝薁类乙酸酐-浓硫酸乙酸酐-浓硫酸三萜：黄-红/甾体：红-紫-蓝-绿-污绿甾体/三萜母核五氯化锑五氯化锑的三氯甲烷60°-70°蓝色，灰蓝，灰紫同上三氯乙酸三氯乙酸100℃/60℃红色渐变紫同上三氯甲烷-浓硫酸三氯甲烷-浓硫酸硫酸→红/紫；三氯甲烷 绿荧同上冰乙酸-乙酰氯两者+氯化锌淡红/紫红同上legal反应亚硝酰铁氰化钾深红/蓝活性亚甲基raymond反应间二硝基苯紫红/蓝同上Kedde反应3,5-二硝基苯甲酸紫红/红同上Baljet碱性苦味酸橙红/红同上K-K反应三氯化铁→浓硫酸蓝2-去氧糖呫吨氢醇呫吨氢醇试剂水浴红2-去氧糖A试剂红色F环闭环或开环E试剂黄色F环开环原理应用酸下产生难溶复盐或络合物生物碱鉴定同上同上同上同上同上同上及含量测定同上同上同上同上同上同上及分离季铵碱浓硫酸下，糖形成的糠醛衍生物与α-萘酚缩合成有色化合物糖，苷p95糖（呋喃糖>单糖>吡喃糖）苷醌起传递电子媒介作用醌类蒽醌化合物区别蒽醌上OH基苯醌，萘醌专用显色剂蒽醌OH基取代/黄酮类区别羰基对位C-H2活泼氢蒽酮定性碱下开环，与盐酸羟胺缩合生成异羟亏酸，酸下与铁离子络合香豆素鉴别香豆素/黄酮酚OH/挥发油中酚类（蓝、蓝紫、绿）香豆素C6无取代酚羟对位无取代木质素中特殊基团查耳酮，花色素，橙酮酸下变色黄酮（醇），二氢黄酮（醇）阳性被NaBH4还原与锆盐络合黄酮类羟基萜烯/挥发油与脂溶性非羰基萜分离挥发油羰基挥发油羰基挥发油羰基甾体/三萜母核鉴别及区别同上甾体/三萜母核鉴别及区别同上同上活性亚甲基同上同上同上强心苷强心苷甾体皂苷区别。
温州医学院天然药物化学考试资料
天然药物化学名词解释1.正相/反相分配色谱：当固定相的极性大于流动相的极性时,可称为正相分配色谱，在正相色谱中极性小的化合物先流出柱,若因定相的极性小于流动相的极性时,可称为反相分配色谱或简称反相色谱2.一次代谢产物：糖、蛋白质、脂质、核酸等这些对植物机体生命活动来说不可缺少的物质。
3.二次代谢产物：植物机体生命活动中不起重要作用的物质如生物碱、萜类等化合物。
4.分配系数：K=Cu/Cl，K越大则被分离的在上相居多，反之则下相居多5.苷化位移：糖苷化后，端基碳和苷元α-C化学位移值均向低场移动，而邻碳稍向高场移动（偶而也有向低场移动的），对其余碳的影响不大，这种苷化前后的化学变化，称苷化位移。
6.诊断试剂：通过加入某些试剂，使化合物中的－OH 全部或部分解离，或形成络合物，使光谱发生规律性变化，用以判断化合物的结构。
因为这些试剂对化合物结构具有诊断意义，故称之为诊断试剂。
7.挥发油又称精油，是一类具有芳香味的油状液体的总称。
第一章总论1、简述聚酰胺的吸附能力强弱取决于什么，有何规律可循?聚酰胺的吸附能力强弱取决于各种化合物与之形成氢键缔合的能力。
规律：1）形成氢键的基团数目越多，则吸附能力越强。
2）成键位置对吸附力也有影响。
易形成分子内氢键者，其在聚酰胺上的吸附即相应减弱。
3）分子中芳香化程度高者，则吸附性增强，反之减弱。
4）溶剂也会参加吸附剂表面的争夺，或通过改变聚酰胺对溶质的氢键结合能力而影响吸附过程。
2、常用溶剂的极性排比顺序：石油醚（低沸点－高沸点）<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烯<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<乙腈<水<吡啶<乙酸第二章糖和苷2 萜类、甾类化合物均由哪种生物合成途径生成答：甲戊二羟酸（MVA）途径3 什么叫做提取,溶剂提取法的原理是什么？溶剂提取法的原理：相似者相溶原理，通过选择适当溶剂将中药中的化学成分从药材中提取出来。
天然药物化学实验
实验一天然产物化学成分系统预试验天然产物中所含的化学成分种类很多，在深入研究之前应首先了解其中含有哪些类型的化学成分，如生物碱、皂苷、黄酮类等等。
这就需要进行各类化学成分的系统定性预试验。
或根据研究的需要进行单项预试法来初步判断。
一、实验目的与要求掌握未知成分的天然产物是怎样初步提取分离的，熟悉各主要成分的试管试验、沉淀反应和纸层析、薄层层析的方法并根据试验结果判断含有什么类型的化学成分。
二、基本原理利用各类成分的颜色反应和沉淀反应，对天然产物的提取液进行检查可以初步判断其中的化学成分。
由于提取液大多数颜色较深，影响对颜色变化的观察，可以使用薄层层析（TLC）或纸层析（PC）等方法对天然产物的提取液进行初步分离，再进一步检查。
三、实验内容：利用不同成分在各种溶剂中的溶解度的不同，一般可采用以下3种溶剂分别提取，试验。
1．水浸液：取中草药粗粉5 g加水60 ml，在50~60℃的水浴上加热1小时，过滤，滤液进行下列试验。
下糖鉴定（1）α-萘酚一硫酸试剂检查还原糖。
①溶液I：10％α-萘酚乙醇溶液。
溶液II：硫酸。
取1ml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2滴～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液II，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。
（2）斐林试剂检查还原糖。
溶液I：6．93g结晶硫酸铜溶于100ml水中。
