高通量基因测序植入前胚胎遗传学诊断和筛查技术规范
胚胎植入前遗传学筛查
胚胎植入前遗传学筛查胚胎植入前遗传学筛查胚胎染色体异常是导致胚胎着床失败、早孕期胎儿流产的一大因素。
研究表明，随着年龄的增长，女性产生的正常卵子数量下降，导致胚胎中染色体数目异常的胚胎比例增加。
PGS检测可以在胚胎植入母体之前，筛选出检测结果为染色体正常的胚胎进行植入，从而减少因胎儿染色体问题而带来的流产甚至引产，减少移植次数，提高治疗效率，好孕之神就会降临！PGS（preimplantation genetic screening），即胚胎植入前遗传学筛查，是指在进行辅助生殖技术（IVF/ICSI）助孕的过程中，在胚胎移植之前，对早期胚胎或者卵子散在发生的染色体异常进行筛查，以挑选染色体正常的胚胎植入子宫，以期减少因胚胎染色体异常导致的流产及反复流产，获得正常的妊娠，提高IVF妊娠率。
胚胎植入前遗传学筛查就是在人工辅助生殖过程中，对胚胎进行种植前活检和高通量基因测序分析，以选择染色体正常无遗传学疾病的胚胎植入子宫，提高着床率和持续妊娠率，降低流产率，从而获得正常胎儿的诊断/筛查方法。
胚胎植入前遗传学筛查推荐人群：1、卵子染色体异常率较高的高龄（≥35岁）孕妇；2、染色体数目及结构异常的夫妇；3、严重的男性不育，少弱精子症，畸精症；4、生育过染色体异常疾病患儿的夫妇及有反复自然流产史的孕妇；5、反复胚胎种植失败的的孕妇。
在人工辅助生殖过程结合应用高通量测序的PGS的优势在于：1、PGS的全染色体筛查的误差率降低（<2%），准确性高大于99%，并且覆盖全面，染色体非整倍体以及10Mb以上微重复/微缺失均能检测；2、对囊胚活检无任何影响；••••3、消除母体年龄对植入的影响；4、能够检测出嵌合体（因为12%的囊胚是嵌合体，嵌合体比整倍体胚胎的受孕率低50%）；5、与普通PGS技术相比，可以将流产率降低60%，同时提高移植着床率，提高临床妊娠率和持续妊娠率。
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高通量基因测序植入前胚胎遗传学诊断和筛查技术规范(试行)
高通量基因测序植入前胚胎遗传学诊断和筛查技术规范(试行)徐艳文;王秀霞;张松英;黄学锋;伍琼芳;全松;周从容;师娟子;孙莹璞;周灿权;黄国宁;孙海翔;范立青;冯云;沈浣;刘平;卢文红;张云山【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2017(26)5【摘要】Next generation sequencing (NGS) technique develops rapidly in recently years.NGS not only expands the application of PGD/PGS,but also improves the accuracy of diagnosis in embryos.For the purpose of better practice of NGS-based PGD/PGS,Chinese Society of Reproductive Medicine (CSRM) drew the guideline,which covered topics including basic requirements,organization and management,clinical process,quality control (QC),quality assurance (QA) and accreditation etc.%高通量基因测序技术的迅猛发展,极大地拓宽了人类胚胎植入前遗传学诊断/筛查(PGD/PGS)的适用范畴,提高了PGD/PGS的准确性.为了更规范地使用高通量基因测序技术进行PGD/PGS,中华医学会生殖医学分会制定此规范,以明确开展本项技术的基本条件、组织管理、临床流程与质量控制等方面的基本要求.【总页数】8页(P391-398)【作者】徐艳文;王秀霞;张松英;黄学锋;伍琼芳;全松;周从容;师娟子;孙莹璞;周灿权;黄国宁;孙海翔;范立青;冯云;沈浣;刘平;卢文红;张云山【作者单位】中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会;中华医学会生殖医学分会第四届委员会【正文语种】中文【相关文献】1.高通量测序应用于一例超雌综合征患者的胚胎植入前遗传学诊断 [J], 檀畅;王喜良;白雪;肖玉红;曲胜强;张金艳;崔鑫;魏威;于月新2.高通量检测技术在植入前胚胎遗传学诊断中的应用 [J], 徐晨明3.胚胎冻融对卵裂期行植入前遗传学诊断或筛查后可移植胚胎临床结局的影响 [J], 石碧炜;崔龙;叶晓群;叶英辉4.单细胞高通量测序技术在胚胎植入前遗传学诊断中的应用 [J], 杨霞;岳丰;张学红5.胚胎植入前遗传学诊断与筛查实验室技术指南 [J], 张宁媛;张松英;黄学锋;伍琼芳;全松;周灿权;周从容;师娟子;孙莹璞;孙海翔;黄国宁;范立青;冯云;沈浣;刘平;卢文红;张云山;王秀霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高通量基因测序植入前胚胎遗传学诊断和筛查技术规范
（１）患者的姓名、年龄、采用本项技术的适应证；
（２）胚胎的编号、胚胎的状态、采样日期和报告日期；
（３）检测的项目和检测方法以及测试的检测级别分类(A、B、C)；
