分子实验室、细胞实验室常用配方
组织裂解液和细胞裂解液如何配制
组织裂解液和细胞裂解液如何配制组织裂解液和细胞裂解液是在实验室中用于将组织或细胞中的生物分子（如蛋白质、核酸等）裂解或溶解的溶液。
这些液体通常包含一系列试剂和缓冲液，以帮助维持理想的酸碱平衡和溶解条件。
以下是组织裂解液和细胞裂解液常见的配制方法。
1. 常用的组织裂解液配方为RIPA裂解液（RIPA lysis buffer），其成分包括：- 50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）-150mM氯化钠（NaCl）- 1% NP-40或Triton X-100-0.5%钠脱氧胆酸或SDS-0.1%SDS-1mMEDTA-1mM苯甲硫酸酯（PMSF）2.配制方法：a. 称取所需量的Tris-HCl缓冲液和NaCl溶解于蒸馏水中；b. 加入适量的PMSF和其他表面活性剂（如NP-40、Triton X-100）；c.配制完毕后，pH应调整至理想值；d.将裂解液过滤或使用高速离心去除悬浮物。
细胞裂解液的配制：1.常用的细胞裂解液配方为RIPA裂解液（同组织裂解液配方）或RIPA缓冲液（不含表面活性剂），以避免破坏裂解液中的蛋白质。
2.配制方法：a.同组织裂解液的步骤1；b.不加入表面活性剂，方便后续蛋白质的分析。
同时，裂解液的配制可以根据实验需要做出适当更改，以满足特定的研究目的和条件。
在裂解液的配制过程中，需要注意以下几点：1.所选择的缓冲液的pH应调整到适合所需实验的范围内，以确保溶液的稳定性；2.表面活性剂的添加量应适中，以满足蛋白质溶解的需要，但过多的添加会造成裂解液的稀释和稳定性下降；3.裂解液的配制应注意在低温下进行，以防止试剂的降解和活性的损失；4.在裂解液的使用过程中，最好将裂解液与细胞/组织充分接触，并且较长时间地孵育，以满足完整的裂解过程。
各种培养液的配方
各种培养液的配方培养液是一种专门设计用于细胞培养的营养基质，它提供了细胞所需的营养物质和生长因子，以支持细胞的生长和增殖。
不同类型的细胞和细胞培养的特定目的可能需要不同的培养液配方。
以下是几种常见的细胞培养液配方：1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）：配方：- Glucose: 4.5g/L- L-Glutamine: 4mM- Sodium Bicarbonate: 3.7g/L- Sodium Pyruvate: 110mg/L- Phenol Red: 0.1%备注：DMEM是一种基础培养液，广泛用于多种哺乳动物细胞的培养，提供了细胞所需的基本营养物质，如糖、氨基酸和盐类。
2. RPMI 1640（Roswell Park Memorial Institute Medium）：配方：- Glucose: 2g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 2g/L-HEPES:10mM- Phenol Red: 0.1%备注：RPMI 1640是一种适用于多种动物和人类细胞培养的基础培养液，具有类似DMEM的配方，但Glucose和L-Glutamine的浓度较低，适合一些特定的细胞类型。
3. MEM（Minimum Essential Medium）：配方：- Glucose: 1g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 2.2g/L-HEPES:15mM- Phenol Red: 0.1%备注：MEM也是一种通用基础培养液，适用于多种细胞类型的培养，其配方与DMEM相似，但含有更低浓度的糖。
4. F-12（Ham's F-12 Nutrient Mixture）：配方：- Glucose: 3.15g/L- L-Glutamine: 2mM- Sodium Bicarbonate: 1.17g/L- Phenol Red: 0.03%备注：F-12是一种含有丰富营养物质的培养液，特别适用于培养多种优质的细胞系。
最全常用缓冲液配方及缓冲范围
最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的溶液。
它可以减少酸碱反应的影响，使物质在酸碱环境中保持稳定。
在生命科学实验室和工业生产中，常用的缓冲液有许多种。
下面是最常用的一些缓冲液配方及其缓冲范围。
1. Phosphate缓冲液：Phosphate缓冲液通常由磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组成。
它的pH范围为2.1-7.4，在生物化学和细胞生物学实验中得到广泛应用。
配方1：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.0-2.8-0.2M磷酸氢二盐，pH5.8-7.4配方2：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.1-3.1-0.2M磷酸氢二盐，pH5.6-7.42. Tris缓冲液：Tris缓冲液由三羟甲基氨基甲烷（Tris）和其酸盐组成。
它的pH范围为7-9，在分子生物学和生化实验中广泛使用。
配方：- 1 M Tris HCl，pH 7.4-9.0- 1 M Tris base，pH 7.0-9.23.MES缓冲液：MES缓冲液是一种针对中性pH值（5.5-6.7）的缓冲液，常用于细胞生物学和酶活性实验。
配方：-0.1MMES，pH5.5-6.74.HEPES缓冲液：HEPES缓冲液是一种适用于细胞培养和酶活性实验的缓冲液，其pH 范围为6.8-8.2配方：-0.1MHEPES，pH6.8-8.25.CAPS缓冲液：CAPS缓冲液是一种适用于生化实验的缓冲液，其pH范围为9.7-11.1配方：-0.1MCAPS，pH9.7-11.1这些是最常用的缓冲液配方及其缓冲范围，可以根据实验的需要选择合适的缓冲液。
需要注意的是，在配制缓冲液时应使用高纯度的化学品，并根据实验要求精确控制缓冲液的pH值。
此外，在实验过程中应注意缓冲液的保存和稳定性，以确保实验结果的准确性。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液的配制方法在免疫组化和细胞培养中，常用到PBS缓冲液。
