利用S-层蛋白在细胞表面展示α-淀粉酶和金属硫蛋白

合集下载

细菌表面S-层的结构及其功能和应用前景

细菌表面S-层的结构及其功能和应用前景

细菌表面S-层的结构及其功能和应用前景
孙明;张蕾;朱晨光;喻子牛
【期刊名称】《微生物学报》
【年(卷),期】2002(042)004
【摘要】@@ 细菌的细胞外壁一般由细胞壁和细胞膜组成,除此之外,在许多古细菌和真细菌中还有一层表面结构,称为表面层(Surface layers)或称为S-层(S-layers),它们是由蛋白质组成的晶格状结构,位于细胞壁或细胞膜外层,是生物进化过程中最简单的一种生物膜[1,2].
【总页数】4页(P506-509)
【作者】孙明;张蕾;朱晨光;喻子牛
【作者单位】华中农业大学生命科学技术学院,农业部暨教育部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学生命科学技术学院,农业部暨教育部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学生命科学技术学院,农业部暨教育部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学生命科学技术学院,农业部暨教育部农业微生物重点实验室,武汉,430070
【正文语种】中文
【中图分类】Q24;Q932
【相关文献】
1.嗜酸乳杆菌S-层蛋白表面展示系统的构建及酶切位点分析 [J], 刘琼;王春凤;杨桂连;秦守涛;刘曼
2.乳酸杆菌S-层蛋白的结构及免疫调控功能研究进展 [J], 张英春;向鑫玲;张兰威;马放;李少慧
3.嗜酸热硫球菌表面层(S-层)的两维结构重建 [J], 段晓峰
4.利用S-层蛋白在细胞表面展示α-淀粉酶和金属硫蛋白 [J], 吴怀光;刘欣;孙明;喻子牛
5.利用S-层蛋白CTC在苏云金芽胞杆菌细胞表面展示鸡毒霉形体粘附素蛋白 [J], 刘梅;郭素霞;胡思顺;肖运才;许青荣;毕丁仁;孙明
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

沪教版生物学高三上学期期中试题及解答参考(2024-2025学年)

沪教版生物学高三上学期期中试题及解答参考(2024-2025学年)

2024-2025学年沪教版生物学高三上学期期中自测试题(答案在后面)一、单项选择题(本大题有12小题,每小题2分,共24分)1、下列哪一项不是细胞膜的主要功能?A. 控制物质进出细胞B. 维持细胞内外环境的稳定C. 参与细胞间的信息交流D. 储存遗传信息2、在光合作用过程中,叶绿体中的光反应发生在哪个部位?A. 类囊体膜B. 叶绿体基质C. 叶绿体外膜D. 叶绿体内膜3、题干:以下关于光合作用的描述,正确的是:A、光合作用的光反应阶段发生在叶绿体基质中B、光合作用中,水分子被分解产生氧气C、光合作用中,二氧化碳和氧气是最终产物D、光合作用的光反应阶段需要消耗能量4、题干:下列关于细胞呼吸过程的描述,正确的是:A、细胞呼吸过程中,氧气是最终电子受体B、细胞呼吸的第一阶段发生在细胞质基质中C、细胞呼吸的第二阶段产生水D、细胞呼吸的第三阶段不需要氧气5、在细胞分裂过程中,染色体数目加倍发生在哪个阶段?A. 间期B. 前期C. 中期D. 后期E. 末期6、下列哪项不是细胞膜的功能?A. 控制物质进出细胞B. 维持细胞内环境稳定C. 进行细胞呼吸作用D. 细胞间的识别与信号传递7、在细胞有丝分裂过程中,以下哪个阶段会发生染色体的交叉互换?A. 前期B. 中期C. 后期D. 末期8、以下关于酶的说法,正确的是:A. 所有酶都是蛋白质B. 酶的作用机理是通过降低反应的活化能C. 酶的活性受温度影响,但不受pH值影响D. 酶的催化效率不受底物浓度的影响9、下列关于生物膜结构的描述,正确的是:A、生物膜主要由蛋白质和核酸组成B、生物膜是由磷脂双分子层和蛋白质组成的静态结构C、生物膜具有一定的流动性,蛋白质可以自由地在磷脂双分子层中移动D、生物膜中的蛋白质都是固定不动的 10、下列关于光合作用的描述,不正确的是:A、光合作用是绿色植物在光照下将二氧化碳和水转化为有机物和氧气的过程B、光合作用分为光反应和暗反应两个阶段C、光反应发生在叶绿体的类囊体膜上,暗反应发生在叶绿体的基质中D、光合作用的光反应阶段产生ATP和NADPH,暗反应阶段使用这些能量和还原力11、题目:以下哪种生物属于原核生物?A. 苍蝇B. 植物细胞C. 细菌D. 真菌12、题目:以下哪种生物现象属于生物的遗传现象?A. 生物对环境的适应B. 生物的繁殖C. 生物的生长D. 生物的变异二、多项选择题(本大题有4小题,每小题4分,共16分)1、以下关于细胞膜结构的描述,正确的是()A. 细胞膜主要由磷脂和蛋白质构成B. 细胞膜是全透性的,物质可以自由通过C. 细胞膜具有一定的流动性,表现为磷脂分子的侧向扩散D. 细胞膜上有糖蛋白,具有识别作用E. 细胞膜上的蛋白质有通道蛋白和载体蛋白两种类型2、以下关于光合作用过程的描述,正确的是()A. 光合作用包括光反应和暗反应两个阶段B. 光反应阶段发生在叶绿体的类囊体膜上C. 暗反应阶段需要光能,但不需要叶绿素D. 光反应阶段产生ATP和NADPH,这些能量和还原剂用于暗反应E. 光合作用的总反应式为:6CO2 + 6H2O + 光能→ C6H12O6 + 6O23、以下哪些属于生物的遗传信息载体?A、蛋白质B、DNAC、RNAD、多糖4、下列关于细胞膜结构的描述,正确的是:A、细胞膜是由磷脂双分子层构成的B、细胞膜中蛋白质是静态的,不参与物质的运输C、细胞膜具有流动性,蛋白质和脂质可以运动D、细胞膜上的糖蛋白只起到识别作用三、非选择题(本大题有5小题,每小题12分,共60分)第一题题目:以下哪种生物分类单位表示的生物种类最为相近?A. 门B. 纲C. 目D. 科第二题题目:以下为某同学对基因表达调控过程的实验记录,请根据实验记录回答问题。

2023-2024学年高中生物沪科版高中第二册第6章 遗传信息的传递和表达单元测试(含答案解析)

2023-2024学年高中生物沪科版高中第二册第6章 遗传信息的传递和表达单元测试(含答案解析)

