质谱分析法--定性与定量
GC-MASS的基本解析
二:质谱的特点与应用
• 1.优点: • (1)确定分子量准确,其它技术无法比。 • (2)灵敏度高,常规10-7—10-8g,单离子检测可达
10-12g。 • (3)样品元素组成。 • (4)复杂混合物的定性定量分析:LC/MS,
GC/MS,MS/MS对于难分离的混合物特别有效, 其它 技术无法胜任。 • (5)多功能,广泛适用于各类化合物。
RI 100 9.8 5.1 0.5
离子的主要类型
1、分子离子峰
M +e→ M++2e
M+称为分子离子或母离子(parrent ion),相应的质谱峰称 为分子离子峰或母峰。
大气压化学电离源的示意图
大气压化学电离源的特点
• 大气压化学电离源主要用来分析中等极性的化合 物。有些分析物由于结构和极性方面的原因,用 ESI不能产生足够强的离子,可以采用APCI方式 增加离子产率,可以认为APCI是ESI的补充。 APCI主要产生的是单电荷离子,所以分析的化合 物分子量一般小于1000Da。用这种电离源得到的 质谱很少有碎片离子,主要是准分子离子。
通常,质谱仪采用机械泵预抽真空,再用高效率扩散泵 连续地运行以保持真空。现代质谱仪采用分子泵可获得更 高的真空度。
六:质谱仪的主要技术指标
1.质量范围:指质谱仪所检测的单电荷离子的质荷比范围.
2.分辨率(Resolution):分辨率是质谱仪分开相邻
两离子质量的能力。是两峰间的峰谷为峰高的10%时的 测定值,即两峰各以5%的高度重叠
(3)成分分离器和进样器组合进样:利用气相和液 相色谱的分离能力,进行多组份复杂混合物分析 (4)参考样品进样
2.离子源定义及分类:
1.使被分析样品的原子或分子离化为带电粒子(离 子)的装置,并对离子进行加速使其进入分析器, 根据离子化方式的不同,有机常用的有如下几种, 其中EI,ESI最常用。
质谱分析法--定性与定量_图文
三、定量方法
2. 内标法
Ø 单点校正法 Ø 内标标准曲线法
三、定量方法
2. 内标法
内标物要满足以下要求: (a)试样中不含有该物质; (b)与被测组分性质比较接近; (c)不与试样发生化学反应; (d)出峰位置应位于被测组分附近。
ESIESI+
m/z- 179→79.9 m/z + 202→122
甜蜜素
SN/T 1948-2007 进出口食品中环己基氨
基磺酸钠的检测方法
应研究样品基质和检测器 性能引起的图谱改变
化合物 麻黄碱 伪麻黄碱
保留时间 (min)
6.9
8.0
定性离子对
166/148 166/133 166/148 166/133
•C7H6N2O2 8.50 0.72 0.45
化合物 C7H11N4
M+1 9.25
C8H6 O3 8.36
C8H8NO2 9.23
C8H11N2O 9.61
C8H12N3 9.98
二、定性(确证)方法
1. 基本原则
Ø质谱法只有在与色谱分离在线或脱机联用时才能作 为确证方法 Ø在分析仪器上的进样顺序是:空白溶剂、阴性控制 样品、要确证的样品、阳性控制样品再进样,最后是 阴性控制样品
Ø 扫描速度
ü色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关
Ø 分辨率
质谱仪主要性能指标
质谱仪主要性能指标
分辨率
磁质谱的分辨率定义最为严格:对两个相等 强度的相邻峰,当两峰间的峰谷不大于其峰高10%时 ,则认为两峰已经分开,其分辨率:
第六章 质谱分析法
现代件 • 3. 1 色谱条件:色谱柱: AB5MS(30m×0.25mm×0.25μm)弹性石英毛细管柱, 进样口温度250℃,柱温60℃,恒温1min,以20 ℃ /min 升温至220 ℃,保持1 min,再以5℃ /min 升温至280℃,保持4min。载气He,柱流速1.0mL /min,分流比10∶1,进样量0.5μL。 • 3. 2 质谱条件:EI 离子源,电子能源70eV,扫描 范围29~450 u,四极杆温度150 ℃,离子源温度 230℃,电子倍增器电压2300V,GC-MS 接口温度 280℃,标准质谱图库Wiley7n.L。
现代食品检测技术第一部分——质谱分析
通过改变仪器实验条件来检验:
1)降低电子流电压——增加分子离子峰强度 (当电子轰击电压降低,强度不增加的峰 不是分子离子峰)。 2)采用化学电离源、场离子或场解吸源等电 离方法; 3)制备易挥发的衍生物,如通过甲基化、乙 酰基化、甲酯化、三甲基硅醚化、水解氧 化或还原等方法将样品制备成适当的衍生 物后再测定。