溶液II：34．6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于100ml水中。
取1ml样品热水提取液，加入4滴～5滴用时配制的溶液I、II等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。
如检查多糖和苷，取1ml样品水提液，加入1m110% 盐酸溶液，在沸水浴上加热10min，过滤，（成盐去除杂质）再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。
或者直接用高效液相色谱看色谱图。
酚类鉴定试剂（1）三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞣质1％～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化。
取1ml样品的乙醇溶液，加入试剂1滴～2滴，显绿、蓝绿或暗紫色为阳性反应。
天然药物化学显色反应
0644814 许丛宇 2008/12/30生物碱(1)Vitali 反应C H C H 2O HC O O R H N O 3C H C H 2O HC O O R N O 2O 2NO 2K O H C H O HNC OO K N O 2O 2NC O O RC H 2O H紫色 (2)DDL 反应COCH OHOHCHO323O OCH COONH N HC C H 3CCH 3O H 3CCH 3DDl黄色 (3)沉淀反应 书本P155糖Molish 反应(试剂:浓硫酸,α-萘酚。
常用色谱显色剂:邻苯二甲酸与苯胺)糠醛衍生物与许多芳胺、酚类及具有活性次甲基的基团化合物缩合成有色的化合物香豆素:(1)异羟肟酸铁反应--------内酯的显色反应碱性条件下,香豆素内酯开环,并与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸,再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。
(2)与酚类试剂的反应具有酚羟基,可与FeCl3试剂产生颜色反应;若酚羟基的对位未被取代,或6-位上没有取代,其内酯环碱化开环后,可与Gibb’s 试剂、Emerson 试剂反应。
机制如下: Gibb’s 反应:符合以上条件的香豆素乙醇溶液在弱碱条件下,2,6-二氯(溴)醌氯亚胺试剂与酚羟基对位活泼氢缩合成蓝色化合物。
Emerson 反应:符合以上条件的香豆素的碱性溶液中,加入2%的4-氨替比林与8%的铁氰化钾试剂与酚羟基对位活泼氢缩合成红色化合物。
醌类颜色反应: 取决于其氧化还原性质以及分子中的酚羟基的性质。
(1)Feigl 反应----醌的通性,所有具醌核的化合物均可反应。
(方法、机理:见书 312页)醌类化合物在碱性条件下,经加热能迅速与醛类及邻二硝基苯反应,生成紫色化合物OOOHCOONa 2.ClH O HN H OHOO HN H OOFe Fe 3+H+CC1/3OH HO N BrBrCl ONBrBr-O O NBrBrO+OH HN N NH 2CH 3CH3O36NN NCH 3CH3OO+氨基安替比林（ 红 色）(2)无色亚甲蓝显色试验----可区别蒽醌与苯醌萘醌苯醌与萘醌因醌核上有活泼质子,可反应,而蒽醌无。
(完整版)天然药物化学笔记整理
第一章总论1.天然药物化学概述：天然药物化学是药物化学的一个分支学科。
它主要用现代科学理论和技术方法研究天然化学物资；具体内容包括主要类型的天然化学成分的结构类型、提取分离方法、结构测定等。
来源: 植物（为主）、动物、矿物天然药物中的活性成分是其药效的物资基础。
2.提取分离的方法1)提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2)提取方法（一）溶剂提取法原理：“相似者相溶”，通过选择适当溶剂将中药中的化学成分从药材中提取出来。
常见溶剂的极性强弱顺序：石油醚(低沸点—高沸点)<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烯<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<乙腈<水<吡啶<乙酸分类：①浸渍法②渗漉法：不断向粉碎的中药材中添加新鲜浸出溶剂，使其渗过药材，从渗漉筒下端出口流出浸出液的方法。
缺点：消耗溶剂量大，费时长，操作麻烦。
③煎煮法④回流提取法⑤连续回流提取法：可弥补回流提取法中溶剂消耗量大，操作台繁琐的不足，实验室常用索氏提取器（沙氏）来完成本法操作。
缺点：时间长，受热易分解的成分不宜使用此法。
⑥超临界流体萃取技术⑦超声波提取技术（二）水蒸气蒸馏法①适用范围：具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、且难容或不溶于水是我成分的提取。
②原理：给予两种互不相溶的液体共存时，各组分的蒸汽压和它们在纯粹状态时的蒸汽压相等，而另一种液体的存在并不影响它们的蒸汽压，混合体系的总蒸汽压等于两纯组分蒸汽压之和，由于体系中的蒸汽压比任何一组分的蒸汽压都高，所以混合物的沸点比任一组分的沸点为低。