2023-2024学年沪科版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2.请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题(本大题共计10小题每题3分共计30分)1.抗生素P能有效抑制细胞内蛋白质的合成原因是其具有与tRNA结构中“结合氨基酸部位”类似的结构在进行试管内翻译时将足量抗生素P加到试管内可能会观察到的现象是()A. 试管内翻译的最终产物为不完整蛋白质B. 携带氨基酸的tRNA无法与mRNA进行碱基互补配对C. mRNA无法与核糖体结合D. 抗生素P与游离的核糖核苷酸结合【答案】A【解析】2.DNA分子具有多样性和特异性是由于()A. DNA分子是高分子化合物相对分子质量大B. DNA分子中碱基数目很多能形成很多氢键C. DNA分子中两条链上的脱氧核糖和磷酸之间的排列顺序变化多端D. DNA分子中碱基对的排列顺序千变万化但在特定的DNA分子中碱基排列顺序是一定的【答案】D【解析】解碱基之间通过氢键连接形成碱基对碱基对的排列顺序干变万化导致DNA 具有多样性特定的碱基对排列顺利导致DNA分子的特异性故选 D3.某校学生开展研究性学习在搭建DNA分子模型的实验中若有4种碱基塑料片共20个其中4个C 6个G 3个A 7个T 脱氧核糖和磷酸之间的连接物14个脱氧核糖塑料片40个磷酸塑料片100个代表氢键的连接物若干脱氧核糖和碱基之间的连接物若干则()A. 能搭建出20个脱氧核苷酸B. 能搭建出4^10种不同的DNA分子模型C. 所搭建的DNA分子片段最长为4个碱基对D. 能搭建出一个10碱基对的DNA分子片段【答案】C【解析】解 A.由题干可知题中提供的条件能构建单个脱氧核苷酸14个 A错误B.能建出一个4碱基对的DNA分子片段由于A—T有3对 G—C有4对因此能搭建的DNA分子模型种类少于4^4种 B错误CD.由题干可知题中提供的条件只能构建一个4碱基对的DNA分子片段 C正确 D错误故选 C4.某细菌有甲、乙两种类型其中甲菌能够合成组氨酸乙菌不能合成组氨酸从甲菌体内提取一种物质加入有乙菌生活的培养基中结果获得了能够合成组氨酸的细菌菌落(菌落指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体)这种物质最有可能是()A. mRNAB. DNAC. 组氨酸D. 合成组氨酸的酶【答案】B【解析】解基因可以控制生物的性状而基因位于DNA上将从这种菌中提取的某种物质加入到培养基中培养不能合成组氨酸的细菌菌落结果获得了活的能合成组氨酸的细菌菌落这说明获得的细菌菌落中含有能够控制合成组氨酸的基因因此该物质为DNA 故选 B5.在同一草场上牛吃了草长成牛羊吃了草长成羊其根本原因是牛和羊的()A. 染色体数目不同B. 消化吸收能力不同C. 蛋白质结构不同D. DNA上的遗传信息不同【答案】D【解析】解牛和羊是不同种生物两者细胞核内的DNA(遗传物质)上的遗传信息不同而蛋白质是DNA控制合成的因此牛、羊虽然吃相同的草但机体同化合成的蛋白质不同因此牛肉和羊肉的口味存在差异.故选 D.6.下列与遗传物质有关的说法正确的是()A. 遗传物质的基本组成单位是脱氧核苷酸B. 只有在染色体上的基因才遵循孟德尔的遗传规律C. 病毒的RNA都能直接复制因此可作为病毒的遗传物质D. 若DNA中腺嘌呤的比例为x 则腺嘌呤在每一条链中的比例也为x【答案】B【解析】A、遗传物质是DNA或RNA 其基本组成单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸 A错误B、孟德尔遗传定律只适用于真核生物核基因的遗传即只有在染色体上的基因才遵循孟德尔的遗传规律 B正确C、病毒的RNA不都能直接复制如HIV病毒的RNA需先逆转录形成DNA 然后再转录才能形成RNA C错误D、若DNA中腺嘌呤的比例为x 则腺嘌呤在每一条链中的比例为0~2x D错误7.在探究核酸是遗传物质的科学历程中有如下重要实验 T2噬菌体侵染细菌实验、肺炎链球菌转化实验、烟草花叶病毒感染和重建实验下列叙述错误的是()A. 用\ ^32P标记的T2噬菌体感染不具放射性的细菌少量子代噬菌体会含有\ ^32PB. 加热杀死的S型菌和活的R型菌混合注入小鼠体内会引起小鼠败血症C. S型菌的DNA用DNA酶处理后能使活的R型菌转化成S型菌D. 用烟草花叶病毒的RNA感染烟草烟草中会有子代病毒【答案】C【解析】解 A. ^32P标记的是噬菌体的DNA 噬菌体侵染细菌实验中只有DNA进入细菌并作为模板控制子代噬菌体的合成而合成子代噬菌体所需的原料均来自细菌根据DNA半保留复制特点用 ^32P标记的噬菌体侵染细菌后的子代噬菌体中只有少数具有放射性 A正确B.把加热杀死的S型菌和活的R型菌混合后注射到小鼠体内 S型菌体内的转化因子(DNA)能使R型菌转化为S型菌因此会引起小鼠败血症而死亡 B正确C.S型菌的DNA经DNA酶处理后失去其功能不能使活的R型菌转化成S型菌 C错误D.用烟草花叶病毒的RNA感染烟草由于RNA是烟草花叶病毒的遗传物质故烟草中会有子代病毒 D正确故选 C8.下列关于DNA的有关叙述正确的是()A. 碱基互补配对原则是DNA精确复制的保障之一B. DNA分子中每一个五碳糖都连接两个磷酸基团C. 双链DNA内侧是脱氧核糖和磷酸交替连接而成的骨架D. DNA分子的特异性是指脱氧核苷酸序列的千变万化【答案】A【解析】下列关于DNA的有关叙述正确的是 - 高中生物 - 菁优网解 A.碱基互补配对原则是DNA精确复制的保障之一 A正确B.DNA中大多数脱氧核糖都与两个磷酸相连只有每条链末端的脱氧核糖连接一个磷酸B错误C.双链DNA外侧是脱氧核糖和磷酸交替连接而成的骨架 C错误D.DNA分子的特异性是指碱基特定的排列序列 D错误故选 A9.下列叙述不能说明核酸是遗传物质的是()A. \T_2噬菌体的DNA进入大肠杆菌细胞后能合成\T_2噬菌体的外壳蛋白B. 外源DNA导入受体细胞后并整合到染色体上随受体细胞稳定遗传C. 烟草花叶病毒的RNA与霍氏车前病毒的蛋白质重建而成的新病毒能感染烟草并增殖出完整的烟草花叶病毒D. 肺炎双球菌的转化实验中加热杀死的S型菌和活的R型菌混合后注射到小鼠体内最终能分离出活的S型菌【答案】D【解析】A. T_2噬菌体的DNA进入大肠杆菌细胞后能复制并指导合成噬菌体的外壳蛋白说明DNA是遗传物质能指导蛋白质合成 A正确B.通过基因工程将外源DNA导入受体细胞后并整合到染色体上随受体细胞稳定遗传从而证明核酸是遗传物质 B正确C.由于新病毒的遗传物质是烟草花叶病毒的RNA 故感染后增殖出新的病毒为烟草花叶病毒 C正确D.以肺炎双球菌为实验材料进行的体内转化实验只能证明加热杀死的S型细菌中含有某种转化因子使R型细菌转化为S型细菌但不能证明该转化因子是什么 D错误故选D10.下列关于DNA分子的叙述错误的是()A. 双链DNA分子含有两个游离的磷酸基团B. DNA分子中每个脱氧核糖上连接两个磷酸基团和一个碱基C. 若一个DNA片段的两个胞嘧啶分子转变为羟化胞嘧啶(可与腺嘌呤配对)则其复制后的子代DNA分子中G-C碱基对所占比值会下降D. 某DNA分子中有m对碱基、a个腺嘌呤第n次复制时需要游离的胞嘧啶是\2^n-1( \m -a)个【答案】B【解析】解 A.双链DNA分子含有两个游离的磷酸基团分别位于DNA分子的两端 A正确B.每条脱氧核苷酸链末端的脱氧核糖只连接了一个磷酸基团和一个碱基 B错误C.若一个DNA片段的两个胞嘧啶分子转变为羟化胞嘧啶(可与腺嘌呤配对)则其复制后的子代DNA分子中G−C碱基对所占比值会下降 C正确D.某DNA分子中有m对碱基、a个腺嘌呤则胞嘧啶有m−a个第n次复制时需要游离的胞嘧啶是2^n-1( m -a)个 D正确故选 B二、多选题(本大题共计5小题每题3分共计15分)11.如图表示真核细胞内基因表达过程中的相关物质间的关系下列叙述正确的是()A. 物质a上含有决定氨基酸的密码子B. 组成物质a、b、c、d的基本单位共有8种C. 过程①的产物中有些具有生物催化作用D. 过程②的场所是核糖体该过程中有水生成【答案】B, C, D【解析】12.如图为DNA分子部分结构示意图对该图的正确描述是()A. ①和②相间排列构成了DNA分子的基本骨架B. ④的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸C. ⑤、⑥、⑦、⑧对应的碱基依次为A、G、C、TD. ⑨表示两个氢键两条链之间键数越多DNA分子越稳定【答案】A, C, D【解析】解分析题图该图是DNA分子的平面结构图其中①是磷酸②是脱氧核糖③是胞嘧啶碱基⑤是腺嘌呤碱基⑥是鸟嘌呤碱基⑦是胞嘧啶碱基⑧是胸腺嘧啶碱基⑨是氢键由题图可知 DNA分子是由2条反向平行的脱氧核苷酸链组成的磷酸和脱氧核糖交替连接构成基本骨架排列在外侧碱基排列在内侧两条链上的碱基由氢键连接形成碱基对遵循A、T配对 G、C配对的碱基互补配对原则A.由题图可知①磷酸和②脱氧核糖相间排列构成了DNA分子的基本骨架 A正确B.①磷酸是胸腺嘧啶脱氧核苷酸的磷酸因此④不是一个脱氧核苷酸 B错误C.由分析可知⑤、⑥、⑦、⑧对应的碱基依次为A、G、C、T C正确D.由题图可知 A、T之间的氢键是2个 G、C之间的氢键是3个两条链之间键数越多DNA分子越稳定 D正确故选 ACD13.胆固醇是人体不可缺少的营养物质也是细胞膜组成成分之一正常情况下细胞中的胆固醇可以自身合成或从血浆运输而来而血浆中胆固醇的含量受LDL(一种胆固醇含量为45%的脂蛋白)的影响据图分析下列说法错误的是()A. ①过程与DNA复制过程相比特有的碱基互补配其对方式是A﹣UB. 参与②过程的RNA有3种C. 图中基因指导LDL受体的合成体现了基因对性状的间接控制D. 图中LDL进入细胞的方式经过了载体蛋白的协助消耗了能量【答案】C, D【解析】A、①为转录过程、T﹣A、G﹣C、T﹣A、G﹣C 特有的碱基互补配其对方式是A﹣UB、②为翻译过程即mRNA(作为翻译的模板)、rRNA(组成核糖体的成分 B正确C、图中基因指导LDL受体的合成体现了基因对性状的直接控制 C错误D、LDL是一种胆固醇含量为45%的脂蛋白不需要载体蛋白的协助 D错误14.菊花是一种双子叶植物易感桃蚜桃蚜不但直接影响植物生长还是多种植物病毒的传播媒介雪花莲凝集素基因GNA的表达产物能有效抑制桃蚜生长某科研团队运用农杆菌转化法获得了转GNA基因菊花下列有关叙述正确的是()A. 受体细胞可以选择菊花叶片细胞或桃蚜细胞B. 将目的基因GNA插入到Ti质粒的T﹣DNA上构建表达载体C. 菊花外植体产生的酚类化合物能吸引农杆菌移向受体细胞D. 应用抗虫接种实验检测转基因菊花对桃蚜的抗性及抗性的程度【答案】B, C, D【解析】15.氧气感应机制使细胞能够调节新陈代谢以适应低氧水平细胞中低氧调节基因表达调控的机理如图所示下列相关分析正确的是()A. 低氧调节基因转录受H蛋白和A蛋白复合物调控B. 氧含量正常时进入细胞核中的H蛋白量较少C. V蛋白功能丧失会导致低氧调节基因表达降低D. H蛋白的氧依赖性降解从分子水平调控了基因表达【答案】A, B, D【解析】A、由题图分析可知低氧调节基因转录受H蛋白和A蛋白复合物调控 A正确B、氧含量正常时大部分H蛋白被降解进入细胞核中的H蛋白量较少 B正确C、V蛋白功能丧失会导致H蛋白不易被降解从而使H蛋白进入细胞核与A蛋白结合启动低氧基因的表达 C错误D、由图示可知 H蛋白在不同氧环境条件下的降解量从分子水平上调控了基因表达 D 正确故选ABD.三、解答题(本大题共计5小题每题10分共计50分)16.(1)在利用基因工程大规模生产胰岛素时将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达以上过程除了证明质粒可以作为载体外还证明了________、________等16.(2)构建基因表达载体时常用的工具酶是________ 他们作用的化学键是________ 基因工程中不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌其原因是________16.(3)检测胰岛素合成基因是否导入受体菌时常用________作探针16.(4)胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时遗传信息的传递方向是________ 经检测胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性导致这种差异的原因可能是表达产物未经________的加工【答案】体外重组的质粒可以进入大肠杆菌, 真核外源基因可以在原核细胞中表达等【解析】利用基因工程大规模生产胰岛素时将胰岛素合成基因与质粒重组后导入大肠杆菌进行了表达以上过程除了证明质粒可以作为载体外还证明了体外重组的质粒可以进入大肠杆菌真核外源基因可以在原核细胞中表达等【答案】DNA连接酶和限制性核酸内切酶, 磷酸二酯键, 胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达【解析】构建基因表达载体时常用的工具酶是DNA连接酶和限制性核酸内切酶它们作用的化学键是磷酸二酯键基因工程中不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌其原因是胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达必须构建基因表达载体【答案】(放射性物质标记的)胰岛素合成基因(的一条链)【解析】检测胰岛素合成基因是否导入受体菌时常用探针检测而检测胰岛素合成基因的探针是含有放射性物质标记的胰岛素合成基因的一条链【答案】DNA→(m)RNA→蛋白质, 内质网、高尔基体【解析】胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时遗传信息的传递方向是DNA→RNA→蛋白质经检测胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性导致这种差异的原因可能是表达产物未经内质网、高尔基体的加工所致17.(1)实验方案如下第一步从S型细菌中提取出DNA 同时制备符合要求的培养基并将盛有等量培养基的培养装置分别标号A、B、C第二步_______________________________________________________________________第三步_______________________________________________________________________第四步________________________________________________________________________ 17.(2)请预测实验结果并得出合理结论___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ _________________________________________________________________17.(3)通过本实验还能得出的新结论___________________________________________________________________________ _________________________________________________________【答案】(1)第二步 A中不加任何提取物 B中加入提取的S型细菌的DNA C中加入提取的S型细菌的DNA和DNA酶(顺序可变) , 第三步在三组培养基上分别接种等量的R型细菌 , 第四步将接种后的培养装置放在适宜温度下培养一段时间后观察菌落生长情况【解析】解(1)欲证明促使R型细菌转化的物质是DNA 可用DNA酶将S型细菌的DNA破坏看其是否还能使R型细菌转化为S型细菌解答时要考虑以下几个方面①设置对照实验在实验组中加入提取的S型细菌的DNA 在对照组中一组中不加任何提取物另一组中加入提取的S型细菌的DNA和DNA酶②单一变量的控制即只有是否加入S型细菌的DNA这一个实验变量其余的变量(如接种的细菌种类、数量以及培养条件等)应相同【答案】(2)结果预测 A中只有R型细菌菌落 B中出现R型细菌和S型细菌两种菌落C中只有R型细菌菌落结论 S型细菌的DNA可以使R型细菌转化为S型细菌【解析】(2)结果预测 A中只有R型细菌菌落 B中出现R型细菌和S型细菌两种菌落C中只有R型细菌菌落结论 S型细菌的DNA可以使R型细菌转化为S型细菌【答案】(3)DNA只有在结构保持完整、未被破坏的前提下才具有促使R型细菌转化为S型细菌的功能【解析】(3)根据本实验还可得出DNA只有在结构保持完整、未被破坏的前提下才具有促使R型细菌转化为S型细菌的功能这一结论18.(1)实验中①出应为______________(填 ^35S或 ^32P)②处应为________________(填 ^35S或 ^32P)18.(2)实验中搅拌的目的是_____________________ 若搅拌不充分会导致A组的结果中出现_________________________现象18.(3)在B组实验中保温时间和上清液放射性强度的关系为_____________18.(4)此实验与艾弗里的实验有相同的设计思路它们最关键的实验设计思路是________________________________________【答案】(1)\ ^35S, \ ^32P【解析】解(1) ^35S标记的是噬菌体的蛋白质 ^32P标记的是噬菌体的DNA 因此实验中①处应为^35S ②处应为 ^32P【答案】(2)使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离, 沉淀物出现较高放射性【解析】(2)实验中搅拌的目的是使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离若搅拌不充分没有将吸附在大肠杆菌处的 ^35S标记的噬菌体外壳与其完全分离会导致A组的结果中沉淀物出现较高的放射性现象【答案】(3)②【解析】(3)在B组实验中保温时间过短 DNA未注入大肠杆菌导致上清液放射性较强保温时间过长子代噬菌体释放也会导致上清液放射性较强保温时间和上清液放射性强度的关系为②【答案】(4)将DNA与蛋白质单独地、直接的分开直接地观察DNA或蛋白质的作用【解析】(4)此实验与艾弗里的实验有相同的设计思路它们最关键的实验设计思路是将DNA与蛋白质单独地、直接的分开直接地观察DNA或蛋白质的作用19.(1)完成①过程需要的酶有________ 这些酶通过________从细胞质进入细胞核②过程得到的mRNA先要在细胞核中进行加工后才用于翻译翻译时一条mRNA会与多个核糖体结合最后得到的多肽链上氨基酸序列________(填“相同”或“不相同”)19.(2)根据所学知识并结合本图推知该细胞中核糖体分布的场所有细胞质基质、________等19.(3)图中所示生理过程的完成需要遵循碱基互补配对原则的有________(填序号)用α﹣鹅膏蕈碱处理细胞后发现细胞质中的RNA含量显著减少由此推测α﹣鹅膏蕈碱抑制的过程最可能是________(填序号)19.(4)某遗传病由核基因和线粒体上的基因共同控制一对患病夫妇生下一个正常的儿子由此推知夫妇患病分别因为________异常【答案】解旋酶、DNA聚合酶, 核孔, 相同【解析】完成①DNA复制过程需要的酶有解旋酶、DNA聚合酶这些酶通过核孔从细胞质进入细胞核②转录过程得到的mRNA先要在细胞核中进行加工后才用于翻译翻译时一条mRNA会与多个核糖体结合最后得到的多肽链上氨基酸序列相同【答案】线粒体(或内质网)【解析】根据所学知识并结合本图推知该细胞中核糖体分布的场所有细胞质基质、线粒体(或内质网)等【答案】①②④⑥⑦⑧, ②【解析】图中所示生理过程的完成需要遵循碱基互补配对原则的有①②④⑥⑦⑧用α﹣鹅膏蕈碱处理细胞后发现细胞质中的RNA含量显著减少由此推测α﹣鹅膏蕈碱抑制的过程最可能是②细胞核中的转录过程【答案】线粒体基因、细胞核基因【解析】某遗传病由核基因和线粒体上的基因共同控制一对患病夫妇生下一个正常的儿子由此推知夫妇患病情况是男可能是线粒体基因异常或细胞核基因异常或二者都异常女一定是细胞核基因异常20.(1)据图分析如果选择性断开的位置是碱基G 那么随机出现的被标记片段应有________种在电泳带上被分离的显示位置应有________处在泳动方向最先端的片段应是________序列段20.(2)应用上述原理分析了某种未知序列核酸的一条单链结果如下图所示此结果说明该核酸的此单链含________个核苷酸同时也可推断出其碱基序列是________【答案】4, 4, TG【解析】分析电泳图后可以发现与选择性从A碱基处断开相同如果选择性断开的碱基是G 随机出现4种被标记片段分别为 TG TGCACTTG TGCACTTGAACG TGCACTTGAACGCATG.通过电泳应显示4处位置其中电泳方向最前端应是TG片段(TG 片段最短)在同样电泳条件下该片段应位于①下方的位置上【答案】18, AACGTAGGGTTACCCTGA【解析】通过电泳图中共显示有18处碱基位置即有18个核苷酸 A T G C=5 4 5 4 同时也可推断其碱基序列是AACGTAGGGTTACCCTGA。

陈俊辉生物化学解析习题电子版

陈俊辉生物化学解析习题电子版

第一章糖类化学一:填空题1.糖类是具有________________结构的一大类化合物。

根据其分子大小可分为________________、________________和________________三大类。

2.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。

3. 糖类物质的主要生物学作用为(1)________________(2)________________(3)________________。

4.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。

5.蔗糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。

6.麦芽糖是由两分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。

7.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。

8.糖原和支链淀粉结构上很相似,都由许多________________组成,它们之间通过________________和________________两种糖苷键相连。

两者在结构上的主要差别在于糖原分子比支链淀粉________________、________________和________________。

9.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。

10.多糖的构象大致可分为________________、________________、________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是________________。

精细化学品复习题 (2)(1)

精细化学品复习题 (2)(1)

精细化学品总复习第一章表面活性剂本章的考点涉及以下方面1、概念:表面活性剂、Cmc、HLB值、craft点(使表面活性剂的溶解度突然增大的温度点,称为克拉夫特点,也称为临界溶解温度)、浊点(将非离子型表面活性剂的溶液加热,达到某一温度时,透明溶液会突然变浑浊,这一温度点称为浊点)、润湿与分散作用2、表面活性剂性质与结构关系1)亲水基在分子中间者,比在末端润湿能力强,而亲水基在末端比在中间的去污能力强;2)有侧链的润湿、渗透效果好;3)对同一品种表面活性剂,当其HLB值相同时,分子量大,去污力、乳化及分散力好,分子量小则渗透力好。

3、了解span和tween结构4、简述十二烷基苯磺酸盐的制备工艺烷基苯磺酸盐制备工艺分为三个部分:烷基苯制备、烷基苯磺化、烷基苯磺酸中和。

A 烷基苯的制备其工艺过程:煤油加氢加氢煤油分子筛脱蜡正构烷烃脱氢烯烃苯烷基化烷基苯B烷基苯磺化:SO3磺化法C烷基苯磺酸中和5、了解咪唑啉型表面活性剂合成其合成方法为:复习题一、选择与填空1)下列物质加入很少量就能够显著降低水溶液表面张力的是(B )A 醋酸钠B葵酸钠 C 丁醇 D 硫酸钠复习要点:表面活性剂定义2)下面有关表面活性剂cmc表述正确的是( D )A cmc就是指表面活性剂的溶解度B cmc值大小取决于表面活性剂的分子结构,而与电解质无关C cmc值大小不仅仅取决于表面活性剂的分子结构,而且与电解质的浓度、种类有关D cmc是指表面活性剂在溶液中形成胶束的最低浓度复习要点:cmc定义与影响因素3)下列表面活性剂溶解度随温度升高而增大,并且当温度达到某一点时其溶解度急剧增大的是( C )A 烷基聚氧乙烯醚B span 60C 烷基聚氧乙烯醚硫酸钠D tween 61复习要点:表面活性剂溶解性质。