以下是我们实验室的配方，供大家参考：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾将1.361g磷酸二氢钾(KH2PO4，分子量136.09)加入100ml双蒸水中。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠将1.78g酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O，分子量177.99)加入100ml双蒸水中。
或者将3.58g酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O，分子量358.14)加入100ml双蒸水中。
pH值。
A液(ml)。
B液(ml)5.60.9.50.0.255.91.9.00.1.006.24.8.00.2.006.47.7.00.3.006.64.6.00.4.006.81.5.00.5.006.98.4.00.6.007.17.3.00.7.007.38.2.00.8.007.73.1.00.9.008.04.0.50.9.50免疫组化常用的PBS只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）、NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）和NaCl。
用于细胞培养的PBS需要含有氯化钾。
配方如下：取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L，浓度为0.01M。
PBS缓冲液的配方如下：取8g NaCl、0.2g KCl、3.63g Na2HPO4•12H2O和0.24gKH2PO4，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调节pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一，但不同实验室的配方可能不同。
以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水。
0.2M NaH2PO4：取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水。
不同浓度的PBS(pH=7.4)的配制：先配制0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4即可。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用，用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液：Hematoxylin-Eosin（HE）染色液是一种经典的组织染色方法，常用于病理学研究和诊断。
配方如下：- Hematoxylin染色液：将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中，加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水，最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液：将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液：将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液：Giemsa染色液用于染色细胞，特别是白细胞，常用于血液学和微生物学研究。
配方如下：- Giemsa染色液：将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂：用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下：- Thioglycollate培养基：将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中，加热至溶解。
- Dithiothreitol（DTT）溶液：将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中，用10 mL离心管分装，-20℃保存。
4. Bradford试剂：用于蛋白质的浓度测定，常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下：- Coomassie Brilliant Blue G-250：将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中，加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂：用于胶片的显影，常用于分子生物学实验。
配方如下：-显影溶液A：将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B：将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液：用于细胞或组织的裂解，提取蛋白质或RNA，常用于生物化学和分子生物学实验。
实验室常用溶液配制
0.25%胰酶-EDTA的配制细胞消化胰酶的配制对一般细胞0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0.25g3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4 调PH7.45 仍在冰浴中6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。
低温，防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2 ，增加消化效力实验常用溶液的配制1.革兰氏碘液：称碘化钾2g溶于100ml蒸馏水中，再加1g碘使其溶解，最后用蒸馏水稀释至300m1，盛于棕色瓶内，保存于暗冷处。
2.1.苯酚品红改良液（一）①A液：取3克碱性品红，溶于100ml 70％酒精中（此液可长期保存）。
