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生物制药学
核酸类药物——转移因子（TF)
主要内容提要： ㈠TF的发现和研究历程 ㈡TF的工艺过程与相关技术 ㈢TF的主要药理作用 ㈣TF的代表药品与应用 ㈤TF的发展前景
1
转移因子基本概念
• 转移因子（Transfer Factor）简称TF,又称传输因子，是具 有免疫活性的淋巴细胞在抗原或丝裂原的刺激下释放的一 类可透析的多核苷酸和多肽小分子物质。
• 1979年以 后国 内 逐 渐 应用于兽医免疫和临床治疗 在 动 物 疾病防控中发挥了一定作用。
4
• 目前，转移因子在治疗病毒性流感，乙肝和犬病毒感染病 等已经取得了一定的成果。市面上主要有转移因子胶囊， 口服液和注射液三种药物类型。
• 同时，国内外研究者一方面, 对TF的研究主要集中在实验 室研究和小范围的临床治疗上, 真正对其在免疫调节作用 机制上和疫苗佐剂效应上的研究甚少; 另一方面, 对TF防 治禽畜的传染病尤其是对禽畜病毒病的研究是热点。
• 据我推测，随着生物研究技术和实验工具的改进，TF的分 子作用机制终会被搞清，那时将会在禽类病毒感染病（如 禽流感）和抗癌治疗上有更好的发展前景。
5
TF的生产工艺
原辅料
↓
破碎
↓
均浆
↓
洁净区
一次离心
↓
二次离心
↓
混料
↓
冷冻干燥
↓ → → → 粉碎，总混，内包
外包装
检验
成品
6
猪脾转移因子的规模化生产工艺研究
• 取 新 鲜 健 康 猪 的 脾 脏150 条，去 除 脂 肪 和 筋膜， 纯化水清洗 1次，注射用水清洗2 次，绞肉机绞碎，称重 为17.5㎏ ，1,5 倍质量的 4℃注射用水稀释，组织捣碎机 充分匀浆，将匀浆液分 6份，分别置于 10L灭菌塑料桶 中 标记A,B,C三组。
• 处理 方 法 如 下: A组 用2mol/L 调 pH4.8，于 -20℃冷冻 ，水浴化冻，冻融3 次， 离心4000r/min ( 以下涉及离心 的都按此标准) ， 取 上清，上清用2mol/L NaoH 调 Ph6.8 ，离心取上清，滤板 过 滤，0.22µm 滤 膜 过 滤，收 集 滤 液。
8
TF的主要药理作用
• 药理作用TF具有两方面的生物效应，其一为抗原依赖性的特异效应，此与皮 肤迟发型超敏反应的转移，抗原诱导淋巴因子的产生及针对抗原的淋巴细胞 转化反应有关。其二是非抗原依赖性效应，包括提高单核细胞及中性粒细胞 的趋化性，增强单核细胞中环磷鸟苷的积累，T细胞花环形成、淋巴细胞对抗 原和有丝分裂原的母细胞转化应答，以及提高受体迟发型超敏反应的能力等。 （1）TF可介导淋巴细胞对肿瘤的细胞毒作用，抑制或破坏肿瘤细胞的生长。 TF是一类T细胞的促进剂，具有活化效应细胞、加强效应细胞对肿瘤细胞的 攻击反应。（2）TF是一种免疫信息传递物质，为免疫调节剂，在TF作用下， 非致敏的淋巴细胞可以转化为致敏的T细胞，增强细胞免疫功能，降低体液免 疫IgE水平，并且TF有促进干扰素释放，增加机体抗感染，抗过敏能力。（3） TF为细胞免疫增强剂，促使T细胞成熟，增强T细胞的免疫功能。 TF只有增 强细胞免疫功能和提高机体防御能力，可达到抵制细菌、病毒感染的作用。 （4）TF是提高LAK细胞疗效，减少rIL-2使用量的另一类有效的肿瘤免疫过 继疗法制剂。 在第4次国际TF会议上，Borkowsky证实TF的活性成分是Th细 胞的产物，可选择性地结合Ts细胞和巨噬细胞，在免疫调节网络中发挥作用。
• 适应症TF已在临床上广泛用作一种免疫增强剂来治疗因免疫功能低下而致的 多种疾病，尤其已成为癌症病人长期应用的辅助治疗剂。TF对急性病毒性感 染效果显著，对过敏性疾病等也有作用。可用于治疗流行性腮腺炎、带状疱 疹、乙型病毒性肝炎、脲敏性鼻炎、支气管哮喘、扁平疣、过敏性紫癜、银 屑病、大疤性鼓膜炎、慢性单纯性鼻炎以及脊髓灰质炎等。
• B组 于-20℃冷冻，水浴化冻，冻融 3次后用2mol/L Hcl调 pH4.5 ，离 心 取 上 清，上 清 用 2mol/L NaoH调pH6.8， 后续处理方法同 A。
7
