实验一 普通光学显微镜
实验一 普通光学显微镜的使用和细菌形态观察
实验一普通光学显微镜的使用和细菌形态观察一、实验目的1．了解普通光学显微镜的构造和原理。
2．学习并掌握普通光学显微镜——油镜的使用方法。
3．利用油镜观察细菌的形态和构造。
二、实验原理微生物学研究用的普通光学显微镜通常有低倍物镜（16mm，10×）高倍物镜（4mm，40-45×）和油镜（1.8mm，95-100×）三种。
油镜常标有黑圈或红圈（或白圈），它是三者中放大倍数最大的。
使用油镜时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间，不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。
这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n＝1.52，与玻璃基本相同。
当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系；当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样视野的照明度就减低了（图Ⅰ-1）。
图Ⅰ-1油镜的原理图Ⅰ-2 镜口角利用油镜不但能增加照明度；更主要的是能增加数值口径。
因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度（称镜口角）的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积，可用下列公式表示：NA=nsinθ数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据；分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。
可分辨两点之间的最小距离=λ/2NA＝λ/2nsinθ式中λ：所用光源波长；θ：为物镜镜口角的半数，取决于物镜的直径和工作距离。
n：玻片与物镜间介质的折射率，空气（n=1.0）、水（n=1.33）、香柏油（n=1.52）、玻璃（n=1.52）等。
nSinθ：数值孔径（NA），是决定物镜性能的最重要指标。
由上述可知若n值和α角越大则NA越大或光波波长越短，则显微镜的分辨力越大（图Ⅰ-2）。
三、实验器材1．仪器：显微镜。
2．材料：标本片（大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、八叠球菌、炭菌杆菌的芽孢和荚膜、细菌三形涂片），香柏油，二甲苯，擦镜纸等。
实验一细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用
实验一细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用引言：细胞是生命的基本单位，具有复杂的结构和功能。
观察细胞的形态结构对于深入了解生命的本质和进行生物学研究至关重要。
本实验的主要目的是通过使用普通光学显微镜观察和学习细胞形态结构的观察方法。
一、实验方法1.收集样本：从鲜植物叶片中切取小型组织样本，并将其放入显微片中。
2.准备显微片：在显微片上滴加一滴蒸馏水，然后放置样本在蒸馏水上。
3.制备盖片：将一个玻璃盖片轻轻放置在样本上方。
4.准备显微镜：打开普通光学显微镜，并将显微镜调整到最佳聚焦状态。
5.放置显微片：将显微片放入显微镜的样本托盘中，并将其轻轻固定。
6.观察样本：通过调节目镜的焦距和光源的亮度，观察样本并记录所见。
7.绘制图表：根据观察结果，绘制细胞形态结构图表。
二、实验结果1.观察细胞膜：通过放大镜镜头观察细胞膜，可以看到细胞膜呈现出一个薄膜状的结构。
细胞膜起着维持细胞形态和保护细胞内部结构的作用。
2.观察细胞核：通过调整镜头的焦距和光源的亮度，可以清晰地观察到细胞核在细胞质中的位置。
细胞核通常呈圆形或卵圆形，具有较深的染色质和一个明亮的核仁。
3.观察细胞质：细胞质是细胞核周围的液体，其中包含着细胞器如线粒体、内质网、高尔基体等。
通过调整显微镜的焦距和光源的亮度，可以清楚地看到这些细胞器。
4.观察细胞壁：在观察植物细胞时，可以通过增加显微镜的放大倍数来观察到细胞壁。
细胞壁是细胞外的一个多层结构，可以提供细胞的支持和保护。
三、实验讨论1.细胞形态结构的观察需要适当的样本处理：使用新鲜的样本可以提供更清晰的显微观察结果，因此，在进行实验前最好收集到新鲜的细胞样本。
2.调整显微镜的焦距和光源亮度是关键：观察细胞结构需要将显微镜调整到最佳的聚焦状态，并调节光源的亮度，以确保能够看到细胞结构的细节。
3.多个角度观察样本可以提供更全面的结果：在实验中，可以从不同的角度观察样本，以获得更全面的细胞形态结构信息。
普通光学显微镜实训报告
一、实验目的1. 了解普通光学显微镜的构造及工作原理。
2. 掌握普通光学显微镜的使用方法及操作技巧。
3. 通过观察细胞结构，加深对生物学知识的理解。
二、实验原理普通光学显微镜是利用光学原理，通过放大物体来观察微观世界的仪器。
它主要由光学系统和机械系统组成。
光学系统包括物镜、目镜和光源，机械系统包括载物台、粗细准焦螺旋等。