（４）检测报告应对每个被检胚胎的检测结果以标准的专业方式描述。常染色体隐性遗传性基因疾病的PGD应明确是正常、致病基因杂合子或纯合子，或致病基因复合杂合子（重型）胚胎；常染色体显性遗传性疾病的PGD应明确是正常或重型胚胎，染色体病的PGD以是否出现易位和非易位染色体数目和／或结构的改变来表示，PGS以是否出现染色体非整倍体的改变来表示。必要时根据检测结果辅以其它的描述或说明；
２．禁忌证：有如下情况之一者，不得实施PGD技术：
（１）患有《母婴保健法》规定的不宜生育的遗传性疾病；
（２）患有目前无法进行胚胎植入前遗传学诊断的遗传性疾病；
（３）其它不适宜实施辅助生殖技术的情况。
二、工作程序
对具备适应证的患者，医师应在其夫妇双方签署知情同意书后，予以核查并备案相关证件，进行术前检查并排除禁忌证；建立病历档案；按辅助生殖技术程序促排卵后经阴道穿刺取卵，行卵胞浆内单精子注射授精，胚胎体外培养，择时行胚胎活检，获取样本进行高通量测序、生物信息学分析，确定胚胎的相关遗传性状是否适合进行胚胎移植，适时向接受本项技术的夫妇双方报告并解释胚胎的高通量测序检测结果，选择胚胎进行宫腔内移植；成功妊娠后须跟踪患者妊娠情况，择时进行产前诊断，根据产前诊断结果作相应处理，并随访妊娠最终结局和子代情况。具体流程可参考附件１制定。
二、设备条件
机构须具备细胞遗传学实验诊断的设备和上述第一部分第一条第３款所要求的相应设备。在此基础上，机构应同时具备专业的高通量测序技术相应的核心设备（如与第三方合作可由第三方提供），该设备由经卫生行政管理部门批准试点或正式开展高通量测序技术临床应用的单位生产。各种设备的种类、数量须与实际开展的项目及工作规模相匹配。
应用二代测序技术进行胚胎植入前遗传学筛查及诊断的基本原理
应用二代测序技术进行胚胎植入前遗传学筛查及诊断的基本原理LI Li-li;SUN Nan;ZHANG Wen-xin【摘要】辅助生殖技术的发展已帮助越来越多不孕不育的夫妇解决生育难题,而胚胎植入前遗传学筛查(PGS)及胚胎植入前遗传学诊断(PGD)进一步排除了存在遗传缺陷的胚胎,并选择健康胚胎进行植入,从而极大降低了新生儿患遗传性疾病的概率.这两项技术最初采用基于分子杂交或聚合酶链式反应(PCR)的检测方法,随后微阵列技术也被应用其中.随着人类基因组计划的完成,DNA测序技术进入高速发展的阶段,二代测序(NGS)采用鸟枪法为基本测序策略,结合生物信息学工具,以高通量、较低成本、检测项目覆盖面广、自动化程度高、可检测未知片段等优势,正不断扩大在PGS/PGD中的应用,同时也对辅助生殖技术产生了深远的影响.【期刊名称】《中国医学装备》【年(卷),期】2019(016)007【总页数】8页(P7-14)【关键词】二代测序技术;胚胎植入前遗传学筛查;胚胎植入前遗传学诊断【作者】LI Li-li;SUN Nan;ZHANG Wen-xin【作者单位】;;【正文语种】中文【中图分类】R394-3遗传学和基因组学的快速发展对人类生命健康及繁衍的影响日益深远，对多种常见和罕见疾病的研究有助于对应预防、检测及治疗方法的开发，从而提高患者及其家人的生活质量。
在不孕不育等问题日益严峻的情况下，辅助生殖技术(assisted reproductive technology，ART)应运而生并被采用于个性化的生育治疗策略，帮助受生育难题困扰的家庭。
其中，植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening，PGS)主要针对高龄、反复助孕失败、反复自然流产等患者，进行植入前胚胎的染色体畸变检测，用于筛查和丢弃染色体畸变的胚胎，保证受孕者所植入的胚胎具有正常染色体组的同时，解决因胚胎染色体畸变而导致的植入失败和反复流产现象，并提高妊娠率[1-2]；植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis，PGD)则主要针对父母本已患有明确遗传病或携带其致病基因，在种植前对胚胎进行相应遗传学诊断，主要包括单基因遗传病和染色体病(如罗氏易位、平衡易位等)，通过选择无致病因素的胚胎进行植入，以提高生育健康婴儿的概率[3]。
高通量测序技术在临床医学中的应用
高通量测序技术在临床医学中的应用摘要：现行的高通量测序技术是第二代测序技术，与第一代技术相比在速度、精准度和成本方面有明显优势。
如今，高通量测序技术在医学领域的应用越来越广泛，对我国医学领域的发展也能起到促进作用。
基于此，本文重点对高通量测序技术进行阐述，结合高通量测序技术的原理分析了该技术在临床医学的应用路径，以期为相关领域提供更多的理论参考依据。
关键词：高通量测序技术；测序技术；临床医学引言新一代的测序技术实际上就是我们所说的高通量测序技术，在传统测序技术基础之上有明显提升，高通量测序技术能够实现同时测序上千万条DNA序列，从而实现对某个物种整体转录组和基因组的深入分析。
随着高通量测序技术的发展，该技术已经在医学领域得到广泛应用，尤其是在肿瘤、寄生虫病、遗传病等体现出了特有的效果。
所以，高通量测序技术也成为我国医学领域的重要技术。
一、高通量测序技术的概述（一）高通量测序技术介绍高通量测序技术，也称为“下一代”测序技术（Next-generation sequencing technology）或大规模平行测序（Massively parallel sequencing，MPS），是一种能够一次并行对大量核酸分子进行序列测定的技术。
