高效液相色谱法检测葡萄酒中5种人工合成色素方法的探讨_欧阳燕玲

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固相萃取-超高效液相色谱法同时测定葡萄酒中的12种合成色素

曾永芳，眭世闺，李莜
贵港市疾病预防控制中心，广西贵港５３７１００
摘要：目的
建立同时测定葡萄酒中的１２种人工合成色素的固相萃取一超高效液相色谱（ＳＰＥ—ＵＰＬＣ）分析方法。方
法葡萄酒样品经ＯＡＳＩＳＷＡＸ固相萃取小柱净化和富集，然后进行ＵＰＬＣ分析。采用反相ＡｃｃｕｃｏｒｅＣ柱（１００ｍｍｘ４．６ｍｍ，２．６ｍ）分离，以甲醇一乙酸铵水溶液（０．０２ｍｏｌ／Ｌ）为流动相进行梯度洗脱，使用可变波长分别在４２８ｎｍ、
ｐｈａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ— — ｕｌｔｒａｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ＺＥＮＧＹｏｎｇ—ｆａｎｇ，ＳＵＩＳｈｉ— ｉ，ＬＩＹｏｎ
５１０ａｍ、５６０ｎｍ和５４７ｎｍ下进行检测。结果１２种合成色素的线性关系良好，相关系数为０．９９９４—１．００００；线性范围分别为：柠檬黄、苋菜红、胭脂红、诱惑红为０．２０ｍｇ／Ｌ一５０．０ｍｇ／Ｌ，新红、亮蓝、红色２Ｇ、偶氮玉红、荧光桃红Ｂ为０．３０ｍｓ／Ｌ～５０．０ｍｇ／Ｌ，日落黄、赤藓红、虎红为０．５０ｍｇ／Ｌ～５０．０ｍｇ／Ｌ；检出限为０．０５ｍｇ／Ｌ一０．１５ｍｇ／Ｌ，加标回收率为８２．８％～１０６．Ｏ％，相对标准偏差为０．３０％一３．８７％。结论非法添加的１２种人工合成色素的检测。本方法简单、快速、结果准确，可用于同时测定葡萄酒中

超高效液相色谱快速检测葡萄酒中5种合成着色剂

超高效液相色谱快速检测葡萄酒中5种合成着色剂
陈欣欣;谢娅黎;肖汉;杨彬
【期刊名称】《现代食品科技》
【年(卷),期】2009(025)009
【摘要】采用超高效液相色谱同时测定葡萄酒中5种人工合成着色剂(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红).采用ACQUITYUPLC(R)BEHC18色谱柱分离,以甲醇-20mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱.利用每种色素最大可见吸收波长,在检测过程中变化波长测定各个着色剂以消除杂质干扰,在428nm测定柠檬黄,520nm测定苋菜红,509 nm测定胭脂红,483nm测定日落黄,528 nm测定赤藓红.结果表明,该法简便、快速、重现性好、回收率高.
【总页数】3页(P1099-1100,1098)
【作者】陈欣欣;谢娅黎;肖汉;杨彬
【作者单位】河南省产品质量监督检验院河南郑州450004;河南省产品质量监督检验院河南郑州450004;河南省产品质量监督检验院河南郑州450004;河南省产品质量监督检验院河南郑州450004
【正文语种】中文
【中图分类】TS261.7
【相关文献】
1.食品中6种人工合成着色剂的快速检测 [J], 刘恒;叶梅;朱明星;谭诗珂;曾琳;王艳琴;黄国华
2.测定葡萄酒中合成着色剂含量的不确定度评定 [J], 单祝庚;杨静
3.葡萄酒中合成着色剂检测方法的探讨 [J], 赵烨
4.固相萃取-高效液相色谱法在食品中合成着色剂检测中的应用 [J], 赵俊;刘虹
5.高效液相色谱-二极管阵列法同时测定卷烟爆珠壁材中10种水溶性合成着色剂[J], 李响丽;张凤梅;范多青;蔡昊城;高莉;王庆华;胡燕;李超
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葡萄酒中合成着色剂检测方法的探讨

葡萄酒中合成着色剂检测方法的探讨作者：赵烨来源：《中外食品工业》2013年第11期摘要：目的：提高葡萄酒中合成着色剂检测方法的回收率和精密度。

方法：改进试样前处理过程中的提取步骤。

结果：检测方法的回收率为91.5%-107.2%，测定结果相对标准偏差小于7.2%。

结论：改进后的检测方法操作简便，精密度好准确度高。

关键词：精密度准确度中图分类号：R155.5 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2013）22-0030-02色素（着色剂）作为食品添加剂，可分为食用天然色素和人工合成色素两大类，前者一般较为安全。

人工合成色素是用人工化学合成方法所制得的有机色素，主要是以煤焦油中分离出来的苯胺染料为原料制成的，本身无营养价值，但由于其成本低廉、色泽鲜艳、着色力强、性质稳定、配色方便，可以增加食品的感官美和提高人们的食欲，在食品生产加工行业中被广泛应用。