三、实验仪器与材料1. 仪器：普通光学显微镜、载物台、粗细准焦螺旋、光源等。
2. 材料：细胞样品、载玻片、盖玻片、碘液等。
四、实验步骤1. 显微镜的组装与调整- 将显微镜放置在平稳的桌面上，调整光源，确保光线充足。
- 组装显微镜，包括放置物镜、目镜、光源等。
- 调整粗细准焦螺旋，使镜筒垂直于载物台。
2. 载玻片的制作- 取载玻片和盖玻片，用软布擦拭干净。
- 用滴管吸取1-2滴清水，滴在载玻片中央。
- 用镊子撕取细胞样品一小片，置于载玻片上的水滴中。
- 用镊子夹取盖玻片，以45°角慢慢放下，避免产生气泡。
3. 观察与操作- 将载玻片放置在载物台上，调整粗细准焦螺旋，找到物像。
- 逐渐降低粗准焦螺旋，观察细胞结构。
- 调整细准焦螺旋，使物像更加清晰。
- 更换不同倍数的物镜，观察不同倍数的细胞结构。
4. 绘图与记录- 观察细胞结构，记录观察结果。
- 根据观察结果，绘制细胞结构图。
五、实验结果与分析1. 观察到细胞的基本结构，包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。
2. 通过不同倍数的物镜，观察到细胞的不同细节，如细胞器的形态、分布等。
3. 绘制细胞结构图，加深对细胞结构的理解。
六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了普通光学显微镜的使用方法及操作技巧。
2. 加深了对细胞结构的理解，提高了生物学知识水平。
3. 认识到显微镜在生物学研究中的重要作用。
七、注意事项1. 操作显微镜时，要保持双手干净，避免污染显微镜。
2. 使用显微镜时，注意光线调节，避免光线过强或过弱。
3. 观察细胞结构时，要耐心细致，避免急躁。
微生物学 实验1 普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察
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一、实验目的
ß 了解显微镜的构造和各部分的作用，掌握 显微镜的使用方法 ß 学习并掌握油镜的原理和使用方法 ß 了解并观察细菌的三种基本形态
一、普通光学显微镜的基本结构
机械部分和光学部分 普通光学显微镜的构造可分为两部分：
高倍镜的操作
1. 转换物镜。旋动转换器将低倍镜换成高倍镜（注意： 在转换物镜时要从侧面观察，以防镜头与标本片相撞， 如果高倍镜触及标本片，应立即停止旋转，并重新用 低倍镜调焦）；
2. 调焦。调节光圈，使光线亮度合适，再调节细准焦螺 旋直至目的物清晰；
3. 观察。移动推动器，找到合适的目的物，并移至视野 的中心进行观察。
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实验一普通光学显微镜的构造和使用[详细讲解]
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实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。
2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。
3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。
二、显微镜的基本构造显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成（图1-1）。
光学显微镜的构造(图1-1)1. 物镜转换器2. 接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6. 彩虹光阑7.光源8. 镜座9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋1．机械装置镜座（base）和镜臂（arm）镜座位于显微镜底部，呈马蹄形，它支持全镜。
镜臂有固定式和活动式两种，活动式的镜臂可改变角度。
镜臂支持镜筒。
镜筒（body tube）是由金属制成的圆筒，上接目镜，下接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种，单筒又可分为直立式和后倾式两种。
而双筒则都是倾斜式的，倾斜式镜筒倾斜45°。
双筒中的一个目镜有屈光度调节装置，以备在两眼视力不同的情况下调节使用。
转换器（no sepiece）为两个金属碟所合成的一个转盘，其上装3—4个物镜，可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。
载物台（stage）又称镜台，为方形或圆形的盘，用以载放被检物体，中心有一个通光孔。
在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹，用以固定标本；有的装有标本推动器，将标本固定后，能向前后左右推动。
有的推动器上还有刻度，能确定标本的位置，便于找到变换的视野。
调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件，有粗动螺旋（coarse adjustment）即粗调节器和微动螺旋（fine adjustment）即细调节器，利用它们使镜筒或镜台上下移动，当物体在物镜和目镜焦点上时，则得到清晰的图像。
