男性非淋菌性尿道炎病原体的实验室诊断

上海医学２００６年第２９卷第１１期
・短篇论著・男性非淋菌性尿道炎病原体的实验室诊断
袁涛叶元康姜启全章劲夫卞崔冬
泌尿生殖系统感染是Ｉ临床常见疾病，与性传播性疾病（ＳＴＤ）有关的常见病原体为淋病奈瑟菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ
ｇｏｎｏｒ—ｒｈｏｅａｅ，Ｎｇ）、沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｅｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ，Ｃｔ）、解脲支原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｔｙｔｉｕｍ，Ｕｕ）和人型支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｈｏｍｉｎｉｓ，Ｍｈ）。

近年来，支原体和衣原体感染的发病率日趋上升，在西方国家已超过淋病，居ＳＴＤ之首…，我国近年来感染人数也在迅速增加。

在男性，可引起非淋菌性尿道炎（ｎｏｎｇｏｎｏｅｏｃｅａ［ｕｒｅｔｈｒｉｔｉｓ，ＮＧＵ）、精索炎、前列腺炎和副睾炎，与男性不育亦有密切关系。

本研究对同时进行Ｕｕ、Ｍｈ和Ｃ￡检测的７００例泌尿外科门诊患者的检测结果进行分析，旨在研究本地区男性泌尿生殖系ＮＧＵ感染者主要病原体的状况及其关系，为临床提供可靠的参考依据。

一、资料与方法
（一）材料鸡成纤维细胞（ＭｃＣｏｙ细胞），选择性液相培养基（法国生物梅里埃公司），运送培养液（ｐＨ值为７的０．０１ｍｏｌ／Ｌ的磷酸盐缓冲液内含５％胎牛血清、２０００Ｕ／ｍＬ的青霉素Ｇ钾和５＞ｇ／ｍＬ的两性霉素Ｂ）．Ｇｅｍｉｓａ染液及其他培养用器材。

（二）方法
１．标本采集：收集２０００年９月至２００５年６月在我院泌尿外科门诊就诊的男性患者７００例，年龄１８～６６岁，平均为（３２．７士２．８）岁。

均具有典型的尿路刺激症状、临床拟诊为泌尿生殖系感染且近期内未服用过抗生素。

用无菌棉拭子插入男性患者尿道口２～４ｃｍ处，将棉拭子轻轻旋转数次并停留３０Ｓ后取出或收集患者精液、前列腺液置无菌采样管内，立即送检。

２．Ｕｕ和Ｍｈ培养法：采用支原体培养法检测Ｕｕ和Ｍｈ。

采样后棉拭子置运送保养液中，室温４～６ｈ或４℃冰箱１２ｈ，从中吸取２００ＦＬ接种于ｕ“和Ｍｈ选择性液相培养基中，置３７℃培养，逐日观察结果。

Ｕｕ培养２４ｈ，Ｕｕ选择性液相培养基颜色由黄色变为红色且液体清亮无混浊为阳性，３ｄ后培养基不变色或明显浑浊者为阴性；Ｍｈ培养７２ｈ，Ｍｈ选择性液相培养基颜色由黄色变为橙红色
作者单位：２０００６５上海，同济大学附属同济医院泌尿外科（袁涛、姜启全、章劲夫、卞崔冬），中心实验室（叶元康）且液体清亮无混浊为阳性，５ｄ后培养基不变色或明显浑浊者为阴性阻］。

试验质量控制：以Ｕｕ和Ｍｈ国际标准株为阳性对照，同时设立阴性对照，全部检验由专人操作。

３．Ｑ细胞培养法：用ＭｃＣｏｙ细胞接种于装有Ｅａｇｌｅ培养液的培养瓶中（含１０％胎牛血清），３５℃培养２～３ｄ使细胞生长成单层，胰酶一乙二胺四乙酸消化，再经洗涤。