研究表明过量摄入人工合成色素，将会在体内畜积，对肾脏、肝脏产生一定的伤害。

偶氮化合物在体内代谢，可形成具有潜在致突变的化合物。

因此GB2760-2011《食品添加剂使用标准》中对着色剂的使用范围及限量有明确的规定，葡萄酒中禁止使用。

1 原理试样中的人工合成着色剂用聚酰胺吸附法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和峰面积外标法定量。

2 溶剂与材料（1）甲醇：色谱纯。

（2）聚酰胺粉（尼龙6）：过200目筛。

（3）甲醇+甲酸溶液：6+4。

（4）乙醇+氨水+水溶液：7+2+1。

（5）柠檬酸溶液：200g/L。

（6）pH6、pH4的水：水加柠檬酸溶液调pH值。

（7）乙酸铵溶液：0.02mol/L称取1.54g乙酸铵加水定容至1000ml 溶解，调pH=4经0.45μm滤膜过滤。

（8）合成着色剂标准溶液：采用国家标物中心的有证标准溶液。

3 仪器和测定条件（1）高效液相色谱仪：（HPLC）岛津SPD-10Avp配有紫外检测器。

超高效液相色谱法同时测定饮料中5种人工合成色素

在最佳色谱条件下对标准样品和实际样品进样分析结果见图饮料样品b色谱图fig1chromatogramsmixedfivepigmentstandardsbeveragesample色素名称保留时间min线性方程检出限mgl柠檬黄34y3211098710099950030苋菜红57y2801027510099980083胭脂红34y2701029810099990100日落黄63y239101601010000008306y6451054810099970035种人工合成色素的保留时间线性关系相关系数和检出限tableretentiontimeslinearequationscorrelationcoefficientsdetectionlimitsfivesyntheticpigments样品序号色素含量gkg柠檬黄苋菜红胭脂红日落黄ndndnd0024nd0028ndndndndndndndndnd0031nd00030018ndndndnd0013nd注
Abstract ：Objective: To develop an ultra performance liquid chromatography (UPLC) method for the determination of five
synthetic pigments such as tatrazine, amaranth, carmine, sunset yellow and brilliant blue in beverage. Methods: Synthetic
变宽，柱效降低，且综合考虑检测大量样品时溶剂的消耗量，本实验选择 0.25mL/min 为最佳流速。在最佳色谱条件下，对标准样品和实际样品进样分析，结果见图 1 。
AU
2.00

高效液相色谱法同时测定葡萄酒中5种酸性红色素

Ａｂｓｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ（ＨＰＬＣ）ｍｅｔｈｏｄｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ
（１．山东省食品药品检验研究院，山东济南摘２５０１０１；２．中海油山东化学工程有限责任公司，山东济南２５０１０１）
要：通过对提取溶剂、流动相条件、最大吸收波长及色谱条件的优化，建立了一种同时测定葡萄酒中
为１．５％～５．８％。
关键词：葡萄酒；酸性红色素；高效液相色谱
中图分类号：０６５７．７２文献标识号：Ａ文章编号：１００１ — ４９４２（２０１４）０９— ０１１７ — ０４
ＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＦｉｖｅＡｃｉｄＲｅｄＰｉｇｍｅｎｔｓｉｎＧｒａｐｅＷ＿ｉｎｅｂｙＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ＷａｎｇＹａｎｌｉ，ＪｉａｎｇＴａｏ，ＳｕＳｈｕ￣ｎｇ，ＹｕＷｅｎｊｉａｎｇ，ＸｕｅＸｉａ
（１．ＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，／ｎＪａｎ２５０１０１，Ｃｈｉｎａ；２．ＣＮＯＯＣＳｈａｎｄｏｎｇＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｊ／ｎａｎ２５０１０１，Ｃｈｉｎａ）

高效液相色谱法测定葡萄酒中人工合成色素

率大于９５％．
关键词：高效液相色谱法；葡萄酒；柠檬黄；苋菜红；胭脂红；日落黄
中图分类号：ＴＳ２６１．７文献标志码：Ａ
由于葡萄酒生产工艺决定，葡萄酒的生产需要
一
个较长的酿制过程．一些生产厂商为了快速谋取
ＯＤＳ — Ｃ。色谱柱，甲醇和０．０２ｍｏｌ／Ｌ乙酸铵的水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为０．８ｍＬ／ｍｉｎ，
采用紫外检测器，检测波长为４７０ｎｍ．该方法测定结果的相对标准偏差小于３％（ｎ＝６），平均回收
纯水．
Ｓｈｉｍａｄｚｕ１０Ａｖｐ型高效液相色谱仪，日本岛津公司；ＯＤＳ — Ｃ型液相色谱柱（１５０ｍｍ ×４．６ｍｍ，５
Ｉｘｍ），ＧＬＳｃｉｅｎｃｅｓ公司；０．４５ｍ水相针管滤膜，
液相色谱法，并取得良好效果．
１８．００ｍｉｎ，Ｖ（Ｂ相）为９８％；紫外检测器检测波长
４７０ｎｍ．
收稿日期：２０１２—０７—０７作者简介：宗万里，男，工程师，主要从事食品检测方面的研究
第３１卷第２期
５８２０１３年４月
食品科学技术学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ

高效液相色谱法测定蜜饯中的合成着色剂

高效液相色谱法测定蜜饯中的合成着色剂张建炀【摘要】采用了用高效液相色谱-二极管阵列法测定蜜饯中的5种合成着色剂.用Symmetry C18柱,甲醇-乙酸铵溶液(0.02 mol/L)为流动相,流速1.0 mL/min,二极管阵列检测器选择柠檬黄428 nm、苋菜红520 nm、胭脂红510 nm、日落黄485 nm、亮蓝629 nm波长进行检测,并以保留时间和光谱图定性,同时比较了不同前处理方式对测定结果的影响.不同样品的加标回收率为85%～92%.【期刊名称】《凯里学院学报》【年(卷),期】2010(028)003【总页数】3页(P63-65)【关键词】高效液相色谱;二极管阵列法;蜜饯;合成着色剂【作者】张建炀【作者单位】黔东南州质量技术监督检测所,贵州,凯里,556000【正文语种】中文合成着色剂即人工合成的色素,作为食品添加剂广泛用于各类食品,国家对其使用有明确的限量标准.合成着色剂的滥用会对人体造成不同程度的危害,包括一般毒性、致泻性、致突性与致癌作用.国标 GB/T 5009.35-2003中介绍了饮料、配制酒类、糖果蜜饯、巧克力豆及着色糖衣制品等产品的前处理方法,并用梯度洗脱,紫外检测器在254 nm波长处测定各合成着色剂的含量,用该方法处理部分蜜饯样品,样品中的果胶容易堵住 G3垂融漏斗,且在254 nm波长处,亮蓝的色谱吸收较弱,不能很好的进行定量.本文主要研究了蜜饯样品不同的前处理过程,并用高效液相色谱二极管阵列检测器的3D数据采集功能对各种合成着色剂进行测定,简单快速,结果准确,适用于食品安全监控.Waters高效液相色谱Alliance系统(E2695、2998 PDA检测器),Empower 2软件,超声波清洗器,真空泵.20%乙醇-氨水溶液(99+1),乙酸铵溶液(0.02 mol/L),合成着色剂标准溶液(国家标准物质),实验室用水为超纯水.色谱柱,Symmetry C18 4.5 mm×150 mm,5μm;柱温30 ℃;流动相,甲醇—乙酸铵溶液(0.02 mol/L);流速 1 mL/min;检测波长,PDA 200～700 nm扫描;梯度洗脱,甲醇:20%～35%,3%;35%～80%,9%;80%,5 min;进样量10μL.a.按 GB/T 5009.35-2003聚酰胺吸附法进行处理[1].b.粉碎或剪碎后,称取10.00 g左右样品,加入20%乙醇 -氨水溶液 20 mL,超声波提取10 min,将上清经塞有玻璃纤维的漏斗抽滤,并用30～50 mL 20%乙醇—氨水溶液少量多次洗涤样品过滤,并合并滤液至烧杯,并用少量水多次清洗抽滤瓶,清洗液并入烧杯,将烧杯置电热板蒸发溶剂至30 mL左右,调p H至6.0,并按a方法进行处理.将柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝的国家标准溶液配制成50.0μg/mL的混标,并稀释成1.00,5.00,10.00,20.00,50.00μg/mL的标准系列;选择柠檬黄 428 nm、苋菜红 520 nm、胭脂红510 nm、日落黄485 nm、亮蓝629 nm波长处进行定量根据保留时间及光谱定性,外标峰面积法定量.由图1可见,5种合成着色剂在200～700 nm波段中的最大吸收值所在波长分别为柠檬黄428(258)nm、苋菜红 520 nm、胭脂红510 nm、日落黄485(236)nm、亮蓝629 nm.波长越接近末端吸收波长200 nm,吸收光谱干扰越大,因此选择柠檬黄的最佳波长为 428 nm,日落黄的最佳波长为485 nm.为了进一步确认方法的专属性,在建立分析方法的过程中,利用了二极管阵列检测器的特性,还进行了峰纯度考察.经过试验,证明所有目标峰的纯度均大于纯度阈值,且纯度角均接近于0,即所有目标峰的光谱一致性均很理想,可以确保测定结果的专属准确.传统的液相色谱法通常使用保留时间进行定性.但是在复杂样品的分析中容易产生假阳性的结果.因此本文利用了二极管阵列检测器的优势,使用标准品溶液建立了光谱库,随后在样品测定中进行了光谱匹配,相对单一的保留时间定性,杜绝了假阳性误判的可能性,使得结果更为可靠.配制1.00,5.00,10.00,20.00,50.00μg/mL的标准溶液进行测定,以质量浓度ρ(μg/mL)对峰面积做标准曲线,回归方程和相关系数见表1.由表 1可知,5种合成着色剂在 1.00～50.00μg/mL范围内线性关系良好.取5份含合成着色剂的不同样品,用国标法即a方法和改进后的b方法处理样品后测定含量,结果见表2.配对比较显著性检验结果,p＞0.05,表明两法测定结果无显著差异,因此可采用本文试样处理b法替代国标法的样品处理,且能很好解决蜜饯样品前处理时果胶容易堵塞 G3垂融漏斗的问题.取2个代表性样品,制样后每个样品各取2份,其中一份加入合成着色剂标准溶液,混匀后按试样处理b方法测定其含量并计算回收率(见表3).结果表明,回收率在85%～92%之间,符合国标规定的加标回收率在70%～95%[2]的要求.本文采用20%乙醇—氨水溶液溶液洗脱蜜饯样品中的合成着色剂,再进行聚酰胺吸附分离,解决了样品前处理时果胶容易堵住 G3垂融漏斗的问题,且用二极管阵列检测器的3D数据采集功能对5种常用合成着色剂进行测定,用光谱匹配杜绝了假阳性的出现,同时采用各成分的最佳吸收波长进行定量,提高了数据的准确性,适用于蜜饯类食品的合成着色剂测定.【相关文献】[1]中华人民共和国卫生部,中国国家标准化管理委员会.食品卫生检验方法理化部分[S].北京:中国标准出版社,2004.[2]王竹天,杨大进,吴永宁,等.食品卫生检验方法(理化部分):注解(下)[M].北京:中国标准出版社,2008.。

