多重耐药菌ESBLS的概念及检验方法
426株肠杆菌科细菌ESBLs检测及耐药性分析
426株肠杆菌科细菌ESBLs检测及耐药性分析发表时间：2012-09-17T10:37:40.717Z 来源：《医药前沿》2012年第6期供稿作者：柴琳杨汝文余亚丹[导读] ESBLs是丝氨酸蛋白酶的衍生物，是存在于细菌中的酶，通过质粒形式传播。
柴琳杨汝文余亚丹（云南省昆明市中医医院 6 5 0 0 1 1 ）【摘要】目的了解E.coli（大肠埃希氏菌），K.pneumoniae（肺炎克雷伯氏菌）和E.cloacae（阴沟肠杆菌）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的产酶状况及耐药性，为临床用药，合理使用抗生素提供资料。
方法采用NCCLS推荐的纸片扩散法筛出可疑产ESBLs的大肠埃希氏菌,肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌，再用双纸片增效试验为ESBLs的确正试验。
结果三种菌426株，共检出产ESBLs的菌株122株，总检出率为28.6%，其中大肠埃希氏菌检出率18.6%，肺炎克雷伯氏菌35.8%，阴沟肠杆菌12.1%。
亚胺培南的耐药率为1.6%呈现最敏感，依次为舒普深14.8%, 头孢吡肟21.3%, 安美汀24.6%。
产ESBLs的菌株对除碳青酶烯类之外的抗菌药物耐药率明显高于非产酶株，其中多数差异有统计学意义（p﹤0.05）。
结论产ESBLs的大肠埃希氏菌，肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌，质粒介导细菌一旦产生此酶，临床上对所有青霉素类，头孢类（1-3代）和单环类抗生素耐药。
【关键词】肠杆菌科细菌 ESBLs 耐药性分析【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）06-0052-02 超广谱β-内酰胺酶（e x t e n d e d s p e c t r u m b e t a - lactamases,ESBLs）是由质粒介导的能赋予细菌对多种β-内酰胺类抗生素耐药的一类酶，它主要由革兰阴性杆菌产生。
近年来，随着抗生素在临床的广泛使用，肠杆菌科细菌ES B L s 的产生率和耐药性均呈逐年上升趋势，其主要原因是头孢三代在临床大量应用，导致其耐药菌广泛传播[1]。
ESBLs检测的筛选与确证试验
肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌中
ESBLs检测的筛选与确证试验
ESBLs是英文Extended-Spectrum β-lactamase的缩写，中文意思是超广谱β-内酰胺酶，它是当前抗生素出现的新的耐药趋势之一。
目前大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、肺炎克雷伯氏菌是最常见的产ESBLs菌株的细菌，其次，阴沟肠杆菌、粘质沙雷氏菌、弗劳地枸橼酸菌、铜绿假单孢菌也可出现产ESBLs菌株的细菌。
脚注:
头孢他啶/克拉维酸(30/10μg)纸片与头孢噻肟/克拉维酸（30/10μg）纸片的制备：使用克拉维酸1000μg/ml的原液（新鲜制备或者从－70℃冰冻中取出已分装在小瓶中的），把10μl的克拉维酸加到头孢他啶（30μg）和头孢噻肟（30μg）的纸片上。
在纸片贴于平板之前1个小时内，用微量加样器把10μl原液加到头孢他啶和头孢噻肟纸片上，允许有30
分钟的时间以利于克拉维酸的吸收和纸片在贴之前保持足够的干燥。
制备完成后立即使用纸片，否则丢弃；不能保存。
（1）CAZ CAZ/棒酸，CTX CTX/棒酸。
一种大于5MM，另一种小于5MM或相等，可确认为ESBL阳性。
（2）加棒酸的药片抑菌圈直径反而小于不加的，可能是片间差异，应认为ESBL阴性。
多重耐药铜绿假单胞菌ESBLs和AmpC酶检测与分析
困难 本 研究 对 我 院 ２ ０ ０ ５年 １ 月 ２ ０ ０ ６年 １ ２月 各