• 结论：①转移因子收率的高低主要是取决 于原料细胞破碎程度和溶液酸碱度 ，原料 细胞破碎率越高，细胞内肽类等有效成份 溶出率越高。②同时冻融次数越多，多肽 含量越高，而核糖含量下降，这可能与肽 类比较稳定，冻融次数越多，释放出来的 肽 类 越 多; 而核糖主要为细胞中的 和，容 易降解，随着冻融次数增多，降解的核糖 愈多，表现为核糖含量下降。
• 临床用于某些抗生素难以控制的病毒性或酶菌性细胞内感 染的免疫缺陷的病人，如细菌性或霉菌性感染、病毒性带 状疱疹、乙肝、麻疹、流行性腮腺炎。对恶性肿瘤可作为 辅助治疗剂。
3
TF的发现历程与热点研究
• 1949年 Lawrence首 次 发 现 结 核菌素阳性供者的活淋巴 细胞能使皮试阴性受者转变为皮试阳性。
9
TF的几类代表药物
• 背景：在抗病毒的预防和治疗中, 目前急需的是一
种具有良好的活化机体细胞免疫功能的免疫增强
剂和能够恢复机体正常免疫水平的免疫调节剂。
二者应具有以下特性: 能促进体液和细胞介导的免
• 一般分为两类： 1．特异性TF
从某种疾病康复者或者治愈者中提取的。
•
2．非特异性TF
从健康人的淋巴细胞中提取，如移动抑制因子。
转移因子是小分子物质，不会被胃蛋白酶、胰蛋白酶分
解，也不会被胃酸破坏，可以口服。无毒副作用，无过敏
反应，无抗原性。使用剂量小，起效快，药效持续时间长。
2
• 转移因子的作用主要是参与 机体免疫功能的淋巴因子， 具 有 增 强 淋巴细胞转化 从而提高机体免疫功能的作用。 可将供体的细胞免疫功能特异地转给受体 而且能转移包 括真菌细菌病毒寄生虫组 织 相 容 性 抗原和肿瘤抗原等 多种抗原的细胞免疫是一种新型免疫制剂。
• 1953年 - 1955年 Lawrence等 将 其对应的白细胞可透析 物质（DLE） 重 复实 验 后 发 现 DLE具备活淋巴细胞同 样的功能 即其提取物仍具有转移迟发型变态反应的作用 并 将 这 种 能 将供体的某种特定的细胞免疫功能特异地 转给受体 使受体也具有该种细胞免疫力的物质称为转移 因子。
核酸类药物——转移因子（TF)
主要内容提要： ㈠TF的发现和研究历程 ㈡TF的工艺过程与相关技术 ㈢TF的主要药理作用 ㈣TF的代表药品与应用 ㈤TF的发展前景
1
转移因子基本概念
• 转移因子（Transfer Factor）简称TF,又称传输因子，是具 有免疫活性的淋巴细胞在抗原或丝裂原的刺激下释放的一 类可透析的多核苷酸和多肽小分子物质。
• 1979年以 后国 内 逐 渐 应用于兽医免疫和临床治疗 在 动 物 疾病防控中发挥了一定作用。
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• 目前，转移因子在治疗病毒性流感，乙肝和犬病毒感染病 等已经取得了一定的成果。市面上主要有转移因子胶囊， 口服液和注射液三种药物类型。
• 同时，国内外研究者一方面, 对TF的研究主要集中在实验 室研究和小范围的临床治疗上, 真正对其在免疫调节作用 机制上和疫苗佐剂效应上的研究甚少; 另一方面, 对TF防 治禽畜的传染病尤其是对禽畜病毒病的研究是热点。
• 据我推测，随着生物研究技术和实验工具的改进，TF的分 子作用机制终会被搞清，那时将会在禽类病毒感染病（如 禽流感）和抗癌治疗上有更好的发展前景。
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TF的生产工艺
原辅料
↓
破碎
↓
均浆
↓
洁净区
一次离心
↓
二次离心
↓
混料
↓
冷冻干燥
↓ → → → 粉碎，总混，内包
外包装
检验
成品
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猪脾转移因子的规模化生产工艺研究
• 取 新 鲜 健 康 猪 的 脾 脏150 条，去 除 脂 肪 和 筋膜， 纯化水清洗 1次，注射用水清洗2 次，绞肉机绞碎，称重 为17.5㎏ ，1,5 倍质量的 4℃注射用水稀释，组织捣碎机 充分匀浆，将匀浆液分 6份，分别置于 10L灭菌塑料桶 中 标记A,B,C三组。
• 处理 方 法 如 下: A组 用2mol/L 调 pH4.8，于 -20℃冷冻 ，水浴化冻，冻融3 次， 离心4000r/min ( 以下涉及离心 的都按此标准) ， 取 上清，上清用2mol/L NaoH 调 Ph6.8 ，离心取上清，滤板 过 滤，0.22µm 滤 膜 过 滤，收 集 滤 液。