运用高效液相色谱测定葡萄酒中的添加剂

运用高效液相色谱测定葡萄酒中的添加剂作者：来源：《食品界》2017年第04期在科学技术快速发展的背景下，许多新的检测技术和检测方法被广泛应用在食品安全检测中，有利于从技术层面保障食品的健康。

当前有不同类型的检测方法可以分别测定葡萄酒中的甜味剂、色素、防腐剂等，但是这些方法需要花费较长的检测时间，检测程序相对繁杂，不能同时快速测定葡萄酒中不同类型的添加剂。

高效液相色谱作为一种全新的检测方法，将其应用于葡萄酒的测定中，可以很好地检测出酒中的添加剂，达到良好的测定效果。

高效液相色谱法概述对于高效液相色谱法而言，其也称之为近代柱色谱、高分离度液相色谱、高速液相色谱、高压液相色谱等，可分为亲和色谱、离子色谱、吸附色谱、体积排阻色谱、分配色谱等类型，指的是在分析化学和生化中经常采用的柱层析仪。

作为色谱法中的重要内容，高效液相色谱是以液体为流动相，借助高压输液系统，在装有固定相的色谱柱中泵入不同比例的缓冲液、混合溶剂或不同极性的单一溶剂，当柱内的成分进行分离后加以检测，有效分析试样。

该方法可以及时准确解决不同学科领域中的数据问题，如法检、商检、工业、化学、农业、医学等，逐渐成为重要的分离分析技术。

材料与方法仪器设备和材料、试剂。

本实验中采用的仪器设备主要是沃特世高效液相色谱仪ACQUITY UPLC H-Class Bio、二极管阵列检测器、自动进样器。

而实验中使用的10份葡萄酒样品规格为750mL，试剂为0.5mg/mL的赤藓红、胭脂红、柠檬黄、苋菜红、日落黄与1.00mg/mL的诱惑红，纯度为99.5%的对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸甲酯、苯甲酸，纯度为99.9%的糖精钠、对羟基苯甲酸乙酯，纯度为91%的靛蓝与纯度为99%的山梨酸和安赛蜜，纯度为92%的新红。

仪器条件和样品处理。

（1）仪器条件。

首先是色谱条件。

本实验选用的色谱柱为ACQUITY UPLC 1.7μm，柱温为30℃，流速是1.0mL/min，而进样量为10μL，流动相为20mmol/L 乙酸铵-甲醇，检测波长涉及630nm的亮蓝、425nm的柠檬黄、515nm的诱惑红、日落黄、胭脂红、苋菜红等，下表1表示的是洗脱梯度。

用高效液相色谱法同时测定葡萄酒中4种色素含量方法的研究

关系，关系数ｒ＞．９。以ＳＮ＝３确定各检出限：啉黄为０２ｇｋ，牢绿为０３／ｇ偶氮玉相均０９９／喹．３ｍ／ｇ坚．７ｍｇｋ，红为０２ｒｋ，利蓝为０１／ｇ．９ｍ，ｇ专／．５ｍｇｋ。精密度（Ｓｎ＝６３０。回收率在９．％～１０８。说明ＲＤ，）＜．％１５０．％
摘要：了建立同时测定葡萄酒中喹啉黄、为坚牢绿、偶氮玉红（又名酸性红，二蓝光酸性红）专利蓝等４种和
色素含量的高效液相色谱方法，采用样品除去乙醇，经水提取和过滤后，用ｃ８使色谱柱（．２０ｍ５ｍ）４６× ５ｍ，
分离，甲醇和乙酸铵（．２ｍｌＬ为流动相梯度洗脱，速为１０ｍＬｍｎ二极管阵列检测器检测，长以００ｏ）／流．／ｉ，波４０ｎ柱温３ ℃ 。结果显示：色素的工作曲线在１０～００１ｍ，０４种．５．ｍ范围内浓度与峰面积呈良好的线性Ｌ
０ｍＬ／ｍｉＴｈｏｇｉｄｒａｅｅｔｒｉｓｄｅｅｔｄｔａｈｔｃｉｖｌｎｇｈｉ０ｎａｄｃｌｎ．ｒｕｈｄｏｅａｒｙｄｔｃｏ，ｔｉｔｃｅｈｔｔｅｄｅｅｔｏｎｗａｅｅｔｓ４１ｍｎｏｕｍｎｔｍｐｒ — ｅｅａｔｅｉ０￣．ｉｈｔｅｆｕａａｔｒｒｉｇｃｖｎｔｃｐｆ１．～５０ｐｇｍＬ，ｏｄｌｎｅｒｒｌｔｏｓｐｅ — ｕｒｓ３ＣＷｔｈｏｒｐｒｍｅｅｓｗｏｋｎｕｒｅｉｈｅｓｏｅｏ００．．／ａｇｏｉａｅａｉｎｈｉｘ