种 临 床 标本 中筛选 出的 ６ ０株多 重 耐 药 铜绿 假单 胞 菌 的 Ｅ Ｂ ｓ和 Ａ Ｃ酶进 行 检测 与 分析 ． ＳＬ ｍｐ 以探 讨 其 耐 药 机制 ． 临床 治疗 及控 制 医院感染 提供 依据 。 为
附表
６ ｏ株 多 重 耐 药铜 绿 假 单 胞 菌 三 维 试 验结 果
３ 讨 论
作 者单 位 ：２ ０ ０ １ 浙 江 省 温 州 第 二 医 院 ；、 州 中心 医 ３５ ０ 、 ２湖
院
多 重 耐 药 铜 绿 假 单 胞 菌 一 直 是 临 床 抗 感 染 治
疗 的重 点 和难 点 ． 特别 是 近 年来 不 断 出现 对 所 有 抗
１ 培养 基 与 试 剂 ＭＨ 培养 基 干 粉 购 自杭 州 天 ． ２
液 ＋ ｌ ｍ ｌ ４ ｌ ｍｏＬ克 拉 维 酸＋ ｌ ｍ ｌ ｘ２ ／ ４ ｌ ｍｏ Ｌ氯 唑 西 林 ． ｘ２ ／
３ ｃ培 养过夜 ．平 板 上 出现 沿槽 周 围 生长 指 向纸 片 ５ｃ 的矢 状 菌苔 ． 即表 明该 酶 能水 解 亚 胺 培南 或 头 孢 噻
的 中心分 别 贴上 １ １ 亚 胺培 南 和 ３ ｌ ０ｘ ｇ ０ ｇ头 孢 噻肟 ． ｘ 距 纸 片边 缘 ５ｎ ｒｍ处 由里 向外 用 无 菌 刀 片均 匀 切 割 ４个 １ ｍ 宽 、５ ｍ 长 的槽 ，于槽 内分别 加 ４ ｌ 酶 ｍ １ｍ ０ｘ ｌ
生素、 免疫抑制剂 、 肿瘤化疗等药物 的广泛使用以 及各 种 侵 入性 操 作 的增 多 ． 菌 引起 的 医院感 染 日 该
产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌(ESBLs)的护理查房
03 04
基因芯片技术：通过基 因芯片检测ESBLs基因 的表达水平，从而判断 ESBLs的存在和耐药性。
荧光原位杂交 （FISH）：通过荧光 标记的ESBLs基因探针 与细菌染色体杂交，检 测ESBLs的存在和耐药 性。
耐药性检测方法
01
纸片扩散法：将抗生素纸片放在培养基上， 观察细菌生长情况，判断耐药性
手术时机：在 感染控制后进 行手术
术后护理：加 强伤口护理， 预防感染复发
ESBLs护理查房
查房前准备
收集患者病历资料，包括病史、 体格检查、实验室检查、影像 学检查等
确定查房重点，包括病情评估、 治疗方案调整、护理措施等
准备查房所需物品，如听诊器、 血压计、体温计等
安排查房人员，包括医生、护 士、实习生等，明确各自职责
05
联合用药：根据药敏试验 结果，选择两种或两种以 上抗生素联合使用，以提 高抗菌效果。
03
喹诺酮类抗生素：如左氧 氟沙星、莫西沙星等，对 ESBLs有一定抗菌活性， 但易产生耐药性。
06
替代治疗：对于严重感染 或耐药菌株，可考虑使用 替代治疗方案，如抗真菌 药物、抗病毒药物等。
护理措施
密切观察病情变化， 及时调整治疗方案
环境消毒：定 期对病房、设 备、物品进行 消毒
隔离：将 ESBLs感染者 与其他患者隔 离
防护设备：使 用防护服、口 罩、手套等设 备，防止交叉 感染
监测措施
定期监测ESBLs感 染情况，及时发现
和处理
加强病房管理，减 少患者间的接触
加强手卫生，减少 交叉感染
加强抗生素使用管 理，避免滥用和过
度使用
加强抗感染药物的使 用管理，确保用药安 全
ESBLS菌
ESBLS菌ESBLS（Extended-spectrum beta-lactamases）菌是一类耐药性较强的革兰阴性细菌，其特点是能够产生一种特殊的酶，即ESBLS酶，能够降解β-内酰胺类抗生素。
这类菌属于多重耐药菌种，给临床治疗带来了一定的挑战。
菌种分类ESBLS菌被归类为革兰阴性菌，主要包括肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）、肠杆菌（Escherichia coli）和产气杆菌（Enterobacter cloacae）等。
它们都属于肠道菌群中的一员，常见于人体内的呼吸道、泌尿道和消化道等部位。