（三）升华法原理：遇热挥发使用范围：游离蒽醌（四）压榨法原理：机械挤压适用范围：新鲜药材，种子植物油3)分离纯化法①根据物质溶解度的不同进行分离a.温度不同,溶解度不同b.改变溶液的极性去杂c.酸碱法d.沉淀法②根据物质分配比不同极性分离原理: 利用物质在两种互不相溶的溶剂中的分配系数的不同达到分离a.液-液萃取法b.反流分布法c.液滴逆流层析法d.高速逆流层析法e.GC法f.LC法: LC分配层析载体主要有---硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。
天然药物实验报告
天然药物化学实验实验报告实验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定（一）实验目的要求1.制备芦丁，供药用。
2.通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。
3.熟悉重结晶技巧。
4.了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。
（二）实验的基本原理1.芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基，呈酚酸性，能在碱水中溶解的性质，可用碱性溶剂进行提取，提取液加酸后可沉淀析出（碱溶酸沉法）。
也可利用芦丁在冷水中溶解度小，在热水中溶解度大的性质进行提取。
2. 芦丁的分离原理利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大，以及在热水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性质分离。
芦丁用溶剂加热溶解后，趁热抽滤，滤液放冷后能析出而达到分离的目的（如不纯可再重复操作进行分离）。
也可采用醇溶水沉法进行精制。
3. 芦丁的鉴定原理（1）利用吸附薄层色谱的分离原理，芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开，显色，以达到鉴定芦丁的目的。
（2）通过专属的化学显色反应（如三氯化铝显色反应），确定芦丁的成分类型（黄酮类）。
(三) 实验内容1. 用碱提法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。
2. 用酸沉法和冷却过饱和法分离芦丁。
3. 溶剂重结晶精制芦丁。
4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁(四) 实验药材仪器与试剂1. 实验药材槐米20g。
2. 仪器：磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、500ml烧杯，1000ml烧杯，50ml 烧杯，250ml园底烧瓶、500ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、50ml 锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置，布氏漏斗，抽滤瓶、层析缸等。
3. 试剂：硼砂、氧化钙、HCI、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、PH试纸等。
（五）实验方法与注意事项1. 芦丁的提取（2）方法二（水提取法）称取槐米粗粉20g，在研钵中研碎后放入500ml烧瓶中，（注意小心沿侧边放入磁子），加水200ml，用磁力加热搅拌器加热煮沸30min，（设定温度为105°C，当加热到103°时，观察到：液体开始沸腾，有气味，有泡沫产生。
天然药物化学：第六章 醌类化合物
天然药物化学
凤仙花
紫草
Impatiens balsamina Lithospermum erythrorhizon
（花色素、黄酮、萘醌）
（紫色素，萘醌）
茜草
Rubia cordifolia （茜草素，蒽醌）
第一节 结构与分类
天然药物化学
分类：根据结构，天然醌类分为4种 苯醌（Benzoquinones ） 萘醌（Naphthoquinones ） 蒽醌（Anthraquinones） 菲醌（Phenanthraquinones）
羟基蒽醌：5个吸收带 I ：230 nm（与酚OH的数目、位置有关） II ：240～260 nm （由苯样结构引起） III ：262～295 nm （由醌样结构引起，受－OH的影响） IV ：305～389 nm （由苯样结构引起） V ：> 400 nm （由醌样结构中C=O引起，受－OH的影响）
9, 10-蒽醌
多
1, 4-蒽醌
少
天然药物化学
蒽醌类 化合物
蒽醌衍生物 蒽醌还原产物
O
蒽酚或蒽酮衍生物（氧化蒽酚，蒽酚，蒽酮） 二蒽酮类衍生物（蒽酮的二聚体）
O
[H] [O]
O
蒽醌
O
[H] [O]
OH
氧化蒽酚
OH
蒽酮
蒽酚
1、蒽醌衍生物
O
8
1
7
8a 9 9a
2
6
10
10a
4a
3
5
4
O
9，10-蒽醌
1，2，3 Feigl 反应
阳性（红色） 2，3
阴性 1
无色亚甲蓝反应
阳性（蓝色斑点） 阴性
3
黄酮-天然药物化学
二、溶解度