现代食品检测技术第一部分——质谱分析
2. 样品预处理 • 2. 1 不含油的水性样品此类样品包括饮用 水、果汁、功能饮料、可乐等饮料。准确 移取样品5mL(可乐样品需先超声振荡20 min 去除二氧化碳,有固形物的饮料先离 心取上清液),加至10 mL 具塞刻度试管中, 准确加入正己烷2.0 mL,充分旋涡混合, 静置分层,取上清液进行GC-MS 分析。
现代食品检测技术第一部分——质谱分析
质谱是应用最为广泛的方法之一,它可以 为我们提供以下信息: a) 样品元素组成; b) 无机、有机及生物分析的结构——结构不同, 分子或原子碎片不同(质荷比不同) c) 复杂混合物的定性定量分析——与色谱方法 联用(GC-MS) 。
气相数据处理方法
气相数据处理方法气相数据处理方法是化学领域中的一项重要技术,它可以匡助研究人员更好地理解和分析气相反应过程中的各种物理和化学性质。
本文将介绍几种常用的气相数据处理方法,并探讨其在实际应用中的优势和局限性。
一、质谱分析法质谱分析法是一种常用的气相数据处理方法,它通过分析气体中的质谱图谱来确定各种化合物的组成和浓度。
质谱图谱是通过将气体样品引入质谱仪中,利用高能电子轰击气体份子,将其离子化,并通过质谱仪中的磁场将离子按质量分离,最终形成一幅质谱图。
通过对质谱图的解析,可以确定气体中各种化合物的相对丰度和浓度。
质谱分析法具有高分辨率、高灵敏度和高选择性的优点,可以同时检测多种化合物,并且可以进行定性和定量分析。
然而,质谱分析法也存在一些局限性,如样品制备和仪器操作的复杂性,以及对仪器的高要求。
此外,质谱分析法对于高份子化合物的分析有一定的局限性,因为高份子化合物在质谱仪中容易分解或者失去活性。
二、气相色谱法气相色谱法是另一种常用的气相数据处理方法,它通过利用气相色谱仪对气体样品中的化合物进行分离和定量分析。
气相色谱仪是一种利用气相色谱柱和载气的物理和化学性质差异将混合物中的化合物分离的仪器。
通过调整色谱柱的温度和载气的流速,可以实现对不同化合物的分离和检测。
气相色谱法具有高分辨率、高灵敏度和高选择性的优点,可以同时分析多种化合物,并且可以进行定性和定量分析。
与质谱分析法相比,气相色谱法操作简单,成本较低。
然而,气相色谱法也存在一些局限性,如对于高沸点和热稳定性较差的化合物的分析有一定的难点。
三、红外光谱法红外光谱法是一种常用的气相数据处理方法,它通过测量气体样品对红外辐射的吸收和散射来确定其份子结构和化学键的性质。
红外光谱法利用红外光谱仪对气体样品进行分析,通过测量不同波长的红外光在样品中的吸收程度,可以得到样品的红外光谱图。
红外光谱法具有高分辨率、高灵敏度和高选择性的优点,可以同时检测多种化合物,并且可以进行定性和定量分析。
蛋白质的定量和定性分析方法
蛋白质的定量和定性分析方法蛋白质是生物体内最重要的功能分子之一,对于研究生物体的结构和功能具有重要意义。
为了准确地了解蛋白质的含量和性质,在科学研究和实际应用中,我们需要使用定量和定性分析的方法来研究蛋白质。
一、定量分析方法1. 低里德伯法(Lowry method)低里德伯法是一种经典而广泛应用的蛋白质定量方法。
该方法利用蛋白质与碱式铜络合物在碱性条件下反应生成蓝色产物,通过比色法测定溶液的吸光度来计算蛋白质含量。
这是一种灵敏且相对简单的方法,适用于大多数蛋白质样品的定量分析。
2. 比色法(Colorimetric assay)比色法是一种常用的蛋白质定量方法,通过蛋白质与染料的结合来测定蛋白质浓度。
常用的染料有布拉德福蓝(Bradford)、库吉铃蓝(Coomassie Brilliant Blue)、BCA法(Bicinchoninic Acid assay)等。
这些染料与蛋白质结合后形成一种复色物,通过比色法测定溶液的吸光度可以定量分析蛋白质。
比色法具有操作简便、灵敏度高等特点,被广泛应用于蛋白质定量领域。
3. 分子标记法(Molecular tagging method)分子标记法是一种新兴的蛋白质定量方法,利用特定的分子标记物(如荧光染料、放射性示踪剂等)标记蛋白质,然后通过测定标记物的荧光强度或放射性信号来计算蛋白质浓度。
分子标记法具有高灵敏度、高特异性等优点,适用于微量蛋白质的定量测定。
二、定性分析方法1. SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)SDS-PAGE是一种常用的蛋白质定性分析方法,通过电泳将蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中分离出来。
