二维核磁简介

二维NMR图谱的表现形式
1、堆积图
2、等高线图 contour
Leabharlann Baidu量子跃迁谱( HSQC)的原理:
2DNMR是两个独立频率变量的函数,共振 吸收分布在由两个频率轴组成的平面上 ,耦合 常数在二维平面上展开,构成二位核磁共振平 面图. 异核单量子相干谱只检测ΔM=±1的单量 子跃迁,通过15N,1H的耦合关系(本文献)找出他 们之间的连接关系.
NMR spectroscopy
核磁共振实验的分类:
1、连续波NMR实验（简称CW)，获得一维NMR谱，仅能做 1H- NMR实验。（依赖于－个FID信号） 2、单脉冲－傅立叶NMR实验（SPFT-NMR), 获得一维NMR谱,在 图谱上完全等同于CW,只是扫描时间短，可以做氢谱，也可 以做碳谱（依赖于－个FID信号）
文献所用方法简述
• 1、实验部分： • 实验对照组1：15N,13C标记氧化型和还原型 的cVIMP-Cys,分别测NMR。 • 实验对照组2:15N标记的cVIMP-Cys,一组加 入做标记的p97N ,另一组不加.这组实验记 录IcpIx/Iapo(加p97N组的峰高值与不加p97N 组的峰高值的比值),并计算
结果与讨论
• 1、NMR Spectroscopy Indicates that cVIMP-Cys Is Partially Disordered（存在 无规卷曲部分） • 进一步实验： • 目的：在单个残基水平上研究构象变化和 结构特征。对49-71和124-189残基做标记， NMR图如下：
3、一维多脉冲傅立叶NMR实验，获得一维NMR谱。mPFT-NMR在 SPFT-NMR基础上，得到特定的信息。（依赖于－个被调制FID信号）
4、二维多脉冲－傅立叶NMR实验（2D－mPFT-NMR), 得到二维NMR谱 （堆积图或等高线图）。（依赖于两个FID信号的图谱） 5、三维多脉冲－傅立叶NMR实验（3D－mPFT-NMR), 得到三维NMR谱 （堆积图或等高线图）。（依赖于三个FID信号的图谱）
二维NMR的分类
2D－NMR可以分为三大类： 1、2D-J分解谱：（1）同核二维J分解谱 （2）异核二维J分解谱 2、2D-化学位移相关谱 ： 同核化学位移相关谱（1H-1HCOSY) 异核化学位移相关谱 (1H-13CCOSY) 异核远程相关谱 (nJCH correlations等同于 HMBC谱 ) 3、 多量子跃迁 谱: HSQC 谱 (1H捡出的，异核单量子相干谱） HMQC谱 (1H捡出的，异核多量子相干谱） HMBC谱 (1H捡出的，异核多键相关谱）
A：用p97N滴定15N 标记的cVIMP-Cys 表明两个蛋白质之 间有相互作用。 B：50-71位的残基 的峰值显著线性扩 展，有些信号消失。 C：局部有化学位 移的变化。
• 图谱说明50-71位残基就是预测的螺旋结构。 • C段部分受p97N的影响比N段部分小，c图 显示C段少数残基化学位移发生变化。B图 仍可观测到C段的线性展宽。 • 163-181残基扩展最多，说明在此cVIMPCys和p97N形成一个瞬时的结构。
• A：氨基酸序列，黑色的未标记，蓝/绿表示 氧化还原型可/不可转换的序列。 • B：蓝色的是氧化型，绿色的是还原型。箭 头指示出有变化的峰。 • C、D：I 、II区域放大图。 • 虚线区：含NH2的侧链。 • 内框：色氨酸信号。
• 结论：标记区域具有很小的紧致的结构。 对比发现二硫键对整个蛋白质的结构几乎 没影响。173-189位残基的转换表明在C端 有两个半胱氨酸。