溶解通性： 水 黄酮苷 可溶 醇 易溶 易溶 乙酸乙脂 可溶 易溶 乙醚、氯仿 不溶 易溶
黄酮苷元 难溶
31
溶解度与结构的关系：
平面型分子
非平面型分子 黄酮(醇), 查耳酮 二氢黄酮(醇) 花色素
水 溶 性
平面型分子 非平面型分子 离子
32
三、酸碱性
酸性：分子中具酚羟基，具酸性，可溶于碱性水
OH OH
Sr++
2 HO
-
O Sr O
+H O 2
43
三氯化铁（FeCl3）
三氯化铁（FeCl3）水溶液可以与黄酮类化合物中
的酚羟基反应呈色，但一般仅在含有氢键缔合的酚羟
基时颜色才明显。
44
（三）硼酸显色反应
黄酮类化合物分子中有下列结构的， 可以在酸性条件下与硼酸反应，生 成亮黄色。
O
2'
C OH
溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺
酸性强弱取决于羟基的数目和位置：
7,4 ’-OH > 7-或4’-OH > 一般OH > 5-OH
33
碱性： -吡喃酮环上的1-氧原子，因为有未共用电 子对，表现为弱碱性，可以与强酸生成yang盐。 生成的yang盐，但极不稳定，加水即可分解：
34
二氢黄酮在碱的作用下易开环生成2’-羟基查耳酮， 由无色转为深黄色，后者经酸化又能转化为原来的 二氢黄酮。
二氢黄酮在碱的作用下易开环生成6’-羟基查耳酮， 由无色转为深黄色，后者经酸化又能转化为原来 的二氢黄酮。
OH H OH O 邻羟基查耳酮 O 二氢黄酮 O
红花所含的色素红花苷是第一个发现的查耳酮 类植物成分
天然药物化学显色反应总结
天然药物化学显色反应总结
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
醌类化合物可以通过不同的反应类型进行鉴别，包括Feigl反应、Bornträge反应、Kesting-Craven反应和活性亚甲基试剂反应。
这些反应试剂包括碳酸钠、甲醛、邻二硝基苯、醋酸镁和碱液等。
不同的反应类型会产生不同的颜色反应，如紫色、蓝色、红、紫红和蓝绿等。
这些颜色反应可以用于鉴别不同的醌类化合物，如苯、萘、菲、蒽醌等。
香豆素显色反应的鉴别特点和意义
香豆素可以通过Gibbs或Emerson反应进行鉴别。
这些反应可以判断香豆素的C－6位是否有取代基的存在。
如果反应呈阳性，表示C-6位无取代。
此外，木脂素也可以通过检测其结构中的功能基进行检测，如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等。
常用的检测方法包括三氯化铁反应、Labat反应和Ecgrine 反应等。
黄酮类化合物的还原显色反应
黄酮类化合物可以通过不同的反应类型进行鉴别，包括盐酸-镁粉反应、四氢硼钠、铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、氯化锶、三氯化铁、硼酸显色反应和碱剂显色反应等。
这些反应可以鉴别黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇等不同的化合物。
不同的反应类型会产生不同的颜色反应，如橙红、紫红、红、黄色络合物等。
这些颜色反应可以用于鉴别不同的黄酮类化合物，如二氢黄酮、二氢黄酮醇、5-羟基黄酮及2-羟基查耳酮类等。
天然药物化学的鉴别反应
天然药化常见的鉴别反应（部分）一、颜色反应的对比（一）、三萜类的颜色反应1.Liebermann-Burchard反应将样品溶于乙酸酐中，加浓硫酸-乙酸酐（1：20）数滴，可产生黄→红→紫→蓝等颜色变化，最后褪色。
2.Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化锑的氯仿溶液（或三氯化锑饱和的氯仿溶液），干燥后60℃～70℃加热，显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3.Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液，加热至100℃，呈红色，逐渐变为紫色。
4.Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在硫酸层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。
5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。
（二）、甾体类化合物的颜色反应1.Liebermann-Burchard反应将样品溶于氯仿中，加浓硫酸-乙酸酐（1：20）数滴，可产生红→紫→蓝→绿→污绿等颜色变化，最后褪色。
也可将样品溶于冰乙酸，加试剂产生同样的反应。
2.Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化锑的氯仿溶液，干燥后60℃～70℃加热，样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3.Rosen-Heimer反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液，加热至60℃，呈红色，逐渐变为紫色。