②B液：取A液10m1，加入90ml 5％苯酚水溶液（一般在两周使用为好）。
③C液：取B液45m1，加入 6ml冰醋酸和6ml 37％甲醛。
④、苯酚品红改良液：取C液10m1，加入90ml45％冰醋酸和1克山梨醇。
2.2.苯酚品红改良液（二）：A液：碱性品红3g＋100ml 70％乙醇。
B液：A液10ml＋5％苯酚水溶液90m1。
C液：B液120ml＋冰醋酯12ml＋甲醛12ml。
D液：C液120ml＋45％冰醋酸480ml。
在D液中加1％山梨醇（600mlD液中加 6g山梨醇），此液配好后至少放4一5天方可使用，可保存几年。
3.1.甲基绿一哌罗宁混合染液（一）：①醋酸缓冲液（pH4.8）0．2mol.L-1醋酸（A.R）（取1.2ml加蒸馏水至100ml）4份0．2mol.L-1醋酸钠（A.R）（取2．72g加蒸馏水至100ml）6份。
培养基配方及配置
培养基配方及配置
一般来说，培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。
基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分，包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。
常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。
添加剂是指用于满足特定实验需求的成分，如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。
添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。
调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分，如缓冲液、pH调节剂等。
以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置：
1.基础培养基成分：
- 水：900ml
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
2.添加剂：（可根据实验需求进行必要的添加）
- 抗生素（如氨苄青霉素）：100μg/ml
- 抗菌剂（如氯霉素）：25μg/ml
3.配制方法：
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中，并搅拌混合均匀。
- 将培养基溶液倒入容量瓶中，加水至1000ml，并混合均匀。
-调节pH值至7.0-7.2（一般使用缓冲液进行调节）。
-用自制滤纸过滤器滤过，将溶液分装至培养皿或试管中。
-如需添加抗生素或抗菌剂，将相应的药物加入培养基中，并充分溶解。
-培养基装瓶后可以高温高压灭菌，或使用滤器过滤进行无菌处理。
以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程，不同实验需要可能
会有所调整和变化。
在设计培养基配方时，需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度，并注意配制和保管过程中的无菌操作，以确保培养基的质量和有效性。
实验室常用液体配制标准操作规程
常用液体配制标准操作规程（SOP）国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心二〇〇八年九月修订目录一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜）三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）一、细菌培养系统1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。
取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。
剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
6、化学感受态制备：1）原理:：细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。
将细菌置于0℃，低渗CaCl2 溶液中时，菌细胞壁和膜的通透性增强，菌体膨胀成球型。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
pbs溶液
pbs溶液PBS溶液引言：PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）是一种广泛应用于生物科学领域的缓冲溶液。
它被用于许多实验室中的分子生物学和细胞生物学实验，包括细胞培养、免疫染色、蛋白质和核酸研究。
PBS溶液具有许多优点，如稳定性、调节pH值的能力和可溶性等，因此被广泛应用于生物科学研究。
一、PBS的组成PBS溶液主要由磷酸盐和盐溶解在水中而成。
典型的PBS溶液的配方包含磷酸二氢钠（NaH2PO4）、磷酸二钠（Na2HPO4）、氯化钠（NaCl）以及水。
标准的配方使用20mM的NaH2PO4和80mM的Na2HPO4，0.2M的NaCl，最终pH值约为7.4（根据实际需求而有所变化）。
二、PBS的性质1. 缓冲性质：PBS溶液被用作实验室中的缓冲剂，能够调节溶液的pH值，使其保持稳定。
PBS溶液在生理条件下（pH值约为7.4）具有最佳的缓冲能力，可以保持生物实验中所需要的稳定pH条件，这对于许多实验来说是非常重要的。
2. 渗透性：PBS溶液是一种无机缓冲溶液，具有较低的渗透性，这意味着它可以穿透细胞膜而不对细胞产生毒性作用。
这使得PBS溶液在细胞处理和培养中非常有用，可以用于洗涤、培养和悬浮细胞。
3. 离子浓度：PBS溶液中的Na+和Cl-离子浓度与人体细胞内液相似，可以提供细胞所需的渗透压，使细胞保持稳定的生理状态。
4. 溶解能力：PBS溶液具有良好的溶解性，可以溶解许多生物分子，如蛋白质、核酸、药物等。
这使得PBS溶液在生物科学研究中成为一个理想的选择，因为它可以用于稀释、洗涤和溶解的同时不会对目标分子产生不良影响。
三、PBS溶液的应用1. 细胞培养：PBS溶液常被用于洗涤和培养细胞。
在细胞培养过程中，细胞需要定期洗涤以去除细胞培养基、细胞残渣以及代谢产物。