耐药机制ESBLS菌的耐药机制主要是通过产生ESBLS酶来降解β-内酰胺类抗生素，这种酶能够使抗生素失去其抗菌活性。
除了产生ESBLS酶外，ESBLS菌还可能具有其他耐药性机制，如外膜通道蛋白的缺陷、多种药物外排泵的表达增加等。
传播途径ESBLS菌通过多种途径传播，主要包括医疗机构内的交叉感染和社区中的传播。
在医疗机构内，ESBLS菌主要通过医疗器械、病人间的直接接触和空气传播等方式传播。
在社区中，ESBLS菌主要通过食物、水源和接触感染传播。
临床治疗ESBLS菌的耐药性给临床治疗带来了很大的挑战。
由于ESBLS菌对常规的β-内酰胺类抗生素产生耐药性，临床医生在治疗ESBLS菌感染时需要选择其他类别的抗生素，并且需要进行药敏试验以确定哪种抗生素对该菌株有效。
通常，氟喹诺酮类抗生素和碳青霉烯类抗生素被认为是治疗ESBLS菌感染的首选药物。
预防与控制预防与控制ESBLS菌感染的关键在于加强感染控制措施和合理使用抗生素。
医疗机构应建立完善的感染监测体系，及时发现ESBLS菌感染的病例，并采取相应的隔离和防控措施。
同时，医生应根据药敏试验结果合理选择抗生素，并避免滥用和不当使用抗生素，以减少ESBLS菌的选择压力。
结论ESBLS菌是一类耐药性较强的革兰阴性细菌，其耐药机制主要是通过产生ESBLS酶来降解β-内酰胺类抗生素。
多重耐药菌的判定与抗菌药物的选择
多重耐药菌的判定与抗菌药物的选择《多重耐药菌医院感染预防与控制技术指南（试行）》（卫办医政发﹝2011﹞5号）中多重耐药菌（multi-drug resistant organism，MDRO）的定义为：主要是指对临床使用的三类或三类以上抗菌药物同时呈现耐药的细菌。
由多重耐药菌引起的感染呈现复杂性、难治性等特点，主要感染类型包括泌尿道感染、外科手术部位感染、医院获得性肺炎、导管相关血流感染等。
近年来，多重耐药菌已经成为医院感染重要的病原菌。
一、常见多重耐药菌1.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）2.耐万古霉素肠球菌（VRE）3.产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌4.耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌（CRE）5.耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌（CR-AB）6.多重耐药/泛耐药铜绿假单胞菌（MDR/PDR-PA)二、多重耐药菌判定标准在2010年美国、瑞典、以色列、希腊、荷兰、瑞士、澳大利亚等国的一些专家共同提出的关于MDR(multidrugresistant)、XDR(extensivelydrugresistant)、PDR(pandrugresistant)术语国际标准化建议（草案）的基上，Magiorakos等专家正式发表了MDR（多重耐药）、XDR（泛耐药）、PDR（全耐药）耐药菌暂行标准定义。
1.葡萄球菌属MDR、XDR、PDR定义标准定义MDR、XDR、PDR葡萄球菌属的抗菌药物类别及代表性药物见表1。
1.1 MDR(1)只要是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)就可以定义为MDR;(2)对表1中17类抗菌药物中的3类或3类以上（每类中的1种或1种以上)抗菌药物不敏感。
1.2 XDR对表1中17类抗菌药物中的15类或15类以上(每类中的1种或1种以上)抗菌药物不敏感。
1.3 PDR对表1中所有代表性抗菌药物均不敏感。
2.肠球菌属MDR、XDR、PDR定义的标准定义MDR、XDR、PDR肠球菌属的抗菌药物类别及代表性药物见表2。
院内感染革兰阴性杆菌ESBLs检测及耐药分析
院内感染革兰阴性杆菌ESBLs检测及耐药分析【摘要】目的监控革兰阴性杆菌超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的耐药特点，为产ESBLs细菌的医治提供依据。