4.Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在硫酸层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。
5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。
二、强心苷的颜色反应1.C17位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心苷在碱性醇溶液中，五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂作用而显色。
乙型强心苷在碱性醇溶液中，不能产生活性亚甲基，无此类反应。
天然药物化学第五章 黄酮
H
HO
O
OH NaBH4 HO
H O
H+
OH
H
H
-H2O
H O
HO HH
+
HO
OH
HO
+
OH
H
X－
CCC
H
H
H
CCC
H
H
X－
三、理化性质
（二）显色反应
1、还原反应：
（2）四氢硼钠（钾）反应： （NaBH4） 操作：样品溶于1ml甲醇或乙醇中，加入2％NaBH4甲醇溶液， 1分钟后加浓盐酸或浓硫酸数滴即可显紫红色（＋）。
OH
O
二、结构分类
（二）结构类型 9、双苯吡酮类(口山酮)（xanthones）：
O
O
10、花色素类（anthocyanidins）：
+
O OH
二、结构分类
（二）结构类型
黄酮母核中A、B环上常见的取代基：
酚羟基： 甲氧基： 甲基： 异戊烯基
二、结构分类
（二）结构类型
组成黄酮苷的常见糖类：
单糖类：见下表 双糖类：槐糖、龙胆二糖、芸香糖、新橙皮糖、刺槐二糖 三糖类：龙胆三糖，槐三糖等 酰化糖类：2-乙酰基葡萄糖，
HO
O
OH
ruitnose-O
O
OH
OH OCH3
OH O
O-rutinose
OH O
芦丁 (rutin)
橙皮苷(hesperidin)
一、概述
（二）生物活性
2、抗肝脏毒作用：
从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素（silybin）、异水飞蓟素 （silydianin）及次水飞蓟素（silychristin）等证明有很强的保肝 作用。临床用以治疗急慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤 等疾病。
天然药物化学显色反应总结
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义判断香豆素的C －6位是否有取代基的存在，可先水解，使其内酯环打开生成一个新的酚羟基，然后再用Gibbs 或Emerson 反应加以鉴别，如为阳性反应表示C-6位无取代。
木脂素没有特征性的理化检识方法，常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。
1．三氯化铁反应——检查酚羟基2．Labat 反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色） 3．Ecgrine 反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）和（或）5-OH ，加二氯氧锆显黄色。
若只有5-OH ，加枸橼酸后黄色减褪，若有3-OH ，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。
用于鉴别3-OH 的存在。
二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构的化合物反应生成沉淀。
而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。
①二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构体查耳酮，显橙色至黄色。
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。
图9-3 强心苷的显色反应 按作用部位分：2）、C-17位不饱和内酯环的颜色反应 甲型强心苷的特征反应，因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲基乙型强心苷为六元不饱和内酯环，故不能反应。
作用于五元不饱和内酯环 1． Legal 反应 2. Kedde 反应 3. Raymond 反应 4. Baljet 反应用于甲型与乙型强心苷的鉴别作用于甾核1． 醋酐-浓硫酸（L-B ）反应2． Salkowski （氯仿-浓硫酸）反应 3． 三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反应 4. 三氯化锑（五氯化锑）反应202221OO23OOHOO CH 3OHOOCH 3OHOOCH 3OHOOHCH 2OHOH作用于a -去氧糖1. Keller-Kiliani （K-K ）反应2. 对二甲氨基苯甲醛反应3. 占吨氢醇反应4. 过碘酸-对硝基苯胺反应 用于 I 型与 II 、III 型强心苷的鉴别分离含有羰基的甾体皂苷元，常用季铵盐型氨基乙酰肼类试剂，如吉拉尔T（Girard T）或吉拉尔P（Girard P）两种试剂。