将细胞悬液接种于２４孔培养板中（每孔孔底预置盖玻片），３５℃培养至盖玻片上长成单层细胞，吸取培养液，加入待检标本。

每份标本种２孔，４℃、离心半径１０ｃｍ，３０００ｒ／ｒａｉｎ离心１ｈ，吸取培养液加入含１ｐ．ｇ／ｍＬ放线菌酮的维持液３５℃培养２ｄ。

吸取培养液，取出单层细胞盖玻片进行Ｇｅｍｉｓａ染色观察包涵体，显微镜下见感染细胞浆中出现包涵体者为阳性。

二、结果
７００例有效标本中，支原体阳性２７１例，感染率为３８．７％（２７１／７００例），其中溉阳性２４４例，感染率为３４．９％（２４４／７００例）；Ｍｈ阳性３６例，感染率为５．１％（３６／７００例）；Ｕｕ和Ｍｈ合并感染者２０例，感染率为２．９％（２０／７００例）。

Ｃ￡阳性９７例，感染率为１３．９％（９７／７００例）。

而衣原体与支原体合并感染者５２例，感染率为７．３％（５２／７００例）。

三、讨论
支原体和衣原体是一类在自然界中广泛传播并可在光学显微镜下观察到的细胞内寄生微生物，广泛寄生于人类、哺乳动物及鸟类，但仅少数有致病性。

是引起人类泌尿生殖道感染的常见病原体和多种泌尿男科疾病潜在的致病因素，文献报道由两者引起的泌尿系统感染性疾病是同期细菌引起的３～１６倍。

已经从人类泌尿生殖道中分离出７种支原体，其中Ｕｕ和Ｍｈ是对人类泌尿生殖道具有致病作用的微生物。

衣原体属分为Ｃ￡、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体３个种。

只有Ｃ￡和鹦鹉热衣原体可引起人类疾病，引起人类泌尿生殖道感染的主要是ｏ，鹦鹉热衣原体主要感染禽类和低等哺乳动物，偶尔波及到人类，尿道为其最主要的感染部位９］。

本研究检测７００例男性患者的Ｃｔ、Ｕｕ和Ｍｈ３种病原体后发现，支原体检出率较高。

本组Ｕｕ的检出率最高，为３４．９％，说明本地区ＮＧＵ患者中支原体感染仍以Ｕｕ为主，与国内Ｕｕ检出率为３５％～４７％的报道相符ｎ］。

７００
　万方数据
・８１２・
例患者中衣原体与支原体同时阳性者５２例，感染率为７．３％，Ｕｕ和Ｍｈ同时感染者２０例，感染率为２．９％，说明混合感染在泌尿科疾病中已不容忽视，应引起临床关注。

而Ｃ￡感染者９７例，感染率为１３．９％，低于欧美等地的报道［５］，可能与国情不同、对Ｑ的易感人群不同和检测方法灵敏度不同等有关。

参考文献
ｌ吴志华，主编．皮肤性病学．第２版．广州：广东科学技术出版社，１９９４．
２叶元康，王慕娣，华红一，等．新支原体成品培养基的研究．中
墨垒！！ｇ丛！丛生！！！！！！！∑！！！！！堕！！！
华流行病学杂志，１９９８，１９：２２２．
３王风，石峻．沙眼衣原体在男性泌尿生殖系的感染．中国皮肤性病学杂志，１９９５，９：２３ｌ＿２３３．
４赵季文，徐萃瑜，汪宁，等．我国三个地区性病患者和健康人脲原体、人型支原体和沙眼衣原体感染的流行病学研究．中华流行病学杂志，１９９２，１３：２１６－２１９．
５ＳｃｈｉｌｌｉｎｇｅｒＪＡ，ＤｕｎｎｅＥＦ，ＣｈａｐｉｎＪＢ，ｅｔａ１．ＰｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆＣｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｍｏｎｇｍｅｎｓｃｒｅｅｎｅｄｉｎ４Ｕ．Ｓ．Ｃｉｔｉｅｓ．ＳｅｘＴｒａｎｓｍＤｉｓ，２００５。

