实验室生物安全

安全眼镜和护目镜
在所有易发生潜在眼
睛损伤的生物安全实
验室中工作时，必须
采取眼睛防护措施。

口罩 口罩可以保护部分面部免 受生物危害物质如血液、 体液、分泌液以及排泄物 等喷溅物的污染。

防护面罩
对整个脸部进行防护：必
须使用一种标准的防护面 罩以罩住整个脸部，或使 用口罩加护目镜（或口罩 加安全镜）。
传播危险有限。

当病源形成大量气溶胶的潜力较大时，
会增加人员感染的危险。

通常危害等级Ⅱ的微生物 都在初级生物学诊断、基
础医学研究上存在，需要
张贴生物危险标志。
实验室生物危害因子分级

危害等级Ⅲ的微生物 体危害):
(高个体危害、低群
即能引起人类或动物严重疾病，造成严重 经济损失，但通常不能因偶然接触而在个 体间传播，或能用抗生素、抗寄生虫药物 治疗的病原体。
后，才可以开始对物品进行处理。
注意：
要在开始实验之前将所有必需的物品置于
在接触感染性物质 （血液、体 液、分泌液、渗出液、以及接 触粘膜和非完整皮肤时），必
须使用合适的手套以保护工作
人员避免受到污染物溅出或生
物污染的事故所造成的损害；

手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒 后丢弃；

手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵 活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并 应对所涉及的危险提供足够的防护；

危害等级Ⅲ的微生物都在特殊的医学研究、
生物学研究中存在，需要装配特殊防护衣、
定向气流疏通器、生物安全柜等特殊研究 装置防止生物感染。

工作时与这些病源体接触的人员面临偶然 性自动接种和空气吸入的危险。
实验室生物危害因子分级

危害等级Ⅳ的微生物
(高个体危害、高群
体危害):
即能引起人类或动物非常严重的疾病，一般
以及可能会扰乱气流的地方。在安全柜的后 方以及每一个侧面要尽可能留有30 cm 的空 间，以利于对安全柜的维护。
实验室中生物安全柜的使用

操作者
操作者在移动双臂进出安全柜时，需要小心维
持前面开口处气流的完整性，双臂应该垂直地 缓慢进出前面的开口。手和双臂伸入到生物安 全柜中等待大约一分钟，以使安全柜调整完毕 并且让里面的空气“扫过”手和双臂的表面以

防护帽
在生物安全实验室中佩戴
简易防护帽可以保护工作
人员避免化学和生物危害
物质飞溅至头部(头发)所 造成的污染。


呼吸防护装备
当实验室操作不能安全有效的 将气溶胶限定在一定的范围内 要求使用呼吸防护装备。

呼吸防护的有效装备--- 防毒
面具（面具、个人呼吸器和正 压防护服 ）


手部防护装备——手套
洗手池外，依靠标准的微生物操作即可
获得基本的防护水平。
生物安全实验室分级及适用范围

Ⅱ级生物安全实验室
适合从事对人和环境有中度危害的生物因 甲、乙和丙型肝炎病毒等。
子的工作，如O157：H7大肠杆菌、沙门氏菌、
一级屏障：需要I或Ⅱ级生物安全柜 和个人防护 ； 二级屏障：在I级BSL的基础上增加 高压灭菌器和洗眼装置 等。
防护服（实验服、隔离衣、连体衣、围裙 以及正压防护服）

防护服（实验服、隔离衣、连体衣、 围裙以及正压防护服）

在实验室中工作人员应该一直或持续穿上 防护服；

清洁的防护服应放置在专用存放处；

污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中； 每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁； 当防护服已被危险材料污染后应立即更换； 离开实验室区域之前应脱去防护服。
外扩散并导致危害而采取的综合措施，
以达到对人、环境生态和社会的安全防
护。
实验室工作人员的责任

废弃物的安全处理； 样本的安全运输（包装容器的正确使用）； 正确使用安全设备； 发生突发事件时，迅速汇报；


如果发现存在某种潜在危险，必须及时指出；
安全意识。
生物安全术语与定义

生物安全 biosafety： 避免危险生物因子造成实验室人员暴露、 向实验室外扩散并导致危害的综合措施。
Ⅱ级B1 型生物 安全柜原理图
A：前开口； B：窗口； C：排风HEPA 过滤器； D：供风HEPA 过滤器； E：负压压力排风系统； F：风机； G：送风HEPA 过滤器。
安全柜需要有与建筑物排 风系统相连接的排风接口。
三级生物安全柜