使用PBS溶液进行洗涤可以保持细胞的稳定环境并避免细胞残留。
此外，PBS溶液还可用作细胞悬浮的稀释液。
2. 免疫染色：PBS溶液是免疫染色实验中常用的稀释液。
实验室常用细胞表征及处理方法(实战版)
实验室常用细胞表征及处理方法一、细胞培养1.1细胞培养基配方普通细胞所需要的培养基配方主要为：购买的培养基+10 %血清（小牛或者胎牛）+1%双抗。
（常用的双抗及胰酶建议直接购买）1.2细胞传代1.2.1洗涤：将培养瓶内的旧培养液吸出，加入2~3ml PBS缓冲液洗涤2-3次，摇晃使其均匀铺满整个平面，清洗细胞，随后吸弃PBS液以除去残留的血清和死细胞。
1.2.2消化：加入适量（盖满细胞层表面即可，25cm2的培养瓶加入0.5-0.6mL 即可，75 cm2加入1.0mL）的0.25%胰蛋白酶液，轻轻摇晃，普通细胞一般需要60s左右，特别难以消化的细胞可以放在37℃孵箱孵育适当的时间，如Hela细胞大约需要30s-40s，翻转培养瓶。
然后在倒置相差显微镜下观察细胞消化情况,待细胞开始收缩成圆形、细胞间的连接明显消失，细胞间出现明显的空隙，即可终止消化（若细胞成片收缩，倒去消化液）。
若存在细胞团，可以轻轻拍打培养瓶侧壁，尽量消化完全，不然传代后会出现较多的细胞团，再次消化会非常困难。
1.2.3终止消化：在培养瓶中加入1-3ml培养液（胰酶遇血清会终止其活性）以终止消化。
用吸管反复吹打洗瓶壁上的细胞，边角部分特别注意多次吹打。
可在倒置相差显微镜下观察细胞吹打的程度，（轻轻摇动培养瓶，观察细胞是否完全脱壁），最后形成单细胞悬浮液。
将单细胞悬液移入15ml离心管内,离心1000r×5min,弃去上清液,加入5ml 培养基进行吹打重悬（也可不用离心，直接把单细胞悬液分装于新的培养瓶里，补加适量培养基）。
小培养瓶需5ml左右培养基，直径60mm培养皿5-7ml，以上均应视细胞的数目而定，细胞多，可适当加多些培养基）。
1.2.4.传代：取上述步骤所得单细胞悬液，进行细胞悬液计数，然后按所需密度接种到其它培养瓶中。
标注上代数、日期及操作人。
注：本实验所需的PBS液、DMEM细胞培养液及0.25%胰蛋白酶液均需37℃预热处理。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。
细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、维生素和激素，并提供适当的pH和离子平衡。
同时，缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分，用于稳定细胞培养基的pH，维持细胞正常的生长环境。
下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液：1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方：-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方：-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液，浓度为25mM，用于稳定pH。
3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方：-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液：盐酸/NaOH缓冲体系，通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。
4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方：-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液：无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方：-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方：-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
实验室常用溶液配方
常用溶液配方（细胞培养）PBS配制一、PBS配方配1L 25倍PBSNaCl 200gNa2HPO4-2H2O 36g 最难溶最后加或Na2HPO4-12H2O 72.4gNaH2PO4-2H2O 6.5g 或NaH2PO4 5g搅拌，1000ml定容，调PH值至7.2—7.4（细胞培养）1倍PBS配方NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.44g 或者Na2HPO4-12H2O 3.57gKH2PO4 0.24g加水定容至1L，调PH值7.2-7.4（细胞培养）10倍PBS配方NaCl 80gKCl 2gNa2HPO4 14.4g 或者Na2HPO4-12H2O 35.7gKH2PO4 2.4g（组化用）PBS配方配1L 10 倍PBSNaHPO4 10.9g 或Na2HPO4-12H2O 27.50gNaCl 90gNaH2PO4 3.2g 或NaH2PO4-2H2O 4.16g搅拌，1000ml定容，调PH至7.2，分装，常温保存配1倍PBS（0.01PBS）1.取50ml 10倍PBS，倒入容量瓶2.定容至500ml，摇匀，分装二、胰酶的配制：0.25%胰酶1倍PBS 1000ml胰酶粉（trypsin）2.5gEDTA 0.4g搅拌后4摄氏度过夜，然后用NaOH调PH值至7.2-7.4；用0.22um滤器（绿色滤器）过滤分装保存。
三、培养基配制L-DMEM配制1L培养液：L-DMEM 10gNaHCO3 2.2g双抗1%（11ml）胎牛血清110ml注：国产胎牛血清需要56℃，30min灭活加完混合后，用0.22um的滤器过滤除菌，4摄氏度保存。
低糖冻存液的保存冻存液：L—DMEM：血清：DMSO=6：3：1注：（DMSO要缓慢加入，以防散热不均，下面要垫上冰块，助散热。