2．光学系统物镜（objective）物镜安装在镜筒下端的转换器上，因接近被观察的物体，故又称接物镜。
其作用是将物体作第一次放大，是决定成像质量和分辨能力的重要部件。
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五、实验结果
绘图，记录所观察到的细菌三种 基本形态。
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六、问题与讨论
1、使用高倍镜与油镜调焦时应注意什么？ 2、使用油镜时，在载玻片和镜头之间加滴 什么油？起什么作用？ 3、什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观 察中有什么意义？
下次实验：细菌简单染色法与革兰氏染色法
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3.根据使用者个人情况，调节双目显微镜的目镜
双目显微镜的目镜间距可以适当调节，使其与观察者两个眼睛瞳
孔的距离相符。
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（二）显微观察
1.低倍镜观察
将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标 本移动螺旋，使目的物处于物镜的正下方。
调节粗调螺旋，使物镜（10×）与标本靠近，眼 睛在侧向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。
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三、实验器材
显微镜、擦镜纸、双层瓶（香柏油、二甲 苯）等。
细菌三型标本片（球菌、杆菌、螺旋菌）
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四、操作步骤
（一）观察前的准备
1.取镜和安放
置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为3~4cm。镜 检者姿势要端正。
2.光源调节
安装在镜座内的光源灯可通过调节电流或电压来获得适当的照明 亮度，使视野内的光线均匀，亮度适宜。
光学系统由目镜、物镜、聚光器、光源、滤 光片、虹彩光圈等组成
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普 通 光 学 显 微 镜 基 本 构 造
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油镜的工作原理
滴加镜油的作用 （1） 增加照明亮度 （2） 增加显微镜的分辨率
分辨率（最小可分辨距离）=λ/2NA
式中λ=光波波长 ； NA=物镜的数值孔径值
NA= n·sin(α/2 )
以保证光洁度 3.观察标本时，必须依次用低、高倍镜，最后
实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察PPT课件
对未来学习的展望
01
深入学习微生物学
本次实验让我对微生物学产生了浓厚的兴趣，未来我将深入学习微生物
学的相关知识，了解更多关于细菌、病毒等微生物的特性、分类和应用。
02
探索微生物在自然界中的作用
微生物在自然界中发挥着重要作用，未来我将进一步探索微生物在生态
系统中的作用和意义，了解其在环境保护、生物防治等方面的应用。
分析并记录观察结果。
02
CHAPTER
普通光学显微镜的使用
显微镜的基本结构
物镜
将观察物象放大，同样有多种 倍率可选，如4X、10X、40X 等。
聚光镜
常有5X、 10X、40X等倍率选择。
载物台
放置和固定观察样本。
调焦旋钮
调节焦距，使物象清晰。
显微镜的操作方法
显微镜应存放在干燥、通风的 地方，避免阳光直射和高温。
03
CHAPTER
细菌三形的观察
细菌的形态分类
01
02
03
球菌
呈球形或近似球形，直径 一般在1μm左右。
杆菌
呈杆状或近似杆状，长度 一般在2-3μm，宽度在 0.5-1μm。
螺旋菌
呈弯曲的杆状或螺旋状， 长度一般在2-6μm，宽度 在0.3-0.6μm。
细菌的染色与观察
染色原理
利用染料与细菌细胞壁结 合，使细菌着色，以便在 显微镜下观察。
常用染色法
革兰氏染色、抗酸染色等。
观察方法
将染色后的细菌涂布在载 玻片上，盖上盖玻片，用 显微镜观察其形态和染色 情况。
细菌三形的观察实例
球菌
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等。
杆菌
大肠杆菌、结核分枝杆菌等。
实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察
实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察引言：显微镜是一种重要的生物学工具，能够放大物体，使我们能够观察到细小的结构。
其中，光学显微镜是最常见和广泛使用的显微镜之一、在本实验中，我们将学习使用普通光学显微镜，并观察细菌的三种形态。