方式用双纸片协同实验检测116株大肠埃希菌和85株肺炎克雷伯菌产ESBLs的情形，并用K B纸片扩散法对其耐药性进行检测。
结果产ESBLs大肠埃希菌为36株,阳性率为%；产ESBLs肺炎克雷伯菌为27株，阳性率为%；ESBLs阳性株均对亚胺培南灵敏，对多种抗生素的耐药率高于ESBLs 阴性株。
结论吉林地域革兰阴性杆菌ESBLs的检出率高并呈多重耐药性。
临床医治中应严格把握抗菌药物应用指征,并动态监测其耐药性变迁，避免产ESBLs菌株的局部流行。
【关键词】肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；ESBLs；抗菌药物；耐药性超广谱β内酰胺酶(Extended spectrum βlactamases,ESBLs)是由质粒介导的一类能够水解甲氧亚氨基β内酰胺类抗生素和单酰胺类抗生素的β内酰胺酶［1］。
自1983年德国第一次报导产ESBLs 菌株以来，国内外不断有检出产ESBLs菌的报导。
本研究检测了吉林地域2006年8月～2007年2月住院患者标本中分离出的116株大肠埃希菌和85株肺炎克雷伯菌产ESBLs情形，并应用K B纸片扩散法检测其对多种抗生素的耐药性，现报导如下。
1 材料与方式材料来源搜集吉林地域2006年8月～2007年2月住院患者标本，经VITEK60型全自动细菌分析仪鉴定，其中116株大肠埃希菌（痰标本37株，尿标本37株，伤口分泌物42株），85株肺炎克雷伯菌（痰标本42株，分泌物43株）。
质控菌株为大肠埃希菌(ATCC 25922)和肺炎克雷伯菌（ATCC 700603）。
试剂亚胺培南、阿莫西林/棒酸、头孢吡肟纸片(英国Oxiod公司)；阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、氧氟沙星、氨曲南、氨苄西林、哌拉西林、头孢他啶、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢呋新、头孢曲松、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林三唑巴坦、复方新诺明抗生素纸片(中国药品生物制品检定所)；M H琼脂(中科院上海昆虫科技开发公司)。
临床常见多重耐药菌判定方法
临床常见多重耐药菌判定方法抗菌药物广泛应用于医疗卫生、农业养殖领域，在治疗感染性疾病挽救患者生命、防治动物疫病提高养殖效益以及保障公共卫生安全中，发挥了重要作用。
但是，由于多种因素影响，细菌耐药问题日益突出，不仅使抗菌药物逐步失效，而且可能导致出现无药可治的多重耐药菌。
细菌耐药已经成为全球公共健康领域面临的一项重大挑战，引起了我国及国际社会的广泛关注。
世界卫生组织、世界动物卫生组织，以及美国、欧盟、英国等国际组织、国家和地区纷纷采取了积极措施加以应对。
所谓细菌的耐药性，是指细菌多次与药物接触后，对药物的敏感性减小甚至消失，致使药物对耐药菌的疗效降低甚至无效。
1、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）（国家指标）判断方法：药敏单上标注苯嗖西林耐药。
2、耐万古霉素肠球菌（VRE）（主要为粪肠球菌和屎肠球菌）（国家指标）判断方法：药敏单上标注万古霉素耐药。
3、产超广谱B内酰胺酶（ESBL）肠杆菌科细菌克雷伯菌属及大肠埃希菌最为多见，也见于变形杆菌属等肠杆菌。
判断方法：药敏单上标注ESBL阳性。
4、耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌CRE（碳青霉烯类耐药肠杆菌预防与控制标准WS/T826—2023）（国家指标）对亚胺培南、美罗培南、厄他培南、多尼培南等任一碳青霉烯类抗菌药物耐药的肠杆菌，或是产生耐碳青霉烯酶的肠杆菌。
注：碳青霉烯类耐药肠杆菌也包括对亚胺培南天然不敏感菌，而对除亚胺培南以外的任一碳青霉烯类抗菌药物耐药的摩根菌、变形杆菌、普罗威登斯菌等摩根菌科细菌。