配好后用0.22微米滤器过滤，分装，4℃保存1640培养液配制1L体系：1640干粉10.3g/LNaHCO3 2g双抗1%100倍谷氨酰胺10mlβ-巯基乙醇3.5 uL胎牛血清10%（灭活）0.22微米滤器过滤，4℃保存。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后1mL分装到离心管中，于-30℃冻存X-gal：贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌IPTG：贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到10mL，用0.22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2：贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl （或者CaCl:2H2O 1.4698g）溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-30℃保存LB培养基：胰蛋白胨（Tyrtone）10g/L酵母提取物（Yeast Extraction）5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6，然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L Tris-Cl（PH7.5）、15mmol/L NaCl 中，配成10mg/mL 的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存，一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L，调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液（pH=7.5）成分：20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠（pH=5.2）中，过滤除菌PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L，使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43−, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液（含有SDS）1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30％丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中，加热至37℃溶解，补足体积至1L，过滤，且pH不大于7.01 M Tris-Cl（pH6.8）60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml1.5 M Tris-Cl（pH8.8）90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml。
细胞工程第二章 细胞工程实验室组成及无菌操作技术
实验过程中，实验人员应按照无菌操作规程操作。 4、使用完毕，应擦净工作台面。
2、高压蒸气灭菌锅
用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。
(1)高压蒸气灭菌锅工作原理： 在密闭的蒸锅内，0.1MPa的压力下，
主要设备：培养架（控温控光控湿）、摇床、培养箱、紫外光源 等。
二、基本设备及使用
1、接种设备：无菌超净工作台 用于培养材料的消毒及接种。使用前，
将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启， 灭菌15min后，关闭杀菌按钮，打开照明 按钮，即可在上面进行操作。
超净工作台
超净工作台使用注意事项
1、使用超净工作台前，应提前开机并开启紫外灭菌灯30分钟以上。 2、使用超净工作台时，关闭紫外灭菌灯，开启日光灯，并用
光 学 显 微 镜
倒置显微镜
分注器
血球计数器
磁力搅拌器
移液器
8、其它辅助设备
①培养基灌装机及洗瓶机
②空调机：用于接种 室和培养室温度的控 制。
③ 除湿机：使培 养室的湿度保持在
定的范围内。
⑤冰箱：用于在常温下易变 性或失效的试剂和母液的储 藏，细胞组织和试验材料的 冷冻保藏，以及某些材料的 预处理。
③高压灭菌前后的培养基，其pH值下降0.2-0.3单
位。因此，调PH值时，可适当调高0.1－0.3个单 位。
④接通电源前一定要加入足量的水。
3、相关仪器
电炉
推车
酒精灯
封口膜
接种器具
灭菌器
培养瓶
4、接种工具
酒精灯 接种针 镊子 解剖刀
5、培养设备
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文培养基配方是微生物学研究的基础，它们提供了养分和条件，促进微生物的生长和繁殖。
常用培养基配方有多种，以下是几个常用的配方范文。
一、莱文斯坦－鲍德尔培养基（Luria-Bertani agar）配方：成分：1.蛋白胨：10克2.酵母提取物：5克3.食盐：10克4.琼脂：15克5.蒸馏水：1000毫升6.高氯酸钠（0.1M）：2毫升（pH7.2）制备方法：1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中，加热至溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀，再加入高氯酸钠调节pH值。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。
二、营养琼脂培养基（Nutrient agar）配方：成分：1.蛋白胨：5克2.细胞色素：1克3.维生素B1：0.1克4.卵黄：10克5.食盐：5克6.琼脂：15克7.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.煮沸时间可根据需要适当延长，但不要超过20分钟。
三、马尿素琼脂培养基（MacConkey agar）配方：成分：1.蛋白胨：17克2.硼砂：1.5克3.细胞色素：2.5克4.氯化钠：5克5.水合甲基红：0.03克6.钴绿：0.015克7.红绿二色砂：0.15克8.琼脂：13.5克9.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.此培养基适用于选择肠道革兰氏阴性杆菌。