高效液相色谱法同时检测液体食品中6种人工合成色素

高效液相色谱法同时检测液体食品中6种人工合成色素作者：童优芸王小宝王晓燕丁文慧来源：《安徽农业科学》2022年第04期摘要 [目的]通过优化高效液相色谱条件和前处理步骤，建立高效液相色谱法同时测定液体食品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、诱惑红6种人工合成色素，以此提高合成色素的检测效率。

[方法]试验优化了前处理方法，液体食品基质比较干净时采用直接水提进样法，基质比较复杂时采用固相萃取净化法;优化了梯度洗脱程序和波长程序等仪器条件。

[结果]6种人工合成色素浓度在5～50 μg/mL 线性关系良好（R2>0.999）;柠檬黄、苋菜红、日落黄、胭脂红、诱惑红的检出限为0.031 25 mg/kg，亮蓝的检出限为0.125 00 mg/kg，样品添加标准物质后平均回收率在89.0%～100.3%，相对标准偏差（RSD）在1.56%～3.12%。

[结论]该研究可为实验室日常的人工合成色素检测提供参考。

关键词高效液相色谱;食品;人工合成色素;仪器条件;前处理;方法优化中图分类号 TS 207文献标识码 A文章编号 0517-6611（2022）04-0190-05doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.04.049开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Simultaneous Detection of Six Synthetic Pigments in Liquid Food by High Performance Liquid ChromatographyTONG You-yun1，WANG Xiao-bao2，WANG Xiao-yan1 et al（1.Sion Inspection Service Co.， Ltd.， Ningbo， Zhejiang 315000;2.Ningbo Academy of Product and Food Quality Inspection （Ningbo Fibre Inspection Institute），Ningbo，Zhejiang 315000）Abstract [Objective] By optimizing the conditions and pretreatment steps of high performance liquid chromatography， a high performance liquid chromatography method was established for the simultaneous determination of 6 synthetic pigments of lemon yellow， amaranth， carmine， sunset yellow， brilliant blue， and allure red in liquid food， so as to improve the detection efficiency of synthetic pigments.[Method] The experiment optimized the pretreatment method. The direct water extraction method was used when the liquid food matrix was relatively clean， and the solid phase extraction purification method was used when the matrix was more complicated;the instrument conditions such as gradient elution procedure and wavelength procedure were optimized.[Result] The concentration of 6 kinds of synthetic pigments has a good linear relationship between 5-50 μg/mL （R2>0.999）.The detection limit of lemon yellow， amaranth， sunset yellow， carmine and allure red was 0.031 25 mg/kg， and the detection limit of brilliant blue was 0.125 00 mg/kg. The average recovery rate of samples after adding standard substances was 89.0%-100.3%，the relative standard deviation （RSD） was 1.56%-3.12%.[Conclusion] This study can provide reference for the daily synthetic pigment detection in laboratories.Key words High performance liquid chromatography （HPLC）;Food;Syntheticpigments;Instrument conditions;Pretreatment;Method optimization作者简介童优芸（1987—），女，浙江宁波人，工程师，从事食品质量检测工作。

高效液相色谱同时测定葡萄酒中合成色素

ｔｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅｓｙｎｔｈｅｔｉｃｃｏｌｏｒｓ（ｔａｒｔｒａｚｉｎｅ，ａｍａｒａｎｔｈａｎｄｐｏｎｃｅａｕ）ｉｎｗｉｎｅ．Ｗｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｂｙｓｏｌｉｄ
ＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＣｏｕｐｌｅｄＦＵＤａ — ｙｏｕ．ＹＵＡＮＤｏｎｇ．ＺＨＡＮＧＸｉａｏ —ｆａｎｇ
（１．ＡｎａｌｙｓｉｓａｎｄＴｅｓｔｉｎｇＣｅｎｔｅｒ，ＳｉｃｈｕａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｚｉｇｏｎｇ６４３０００，Ｓｉｃｈｕａｎ，
Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭａｔｅｒｉａｌｓａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＳｉｃｈｕａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，
差均小于５％（ｎ＝６）。方法准确、快速、灵敏，适用于葡萄酒中非法添加合成色素的检测。
关键词：固相萃取；高效液相色谱；葡萄酒；合成色素
ＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＳｙｎｔｈｅｔｉｃＣｏｌｏｒｓｉｎＷｉｎｅｂｙＨｉｇｈ－ｐｅｆｏｒｒｍａｎｃｅ

