游离氨基酸样品前处理
L8900 AA analyzer 样品前处理简要步骤
日立L-8900全自动氨基酸分析仪样品前处理步骤（内部用）一、饲料样本中水解蛋白中氨基酸含量测定步骤（参考GB/T 18246-2000）1. 样品制备取具代表性的饲料样品，用四分法缩减分取25g 左右，粉碎并过。
.25m m孔径(60目)筛，充分混匀后装入磨口瓶中备用。
对于粗脂肪含量大于、等于5%的样品，需将脱脂后的样品风干、混匀，装入密闭容器中备用。
而对粗脂肪小于5%的样品，则可直接秤用未脱脂样品。
2. 氨基酸水解液制备（酸水解）称取含蛋白7.5 -25 mg的试样(约50~100 mg,准确至1 mg) 于20 mL水解管，加10.00 mL 酸解剂（6 mol/L HCl)，置液氮或干冰(丙酮)中冷冻。
然后，抽真空至7 Pa(-<5X1 0-'mm汞柱)后封口或充氮气封口。
将水解管放在110℃恒温干燥箱中，水解22~24 h。
冷却，混匀，开管，用水定容至50~100mL（保证上机液中总氨基酸浓度在50-250 nmol/mL），过滤，用移液管吸取1.0 mL 于真空干燥箱60℃蒸干，必要时，加少许水，重复蒸干1-2次（或50℃氮吹仪吹干，加少量水重复吹干2次）。
加入2 mL 0.02 mol/L HCl溶液，充分溶解，0.22 um滤膜过滤，上机。
二、血浆中游离氨基酸测定1. 样品制备采集约5 mL抗凝全血，4000 × rpm离心，获得血浆，检测前-20℃保存。
2. 分离游离氨基酸取血浆1.0 mL，加入1.0 mL 8%磺基水杨酸（8g磺基水杨酸溶于92mL的超纯水），4℃冰箱过夜，14000 × rpm 离心10 min，上清液过0.22 um滤膜，取约1 mL上机测定。
游离氨基酸测定（完整版）
总游离氨基酸测定（完整版）实验原理：游离氨基酸的游离氨基可与水合茚三酮作用，产生蓝紫色的化合物二酮茚－二酮茚胺，产物的颜色深浅与游离氨基酸含量成正比，用分光光度计在570nm下测其含量。
因蛋白质中的游离氨基酸也会产生同样反应，在测定前必须用蛋白质沉淀剂将其除掉.仪器与用具：100ml容量瓶；漏斗；三角瓶研钵；刻度吸管：0.1ml×1、1ml×2、2ml×2、5ml×1;沸水浴；具塞刻度试管20ml×10;分光光度计.一、试剂1.水合茚三铜：称重结晶的茚三铜0.6g,装入烧杯，加入正丙醇15ml，使其溶解加入正丁醇30 ml、乙二醇60 ml、乙酸-乙酸钠缓冲液（pH=5.4）9 ml,混匀，棕色瓶冰箱保存，10天内有效。
2.乙酸-乙酸钠缓冲液（pH5.4）：称取化学纯乙酸钠54.4g，加入无氨蒸馏水100 ml，电炉加热至沸，使其体积减半，冷却后加冰乙酸30 ml，加蒸馏水定容至100 ml。
3.氨基酸标准溶液：精确称取80℃烘干至恒重的亮氨酸0.0234g溶于10％异丙醇并定容至50ml。
取此液5ml蒸馏水稀释到50ml，即为5μg/ml氨基酸标液。
4.0.1%抗坏血酸：称取0.050g抗坏血酸，溶于50 ml蒸馏水中，即配即用。
5.10％乙酸二、标准曲线制备加塞子密封于沸水中加热15分钟，取出后用冷水迅速冷却并不时摇动使加热时形成的红色被空气逐渐氧化褪去，待呈现兰紫色时，用60％乙醇定容至20ml，摇匀于570nm波长下比色。
以吸光度为纵坐标，氨基氮ug数为横坐标，绘标准曲线三、实验步骤：1.烟末0.5g于研钵中加入5 ml10%乙酸，研磨匀浆后用蒸馏水定容100 ml，用滤纸过滤到三角瓶中备用。
2.1ml滤液加入到20ml 干燥试管中，加1 ml蒸馏水，水合茚三铜3ml, 0.1%抗坏血酸0.1ml, 加塞子密封于沸水中加热15分钟，取出后用冷水迅速冷却并不时摇动使加热时形成的红色被空气逐渐氧化褪去，待呈现兰紫色时，用60％乙醇定容至20ml，摇匀于570nm波长下比色。
游离氨基酸的测定实验报告
游离氨基酸的测定实验方案（茚三酮比色法）一、实验目的茚三酮比色法测定发酵液中游离氨基酸含量，利用氨基酸含量这个参数，控制发酵过程.二、实验原理游离氨基酸的游离氨基可与水合茚三酮作用,产生蓝紫色的化台物二酮茚一二酮茚胺,产物的颜色深浅与游离氨基酸含量成正比，用分光光度计在570nm 下测其含量.因蛋白质中的游离氨基酸也会产生同样反应,在测定前必须用蛋白质沉淀剂将其除掉。