在电泳过程中,蛋白质在SDS(十二烷基硫酸钠)的作用下具有相同的电荷密度,只受到大小的限制而移动。
蛋白质在凝胶中的分离程度取决于其分子量大小,可以通过对比标准品的迁移距离来估计样品中蛋白质的相对分子量。
质谱分析法定性与定量
ü色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关
Ø 分辨率
质谱仪主要性能指标
质谱仪主要性能指标
分辨率
磁质谱的分辨率定义最为严格:对两个相等 强度的相邻峰,当两峰间的峰谷不大于其峰高10%时 ,则认为两峰已经分开,其分辨率:
磁质谱中,R不随m/z变化,在测定小分子时有优势 eg. R=5000,500与500.1 5000与5001
用碎片离子色谱图进行质谱测定时,分子离子 最好是一个选择的检测离子。选择的检测离子并不一定 要源于分子的同一部分。每个检测离子的信噪比应≥3︰ 1
二、定性(确证)方法
相对离子丰度最大容许偏差
相对丰度(%基峰)
EI-GC-MS(相对)
CI-GC-MS、GC-MSn、LCMS、LC-MSn(相对)
> 50%
FT-ICR
各种离子化方法的使用范围
Ionic
ESI or MALDI
APCI/APPI
选择的依据
挥发性 热稳定性 极性
Analyte Polarity
GC/MS
Neutral
101
102
103
104
105
Molecular Weight
质谱仪主要性能指标
Ø 质量范围
ü 质谱仪所能测定的离子质荷比的范围 ü 不同仪器 ü 不同应用
±10%
±20%
> 20% to 50%
±15%
分辨率
Ø有机质谱仅要求50%峰 谷刚刚分开就算分开(这 时称为有机质谱的单位质 量分辨) Ø简化为用单峰法表示, 即测定一个峰半峰高处的 全峰宽Full width half Maximum(简写为 FWHM)
eg. FWHM=0.25
第十四章质谱分析法
无机质谱仪
① 火花源双聚焦质谱仪。 ②感应耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)。 ③二次离子质谱仪(SIMS) 同位素质谱仪。 气体分析质谱仪。主要有呼气质谱仪,氦质 谱检漏仪等。
22
从质谱仪所用的质量分析器的不同,把质谱仪分为 双聚焦质谱仪,四极杆质谱仪,飞行时间质谱仪, 离子阱质谱仪,傅立叶变换质谱仪等。 质谱分析法主要是通过对样品的离子的质荷比的分 析而实现对样品进行定性和定量的一种方法。因此, 质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离子,有质 量分析装置把不同质荷比的离子分开,经检测器检测 之后可以得到样品的质谱图,由于有机样品,无机样 品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分 析要求,所以,所用的电离装置、质量分析装置和检 测装置有所不同。但是,不管是哪种类型的质谱仪, 其基本组成是相同的。都包括真空系统、进样系统、 离子源、质量分析器、离子检测器及计算机自动控 23 制和数据处理系统。
离子源的作用使样品离子化,并使离子汇聚成具 有一定形状和能量的离子束。它是质谱仪的心脏。 离子源的结构和性质对质谱仪的分辨率、灵敏度 影响很大 使物质电离的方法很多: 电子轰击,化学电离、火花电离、ICP离子源等。
有机物分析 无机物分析
最常用的是电子轰击离子源
35
将引入的样品转化成为碎片离子的装置。根据样品
M
M e M 2e
M—分子
M —分子离子 M + 表示正离子,·表示不成对的单电子
化学键可以断裂,形成碎片离子,其进一 步断裂,形成各种质荷比不同的离子
17
各种正离子受到800~8000V的高压电场加 速,加速后的动能等于离子的位能
质谱分析法
2.化学电离源(Chemical Ionization, CI)
试样电离是由离子—分子反应产生的 以CH4为反应气,XH为试样 5—500eV能量 CH4+e-→CH4++ CH3++ CH2++ C++ H2++H+ CH4++ CH3+ 90% CH4++ CH4→CH5++· CH3 CH3++ CH4→C2H5++ H2 C2H5++XH→XH2++ CH4 C2H5++XH→XH2++ C2H4 C2H5++XH→X++ C2H6
参考 P 215