主要为大肠埃希菌、克雷白氏杆菌、奇异变形杆菌)。
判断方法：药敏单上标注碳青霉烯类耐药5、耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌(CR-AB)/铜绿假单胞菌(CR-PA)(国家指标)判断方法：药敏单上标注碳青霉烯类耐药6、多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)/铜绿假单胞菌(MDR-PA)判断方法：药敏单上标注头泡菌素类、碳青霉烯类、喳诺酮类、氨基糖首类、酶抑制剂类等5类中的3类及3类以上耐药的即是此类耐药菌；如果是5类均耐药即为泛耐药的鲍曼不动杆菌(PDR-AB)/铜绿假单胞菌(PDR-PA)。
多重耐药菌医院感染监测及管理制度
多重耐药菌医院感染监测及管理制度多重耐药菌（Multidrug-resistant organisms，MDROs）是指对多种抗菌药物耐药的细菌，如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌（ESBLs）、碳青霉烯酶产生肠杆菌（CRE）等。
这些菌株具有高度传染性和致病性，易在医疗机构内引起院内感染，对患者健康和医疗质量造成严重威胁。
为了有效监测和管理多重耐药菌的院内感染，制定和执行一套科学的多重耐药菌医院感染监测及管理制度是非常重要的。
一、监测多重耐药菌2.建立标本采集和送检规范：指导医务人员正确采集标本，如血液、呼吸道、尿液、伤口等。
确保标本质量，避免假阳性或假阴性结果的发生。
3.建立标本处理和实验室检测方法：规定标本处理和实验室检测方法，包括细菌培养、细菌鉴定和耐药性测试等。
严格进行质量控制，确保检测结果准确可靠。
4.建立感染和耐药信息数据库：建立感染和耐药信息的数据库，对监测结果进行整理和分析，及时掌握多重耐药菌的流行趋势和分布情况。
二、管理多重耐药菌1.强化感染控制措施：制定和执行感染控制措施，如手卫生、个人防护、环境清洁、消毒灭菌等。
加强对医务人员及患者的培训和宣教，提高大家的感染控制意识。
2.制定感染管理方案：建立多重耐药菌感染的预防和控制管理方案，包括各临床科室感染控制管理流程、感染防治制度及操作规范等。
明确各部门的职责和任务，确保感染管理的协同推进。
3.加强抗生素合理使用：加强抗生素的合理使用和抗生素监测工作，制定并严格执行抗生素使用指南，减少不必要的抗生素使用，合理选择抗生素，防止抗生素的滥用和误用。
4.实施感染预防措施：采取一系列有效的感染预防措施，如手卫生、环境消毒、器械灭菌等。
对高危患者采取特殊措施，如单间隔离、定点医院感染监测、抗菌药物管理等。
5.建立感染报告制度：建立感染报告制度，对院内感染进行及时报告，并进行流行病学调查和风险评估。
及时采取控制措施，防止感染的传播和扩散。
esbls的名词解释
esbls的名词解释ESBLs（extended-spectrum beta-lactamases）是一种β-内酰胺酶，它能够水解一类广谱β-内酰胺类抗生素，包括第三代头孢菌素和氟喹诺酮类药物。
ESBLs产生的细菌株对常用的抗生素产生了耐药性，给医疗工作带来了巨大的挑战。
ESBLs最早于1980年在德国被发现，随后在世界范围内广泛传播。
ESBLs一旦广泛传播，会导致细菌菌株之间的传播迅速，而这些细菌菌株也变得对药物治疗具有高度抗药性。
目前已经发现的ESBLs大约有400个亚型，其中有些亚型已经迅速蔓延，并且表现出多重耐药性。
ESBLs主要存在于革兰阴性菌中，如大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌等，这些细菌经常导致呼吸道、泌尿道、血液感染等疾病。
ESBLs基因主要位于细菌染色体或质粒中，通过水平基因转移方式在不同细菌中传播。
这导致了不同医疗环境内的ESBLs感染病例不断增加，加重了公共卫生问题。
ESBLs的耐药机制主要是由于它在细菌细胞内产生一种酶，能够破坏抗生素的β-内酰胺的分子结构，使其失去药效。
这种酶的活性较强，能够迅速破坏第三代头孢菌素的结构，从而使细菌对这些药物产生耐药性。