离子型表面活性剂溶解度随温度升高而增大,因为较高温度破坏离子键,促进溶解;非离子表面活性剂溶解度随温度升高而降低,因为较高温度破坏其与水形成的氢键。

金属硫蛋白的检测方法及其应用

金属硫蛋白的检测方法及其应用

金属硫蛋白的检测方法及其应用金属硫蛋白(Metallothionein)是一类富含半胱氨酸残基和金属的小分子蛋白质物质,简称MT,又叫金属硫氨酸甲基内盐。

主要存在于动物的肝脏、肾脏、胰腺和小肠中,因动物的不同,其分布和半衰期略有差异。

其研究和开发涉及农业、医药保健、生物工程、环境保护等各个领域。

1MT的一般性质根据与MT结合的金属种类、摩尔含量来分别命名,如Cd-MT、Cu-MT或Cd7-MT、Zn7-MT(表示每个分子中结合7个原子Cd或Zn)或Cd、Zn-MT这类形式。

也可用罗马数字和小写字母标出分子结构的差别,如人MT-Ⅰb、MT-Ⅱa等。

MT的三级结构由α结构域(羧基末端后30个氨基酸残基)和β结构域(氨基末端前30个氨基酸残基)构成,分子呈哑铃形。

每个区域有4个Cys巯基结合金属原子。

等电点PI一般在4左右。

分子量范围较大,为2 000~13 800Da,其中哺乳动物的MT分子量为6 000~7 000Da。

分子中不含芳香族氨基酸,没有280nm的吸收峰,与不同金属结合产生不同特征吸收峰,脱掉金属后,硫蛋白在190nm处有一明显的肽键吸收峰。

MT的金属具有动力学不稳定性,巯基具有亲核性,决定了MT 易与某些亲电物质特别是某些自由基相互作用,消除辐射形成的·OH 自由基。

MT具有抗应激作用,如动物注射糖皮质激素、干扰素、白细胞介素-Ⅰ后,肝脏中的MT合成增加;各种炎症因子及机体的应激状态(如寒冷、过度疲劳、饥饿等)都增加MTmRNA的转录。

并且MT可保护细胞抵抗重金属和烷化剂的致癌、致突作用。

重金属(Cd、Zn等)可使MT合成速率增加,可防止Zn和Cu、Hg中毒。

但MT 并不是对所有能诱导它合成的金属都具有解毒作用,如Ag、Au、Co 和Ni都能诱导MT的合成,却不对这些金属有解毒作用。

另外在细胞内,Cd-MT具有保护作用,但在细胞外,Cd-MT具有比Cd2+本身更大的肾细胞毒性。

沪教版生物学高三上学期试题与参考答案(2024-2025学年)

沪教版生物学高三上学期试题与参考答案(2024-2025学年)

2024-2025学年沪教版生物学高三上学期复习试题(答案在后面)一、单项选择题(本大题有12小题,每小题2分,共24分)1、以下关于细胞膜结构的描述,正确的是:A、细胞膜是由蛋白质和磷脂分子构成的均匀层B、细胞膜是细胞内部和外部环境的分隔层,但不具有选择透过性C、细胞膜上的蛋白质分子和磷脂分子是固定不变的D、细胞膜的主要功能是维持细胞形态,与物质交换无关2、下列关于DNA分子的描述,错误的是:A、DNA分子是由脱氧核苷酸单元连接而成的长链B、DNA分子的双螺旋结构是由两条反向平行的脱氧核苷酸链组成的C、DNA分子中的碱基配对遵循A与T、C与G的配对原则D、DNA分子的复制过程中,新合成的DNA链与模板链是互补的3、下列关于DNA分子结构的描述,正确的是:A、DNA分子由核苷酸链构成,核苷酸链是由磷酸和核糖组成的。

B、DNA分子由两条互补的核苷酸链组成,这两条链通过氢键连接。

C、DNA分子的结构特点是双螺旋,每条链的螺旋方向是顺时针。

D、DNA分子的复制过程中,DNA聚合酶负责连接新合成的核苷酸链。

4、下列关于细胞有丝分裂的描述,错误的是:A、有丝分裂是细胞分裂的一种形式,用于产生体细胞。

B、有丝分裂过程中,染色体会复制,形成姐妹染色单体。

C、有丝分裂的后期,染色体数目加倍。

D、有丝分裂过程中,细胞质分裂发生在有丝分裂的末期。

5、题干:以下哪种生物在生物圈中属于生产者?A. 青蛙B. 蘑菇C. 草原狼D. 草原6、题干:以下哪个过程属于生物的生殖过程?A. 细胞分裂B. 有丝分裂C. 减数分裂D. 无性生殖7、在下列关于基因突变的描述中,错误的是:A、基因突变可能导致生物性状的改变B、基因突变是自然界中普遍存在的现象C、基因突变通常具有低频性、少利多害性D、基因突变可以通过物理、化学和生物因素诱导8、下列关于DNA复制特点的描述中,不正确的是:A、DNA复制是半保留复制B、DNA复制需要模板、原料、能量和酶C、DNA复制过程中会产生复制叉D、DNA复制速度非常快,每秒可以复制数千个碱基对9、以下哪种生物属于真核生物?A. 病毒B. 水母C. 蓝藻D. 细菌 10、在细胞有丝分裂过程中,以下哪个阶段染色体数目加倍?A. 间期B. 前期C. 中期D. 后期11、在DNA分子中,碱基互补配对原则的实质是:A. 每个碱基都与其互补碱基形成氢键连接B. 碱基之间的氢键连接保证了DNA分子的稳定C. 碱基互补配对是DNA复制和转录的必要条件D. 碱基互补配对使得DNA具有双螺旋结构12、以下关于基因表达的说法,错误的是:A. 基因表达包括转录和翻译两个阶段B. 转录过程是以DNA的一条链为模板合成RNAC. 翻译过程是以mRNA为模板合成蛋白质D. 基因表达过程中,所有基因都会被转录和翻译二、多项选择题(本大题有4小题,每小题4分,共16分)1、以下关于生物膜结构的描述,正确的是:A、生物膜主要由蛋白质和磷脂构成B、生物膜具有流动性,蛋白质可以在膜上移动C、生物膜是细胞内所有膜结构的总称D、生物膜的存在有助于维持细胞的渗透平衡2、以下关于基因表达调控的描述,正确的是:A、基因表达调控发生在转录和翻译两个水平B、转录因子可以增强或抑制基因的表达C、表观遗传学研究发现,DNA甲基化可以影响基因表达D、基因表达调控是生物体适应环境变化的重要机制3、以下哪些生物过程属于细胞呼吸的范畴?()A、葡萄糖分解成丙酮酸和[H]B、丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]C、三羧酸循环D、氧化磷酸化E、光合作用4、以下哪些物质与DNA的结构和功能密切相关?()A、脱氧核糖B、磷酸C、碱基D、蛋白质E、核苷酸三、非选择题(本大题有5小题,每小题12分,共60分)第一题题目:以下关于生物膜系统的描述,正确的是:A. 生物膜系统只存在于真核生物细胞中B. 生物膜系统由细胞膜、细胞器膜和核膜组成C. 生物膜系统的功能包括物质运输、能量转换和信息传递D. 生物膜系统的存在与生物的遗传多样性无关第二题题目:以下是一种关于生物进化理论的描述,请根据所学知识判断其正确性,并简要说明理由。

2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册 第3章 第4节 蛋白质工程的原理和应用含答案

2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册 第3章 第4节 蛋白质工程的原理和应用含答案

2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册 第3章 第4节 蛋白质工程的原理和应用第4节 蛋白质工程的原理和应用[学习目标] 1.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。

2.简述蛋白质工程的基本原理。

1.蛋白质工程(1)基础:蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。

(2)手段:通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质。

(3)目的:获得满足人类生产和生活需求的蛋白质。

(4)困难:蛋白质发挥功能必须依赖正确的高级结构,而蛋白质的高级结构十分复杂。

2.蛋白质工程崛起的缘由(1)崛起缘由 ①基因工程的实质:将一种生物的基因转移到另一种生物体内,后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状。

②基因工程的不足:基因工程在原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。

③天然蛋白质的不足:天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。

(2)实例:提高玉米赖氨酸含量―→改造 天冬氨酸激酶(第352位为异亮氨酸)―→改造二氢吡啶二羧酸合成酶(第104位为异亮氨酸) 改造后玉米叶片和种子中游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍。