材料和方法：1.准备细菌涂片。
准备一份细菌涂片，将其放在显微镜载片上。
2.放置载片。
将细菌涂片置于载片上，用显微镜夹子固定。
3.调整镜头。
在显微镜上选择合适的目镜和物镜，通常在使用40倍至100倍的物镜进行观察。
将镜头调整到最低位置，然后慢慢向上调整，直到能够看到细菌。
4.调整光源。
用光源照亮样品，然后通过调整光源的亮度和方向，使样品清晰可见。
5.调整焦距。
通过转动焦点调整器，使细菌变得清晰。
如果观察中出现模糊或扭曲的图像，重新调整焦距。
6.观察并拍照。
使用目镜和物镜逐步放大细菌，并观察它们的形态特征。
如果需要，可以使用相机拍摄细菌的图像以作进一步分析和记录。
结果：经过实验观察发现，细菌的形态分为以下三种：1.球形（球菌）：球形菌又称为球菌，其形状近似一个圆球。
球菌通常呈现出单个细胞独立生长的特点，例如葡萄球菌。
2.杆形（杆菌）：杆菌是一类细菌，其形状呈长棍状。
杆菌通常呈现出链状生长的特点，例如大肠杆菌。
3.螺旋形（螺旋菌）：螺旋菌的形状呈螺旋状。
螺旋菌有时会呈现出较长或较短的螺旋形态，例如鼠疫杆菌。
讨论：本实验使用普通光学显微镜观察了细菌的三种形态，即球形、杆形和螺旋形。
这些形态特征对于鉴定和分类细菌非常重要，因为形态可以反映细菌的生态和代谢特征。
球形细菌通常是在湿润的环境中生长并繁殖。
由于其小尺寸和圆滑的表面，球形细菌对于机体的作用较小，通常是人体正常菌群的一部分。
此外，一些病原细菌如葡萄球菌等也具有球形。
球形细菌在显微镜下通常呈圆形或椭圆形，并且可以在荧光显微镜下染色以增强可见性。
杆菌是一类常见的细菌，其形状与一根棍子类似。
杆菌通常生活在土壤、水体和生物体的表面。
实验一 普通光学显微镜的使用与生物绘图
实验一普通光学显微镜的使用与生物绘图【目的要求】1. 了解显微镜的构造和各部分的性能，学习并掌握正确的使用技术和保养措施；2. 学会制作临时装片、徒手切片的方法。
3．学会绘制生物图。
【材料和用品】显微镜、微藻培养液【实验内容与方法】（一）普通光学显微镜的基本构造、使用方法及保护1、显微镜的基本结构显微镜构造很复杂，种类很多，但基本结构是由机械和光学两大部分构成，现分述如下：1.1 机械部分它是为光学部分服务的部件，包括以下六部分：(1) 镜座：显微镜最下面呈马蹄形或圆形的部分，起稳定和支持显微镜作用。
(2) 镜柱：直立于镜座上的短柱，支持显微镜的其它部分。
(3) 镜臂：弯曲成马蹄形的部分，便于手持，下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节，可使镜臂倾斜，便于观察。
(4) 载物台：自镜臂下端向前伸出，放置标本用的平台，其中央有一个园孔，叫通光孔。
台上有一移动器（老式的左右各有一个压片夹），用以固定和移动标本。
(5) 镜筒：和镜臂上方连接的园筒部分。
有的显微镜镜筒内有一抽管，可适当抽长，一般长度是160-170mm。
镜筒上端装有目镜，下端有一个可转动的园盘，叫物镜转换器（或叫物镜旋转盘），其上装有2-4 个物镜。
(6) 调焦器：为镜壁上两种可转动的螺旋，一大一小，能使镜筒上下移动，调节焦距。
大的叫粗调焦器，升降镜筒较快，用于低倍镜对焦；小的叫细调焦器，升降镜筒较慢。
1.2 光学部分由接目镜、接物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。
(1) 接目镜：装于镜筒上方，由两组透镜构成，接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像。
接目镜上刻有5×，8×，10×，15×，25×等符号，表示放大倍数。
我们所观察到的标本的物像，其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。
如接物镜是10×，接目镜是8×，其物像的放大倍数是10×8＝80 倍。
实验一 普通光学显微镜的使用
实验一普通光学显微镜的使用一目的要求1．了解普通光学显微镜的各部分构造、性能和基本原理。
2．学会显微镜的正确使用方法，了解显微镜的维护和保养方法。
二显微镜的构造与成像原理（一）显微镜的构造包括机械部分和光学部分1．机械部分：镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、移动器、粗调节器和细调节器。
2．光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、反光镜。
(二）显微镜的成像原理显微镜的放大是通过透镜来完成的，单透镜成像具有像差，影响像质。
由单透镜组合而成的透镜组相当于一个凸透镜，放大作用更好。
（三）显微镜的性能显微镜分辨能力的高低决定于光学系统的各种条件。
被观察的物体必须放大率高，而且清晰，物体放大后，能否呈现清晰的细微结构，首先取决于物镜的性能，其次为目镜和聚光镜的性能。
三实验材料1．显微镜 1 台，载玻片数片，盖玻片数片。
2．细菌、霉菌、酵母菌标本片。
3．香柏油、二甲苯、察镜纸等。
四显微镜的操作及注意事项显微镜结构精密，使用时必须细心，要按下述操作步骤进行。
正确放置显微镜→调节光照→低倍镜观察→确定目标→高倍镜观察→油镜观察→镜头的维护操作要点：1．调节光照：不带光源的显微镜，可利用灯光或自然光通过反光镜来调节光照，但不能用直射阳光，直射阳光会影响物像的清晰并刺激眼睛。