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TF的主要药理作用
• 药理作用TF具有两方面的生物效应，其一为抗原依赖性的特异效应，此与皮 肤迟发型超敏反应的转移，抗原诱导淋巴因子的产生及针对抗原的淋巴细胞 转化反应有关。其二是非抗原依赖性效应，包括提高单核细胞及中性粒细胞 的趋化性，增强单核细胞中环磷鸟苷的积累，T细胞花环形成、淋巴细胞对抗 原和有丝分裂原的母细胞转化应答，以及提高受体迟发型超敏反应的能力等。 （1）TF可介导淋巴细胞对肿瘤的细胞毒作用，抑制或破坏肿瘤细胞的生长。 TF是一类T细胞的促进剂，具有活化效应细胞、加强效应细胞对肿瘤细胞的 攻击反应。（2）TF是一种免疫信息传递物质，为免疫调节剂，在TF作用下， 非致敏的淋巴细胞可以转化为致敏的T细胞，增强细胞免疫功能，降低体液免 疫IgE水平，并且TF有促进干扰素释放，增加机体抗感染，抗过敏能力。（3） TF为细胞免疫增强剂，促使T细胞成熟，增强T细胞的免疫功能。 TF只有增 强细胞免疫功能和提高机体防御能力，可达到抵制细菌、病毒感染的作用。 （4）TF是提高LAK细胞疗效，减少rIL-2使用量的另一类有效的肿瘤免疫过 继疗法制剂。 在第4次国际TF会议上，Borkowsky证实TF的活性成分是Th细 胞的产物，可选择性地结合Ts细胞和巨噬细胞，在免疫调节网络中发挥作用。
• 适应症TF已在临床上广泛用作一种免疫增强剂来治疗因免疫功能低下而致的 多种疾病，尤其已成为癌症病人长期应用的辅助治疗剂。TF对急性病毒性感 染效果显著，对过敏性疾病等也有作用。可用于治疗流行性腮腺炎、带状疱 疹、乙型病毒性肝炎、脲敏性鼻炎、支气管哮喘、扁平疣、过敏性紫癜、银 屑病、大疤性鼓膜炎、慢性单纯性鼻炎以及脊髓灰质炎等。
• B组 于-20℃冷冻，水浴化冻，冻融 3次后用2mol/L Hcl调 pH4.5 ，离 心 取 上 清，上 清 用 2mol/L NaoH调pH6.8， 后续处理方法同 A。
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• 结论：①转移因子收率的高低主要是取决 于原料细胞破碎程度和溶液酸碱度 ，原料 细胞破碎率越高，细胞内肽类等有效成份 溶出率越高。②同时冻融次数越多，多肽 含量越高，而核糖含量下降，这可能与肽 类比较稳定，冻融次数越多，释放出来的 肽 类 越 多; 而核糖主要为细胞中的 和，容 易降解，随着冻融次数增多，降解的核糖 愈多，表现为核糖含量下降。
• 临床用于某些抗生素难以控制的病毒性或酶菌性细胞内感 染的免疫缺陷的病人，如细菌性或霉菌性感染、病毒性带 状疱疹、乙肝、麻疹、流行性腮腺炎。对恶性肿瘤可作为 辅助治疗剂。
3
TF的发现历程与热点研究
• 1949年 Lawrence首 次 发 现 结 核菌素阳性供者的活淋巴 细胞能使皮试阴性受者转变为皮试阳性。
9
TF的几类代表药物
• 背景：在抗病毒的预防和治疗中, 目前急需的是一
种具有良好的活化机体细胞免疫功能的免疫增强
剂和能够恢复机体正常免疫水平的免疫调节剂。
二者应具有以下特性: 能促进体液和细胞介导的免
• 一般分为两类： 1．特异性TF
从某种疾病康复者或者治愈者中提取的。
•
2．非特异性TF
从健康人的淋巴细胞中提取，如移动抑制因子。
转移因子是小分子物质，不会被胃蛋白酶、胰蛋白酶分
解，也不会被胃酸破坏，可以口服。无毒副作用，无过敏
反应，无抗原性。使用剂量小，起效快，药效持续时间长。
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• 转移因子的作用主要是参与 机体免疫功能的淋巴因子， 具 有 增 强 淋巴细胞转化 从而提高机体免疫功能的作用。 可将供体的细胞免疫功能特异地转给受体 而且能转移包 括真菌细菌病毒寄生虫组 织 相 容 性 抗原和肿瘤抗原等 多种抗原的细胞免疫是一种新型免疫制剂。
• 1953年 - 1955年 Lawrence等 将 其对应的白细胞可透析 物质（DLE） 重 复实 验 后 发 现 DLE具备活淋巴细胞同 样的功能 即其提取物仍具有转移迟发型变态反应的作用 并 将 这 种 能 将供体的某种特定的细胞免疫功能特异地 转给受体 使受体也具有该种细胞免疫力的物质称为转移 因子。