3.蛋白质工程的基本原理 (1)目标:根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造。

(2)方法:改造或合成基因。

(3)基本思路:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

4.蛋白质工程的应用(1)医药工业方面①科学家通过对胰岛素基因的改造,研发出速效胰岛素类似物产品。

改造②干扰素(半胱氨酸)――↓在一定条件下,可以延长保存时间③人-鼠嵌合抗体:降低免疫反应强度。

(2)其他工业方面用于改进酶的性能或开发新的工业用酶,如利用蛋白质工程获得枯草杆菌蛋白酶的突变体,筛选出符合工业化生产需求的突变体,提高该酶的使用价值。

(3)农业方面①科学家尝试改造某些参与调控光合作用的酶,以提高植物光合作用的效率,增加粮食的产量。

金属硫蛋白及其生物学功能

金属硫蛋白及其生物学功能

金属硫蛋白及其生物学功能金属硫蛋白,及其生物.学功能吴宗明,张彬,毕小艳(湖南农业大学动物科技学院,长沙410128)摘要:金属硫蛋白能够清除体内自由基,缓解动物应激,调控体内微量元素代谢及重金属解毒,调控机体,'发育.文章介绍了金属硫蛋白的理化性质,主要功能及其应用.'关键词:金属硫蛋白;动物应激;机体发育一中图分类号:Q513;Q959文献标志码:A文章编号:1001—0084(2010)04-0008-03 ,金属硫蛋白(Metall0thioneins,MTs)是一类低分子量,富含半胱氨酸的金属结合蛋白,与应激及应激性疾病关系密切,被认为是一种很有效的抗应激蛋白,其抗应激功能得到了很深入的研究….MTs的生物学功能主要有清除体内自由基,缓解动物应激,调控体内微量元素代谢及重金属解毒,调控机体发育等作用,在医学,农业科学以及食品科学等领域应用广泛.1金属硫蛋白概述1.1金属硫蛋白的理化性质MTs是一类富含半胱氨酸的低分子量金属结合蛋白,广泛存在于多种生物体内.MTs的氨基酸序列是很相似的,哺乳动物的MTs均含有61个氨基酸,其中38个相同,完全缺乏芳香族氨基酸和组氨酸,羧基末端都是丙氨酸,且所有这些MTs都有20个半胱氨酸.MTs家族包括I,Ⅱ,血,Ⅳ4种亚型,所有的脊椎动物体内都存在两种或更多的MTs亚型. MTs—I和MTs一11基因在大多数的组织中表达,而且能被包括金属离子和激素在内的不同化学物理条件协同诱导.MTs—III和MTs—IV基因只在特殊的组织中表达.MTs—IlI主要在大脑的神经细胞和星形细胞,脊索以及生殖系统的器官中表达.MTs一Ⅳ的表达仅限于特定分化的复层上皮细胞,舌和上收稿日期:2010—02—04基金项目:国家自然科学基金资助项目(30671516)作者简介:吴宗明(1984一),男,湖北咸丰人,硕士研究生,研究方向为特种经济动物营养与饲料.通讯作者:教授,博士生导师.8饲料博览'技术版2010年第4期消化道.1.2金属硫蛋白的诱导合成金属硫蛋白是一种内源性可诱导的蛋白质,能够被许多因素如重金属,激素等诱导合成.1.2.1金属诱导MTs合成许多金属能诱导MTs的合成.金属效应元件被认为是金属诱导MTs合成的起始DNA序列,具有金属诱导增强子功能,是转录调控蛋白的识别位点.机体内预先存在一种或多种金属效应转录因子,与诱导金属结合后发生变构效应进而与金属效应转录因子结合,对效应基因进行调控,促发MTs基因转录【1.重金属(镉,汞等)诱导能力较强,但是诱导产生的MTs与金属结合很牢固,不易被其他金属替换,所以生物学功能受限.锰依赖于IL一6诱导肝脏MTs合成,并且对肝脏无损伤.砷通过金属活性转录因子一I(MTsF—I)介导应激信号诱导MTs合成.Zn是目前应用最广的诱导金属,锌诱导生成的Zn—MTs能被多种金属置换,在重金属解毒方面起着重要作用,同时结合在MTs 中的zn还能够行使其他生物学功能,因此锌被认为最安全最有效的MTs诱导剂【71.黎云等发现锌源不同诱导效果也有差异,与硫酸锌相比,日粮中添加氨基酸锌显着提高了肝脏MTsmRNA基因表达水平(P<0.05)【引.1.2.2应激诱导MTs合成动物的应激可以诱导MTs合成.Beattie等研究发现,冷暴露可诱导大鼠棕色脂肪组织中MTs—I的合成,表明低温暴露大鼠肝脏,肾脏可诱导合成金属硫蛋白【.另外,应激反应还能诱导体内氧化物质的产生,通过免疫调节诱导金属硫蛋白大量合成.孙玉生等发现,哮喘豚鼠肝,心,.肾,肺组织及血浆中MTs含量显着增高,可能与哮喘豚鼠体内氧自由基引起的过氧化损伤有关,说明MTs含量增高可能也是机体对应激的一种代偿适应性保护反应口ol.同时大量研究发现,辐射,运动,创伤等也能诱导体内MTs的合成.Hidalgo等研究表明,在大鼠饥饿或口渴条件下肝脏和心脑等组织中的MTs含量也增加fl】】.李利根等报道大鼠烫伤后血清锌下降,肝脏锌增加,肝脏MTs合成增多[121. 1.2.3激素和其他因素诱导MTs合成激素和cAMP可诱导MTs的合成,其都能增加肝脏MTsmRNA水平,从而引起肝脏MTs合成的增加『l31.有机硒能够诱导体内大量合成MTs,硒很可能在诱导过程中部分取代了MTs分子中的硫原子,形成一种与Zn—MTs相似的新型Se—MTs[.皮质醇能增强细胞内锌吸收,并且由此依次刺激MTs的表达i51.此外辐射也能诱导MTs的合成,主要是通过氧化张力,细胞因子,信号传导诱导MTs合成和mRNA表达『】61.疾病能诱导MTs高表达,但某些病变也能抑制MTs表达.2金属硫蛋白主要生物学功能及其应用2.1清除体内自由基,缓解动物应激正常情况下体内自由基除了参与细胞内重要的化学反应过程外,还可损伤生物活性分子如蛋白质,DNA等,从而导致癌症,肝脏损伤,自身免疫性疾病以及衰老等症状.MTs中还原状态的巯基具有亲和性,其中的金属具有动力学不稳定性,巯基的亲和性使得MTs对一些自由基有相互作用.含不同金属的MTs清除自由基的能力不同,如zn—MTs清除羟自由基的能力比Cd—MTs强,主要是因为巯基含量不同而导致MTs活性差异.MTs含量丰富的细胞或组织,可以抵抗电离辐射或紫外线引起的细胞组织损伤,修复受损细胞【18】.2.2调节体内微量元素代谢及重金属解毒作用MTs具有很强的结合各种金属离子的能力,金属元素大多数是微量元素,所以MTs对体内微量元素也有调节作用.王佳垫等研究表明,小鼠摄食低锌饲粮使血浆MTs总量升高,肝脏,肾脏,小肠MTs总量下降,并且发现正常情况下小鼠血浆,肝脏,肾脏及小肠中MTs与zn,cu结合的比例不同,血浆MTs中Zn:Cu是1:3,肝脏和小肠MTs中Zn:Cu是3:1,说明MTs能调节对Cu和'Zn的吸收,维持代谢平衡【】91.非必需重金属元素和过量的必需重金属元素对动物的生长和发育都是有害的,金属硫蛋白对重金属离子的螯合作用是动物耐受重金属胁迫的一种特定反应机制.研究发现,给予动物重金属(Cd,Zn)或处理体外培养的细胞,可以增强MTs基因的转录,从而增加了MTs合成速率.若首先给予少量Cd,过一定时间后,再给予大剂量(致死量)的Cd,动物或其细胞表现出对cd中毒明显的颉颃作用. 丧失了MTs合成能力的哺乳动物细胞对cd中毒高度敏感.但MTs并不是对所有能诱导其合成的金属都有解毒作用如ACu和Ni都能诱导MTs的合成,但MTs并不对这些金属有解毒作用[2Ol. 2.3调控机体生长发育与细胞代谢Nishimura等率先报道了在胎鼠和新生鼠的肝细胞核中MTs含量高,随后逐渐降低,2周后MTs则主要集中在胞质中f2】】.Cherian等认为,细胞核中的高MTs含量与转录因子对zn的需求相关,核MTs可能起到保护细胞DNA和防止细胞凋亡的作用[221.许多研究表明,MTs表达量的升高能诱导细胞抗凋亡,而缺乏MTs表达的细胞对细胞凋亡敏感,其作用机制是通过阻止氧化性细胞损伤达到抑制细胞凋亡的作用,MTs含量较低的肝癌组织中凋亡细胞的数目也较多[231.王毅等研究发现,金属硫蛋白对急性化学性肝损伤有保护作用,通过抑制或激活相关酶活性,抑制自由基诱导的肝脏脂质过氧化损伤作用,提高机体清除氧自由基能力,维护细胞膜结构和功能的完整性.有研究发现,MTs的表达对离体供血心肌间质具有明显的保护作用,MTs对胃黏膜上由幽门螺杆菌引起的胃溃疡有重要保护作用,MTs抑制由高脂肪日粮引起的心肌收缩障碍[25-27].Mary等研究发现,其可在恶性肿瘤中有很高的表达量,可能与MTs参与机体抑制肿瘤细胞有关[281.3小结金属硫蛋白正成为当今生命科学的研究热点,应用于畜牧生产上,其具有增强机体应激反应能力,调节动物微量元素的代谢,重金属解毒等作用.但是很多关于MTs的研究都集中在实验室小动物,畜牧生产上普遍的动物试验需要得到关注.此外低成本的畜用MTs产品还有待开发,用以降2010年第4期饲料博览.技术版9低饲喂成本和提高养殖效率.[1]【2】[3】[4】[5】[6][7][8][9][1O]【11][12][13]【14]【15]【参考文献】DavisSR,CousinsRJ.Metallothioneinexpressioninanimals:Aphysiologicalperspectiveonfunction[j].TheJournalofNutri—tion.2000.130(5):l085一l088.张艳,杨传平.金属硫蛋白的研究进展【J1_分子植物育种, 2006,4(S1):73—78.谢红.重金属在金属硫蛋白基因表达中的调控作用[J】.国外医学卫生学分册,1999,26(3):151—155.ToriumiS,SaitoT,HosokawaT,eta1.Metalbindingabilityof metallothionein一3expressedinescherichiacoli[J].BasicClinc PharmacolToxicol,2005,96(4):295—301.KobayashiK,KurodaJ,ShibataN,eta1.Inductionofmetallo- thioneinbymanganeseiscompletelydependentoninterleukin一6 production[J].JournalofPharmacologyandExperimentalThera- peutics,2007,320(2):721-727.HeX.MaQ.InductionofmetallothioneinIbyarsenicviametal—activatedtranscriptionfactor1:criticalroleofc—terminalcysteine residuesinarsenicsensing[J].TheJournalofBiologicalChemis—try,2009,284(19):12609—12621.柴春彦,刘国艳,石发庆.铜缺乏对奶牛肝脏金属硫蛋白代谢影响[J].畜牧与兽医,2002,34(3):14—16.黎云,成廷水,呙于明.日粮锌源对肉仔鸡肝脏金属硫蛋白基因表达的影响[J].上海畜牧兽医通讯,2008(5):18—19. BeattieJH,BlackDJ,WoodAM,eta1.Coldinducedexpre—ssionofthematallothionein—Igeneinbrownadiposetissueofrats[J].AmJPhysio1.1996.270(5):971—977.孙玉生,李淑莲,张永雪,等.哮喘对豚鼠金属硫蛋白合成的影响[JJ.河南大学,2001,20(1):5—7.Hidalgoj,BorrasM,GarveyJS.Liver,brain,andheartmetal= lothioneininductionbystress[J1.JNeurochem,1990,55(2): 651—654.李利根,郭振荣,赵霖,等.锌对烫伤大鼠肝脏金属硫蛋白的影响[J1.中华整形烧伤外科杂志,1999,15(5):363—365. JacobST,GhoshalK,AheridanJF.Inductionofmetallothionein bystressanditsmolecularmechanisms【JJ.GeneExpress,1999,7:301—310.何冰,段姚尧,雍政.硒诱导金属硫蛋白的分离,纯化【JJ.武警医学院,2006,15(3):184—186.NicRBury,MiJaChung,ArminSturm,eta1.Cortisolstimulates10饲料博览.技术版2010年第4期thezincsignalingpathwayandexpressionofmetallothioneins andZnT1inrainbowtroutgillepithelialcells[J].AmJPhysiol,2008,294:623—629.[16]王建龙.金属硫蛋白在辐射照射中的诱导及防护作用[JJ_辐射研究与辐射工艺,2003,21(4):227—231.[17]JharnaD,SarmilaM,HubanK.Metallothioneinexpressionis suppressedinprimaryhumanhepatocellularcarcinomasandis mediatedthroughinactivationofCCAATenhancerbindingpro—teinbyph0.phatidlin0sit0l3-Kinasesignalingcascade[J].Can—CCFRes,2007,67●6):2:736—2746.[18]MoffattP,SeguinC.Expressionofthegeneencodingmetallo- thionein一3inorgansofthereproductivesystem[J].DNAandCell Biology,1998.17(6):501-510.[19]王佳垄,孙文志.金属硫蛋白对机体锌营养状况的反应IJ】.中国畜禽杂志,2005,41(8):23—26.[2O]刘安玲,朱必凤.金属硫蛋白的研究进展.韶关学院(自然科学版)【J1.2001,22(3):86—91.[21]NishimuraN,NishimuraH,TohyamaC.Localizationofmetal- lothioneininfemalereproductiveorgansofratandguineapig[J]. HistochemCytochem,1989,37(11):l601-1607.[22]CherianM,ApostolovaMD.Nuclearlocalizationofmetalloth—ioneinduringcellproliferationanddifferentiation[J】.CellMolBiol,2000,46(2):347—356.[23JGuang—WuWang,ZhanxiangZhou,JanB,eta1.Inhibitionofby—poxia/reoxygenation——inducedapoptosisinmetallothionein—-over——expressingcardiomyocytes[J】.HeartandCirculatoryPhysiology, 2001,280:2292-2299.【24]王毅,徐松柏,谷斌斌,等.金属硫蛋白对急性化学性肝损伤的保护作用研究[上海预防医学杂志,2008,20(11):528—530.[25]孙忠东,夏家红,宋玉娥,等.金属硫蛋白对离体心脏心肌问质的保护作用叨.中国心血管杂志,2004,9(5):316—318.[26]MasaharuM,MasahikoS,AkinoriS,eta1.Metallothioneinisa crucialprotectivefactoragainstHelicobacterpylori—induced gastricerosivelesionsinamousemodel[J].AmJPhysiol,2008,294:877—884.[27】FengD,QunL,NairS.Metallothioneinpreventshigh—fatdiet—inducedcardiaccontractiledysfunction:roleofperoxisomepm—liferator-activatedreceptorcoactivatorrcoactivatorlaandmito——chondrialbiogenesis[J].Diabetes,2007,56(9):2201-2212.[28】MaryAS,SeemaS,ScottH,eta1.Metallothioneinisoform3 overexpressionisassociatedwithbreadcancerhavingapoorprognosis[J].AmericanJournalofPathology,2001,159:21—26.。

金属硫蛋白的研究现状及进展

金属硫蛋白的研究现状及进展

摘要:金属硫蛋白是一类存在于生物中低分子量,富含半胱氨酸、不含芳香氨基酸的金属结合蛋白质。

对金属硫蛋白的结构、4种类型,以及其重金属解毒、清除自由基、氧化应激等功能和开发利用进行了简要概述,对金属硫蛋白在各种疾病方面的研究进行介绍,同时对金属硫蛋白的开发利用进行了展望。

关键词:金属硫蛋白;氧化应激;重金属解毒;疾病;开发利用中图分类号:Q51文献标志码:A doi:10.16693/ki.1671-9646(X).2019.09.018(1.College of Life Sciences,South-central University for Nationalities,Wuhan,Hubei430074,China;2.Institute of Food and Nutrition Development,Ministry of Agriculture,Beijing100081,China)Metalllothionein is a kind of metal-bound protein with low molecular weight,rich in cysteine and no aromatic amino acids.In this paper,the structure,four types of metallothionein,its functions of heavy metal detoxification,free radical scavenging,oxidative stress and its development and utilization were briefly reviewed.The research of metallothionein in vari-ous diseases was emphatically introduced.Finally,the developmen and utilization of metallothionein were prospected.metallothionein;oxidativestress;heavymetaldetoxification;diseases;development and utilization0引言金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类存在于动植物及微生物中低分子量,富含半胱氨酸、不含芳香氨基酸的金属结合蛋白质[1]。

生化答案浓缩

生化答案浓缩

活性肽:是一类分子量小于6000,在构象上较松散,具有多种生物功能的小肽。

分子伴侣:细胞核内能与组蛋白结合并能介导核小体有序组装的核质素称为分子伴侣。

蛋白质组学:阐明生物体各种生物基因组在细胞中表达的全部蛋白质的表达模式及功能模式的学科。

包括鉴定蛋白质的表达、存在方式、结构、功能和相互作用等。

分子识别:是指蛋白质与蛋白质、核酸、脂等分子之间特异性的辨认,对机体完成许多过程至关重要,如抗原--抗体、酶--底物的特异结合、基因表达的调控等。

增强子: 增强基因启动子工作效率的顺式作用序列,能够在相对于启动子的任何方向和任何位置(上游或下游)上都发挥作用。

顺式作用元件:对基因表达有调节活性的DNA 序列,其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因,通常不编码蛋白质,多位于基因旁侧或内含子中。

反式作用因子:通过扩散自身表达产物(酶、调节蛋白)控制其他基因的表达,其编码基因与其识别或结合的靶序列不在同一个DNA 分子上。

基因表达:储存遗传信息的基因,在一定调节机制控制下,经过转录、翻译,产生有生物活性的蛋白质或成熟的rRNA和tRNA的过程。

C 值:一个单倍体基因组的DNA含量总是恒定的,通常称为该物种DNA的C值。

转录因子:转录起始过程中,RNA聚合酶所需要的辅助因子,是参与正调控的反式作用因子。

操纵子:是基因表达的协调单位,由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。

操纵基因受调节基因产物的控制。

分子营养学:分子营养学主要是研究营养素与基因之间的相互作用。

一方面研究营养素对基因表达的调控作用;另一方面研究遗传因素对营养素消化、吸收、分布、代谢和排泄的决定作用。

层析技术:当待分离的混合物通过固定相时,由于各组份的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量对比)不同,导致移动速度不同,从而达到将各组分分离的目的。

离子交换层析:利用化学键键合在固定相(离子交换剂)表面具有交换能力的离子基团与流动相待分离组分的离子可逆结合能力的差异进行分离的方法。

大学细胞生物学考试(习题卷16)

大学细胞生物学考试(习题卷16)

大学细胞生物学考试(习题卷16)第1部分:单项选择题,共88题,每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。

1.[单选题]rDNA基因是()A)单拷贝基因B)多拷贝基因C)中度重复序列D)高度重复序列答案:B解析:2.[单选题]结构较稳定的细胞骨架是( )A)微管B)微丝C)中间纤维D)微梁网络答案:C解析:3.[单选题]冷冻蚀刻技术是( )样品制备的一种方法。

A)普通光镜B)透射电镜C)暗视野显微镜D)相差显微镜答案:B解析:4.[单选题]下列哪个部位组装到染色体中导致 rRNA 合成停止,核仁逐渐分解最终消失( )A)核仁组织中心B)微管组织中心C)组蛋白D)核糖体答案:A解析:5.[单选题]膜蛋白高度糖基化的细胞器是( )A)过氧化物酶体B)高尔基复合体C)线粒体D)溶酶体答案:D解析:6.[单选题]由单一类型的细胞所组成的细胞系称为( )D)转化性细胞系答案:A解析:7.[单选题]红细胞中的血影蛋白是一种 ( )A)跨膜蛋白B)膜周边蛋白C)脂锚定蛋白D)以上都不是答案:B解析:8.[单选题]下列信号分子中,( )作为细胞内信号传递的信使是近年来生命科学领域的一个重要成就。

A)NOB)乙酰胆碱C)表皮生长因子D)雌二醇答案:A解析:9.[单选题]Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法,常用于细胞内( )A)蛋白质的分布与定位B)脂肪的分布与定位C)DNA的分布与定位D)RNA的分布与定位答案:C解析:10.[单选题]双向电泳利用了蛋白质的分子大小和( )特性,具有很高的分辨率。

A)种属B)电荷C)组织分布D)免疫答案:B解析:11.[单选题]线粒体中的氧化磷酸化发生在( )。

A)内膜B)外膜C)基质D)膜间隙答案:A解析:线粒体的电子传递链和ATP合成酶都位于内膜上。

12.[单选题]卫星DNA在S期的哪一阶段复制A)S期的早期B)S期的中期C)S期的晚期13.[单选题]为了描述方便有丝分裂常被分为( )个时期A)3B)4C)5D)6答案:D解析:14.[单选题]下列哪类细胞具有分化能力?( )[南京师范大学2008研]A)肝细胞B)肾细胞C)胚胎细胞D)神经细胞答案:C解析:AB两项,肝细胞、肾细胞都属于G0期细胞,丧失分化能力。

微生物的重金属代谢研究进展

微生物的重金属代谢研究进展

微生物的重金属代谢研究进展*潘园园 陈雯莉 黄巧云**(华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 武汉 430070)摘要:本文综述了微生物抗重金属机制、与重金属代谢有关的运输蛋白家族和抗性基因的功能鉴定等方面的研究进展。

同时也对今后的研究进行了展望。

关键词:微生物 重金属 抗性基因 代谢重金属指具有d轨道电子的过渡族金属元素,另外,通常也将As、Se等非金属(metalloids)划分到重金属的范畴加以讨论。