天然药物化学成分检识(成都中医药大学)
糖和苷的检识1.菲林反应：还原糖能使碱性酒石酸铜试剂还原，产生砖红色的氧化亚铜2.多伦反应：还原糖与氨性硝酸银试剂反应产生金属银，呈银镜或黑色沉淀3.Molish反应：在糖或糖苷的水或乙醇溶液中加入a萘酚乙醇溶液，沿器壁滴加浓硫酸，二液层交界处呈现紫色环。
碳苷及葡萄糖醛酸苷与该试剂反应呈阴性4.苯胺-邻苯二甲酸试剂反应：糖类与其生成有色物质醌类化合物显色反应1.Feigl反应：醌类衍生物在碱性条件下与醛类和邻二硝基苯加热，呈紫色2.无色亚甲蓝反应：苯醌类及萘醌类的专用显色剂3.碱性条件下的显色反应：羟基蒽醌类由于酚羟基的存在，在碱性条件下呈色（Borntrager反应）4.活性次甲基试剂反应（Kesting-Craven法）：苯醌类及萘醌类化合物的醌环上有未被取代的位置，可在碱性条件下与该试剂显蓝绿色或蓝紫色，蒽醌类不发生反应香豆素显色反应1.异羟肟酸铁反应：内酯结构，呈红色2.Gibb’s反应：香豆素类化合物具有酚羟基取代且酚羟基的对位无取代，则能与2，6-二氯(溴)苯醌氯亚胺(Gibb’s试剂)反应显蓝色3.Emerson反应：内酯环在碱性条件下开环后与4-氨基安替比林和铁氰化钾(Emerson试剂)反应生成红色缩合物Gibb’s反应和Emerson反应可判断香豆素碳6位是否有取代基的存在木质素类显色反应Labat反应，Labat试剂与亚甲二氧基的化合物反应产生蓝绿色黄酮类显色反应1.盐酸-镁粉反应：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮和二氢黄酮醇显色，而异黄酮（少数例外）、查耳酮、橙酮、儿茶素类则为阴性反应2.四氢硼钠反应：二氢黄酮类化合物可被四氢硼钠还原产生红至紫红色，其他黄酮类化合物均不显色。
对二氢黄酮类和二氢黄酮醇类专属性较高的还原剂3.三氯化铝反应：一般样品在紫外灯下显鲜黄色荧光，4/-羟基黄酮醇或7,4/-二羟基黄酮醇类显天蓝色荧光4.锆盐-枸橼酸反应：黄酮中有游离的3-或5-羟基时，可与2%二氯氧锆甲醇溶液反应显黄色，若枸橼酸过多5-羟基黄酮显著褪色、3-羟基黄酮仍显鲜黄色5.氨性氯化锶反应：有邻酚羟基者，产生绿色至棕色乃至黑色沉淀6.硼酸显色反应：5-羟基黄酮和2/-羟基查耳酮呈阳性反应，在酸性条件下，可与硼酸反应产生亮黄色五氯化锑反应：溶于四氯化碳中，加2%五氯化锑的四氯化碳（必须无水），查耳酮类生成红或紫红色沉淀，而黄酮、二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色，用于区别查耳酮与其他黄酮。
天然药物化学-第九章-强心苷
第二节 理化性质
天然药物 化学 (yàowù)
第一页，共五十页。
天然药物化学
第九章 强心苷
第二页，共五十页。
课
1. 掌握强心苷的结构类型。
堂
2. 掌握强心苷的溶解性和水解性
目 标
3. 掌握强心苷的显色反应
重 要
1.甲型强心苷元
知
2.乙型强心苷元
识
3.酸催化水解
点
4.碱催化水解
5.酶催化水解
6.显色反应
第三页，共五十页。
第一节 结构类型
第四页，共五十页。
第一节 结构类型
一、基本概念
强心苷类是自然界中存在的一类对心脏具有显著生物活性的
甾体苷类化合物。
由强心苷元和糖缩合而产生的一类苷。 强心苷是治疗室率过快心房颤动的首选药和慢性心功能不全的主
要药物。 毒性：强心苷类能兴奋延髓催吐化学感受区而引起恶心、呕
吐等胃肠道反应；且有剧毒，若超过安全剂量时，可使心 脏中毒而停止跳动。
第五页，共五十页。
第一节 结构类型
目前临床应用的有二、三十种，用于治疗充血性心力衰竭及节律 障碍等心脏疾病，如西地兰、地高辛、毛地黄毒苷等
强心苷的分布主要有夹竹桃科、玄参科、萝摩科、卫矛科、百合 科、大戟科等等。尤其在玄参科和夹竹桃科植物中最多。
黄花夹竹桃、紫花洋地黄、毛花洋地黄、杠柳、铃兰、
O O
O
O
O
O
OH
HO
洋地黄毒苷元
OH
HO
H
乌沙苷元
O
OH
O
HO
夹竹桃苷元
O
CHO
O
3A
17
C 13 D
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0644814 许丛宇 2008/12/30生物碱(1)Vitali 反应C H C H 2O HC O O R H N O 3C H C H 2O HC O O R N O 2O 2NN O 2K O H C 2H 5O HNC OO K N O 2O 2NC O O RC H 2O H紫色 (2)DDL 反应COCH OHHIO 4OHCHOCH 3CCH 2CCH 3O OCH 3COONH 4N HC C H 3CCH 3O O H 3CCH 3DDl黄色 （3）沉淀反应 书本P155糖Molish 反应（试剂：浓硫酸，α-萘酚。
常用色谱显色剂：邻苯二甲酸和苯胺） 糠醛衍生物和许多芳胺、酚类及具有活性次甲基的基团化合物缩合成有色的化合物香豆素：（1）异羟肟酸铁反应--------内酯的显色反应碱性条件下，香豆素内酯开环，并与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸，再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。