用于操作危险度4 级的微生物材料，可
以提供最好的个体防护。
生物安全实验室分级及适用范围

Ⅳ级生物安全实验室
适用于对人体、动植物或环境具有高度的 危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径 不明，目前尚无有效疫苗或治疗方法的致 病性微生物或未知传播风险的有关病原体 及其毒素。
一级屏障：Ⅲ级生物安全柜，正压防护服
二级屏障：在Ⅲ级BSL的基础上，应为单独
建筑或隔离的独立区域，有供气系统、排气 系统、真空系统、消毒系统、外排空气二次 HEPA过滤。

它们不同于Ⅰ级生物安全柜之处为，只让经
HEPA 过滤的（无菌的）空气流过工作台面；

所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、
环境和实验对象的保护；

可用于操作危险度2 级和3 级的感染性物质。
Ⅱ级A1 型生物 安全柜原理图
A：前开口； B：窗口； C：排风HEPA 过滤器； D：后面的压力排风系统； E：供风HEPA 过滤器； F：风机。
及其毒素；
根据其致病性、传播方式和防治措施等将生物 危害程度分为4级：
实验室生物危害因子分级

危害等级I的微生物 体危害):
(低个体危害、低群
指确定的、有特征的，已知不会使健康成
人致病的微生物菌落。

这些微生物菌落是机会性病原体，因而存 在着在青少年、老年及免疫缺陷或免疫受 抑的个体中传播的可能性。
生物安全实验室分级及适用范围

Ⅲ级生物安全实验室
适用于主要通过呼吸途径吸入使人感染严重 的甚至是致死疾病的微生物及其毒素，如炭 疽芽孢杆菌、黄热病毒、汉坦病毒、HIV、 SARS冠状病毒。
一级屏障：特殊的人体防护和呼吸道防护措施，
以及严格的操作规范，Ⅱ级或Ⅲ级生物安全
柜。 二级屏障：在Ⅱ级BSL的基础上，实验室和进 入走廊隔开，双门进入，自动关闭，排出的空 气不循环，室内负压，双开门高压灭菌器。

Ⅲ级生物安全柜适用于三级和四级生物
安全水平的实验室。
三级生物安全柜

所有接口都是“密封的”，其送风经HEPA 过滤，排风则经过两个HEPA 过滤器。 三级生物安全柜由一个外置的专门的排风 系统来控制气流，使安全柜内部始终处于

负压状态。只有通过连接在安全柜上的结
实的橡胶手套，手才能伸到工作台面。

危险 risk： 伤害发生的概率及其严重性的综合。

气溶胶aerosols： 悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子 （粒径一般为 0.001-100μm）形成的相对 稳定的分散体系。
生物安全术语与定义

生物安全实验室 biosafety
laboratory ：通过防护屏障和配套管理 措施，达到生物安全要求的生物实验室和
生物安全实验室分级

生物安全实验室是按照相应的生物安全
防护水平要求设计建造的，根据所处理
对象的生物危险程度不同，把生物安全
实验室分为4级：
生物安全实验室分级
(Biosafety Laboratory)

Ⅰ级生物安全实验室：英文缩写为BSL-1 Ⅱ级生物安全实验室：英文缩写为BSL-2


足部防护装置
BSL-2和BSL-3实验室要
坚持穿鞋套或靴套；

BSL-3和BSL-4实验室要
求使用专用鞋。
生物安全柜
Biological safety cabinets，BSCs 是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性
标本等具有感染性的实验材料时，用来保
护操作者本人、实验室环境以及实验材料，
使其避免暴露于上述操作过程中可能产生
Ⅲ级生物安全实验室：英文缩写为BSL-3
Ⅳ级生物安全实验室：英文缩写为BSL-4
生物安全实验室分级及适用范围

Ⅰ级生物安全实验室
适用于已知其特征的，在健康人群中不
引起疾病的，对实验室工作人员和环境
危害最小的生物因子的工作，如枯草芽
孢杆菌、格式阿米巴原虫和感染性犬肝
炎病毒等。
不需要特殊的一级和二级屏障，除需要
内产品，目前已较Fra Baidu bibliotek使用。
一级生物安全柜
图6 Ⅰ级生物安全柜原理图 A：前开口；B：窗口；C：排风HEPA 过滤器；D：压力排风系统
二级生物安全柜