此外，ESBLs还能够导致细菌菌株产生多重耐药性，包括对其他类抗生素的抗药性。
ESBLs的出现给临床治疗带来了挑战。
由于ESBLs产生的耐药性，导致了一些常用的抗生素对感染的疗效下降。
临床医生不得不转向更为强效的抗生素，如碳青霉烯类，但这些药物往往带来更高的毒副作用和费用。
同时，ESBLs的传播和高度耐药性也给医疗环境中的卫生安全带来了风险，容易导致院内感染，特别是在免疫功能较弱的患者群体中。
为了有效控制ESBLs的传播和治疗，一系列的措施被提出。
首先，加强细菌菌株的监测和细菌学实验，在感染控制和感染源追踪上进行精准的管理。
其次，合理使用和规范使用抗生素，减少滥用和过量使用，以降低抗生素产生抗性菌株的风险。
此外，科学开展抗菌药物研发，寻找新的治疗手段和药物，以提高对ESBLs 感染的有效治疗。
产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药分析
产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药分析摘要】目的监测并分析我院2010年1月至2012年12月间临床分离的2341株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药变化,为临床合理使用抗菌药物提供依据。
方法对分离的2341株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,用筛选和确证试验确认产ESBLs菌株,用WHONETS.5软件进行数据分析。
结果 1807株大肠埃希菌产ESBLs的有982株,占54.3％; 534株肺炎克雷伯菌产ESBLs的有206株,占38.6％.产ESBLs菌株的耐药性显著高于非产ESBLs菌株(P＜0.05),产ESBLs菌株呈多重耐药。
结论三年来产ESBLs菌的检出率与耐药率呈总体上升趋势,在抗感染治疗过程中,临床应根据药敏结果合理选择抗菌药物,特别是加强对产ESBLs菌株及其耐药性监测,以减缓细菌耐药性的产生。
【关键词】大肠埃希菌肺炎克雷伯菌 ESBL 耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯氏是社区和医院获得性感染常见的致病菌，临床抗生素的不合理使用往往导致其在抗生素的选择性压力作用下获得并维持耐药性，通过质粒、整合子等多种介质在相同或不同种属之间传播转移，感染的多重耐药情况日益严重，对β-内酰胺类、氨基糖普类、哇诺酮类抗生素的耐药尤其明显，给临床治疗带来很大困难。
现将本院3年来分离的株大肠埃希菌氏和肺炎克雷伯氏的耐药情况和产ESBLs作一分析,以期为临床感染治疗提供有效的实验依据,报告如下：1 材料与方法1.1标本来源：取自2010年1月～2012年12月本院门诊及住院患者各类标本,包括痰液、尿、脓液、胆汁、血液、白带等。
1.2采用法国生物梅里埃ATP细菌分析仪和配套ID32E鉴定卡。
1.3 药敏实验：18种抗生素纸片由英国Oxoid公司提供。
用纸片扩散法(K-B)法进行常规药敏检测, 药敏结果判断及质量控制采用美国NCCLS2012年标准。
多重耐药菌ESBLS的概念及检验方法
耐药特点如果临床出现产ESBLs菌株，则对青霉素类、第三代头孢菌素(头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢曲松等)、单环β-内酰胺类抗生素(氨曲南)耐药，ESBLs在实验室有一专门的检测方法，如果病人的药敏报告单已注明为产ESBLs菌株，则表明已经实验室确证。
如果病人药敏报告单未注明为产ESBLs菌株，三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素中有一种MIC≥2ug/ml，或符合CAZ≤22mm、ATM≤27mm、CTX≤27mm、CRO≤25mm其中一个，则提示菌株可能产ESBLs，这种情况下，即使实验室报告为敏感的第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素，在临床也不推荐使用。