自然界存在的90种元素中,有53种是重金属,由于它们大多数属于过渡元素,因此它们的电子排列方式不仅决定了它们可以形成复合物,而且在固氮、水净化、碳碳键的重排、基因转录、细胞的发育调控等复杂的生化反应中起着重要的作用。

然而,在更多情况下它们却担当着负面效应的角色,重金属在浓度很高的情况下会在细胞内累积形成非特异性的复合物而引起细胞中毒,某些金属离子例如Hg2+、Cd2+、Ag2+有很高的毒性,它们能够替代细胞内有功能的金属离子,结合于重要的呼吸蛋白上,导致蛋白质和DNA变性。

另外,重金属也是土壤及有关环境中最常见的污染物,它们通过多种途径进入土壤并在其中累积,不断退化土壤肥力,降低作物产量与品质,同时恶化水体环境,并通过食物链危及人类的生命和健康。

因此,重金属污染土壤的改良和修复,已成为当今农业可持续发展和环境质量改善中多学科研究的难点和热点。

本文拟从微生物抗重金属的机制、与重金属代谢有关的运输蛋白家族和抗性基因功能的鉴定等方面进行综述,同时也对这一领域以后的研究工作进行了展望。

1微生物抗重金属的机制1.1细胞表面吸附细菌表面载负电荷,并存在多种极性官能团,可通过静电吸附和各种官能团的络合作用固定重金属离子。

微生物吸附重金属的机理十分复杂,研究表明它们对金属的作用可分为微生物吸着(Microorganisms biosorption)和微生物累积(Microorganisms bioaccumulation)两个不同的生物化学阶段。

微生物处理重金属污染

微生物处理重金属污染

微生物处理重金属污染摘要:重金属污染的修复是目前研究的热点之一,其中生物治理技术尤其得到了广泛关注。

利用菌类微生物的表面结构特性及其生化代谢作用,通过生物化学法、生物絮凝法等将重金属元素分离或降低其毒性,可达到治理污染的目的。

基因工程技术在这一领域的应用,加强了菌类和微藻的吸附、代谢、絮凝功能,提高了重金属污染的处理能力。

固定化技术的应用提高了治理重金属污染的效率及稳定性,有力地推动了重金属微生物治理技术的发展。

文章综述了近年来国内外在利用微生物及植物技术治理重金属污染方面的研究进展,并对其发展方向进行了展望。

关键词:重金属;微生物;研究现状;应用前景Review on Microbiological for Heavy MetalPollutionLI Dong-xiaoAbstract:Development in the treatment of heavy metal pollution at home and abroad by means of microbiological techniques were summarized,and present studies and application prospects of Biological chemical method,Biological flocculation method. the application of gene engineering technique and immobilized microorganism technique to heavy metal pollution treatment were introduced. The prospects of development of treatment technology for heavy metal pollution were also discussed.Key words:heavy metal pollution;microorganism;status; review1.前言由于工业的发展,重金属的使用越来越广泛,伴随而来的重金属污染问题也日趋严重。

2023-2024学年高中生物沪科版高中第二册第6章 遗传信息的传递和表达单元测试(含答案解析)

2023-2024学年高中生物沪科版高中第二册第6章 遗传信息的传递和表达单元测试(含答案解析)

2023-2024学年沪科版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2.请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题(本大题共计12小题每题3分共计36分)1.研究表明真核生物细胞核基因在RNA聚合酶Ⅱ催化下转录成前体RNA 前体RNA的特定碱基序列被剪接体(一种核糖核酸蛋白质复合物)剪切后拼接成不同的成熟mRNA mRNA进入细胞质中并进行翻译下列相关叙述错误的是()A. 核DNA的起始密码子控制着基因的转录过程B. RNA聚合酶Ⅱ不能剪切前体RNA 体现了酶的专—性C. 在前体RNA的剪切过程中剪接体可能起催化作用D. 细胞核中的一种核基因可能会编码多种蛋白质【答案】A【解析】解 A.DNA转录的起点是启动子起始密码子在mRNA上 A错误B.RNA聚合酶Ⅱ能催化前体RNA的合成不能剪切前体RNA为成熟RNA 体现了酶的专一性 B正确C.剪接体是一种核糖核酸蛋白质复合物其中的核糖核酸可能参与了前体RNA的剪切可能具有催化功能 C正确D.一种核基因转录成一种前体RNA 前体RNA经剪切后可拼接成多种成熟mRNA 这些成熟mRNA可翻译成多种蛋白质 D正确故选 A2.如图为中心法则图解有关分析错误的是()A. e过程需要4种游离的脱氧核苷酸作为原料B. c过程需要tRNA和核糖体同时参与C. d过程为逆转录需要逆转录酶的参与D. 在线粒体中可以发生a、b、c过程【答案】A【解析】 A 、e过程是RNA的自我复制过程需要4种游离的核糖核苷酸作为原料 A错误B、c过程是翻译过程 mRNA是翻译过程的模板核糖体是翻译过程的场所因此需要mRNA和核糖体同时参与 B正确C 、d过程是以RNA为模板合成DNA的逆转录过程需要逆转录酶的参与 C正确D、线粒体内含有少量的DNA和核糖体可以发生aDNA的复制、b转录和c翻译过程 D 正确3.下列操作可以达到目的选项是()A. \AB. BC. \CD. D【答案】D【解析】 A 、在DNA粗提取实验中鸡血中加入蒸馏水目的是使血细胞吸水涨破 A错误B、洋葱根尖解离后漂洗的目的是洗去附着在根尖上的解离液 B错误C 、色素提取时加入碳酸钙是中和液泡中的酸保护色素 C错误D、新型农业生态系统的建立实现对能量的多级利用提高能量利用率 D正确4.下列有关“碱基互补配对”的说法正确的是()A. 碱基之间通过形成磷酸二酯键而发生互补配对B. 单链RNA分子中部分碱基之间也可能发生互补配对C. 转录过程中密码子和反密码子的碱基会进行互补配对D. 原核细胞和真核细胞中碱基互补配对的方式不同【答案】B【解析】解 A.碱基之间通过形成氢键而发生互补配对 A项错误B.tRNA是单链RNA分子但是其中的部分碱基之间发生互补配对从而形成“三叶草”结构 B项正确C.密码子和反密码子之间的碱基互补配对发生在翻译过程中 C项错误D.原核细胞和真核细胞中碱基互补配对的方式是相同的 D项错误故选 B5.一个用 ^15N标记的细菌DNA分子含100个碱基对腺嘌呤有40个其中一条链上含胞嘧啶30个将它们放入含 ^14N的培养基上连续繁殖3代下列叙述错误的是()A. 只含\ ^15N、只含\ ^14N的两种DNA分子数之比是0:6B. 第3次复制需游离的胞嘧啶为160个C. 子代DNA分子两条链中的鸟嘌呤含量相等D. 子代DNA中嘌呤与嘧啶之比是1:1【答案】B【解析】解 A.DNA复制方式为半保留复制 3次复制结束后无只含 ^15N的DNA分子只含 ^14N的DNA分子数为8-2=6个 A正确B.根据题意原始的DNA分子中A有40个因所有碱基之和为200个则C=G=60个第三次复制结束得到 2^3=8个与原始DNA分子相同的DNA分子此时所含胞嘧啶之和为8×60=480个第三次复制的起点为第二次复制结束时同理可知此时所含胞嘧啶之和为4×60=240个故第3次复制需游离的胞嘧啶为480-240=240个 B错误C.因子代DNA分子与亲代DNA相同即G=60个其中一条链G=30个则另一条链G=60-30=30个 C正确D.因碱基互补配对原则所有双链DNA分子中的嘌呤数与嘧啶数相等 D正确故选 B6.下列有关DNA的分子结构及其发现过程的叙述正确的是()A. 沃森和克里克通过构建数学模型发现了DNA的双螺旋结构B. 脱氧核糖和磷酸交替连接构成了DNA分子的基本骨架C. 任何双链DNA分子都含有两个游离的磷酸基团D. DNA分子一条链上相邻的碱基之间通过氢键相连【答案】B【解析】解 A.沃森和克里克通过构建物理模型发现了DNA的双螺旋结构 A错误B.磷酸与脱氧核糖交替连接排在外侧构成DNA分子的基本骨架 B正确C.环状DNA分子中没有游离的磷酸基团 C错误D.两条脱氧核苷酸链上的碱基通过氢键连接成碱基对且碱基之间的配对遵循碱基互补配对原则 D错误故选 B7.“转基因动物”是指()A. 含有可利用基因的动物B. 基因组中插入外源基因的动物C. 本身具有抗体蛋白类的动物D. 能表达基因信息的动物【答案】B【解析】解转基因动物是指携带有外源基因并能表达和遗传的动物外源基因在其他生物体中原来就存在 B正确故选 B8.有关基因的叙述错误的是()A. 基因是有遗传效应的DNA片段B. 基因中碱基排列顺序代表遗传信息C. 染色体是基因的唯一载体D. 基因与性状并非都是一一对应关系【答案】C【解析】解 A、基因是有遗传效应的DNA片段 A正确B、基因中碱基排列顺序代表遗传信息 B正确C 、染色体是基因的主要载体少数基因分布在叶绿体和线粒体中 C错误D、基因与性状并非都是一一对应关系有些性状有多对基因控制 D正确.故选 C.9.CRISPR/Cas9基因编辑技术是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行准确切割的技术(如图)下列相关叙述的正确是()A. Cas9蛋白通过破坏氢键实现对特定基因的准确切割B. 向导RNA与DNA结合的双链区遵循碱基配对方式为A﹣T C﹣GC. 向导RNA可在逆转录酶催化下合成D. 通过设计向导RNA中的识别序列可实现对细胞内特定基因的敲除【答案】D【解析】A、Cas9蛋白通过破坏磷酸二酯键实现对特定基因的准确切割 A错误B、向导RNA与DNA结合的双链区遵循碱基配对方式为A﹣T、C﹣G、U﹣A、G﹣C B 错误C、向导RNA可通过转录形成该过程需要RNA聚合酶催化不需要逆转录酶 C错误D、通过设计向导RNA中的识别序列可实现对细胞内特定基因的敲除 D正确10.下列有关染色体、DNA、基因、脱氧核苷酸的说法不正确的是()A. 四种脱氧核苷酸的数目和排列顺序决定了基因的多样性和特异性B. 基因是具有遗传效应的DNA片段一个DNA 分子上可含有成百上千个基因C. 染色体由 DNA 和蛋白质组成一条染色体上含有1个或2个DNA分子D. 在DNA分子结构中与一个脱氧核糖直接相连的一般是一个磷酸基团和一个碱基【答案】D【解析】解故选 D11.下列关于“核酸是遗传物质的证据”的相关实验的叙述正确的是()A. \ T_2噬菌体侵染细菌实验中用\ ^32P标记的\ T_2噬菌体侵染细菌后的子代噬菌体多数具有放射性B. 肺炎双球菌活体细菌转化实验中 R型肺炎双球菌转化为S型菌是基因突变的结果C. 肺炎双球菌离体细菌转化实验中 S型菌的DNA使R型菌转化为S型菌说明DNA是遗传物质蛋白质不是遗传物质D. 烟草花叶病毒(TMV)感染和重建实验中用TMV A的RNA和TMV B的蛋白质重建的病毒感染烟草叶片细胞后可检测到A型病毒说明RNA是TMV A的遗传物质【答案】D【解析】解 A. T_2噬菌体侵染细菌实验中用 ^32P标记的 T_2噬菌体侵染细菌后 DNA 进行半保留复制子代噬菌体少数具有放射性 A错误B.肺炎双球菌活体细菌转化实验中 R型肺炎双球菌转化为S型菌是基因重组的结果 B 错误C.肺炎双球菌离体细菌转化实验中证明了DNA是遗传物质但不能证明蛋白质不是遗传物质 C错误D.烟草花叶病毒感染和重建实验中用TMV A的RNA和TMV B的蛋白质重建的病毒感染烟草叶片细胞后可检测到A型病毒说明RNA是TMV A的遗传物质 D正确故选 D12.某双链DNA分子中含有200个碱基一条链上A:T:G:C=1:2:3:4 则该DNA分子中()A. 四种含氮碱基A:T:G:C=3:3:7:7B. 连续复制两次需要游离的腺嘌呤脱氧核苷酸120个C. 碱基排列方式共有4^100种D. 含有4个游离的磷酸基【答案】A【解析】解 A.已知一条链上A:T:G:C=1:2:3:4 即 A_1: T_1: G_1: C_1=1:2:3:4 根据碱基互补配对原则可知 A_2: T_2: G_2: C_2=2:1:4:3 双链DNA分子中含有200个碱基则 A_1=T_2=10 T_1= A_2=20 G_1= C_2=30 C_1= G_2=40 即该DNA分子中A=T=30个 C=G=70个则DNA分子四种含氮碱基A:T:G:C=3:3:7:7 A正确B.连续复制两次需要游离的腺嘌呤脱氧核苷酸数目为( 2^2−1)×30=90个 B错误C.该DNA分子中碱基比例已经确定所以碱基排列方式小于4^100种 C错误D.该DNA分子含有2个游离的磷酸基 D错误故选 A二、多选题(本大题共计4小题每题3分共计12分)13.图中甲表示酵母丙氨酸tRNA的结构示意图乙和丙是甲相应部分的放大图其中I表示次黄嘌呤能够与A、U或C配对下列有关叙述正确的是()A. 图中tRNA的p端是结合氨基酸的部位B. 丙氨酸的密码子与反密码子是一一对应的C. 单链tRNA分子内部存在碱基互补配对D. 转录丙所示序列的双链DNA片段含有3个腺嘌呤【答案】C, D【解析】A、图中tRNA的3'-OH端是结合氨基酸的部位 A错误B、据题意丙氨酸的反密码子是IGC 则丙氨酸的密码子可能是ACG、UCG、CCG B错误C、单链tRNA分子内部存局部双链区双链区存在碱基互补配对 C正确D、转录时遵循碱基互补而配对原则转录丙的双链DNA片段为TGGACGAG/ACCTGCTC D 正确14.下列不属于非编码DNA的有(多选)()A. Xist RNAB. rRNA基因C. 转座子D. 短重复序列E. tRNA基因【答案】C【解析】解 DNA序列中专门转录成非编码RNA的部分称为RNA基因或是非编码RNA基因非编码RNA基因用来生产tRNA(转移RNA)与rRNA(核糖体RNA)以及一些小RNA 如snoRNAs、microRNAs、siRNAs与piRNAs 较大的则有Xist、Evf、Air、CTN与PINK等故选 C15.如图是某高等动物细胞内通过一系列酶将原料合成它所需要的氨基酸C 该氨基酸是细胞正常生活所必须的且不能从食物中获得.下列相关说法不正确的有()A. 图中①包含转录和翻译过程B. 若基因A不表达则基因B和基因C也不表达C. 除通过图中途径基因还可通过控制蛋白质的结构直接控制生物体的性状D. 基因型为AaBbCc的个体自交其后代中有dfrac12的个体能正常生活【答案】B, D【解析】 A 、图中①是基因控制蛋白质合成包含转录和翻译过程 A正确B、基因具有独立性基因B和基因C是否表达与基因A不表达无关 B错误C 、图示表示基因通过控制酶的合成控制细胞代谢进而间接控制生物的性状此外基因还可通过控制蛋白质的结构直接控制生物体的性状 C正确D、由于氨基酸C是细胞正常生活所必需的而食物中又没有所以基因型为AaBbCc的个体自交其后代中有\dfrac34 \times \dfrac34 \times \dfrac34 = \dfrac2764的个体(A_B_C_)能正常生活 D错误16.动物基因工程的一个重要应用是改善畜产品的品质其中为解决有些人对牛奶中乳糖不能完全消化甚至过敏等问题科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛的基因组获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低但其他营养成分不受影响下列相关叙述合理的是()A. 需要将肠乳糖酶基因和牛的乳腺蛋白基因启动子等组件重组在一起构建基因表达载体B. 为获得该转基因奶牛需选用受精卵作受体细胞一般采用基因枪法进行导入C. 该转基因牛的乳汁中其他成分不受影响的原因是肠乳糖酶基因只能催化乳糖水解D. 乳糖为动物特有的二糖其水解前后均能与斐林试剂在加热时发生反应产生砖红色沉淀【答案】A, D【解析】解 A.为使该转基因奶牛选择性地在乳腺细胞表达肠乳糖酶基因需要将肠乳糖酶基因和牛的乳腺蛋白基因启动子等组件重组在一起构建基因表达载体 A正确B.为获得该转基因奶牛需选用受精卵作受体细胞当向动物细胞导入目的基因时一般采用显微注射法 B错误C.该转基因牛的乳汁中其他成分不受影响的原因是肠乳糖酶具有特异性只能催化乳糖水解肠乳糖酶基因并没有催化能力 C错误D.乳糖为动物特有的二糖其水解后产物为葡萄糖和半乳糖乳糖、葡萄糖和半乳糖均为还原性糖均能与斐林试剂在加热时发生反应产生砖红色沉淀 D正确故选 AD三、解答题(本大题共计5小题每题10分共计50分)17.(1)一个被^32\textrmP标记的 T_2噬菌体侵染未被标记的细菌若共释放了n个子代噬菌体其中被^32\textrmP标记的噬菌体所占的比例为________17.(2)该实验中搅拌离心的目的是_______________________ 该同学的实验结果中上清液也含有少量的放射性可能的原因是在操作过程中_________________________________________17.(3)仅根据该组实验结果________(填“能”或“不能”)说明DNA是噬菌体的遗传物质原因是______________________________________【答案】(1)2/n【解析】解(1)噬菌体的遗传物质为DNA DNA为双链结构遵循半保留复制原则被^32\textrmP标记的DNA链为两条故释放n个子代噬菌体中被^32\textrmP标记的噬菌体所占的比例为2/n【答案】(2)使吸附在细菌表面的噬菌体及噬菌体的蛋白质外壳和细菌分离, 保温时间过长或过短【解析】(2)该实验中搅拌离心的目的是使吸附在细菌表面的噬菌体及噬菌体的蛋白质外壳和细菌分离该同学的实验结果中上清液也含有少量的放射性可能的原因是在操作过程中保温时间过长或过短保温时间过短噬菌体还来不及侵染保温时间过长大肠杆菌裂解后释放出子代噬菌体两者都使上清液中出现较强放射性【答案】(3)不能, 没有研究噬菌体侵染细菌时其蛋白质外壳是否进入细胞【解析】(3)仅根据该组实验结果不能说明DNA是噬菌体的遗传物质原因是没有研究噬菌体侵染细菌时其蛋白质外壳是否进入细胞18.(1)图1中利用PCR技术扩增拟南芥醛缩酶基因时应选用的引物是________ 图2重组质粒中未标注出的必需元件还有________ 构建该重组质粒用的限制性核酸内切酶有________18.(2)将拟南芥醛缩酶基因导入烟草叶绿体基因组时一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上通过轰击进入叶绿体中这种方法称为________ 叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区其原因是________ 18.(3)检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是________ 该项技术用到的基因探针的制作方法是在________上用放射性同位素等做标记18.(4)若拟南芥醛缩酶基因在烟草叶绿体中成功表达其活性是野生型烟草的1.4~1.9倍在高CO_2浓度下可达2.2倍说明拟南芥醛缩酶通过________来提高光合效率【答案】引物甲、引物丙, 复制原点, HindIII和BclI【解析】【答案】基因枪法, 避免对叶绿体自身的基因组的表达造成影响【解析】【答案】DNA分子杂交技术, 含有目的基因的DNA单链片段【解析】【答案】促进暗反应中CO_2的固定(利用)【解析】19.(1)在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验中采用的实验方法是_________________ ________(填“能”或“不能”)用 ^15N来标记噬菌体的 DNA 理由是________________________19.(2)若要大量制备用 ^35S标记的 T_2噬菌体需先用含 ^35S的培养基培养________ 再用 T_2噬菌体去侵染____________________19.(3)噬菌体DNA复制时由细菌提供的条件是__________________19.(4)用 ^35S标记的 T_2噬菌体侵染大肠杆菌时发现沉淀物中放射性也较高原因可能是______________________________________________19.(5)若用一个 ^32P标记的 T_2噬菌体去侵染未被标记的大肠杆菌此噬菌体复制3代后子代噬菌体中含有 ^32P的噬菌体的个数是________ 原因是_______________________________________________________【答案】(1)同位素标记法(同位素示踪法), 不能, 因为DNA和蛋白质中都含有N元素【解析】解(1)在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验中采用的实验方法是同位素标记法(同位素示踪法)上述实验中由于DNA和蛋白质中都含有N元素故不能用^15N来标记噬菌体的DNA【答案】(2)大肠杆菌, 被\ ^35S标记的大肠杆菌【解析】(2) T_2噬菌体是专门侵染大肠杆菌的病毒所以需要先用含 ^35S的培养基培养大肠杆菌再用 T_2噬菌体去侵染被 ^35S标记的大肠杆菌【答案】(3)原料、能量、酶【解析】(3)噬菌体侵染细菌时只有DNA进入细菌并作为模板控制子代噬菌体合成而DNA复制所需的原料、能量、酶等均由细菌提供【答案】(4)搅拌不充分少量含\ ^35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面没有分离【解析】(4) ^35S标记的是噬菌体的蛋白质外壳噬菌体侵染细菌时蛋白质外壳留在外面经搅拌离心后分布到上清液中因此上清液中具有较强的放射性若 ^35S标记的噬菌体侵染细菌时离心后的沉淀物中放射性也较高原因可能是搅拌不充分少量含 ^35S 的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面没有分离【答案】(5)2, 由于DNA分子是半保留复制所以若用一个\ ^32P标记的噬菌体去侵染未被放射性标记的大肠杆菌此噬菌体复制3代后子代噬菌体中含有\ ^32P的噬菌体的目数只有2个【解析】(5)由于DNA分子是半保留复制所以若用一个 ^32P标记的噬菌体去侵染未被放射性标记的大肠杆菌此噬菌体复制3代后子代噬菌体中含有 ^32P的噬菌体的目数只有2个20.(1)DNA分子的两条链按反向平行方式盘旋成_______________结构 DNA分子的基本骨架由_____________________交替连接而成20.(2)DNA分子复制时首先在____________酶的作用下把双链解开然后在____________酶的作用下以解开的两条链作为模板各自合成与模板互补的子链这种复制方式称为_____________复制【答案】(1)双螺旋, 脱氧核糖和磷酸(基团)【解析】解(1)DNA分子的两条链按反向平行方式盘旋成双螺旋结构 DNA分子的基本骨架由脱氧核糖和磷酸(基团)交替连接而成【答案】(2)解旋, DNA聚合, 半保留【解析】(2)DNA分子复制时首先在解旋酶的作用下把双链解开然后在DNA聚合酶的作用下以解开的两条链作为模板各自合成与模板互补的子链这种复制方式称为半保留复制21.亚硝酸盐使某细胞DNA上的碱基对C. D.突变为.当此DNA复制后形成的子代DNA中U被剔除并进行修复则其子代DNA在此位置上出现的碱基对为()A. B.【答案】BC【解析】由题意可知亚硝酸盐使某细胞DNA上的碱基对突变为说明有一个C突变为U.以DNA中正常链为模板复制后产生的子代DNA为以DNA中异常链为模板复制后产生的子代DNA为其U被剔除并进行修复后为。