生成的正离子再分解 XH2+→X++ H2 XH2+→A++ C X+→B++ D 样品可以是有机物、无机物,反应气除 CH4 外,可用 H2 、 NH3 、 C3H8 。即使是 不稳定的有机化合物,也可以得到很强 的分子离子峰,谱图简化。
3.高频火花电离源
无挥发性的无机样品如金属、半导体、矿 物的离子化,利用 30KV 脉冲高频电压,进 行火花放电。 特点:电离效率高。能量分散大(使用双 聚焦分析器)。不必进行定量校正,进行 定性和半定量分析。
2.照相板
曝光量则由时间或电量控制。利用谱线的 位置与黑度,对元素进行定性和定量分析。 主要用于火花源双聚焦质谱仪中,不需 要记录离子流强度和电子设备,灵敏度高, 但精度低,要先抽真空。
3.电子倍增器
工作原理与光电倍增管相似。 多用于气相与有机质谱中。优点:灵敏度 高,测定速度快 但:增益会逐渐下降。
gc-ms分析方法如何定性定量
gc-ms分析⽅法如何定性定量质谱仪种类很多,不同类型的质谱仪主要差别在于离⼦源。
离⼦源的不同决定了对被测样品的不同要求,同时,所得信息也不同。
质谱仪的分辨率同样⼗分重要,⾼分辨质谱仪可给出化合物的组成式,对于未知物定性⾄关重要。
,在进⾏质谱分析前,需要根据样品状况和分析要求选择合适的质谱仪。
今天我们⼀起来学习GC-MS如何进⾏定性与定量的知识。
GC-MS定性分析⽬前,⾊质联⽤仪数据库中,⼀般贮存有近30万个化合物标准质谱图。
因此,GC-MS最主要的定性⽅式是库检索。
由总离⼦⾊谱图可以得到任⼀组分的质谱图,由质谱图可以利⽤计算机在数据库中检索。
检索结果,可以给出⼏种最可能的化合物。
包括:化合物名称、分⼦式、分⼦量、基峰及可靠程度。
下图是由计算机给出的某未知物谱图检索结果。
某未知化合物检索结果利⽤计算机进⾏库检索是⼀种快速、⽅便定性⽅法,但是,在利⽤计算机检索时应注意如下⼏个问题:数据库中所存质谱图有限,如果未知物是数据库中没有的化合物,检索结果也给出⼏个相近的化合物。
显然,这种结果是错误的。
由于质谱法本⾝的局限性,⼀些结构相近的化合物其质谱图也相似,这种情况也可能造成检索结果不可靠。
由于⾊谱峰分离不好以及本底及噪⾳的影响,使得到的质谱图质量不⾼,这样所得到的检索结果也会很差。
因此,在利⽤数据库检索之前,应⾸先得到⼀张很好的质谱图,并利⽤质量⾊谱图等技术判断质谱中有没有杂质峰;得到检索结果之后,还应根据未知物的物理、化学性质以及⾊谱保留值、红外、核磁谱等综合考虑,才能给出定性结果。
GC-MS定量分析GC-MS定量分析⽅法类似于⾊谱法定量分析,由GC-MS得到的总离⼦⾊谱图或质量⾊谱图,其⾊谱峰⾯积与相应组分的含量成正⽐,若对某⼀组份进⾏定量测定,可以采⽤⾊谱分析法中的归⼀化法、外标法、内标法等不同⽅法进⾏。
这时,GC-MS法可理解为将质谱仪作为⾊谱仪检测器。
其余均与⾊谱法相同,与⾊谱法定量不同的是,GC-MS法除了可利⽤总离⼦⾊谱图进⾏定量之外,还可利⽤质量⾊谱图进⾏定量,这样做可最⼤限度去除其它组份的⼲扰。
质谱定性定量原理
质谱定性定量原理
质谱定性定量原理是一种广泛应用于化学和生物学领域的分析技术。
它通过测量样品中分子的质量和相对丰度来确定样品的成分和浓度。
质谱定性定量原理的关键是利用质谱仪分析样品中的分子离子。
首先,样品通过某种方法(例如电离、蒸发或溶解)形成气态或离子态的分子。
然后,这些分子离子被导入质谱仪中。
在质谱仪中,离子会经历一系列的电磁场作用,包括加速、聚焦和分离。
其中最重要的是质量分离,即根据离子质量-荷比(m/z)的差异将离子分离开来。
质谱仪中通常使用磁场或电
场来实现质量分离。
分离后,离子进入一个名为检测器的设备。
检测器会对不同
m/z值的离子进行电子转换,并将其转换为电信号。
通过测量
这些电信号的强度和时间,可以确定离子的相对丰度。
质谱定性定量原理中的定性分析是通过比较样品中的离子质量与已知的分子库进行匹配,从而确定样品的成分。
这种匹配可以通过谱图匹配算法或专用的质谱数据库来实现。
定量分析则是利用离子的相对丰度来确定样品中不同分子的浓度。
这可以通过内标品或外标品的加入来实现。
内标法是在样品中加入已知浓度的化合物作为参考物质,通过对其和待测物的离子相对丰度进行比较来计算待测物的浓度。
外标法是在已知浓度的化合物溶液中进行浓度-响应曲线的构建,然后通过
测量待测物的离子相对丰度并在浓度-响应曲线上进行插值来计算待测物的浓度。
综上所述,质谱定性定量原理是通过测量样品中离子的质量和相对丰度来确定样品的成分和浓度。
它在各个领域中具有广泛的应用,并且通过不同的定性和定量方法可以实现准确和可靠的分析结果。
