消化道平滑肌

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实验二 药物量-效关系
三. 阿托品对ACh的拮抗效应: 6. 加入10-4M 阿托品 0.05ml,作用2min。 7. 重复步骤5、6。
实验二 药物量-效关系
表3. ACh的给药剂量和累积浓度
次序 浓度
剂量(ml) 终浓度(mol/L)
1
10-6
0.15
10-8
2
10-5
0.15
10-7
3
10-4
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
二. 实验项目 1. 温度作用
正常平滑肌收缩曲线(38℃) 。
换15ml室温台氏液
38℃台氏液
实验一 消化道平滑肌生理特性观察 2. 1:100,000 Ach 2滴,观察记录,冲洗3次。 3. 1:10,000 Adr 2滴,观察记录,冲洗3次。 4. 1N HCl 2滴,观察记录,冲洗3次。 5. 无钙液冲洗3次,无钙液,观察记录,不冲。 6. 1:100,000 Ach 2滴,观察1min后,含钙台氏
【实验器材】 BL-420E实验系统;离体平滑肌灌流装置; 台氏液、无钙台氏液,HCl, Ach, 肾上腺素 (Adr)、阿托品(atr) 。
恒温平滑肌灌流装置
麦氏浴槽
家兔十二指肠 (2cm)
实验一 消化道平滑肌生理特性观察 一. 恒温平滑肌灌流装置
1. 恒温、台式液15ml 、通空气。 2. 十二指肠固定,连接换能器,预张力。 3. BL-420E系统: 实验项目/消化实验/消化道平滑肌生理特性。 4. 稳定灌流。
实验二 药物量-效关系
一. 恒温平滑肌灌流装置 1.豚鼠处死、取一段2cm回肠,台氏液冲洗, 2.固定,38℃,台氏液15ml,通气。 3. BL-420E系统:
实验项目/消化实验/消化道平滑肌生理特性。
4.平稳灌流5-10分钟, 二. ACh量-效曲线:
5. 按表3顺序加ACh 。
6.记录每次ACh浓度,对应张力。
2. 药物对消化道平滑肌的影响: ACh →M受体→ 兴奋,收缩; 量-效关系:剂量依赖性。
阿托品阻断M受体 →平滑肌舒张; 解除痉挛,缓解腹痛等。(拮抗效应)
【离体小肠平滑肌的实验条件】
❖ 恒温:38℃ ❖ 台式液:适于哺乳类小肠 ❖ 氧气:气泡单一连续
实验中必须时刻满足这3个条件
【实验动物】 兔 :十二指肠, 豚鼠:回肠
38℃台氏液 室温台氏液 乙酰胆碱 肾上腺素 无钙台氏液 无钙液+ACh 台氏液(复钙) 台氏液+ACh
收缩频率
正常 减少 增加 减少 消失 无/很弱 恢复 增加
收缩幅度
正常 降低 增加 降低 消失 无/很弱 恢复 增加
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
平滑肌兴奋-收缩作用
Ca2+内流放
CM(钙调蛋白) 细胞内Ca2+↑
激活
4Ca2+-CM
MLCK(肌球蛋白轻链激酶)
MLC-磷酸化
横桥-肌丝滑动
肌肉收缩。
拮抗药对激动药量效曲线的影响
Emax (%)
1.0
1.0
率0.5
0.5
0.1
10 100 [A] 0.1
10 100 [A]
竞争性拮抗作用
非竞争性拮抗作用
受体占领学说
Байду номын сангаас
0.15
10-6
4
10-3
0.15
10-5
5
10-2
0.15
10-4
【注意事项】
❖ 固定时尽量减少小肠平滑肌的损伤 ❖ 每次实验效果明显后,立即更换浴槽内
的台氏液,并冲洗2~3次 ❖ 浴槽内温度应保持在38℃ ❖ 量效关系中依次递加Ach时必须保证在高
峰下降前
讨论分析
1. 温度改变对小肠平滑肌的影响?为什么? 2. ACh 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 3. Adr 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 4. HCl 对小肠平滑肌活动的影响?为什么? 5. 无Ca2+台氏液的作用? 6. ACh作用的量-效关系特点? 7. 阿托品对ACh的拮抗效应有什么特点?
液冲洗3次。 7. 1:100,000 Ach 2滴,观察对Ach的恢复。
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
表1. 影响小肠平滑肌活动的因素
观察项目
收缩频率 收缩幅度
温度改变
ACh
Adr
HCl 无钙液
无钙液+ACh 台氏液(复钙)
台氏液+ACh
实验一 消化道平滑肌生理特性观察
表2. 预期实验结果
观察项目
【实验目的】
❖ 观察哺乳动物胃肠平滑肌的生理特性以及 影响因素。
❖ 药物量效关系及拮抗药物特性。 ❖ 学习离体平滑肌基本实验方法。
【实验原理】
1. 消化道平滑肌的特性 兴奋性较低,收缩缓慢; 具有一定紧张性; 自动节律性、较大的伸展性; 对牵张、温度和化学刺激比较敏感。 离体灌流:仍保持节律性活动, 经典模型:神经-体液调节、刺激的影响。
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