将低倍镜转入光孔，将聚光器上的虹彩光圈打开到最大位置，用左眼观察目镜中视野的亮度，转动反光镜，使视野的光照达到最明亮最均匀为止。
光线较强时，用平面反光镜，光线较弱时，用凹面反光镜。
自带光源的显微镜，可通过调节电流旋钮来调节光照强弱。
2．低倍镜观察：镜检任何标本都要养成必须先用低倍镜观察的习惯。
因为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定检查的位置。
将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢升起镜筒（或下降载物台），直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰为止。
实验一普通光学显微镜的使用与细菌三形的观察
实验一普通光学显微镜的使用与细菌三形的观察摘要：本实验使用普通光学显微镜观察细菌的三种形态，包括球状细菌、杆状细菌和螺旋形细菌。
首先，通过镜片清洗和调焦操作，使显微镜准备就绪。
然后，通过移动物镜和镜身，找到适合观察的细菌样本。
最后，使用1000倍的放大倍数观察细菌样本，并记录下观察结果。
实验结果表明，普通光学显微镜可以有效地观察细菌的不同形态，并提供有关细菌结构的详细信息。
引言：显微镜是观察微小物体的重要工具之一、在生物学研究中，显微镜被广泛应用于观察细胞和微生物等微观结构。
本实验旨在使用普通光学显微镜观察细菌的三种形态，即球状细菌、杆状细菌和螺旋形细菌，并记录下观察结果。
方法和材料：本实验使用以下设备和试剂进行观察：1.普通光学显微镜：用于观察细菌样本。
2.清洗液：用于清洗显微镜镜片。
3.导轨：用于移动显微镜物镜和镜身。
实验步骤：1.清洗显微镜镜片：首先，取适量清洗液滴在镜片上，用棉纸轻轻擦拭，直到镜片干净为止。
2.调焦：将样本架置于显微镜平台上，调节光源的亮度，使用低倍物镜对准样本。
通过调节焦距，使样本清晰可见。
3.移动物镜和镜身：使用导轨移动物镜，找到适合观察的细菌样本。
然后，在适当位置上调整镜身，以便获得清晰的图像。
4.观察和记录：使用高倍放大倍数（1000倍）观察细菌样本。
注意细菌的形状、大小和结构，并记录下观察结果。
结果与讨论：本实验观察到了三种常见的细菌形态：球状细菌、杆状细菌和螺旋形细菌。
球状细菌：球状细菌是一种常见的细菌形态，其形状类似于小球。
观察时，可以看到多个球状细菌聚集在一起形成一个群体。
球状细菌的直径大约为1至2微米，通常由一个或多个细胞组成。
在高倍放大倍数下，可以通过显微镜清晰地观察到球状细菌的细胞壁和细胞质。
杆状细菌：杆状细菌是一种长形的细菌，其形状类似于棍子或柱子。
观察时，可以看到杆状细菌在显微镜视野中以不同的方向排列。
杆状细菌的长度通常为2至5微米，直径为0.5至1微米。
普通光学显微镜的使用实验报告
一、实验目的1. 掌握普通光学显微镜的使用方法；2. 了解显微镜的组成结构；3. 通过显微镜观察和比较不同材料的细胞形态和结构。
二、实验原理普通光学显微镜是利用光学原理对微小物体进行放大观察的仪器。
其基本原理是：将物体放置在物镜前方，通过物镜的放大作用，将物体成像于目镜，人眼通过目镜观察放大的图像。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶、酵母菌、细菌、植物叶片等；2. 实验仪器：普通光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、显微镜切片、显微镜专用清洁纸等。
四、实验步骤1. 准备工作（1）清洁显微镜，确保显微镜表面干净；（2）检查显微镜的各部分是否完好，如目镜、物镜、载物台等；（3）调整显微镜的光源，确保光线充足。
2. 观察洋葱鳞片叶细胞（1）取一片洋葱鳞片叶，用镊子撕取一小块细胞组织；（2）将细胞组织置于载玻片上，用滴管滴加适量清水；（3）用盖玻片覆盖细胞组织，确保盖玻片与载玻片之间无气泡；（4）将载玻片置于显微镜载物台上，调整粗准焦螺旋，使物镜与载玻片接触；（5）缓慢旋转粗准焦螺旋，使物镜逐渐上升，直至观察到清晰的细胞图像；（6）调整细准焦螺旋，使图像更加清晰。
3. 观察酵母菌（1）取少量酵母菌，用滴管滴加适量清水；（2）将酵母菌置于载玻片上，用盖玻片覆盖；（3）重复步骤2中的观察过程。
4. 观察细菌（1）取少量细菌，用滴管滴加适量细菌培养液；（2）将细菌培养液置于载玻片上，用盖玻片覆盖；（3）重复步骤2中的观察过程。
5. 观察植物叶片（1）取一片植物叶片，用镊子撕取一小块细胞组织；（2）将细胞组织置于载玻片上，用滴管滴加适量清水；（3）将盖玻片覆盖细胞组织，确保盖玻片与载玻片之间无气泡；（4）重复步骤2中的观察过程。
五、实验结果与分析1. 观察洋葱鳞片叶细胞：在显微镜下观察到洋葱鳞片叶细胞呈长方形，细胞壁较厚，细胞质透明，细胞核较大，呈圆形。
2. 观察酵母菌：在显微镜下观察到酵母菌呈椭圆形，细胞壁较薄，细胞质透明，细胞核较大，呈圆形。
实验一、普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察
实验一、普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察实验目的：