化学分析方法的基本原理
化学分析方法的基本原理化学分析是一种重要的实验技术,通过使用不同的分析方法可以分离、鉴定和定量不同物质的化学成分。
化学分析方法的基本原理包括以下几个方面:定性分析、定量分析、仪器分析和质谱分析。
一、定性分析定性分析是确定样品中所含化学成分的方法。
它通过观察化学反应的现象、检验样品的特征和使用相应的试剂等手段,推断样品中所含的成分。
定性分析可分为物理方法和化学方法。
物理方法主要包括颜色、形状、晶体结构等的观察与判断;化学方法则是指根据化学反应的性质,通过试剂的加入和反应产物的形成来推断样品中的化学成分。
二、定量分析定量分析是测定样品中所含化学成分的含量的方法。
它通过使用适当的定量分析方法,以反应产物的生成量或吸光度等物理化学性质的变化来测定样品中目标成分的含量。
定量分析方法主要分为重量法、容量法和光度法等。
其中,重量法通过称量或电子天平的重量测定样品中化学物质的含量;容量法则是利用滴定、酸碱中和等反应,通过溶液的体积计算出目标物的含量;光度法则是利用物质对特定波长光线的吸收或发射特性来测定其浓度。
三、仪器分析仪器分析是指利用先进的仪器设备进行化学分析的方法。
随着科技的不断进步,各种先进的仪器设备被开发出来,极大地提高了分析的准确度和分析速度。
常见的仪器分析方法包括原子吸收光谱法(AAS)、气相色谱质谱法(GC-MS)和高效液相色谱法(HPLC)等。
这些仪器在分析过程中,通过检测样品与特定物理量的相互作用来获得和分析样品的信息,如吸收光谱、质谱图和色谱图等。
四、质谱分析质谱分析是一种通过检测样品中的离子质量谱图来确定化学成分的方法。
质谱分析方法在分析多种样品中的元素和化合物时具有高灵敏度和高选择性的特点。
它主要包括质谱仪的离子化产生、质谱中的质量筛选和测量等步骤。
质谱仪将样品中的物质分离成离子,然后根据离子的质量-电荷比(m/z)进行分析和测量。
质谱图能够提供物质的分子结构信息以及相对丰度等数据,被广泛应用于化学分析和有机化学领域。
化学分析方法从定性到定量的转变
化学分析方法从定性到定量的转变化学分析方法是化学学科中非常重要的一部分,它通过对样品中化学成分的分析,为我们提供定性和定量的信息。
化学分析方法已经发展了几个世纪,从最初的定性方法逐渐发展到了现代的定量分析方法。
本文将探讨化学分析方法从定性到定量的转变,并介绍一些代表性的方法和技术。
定性分析是化学分析的基础,它是确定物质组成和特征的一种方法。
在早期的化学分析中,化学家主要通过观察物质的外部性质,如颜色、形状、气味等来进行定性分析。
然而,这种方法的局限性很大,很难对复杂的混合物进行准确的分析。
随着科学技术的不断进步,化学家开始采用更加精确的定性分析方法。
其中一种重要的方法是光谱分析。
光谱分析通过测量物质与电磁波的相互作用来研究其结构和组成。
例如,紫外-可见光谱可以用来确定物质的吸收和发射光谱,红外光谱可以用来确定物质的化学键的类型和存在情况。
这些光谱数据提供了更多的信息,使得定性分析更加准确和可靠。
然而,定性分析也有其局限性。
当我们需要知道样品中特定成分的含量时,光谱分析无法提供这样的定量信息。
因此,化学家开始研究新的定量分析方法。
定量分析是一种确定物质中特定成分浓度或含量的方法。
一种常见的定量分析方法是滴定法。
滴定法通过向待测溶液中滴加已知浓度的试剂,利用化学反应的反应计量关系确定待测溶液中目标物质的浓度。
滴定法有简单、快速、准确的特点,被广泛应用于各个领域。
另一种重要的定量分析方法是色谱法。
色谱法分为气相色谱和液相色谱两种。
色谱法通过样品在固定相或流动相中的分配行为,来分离混合物中的成分,并通过测量它们在分离过程中的行为来定量。
色谱法具有高分离能力和灵敏度,可用于分析复杂的混合物。
近年来,随着仪器技术的进一步发展,质谱法也成为了一种重要的定量分析方法。
质谱法通过将样品中的化合物分解成离子,然后通过质谱仪测量离子的质荷比来确定化合物的结构和浓度。
质谱法具有高灵敏度和高选择性,适用于快速和准确地分析各种样品。
蛋白质质谱定性定量
百泰派克生物科技
蛋白质质谱定性定量
对蛋白质进行定性定量鉴定即对目标蛋白的种类和含量进行鉴定是蛋白质组学研究中最基本的研究内容。
质谱技术是目前常用的蛋白质组学分析技术,它基于蛋白肽段离子的质荷比(m/z)和离子峰强度信息可实现蛋白质的定性和定量鉴定。
在质谱分析中,蛋白质先被酶解消化为小分子的肽段,小分子肽段在离子源中电离成肽段母离子,再利用质量分析器检测肽段母离子的质荷比和离子峰强度。