以上是常用的几个培养基配方范文，供参考使用。
在制备培养基时，需要注意消毒操作，以防止污染。
另外，不同微生物对培养基的要求也有所不同，可以根据实际需要进行配方的修改和优化。
实验室常用试剂配制
细胞培养PBS配方PBS即磷酸盐缓冲生理盐水，都是含有H2PO4-、HPO42- 缓冲体系和NaCl，用于调节渗透压，达到与人体相当的水平，分为含钾离子和不含钾离子两种。
1、不含钾离子的PBS配方（由NaCl，Na2HPO4和NaH2PO4三种成分组成，用于其它实验缓冲和稀释用）母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB（pH=7.4）的配制：先配 0.2M PB （pH=7.4，100ml）：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4，即可。
然后只需将0.2M PB （pH=7.4）按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
配好后加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
* 其他各种另 PH值的 0.2M PB（100ml）配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19 817.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7 .2、含钾离子的PBS配方（由NaCl，KCl，Na2HPO4和KH2PO4四种成分组成，一般用于组织培养）0.01M磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法：(免疫组化常用)称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可，高压灭菌。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏（Loeffler）美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue）0。
3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH）0。
01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。
2、齐氏（Ziehl）石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin）0。
3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚）5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95％酒精中，配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订）A液：结晶紫（Crystai violet) 2.5 克95％酒精25.0 毫升B液：草酸铵（NH4）2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95％酒精,使之溶解，配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI）碘液(革氏鉴别染色用）碘1。
0克碘化钾2。
0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液（革氏鉴别染色用）番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green）5。
0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95％酒精溶解，再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液（英膜染色用）黑素（Nigrosin）10。
0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛）0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红（Congo red）2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液（放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20。
0毫升乳酸(比重l.21）10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10。
0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffl er)美蓝染色液A液：美蓝(Methyl ene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basicfuchsi n) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclke r改订)A液：结晶紫(Crysta i violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘 1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safran in O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malach ite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigros in) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congored)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。
实验室常用细胞表征及处理方法（实战版）