三、实验材料发酵液样品；实验试剂:水合茚三酮;氨基酸标准液；0.1%抗坏血酸实验仪器:100ml容量瓶；漏斗；三角瓶；研钵；移液器;枪头；沸水浴；具塞刻度试管20 ml×10;分光光度计四、实验方法1.溶液配制（1)水合茚三酮称取0。
6g重结晶的茚三酮放烧杯中，加入15ml 正丙醇、30ml正丁醇、60ml乙二醇及9 ml PH4。
54的醋酸盐缓冲液混匀,棕色瓶中冰箱内保存,10天内有效。
（2）氨基酸标准液称取80℃烘干的亮氨酸23.4mg,以10％的异丙醇溶解定溶至50ml（含氮为50ug/ ml)，取此液5ml，用水定容至50 ml，此为含氮量5ug/ ml工作液。
（3）0.1%抗坏血酸称取0。
1g抗坏血酸定容100 ml，随用随配。
2.标准曲线绘制取6支20ml 试管,按下表加剂：试剂管号12 3 4 5 6 亮氨酸标准液（ml ） 0 0.2 0.4 0。
6 0。
8 1.0 无氨蒸馏水（ml ） 2.0 1。
8 1。
6 1.4 1.2 1.0 水合茚三酮（ml) 3.0 3。
0 3。
0 3.0 3.0 3。
0 抗坏血酸（ml ） 0.1 0.1 0.1 0.1 0。
1 0.1 氨基氮量（ug/管 )1.02.03.04.05.0将各管溶液混合均匀，封口，在沸水中加热15min ，取出后立即用冷水摇动冷却,用60%乙醇定容至20 ml ，摇匀。
λ=570nm 处测定吸光度0 0.025 0.055 0。
0990。
146 0.186以吸光度为纵坐标，氨基氨ug 数为横坐标，绘标准曲线如图：茚三酮比色法测定游离氨基氮标准曲线-0.0500.050.10.150.2氨基氮（ug）吸光度A3.样品中游离氨基酸的测定取20ml 试管，取待测液1ml ，加蒸馏水l ml ，水合茚三酮3.0 ml,坏血酸0。
高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量
高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量一、本文概述本文旨在探讨高效液相色谱法（HPLC）在大豆中游离氨基酸含量测定中的应用。
作为一种重要的植物蛋白来源，大豆中的氨基酸组成对于其营养价值及食品工业应用具有重要意义。
游离氨基酸作为大豆蛋白质水解的产物，其含量直接反映了大豆的蛋白质质量和营养价值。
因此，准确测定大豆中游离氨基酸的含量对于评估大豆品质及开发高附加值产品至关重要。
高效液相色谱法作为一种高效、准确的分离分析技术，在氨基酸分析领域具有广泛应用。
本文将详细介绍高效液相色谱法的基本原理、样品处理方法、色谱条件优化以及结果计算与分析等方面的内容，并通过实验验证该方法的可行性和准确性。
本文还将讨论高效液相色谱法在大豆游离氨基酸含量测定中的优势及局限性，以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考。
二、实验材料与方法（1）大豆样品：选择新鲜、无病虫害、无杂质的大豆作为实验材料，经过清洗、烘干、破碎后备用。
（2）试剂：实验所需试剂包括高效液相色谱仪用流动相（如乙腈、甲醇等）、衍生化试剂（如OPA、FMOC等）、标准品氨基酸等，均为分析纯或更高纯度。
（3）仪器：高效液相色谱仪（配备紫外检测器或荧光检测器）、离心机、涡旋混合器、水浴锅、移液枪等。
（1）样品处理：称取适量大豆样品，加入适量的水或缓冲液，进行匀浆处理。
然后，将匀浆液进行离心，取上清液作为游离氨基酸提取液。
（2）衍生化处理：取一定体积的游离氨基酸提取液，加入适量的衍生化试剂，进行衍生化反应。
衍生化反应的目的是将氨基酸转化为易于检测的衍生物，提高检测灵敏度和准确性。
（3）高效液相色谱分析：将衍生化后的样品进行高效液相色谱分析。
选择合适的流动相和色谱柱，设置合适的检测波长或激发/发射波长，记录色谱图和峰面积。