该技术运用了生物信息学、纳米孔测序和并行测序等多种技术，能够高效、快速、准确地测定大量核酸分子的序列。
与传统的Sanger双脱氧法测序相比，高通量测序技术具有更高的测序速度和更高的通量，一次测序反应就能产出不低于100Mb的测序数据。
高通量测序技术的应用范围非常广泛，包括基因组学、遗传学、分子生物学、临床医学和癌症研究等领域。
通过该技术，我们可以对特定基因组或全基因组进行深入研究，发现新的基因及其变异体，了解基因的表达调控机制，为疾病的治疗和预防提供依据。
虽然高通量测序技术已经取得了许多重要的成果和突破，但仍然存在一些挑战和限制，如数据分析和解读的难度、对实验条件和操作技能的要求、伦理和隐私问题等。
高通量基因测序产前筛查与诊断技术规范试行
高通量基因测序产前筛查与诊断技术规范（试行）为规范高通量基因测序产前筛查与诊断技术临床应用工作，制定本规范。
该规范主要包括高通量基因测序产前筛查与诊断的适用范围、临床服务流程和质量控制等内容。
第一部分适用范围一、适用目标疾病根据目前技术发展水平，高通量基因测序技术在产前筛查与诊断领域适用的目标疾病为常见胎儿染色体非整倍体异常（即21 三体综合征、18 三体综合征、13 三体综合征）。
二、适用时间高通量基因测序产前筛查与诊断时间应当为12+0-26+6周，最佳检测时间应当为12+0-26+6周。
三、适用人群（一）血清学筛查、影像学检查显示为常见染色体非整倍体临界风险（即1/1000≤唐氏综合征风险值<1/270，1/1000≤18 三体综合征风险值<1/350）的孕妇。
（二）有介入性产前诊断禁忌证者（先兆流产、发热、有出血倾向、感染未愈等）。
（三）就诊时，患者为孕20+6周以上，错过血清学筛查最佳时间，或错过常规产前诊断时机，但要求降低21 三体综合征、18 三体综合征、13 三体综合征风险的孕妇。
四、慎用人群有以下几种情形的孕妇属于慎用人群，即在该人群中本检测的筛查效果较适用人群有一定程度下降，即筛查的检出率下降，假阳性及假阴性率上升，或已符合介入性产前诊断的指征，知情后拒绝直接选择介入性产前诊断的孕妇。
包括：（一）产前筛查高风险，预产期年龄≥35 岁的高龄孕妇，以及有其他直接产前诊断指征的孕妇。
（二）孕周<12 周的孕妇。
（三）高体重（体重>100 千克）孕妇。
（四）通过体外受精-胚胎移植（以下简称IVF-ET）方式受孕的孕妇。
（五）双胎妊娠的孕妇。
（六）合并恶性肿瘤的孕妇。
五、不适用人群（一）染色体异常胎儿分娩史，夫妇一方有明确染色体异常的孕妇。
（二）孕妇1 年内接受过异体输血、移植手术、细胞治疗或接受过免疫治疗等对高通量基因测序产前筛查与诊断结果将造成干扰的。
（三）胎儿影像学检查怀疑胎儿有微缺失微重复综合征或其他染色体异常可能的。
pgd筛查流程
pgd筛查流程PGD筛查流程引言：随着生物技术的不断发展和进步，人类对于基因的了解愈发深入，基因检测技术也日趋成熟。
PGD（Preimplantation Genetic Diagnosis），即胚胎植入前遗传学诊断，是一种通过对胚胎进行遗传学检测，筛查出患有遗传病或有遗传病风险的胚胎，并选择健康胚胎进行植入的技术。
本文将介绍PGD筛查流程的具体步骤和注意事项。
一、患者咨询和咨询辅导在PGD筛查流程开始之前，首先需要患者进行咨询。
咨询的目的是让患者了解PGD技术的原理、适应症、风险和限制，以及筛查结果的解读和可能的后果。
咨询辅导的过程中，医生与患者进行充分沟通，解答患者的疑问，确保患者对PGD的理解和决策是全面和准确的。
二、遗传咨询和家庭史调查在患者咨询和咨询辅导之后，接下来进行遗传咨询和家庭史调查。
遗传咨询的目的是收集患者的个人和家族的遗传信息，确定需要进行PGD筛查的遗传病或遗传病风险。
家庭史调查包括患者和配偶的家族遗传病情况、家族成员患病情况等，以便更准确地判断PGD筛查的适应症和筛查范围。
三、胚胎移植准备在遗传咨询和家庭史调查之后，准备进行胚胎移植。
首先，女性患者需要进行促排卵治疗，以产生足够数量的卵子。
然后，通过体外受精（IVF）技术，将男性患者的精子与女性患者的卵子结合，培养出多个受精卵。
在胚胎发育到8细胞阶段时，进行胚胎活检，取出一个或多个细胞用于遗传学检测。
四、胚胎遗传学检测胚胎遗传学检测是PGD筛查流程的核心步骤。
通过对胚胎细胞进行遗传学检测，可以筛查出患有遗传病或有遗传病风险的胚胎。
常用的胚胎遗传学检测方法包括：FISH（荧光原位杂交）、PCR（聚合酶链反应）、SNP（单核苷酸多态性）等。
这些方法可以检测出胚胎的染色体数目异常、染色体结构异常，以及一些单基因病的突变等。
五、筛查结果解读和讨论在胚胎遗传学检测完成后，需要进行筛查结果的解读和讨论。
遗传学专家会对筛查结果进行解读，确定每个胚胎的遗传状态。
高通量测序技术市场发展与应用
1.高通量测序技术应用范围：1)遗传病诊断2)产前筛查与诊断3)植入前胚胎遗传学诊断4)肿瘤诊断与治疗其中，前三个专业已经经过国家卫计委批准，肿瘤诊断与治疗暂未批准。
2.国家批准进行高通量测序服务的单位有北京的四家单位和广州的三家单位：1）中国医学科学院北京协和医院2）北京博奥医学检验所3）安诺优达基因科技（北京）有限公司医学检验所4）北京爱普益医学检验中心广州的三家单位：5）深圳华大临床检验中心6）广州达安临床检验中心7）南方医科大学南方医院具体内容如下。
2014年的最后一天，一则消息让整个基因测序行业提前进入了新年的火热气氛当中。