[讲解]增色效应

[讲解]增色效应

增色效应:核酸(DNA和RNA)分子解链变性或断链,其紫外吸收值(一般在260nm处测量)增加的现象。

0启动子:DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域,在许多情况下,还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。

0中心法则:指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。

也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。

这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。

0锌指结构:指的是在很多蛋白中存在的一类具有指状结构的结构域,这些具有锌指结构的蛋白大多都是与基因表达的调控有关的功能蛋白。

0Km值:酶促反应速度达到最大反应速度一半时所对应的底物浓度,是酶的特征常数之一。

不同的酶Km值不同,同一种酶与不同底物反应Km值也不同,Km值可近似的反应酶与底物的亲和力大小:Km值大,表明亲和力小;Km值小,表明亲合力大。

米氏方程:V=Vmax[S]/Km+[S][S]表示底物浓度,Vmax表示最大酶促反应速度0别构效应:是寡聚蛋白与配基结合改变蛋白质的构象,导致蛋白质生物活性改变的现象.结构域:蛋白质或核酸分子中含有的、与特定功能相关的一些连续的或不连续的氨基酸或核苷酸残基。

0能荷:细胞内的能量状态取决于A TP、ADP及AMP的相对浓度。

贮存在腺苷酸体系的总能量与其中的焦磷酸基的数目成正比。

为便于定量表示其能量状态而提出能荷的概念,即单位腺苷酸中(包括AMP、ADP和A TP)所含焦磷酸基团总数的二分之一,其大小在0~1之间。

可根据细胞内AMP、ADP和A TP的实际浓度来计算。

0蛋白质三级结构:指一条多肽链在二级结构或者超二级结构甚至结构域的基础上,进一步盘绕,折叠,依靠共价键的维系固定所形成的特定空间结构成为蛋白质的三级结构。

0必需氨基酸:人体自身不能合成或合成速度不能满足人体需要,必须从食物中摄取的氨基酸。

0酶原激活(zymogen activation)。

2023-2024学年高中生物沪科版高中第二册第6章 遗传信息的传递和表达单元测试(含答案解析)

2023-2024学年高中生物沪科版高中第二册第6章 遗传信息的传递和表达单元测试(含答案解析)