（2）与酚类试剂的反应具有酚羟基，可与FeCl3试剂产生颜色反应；若酚羟基的对位未被取代，或6-位上没有取代，其内酯环碱化开环后，可与Gibb’s 试剂、Emerson 试剂反应。
机制如下： Gibb’s 反应：符合以上条件的香豆素乙醇溶液在弱碱条件下，2,6-二氯(溴）醌氯亚胺试剂与酚羟基对位活泼氢缩合成蓝色化合物。
Emerson 反应：符合以上条件的香豆素的碱性溶液中，加入2%的4-氨替比林和8%的铁氰化钾试剂与酚羟基对位活泼氢缩合成红色化合物。
醌类颜色反应: 取决于其氧化还原性质以及分子中的酚羟基的性质。
（1）Feigl 反应----醌的通性，所有具醌核的化合物均可反应。
（方法、机理：见书 312页）醌类化合物在碱性条件下，经加热能迅速与醛类及邻二硝基苯反应，生成紫色化合物 OOOHCOONa HONH 2.ClH O HN H OHOO HN H OOFe Fe 3+H+CC1/3( 红 色)OH HO N BrBrCl ONBrBr-O O NBrBrO+pH 9~10OH HN N NH 2CH 3CH3OK 3Fe(CN)6NN NCH 3CH3OO+[O]氨基安替比林（ 红 色）（2）无色亚甲蓝显色试验----可区别蒽醌与苯醌萘醌苯醌和萘醌因醌核上有活泼质子，可反应，而蒽醌无。
无色亚甲基蓝溶液，样品在白色背景上作为蓝色斑点出现。
（3）与碱的反应(Bornträger反应----可区别含羟基的蒽醌与蒽酚衍生物反应、机理、应用：见书313 页。
羟基醌类在碱性溶液中发生颜色变化，会使颜色加深。
多呈橙、红、紫红色及蓝色。
例如羟基蒽醌类遇碱显红~紫红色的反应称Bornträger反应（4）与活性次甲基试剂的反应----可区别蒽醌与苯醌萘醌（Kesting-Craven法）反应、机理、应用：见书313 页。
苯醌及萘醌类化合物当其醌环上有未被取代的位置时，可在氨碱性条件下与一些含有活性次甲基试剂（乙酰醋酸酯、丙二酸酯、丙二腈等）的醇溶液反应，生成蓝绿色或蓝紫色（5）与金属离子的反应----可初步鉴定蒽醌的取代情况机理：见书314 页常用0.5％醋酸镁的乙醇溶液，可根据结果初步判断取代情况：A．母核中只有一个α-或β-酚羟基，或有两个β-酚羟基但不在同一环上，呈黄橙色至橙色。
B．邻位酚羟基的蒽醌，呈紫色－蓝紫色。
C. 对位二酚羟基蒽醌，呈紫红色－紫色。
D. 每个苯环上各有一个α-酚羟基，或含有间位二羟基者，呈红色至红色。
黄酮1）盐酸-镁粉（或锌粉）反应：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显橙红~紫红色，少数显紫~蓝色。
查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。
异黄酮类一般不显色。
2）四氢硼钠（钾）反应：NaBH4是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂。
与二氢黄酮类化合物产生红~紫色。
其它黄酮类化合物均不显色。
二氢黄酮与磷钼酸试剂显棕褐色。
3）铝盐：生成的络合物多为黄色（λmax=415nm），并有荧光，可用于定性及定量分析。
常用试剂为1%三氯化铝或硝酸铝溶液。
4）铅盐：常用1%醋酸铅及碱式醋酸铅水溶液，碱式醋酸铅反应能力更强，可生成黄~红色沉淀。
5）锆盐：多用2%二氯氧化锆（ZrOCl2）甲醇溶液。
黄酮类化合物分子中有游离的3-或5-OH存在时，均可反应生成黄色的锆络合物。
3-OH，4-酮基络合物的稳定性>5-OH，4-酮基络合物（仅二氢黄酮醇除外）。
〖当反应液中接着加入枸橼酸后，5-羟基黄酮的黄色溶液显著褪色，而3-羟基黄酮溶液仍呈鲜黄色（锆—枸橼酸反应）〗。
6）镁盐：二氢黄酮、二氢黄酮醇类与醋酸镁的甲醇溶液，加热可显天蓝色荧光，若具有C5-OH，色泽更为明显。
而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄~橙黄~褐色。
7）氯化锶（SrCl2）：在氨性甲醇溶液中，可与分子中具有邻二酚羟基结构的黄酮类化合物生成绿色~棕色乃至黑色沉淀。
8）三氯化铁反应：多数黄酮类化合物因分子中含有游离酚羟基，与三氯化铁水溶液或醇溶液可产生正反应，呈现颜色；当含有氢键缔合的酚羟基时，颜色更明显。
9）碱性试剂显色：二氢黄酮类在碱液中开环，转变成查尔酮类化合物，显橙黄至黄色。
黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色，与其他黄酮类区别。
黄酮类分子中有邻二酚羟基取代或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生黄色—深红色—绿棕色沉淀卓酚酮能与多种金属离子形成络合物结晶体，并显示不同的颜色，可用于不同的颜色，可用于鉴别。
如铜络合物为绿色结晶，铁络合物为赤红色结晶。
环烯醚萜游离苷元遇酸、碱、羰基化合物和氨基酸等都能变色。
如遇到氨基酸类加热，即显深红色至深蓝色，最后变成蓝色沉淀。