国家卫计委医政医管局发布了关于《开展高通量基因测序技术临床应用试点工作的通知》（以下简称《试点名单通知》），公布了北广两地第一批高通量测序技术临床应用试点单位。
通知中共涉及3个专业（遗传病诊断、产前筛查与诊断、植入前胚胎遗传学诊断），批准4家北京地区机构（中国医学科学院北京协和医院，北京博奥医学检验所，安诺优达基因科技（北京）有限公司医学检验所以及北京爱普益医学检验中心）以及3家广州地区机构（深圳华大临床检验中心，广州达安临床检验中心，南方医科大学南方医院）。
这一次发布，与同年3月份卫计委发布的《关于开展高通量基因测序技术临床应用试点单位申报工作的通知》（以下简称《申报通知》）因果呼应。
从发布申请通知，到公布审批名单，时隔9个多月。
然而，我们发现本次发布的《试点名单通知》中存在诸多疑问。
本次公布为何第三方检验所比例如此之大，难道医疗机构在基因测序领域真的被国家否定了么？另外，为何只有三个专业，当初说的肿瘤诊断与治疗专业呢？国内最早开展的无创产前检测的公司贝瑞和康为何没有在本次公布的名单之列？等等疑问，我们通过对两次通知中内容的深度挖掘，找出这些疑问背后的故事。
首先，去年3月份发布的《申报通知》中明确描述“具有通过省级技术审核的临床基因扩增检验实验室的三级甲等综合医院，妇幼保健院，专科医院，医学检验所”都可以申报基因测序临床应用试点；本次公布的七所机构中，五所是第三方检验机构，同时另外两家医疗机构则集中在遗传病诊断专业。
胚胎植入前遗传学诊断名词解释
胚胎植入前遗传学诊断名词解释1. 胚胎植入前遗传学诊断概述胚胎植入前遗传学诊断（Preimplantation Genetic Diagnosis, PGD）是一种在试管受精（体外受精）胚胎发育到培养囊胚阶段前，对胚胎进行遗传学分析和筛查的技术。
通过PGD，可以获得胚胎的遗传信息，以便筛查某些遗传病、染色体异常或遗传性疾病的携带者。
PGD通常结合辅助生殖技术，如体外受精（IVF），旨在选择出健康的胚胎用于胚胎植入。
2. PGD的应用范围2.1 遗传病筛查•单基因病筛查：通过对胚胎进行遗传学诊断，可以检测出携带有单基因遗传病的胚胎，如囊胞性纤维化等。
携带有遗传病基因的胚胎可以被排除，以减少疾病遗传给下一代的风险。
•染色体异常筛查：染色体异常是导致胚胎停育、流产和先天性异常的主要原因之一。
通过PGD，可以检测出染色体异常的胚胎，并选择正常的胚胎进行植入，提高妊娠成功率。
2.2 染色体易位和平衡易位携带者筛查•对于染色体易位或平衡易位携带者，他们自身可能没有明显疾病症状，但易位染色体的组合可能会导致异常的胚胎发育，增加流产风险。
PGD可以帮助筛查携带易位染色体的胚胎，选择正常胚胎以减少流产的风险。
2.3 个性化医学•除了遗传病筛查外，PGD还可以用于选择具有特定基因型的胚胎，以满足父母的个人需求。
例如，一些夫妇可能希望选择具有特定基因特征的胚胎，如造血干细胞移植所需的HLA配型相匹配的胚胎。
3. PGD的技术原理和流程3.1 胚胎植入前的胚胎活检技术•PGD通常需要在体外受精后的囊胚阶段进行胚胎活检。
胚胎活检可以通过取出囊胚的一小部分细胞进行遗传学分析。
3.2 全基因组扩增技术（Whole Genome Amplification, WGA）•WGA是一种将少量胚胎细胞的基因组DNA扩增到足够数量进行遗传学分析的技术。
常用的WGA方法包括PCR和多位点连锁扩增（Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification, MLPA）。
高通量基因测序产前筛查与诊断技术规范(试行)
高通量基因测序产前筛查与诊断技术规范（试行）为规范高通量基因测序产前筛查与诊断技术临床应用工作，制定本规范。
该规范主要包括高通量基因测序产前筛查与诊断的适用范围、临床服务流程和质量控制等内容。
第一部分适用范围一、适用目标疾病根据目前技术发展水平，高通量基因测序技术在产前筛查与诊断领域适用的目标疾病为常见胎儿染色体非整倍体异常（即21 三体综合征、18 三体综合征、13 三体综合征）。
二、适用时间高通量基因测序产前筛查与诊断时间应当为12+0-26+6周，最佳检测时间应当为12+0-26+6周。
三、适用人群（一）血清学筛查、影像学检查显示为常见染色体非整倍体临界风险（即1/1000≤唐氏综合征风险值<1/270，1/1000≤18 三体综合征风险值<1/350）的孕妇。
（二）有介入性产前诊断禁忌证者（先兆流产、发热、有出血倾向、感染未愈等）。
（三）就诊时，患者为孕20+6周以上，错过血清学筛查最佳时间，或错过常规产前诊断时机，但要求降低21 三体综合征、18 三体综合征、13 三体综合征风险的孕妇。
四、慎用人群有以下几种情形的孕妇属于慎用人群，即在该人群中本检测的筛查效果较适用人群有一定程度下降，即筛查的检出率下降，假阳性及假阴性率上升，或已符合介入性产前诊断的指征，知情后拒绝直接选择介入性产前诊断的孕妇。
包括：（一）产前筛查高风险，预产期年龄≥35 岁的高龄孕妇，以及有其他直接产前诊断指征的孕妇。
（二）孕周<12 周的孕妇。
（三）高体重（体重>100 千克）孕妇。
（四）通过体外受精-胚胎移植（以下简称IVF-ET）方式受孕的孕妇。
（五）双胎妊娠的孕妇。
（六）合并恶性肿瘤的孕妇。
五、不适用人群（一）染色体异常胎儿分娩史，夫妇一方有明确染色体异常的孕妇。