将肽段离子的质荷比数据与理论数据库进行比较、匹配可以确定其分子质量,进而获得该肽段的氨基酸组成,通过各肽段之间的拼接最后确定完整蛋白的分子量和氨基酸组成信息以实现定性鉴定。
肽段母离子的浓度与样品量成正相关,样品量越多,其产生的肽段离子就越多,相应的离子峰信号强度就越大,因此可以利用离子峰信号强度进行蛋白的含量测定。
若引入已知浓度的标准品(内标肽)还可以对蛋白进行精确的含量测定。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台结合Nano-LC色谱,提供快速高效的蛋白质质谱定性定量鉴定服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的细胞寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括细胞培养、细胞标记、蛋白提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析,欢迎免费咨询。
物质分析方法介绍
物质分析方法介绍在科学研究和工业制造中,物质分析是必不可少的环节。
它通过使用一系列的方法和技术,对物质的成分、性质和结构进行定量或定性的测定。
本文将介绍几种常见的物质分析方法,包括质谱分析、光谱分析和色谱分析。
一、质谱分析质谱分析是一种基于离子化技术的分析方法,它能够通过将物质分子转化为离子,然后根据物质离子的质荷比,对物质进行定性和定量分析。
质谱分析具有灵敏度高、分辨率高和特异性强的优点,广泛应用于有机化学、药物研发和环境监测等领域。
其中,最常见的质谱分析技术包括质谱仪、液质联用技术和飞行时间质谱技术等。
二、光谱分析光谱分析是利用物质对电磁波的吸收、散射或发射过程,来研究物质的能级结构和分子结构的一种分析方法。
常见的光谱分析技术包括紫外-可见吸收光谱、红外光谱和核磁共振光谱等。
紫外-可见吸收光谱主要用于有机物和无机物的分析,通过测量物质对紫外可见光的吸收程度,可以推断物质的浓度和结构。
红外光谱则主要用于有机物的结构分析,通过测量物质对红外光的吸收情况,可以判断有机物中的官能团和化学键的存在。
核磁共振光谱则用于研究物质核的磁学性质,通过测量核磁共振信号的位置和强度,可以确定物质分子的结构和磁学性质。
三、色谱分析色谱分析是基于物质在固定相和流动相之间的分配行为进行分析的一种方法。
它通过将物质溶解在流动相中,然后经过固定相的柱子进行分离和检测,从而确定物质的成分和含量。
色谱分析具有高效、高分辨率和高灵敏度的特点,广泛应用于食品安全、环境监测和药物研发等领域。
常见的色谱分析方法包括气相色谱、液相色谱和超高效液相色谱等。
气相色谱主要用于分析揮发性物质,通过控制样品和固定相之间的温度和气流速率,实现物质的分离和测定。
液相色谱则主要用于分析非挥发性物质,通过控制样品和固定相之间的流速和溶剂组成,实现物质的高效分离和检测。
综上所述,质谱分析、光谱分析和色谱分析是物质分析中常见的几种方法。
它们各具特点,在不同领域中发挥着重要的作用。
比较质谱法与光谱法的差异
光谱法和质谱法质谱:定性、定量,可以推测物质的组成;光谱:定性,确定样品中主要基团,确定物质类别。
光谱分析仪的优点:1. 采样方式灵活,对于稀有和贵重金属的检测和分析可以节约取样带来的损耗。
2. 测试速率高,可设定多通道瞬间多点采集,并通过计算器实时输出。
3. 对于一些机械零件可以做到无损检测,而不破坏样品,便于进行无损检测。
4. 分析速度较快,比较适用做炉前分析或现场分析,从而达到快速检测。
5. 分析结果的准确性是建立在化学分析标样的基础上。
光谱分析仪的缺点:1. 对于非金属和界于金属和非金属之间的元素很难做到准确检测。
2. 不是原始方法,不能作为仲裁分析方法,检测结果不能做为国家认证依据。
3. 受各企业产品相对垄断的因素,购买和维护成本都比较高,性价比较低。
4. 需要大量代表性样品进行化学分析建模,对于小批量样品检测显然不切实际。
5. 模型需要不断更新,在仪器发生变化或者标准样品发生变化时,模型也要变化。
6. 建模成本很高,测试成本也就比较大了,当然对于大量样品检测时,测试成本会下降。
7. 易受光学系统参数等外部或内部因素影响,经常出现曲线非线性问题,对检测结果的准确度影响较大。
质谱的优缺点质谱法特点:唯一可以确定分子量的方法,特别是现代生物质谱,适用于生物大分子分子量(数十万)定;具有极高灵敏度,检测限达10-14g。