实验室常⽤细胞表征及处理⽅法（实战版）实验室常⽤细胞表征及处理⽅法⼀、细胞培养1.1细胞培养基配⽅普通细胞所需要的培养基配⽅主要为：购买的培养基+10 %⾎清（⼩⽜或者胎⽜）+1%双抗。
（常⽤的双抗及胰酶建议直接购买）1.2细胞传代1.2.1洗涤：将培养瓶内的旧培养液吸出，加⼊2~3ml PBS缓冲液洗涤2-3次，摇晃使其均匀铺满整个平⾯，清洗细胞，随后吸弃PBS液以除去残留的⾎清和死细胞。
1.2.2消化：加⼊适量（盖满细胞层表⾯即可，25cm2的培养瓶加⼊0.5-0.6mL 即可，75 cm2加⼊1.0mL）的0.25%胰蛋⽩酶液，轻轻摇晃，普通细胞⼀般需要60s左右，特别难以消化的细胞可以放在37℃孵箱孵育适当的时间，如Hela细胞⼤约需要30s-40s，翻转培养瓶。
然后在倒置相差显微镜下观察细胞消化情况,待细胞开始收缩成圆形、细胞间的连接明显消失，细胞间出现明显的空隙，即可终⽌消化（若细胞成⽚收缩，倒去消化液）。
若存在细胞团，可以轻轻拍打培养瓶侧壁，尽量消化完全，不然传代后会出现较多的细胞团，再次消化会⾮常困难。
1.2.3终⽌消化：在培养瓶中加⼊1-3ml培养液（胰酶遇⾎清会终⽌其活性）以终⽌消化。
⽤吸管反复吹打洗瓶壁上的细胞，边⾓部分特别注意多次吹打。
可在倒置相差显微镜下观察细胞吹打的程度，（轻轻摇动培养瓶，观察细胞是否完全脱壁），最后形成单细胞悬浮液。
将单细胞悬液移⼊15ml离⼼管内,离⼼1000r×5min,弃去上清液,加⼊5ml 培养基进⾏吹打重悬（也可不⽤离⼼，直接把单细胞悬液分装于新的培养瓶⾥，补加适量培养基）。
⼩培养瓶需5ml左右培养基，直径60mm培养⽫5-7ml，以上均应视细胞的数⽬⽽定，细胞多，可适当加多些培养基）。
1.2.4.传代：取上述步骤所得单细胞悬液，进⾏细胞悬液计数，然后按所需密度接种到其它培养瓶中。
标注上代数、⽇期及操作⼈。
注：本实验所需的PBS液、DMEM细胞培养液及0.25%胰蛋⽩酶液均需37℃预热处理。
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（一）WB相关试剂及常用缓冲液●●10%过硫酸铵溶液AP（分装保存于-20度）AP粉末 1gddH20 10ml●10％SDS（十二烷基硫酸钠）：SDS粉末 10gddH20定容到 100ml注意：用磁力搅拌器搅拌不会容易起泡泡●6X蛋白质sample bufferTris-HCl(1M,pH6.8) 30mLSDS 10g甘油 30mLDTT（154.25） 9.3g溴酚蓝 0.06gdd H20 定容至100mL●10XPBS缓冲液的配制：NaCl 80gKCl 2gNa2HPO4 14.4g（十二水合36g）KH2PO40 2.4g加800 mLddH2O,根据开始的pH用NaOH或HCL调pH到7.4，调好pH再定容到1升。
配好后用高压蒸气灭菌后常温保存最好是在4度●PBST(1X)PBS(1X) 500mlTween 20 500μl●50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液配制1L溶液各成分的用量Tris粉末 242g冰醋酸 57.1mlNa2EDTA·2H2O 37.2gddH20定容到 1L●封闭液脱脂奶粉 5g叠氮钠 0.02g(现配现用时可不加)PBS 定容到100mL●脱色液：(室温)甲醇 165mL乙酸 50 mLH20 785 mLddH20 定容至1L●TBST(1X)TBS(1X) 500mlTween 20 500μl●Stripping buffer(可反复利用)温老师组配方10%SDS 10mlΒ-巯基乙醇 350 lTris-HCI（pH6.8） 6.25ml（6.06加到50mL水）加入ddH2O 至50mL●Stripping buffer(可反复利用)郭老师给配方甘氨酸 15gSDS 1gTween20 1mldd ddH2O 1L作这个buffer洗20min，然后用PBST洗3次，再重新封闭孵抗体。
（二）细胞和细菌培养基、抗生素●SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨 20g酵母提取物 5g氯化钠 0.5g1mol/L氯化钾 2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁●1M IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3））溶液IPTG粉末 2.383gddH20 定容到10ml用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。
●Amp+(50mg/ml)Amp+粉末 50mgddH20 1ml注意：分装保存于-20度，使用时按1000：1的比例用●Kana+(50mg/ml)Kana +粉末 50mgddH20 1ml注意：分装保存于-20度，使用时按1000：1的比例用●胰酶：抽滤，长期保存可放负20度粉末 0.25gEDTA 0.02-0.03g1XPBS 100ml●高糖DMEM培养基：抽滤保存在4度粉末全部碳酸氢钠 3.7gddH20 定容到1L（用盐酸调pH值到：7.2-7.4）●G418母液（100mg/ml）用0.22μM滤菌，分装存于-20度粉末 1gPBS 10ml●zeocin母液（100mg/ml）用0.22μM滤菌，分装存于-20度粉末 1gddH2O 10ml●Blasticidin（100mg/ml）用0.22μM滤菌，分装存于-20度粉末 0.3gPBS 10ml●Na3PO4（164） 8.2g（50mM）NaCl (58.5) 17.55g（300mM）加800 mL ddH2O溶解，用2M NaOH或者2M HCL 调pH到8.0，再定容到1升。
配好后用高压蒸气灭菌后常温保存。