（4）数据处理：根据标准品氨基酸的色谱图和峰面积，绘制标准曲线。
然后，根据样品的色谱图和峰面积，结合标准曲线，计算样品中游离氨基酸的含量。
本实验采用高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸的含量，通过样品处理、衍生化处理、高效液相色谱分析和数据处理等步骤，实现对大豆中游离氨基酸的快速、准确测定。
实验八植物组织中游离氨基酸的分离鉴定
实八:植物组织中游离氨基酸的分离鉴定
左哥
一、实验材料、器材
1、展层溶剂标准氨基酸溶液0.5%羧甲基纤维素钠溶液硅胶G粉0.5%茚三酮丙酮溶液
2、层析缸玻璃板
二、操作步骤
1、马铃薯提取液制备：30g去皮马铃薯，80%乙醇，组织捣碎机，水浴蒸干，残渣加水溶解→
2、制版：1.8g硅胶G，研磨3min，干燥，110C烘箱活化30min→
3、点样：→
4、展层→
5、显色→
6、鉴定。
三、实验结果
四、讨论及分析
由样点颜色和Rf值与标准样点对比可知，2号点为Met，6号点为Pro，7号点为His，
1—6号点，对应氨基酸为酸性或中性氨基酸，而7、8号对应氨基酸为碱性氨基酸。
薄板上样品中5号显色斑点为紫红色，但距离6号点较近，未能完全分离，推断有以下
几点原因：点样时扩散直径过大，导致两斑点扩散区域重叠难以辨认；薄层担体粒度本身的
限制，试验中展层时间不长即达到了预计的溶剂前沿（居上边缘约1cm），即展层速度过快，
原因可能是制板时硅胶G研磨过粗，据范迪姆特方程：H=A+B/U+Cu,其中A、C均与粒度成
正比，即提高填充料的均匀性和减少粒度才能在定长的条件下提高有效搭伴数，增强分离效
果；研磨时用力适当，方法合适，适当增加研磨时间才能是硅胶G颗粒又匀又细，达达到
较好分离效果。
同时，也要注意不可研磨过细，否则易拖尾。
游离氨基酸样品前处理方法
游离氨基酸样品的制备:
1.如为固体样品，取样品置于打浆机中打碎或碾碎，备用。
含油高时需去除油脂。
2.秤取适量打碎样品于小烧杯中加入适量超纯水，涡旋混合2min，常温下提取氨基酸10-30min，定容至25或50ml 容量瓶中。
（注：液体样品从步骤3开始，无需步骤1和2）。
3.取定容后的样液4ml于离心试管中，按样品：磺基水杨酸（15%）=4：1加入磺基水杨酸，混合均匀。
4.置冰箱中 2-4 摄氏度冷藏静置60min以上。
5.置离心机中以10.000rpm离心15min。
6.取上层清液再次以10.000rpm离心15min。
7.用样品稀释液按1：1--1：100稀释（根据样品中氨氮含量确定稀释倍数，以稀释后样品瓶中氨氮含量
0.01-0.006%进样合适，如酱油氨氮含量0.8，稀释100倍为0.008进样正好）。
8.经0.22-0.45微米过滤器过滤后装入试剂瓶中上机分析。
蘑菇中游离氨基酸含量的测定实验报告
蘑菇中游离氨基酸含量的测定实验报告蘑菇是一种常见的食用菌类，具有丰富的营养价值。
其中，游离氨基酸是蘑菇中重要的营养成分之一。
本实验旨在测定蘑菇中游离氨基酸的含量，为进一步了解蘑菇的营养价值提供科学依据。
实验步骤如下：1. 样品准备：选取新鲜的蘑菇作为实验材料，并将其洗净，去除杂质。
2. 样品处理：将蘑菇样品切成小块，然后使用搅拌器将其研磨成蘑菇泥。
3. 提取游离氨基酸：取一定量的蘑菇泥，加入适量的提取液（如酸性溶液、无水乙醇等），并进行搅拌，使蘑菇中的游离氨基酸溶解到提取液中。
4. 离心处理：将提取液进行离心，使蘑菇的残渣与提取液分离。
5. 过滤处理：将离心后得到的提取液通过滤纸进行过滤，去除其中的固体残渣，得到纯净的提取液。
6. 清洗提取液：将提取液加入适量的洗涤溶液中，进行清洗，去除其中的杂质。
7. 测定游离氨基酸含量：采用比色法、高效液相色谱法或气相色谱法等方法测定提取液中游离氨基酸的含量。
通过以上实验步骤，可以得到蘑菇中游离氨基酸的含量。
游离氨基酸是蛋白质分解产物，是蘑菇中重要的营养成分之一。
它们在人体内参与蛋白质合成、酶的催化活性以及细胞信号传递等生理过程中发挥重要作用。
蘑菇中游离氨基酸的含量与蘑菇的品种、生长环境、采摘时间等因素有关。