高效液相色谱法检测葡萄酒中人工色素、防腐剂和甜味剂方法的研究

［２］李颖．高效液相色谱法测定调味品和饮料中常见１７种食品添加剂［Ｊ］．中国卫生检验杂
志．２０１０（１１）：３３１－３３２．
２．２确定葡萄酒中防腐剂、甜味剂高效液
相色谱法检测方法
［３］王浩．固相萃取一ＨＰＬＣ法同时测定葡萄酒中８种人工合成色素［Ｊ］．中国食品添加剂．
理合酒萄诮关相酣规的哟，蚧加添拥法，方杂般的局法在中测必要。
２、
杨硕张曼丽
１３６２００
摘要：目前，在葡萄酒添加剂的检测中，多从饮料或配制酒的检测方法中 “ 取经” 。然而葡萄酒化学成分较为复杂，采用高效液相色谱法检测方法具有一定的局限性。本文针对高效液相色谱法检测方法在葡萄酒中人工色素、防腐剂和甜味剂检测中不足，提出了优化方法。关键词：高效液相色谱法检测葡萄酒人工色素防腐剂甜味剂
工色素
２．１
中人
色素
方法优化
通过比较样品不同前处理方法分离效果和优选高效液相色谱条件，从而使波长高效液相色谱法检测人工色素优化方法。采用聚酰胺吸附的方法对葡萄酒样品进行前处理，其分离效果表现最佳［４］。在此过程中，要对色谱条件进行控制，ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＳＢ— Ｃ１８（４．６ ×２５０ｍｍ５ｕｍ）反相色谱柱，用０．０２５ｍｏＵＬ的甲醇作为流动相Ａ液，０．０２５ｍｏＶＬ的醋酸铵水溶液作为流动相Ｂ液，流动相Ａ液和流动相Ｂ液的流速控制在每分钟１．５ｍＬ，流动相Ａ液在２分钟以内，其洗脱梯度要从２０％上升到６５％，在２分钟至２．２分钟之间其洗脱滴度要从６５％上升到９３％，在２．２分钟至５分钟之间，其洗脱梯度控制在９３％。变波长检测葡萄酒样品人工色素中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄的检测波长在２．５分钟以内为４２０ｒｉｍ，检测波长在２．５分钟至４分钟之间为２４０ａｍ，在４分钟至５分钟之间，其波长为４９０ａｍ，在４分钟至５分钟之间，其波长为４９０ａｍ，检测时间控制在５分钟左右，柱温度控制在３５ ℃，进样量为２５ｕＬ，葡萄酒的样品通过精密度及加标试验，实验表明，葡萄酒中的柠檬黄、日落黄、胭脂红和苋菜红相对标准差为Ｏ．７２％至１．５０％之间，回收率在８８．８０％至ｌＯ６．４５％

高效液相色谱法测定熟肉制品中四种合成色素

高效液相色谱法测定熟肉制品中四种合成色素摘要：目的：建立反相高效液相色谱法测定熟肉制品中的柠檬黄、胭脂红、日落黄、诱惑红等四种合成色素。

方法：样品中合成色素经涡旋提取，注入高效液相色谱仪中进行分离，测定。

结果：四种合成色素在0～1mg·L-1的范围内线性关系良好；回收率均可达到90％以上。

结论：本法灵敏度高，简单，易行，结果准确可靠，可用于大批量样品的监测工作。

关键词：反相高效液相色谱法熟肉制品合成色素人工合成色素着色力强，色泽鲜艳，成本较低。

但近年来，诸多对人工合成色素的研究发现，有些色素有致癌作用，因此，我国规定了人工合成色素的使用限量[1]及检测方法。

然而市场却存在为了非法利润而滥用人工合成色素的现象，因此，必须对其进行监督和监管。

在对市场抽检的熟肉制品中四种合成色素的检测过程中发现，现行标准方法繁琐，前处理时间长，针对熟肉制品专属性不强，回收率较低，难以适应大批量的检测工作的需要，且现行标准中，诱惑红采用纸色谱法[2]测定，不仅操作繁琐，还要与其他色素分别测定，增大了工作量。

因此结合文献报道[3]，在原标准基础上加以改进，从而大大的提高了检测专属性、灵敏度及工作效率。

1、材料与方法1.1 检测仪器LC20液相色谱仪、UV检测器（日本岛津公司），CAPELL PAK C18色谱柱（15cm×0.46 mm,5μm）（日本资生堂），ALC-1100 电子天平（德国赛多利斯公司），GENIUS 3涡旋混合器（德国IKA公司），DK-S26型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)。

1.2 试剂试药石油醚(沸程30℃～60℃，分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；甲醇(色谱纯，天津康科德科技有限公司)；醋酸铵(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；盐酸(优级纯，北京化工厂)；无水乙醇-氨水-水(7-2-1)；硫酸锌(300g/L)；铁氰化钾溶液(150g/L)。