是目前应用最为广泛的柜型；

依照入口气流风速、排气方式和循环方式
可将二级生物安全柜分为4个级别：
A1型， A2型(原B3型), B1型和B2型；
二级生物安全柜

通常生物危险等级为1级的微生物都在基 础生物教学、基础微生物技术工作室等场 所存在。
实验室生物危害因子分级

危害等级Ⅱ的微生物 限群体危害):
(中等个体危害、有
即能引起人或动物发病，但一般情况下对 健康工作者、群体、家畜或环境不会引起 严重危害的病原体。

实验室感染可能发生，但不会导致严重 疾病，具有有效治疗和预防措施，并且
个人防护装置选择原则
实验室工作人员应根据不同级别生物 安全水平和工作性质来选择个人防护 装置并掌握正确的使用方法。
个人防护装置主要包括：

眼睛防护（安全镜、护目镜）
头面部及呼吸道防护（口罩、面罩、
个人呼吸器、防毒面具、帽子）

躯体防护（实验服、隔离衣、连体衣等）
手、足防护（手套、鞋套） 耳防护（听力保护器等）
不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在
人与人、或动物与人、或人与动物、或动物 与动物之间传播的病原体。

危害等级Ⅳ的微生物需要装备更多更严密 的防护设备和隔离设备。 研究人员需要身着完全密封性防护衣，双 门高压蒸气灭菌器，空气过滤防毒面具等

高安全系数防护设备。
实验室相关感染源

培养物和储存物 实验动物 标本 被上述内容污染的物品
1983
1993
2003
2004
该手册的第2版于1993 年出版 于2004年在网上公布了该手册的第3 版中文版
WHO《实验室生物安全手册》对各个国 家都是有益的参考和指南，它可以帮 助制订并建立微生物学操作规范，确 保微生物资源的安全。
实验室生物安全
就是在实验研究过程中，为避免危险生
物因子造成实验室人员暴露，向实验室
动物实验室。
生物安全术语与定义

一级屏障 primary barrier ：
是操作者和被操作对象之间的隔离，也称一
级隔离 。如生物安全柜、个体防护装备等。

二级屏障 secondary barrier ：
是生物安全实验室和外部环境的隔离，也称
二级隔离。
实验室生物危害因子分级
实验室生物危害因子就是所研究的病原微生物
Ⅲ级生物安全柜 （手套箱）示意图
A：用于连接等臂长手套的舱孔； B：窗口； C：两个排风HEPA 过滤器； D：送风HEPA 过滤器； E：双开门高压灭菌器或传递箱； F：化学浸泡槽。
安全柜需要有与独立的建筑物 排风系统相连接的排风接口。
实验室中生物安全柜的使用

安装位置
生物安全柜应位于远离人员活动、物品流动

生物因子 biological agents ： 一切微生物和生物活性物质。
生物安全术语与定义

病原体
pathogens ：
可使人、动物或植物致病的生物因子。

危害废弃物
hazardous waste ：
有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有 毒、放射和起破坏作用的对人、环境有害 的一切废弃物。
生物安全术语与定义
实验室相关感染的原因

80％是由工作人员操作失误引起的； 20％是由设备故障引起的； 导致感染最多的4种实验室事故： A 溢出和泼洒； B．针头和注射器；
C．锐器、碎玻璃；D．动物咬伤或抓伤、 或其身上的寄生虫叮咬。
实验室相关感染暴露途径

经皮接种感染


气溶胶吸入感染
粘膜接触感染

食入感染
的感染性气溶胶和溅出物而设计的操作装
置。
生物安全柜分级
可分为一级、二级和三级三大类以满
足不同的生物研究和防疫要求。
一级生物安全柜

可保护工作人员和环境而不保护样品；

气流原理和实验室通风橱一样，不同之处
在于排气口安装有HEPA过滤器；

一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通
风管中的风机带动气流，由于不能保护柜
实验室生物安全列 问题交流
生物安全，是一个重要的国际性问题。世
界卫生组织（WHO）早就认识到这个问题，
因此早在1983 年就出版了《实验室生物安
全手册》（Laboratory Biosafety Manual）
第1 版。
WHO Laboratory Biosafety Manual
Laboratory Biosafe ty Manual 1st edition