不同品种的蘑菇中游离氨基酸的含量也有所差异。
此外，蘑菇的新鲜程度也会影响游离氨基酸的含量。
因此，在进行蘑菇中游离氨基酸含量的测定时，需要选择新鲜的样品，并且注意控制其他影响因素，以保证实验结果的准确性和可靠性。
通过测定蘑菇中游离氨基酸的含量，可以了解蘑菇的营养价值和食用价值，为人们合理膳食提供科学依据。
此外，还可以为蘑菇的种植和加工提供参考，以提高蘑菇的品质和经济效益。
蘑菇中游离氨基酸含量的测定是一项重要的实验研究。
通过科学的实验方法和严谨的实验步骤，可以准确测定蘑菇中游离氨基酸的含量，为了解蘑菇的营养成分和提高蘑菇的品质提供科学依据。
这对于人们的健康饮食和蘑菇产业的发展具有重要意义。
游离氨基酸的测定方法
游离氨基酸的测定方法
游离氨基酸咋测定呢？其实有不少方法呢！比如说茚三酮比色法。
先准备好样品，把它处理成合适的状态。
然后加入茚三酮试剂，经过一系列反应后，通过比色来确定游离氨基酸的含量。
这过程中可得小心操作，要是弄错了一步，那结果可就不靠谱啦！那安全性咋样呢？只要按照正确的步骤来，一般没啥大问题。
稳定性嘛，只要试剂没问题，操作规范，结果还是挺稳定的。
这方法能用到好多地方呢！像食品检测领域，你想想，要是不知道食品里的游离氨基酸含量，咋能保证食品的质量和营养呢？优势也不少呢！操作相对简单，成本也不高。
咱举个实际案例哈。
有个食品加工厂，用这个方法检测产品中的游离氨基酸含量，及时调整了生产工艺，提高了产品质量。
这效果多棒啊！
游离氨基酸的测定方法真的超实用，能帮我们了解各种物质中的氨基酸情况，为我们的生活和生产带来很多好处。
咱可得好好利用这些方法，让它们发挥更大的作用。
水溶肥 游离氨基酸含量测定标准
水溶肥游离氨基酸含量测定标准
水溶肥是一种现代化肥料，它可以直接溶解在水中，提供给植
物所需的养分。
其中，游离氨基酸是水溶肥中的重要成分之一，对
植物的生长发育起着重要作用。
因此，准确测定水溶肥中游离氨基
酸的含量，对于合理施肥、提高作物产量和质量具有重要意义。
为了保证水溶肥中游离氨基酸含量的准确性，制定了相应的测
定标准。
首先，需要选择合适的测定方法，常见的有高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法等。
然后，根据标准操作程序，
进行样品的前处理、提取和分析，确保测定结果的准确性和可靠性。
同时，还需要建立相应的质控体系，包括仪器设备的校准、标准品
的准备和实验室操作规范等，以确保测定结果的准确性和可靠性。
标准的制定和实施，不仅有利于水溶肥生产企业提高产品质量，还可以为农民提供科学合理的施肥指导，促进农业生产的可持续发展。
因此，加强对水溶肥游离氨基酸含量测定标准的研究和推广应用，具有重要的现实意义和深远的社会影响。
希望相关部门和科研
机构能够进一步加强标准的制定和实施，推动水溶肥行业的发展，
为农业生产提供更好的支持。
氨基酸分析样品的水解处理
氨基酸分析样品水解用于氨基酸分析的样品制备要得到满意的氨基酸分析结果，不仅仅要注意样品的制备，最重要的是样品的处理。
最精密的仪器也只是在分析时从样品中分离出氨基酸本来的含量。
下面的制备方法已经过实践验证，适用于常规分析。
但在某些情况下也可以，或者说有必要，做适当的修改。
含缩氨酸或蛋白质的样品制备方法：水解样品需要预先粉碎并过60目筛，如果样品含有油脂成分，则水解前还必须先萃取。
方法一、用6 mol/L盐酸水解纯蛋白质或缩氨酸1、称取含蛋白7.5-25 mg的样品（约50－100 mg，准确至0.1 mg）于20 mL安培管中（切勿粘壁）；2、加入10 mL 6mol/L HCL（取500 mL优级纯盐酸（36-38%），定容到1000 mL，加1 g苯酚）；3、用液氮冷冻；4、待液体超过三分之一凝固后，抽真空，熔化安培管使其密封；5、根据样品的不同，将其放在110℃的炉子（烘箱）上，水解12、24、36或72h；6、为了保证结果的重现性，应使炉子恒定在110℃，建议使用内置气流环路的炉子；7、水解完成后，冷却，混匀，开管，过滤，定容至50 mL；8、取适量（0.5 mL左右）滤液置于浓缩仪或旋转蒸发仪中，低于60℃，抽真空，蒸发至干，必要时加少许水，重复蒸干1－2 次；9、加入1－3 mL样品稀释液，使氨基酸浓度达到50－250 nmol/mL。