３２：７４—７７．
（收稿Ｆｊ期：２００５一Ｏｌ一２４）
（本文编辑：王小燕）
非酒精性脂肪肝患者的细胞免疫状态魏玮刘智华翟凤仪王骏
外周血Ｔ淋巴细胞亚群之间的动态平衡是维持机体正常免疫反应的前提，而脂肪肝患者的细胞免疫状态通常发生改变。

本研究对我院２００３年９月至２００５年９月收治的１０８例非酒精性脂肪肝患者的Ｔ淋巴细胞亚群进行检测分析，旨在揭示非酒精性脂肪肝与细胞免疫之间的关系。

一、对象与方法
１．研究对象：收集我院２００３年９月至Ｚ００５年９月收治的１０８例非酒精性脂肪肝患者，按《非酒精性脂肪肝诊断标准（草案）》ｕ３进行临床诊断和分型，其中单纯性脂肪肝组６６例，男３１例，女３５例，年龄２０～７０岁，平均为（５０．７±１１．４）岁；脂肪性肝炎组４２例，男１９例，女２３例，年龄２２～６８岁，平均为（４６．８±１１．８）岁。

对照组为３４名门诊体检健康者，男１９名，女１５名，年龄２０～７７岁，平均为（５１．５士１３．７）岁。

３组的性别、年龄具可比性，差异均无显著性（Ｐ值均＞０．０５）。

２．检测方法：Ｔ淋巴细胞亚群ｃＤ３，ｃＤ４、ｃＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８检测采用流式细胞术法，试剂为ＢＤ公司荧光抗体标记试剂盒。

肝功能各项指标采用Ｂｅｃｋｍａｎ生化仪进行检测。

影像学检查采用Ｂ型超声仪或ＣＴ。

３．临床诊断与分型：凡具备下列第１～５项及第６、７项中任一项者可诊断为非酒精性脂肪肝：①有易患因素如肥胖、２型糖尿病、高脂血症和女性等；②无饮酒史或饮酒折合量每周＜４０ｇ；③除外病毒性肝炎、药物性肝病、Ｗｉｌｓｏｎ病、全胃肠外营养和自身免疫性肝病；④除原发病
作者单位：２００１２０上海，同济大学附属东方医院中西医结合研究室临床表现外，可出现乏力、肝区隐痛等症状，可伴肝脾肿大；⑤血清转氨酶可升高，并以丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）为主，可伴有７－谷酰基转移酶（ＧＧＴ）、铁蛋白和尿酸等增高；⑥肝脏组织学有典型表现；⑦有影像学（Ｂ超或ＣＴ）诊断依据。

非酒精性脂肪肝的临床分型：单纯性脂肪肝：凡具备下列第１～２项及第３、４项中任一项者即可诊断：①具备临床诊断标准１～４项；②肝功能检查基本正常；③影像学表现符合轻、中度脂肪肝；④肝脏组织学表现符合单纯性脂肪肝，无明显肝内炎症和纤维化。

非酒精性脂肪性肝炎：凡具备下列第１～２项和第３、４项中任一项者即可诊断：①具备临床诊断标准１～４项；②血清ＡＬＴ和（或）ＧＧＴ高于正常值上限的１．５倍，持续时间超过４周；③有影像学诊断依据；④肝脏组织学诊断证实。

４．统计学处理：计量资料以均数土标准差表示，组间比较采用ｔ检验。

二、结果
单纯性脂肪肝组和脂肪性肝炎组的ＣＤ４、ＣＤ８与对照组有显著性差异（Ｐ值分别＜０．０５、０．０１）；脂肪性肝炎组与对照组的ＣＤ３差异有显著性（Ｐ＜０．０５），但单纯性脂肪肝组与对照组的ＣＤ３差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。

见表１。

表１３组Ｔ淋巴细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８和ＣＤ４／ＣＤ８比较与对照组比较：①Ｐ＜０．０５，ｏＰ＜０．０１
　万方数据。