实验原理：
普通光学显微镜是一种透镜光学系统，通过对样本中的光线进行聚焦，放大细菌的图像。
显微镜的主要部分包括物镜、目镜、调焦机构、光源等。
细菌是一类微生物，形态多样，通常为单细胞生物，通过不同的染色方式和光学显微镜观察，可以看到不同形态的细菌。
实验器材：
普通光学显微镜、平片、细胞培养液、革兰染色试剂、蒸馏水、酒精、碘液、碱性蓝溶液
实验步骤：
1. 取一片平片，用无菌锉子在中心处轻轻划十字，用烧杯将片子消毒并放入培养液中。
2. 从细菌培养物中取出一小团菌落，在平片的交叉点处将其划成一个小圆圈，放入蒸馏水中。
3. 用无菌镊子夹取一滴细胞液，在平片的交叉点处加上一滴，然后在上方盖上一片盖片。
4. 将样品放入显微镜的标本台上，调整镜头至最佳位置，适当调整光源亮度和对比度等参数，观察细菌的形态特征。
5. 移动物镜或调整焦距，可以观察到更大或更小的细胞形态。
6. 取另一张平片，准备革兰染色试剂，将样本放入试剂中，反复洗涤，用显微镜观察识别细菌的形态，进行分类。
实验结果：
观察到细菌呈长梭形，直杆形，圆球形、螺旋形等形态，且在革兰染色后，长梭形的细菌为革兰阳性菌，圆球形的细菌为革兰阴性菌。
结论：
通过使用普通光学显微镜，成功观察了细菌的形态特征。
并通过革兰染色试剂进行分类，为后续的生物学研究提供了基础。
实验一普通光学显微镜的结构与使用方法
操作显微镜需要按照取样、放置样本、调节焦距、观察等 步骤进行。
06
首先需要从样本中取一小块放在载物台上，然后通过调节 调焦旋钮，使样本清晰地呈现在目镜中，以便进行观察。
结果分析
分析1：显微镜的分辨率和放大倍数
显微镜的分辨率和放大倍数取决于物镜和目镜的质量和规格。
显微镜的分辨率是指能够区分两个靠近的点的能力，而放大倍数是指物像尺寸与实物尺寸之 比。物镜和目镜的数值孔径决定了显微镜的分辨率和放大倍数。数值孔径越大，分辨率和放 大倍数越高。
了解显微镜的基本结构和原理对 于正确使用和保养显微镜非常重 要，能够保证实验结果的准确性
和可靠性。
随着科学技术的发展，光学显微 镜的性能和功能也在不断改进和 完善，为科学研究提供了更多可
能性。
02 普通光学显微镜的结构
显微镜的组成
物镜
连接显微镜和被观察物体的透 镜，能够将物体放大并聚焦在 焦平面上。
实验一：普通光学显微镜的结构与 使用方法
目录
• 引言 • 普通光学显微镜的结构 • 普通光学显微镜的使用方法 • 实验结果与讨论 • 结论
01 引言
实验目的
了解普通光学显微镜 的基本结构和原理。
观察不同样本，熟悉 显微镜在生物学、医 学等领域的应用。
学习并掌握显微镜的 使用方法。
实验背景
光学显微镜是生物学、医学、农 业等领域中常用的实验工具，能 够观察细胞、组织等微观结构。
实验感想
通过本次实验，我深刻体会到了科学研究的严谨性和精确性。在实验过程中，我们需要认真观察、思考和操作， 确保实验结果的准确性和可靠性。同时，我也认识到了显微镜的重要性和作用，它不仅是科学研究的重要工具， 也是我们认识微观世界的重要手段。
微生物实验指导书
微生物实验指导书实验一普通光学显微镜的使用维护一、实验目的：1、掌握显微镜的构造原理及性能。
2、纯熟掌握显微镜的操作方法3、初步了解血球计数板的使用方法。
二、实验原理：1、显微镜的实验原理：普通光学显微镜运用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微镜。
它们由机械装置和光学系统两大部分组成。
在显微镜的光学系统中，物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。
而在普通光学显微镜通常配置的几种物镜中，油镜的放大倍数最大，对微生物学研究最为重要。
与其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻片与镜头之间加滴镜油，这重要有如下二方面的因素：①增长照明亮度②增长显微镜的分辨率。
2、血球计数板的构造原理：血球计数板是一块特制的厚的载玻片，其上由四条竖槽构成三个平台，中间较宽的平台又被一短的横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为9个大方格，中间的大方格为计数室。
计数室的刻度有两种规格即16×25或25×16的。
现在常用25×16的，即计数室（一个大方格）提成25个中方格，每个中方格由分为16个小方格。
1、仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、牙签、血球计数板2、材料：擦镜纸、元葱四、实验环节：（一）显微镜练习：1、制片：用牙签挑少许元葱表皮放在载玻片上，然后加盖盖玻片。
2、观测：低倍镜高倍镜（二）血球计数板的练习：先用低倍镜查找中方格，再用高倍镜查找小方格，按照左上、左下、右上、右下、中心格练习。
实验二革兰氏染色法一、目的规定了解革兰氏染色的原理，学习并掌握革兰氏染色的方法。
二、基本原理革兰氏染色反映是细菌分类和鉴定的重要性状。
它是1884年由丹麦医师Gram创建的。