●洗涤液(wash buffer)：2011年做蛋白纯化时用Na3PO4 8.2g（50mM）NaCl 17.55g（300mM）咪唑 0.681g（10mM）加800 mLddH2O溶解,根据开始的pH用2M NaOH或者2M HCL调pH到8.0，调好pH再定容到1升●洗脱液(elution buffer)：2011年做蛋白纯化时用Na3PO4 8.2g（50mM）NaCl 17.55g（300mM）咪唑 17.025g（250mM）加800 mLddH2O溶解,根据开始的pH用2MNaOH或者2M HCL调pH到8.0，调好pH 再定容到1升）PrepEase®Histidine-Tagged Protein Purification Kits - High Specificity●8X LEW Buffer (Lysis-Equilibrium-Wash Buffer)：（室温保存）pH：8.0NaH2PO4.2H2O 6.2404g（400mM）NaCl 14.0256g（2.4M）dH20 定容到100 mL （调节pH：8.0）●4X Elution Buffer：（室温保存）pH：8.0NaH2PO4.2H2O 3.1202 g（200mM）NaC l7.0128g（1.2M）咪唑 6.81 g（1M）dH20 定容到100 mL（调节pH：8.0）●EDTA:（100mM）EDTA 2.923 gdH20 定容到100 mL●NiSO4:NiSO4 .6H2O 2.6285g（100mM） dH20 定容到100 mL●溶菌酶：（使用时1ml溶液加入20ul）粉末 50mgddH20 1mL(四)利用His-tag从细胞中富集蛋白配方●磷酸钠缓冲液按图示比例混合0.2 M Na2HPO4溶液和0.2 MNaH2PO4溶液，得到两种缓冲液，pH分别调节成为8.0和6.3.（注意二价阳离子螯合剂，还原剂，会导致镍从树脂上的洗脱）本实验的所有试剂中EDTA浓度不得超过1 mM,DTT浓度不超过5 mM，巯基乙醇浓度不超过20 mM。
注意使用pH为6.3的磷酸缓冲液，而且pH不得低于6，pH要精确配制，非常重要！Histidine 的质子化，会导致镍树脂上的解离，所以要精确测定pH，并且以pH试纸校对，而不是仅仅依靠pH仪器。
洗脱溶液200mMImidazole咪唑，5% (wt/vol)SDS，150mM Tris-HCl(pH 6.7)30% (vol/vol)丙三醇720mM巯基乙醇0.0025%(wt/vol)溴酚蓝注意wt/vol是质量/体积之比例，而vol/vol是体积：体积的比例。
(五)双向电泳溶液配制●水化上样缓冲液（I）：尿素(8M) 4.805gCHAPS(4%) 0.4gDTT(65mM) 0.098g(现加)Bio-Lyte0.2%（w/v）50μI(40%现加)溴酚蓝0.001% 10μI(1%溴酚蓝)MilliQ水定容到10mI,分装成10小管，-20度冰箱保存●上样缓冲液（II）：尿素(7M) 4.2g硫脲(2M) 1.52gCHAPS(4%) 0.4gDTT(65mM) 0.098g(现加)Bio-Lyte0.2%（w/v）50μI(40%现加)溴酚蓝0.001% 10μI(1%溴酚蓝)MilliQ水定容到10mI,分装成10小管，-20度冰箱保存●上样缓冲液（III）尿素(5M) 3g硫脲(2M) 1.52gCHAPS(2%) 0.2gSB 3-10(2%) 0.2gDTT(65mM) 0.098g(现加)Bio-Lyte0.2%（w/v）50μI(40%现加)溴酚蓝0.001% 10μI(1%溴酚蓝)MilliQ水定容到10mI,分装成10小管，-20度冰箱保存●平衡缓冲液母液尿素(6M) 36gSDS(2%) 2gTris-HCI(pH8.8)0.375M 25mI(1.5M)甘油(20%) 20mIMilliQ水定容到100mI，分装10管，-20度保存●胶条平衡缓冲液I（充分混匀，用时现配）胶条平衡缓冲液母液10mIDTT 0.2g●胶条平衡缓冲液II（充分混匀，用时现配）胶条平衡缓冲母液10mI碘乙酰胺0.25g●低熔点琼脂糖封闭液低熔点琼脂糖0.5% 0.5gTris（25mM）0.303g甘氨酸(192mM) 1.44gSDS（0.1%）1mI（10%SDS）溴酚蓝（0.001%）100μI（1%溴酚蓝）MilliQ水定容到100mI,加热溶解至澄清，室温保存（六）同位素实验相关试剂●●● 2 X Annealing bufferTris-HCI(pH7.5-8.0) 20mMNaCI 100mMEDTA 2mM●●Tris 0.89M 26.945g硼酸（pH8.3） 0.89M 13.757gNa2EDTA 20mM 1.86115g●15% Denatured DNA PAGE gel(100ml)10 X TBE 15ml40%,19:1 gel stock 37.5mlddH2O 16mlUrea 48g存放在4度，使用前加200μl 10%AP和20μl TEMED●20% Denatured DNA PAGE gel10 X TBE 15ml40%,19:1 gel stock 50mlddH2O 3.5mlUrea(尿素) 48g存放于4度，使用前取35ml混合液加140μl 10%AP和140μl TEMED ●硼氢化钠（1M） 37.83粉末 0.7566gddH2O 10ml● 2 X dRP buffer（分装保存于负20度）DNA binding buffer（七）酶切打质谱相关配方NH4HCO3(79.06) 100mM粉末 0.7906gddH2O定容到100ml,pH7.8-8.0DTT（154.25g） 100mM粉末 0.01542gddH2O 1mlIAA(碘乙酰胺，184.96) 200mM粉末 0.036992gddH2O 1ml（八）其他配方●2XHEPES-缓冲液（潘老师给的配方做细胞转染，需要调pH为7.05，用0.22μM滤菌，分装存于-20度）。
●CaCI2·2H2O(2M) 147.02 潘老师给的配方做细胞转染粉末 5.88gddH2O 20ml0.22μm滤菌，分装存于-20度●5XTBS（1L体系）（在利用flag tag带磁珠的抗体富集蛋白时用）Tris-HCI(250mM) 30.275gNaCI(750mM) 43.875gdd H20 定容至1L（调节pH为7.4）●MMS甲磺酸甲酯（Sigma 密度为1.3g/mI,M=110.13）1M 体系：液体85μI ddH2O 915μI●Hochest母液：1mg/ml,避光存于-20度工作液：母液按1:1000稀释●TritonX-100（0.2%）TritonX-100 2 lddH2O 1ml● 2 X HDM buffe(II)曾用于LSD1去甲基化PMSF粉末 1.742g异丙醇/甲醇定容到10ml【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。