标准工作溶液为柠檬黄、胭脂红、日落黄、诱惑红国家标准物质加超纯水稀释而成。

葡萄酒中外来添加色素检测方法的研究进展

葡萄酒中外来添加色素检测方法的研究进展刘沛通;杨艳;吴广枫【摘要】为了增强葡萄酒的色泽,商家可能会人为添加一些天然色素或合成色素来达到效果,尤其一些市售葡萄酒中违规添加了胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄、赤藓红、亮蓝等合成色素,危害了消费者的身体健康.因此,对葡萄酒中的色素(特别是合成色素)进行定性定量分析是很有必要的.本文简要介绍了葡萄酒中添加色素的种类,并对其定性、定量检测方法进行了简述,为葡萄酒中外来添加色素的检测提供参考.【期刊名称】《中外葡萄与葡萄酒》【年(卷),期】2013(000)001【总页数】4页(P57-60)【关键词】葡萄酒;合成色素;天然色素;定性检测;定量检测【作者】刘沛通;杨艳;吴广枫【作者单位】中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083【正文语种】中文葡萄酒晶莹剔透、芳香馥郁，是倍受大众欢迎的饮料酒之一。

随着消费水平的提高，人们对葡萄酒品质的要求日益提升[1]。

葡萄酒的重要质量指标之一是颜色，特别是红葡萄酒，颜色的深浅既影响葡萄酒的感官质量，同时也决定了葡萄酒的内在品质[2]。

然而由于原料葡萄的质量不好、着色效果差或在葡萄酒酿制过程中出现的各种问题，导致国内红葡萄酒的色泽偏浅[3-5]。

为了增强葡萄酒的色泽、提升葡萄酒的感官品质，同时降低生产成本，有许多葡萄酒生产厂家向酒中添加各种色素[3,4,6]。

P.Bridle等[7]检测出葡萄酒中非法添加花色苷丰富的天然接骨木色素。

据相关研究，某些葡萄酒中违规添加的胭脂红、柠檬黄、苋菜红等合成色素严重超标[8-12]，而这些合成色素对人体有一定的毒性，如柠檬黄可引发过敏、哮喘及儿童多动症等[13]，有的色素会致腹泻、基因突变，甚至致癌[14]。

因而检测葡萄酒中的外来添加色素对消费者的身心健康具有十分重要的意义。

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[作者简介] 欧阳燕玲(1967-),女,学士,副主任检验师,主要
从事理化检验工作。

【化学测定方法】
高效液相色谱法检测葡萄酒中5种人工合成色素方法的探讨
欧阳燕玲,谢维平,陈春祝
(福建省泉州市卫生防疫站,福建泉州 362000)
[摘要] 目的:建立葡萄酒中5种人工合成色素H PLC 检测新方法。

方法:采用梯度洗脱,利用每种色素最大可见吸收
波长,在检测过程中变化波长测定各色素。

结果:本法R SD 为2183%~3198%,回收率95%~99%。

结论:用于大批量的葡萄酒样测定,其干扰小,灵敏度高,线性范围好,精密度和准确度良好,结果满意。

[关键词] 高效液相色谱法;葡萄酒;人工合成色素;梯度洗脱;最大可见吸收波长
[中图分类号] O 65717+2 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2005)10-1218-02 近年来,高效液相色谱法(H PLC)是测定人工合成色素的首选方法之一,我们在国标的基础上简化了前处理步骤,建立了一种适用于葡萄酒基质测定人工合成色素的H PLC 方法,用甲醇-醋酸铵缓冲溶液为流动相进行梯度洗脱,充分利用每种色素最大可见吸收波长,在检测过程中变化波长测定各色素,避免了国标中采用单一波长254n m [1]繁琐的前处理,减少了提取过程的损失。

1 材料与方法
111 仪器与试剂
Beck m an125高效液相色谱仪带二极管阵列检测器(Beck -m an 公司,美国);色谱工作站:32K arat510;超声波清洗器;UU p w -25N 超纯水系统;微量进样器。

标准工作液为国家标准物质稀释而成;醋酸铵(HPLC 级);甲醇(HPLC 级);实验用水为超纯水。

112 高效液相色谱条件
色谱柱为Sy mme try shield R P18反相色谱柱(416mm @250mm @5L m );流动相采用0105m o l/L 醋酸铵A -甲醇B ;根据每种人工合成色素最大可见吸收波长考虑选择变化波长进行检测;梯度洗脱条件(见表1);流速112m l/m i n ;进样量10L ;l 柱温30e ;光谱采集210~600nm 。

表1 梯度洗脱条件时间(m i n )
流动相
A(%)
B(%)时间(m in)
波长(n m )
010881210105842111029813152981410
88
12
01043081049811154081410
430
113 标准系列及样品测定
将柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮兰各贮备液稀释配制成标准混合液,混合标准溶液的浓度分别为:1100、5100、10100、25100、50100、100100m g /L 。

将样品调节p H =6~7左
右(用柠檬酸或稀氨水)[2],超声波脱气。

分别取上述标准液、样品液各10L ,l 经0145L m 针筒式滤膜过滤,微量注射器进
样,注入H PLC ,起动时间程序,每组分均在最大可见吸收波长下检测,按保留时间和光谱图定性,峰面积定量,以峰面积对浓度作图,计算回归方程,外标法定量。