革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观测到细菌的形态并且还可将所有细菌区分为两大类：染色反映呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表达；染色反映呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表达。
实验一 普通光学显微镜的使用
• 镜口角总是小于180°。因为空气的折射率为1， 所以干燥物镜的数值孔径总是小于1，一般为 0.05—0.95；油浸物镜如用香柏油（折射率为 1.515）浸没，则数值孔径最大可接近1.5。虽然理 论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率， 但实际上从透镜的制造技术看，是不可能达到这 一极限的。通常在实用范围内，高级油浸物镜的 最大数值孔径是1.4。 • 几种物质的介质的折射率如下： • 空气为1.0，水为1.33，玻璃为1.5，甘油为1.47， 香柏油为1.52。
胞间连丝切片 (柿胚乳)
２、有丝分裂
• 植物细胞有丝分裂 • 洋葱根尖（16条染色体） • 动物细胞有丝分裂 • 马蛔虫受精卵（4条染色体）
1
2
3
4
洋葱根尖细胞有丝分裂图
卵壳 围卵腔 受精卵
马蛔虫子宫切片400×铁苏木精染色
1
3
2
4
马蛔虫受精卵有丝分裂图
３、血细胞
中性粒细胞
血细胞
４、肝细胞切片
• 可见光的波长为0.4—0.7微米，平均波长为0.55 微米。若用数值孔为0.65的物镜，则 R=0.61×0.55微米/0.65=0.52微米。这表示被检 物体在0.52微米以上时可被观察到，若小于0.52 微米就不能视见。如果使用数值孔径为1.25的物 镜，则R=0.27微米。凡被检物体长度大于这个数 值，均能视见。
肝细胞切片——线粒体
肝板和肝血窦（示肝细胞、肝血窦、巨噬细胞）
肝细胞
５、人染色体NOR
NOR
人染色体NOR
６、草履虫
７、人口粘膜腔上皮细胞
８、植物根尖纵切
分生区
根冠
植物根尖根冠、分生区
植物根尖纵切（示伸长区）
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实验一普通光学显微镜
普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。
以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。
普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。
（一）显微镜的构造
普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。
1、显微镜的机械装置
显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件
（1）镜座镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。
在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。
（2）镜筒镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。
从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。
因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。
镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。
因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。
国际上将显微镜的标准筒长定为160mm，此数字标在物镜的外壳上。
（3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。
Nikon显微镜装有四个物镜。
转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。
（4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。
在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。
（5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。
如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以找到原来标本的位置。
（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜头下降接近标本。
新近出产的显微镜（如Nikon显微镜）镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。
（7）微动螺旋用粗动螺旋只可以粗放的调节焦距，要得到最清晰的物象，需要用微动螺旋做进一步调节。
微动螺旋每转一圈镜筒移动0.1毫米（100微米）。
新近出产的较高档次的显微镜的粗动螺旋和微动螺旋是共轴的。
2、显微镜的光学系统