（二）孕妇1 年内接受过异体输血、移植手术、细胞治疗或接受过免疫治疗等对高通量基因测序产前筛查与诊断结果将造成干扰的。
（三）胎儿影像学检查怀疑胎儿有微缺失微重复综合征或其他染色体异常可能的。
胚胎植入前遗传学诊断筛查技术专家共识
‘中国产前诊断杂志(电子版)“ 2018年第10卷第2期㊃视频导读㊃P G S 在高龄㊁反复自然流产反复种植失败患者中的临床应用孙晓溪(复旦大学附属妇产科医院上海集爱遗传与不育诊疗中心)随着辅助生殖在实验室技术方面不断地革新,临床医生也需要重新评估新的诊断治疗方法㊁适应新的技术潮流从而获得更好的临床结局㊂其中,植入前遗传学筛查(p r e i m pl a n t a t i o n g e n e t i c s c r e e n i n g ,P G S )技术就在近年来获得了极大的关注㊂P G S 又可以称为是P G T-A ,其中文全称是植入前胚胎非整倍体筛查或植入前胚胎遗传学筛查,是指在辅助生殖技术中进行胚胎染色体数目的筛查㊁选择染色体正常的胚胎植入,被应用于自身核型正常但胚胎出现遗传异常风险较高的妇女,以期降低流产率㊁增加活产率,该技术也称为 升级版的第三代试管婴儿㊂今天,就让我们跟随来自复旦大学附属妇产科医院的孙晓溪教授一起来探讨一下P G S 临床应用的情况㊂D O I :10.13470/j .c n k i .c j pd .2018.02.016胚胎植入前遗传学诊断/筛查技术专家共识徐晨明(上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院)植入前胚胎遗传学诊断技术(p r e i m p l a n t a t i o n g e n e t i cd i a g n o -s i s ,P G D )是对胚胎或卵子行卵裂球/滋养层细胞或极体活检,作染色体和(或)基因学检测,将无疾病胚胎植入子宫妊娠,并出生正常子代的技术㊂该技术于1990年由H a n d y s i d e 教授首次应用于性连锁疾病诊断㊂植入前遗传学筛查(p r e i m p l a n t a t i o n g e n e t i cs c r e e n i n g ,P G S )又称 低风险 P G D ,是指对体外受精形成的胚胎进行染色体非整倍体分析,选择无遗传学异常的胚胎植入宫腔,以提高临床妊娠率㊁降低流产率和出生缺陷㊂在今年刚举办的 第八届中国胎儿医学大会 上,来自上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院的徐晨明教授就P G D ㊁P G S 的适应证㊁工作流程等内容做了详尽的讲解㊂D O I :10.13470/j .c n k i .c j p d .2018.02.01775。
如何使用高通量技术对基因进行筛查
如何使用高通量技术对基因进行筛查随着现代生物技术的发展，DNA测序技术不断推陈出新。
现在，高通量测序技术已经成为了基因测序的主流。
高通量测序技术可以高效、精准、快速地进行基因测序，大大提高了我们对基因的认识和研究。
在本文中，我们将探讨如何使用高通量技术对基因进行筛查。
一、高通量测序技术的基本原理高通量测序技术是指在同一时间内进行大量的DNA分析，通过扩大分析范围，来加速DNA序列的测定速度和降低成本。
根据测序原理的不同，高通量测序技术有以下几种：1.链终止法：该方法是1986年由斯里兰卡的谢科尔斯基组研发出来的。
该方法需要使用标记有不同荧光染料的4种dNTP（即ATCG），在DNA合成过程中加入。
DNA链延伸到有某个dNTP的位置后，该荧光染料就会释放出荧光信号标记位置的碱基。
通过监测这些荧光信号，就可以突破测序速度和通量的瓶颈。
2.桥接PCR法：该方法是将DNA片段接到测序板上，然后通过PCR反应来产生许多DNA链，最后进行荧光检测。
该方法能在不断增加测序片段的同时，也能提高质量、稳定性和重复性。
3.扩增桥接法：该方法是将DNA片段连接成桥，并逐一地进行扩增。
可形成数百万个DNA片段，然后通过荧光标记的方法检测DNA片段测序。
4.纳米孔法：该方法是利用原子层沉积技术在纳米空间中制备出纳米孔。
DNA分子通过这些孔，来逐个被检测和测序。
五、如何使用高通量技术对基因进行筛查1.基因组测序：基因组测序是高通量测序技术的主要应用之一。
该技术可以对整个基因进行测序，包括所有编码和非编码区域。
通过比较两个不同人的基因组序列，我们可以找到其差异，从而帮助我们理解人类基因的多样性和基因在足迹中的重要性。
2.转录组测序：转录组是指在一个特定细胞或组织的基因表达水平。
通过利用转录组测序技术，我们可以得到组织中所有表达的核糖核酸序列，从而研究基因的表达模式和功能。
3.外显子组测序：外显子是基因组中的编码蛋白序列的区域。
胚胎植入前遗传学诊断和筛查的研究进展
胚胎植入前遗传学诊断和筛查的研究进展刘茜桐;田莉;师娟子【期刊名称】《中国妇幼健康研究》【年(卷),期】2016(027)001【摘要】胚胎植入前遗传学诊断（ PGD）和筛查（ PGS）是近年来发展的植入前遗传学检测（ PGT）方法。
PGD主要适用于父母携带基因突变或染色体平衡易位，通过体外受精，在胚胎移植前检测特定的突变以及非平衡染色体异常是否传递到卵子或胚胎。
PGS是运用相同的检测方法检测胚胎染色体非整倍性，通过移植正常的胚胎从而提高妊娠率。
PGD／PGS相关检测技术发展日新月异，传统FISH技术逐渐被取代，更多的新技术也在研发中。