分析运行14m i n ,平衡14m i n 。

2 结果与讨论211 流动相的选择
经试验采用梯度洗脱,在10m i n 甲醇从12%递增到42%,以3%/m in 增加,之后在1m i n 内由42%递增至98%,以98%继续洗脱215m i n 。

通过调整流动相比例,各峰分离完全,且峰形良好,保留时间稳定。

各色素混合标准溶液(5010mg /L )的色谱图如图1所示。

图1 柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮兰
标准溶液(5010m g /L)色谱图
11柠檬黄;21苋菜红;31胭脂红;41日落黄;51亮兰
212 HPLC 测定波长的选择
采用二极管阵列检测器,可以实现多个波长变化检测,用二极管阵列检测器采集210~600n m 光谱图,各色素最大可见吸收波长:柠檬黄430n m,苋菜红520n m,胭脂红510n m,日落黄490n m,亮兰408n m (210~600n m )。

由此来相应采用具体测定波长,0~8m in 是柠檬黄出峰,本文用430n m,8m i n 后出峰顺序是苋菜红、胭脂红、日落黄,综合考虑苋菜红、胭脂红、日落黄最大可见吸收波长,选用498n m,适合这3种色素,3种色素在此波长均有较大灵敏度,1115m i n 后改用408n m,它是亮兰600nm 内灵敏度最高的波长。

采用254n m 和430n m 通道的一实际样品和样品加标测定色谱图如图2所示,由图2可见430n m 波长杂质峰明显变少,干扰变小,谱图清晰,可避免因干扰峰存在而掩盖样品色素峰。

国标中采用单
一波长254n m 检测,在此波长下很多化学组分均有吸收,造成大量的干扰峰,一些色素峰难以从干扰峰中辨别出。

采用每一组分的可见最大吸收波长进行检测可避免此缺陷,无颜色成分不会吸收,增加了灵敏度,
前处理也随之大大简化。

图2a 采用本法通道430n m 测定一实际样品的色谱图
11柠檬黄;21
苋菜红
图2b 采用通道254n m 测定一实际样品的色谱图
11柠檬黄;21
苋菜红
图2c 采用本法通道430n m 测定一实际样品加标的色谱图11柠檬黄;21苋菜红;31胭脂红;41日落黄;51
亮兰
图2d 采用通道254n m 测定一实际样品加标的色谱图11柠檬黄;21苋菜红;31胭脂红;41日落黄;51亮兰
213 光谱定性
由于采用二极管阵列检测器,可以采集210~600n m 光谱图,利用其光谱信息、光谱匹配度对色谱峰进行可靠的定性,避免了仅靠保留时间定性所引起的错误,本实验选用310~600nm ,避开了受杂质影响大的254n m 以下波长。

在较低
浓度(1100mg /L )仍有较好的光谱匹配度,这也才使前处理的简化成为可能。

214 方法的线性范围和检出限
在110~100100m g /L 范围内响应值与人工合成色素浓度呈良好线性关系,以Y 表示浓度,X 表示峰面积,回归方程为:柠檬黄Y =3452218X +9823145,相关系数r =019996;苋菜红Y =2092913X +5503121,r =019998;胭脂红Y =2312715X +1772212,r =019996;日落黄Y =2227713X +1058316,r =019999;亮兰Y =7062117X +2969162,r =019995。

6种标准曲线相关系数在019995~019999。

根据信噪比S /N =3计算检出限,柠檬黄01021m g /L,苋菜红01062mg /L,胭脂红01050mg /L,日落黄01048mg /L,亮兰0112mg /L 。

215 精密度试验
取一葡萄酒样品加标(50m g /L),按上述方法进行重复测定(n =6),计算精密度,其相对标准偏差(RSD )分别为:柠檬黄3101%,苋菜红3140%,胭脂红2183%,日落黄3146%,亮兰3198%。

216 加标回收率试验
加入高(8010mg /L )、低(1010mg /L )含量标准,按本法测定,计算回收率在95%~99%之间,符合方法学要求(见表2)。

表2 加标回收试验结果(n =3)
项目
本底值(m g /L)加标量(m g/L )测定值(mg /L)回收率(%)柠檬黄
9181010191196158010
87159714苋菜红1216101021199619801091119814胭脂红01010109179710801079129910日落黄01010109169610801079119819亮兰
010
101091595108010
7617
9519
217 方法的实际应用及样品测定结果
采用本方法对我市大批量的葡萄酒抽样测定,其干扰小,灵敏度高,测定结果表明,与国标法结果基本一致,无显著性差异。

3 小结
采用本方法梯度洗脱,变化波长测定葡萄酒中色素,充分利用各色素最大可见吸收波长,灵敏度高,受杂质峰干扰小的特点,样品峰得到很好的分离,预处理步骤简单,损失少,方法
稳定,线性范围好,精密度和准确度均获得满意的结果,能满足葡萄酒样的分析要求,很有实际应用价值。

[参考文献]
[1]GB /T5009135-20031食品卫生检验方法#理化部分(一)[S ]1[2]谷岩,曲明1高效液相色谱法测定饮料的食用色素[J]1化学分析
量,2004,13(1):42-431
(收稿日期:2005-06-16)。