预防大肠杆菌互传播，导致临床高死亡率及高比率持续性定殖，应充分引起注意。
因此，在治疗时，减少第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的应用，可以显著降低产ESBLs菌株的出现。
选择治疗哌拉西林/他唑巴坦首先，一旦确定为产ESBLs菌株，应立即停止使用第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的治疗。
对付产ESBLs菌株，最有效的抗生素为碳青霉烯类，亚胺培南、美罗培南等较为常用。
其次，头霉素类中的头孢西丁、头孢美唑等对其也有效。
因为ESBLs活性可以被克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦等β-内酰胺酶抑制剂所抑制，所以，也可以选择β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂的混合制剂，如替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等，但如果细菌同时产ESBLs和AmpC酶，这种方法就没用了，因为AmpC酶可以水解以上抗菌药物，且其活性不被克拉维酸、舒巴坦等β-内酰胺酶抑制剂所抑制。
检测方法目前检测ESBLs的常用方法有双纸片协同试验(即阿莫西林双纸片协同试验与替卡西林双纸片协同试验，以NCCLS纸片表型确证试验测定结果为标准，筛选出产ESBLs)、纸片表型确证试验、琼脂稀释法确证实验、三维试验等。
折叠扩散法1.筛选试验:选用头孢泊肟、头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟或头孢曲松(每片含量均为30μg)药敏纸片中的至少2种,用苗勒-欣顿(MHA)琼脂,标准纸片扩散法测试抑菌环直径,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1997年标准进行判断。
多重耐药菌监测与防控
BLAC：β -内酰胺酶阳性 ESBL：超广谱β -内酰胺酶阳性 NEG：阴性 POS：阳性
3
4
敏感性：环丙沙星>厄他培南>丁胺卡那霉素?
MIC中敏范围：1-4； 4-16 16-64
5
头孢西丁筛选
用于筛查MRS。
6
可诱导的克林霉素
葡萄球菌对克林霉素的耐药包括两种类型： 结构耐药和诱导耐药，后者通过一般的药 敏试验无法检测。我们细菌培养与药敏报 告中的“可诱导的克林霉素”主要用于检 测葡萄球菌对克林霉素的诱导耐药。 当该试验报告为阳性时，说明克林霉素极 可能已产生诱导耐药，即使药敏结果显示 对克林霉素敏感，也不建议临床大夫使用 克林霉素。
多重耐药菌监测与防控
乳山市人民医院检验科 侯盼飞
1
细菌药敏报告部分代码解释
S：敏感（sensitive） R：耐药 （resistance） I：中敏（intermediate） N/R：结果不报告。临床上不要考虑此药 MIC：最低抑菌浓度，能抑制细菌生长的 最低抗生素浓度。 区别于纸片法抑菌圈（越大越敏感） 对不同抗生素MIC没有可比性。如大肠埃 希菌对氨曲南MIC=8为敏感，对环丙沙星 MIC=4即为耐药。
临床常用抗生素仅对氨基糖苷类敏感
30
MR-AB
31
感染现状
乳山市人民医院2013年第一、二、 三季度多重耐药菌检出情况
32
耐药菌、耐药率逐年增加
18.6% 41.9%
2005年
32.2%
44%
59.3%
2006年
2007年 2008年 2009年
2005-2009年上海某医院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率变化
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多重耐药菌ESBLS的概念及检验方法