但是，PGD／PGS仍存在费用昂贵，无法检测所有胚胎异常等不足之处。
该文综述PGD／PGS相关进展和PGD／PGS 所存在的问题。
【总页数】4页(P123-126)【作者】刘茜桐;田莉;师娟子【作者单位】西北妇女儿童医院，陕西西安710000;西北妇女儿童医院，陕西西安710000;西北妇女儿童医院，陕西西安710000【正文语种】中文【中图分类】R715.5【相关文献】1.胚胎植入前遗传学诊断和筛查的研究进展 [J], 张静;吕睿;吕永焕;宋学茹;赵晓徽2.胚胎冻融对卵裂期行植入前遗传学诊断或筛查后可移植胚胎临床结局的影响 [J], 石碧炜;崔龙;叶晓群;叶英辉3.胚胎植入前遗传学诊断与筛查实验室技术指南 [J], 张宁媛;张松英;黄学锋;伍琼芳;全松;周灿权;周从容;师娟子;孙莹璞;孙海翔;黄国宁;范立青;冯云;沈浣;刘平;卢文红;张云山;王秀霞4.胚胎植入前遗传学诊断/筛查技术专家共识 [J], 徐晨明5.16例中途胚胎植入前遗传学诊断/筛查病例报道及文献复习 [J], 柏海燕;师娟子因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
2024胚胎植入前遗传学检测技术临床风险防范指标要点(全文)
2024胚胎植入前遗传学检测技术临床风险防范指标要点（全文）摘要植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing，PGT）技术在近年来迅猛发展，随之而来的是在临床应用时可能存在的问题和风险。
我们需要重视PGT的相关临床风险，从PGT适应证的遗传风险评估、疾病本身对于卵巢功能的影响、控制性促排卵强度的控制，以及遗传性肿瘤易感基因携带者的促排卵风险等多个环节进行风险防范，以提高PGT技术的安全性、有效性。
【关键词】植入前遗传学检测；风险指标；防范随着辅助生殖技术临床开展规模的扩大，以及细胞及分子遗传学诊断技术的快速发展，胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing，PGT）技术迎来了快速的增长和发展，但技术在临床应用时还存在诸多问题。
PGT是一个多环节、复杂流程、环环相扣的治疗过程，涉及不同学科的不同领域，如临床生殖内分泌学、胚胎学、分子遗传学等，有多个涉及到临床风险的关键点，需要加以防范。
本文就PGT技术在临床实践中的风险进行分析，提出临床风险防范指标，以保障PGT技术的临床安全性、有效性。
一.PGT适应证相关的遗传风险评估根据PGT的适用范畴，PGT可分植入前单基因遗传病检测（PGT for monogenic/single gene defects，PGT-M）、植入前染色体结构重排检测（PGT for chromosomal structural rearrangements，PGT-SR）和植入前非整倍体检测（PGT for aneuploidies，PGT-A）［1-4］。
规范PGT前的遗传咨询，评估其遗传风险，必要时进行多学科会诊（multidisciplinary consultation，MDT）有利于降低PGT适应证不明确带来的临床风险。
PGT-A适应证包括高龄、复发性流产和反复种植失败等，主要的遗传风险与女方年龄、不良孕产史等相关，不在此赘述。
胚胎植入前遗传学诊断课件
单 PGD/PGS的流程与相关技术
关键技术
ICSI技术 囊胚培养 ③囊胚活检
①极体活检 ②单卵裂球活检
固定、FISH 检测 全基因组扩增
囊胚冷冻
微量细胞遗传学检测
正常胚胎移植
关键技术①：胚胎活检技术
极体活检
单卵裂球活检
囊胚活检
讨论：极体活检vs囊胚活检？
关键技术②：囊胚玻璃化冷冻
冷冻胚胎库
关键技术③： 单细胞全基因组扩增技术
活检细胞移入EP管
全基因组扩增 全基因组扩增产物
关键技术④： 对全基因组扩增产物的全基因组测序
关键技术⑤： SNP芯片技术
二、植入前遗传学诊断和筛查的临床应用
CHI NA’S P US H
极体活检
• 活检第一极体和第二极体，检测母源性的染色体结构异 常或基因突变，以及减数分裂异常造成的染色体非整倍 体。
• 优点：对卵母细胞的发育没有影响。 缺点： 只能检测母源性的染色体异常； 不能检测受精后发生的染色体异常； 可检测细胞数少，易发生检测失败。
卵裂球活检
• 在D3胚胎发育到6-10细胞时活检出1-2个卵裂球，进行遗
nullisomy 21 Nullisomy 14 disomy 21
首例FISH-PGD（2003年）：罗氏易位
PGD 分类
高风险PGD (Preimplantati on genetic diagnosis， PGD)
低风险PGD (preimplantation genetic screening， PGS)
PGD/PGS逐渐被PGT取代
• PGT (Preimplantation Genetic testing)：是一个广 义的术语，指在胚胎植入前，利用显微技术和DNA分 析技术对胚胎的染色体异常进行检测，选择正常的胚 胎植入。
PGD：植入前遗传学诊断技术
PGD：植入前遗传学诊断技术植入前遗传学诊断(Preimplantation Genetic Diagnosis, PGD) 技术可以为患者选择没有遗传缺陷的胚胎进行植入，从而避免后代发生某些遗传病的风险。
PGD可以筛查多种疾病，包括染色体病、单基因遗传病和性连锁疾病，比如常听说的血友病、地中海贫血病等疾病。