显微镜的光学系统由反光镜，聚光器，接物镜，接目镜等组成，光学系统使物体放大，形成物体放大像。
见图1—2。
（1）反光镜较早的普通光学显微镜是用自然光检视物体，在镜座上装有反光镜。
反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成，可以将投射在它上面的光线反射到聚光器透镜的中央，照明标本。
不用聚光器时用凹面镜，凹面镜能起会聚光线的作用。
用聚光器时，一般都用平面镜。
新近出产的较高档次的显微镜镜座上装有光源，并有电流调节螺旋，可通过调节电流大小调节光照强度。
（2）聚光器聚光器在载物台下面，它是由聚光透镜、虹彩光圈和升降螺旋组成的。
聚光器可分为明视场聚光器和暗视场聚光器。
普通光学显微镜配置的都是明视场聚光器，明视场聚光器有阿贝聚光器、齐明聚光器和摇出聚光器。
阿贝聚光器在物镜数值孔径高于0.6时会显示出色差和球差。
齐明聚光器对色差、球差和慧差的校正程度很高，是明视场镜检中质量最好的聚光器，但它不适于4倍以下的物镜。
摇出聚光器能将聚光器上透镜从光路中摇出满足低倍物镜（4×）大视场照明的需要。
聚光器安装在载物台下，其作用是将光源经反光镜反射来的光线聚焦于样品上，以得到最强的照明，使物象获得明亮清晰的效果。
聚光器的高低可以调节，使焦点落在被检物体上，以得到最大亮度。
一般聚光器的焦点在其上方1.25mm处，而其上升限度为载物台平面下方0.1mm。
因此，要求使用的载玻片厚度应在0.8—1.2mm之间，否则被检样品不在焦点上，影响镜检效果。
聚光器前透镜组前面还装有虹彩光圈，它可以开大和缩小，影响着成像的分辨力和反差，若将虹彩光圈开放过大，超过物镜的数值孔径时，便产生光斑；若收缩虹彩光圈过小，分辨力下降，反差增大。
因此，在观察时，通过虹彩光圈的调节再把视场光阑（带有视场光阑的显微镜）开启到视场周缘的外切处，使不在视场内的物体得不到任何光线的照明，以避免散射光的干扰。
（3）物镜安装在镜筒前端转换器上的接物透镜利用光线使被检物体第一次造像，物镜成像的质量，对分辨力有着决定性的在一直线上。
带视场光阑的显微镜，先将光阑缩小，用10×物镜观察，在视场内可见到视场光阑圆球多边形的轮廓像，如此像不在视场中央，可利用聚光器外侧的两个调整旋钮将其调到中央，然后缓慢地将视场光阑打开，能看到光束向视场周缘均匀展开直至视场光阑的轮廓像完全与视场边缘内接，说明光线已经合轴。
（二）低倍镜观察镜检任何标本都要养成必须先用低倍镜观察的习惯。
因为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定检查的位置。
将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢升起镜筒（或下降载物台），直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰为止。
用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。
（三）高倍镜观察在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。
较好的显微镜，低倍、高倍镜头是同焦的，在正常情况下，高倍物镜的转换不应碰到载玻片或其上的盖玻片。
若使用不同型号的物镜，在转换物镜时要从侧面观察，避免镜头与玻片相撞。
然后从目镜观察，调节光照，使亮度适中，缓慢调节粗调节旋钮，使载物台上升（或镜筒下降），直至物像出现，再用细调节旋钮调至物像清晰为止，找到需观察的部位，并移至视野中央进行观察。
（四）油镜观察油浸物镜的工作距离（指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离）很短，一般在0.2mm以内，再加上一般光学显微镜的油浸物镜没有“弹簧装置”，因此使用油浸物镜时要特别细心，避免由于“调焦”不慎而压碎标本片并使物镜受损。
使用油镜按下列步骤操作：
1、先用粗调节旋钮将镜筒提升（或将载物台下降）约2cm，并将高倍镜转出。
2、在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。
3、从侧面注视，用粗调节旋钮将载物台缓缓地上升，（或镜筒下降），使油浸物镜浸入香柏油中，使镜头几乎与标本接触。
4、从接目镜内观察，放大视场光阑及聚光镜上的虹彩光圈（带视场光阑油镜开大视场光阑），上调聚光器，使光线充分照明。
用粗调节旋钮将载物台徐徐下降（或镜筒上升），当出现物像一闪后改用细调节旋钮调至最清晰为止。
如油镜已离开油面而仍未见到物象，必须再从侧面观察，重复上述操作。
5、观察完毕，下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦镜纸蘸少许乙醚酒精混合液（乙醚2份，纯酒精3份）或二甲苯，擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭2—3下即可，（注意向一个方向擦拭）。
6、将各部分还原，转动物镜转换器，使物镜头不与载物台通光孔相对，而是成八字形位置，再将镜筒下降至最低，降下聚光器，反光镜与聚光器垂直，用一个干净手帕将接目镜罩好，以免目镜头沾污灰尘。
最后用柔软纱布清洁载物台等机械部分，然后将显微镜放回柜内或镜箱中。