质谱法应用质谱仪的种类有很多,从分析对象来看,可分为原子质谱和分子质谱法。
质谱最重要的应用是分离同位素并测定它们的原子质量及相对丰度。
测定原子质量的精度超过化学测量方法,大约2/3以上的原子的精确质量是用质谱方法测定的。
质谱方法还可用于有机化学分析,特别是微量杂质分析,测量分子的分子量,为确定化合物的分子式和分子结构提供可靠的依据。
由于化合物有着像指纹一样的独特质谱,质谱仪在工业生产中也得到广泛应用。
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质谱仪主要性能指标
质量范围
质谱仪所能测定的离子质荷比的范围 不同仪器 不同应用
扫描速度
色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关
分辨率
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质谱仪主要性能指标
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二、定性(确证)方法
2. 色谱分离
保留时间
测试部分中分析物的保留时间(或相对保留时 间),应在一个特定的保留时间窗口范围内与校正标 准的保留时间相符。保留时间窗口与该色谱系统的分 辨能力相当。分析物和内标的保留时间之比,应与校 正溶液的相对保留时间一致,GC 偏差为±0.5%,LC 偏差为±2.5%
100.00
80.00
60.00
100.00
40.00
80.00
20.00
60.00
0.00 3.90 4.00 4.10 4.20 4.30 4.40 4.50
40.00
20.00
100.00
0.00 3.90
80.00
4.00
4.10
4.20
4.30
4.40
4.50
60.00
40.00
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二、定性(确证)方法
相对离子丰度最大容许偏差
相对丰度(%基峰)
> 50% > 20% to 50% > 10% to 20% ≤ 10%
EI-GC-MS(相对)
±10% ±15% ±20% ±50%
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二、定性(确证)方法
2. 色谱分离
保留时间
实验室条件下分析物的最小可接受保留时间,> 2t0 气相色谱(GC)或液相色谱(LC)时,半峰宽应在原来峰 宽的90-110%以内,保留时间的变化应在5%以内
主要内容
一、质谱基础及相关法
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一、质谱基础及相关术语
质谱仪的基本结构
大气压
真空系统 离子源 质量分析器 检测器 数据系统
进样系统
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二、定性(确证)方法
关于保留时间的讨论
GBT 16631-2008 高效液相色谱法通则:同样条件下重复试验 的保留数据的分散性,RSD≤3%
JJG705-2002 液相色谱仪检定规程:定性测量重复性(6次测 量)RSD≤1.5%
选择的依据
ESI or MALDI
Analyte Polarity 挥发性 热稳定性 极性
APCI/APPI
GC/MS
Neutral 101 102
Molecular Weight
103
104
105
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The Arnolfini Wedding
阿尔诺菲尼的婚礼 扬.凡.艾克 1434
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二、定性(确证)方法
3. 质谱检测
全扫描 scan
选择离子监测 SIM
MS-MSn技术,如多反应监测 MRM
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二、定性(确证)方法
3. 质谱检测
全扫描 scan 用记录全扫描质谱图进行质谱测定时,在标准品参 考图谱中所有相对丰度>10%(分子离子、分子离子的特 征加成物、特征碎片离子、同位素离子等)的特征离子 都必须检测 选择离子监测 SIM 用碎片离子色谱图进行质谱测定时,分子离子最好 是一个选择的检测离子。选择的检测离子并不一定要源 于分子的同一部分。每个检测离子的信噪比应≥3︰1