震荡混匀，用0.22 μm滤膜过滤后，供上机测定使用。
注意：称取样品的量最好与氮的总含量相关联，这样分析结果的重复性会更好。
除此之外的另一个重要因素是样品量与所加入的酸的比例。
当样品中不含纯的缩氨酸和蛋白质而是含有碳水化合物时，酸的多少就非常重要。
碳水化合物的量越多，所需酸就越多。
样品与酸的比例必须在1:10到10:1的之间(mg/mL)。
方法二、氧化水解1、称取含蛋白7.5-25 mg的样品（约50－100 mg，准确至0.1 mg）于20 mL浓缩管中（切勿粘壁）；2、置于0℃冰水中加入2 mL预冷的过甲酸溶液，加液时需将样品全部润湿，但不能摇动；3、在2℃的冰箱中放置15 h；或者55℃水浴中放置15 min；4、溶液中多余的过甲酸可以通过加入氢溴酸（48％氢溴酸0.3 mL）放入冰浴静止30 min来去除；5、然后置于浓缩仪或旋转蒸发仪中，低于60℃，抽真空，蒸发至干；6、用10-15 mL 6 mol/L HCL将残渣转移到20 mL安培瓶或厌氧管中（切勿粘壁），封口（无须抽真空），置于（110±1）℃恒温干燥箱中水解22－24 h；7、水解完成后，冷却，混匀，用水把水解液定容到20 mL；8、过滤后取0.5 mL上清液浓缩至干；9、加入1－3 mL样品稀释液，使氨基酸浓度达到50－250 nmol/mL，震荡混匀，用0.22 μm滤膜过滤后，供上机测定使用。
锦绣杜鹃花游离氨基酸的提取工艺研究
锦绣杜鹃花游离氨基酸的提取工艺
研究
锦绣杜鹃花游离氨基酸的提取工艺研究，主要是指从锦绣杜鹃花中提取游离氨基酸的工艺过程。
一般来说，提取锦绣杜鹃花游离氨基酸的具体步骤如下：
1.将锦绣杜鹃花进行分级、去皮、洗涤、粉碎，得到细粉状样品；
2.将粉末加入适量的水，用搅拌机进行搅拌，使其形成浆料；
3.将浆料加入适量的乙醇，搅拌均匀后，再进行滤清，滤液即为研究样本；
4.将滤液加入适量的硫酸铵溶液，搅拌均匀，放置2小时，使游离氨基酸的胺基组分完全沉淀；
5.将沉淀物用空气吹干，加入适量的溴化钾溶液，热解30min，把游离氨基酸的胺基组分完全溶解；
6.采用HPLC分析技术对溶解液中的游离氨基酸进行分析，以确定其组成成分及含量。
中草药中氨基酸的前处理及色谱法分析
中草药中氨基酸的前处理及色谱法分析李亚丽; 朴向民; 逄世峰; 曲正义; 王英平【期刊名称】《《特产研究》》【年(卷),期】2019(041)003【总页数】6页(P112-117)【关键词】中草药; 氨基酸; 前处理; 色谱法【作者】李亚丽; 朴向民; 逄世峰; 曲正义; 王英平【作者单位】中国农业科学院特产研究所长春130122【正文语种】中文【中图分类】Q503氨基酸是含有氨基的羧酸，是生物功能大分子蛋白质的基本组成单元[1-2]。
目前，已发现自然界中有300 余种氨基酸，其中，参与蛋白质合成的氨基酸有20多种，是基本氨基酸[3]。
氨基酸在自然界中主要以游离态和结合态2 种形式存在。
中草药中2 种氨基酸形式皆存在，且大多为人体必需氨基酸，除具有营养价值外，在发挥药效时亦起着不可或缺的作用[4]，如亮氨酸和缬氨酸等具有提高运动耐力、抗感染和修复组织作用。
另外，非必需氨基酸亦可能有一定的药效价值，如牛磺酸虽不是机体蛋白质的构成成分，但是缺乏牛磺酸可引起多种心血管和中枢神经性疾病[5]。
谷酰胺或含谷酰胺的肽能防止新生儿肠上皮细胞由氧化剂诱导的氧化[6]；其次，氨基酸含量的高低可作为中草药药性判别的依据[7]；而且，指标性氨基酸可用于定性鉴别中药材[8]。
从目前氨基酸在人体中的代谢来看，20 余种氨基酸的摄入量比例不当时，会致使氨基酸总体利用率降低[5]。
另外，某种氨基酸摄入量过大还会对人体构成危害，如大量食用谷氨酸可能会引起头疼和肩背痛等[9]。
因此，中草药中氨基酸分析可为中草药鉴别、质量评估及其相关产品的开发利用提供理论依据。