2023-2024学年沪科版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2.请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题(本大题共计13小题每题3分共计39分)1.根据如图所示的基因表达过程有关说法正确的是()A. 甲状腺细胞和垂体细胞表达的产物不同两者所含的基因也不相同B. 过程1、过程3(含3-1、3-2)中发生碱基互补配对过程2中有磷酸二酯键的断裂和形成C. 启动子是转录的起点是核糖体识别和结合的起始位点D. 图中基因表达过程是在细胞核中完成的【答案】B【解析】A.甲状腺细胞和垂体细胞都是由同一个受精卵分裂和分化形成的分化前后细胞核中的遗传物质不变故两者所含的基因相同 A错误B.过程1表示转录过程3(含3-1、3-2)表示翻译两个过程中都发生碱基互补配对过程2表示对mRNA前体进行剪切和拼接该过程中发生磷酸二酯键的断裂和形成 B正确C.启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点 C错误D.基因表达包括转录和翻译转录在细胞核中完成翻译在核糖体上完成 D错误故选B2.下列是人类探索遗传奥秘的几个重要事件其中表述合理的是()A. 孟德尔通过豌豆杂交实验发现了基因B. 萨顿用实验证明了基因在染色体上C. 艾弗里用肺炎双球菌体外转化实验证明了DNA是遗传物质蛋白质不是遗传物质D. 许多科学家相继发现了逆转录和RNA复制过程从而推翻了传统的中心法则【答案】C【解析】 A 、孟德尔通过豌豆杂交实验提出遗传因子但没有发现基因 A错误B、萨顿利用类比推理法提出基因在染色体上的假说摩尔根用实验证明了基因在染色体上 B错误C 、艾弗里用肺炎双球菌体外转化实验证明了DNA是遗传物质蛋白质不是遗传物质 C 正确D、许多科学家相继发现了逆转录和RNA复制过程从而对传统的中心法则进行了补充和完善 D错误3.某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白这个事实说明()A. 蛋白质合成是在核糖体上进行的B. 各种生物共用一套遗传密码C. 兔子和大肠杆菌的基因发生了重组D. 兔子的基因发生了突变【答案】B【解析】解 A、题干信息只能说明血红蛋白合成但不能说明场所是在核糖体上进行故A错误B、根据题干信息“把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白” 说明不同生物中的蛋白质都是由20种氨基酸组成都是由一套遗传密码决定的因而有相同的密码子故B正确C 、将信使RNA导入大肠杆菌并没有导入血红蛋白基因则没有涉及基因工程故C错误D、基因突变是DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失而引起基因结构的改变而题干能表达出正常的血红蛋白说明基因不一定突变故D错误.故选 B.4.下列关于染色体、DNA、基因和遗传信息之间关系的叙述正确的是()A. 1条染色体中只含1个DNA分子B. 真核细胞中的基因都位于染色体上C. 1个DNA分子中含有许多基因D. 基因中脱氧核糖的排列顺序代表遗传信息【答案】C【解析】A、1条染色体中一般只含1个DNA分子染色体复制后每条染色体含有2个DNA分子 A错误B、真核细胞中的基因主要位于染色体上少数位于细胞质中 B错误C、基因是有遗传效应的DNA片段 1个DNA分子中含有许多基因 C正确D、基因中碱基对的排列顺序代表遗传信息 D错误5.下列关于艾弗里的肺炎双球菌转化实验以及赫尔希、蔡斯的噬菌体侵染细菌实验的对比分析中说法正确的是()A. 两个实验共同证明DNA是主要的遗传物质B. 两个实验基本上都能把DNA和蛋白质区分开C. 两个实验的实验材料在培养基上都易直接培养D. 他们在开始实验之前并不知道遗传物质的作用【答案】B【解析】A项两个实验都证明了DNA是遗传物质 A错误B项共同点是设法将DNA和蛋白质分开单独地、直接地去观察它们各自的作用 B正确C项噬菌体是病毒不能直接在培养基上培养必须寄生在活细胞中 C错误D项他们在开始实验之前就已经了解到遗传物质的作用但遗传物质是什么不太清楚 D 错误故选B6.如图表示真核细胞基因指导蛋白质合成过程中相关物质间的关系.下列叙述错误的是()A. 图中①表示基因是控制生物性状的基本功能单位B. 图中②表示转录该过程碱基配对方式中存在T-A配对C. 图中③表示翻译该过程离不开④D. 图中④中的密码子决定其携带的氨基酸的种类【答案】D【解析】解 A、图中①表示基因基因是控制生物性状的结构和功能的基本单位 A正确B、②表示转录过程该过程中碱基配对方式为A-U、T-A、C-G、C-G B正确C 、③表示翻译过程该过程离不开④tRNA识别mRNA上密码子并运载相应氨基酸的过程 C正确D、密码子在mRNA上而④是tRNA D错误.故选 D.7.下图为大麦种子萌发前后淀粉含量的变化情况下列分析正确的是()A. P点之后自由水/结合水的比值减小B. PQ段的形成原因可能是淀粉酶的含量增加C. Q点时植物开始进行光合作用D. 种子萌发是多种植物激素相互作用共同催化的结果【答案】B【解析】解 A.种子萌发过程中大量吸水细胞中自由水含量上升自由水/结合水的比值增大 A错误;B.PQ段淀粉水解加快原因可能是淀粉酶的含量增加 B正确C.从图中可以看出 Q点后淀粉的含量开始上升说明光合作用强度大于呼吸作用强度种子开始进行光合作用的点应在Q点前 C错误D.种子萌发是多种植物激素相互作用共同调节的结果激素没有催化作用 D错误故选 B8.将含有^31P的果蝇(2n=8)精原细胞置于含^32P的培养基中培养进行一次有丝分裂后将其中一个细胞置于含^31P的培养液中继续进行减数分裂则在减数第二次分裂后期被^32P标记的染色体数目为()A. 1B. 2C. 3D. 4【答案】D【解析】将含\sqrt3P的果蝇精原细胞置于含32p的培养基中培养进行一次有丝分裂后将其中一个细胞置于含?1p的培养液中接着进行减数分裂由于DNA复制方式为半保留复制精原细胞完成一次有丝分裂后每个核DNA都是一条链为32p、一条链为31 减数第一次分裂前的间期完成复制后减数第一次分裂后期染色体的着丝点不发生分裂每条染色体中的DNA均有32p标记所以在减数第一次分裂后期被32p标记的染色体数目为8 减一结束后染色体数目减半减二的前期和中期含有放射性的染色体数目为4条每条染色体上的染色单体都是一条有标记一条没有标记则减二后期着丝点分裂染色体数目加倍含有32F”标记的染色体数目为4条 D正确ABC错误故选D.9.图为某六肽化合物合成的示意图下列叙述不正确的是()A. 与①→②相比③→⑤特有的碱基配对方式是U—AB. 根据图中多肽的氨基酸数可以判断出终止密码子是UAAC. ①→②中会产生图中④代表的物质且④中含有氢键D. 图中③④⑥的合成均与核仁有关【答案】D【解析】解分析图示可知①为DNA ②③为mRNA ④为tRNA ⑤为翻译形成的肽链⑥为核糖体A.①→②是转录过程以DNA为模板形成mRNA 没有U—A的配对③→⑤为翻译过程特有的碱基配对方式是U—A 所以与①→②相比③→⑤特有的碱基配对方式是U—A A正确B.由题意“图示为六肽化合物的形成过程” 而图中肽链已经含有6个氨基酸所以可推知终止密码子是UAA B正确C.④是tRNA ④代表的物质即RNA ①→②中会产生RNA 且④中含有氢键 C正确D.核仁与核糖体的形成以及rRNA的形成有关图中③为mRNA ④为tRNA 是通过细胞核中DNA转录形成的 D错误故选 D10.在肺炎双球菌转化实验中 S型细菌有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等多种类型 R型菌是由Ⅱ型突变产生.利用加热杀死的S_Ⅲ与R型菌混合培养出现了S型菌有人认为混合培养出现的S 型菌是由于R型菌突变产生但该实验中出现以下哪种结果时能否定这种说法()A. S型菌全为Ⅱ型B. S型菌部分为Ⅲ型C. S型菌中三种均有D. S型菌全为Ⅲ型【答案】D【解析】加热杀死的SⅢ型细菌能让R型细菌转化成S型细菌若是S型细菌是R型细菌基因突变产生的则可以转化成多种S型细菌因为基因突变具有不一定向性而结果出现的S型细菌均为SⅢ型这就否定基因突变的说法11.艾弗里将R型肺炎双球菌培养在含S型细菌DNA的培养基中得到了S型肺炎双球菌有关叙述中正确的是()A. R型细菌转化成S型细菌说明这种变异是定向的B. R型细菌转化为S型细菌属于基因重组C. 该实验不能证明肺炎双球菌的遗传物质是DNAD. 将S型细菌的DNA注射到小鼠体内也能产生S型细菌【答案】B【解析】解 A、R型细菌转化成S型细菌的这种变异是不定向的故A错误.B、S型细菌的DNA与R型细菌的DNA实现重组重组表现出S型细菌的性状此变异属于广义上的基因重组基因重组故B正确.C 、该实验能证明肺炎双球菌的遗传物质是DNA 故C错误.D、S型细菌型细菌的DNA与R型细菌相混合后才能转化成S型细菌而单独将S型细菌的DNA注入到小老鼠时已经失去活性故D错误.故选 B.12.图示表示细胞内某些重要物质的合成过程该过程发生在()A. 真核细胞内一个mRNA分子上结合多个核糖体同时合成多条肽链B. 原核细胞内转录促使mRNA在核糖体上移动以便合成肽链C. 原核细胞内转录还未结束便启动遗传信息的翻译D. 真核细胞内转录的同时核糖体进入细胞核启动遗传信息的翻译【答案】C【解析】解 A.在真核细胞中在细胞核中转录形成mRNA后必须经过核孔进入到细胞质中与核糖体结合指导蛋白质合成与图示不符合 A错误B.翻译时核糖体在mRNA上移动以便合成肽链 B错误C.原核细胞中没有核膜的阻断能边转录边翻译即转录还未结束便启动遗传信息的翻译C正确D.真核细胞内先转录形成mRNA 进入细胞质启动遗传信息的翻译 D错误故选 C13.被限制酶错位切开的 DNA两条单链的切口带有几个伸出的核苷酸它们正好碱基互补配对这样的切口叫黏性末端如图①~⑥是多种限制酶识别序列及切割位点示意图据图分析下列叙述错误的是()A. 不同的限制酶可能识别相同的DNA序列切割产生不同的黏性末端B. 不同的限制酶可能识别不同的DNA序列切割产生相同的黏性末端C. 不同的限制酶可能识别相同的DNA序列切割产生相同的黏性末端D. 限制酶只能识别“其中一条链上按\ 5^prime 到\ 3^prime 读取的序列与其互补链上按相同的\ 5^prime 到\ 3^prime读取的序列一致”的回文序列【答案】D【解析】解 A.由①②可知不同的限制酶可能识别相同的DNA序列切割产生不同的黏性末端 A正确B.由③④可知不同的限制酶可能识别不同的DNA序列切割产生相同的黏性末端 B正确C.由⑤知不同的限制酶可能识别相同的DNA序列切割产生相同的黏性末端 C正确D.由⑥可知 BbvCⅠ识别的就不是回文序列 D错误故选 D二、多选题(本大题共计3小题每题3分共计9分)14.下列有关双链DNA分子结构的叙述正确的是()A. 一般都含有四种脱氧核苷酸B. 毎个碱基只与脱氧核糖相连接C. 有4个游离的磷酸基团D. \C -G的相对含量影响其结构的稳定性【答案】A, D【解析】 A 、DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸 DNA分子中一般都含有四种脱氧核苷酸 A正确B、碱基通过脱氧核糖和磷酸连接 B错误C 、双链DNA分子中含有两个游离的磷酸基团分别位于DNA分子的两端 C错误D、A-T之间有2个氢键 C-G之间有3个氢键氢键越多越稳定 C-G的相对含量影响其结构的稳定性 D正确15.关于DNA分子的结构与复制的叙述中正确的是()A. 含a个腺嘌呤的DNA分子复制n次共需要消耗腺嘌呤脱氧核苷酸(2^n-1)times a个B. DNA双链被^32P标记后在^31P中复制n次子代DNA中有^32P标记的占dfrac12^nC. 细胞内全部DNA被^32P标记后在不含^32P的环境中进行连续有丝分裂第2次分裂的每个子细胞染色体均有一半有标记D. 在一个双链DNA分子中 G+ C占M% 那么该DNA分子的每条链中G+ C都占该链碱基总数的M%【答案】A, B, D【解析】解 A、某DNA分子含腺嘌呤a个 DNA复制n次形成了2^n个DNA分子因此需要游离的腺嘌呤是(2^n-1)a A正确B、DNA双链被^32P标记后在^31P中复制n次形成了2^n个DNA分子共2^n+ 1个脱氧核苷酸链含^32P标记的是2条链子代DNA中有^32P标记的占\dfrac12^n B正确C 、细胞内全部DNA被^32P标记后在不含^32P的环境中进行连续有丝分裂第一次分裂形成的两个细胞中染色体均被标记第二次分裂形成的四个细胞中被标记的染色体不能确定 C错误D、由于DNA分子两条链上的碱基数量关系是G1= C2、C1= G2 因此双链DNA分子中G+ C的比值与每一条链上的该比值相等 D正确.故选 ABD.16.氧气感应机制使细胞能够调节新陈代谢以适应低氧水平细胞中低氧调节基因表达调控的机理如图所示下列相关分析正确的是()A. 低氧调节基因转录受H蛋白和A蛋白复合物调控B. 氧含量正常时进入细胞核中的H蛋白量较少C. V蛋白功能丧失会导致低氧调节基因表达降低D. H蛋白的氧依赖性降解从分子水平调控了基因表达【答案】A, B, D【解析】A、由题图分析可知低氧调节基因转录受H蛋白和A蛋白复合物调控 A正确B、氧含量正常时大部分H蛋白被降解进入细胞核中的H蛋白量较少 B正确C、V蛋白功能丧失会导致H蛋白不易被降解从而使H蛋白进入细胞核与A蛋白结合启动低氧基因的表达 C错误D、由图示可知 H蛋白在不同氧环境条件下的降解量从分子水平上调控了基因表达 D 正确故选ABD.三、解答题(本大题共计5小题每题10分共计50分)17.(1)“噬菌体侵染细菌的实验”与艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验在设计思路上的共同点是________17.(2)第二组实验中子代噬菌体蛋白质外壳中存在的氧元素是________ 一般来说第三组实验中子代噬菌体的DNA中________(填“一定含有”或“一定不含有”或“不一定含有”) ^14C17.(3)假设在第一组实验中噬菌体DNA在细菌体内复制了三次那么从细菌体内释放出的子代噬菌体中含有 ^32P的噬菌体和 ^35S的噬菌体分别占子代噬菌体总数的________17.(4)第二组与第三组实验经过一段时间培养后离心检测到放射性的主要部位分别是________、________【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】18.(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后分别含有________、________个游离的磷酸基团用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒不能使用SmaⅠ切割原因是_____________________________18.(2)与只使用EcoRⅠ相比较使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_________________________________________________ 18.(3)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了___________________________________________________18.(4)基因工程的操作步骤中没有涉及碱基互补配对的是_____________________ 将该目的基因导入某植物细胞其能否在此植物体内稳定遗传的关键是____________________________ 可以用______________技术对此进行检测18.(5)蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出的第二代基因工程蛋白质工程中要对蛋白质结构进行设计改造必须通过____________或基因合成来完成而不直接改造蛋白质原因是________________________________【答案】(1)0, 2, SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因【解析】解(1)图1所示的质粒分子含有一个SmaⅠ酶切位点在SmaⅠ切割前为环状DNA分子没有游离的磷酸基团 SmaⅠ切割后为一个链状DNA分子每条单链含有一个游离的磷酸基团共含有2个游离的磷酸基团用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒不能使用SmaⅠ切割原因是SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因【答案】(2)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化(或目的基因反向接入)【解析】(2)只使用EcoRⅠ处理质粒、外源DNA 目的基因两端存在相同的黏性末端质粒上也存在相同的黏性末端会导致质粒和目的基因自身环化目的基因插入质粒时也可能反向插入导致不能正常表达使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA即可避免这些问题【答案】(3)鉴别和筛选含有目的基因的细胞(或鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将含有目的基因的细胞筛选出来)【解析】(3)重组质粒中抗生素抗性基因属于标记基因作用是为了鉴别和筛选含有目的基因的细胞(或鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将含有目的基因的细胞筛选出来)【答案】(4)将目的基因导入受体细胞, 目的基因是否整合到植物细胞的染色体上, DNA分子杂交【解析】(4)基因工程的操作步骤中没有涉及碱基互补配对的是将目的基因导入受体细胞将该目的基因导入某植物细胞其能否在此植物体内稳定遗传的关键是目的基因是否整合到植物细胞的染色体上可以用DNA分子杂交技术对此进行检测【答案】(5)基因修饰, 改造后的基因能够遗传且改造基因易于操作【解析】(5)蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出的第二代基因工程蛋白质工程中要对蛋白质结构进行设计改造必须通过基因修饰或基因合成来完成而不直接改造蛋白质原因是改造后的基因能够遗传且改造基因易于操作19.(1)子代噬菌体的DNA应含有表中的________和________元素如果此DNA分子复制3代则得到的子代DNA分子中含 ^32P的DNA分子和含 ^31P的DNA分子的比例为________19.(2)若该DNA分子共有a个碱基其中腺嘌呤有m个则连续复制4代需要环境中提供游离的胞嘧啶脱氧核苷酸为________个19.(3)子代噬菌体的蛋白质分子中都没有 ^32S元素由此说明________ 子代噬菌体蛋白质都含有________元素这是因为________【答案】(1)\ ^31P, \ ^32P, 1∶4【解析】(1)由于DNA分子复制为半保留复制所以子代噬菌体的DNA应含有表中的^31P和 ^32P元素且子代噬菌体的DNA都含有 ^31P 只有2个子代噬菌体的DNA含有^32P 如果此DNA分子复制3代则得到的子代DNA分子中含 ^32P的DNA分子为2个含 ^31P的DNA分子为8个比例为1∶4【答案】(2)\ 15timesleft(dfraca\ 2-mright)【解析】(2)若该DNA分子共有a个碱基其中腺嘌呤有m个则胞嘧啶有\dfraca 2-m个连续复制4代需要环境中提供游离的胞嘧啶脱氧核苷酸为(2^4-1)\times\left(\dfraca 2-m\right)= 15\times\left(\dfraca 2-m\right)个【答案】(3)噬菌体侵染细菌时蛋白质没有进入细菌内, \ ^35S, 子代噬菌体的外壳(或蛋白质)是以细菌内\ ^35S标记的氨基酸为原料合成的【解析】(3)子代噬菌体的蛋白质分子中都没有 ^32S元素由此说明噬菌体侵染细菌时蛋白质没有进入细菌内子代噬菌体的外壳(或蛋白质)是以细菌内 ^35S标记的氨基酸为原料合成的因此子代噬菌体蛋白质都含有 ^35S元素20.(1)以下人体细胞中可获取胰岛素编码序列的有________①胰岛A细胞②胰岛B细胞③肝脏细胞④肾脏细胞⑤成熟红细胞20.(2)在胰岛素A、B肽链编码序列间引入一段短肽编码序列可确保A、B肽链的表达量________20.(3)已知限制酶SacI和XbaI仅有图示的酶切位点用这两种酶切割图中重组表达载体最多能获得________种大小不同的DNA片段20.(4)检测转化的乳酸菌发现重组人胰岛素会在信号肽的引导下分泌到细胞外由此推测重组人胰岛素的合成和运输依次经过的细胞结构是 ________(请用文字和箭头表示)→细胞壁→细胞外20.(5)若利用转基因植物作为生物反应器生产人胰岛素该目的基因需依据植物“偏爱”的密码子来设计并采用________方法获取在利用PCR技术进行扩增之前常需要进行一次预变性其目的是________20.(6)若利用转基因动物生产人胰岛素可将基因表达载体包埋在由________层磷脂分子组成的脂质体中依赖________原理导入受体细胞【答案】①②③④【解析】【答案】相等【解析】【答案】7【解析】【答案】核糖体→(细胞质基质→)细胞膜【解析】【答案】人工合成, 增加大分子模板DNA彻底变性的概率【解析】【答案】2, (生物)膜的流动性【解析】21.(1)人体的骨骼肌细胞可进行上图中的________过程21.(2)细胞甲过程发生的主要场所是________ 该过程是在________酶图甲图乙图丙的作用下完成的21.(3)已知乙过程的 a链中鸟嘌呤与尿嘧啶之和占碱基总数的 54\% α.链及其模板链对应区段的碱基中鸟嘌呤分别占 30\%、 20\% 则与α链对应的DNA区段中腺嘌呤所占的碱基比例为________21.(4)图乙表示________生物的遗传信息表达过程判断依据是________21.(5)一个双链均被 ^32P标记的DNA分子将其置于只含有 ^31P的环境中复制2次子代中含 ^32P的单链与含 ^31P的单链数目之比为________基因H 基因N21.(6)基因H、N编码各自蛋白质的前3个氨基酸的DNA序列如图所示起始密码子均为AUG 则基因N转录时以________链为模版若基因H的箭头所指碱基对 G-C突变为 T-A 其对应密码子的变化是________21.(7)人体不同组织细胞的相同DNA进行转录过程时启用的起始点(填“都相同”“都不同”或“不完全相同”)其原因是【答案】(1)丙【解析】略【答案】(2)细胞核 DNA聚合酶【解析】略【答案】(3)25%【解析】略【答案】(4)原核边转录边翻译【解析】略【答案】(5)1:3【解析】略【答案】(6) a由GUC变为UUC【解析】略【答案】(7)不完全相同不同组织细胞中基因进行选择性表达【解析】略。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