PGD的作用* 可以诊断超过100遗传性疾病的能力* 可以确定胚胎的质量优劣* 可以降低自然流产的风险PGD的重要性基因诊断对高龄女性是非常重要。
基因检测可以帮助降低自然流产的风险，同时提高活产率。
通过PGD，我们取出1个卵裂球，然后会进行染色体或基因鉴定。
如果有染色体异常，我们就不会选择此胚胎植入到子宫。
PGD的安全性SCRC中心专家提示，现在在美国，所有的胚胎养到5天成囊胚的时候取外围滋养层的细胞去做PGD的筛查。
养成囊胚之后已经分裂出了很多细胞，因此取滋养层细胞去做筛查并不会影响胚胎的质量。
为什么要做PGD？对于染色体结构或数目有问题的病人，在试管婴儿助孕时，我们会建议病人采用PGD 技术，对胚胎进行筛选，挑选染色体正常的胚胎植入宫腔，但大多数病人对PGD缺乏了解，在助孕过程中疑虑重重，在此简单介绍下PGD。
首先，采用PGD技术助孕的病人，需要进行常规试管婴儿过程，包括促排卵、取卵，卵子受精，胚胎卵裂，然后在胚胎形成囊胚后，对囊胚的滋养外胚层细胞进行活检取样，提取细胞的DNA进行芯片检测，待芯片检测结果回示后，挑选正常的胚胎移入子宫腔中。
PGD 可在孕前阶段杜绝X-连锁隐性遗传病、染色体病和基因病患儿的妊娠，避免人工流产终止异常妊娠给广大妇女的身心痛苦。
理论上还可减少遗传病在人群中的遗传负荷，从而是遗传性病防治的重要手段，也是Edwards获诺贝尔奖的理由之一。
染色体异位携带者的PGD？染色体易位(Translocation)是一种染色体结构异常，指一条染色体的一段转移到同一条或另一条染色体上，导致易位片段基因的重排，是临床上较为常见的一种染色体结构重排异常，在新生儿中发病率约0.2%。
高通量测序技术临床应用的质量管理与标准化(李金明)
高通量测序技术临床应用的质量管理与标准化李金明国家卫生计生委临床检验中心全国cfDNA检测标准化高峰论坛2016.11.23-24 长沙基因测序技术的发展●1953年：DNA双股螺旋的发现（英国剑桥大学James Watson 和Francis Crick ）●1965年：酵母tRNA测序（美国Comell大学Rober Holley，小片段重叠法）●1971年：λ噬菌体两个粘性末端的完整序列（吴瑞博士，华裔分子生物学专家，引物延伸测序）●1975年：加减法DNA测序（英国剑桥大学Fred ）●1977年：Sanger测序（英国剑桥大学Fred Sanger）和Maxam-Gillbert DNA化学降解法测序(美国哈佛Alan Maxam &Walter Gilbert）●1996年：焦磷酸测序（瑞典皇家技术研究所Ronaghi M等）●2005年:Genome Sequencer20新一代测序仪(大规模并行焦磷酸合成测序法，454life Science公司的创始人Jonathan Rothberg)●2007年:454、Solexa公司和Agencourt（SoliD测序仪）公司分别被Roche、illumina和ABI公司收购。
新一代测序技术（next-generation sequencing）2007年被Nature Methods评为生物领域影响力最大的技术精准医学不等于高通量测序高通量测序是目前精准医学实践最为成熟的支撑技术高通量测序技术的临床应用●染色体非整倍体无创产前筛查（NIPT）●胚胎植入前遗传学筛查（Preimplantation GeneticScreening，PGS）和胚胎植入前基因诊断（Preimplantation Genetic Dignosis，PGD）●肿瘤靶向治疗基因突变检测●单基因遗传病检测●病原微生物检测：如HPV基因分型、宏基因组（Metagenomics）测序●┈┈高通量测序技术临床应用的质量管理与标准化●国家卫生计生委医政医管局高通量测序临床应用试点实验室：评审标准、评审、试点实验室基本要求、管理试点实验室●2015年增加质评调查：全国肿瘤诊断与治疗高通量测序检测●2016年新增质评计划：染色体非整倍体（21、13、18）无创产筛●2016年质评调查：肿瘤游离DNA（ctDNA）检测●2017年正式开展：全国肿瘤基因突变高通量测序（组织样本）检测质评计划批准的第一批四个专业的试点单位全面质量管理？●写你所应做的●做你所写的●记录你已做的●分析你已做的以ISO的标准如ISO15189为标志的！标准化？标准化是对实际与潜在的问题作出统一规定，供共同和反复使用，以在预定的领域内获取最佳秩序和效益的活动。
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一、适应证和禁忌证
１．适应证：（１）高通量测序PGD的适应证：包括多种遗传疾病如基因性疾病、非平衡的染色体结构异常、染色体数目异常，以及染色体微小片段插入、缺失与重复等；（２）高通量测序PGS的适应证：自然流产≥3次、或2次自然流产且其中至少１次流产物检查证实存在病理意义的染色体或基因异常的患者，反复种植失败（移植优质胚胎３次及以上，或移植不少于10个可移植胚胎）的患者，也可用于>38岁的高龄且需要采用辅助生殖技术的患者。
４．机构可根据自身条件独立开展本项检测，也可择优与经卫生行政管理部门批准的高通量测序技术临床应用于胚胎植入前遗传学诊断的试点或正式运行的医学检验机构签订合作进行本项检测的服务协议，将测序交由对方进行。
（１）独立开展本项检测的机构，必须采取必要措施保证本项技术的质量并定期进行评价，按本规范开展工作。