由于氨基酸含有氨基和羧基高极性基团，且一般具有挥发性低、无强发色基团等特点，其分离和检测极具挑战性。
色谱法是氨基酸分析最有效和最常用的方法，分析前预处理是确保分析结果准确无误的关键环节之一。
笔者拟对中草药中氨基酸的前处理及色谱方法进行总结评述，并对氨基酸的前处理和色谱分析方法的发展趋势进行展望，以期为今后氨基酸分析工作提供参考。
鱼肉游离氨基酸的测定
鱼肉游离氨基酸的测定
鱼肉游离氨基酸的测定可以按照以下步骤进行：
样品选取：选择能够代表整个鱼肉批次的样品。
为了提高结果的准确性，可以选择多个同种鱼肉的样本进行测试。
样品处理：在检测前，需要对鱼肉样品进行适当的处理。
这包括去除骨头、皮等不必要的部分，并确保样品清洁无污染。
检测方法：使用高效液相色谱（HPLC）或气相色谱（GC）等技术进行游离氨基酸的检测。
具体选择哪种检测方法，应根据实际需要和设备条件来决定。
检测标准：根据相关标准或规范，确定检测鱼肉中游离氨基酸的指标范围。
常用的标准有国家标准、行业标准或国际标准等。
完成以上步骤后，就可以对鱼肉中的游离氨基酸进行测定了。
请注意，在进行任何化学实验时，都应确保操作安全，遵循相关的实验室规定和安全指南。
血清中游离氨基酸的测定
血清中游离氨基酸的测定
血清中游离氨基酸的测定是衡量血液中游离氨基酸浓度的方法。
游离氨基酸是指未与其他分子结合形成蛋白质或肽链的氨基酸，它们可以被运输到身体其他部位用于蛋白质合成、能量供应等。
以下是一种常用的方法来测定血清中游离氨基酸的浓度：
1. 血样准备：采集血液样品，并用抗凝剂如EDTA进行处理，以防止凝固。
随后，离心血液以分离血清。
2. 血清制备：将血清样品加入蛋白质沉淀剂（如硫酸锌），以沉淀蛋白质并保留游离氨基酸。
3. 血清提取：将沉淀的血清与适当的提取溶剂（如醇/酮）混合，并通过离心将游离氨基酸从血清中提取出来。
4. 血清测定：使用各种分析方法来测定游离氨基酸的浓度。
常用的方法包括高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC）等。
这些方法利用标准曲线来量化游离氨基酸，通过与已知浓度的标准品进行比较。
该测定方法可以用于研究某些疾病状态下血清中游离氨基酸的改变，评估蛋白质代谢异常或营养状态。
此外，它也可以帮助医生判断某些遗传代谢疾病，如苯酮尿症等。
游离氨基酸总量的测定[详实参考]
![游离氨基酸总量的测定[详实参考]](https://img.taocdn.com/s3/m/32a1deab7f1922791788e828.png)
植物体内游离氨基酸总量的测定方法一：一、原理游离氨基酸的氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，其颜色的深浅与游离氨基酸的含量成正比。
二、仪器设备分光光度计；电子天平；容量瓶25ml或50ml 3个；漏斗（直径6厘米）3个、滤纸适量；20ml刻度试管 7支；移液管0.5ml 3支、5ml 1支；试管架；玻棒；吸耳球；剪刀；移液管架；橡皮筋、塑料薄膜（封试管口）；吸水纸；擦镜纸适量；电炉；水浴锅（含铁丝筐）。
三、试剂1. 3%茚三酮试剂称3g茚三酮用95%乙醇溶解定容到100ml容量瓶里，贮于棕色瓶中。
此试剂应放在冷凉处，不宜久放，使用期约10天。
2. 氰酸盐缓冲液（按以下方法配制）：（1）NaCN贮备液0.01mol/L（490mg/L）。
（2）醋酸缓冲液：称360g醋酸钠（含三分子结晶水）溶于约300ml无氨蒸馏水中，加66.67ml冰醋酸再用无氨蒸馏水稀释至1L。
取溶液（1）20ml，用溶液（2）定容到1L。
3. 标准氨基酸精确称取在80℃下烘干的亮氨酸13.1mg（或α-丙氨酸8.9mg）溶于10%的异丙醇中，并在100ml容量瓶中用10%异丙醇稀释至刻度，混匀，即为1mmol/L 的标准氨基酸贮备液，置冰箱中保存。
为了制备工作液，可取贮备液与等量无氨蒸馏水混合，此液浓度为0.5mmol/L，即1ml含氨基酸0.5μmol，或氨基氮7μg。
4. 95%乙醇；异丙醇（分析纯）。
四、操作步骤1. 标准曲线的制作取20ml刻度试管18支，按下表1加入各试剂。