, 分子量多位于 7 W 4[O, 是一种非分泌型 C.@C,N9) 的蛋白质, 富含半胱氨酸, 占氨基酸总数的 %7U , 其
[%%] 间形成的二硫键对蛋白质折叠成正确的构象 起
胞杆菌的 J:层蛋白在细胞表面展示了果聚糖蔗糖 酶, 但是到目前为止, 还没有人利用苏云金芽胞杆菌 的 J:层蛋白进行过蛋白质的表面展示工作。苏云 金芽胞杆菌是土壤中广泛存在的一种细菌, 已成功 用于生物杀虫剂 。我们克隆到了来自苏云金芽胞
!! 卷 " 期 #$$! 年 %$ 月
微 生 物 学 报 !"#$ %&"’()&(*(+&"$ ,&-&"$
&’() !! *+,’-./
0’) " #$$!
! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! !
层是由蛋白质或糖蛋白亚基组成的单分子晶体点
[#] 阵, 它们形成有孔的网格结构覆盖在细胞表面 。
( , 相对分子量为 "$[O 左右, :淀粉酶 :<?Y(<A.) ! ! 是一种分泌型的蛋白质, 其活性易于检测; 能任意切 断淀粉分子内的 ! 终产物为麦芽 :%, !:葡萄糖苷键,
[%$] 糖、 糊精和少量葡萄糖 。金属硫蛋白 ( N.,<((’,E@’:
# 吴怀光和刘欣为同等贡献者。
收稿日期: #$$!:$#:$#,修回日期: #$$!:$!:#7
#期
吴怀光等: 利用 1-层蛋白在细胞表面展示! -淀粉酶和金属硫蛋白
+#3
!
!Ř’ !"(
质粒电脉冲转化苏云金芽胞杆菌 按照文献 [&’] 所述方法进行。 锥虫蓝染色法检测 ! )淀粉酶活性
用 J:层蛋白进行细胞表面展示有很多优点。首先, 一般可达整个细胞蛋白的 J:层蛋白 的 表 达 量 高, [#, 1] ; 其次, %$U W %"U J:层蛋白具有高效的信号肽 和表面定位结构, 能够准确的定位在细胞表面, 尽管 如此, 利用 J:层蛋白进行细胞表面展示对外源片段
[!] ["] 的大小仍有一定限制 。 N.AC<X. 等 利用炭疽芽
" 通讯作者。 9.(: 27:#4:24#21!"";;<=:27:#4:24#2$74$; >:?<@(: ?32ABCD ?<@( ) EF<B ) .GB ) +C
作者简介: 吴怀光 (%343 H ) , 男, 湖北黄冈人, 硕士研究生, 主要从事苏云金芽胞杆菌分子生物学研究。 >:?<@(: .(@,.D I.-?<@( ) EF<B ) .GB ) +C
利用 !" 层蛋白在细胞表面展示 ! " 淀粉酶和金属硫蛋白
吴怀光 刘 欣# 孙 明" 喻子牛
武汉 !1$$4$) (华中农业大学生命科学技术学院 农业微生物学国家重点实验室

要: 选用苏云金芽胞杆菌 595 菌株细胞表面 J:层蛋白作为表面展示载体, 利用其 0:端信号肽以及锚定序列分
别将不同生物特性的外源蛋白带到胞外并锚定在细胞的表面。为研究外源蛋白的分子量和生化特性对表面展示 以及对其在细胞表面生物活性的影响, 选用分子量较大的分泌性蛋白! :淀粉酶和富含半胱氨酸的非分泌性蛋白金 ( !"# ) 和金属硫蛋白的结构基因 ( $"%& ) 与 J:层蛋白的锚定区 $’( 属硫蛋白作为目标蛋白。将! :淀粉酶的结构基因 结合, 构建融合蛋白基因 $’( K !"# 及 $’( K $"%& , 克隆至穿梭载体 LM91$! 上, 得到重组质粒 L6N6J8:1$! 和 L6N6JN: 转入带有帮助质粒的重组菌株 6N6%4%KL6N6:5J8 中, 得到新的重组菌株 6N6J85 和 6N6JN5。 JOJ:P8Q> 显示 1$!; 融合蛋白 JRMK8NS 和 JRMKJN98 在重组菌的表面得到了表达。利用锥虫蓝染色 K 打孔加膜法表明重组菌 J85 的确 具有表面酶活性, :淀粉酶被固定在细胞表面。碘液法测定的数据表明重组菌 J85 的菌悬液样品较之受体菌 ! 证实 6N6%4% 菌悬液样品酶活提高了 !#T!U 。 0@:098:琼脂糖微球吸附试验显示重组菌 JN5 能够被微球所吸附, JN98 在重组菌表面具有活性。对游离镉离子的吸附试验显示重组菌对镉离子的吸附能力是对照受体菌的 ! 倍。 关键词: 苏云金芽胞杆菌,J:层蛋白,细胞表面展示,融合蛋白基因 中图分类号: V2%# 文献标识码: 8 文章编号: $$$%:7#$3(#$$!)$":$7"2:$"
收集菌体培养制样, 菌体经 J$1 ( 磷酸缓冲液, ) 洗涤 次后重新悬浮于等体积 ( /"+O4) 。 /"+O4 , J$1 检测基质 1)2 [ 1 即 16<?PL, 可溶性淀粉 &O4Q (R.S) ; 锥虫蓝 4O4&Q (R.S) ; 琼 ) 即 )?T/<D BMUV, 2 即 2I<?, 脂 &O#Q (R.S) ] 灭菌后融化倾倒于平皿中, 经打孔、 加滤膜处理后, 取起始培养物、 菌悬液、 上清液各样 品适量滴加至孔中或滤膜上, 并以滤膜及 J$1 为对 照。,’G 反应 ,L。 !"* 碘液法测定 ! )淀粉酶活力 参照文献 [&7] 的方法测定! -淀粉酶活力。收集 菌体培 养 物, 用 J$1 洗 涤 菌 8 N , 次, 重新悬浮于 56+44 &O# 左右。取 &O4Q 的可溶性淀粉 &>H 置于离 心管中, 加入菌悬 液、 ,’G 保温 &4>CD, J$1 各 样 品 混匀。,’G 保温 &4>CD, 迅速取出离心, 吸上 4O&>H, 清 4O&>H 加入 &>H 4O&>AM.H "0M 中, 混匀。从中取 加入 稀释 倍的 碘液中, 混匀。 4O,>H ,>H 844 &O4Q 用 :9W0X’844 型分光光度计于 ++4D>、 以稀释碘液 为参比测定 56 值。一个淀粉酶单位定义为: 在规 定条件下每分钟将浓度为 &O4Q 的可溶性淀粉溶液 的显蓝强度降低 &Q 时所需的酶量。计算酶活力的 公式为: ( $ Z [) ( 式中 $ :.>H Y . $ \ &4 \ S)\ &44, 是对照吸光度值, [ 为主值吸光度, S 是样品。 !"+ 镉离子吸附试验
[4] , 该蛋白质 0:末端氨基酸 杆菌的 J:层蛋白基因 )%) 序列与炭疽芽胞杆菌和地衣芽胞杆菌的细胞表面 [7]
稳定 作 用; 有大量能结合重金属离子 ( 如 \C# ] 、 的巯基, 广泛分布于生物体 5G# ] 、 5B# ] 、 MX# ] 和 8X ] )
[%#] 。N9 能清除体内自由基, 有效抵抗辐射, 参与 内
[&3] 的方法。收集菌体培养物, 以 参照许朝晖等
(R.S) 并重新悬浮。 4O7#Q 9<0M 溶液洗涤菌体 , 次, 取 &4 H 稀 释 成 &>H 以 计 数。样 品 加 入 等 体 积 的 " 〔4O7#Q ( R.S) #4 \ &4 Z + I.>H 0]0M8 溶液 9<0M 溶液配 制〕 。将混合物在 8#G 摇床上缓慢振荡 8*L。收集 菌体, 以 4O7#Q (R.S) 用 9<0M 溶液洗涤菌体两次后, (R.S) 的硝酸过夜消化。稀释 &44 倍后, 用全 ’4Q 谱直读等离子体发射光谱仪对消化液中的 0]8 F 进 行定量测定, 波长为 887O7D>。计算每个细胞吸附 8F ( [ \ S) ( 0] 个数的公式为: @Y . % \ 9) .( \ 稀释 倍数系数。式中 [ 是测定的 0]8 F 浓度, ( 是测量的 8F 菌体数, S 是样品体积, % 是 0] 的分子量 &&8, 9 是摩尔常数 +O48 \ &48, , 稀释倍数系数综合了测定 8F 0] 浓度和菌体数时的稀释倍数。 !", 琼脂糖微球吸附实验
体内微量元素的储存、 运输和代谢过程, 能解除铅、 汞、 镉等重金属对生物体的毒害, 还可用于医药业、
[%#, %1] 化妆品业、 保健食品业和环保行业 。本研究选
用上述两种蛋白质作为目标蛋白, 研究了利用苏云 金芽胞杆菌 J:层蛋白展示不同生物特性蛋白质的 可行性, 并探讨其在全细胞催化剂和全细胞吸附剂 方面的应用潜力。
J:层蛋白是位于细胞外壳最外层的一类表面结 构, 生物圈中有 J 层的生物体普遍存在, 这层结构对
[%] 细菌细胞的生存及完整性有着很重要的作用 。J
适合作为表面展示的 JRM)同源性高达 34U , ?’,@Z, [2] 载体 。我们已利用这一 J:层蛋白在细胞表面展示
[3] 了生化性质单一的多聚组氨酸肽 。
其中细胞表 J:层蛋白具有 3#U W 31U 的同源性 , 面锚定所必需的 J 层蛋白同源模体 ( J:(<Y./ E’?’(’XY
[4]
基金项目: 国家自然科学基金 (1$$2$$%1) ; 国家 “341 项目” (#$$156%%!#$%) ; 国家 “271 计划” (#$$!88#%!$3#)
大肠杆菌 ( !"#$%&’#$’( #)*’ ) !"!"! 质 粒 和 菌 株: ,苏 云 金 芽 胞 杆 菌( +(#’**," -$,&’./’%."’" ) !"# ! (库斯塔克亚种 ($)&*+, #&0 -无质粒突变株, $%$&’& ) , (辅助质粒 /$%$0见文献 [&*] $%$&’&./$%$012 见文献 [ 3] ) , 质粒 /"),4* ( $5 6 复 12 转入 $%$&’&, ) , 制子, 氨苄青霉素抗性、 红霉素抗性, 见文献 [&#] ( 含有 #-# 基因的 !92 片段插入 质粒 /$%$378-,4* 见文献 [ ’] ) ,质粒 /$&+ ( 含有 ! - (10*("% 基 /"),4*, 因的 !92 片段插入 /:0&,,氨苄青霉素抗性, 见文 ) , 质粒 /;)-83<-=>62 (含有 "1-2 的 !92 片段 献 [&4] 插入 /;)-83<, 卡那霉素抗性, 见 !? 5 @ABCD=AD 惠赠, ) , 质 粒 /$%$012 (含 有 #"(2+ 操 纵 子 的 文献 [ && ] 含金黄色葡萄 !92 片段插入 ! 5 #)*’ -E F 穿梭载体, 球菌复制起始点, 氨苄青霉素抗性, 四环素抗性, 见 文献 [3] ) 。大肠杆菌在 ,’G 培养, 苏云金芽胞杆菌 均用 H$ 培养基培养。抗生素使用浓 在 87G 培养, 红霉素为 8# 四 度: 氨苄青霉素为 &44 I.>H, I.>H, " " 环素 8# 卡那霉素为 #4 I.>H, I.>H。 " " 根据 (10 基因的序列设计克隆 !"!"# 引物设计: 并在结构基因前引入 34( # 该基因的引物 J& 和 J8, 位点, 以与 #-# 基因上参与细胞表面锚定所必需的 根据 "1-2 基因的序列设计引物 J, 和 "*$ 片段融合, 以与 #-# 基因 J*,并在结构基因前引入 34( #位点, 的 "*$ 融合。 J&: #K-0202)0)2E20E)02)00)E02)E0E))0 -,K (含 34( 酶切位点) ; J8:#K-E)22220E20EE002E)# ,K;J,: #K-E2E2)0)2E2)2)E200)02202-,K( 含 ; 34( # 酶 切 位 点) J*:#K-E0)2E))2))E0)02E0EE-,K !"# $%& 操作和蛋白质检测 质粒的提取、 酶切、 连接、 转化、 J0@ 参照文献 的方法。细胞表面层蛋白样品制备: 挑取单菌 [&+] 落接种于 H$ 培养基, 收获菌体。 ,4G 摇床培养 &8L, 沉淀物用 &>AM.H 9<0M 和无菌水各 取 &>H 菌液离心, 用 &44 N &#4 并加入 洗涤 , 次后, H 的无菌水悬浮, " 等量的 8 倍的上样缓冲液。混匀后, 在沸水中加热 冷却后离心取上清, 即得 1!1-J2E; 样品。 , N #>CD, [ &+] 的方法。蛋白定量采用上 1!1-J2E; 参照文献 海四星生物技术公司生产的凝胶成像系统软件进行 光密度测定后定量。
相关文档
最新文档