（２）与上述合作医学检验机构在本机构内共建联合实验室或交由上述合作方进行本项检测的医疗机构，由双方合作开展本项技术。医疗机构与合作方须签订合作协议，明确双方权责：
二、设备条件
机构须具备细胞遗传学实验诊断的设备和上述第一部分第一条第３款所要求的相应设备。在此基础上，机构应同时具备专业的高通量测序技术相应的核心设备（如与第三方合作可由第三方提供），该设备由经卫生行政管理部门批准试点或正式开展高通量测序技术临床应用的单位生产。各种设备的种类、数量须与实际开展的项目及工作规模相匹配。
①对外合作的医疗机构必须是符合本规范第一部分基本要求所规定的医疗机构；
②医疗机构负责临床医疗行为，包括病例的筛选、PGD/PGS方案的确定、检测前的咨询、签署知情同意书、样本采集、报告签署和发放、结果解释、临床处理、质量评价、医疗风险管理等；
③与医疗机构合作的医学检测机构负责提供有效的检测技术，包括检测技术平台的建设、技术人员的培训、技术支持、检测的质量控制、提供检测结果及其解释等；
３．实施本项技术的专业技术人员中２人（其中１人可来自第三方合作机构）以上必须具备专业的生物信息学、检测结果分析与判读的知识和能力。
四、场所条件
１．具有符合PCR诊断实验室标准的PGD专用的实验场所，包括了省临检中心的审查，获得“临床基因扩增检验实验室技术验收合格证书（PCR证书）”；
２．机构必须预先认真查验接受本项技术的夫妇的身份证、结婚证，备案其纸质复印件，并取得接受本项技术的夫妇对于遵守国家人口和计划生育法规和条例规定的书面承诺的原件；涉外婚姻夫妇及外籍人员应出示护照及婚姻证明并备案其纸质复印件；
３．机构必须制定并严格实施避免非医学指征性别诊断的措施，杜绝非医学指征的性别鉴定。除性染色体存在有病理意义异常的病例，本项检测报告发布时必须隐去性别的检测结果。机构必须制定详细、可操作的在可用胚胎中选择移植胚胎的标准及其操作程序。选择移植胚胎的结论须由除遗传检测相关人员以外的临床正高职称一名和胚胎培养室副高职称以上的一名专业人员共同签署相同的意见。移植胚胎妊娠分娩或失败后凭相关资料及中心负责人签署的意见追溯所移植胚胎的性别诊断结果并在病案和数据库中记录；
２．胚胎活检场地布局合理，符合辅助生殖技术胚胎培养室的洁净要求；
３．工作场所须符合医院建筑安全要求和消防要求，保障水电供应。各工作场所应具备必要的消毒和空气清洁设施。
组织管理
一、高通量测序PGD/PGS的组织管理
１．实施本项技术的医疗机构及其人员，必须遵守国家人口和计划生育法规和条例的规定，并与患者签署《高通量测序技术进行PGD/PGS知情同意书》和《高通量测序技术进行PGD/PGS妊后随访和接受产前诊断知情同意书》；
高通量基因测序植入前胚胎遗传学诊断和筛查技术规范
根据国家卫生和计划生育委员会发布的《关于辅助生殖机构开展高通量基因测序植入前胚胎遗传学诊断临床应用试点工作的通知》要求，特制定《高通量基因测序植入前胚胎遗传学诊断技术规范（试行）》（以下简称“本规范”）。本规范针对“高通量基因测序技术在人类胚胎植入前遗传学诊断(pre-im-plantation genetic diagnosis,PGD)和植入前遗传学筛查(pre-implantation genetic screening,PGS)的临床应用”（以下简称“本项技术”），明确开展本项技术的基本条件、组织管理、临床流程与质量控制等方面的基本要求。在人类PGD/PGS的临床应用中采用高通量基因测序技术（以下称本项检测）的机构须遵守本规范。
二、定期报告
实施本项技术的医疗机构必须定期进行自查，定期将实施本项技术的工作量及其结果和各项技术指标包括高通量测序的检出率、阳性率、阴性率和误诊率等数据上报卫生行政管理部门指定的相关部门或机构。
三、定期评估
机构必须接受卫生行政管理部门组织的专家组对本项技术实施的指导、监督和对各机构的质量控制、场所、设备、试剂、人员、技术、检测方案、检测效果、管理制度的执行等事项的定期评估，执行根据评估情况提出的调整或改进的建议，以及暂停、终止机构实施本项技术的意见。
④医疗机构负有对合作的检验机构的资质、场所、设备、人员、技术等条件和检测能力进一步核实的责任，合作的检验机构须无条件提供有关材料并配合该项核实工作。合作的检验机构须建立有效可行的措施保障本项检测的质量；双方应定期对此进行评价，并按本规范开展工作。
５．如卫生行政管理部门指定机构进行本检测技术的实验室间比对等质量控制工作，各机构须予以全面配合，其质控结果应定期上报卫生行政主管部门指定的相关部门或机构。
基本条件
一、机构设置条件
１．本项技术须在医疗机构实施；
２．该医疗机构必须是经省级医疗行政管理部门批准正式并规范运行体外受精－胚胎移植技术、卵胞浆内单精子注射技术和植入前遗传学诊断技术且是实施本项技术的试点或正式运行单位（以下简称“机构”）；
３．机构须具有省级临床检验行政管理部门审批核发的临床基因扩增检验实验室资质，相关工作开展符合《临床基因扩增检验实验室工作规范》的规定。
三、人员条件
１．实施本项技术的医疗机构必须建立与本项检测工作相适应的专业技术人员团队。其中包括：具备从事产前诊断技术资质的副高职称以上的临床医师2名以上（含2名，下同）；具备临床检验资质的中级职称以上的实验室技术人员１名以上；具备医学、生物学或遗传学本科及以上学历的专业技术人员3名以上；
２．实施本项检测工作的专业技术人员必须具有临床基因扩增检验实验室技术人员上岗培训合格证；