加完试剂后混匀，在100℃水浴中加热12min（加热时封口），取出在冷水中迅速冷却，立即于每管中加入5ml 95%乙醇，塞好塞子，猛摇试管，使加热时形成的红色产物被空气中的氧所氧化而褪色，此时溶液呈蓝紫色。
于570nm 波长下测其光密度（以空白管为参比），以氨基酸浓度为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线，求出直线方程。
2. 样品提取选取有代表性的植物叶片（或其它组织），洗净擦干，剪碎混匀，迅速称取0.10~0.20g（视氨基酸含量多少而定），共称3份，分别加入20ml刻度试管中，再加蒸馏水10ml盖塞（或系上塑料薄膜），置沸水浴中20min以提取游离氨基酸，到时取出在自来水中冷却，把上清液滤入25ml 容量瓶中，之后再往试管中加5ml蒸馏水，置沸水浴上再加热10min，过滤并反复冲洗残渣，最后定容至刻度，摇匀。
超高效液相色谱-质谱测定牛乳中游离氨基酸
超高效液相色谱-质谱测定牛乳中游离氨基酸赵瑞;崔进;梅连瑞;许晓菁;金钥;闫师杰;刘祥【摘要】建立牛乳中未衍生游离氨基酸的超高效液相色谱串联质谱的测定方法.样品采用酸化乙腈沉淀蛋白,正己烷脱脂,氮吹至近干后初始流动相复溶,超声溶解离心过膜后检测.结果显示:在14 min内所分析目标物得到较好的分离,浓度与峰面积的线性关系良好,相关系数在0.9912~0.9998之间,回收率在76%~124%,相对标准偏差1.0%~12.9%.%A method for determining of underivatized free amino acids in milk was developed with ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS). The protein of sample was pre-cipitated with acid acetonitrile, the supematant was purified by n-hexane,then the purified solution was con-centrated by nitrogen,dissolved with the initial mobile phase by ultrasonic assistance,centrifuged and filtered for ultra-high performance liquid chromatographic analysis. The results indicated that good separation of amino acids was obtained within 14 min. The linearity of the investigated compounds between concentrations and their peak areas within the test ranges was good, and the correlation coefficient was from 0.9912 to0.9998. The av-erage recoveries and relative standard deviations of 14 amino acids at three spiked levels were in the range of 76%-124%and1.0%-12.9%respectively.