二、定性(确证)方法
质量碎片类型和识别点的关系
MS技术 低分辨质谱(LR) LR-MSn母离子 LR-MSn子离子 高分辨质谱(HR) HR-MSn母离子 HR-MSn子离子 每种离子的识别点数 1.0 1.0 1.5 2.0 2.0 2.5
酸内酯如玉米赤霉醇、β-受体激动剂等
要确证指令 96/23/EC附录I-B 组所列的物质,最少需要3 个识别 点,包括兽药和污染物,兽药如抗菌药、驱虫药、抗球虫药、氨
基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、镇静药、非甾体抗炎药等;其他环
境污染物如有机氯、有机磷、真菌毒素、染料等
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质谱分析方法——定性与定量
北京市海淀区产品质量监督检验所 国家食品质量安全监督检验中心
2011年06月23日
The birth of Venus
《LC and MS: A Match Made in Heaven》James Jorgenson,University of North Carolina 59th, ASMS,June 5,Denver,USA
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1-Br
2-Br
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3-Br
准分子离子 碎片离子 同位素离子
• 由于天然同位素的存在,因此在质谱图上出现M+1,M+2等峰,由 这些同位素所形成的峰称之为同位素峰
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1-Cl
2-Cl
二、定性(确证)方法
关于保留时间的讨论
GB/T 22260-2008 饲料中甲基睾丸酮的测定 高效液 相色谱串联质谱法 试样保留时间与标准品的相对偏差不大于15%
GB/T 22147-2008 饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和 盐酸克仑特罗的测定 液相色谱质谱联用法 样品与标准品保留时间的相对偏差不大于0.5%
0.00 3.90
4.00
4.10
4.20
4.30
4.40
4.50
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质谱仪主要性能指标
分辨率
磁质谱的分辨率定义最为严格:对两个相等强度 的相邻峰,当两峰间的峰谷不大于其峰高10%时,则 认为两峰已经分开,其分辨率:
CI-GC-MS、GC-MSn、LCMS、LC-MSn(相对) ±20% ±25% ±30% ±50%
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二、定性(确证)方法
2002/657/EC规定:
要确证指令 96/23/EC 附录I-A 组所列的物质,最少需要4 个识别 点,包括具有促合成作用和其他未允许的化合物,如二苯乙烯类 化合物及其衍生物、盐、酯等、抗甲状腺剂、甾醇、 二羟基苯甲
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二、定性(确证)方法
1. 基本原则
质谱法只有在与色谱分离在线或脱机联用时才能作为 确证方法 在分析仪器上的进样顺序是:空白溶剂、阴性控制样 品、要确证的样品、阳性控制样品再进样,最后是阴 性控制样品
M 27.9949 R 2500 M 28.0061 27.9949
ArCl+ 74.9312 As+ 74.9216
R M 74.9216 7800 M 74.9312 74.9216
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JJF(闽)1032-2010 液相色谱-质谱联用仪校准规范:定性 重复性 RSD≤2% JY/T 021—1996 分析型气相色谱方法通则:整机重复性 保留 时间RSD≤5%
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4-Br
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