还有冰醋酸-铜离子反应，shear试剂（1体积浓盐酸与1.5体积苯胺混合）反应(车前草苷：黄—棕—深绿)藇类挥发油分馏时，高沸点馏分如见美丽的蓝色、紫色或绿色，表明可能有藇类三萜类三萜化合物（苷元和苷）在无水条件下，与强酸、三氯乙酸或Lewis酸（氯化锌、三氯化铝、三氯化锑）作用，会产生颜色变化或荧光。
但全饱和、且3位又无羟基或羰基的化合物呈阴性反应：*（1）醋酐-浓硫酸反应（Liebermann-Burchard反应）将样品溶于冰醋酸中，加硫酸-醋酐（1：20），可产生黄→红→紫→蓝等颜色变化，最后褪色。
（甾体皂苷也有此反应，但颜色变化快，在颜色变化的最后出现污绿色；而三萜皂苷颜色变化稍慢，且不出现污绿色。
）*（2）五氯化锑反应（Kahlenberg反应）将样品氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷以20%五氯化锑的氯仿溶液，干燥后60~70℃加热，显蓝色、灰蓝色，灰紫色等多种颜色斑点。
紫外灯下显蓝色荧光（甾体皂苷则显黄色荧光）另：三氯化锑（Carr-Price反应）薄层色谱显色用。
其余一样。
（3）三氯醋酸反应（Rosen-Heimer反应）将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯醋酸乙醇溶液，加热至100℃，生成红色渐变为紫色。
（加热至100度，甾体是60度。
）（4）氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应）样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在氯仿层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。
（甾体也有，一样）（5）冰醋酸-乙酰氯反应（Tschugaeff反应）样品溶于冰醋酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。
（甾体也有，一样）三萜化合物的沉淀反应皂苷的水溶液可以和一些金属盐类如铅盐、钡盐、铜盐等产生沉淀。
三萜皂苷多含羧基，可用酸性醋酸铅沉淀，而甾体皂苷则为中性皂苷，须用碱性醋酸铅或者氧化钡沉淀。
挥发油官能团鉴定：酚类：将少许溶于乙醇中，加三氯化铁的乙醇溶液，如产生蓝色，蓝紫或绿色反应，表示挥发油中有酚类物质存在。
羰基化合物：银镜反应（硝酸银的氨溶液）醛类物质。
挥发油的乙醇液中加2，4-二硝基苯肼，氨基脲，羟胺等试剂，若产生晶形衍生物沉淀表明有醛或酮类化合物存在。
不饱和化合物和藇类衍生物挥发油的三氯甲烷加溴的三氯甲烷液——红色褪去——有不饱和化合物，继续加溴的三氯甲烷，若产生蓝色紫色或绿色，表明油中有藇类。
此外在挥发油的无水乙醇液中加浓硫酸时，如有藇类衍生物应产生蓝色或紫色反应。
内酯类：挥发油吡啶溶液中加亚硝酰氰化钠试剂及氢氧化钠液，若出现红色并逐渐消失，则表明有~甾体1.Salkowski反应样品溶于氯仿，沿试管壁滴加浓硫酸，氯仿层显血红色或青色，硫酸层显绿色荧光。
2.三氯乙酸-氯胺T反应25%三氯乙酸乙醇液和3%氯胺T水液4：1混合，喷在滤纸上与强心苷反应，干后加90度加热数分钟紫外灯下观察，显黄绿色、蓝色、灰蓝色荧光，反应较稳定，用于毛地黄强心苷类的区别。
3.α，β不饱和内酯环反应（区别甲乙型强心苷）甲型强心苷：C17侧链上有不饱和内酯环，碱液中，双键移位形成活性次甲基，与某些试剂反应显色。
乙型无。
Legal反应亚硝酰铁氰化钠深红或蓝【NaFe（NO）(CN)5·2H2O】Kedde反应3，5-二硝基苯甲酸乙醇液紫红或红Raymond反应1%间-二硝基苯乙醇液紫红或蓝Baljet反应苦味酸（2，4，6-三硝基甲苯）橙或橙红4.α去氧糖的反应（1）占吨氢醇反应分子中有2-去氧糖能显色（2）对—二甲氨基苯甲醛反应灰红色（3）Keller—Kiliani反应（游离的2-去氧糖或者该条件下能水解得到2-去氧糖的强心苷）强心苷溶于含少量Fe3+的冰醋酸中，沿管壁滴加浓硫酸，观察界面和醋酸层的颜色变化，若有2-去氧糖，醋酸层渐呈蓝色或蓝绿色，但是对此反应不显色的，并非结构中无2-去氧糖。
（4）过碘酸—对硝基苯胺反应黄色与强心苷有关的一些鉴别方法:1、甲型强心苷的不饱和五元内酯环，在碱性溶液中，双键转位可产生活性次甲基，可与Legalsh试剂、Kedde试剂等发生显色反应；2、基于2－去氧糖的显色反应：可用Keller-Kiliani试剂鉴别，显蓝绿色。
3、UV法：不饱和五元内酯环－－在220nm处不饱和六元内酯环－－在300nm处有最大吸收；4、IR法：在1700－1800cm-1都有两个强吸收峰，但不饱和六元内酯环的，向低移40cm –1。
鞣质（还原性）极易被氧化，为强还原剂。
与高价金属离子和盐，如Fe3+、Vd6+、Ce4+、重铬酸钾、高锰酸钾、钨酸钠等发生氧化还原反应，大部分产生颜色变化，可作为鞣质的定量方法，Folin酚法：碱性条件下酚类化合物讲钨钼酸还原成蓝色化合物，在760nm处有最大吸收，可定量；普鲁士蓝法是根据在酸性介质中酚类物质讲Fe3+还原成Fe2+，后者与K3Fe（CN）6生成深蓝色配合物，在695nm处有最大吸收，测定总酚量。
特殊官能团FeCl3 或重氮化试剂可用于酚羟基的检查；Labat试剂或Ecgrine试剂变色酸浓硫酸试剂用于亚甲二氧基的检测。