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)019【总页数】5页(P156-160)【关键词】牛乳;未衍生游离氨基酸;超高效液相色谱串联质谱;亲水作用【作者】赵瑞;崔进;梅连瑞;许晓菁;金钥;闫师杰;刘祥【作者单位】天津农学院食品科学与生物工程学院,天津300384;天津市产品质量监督检测技术研究院,天津300308;天津市产品质量监督检测技术研究院,天津300308;天津市产品质量监督检测技术研究院,天津300308;天津市产品质量监督检测技术研究院,天津300308;天津农学院食品科学与生物工程学院,天津300384;天津市农副产品深加工技术工程中心,天津300384;天津市食品安全检测技术研究院,天津300308【正文语种】中文Abstract：A method for determining of underivatized free amino acids in milk was developed with ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）.The protein of sample was precipitated with acid acetonitrile，the supematant was purified by n-hexane，then the purified solution was concentrated by nitrogen，dissolved with the initial mobile phase by ultrasonic assistance，centrifuged and filtered for ultra-high performance liquid chromatographic analysis.The results indicated that good separation of amino acids was obtained within 14 min.The linearity of the investigated compounds between concentrations and their peak areas within the test ranges was good，and the correlation coefficient was from 0.991 2 to 0.999 8.The average recoveries and relative standard deviations of 14 amino acids atthree spiked levels were in the range of 76%-124%and 1.0%-12.9%respectively.Key words：milk；underivatized free amino acids；ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）；hydrophilic interaction鲜牛乳中含有一定量人体所必需的游离氨基酸，它可以提高人体免疫功能从而起到预防作用，谷氨酸和甘氨酸是其主要形式，其含量是一定的。
植物中游离氨基酸的测定
植物中游离氨基酸的测定
植物中游离氨基酸的测定是检测植物中氨基酸含量的重要方法。
它对于评估植物营养价值，鉴定新品种以及研究植物体内生理功能具有十分重要的意义。
一般而言，植物中游离氨基酸测定分为三个步骤：样品前处理、含氮量测定和氨基酸分析。
样品前处理需要将植物样本进行固相萃取或者电解质萃取，以去除杂质；含氮量测定采用Kjeldahl法或者Dumas法；而氨基酸分析则包括HPLC-UV/MS、GC-MS、IR、MS/MS 等不同方法。
其中HPLC-UV/MS方法是常用的方法之一。
在使用HPLC-UV/MS 方法时，样品先通过回归装置进行净化、分离及回收，然后在HPLC端盘上使用循环优化的方式进行分析；最后通过UV/MS 技术对所得的产物
进行定量测定。
以上就是关于植物中游离氨基酸的测定的详情介绍，从上文可以看出对于正确地进行检测都必不可少地依赖于专业人士对样本处理、测试方法选取以及数字应用方式的正确使用。
只有采取正确的方法才能确保最终的测定结果的准确性，以便更好地利用植物的营养价值，获得更好的生产和使用效果。
不同前处理方法对羽毛粉碱解液中游离氨基酸测定的影响
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