esblsESBLs是英文”Extended Spectrum Beta-Lactamases”的缩写，中文翻译为”超广谱β-内酰胺酶".大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌等通常最易生产,其次，阴沟肠杆菌、粘质沙雷氏菌、弗劳地枸橼酸菌、绿脓杆菌也可生产。
其特点是可以水解灭活青霉素类抗生素、头孢菌素（主要为第三代头孢菌素，如头孢他啶、头孢哌酮等，马斯平等除外）和单环β-内酰胺类抗生素(氨曲南、卡芦莫南等），通常不水解头霉素类(头孢西丁、头孢美唑等)和碳青霉烯类（亚胺培南、美罗培南等）。
其活性可以被克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦等β—内酰胺酶抑制剂所抑制。
我国的产ESBLs菌株主要是分解头孢噻肟的CTX—M型。
耐药特点如果临床出现产ESBLs菌株，则对青霉素类、第三代头孢菌素（头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢曲松等)、单环β—内酰胺类抗生素(氨曲南）耐药，ESBLs在实验室有一专门的检测方法，如果病人的药敏报告单已注明为产ESBLs菌株，则表明已经实验室确证。
如果病人药敏报告单未注明为产ESBLs菌株，三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素中有一种MIC≥2ug/ml，或符合CAZ≤22mm、ATM≤27mm、CTX≤27mm、CRO≤25mm 其中一个，则提示菌株可能产ESBLs,这种情况下，即使实验室报告为敏感的第三代头孢菌素和单环β—内酰胺类抗生素,在临床也不推荐使用。
预防第三代头孢菌素和单环β—内酰胺类抗生素的广泛应用是导致产ESBLs菌株出现及传播的主要因素，此外，尚有其它因素.若临床出现产ESBLs菌株，会在病人和医院之间及不同菌株之间相大肠杆菌互传播,导致临床高死亡率及高比率持续性定殖,应充分引起注意。
因此，在治疗时，减少第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的应用,可以显著降低产ESBLs菌株的出现.选择治疗哌拉西林/他唑巴坦首先，一旦确定为产ESBLs菌株，应立即停止使用第三代头孢菌素和单环β—内酰胺类抗生素的治疗。
esbls名词解释
esbls名词解释ESBLs名词解释ESBLs是指“Extended-Spectrum Beta-Lactamases”（扩展谱β-内酰胺酶），是一种重要的药物耐药性机制。
ESBLs属于抗生素的β-内酰胺酶家族，主要对第3代头孢菌素（如头孢曲松、头孢噻肟等）以及β-内酰胺酶抑制剂类药物失去了敏感性，致使细菌产生多重抗药性。
下面分步骤阐述ESBLs的相关内容：1. ESBLs的功能和作用ESBLs是一种酶类，能够有效地将靶抗生素分解，从而使得含有ESBLs的细菌对该类抗生素失去敏感性，产生抗药性。
ESBLs主要针对第3代头孢菌素，如果细菌携带ESBLs基因，即使使用高剂量第3代头孢菌素药物，也可能无法抵御细菌的侵袭，从而导致严重的感染。
2. ESBLs的检测方法目前，常见的ESBLs检测方法包括双峰环氧酶试验法、杀菌环法和酶联免疫吸附法。
其中，双峰环氧酶试验法和杀菌环法是常规的ESBLs检测方法，酶联免疫吸附法则是一种高效、快速而准确的检测手段。
3. ESBLs的临床应用ESBLs是一种耐药性机制，在临床中的应用比较有限。
如果患者所患疾病为ESBLs阳性细菌导致的感染，常规的第3代头孢菌素并不能有效遏制细菌的生长，因此需要通过其它药物的联合应用才能达到理想的治疗效果。
此外，对于一些严重的感染，还需要进行个体化应用，严密监测疗效和药物副作用，同时注意合理用药和预防其它细菌抗药性的产生。
4. ESBLs的预防和控制ESBLs的预防和控制是重中之重。
在预防上，应该严格控制、规范抗生素使用，尽可能减少药物的不必要使用，同时鼓励医生进行更为精确的病原微生物检测。
在控制上，应加强医疗单位和社区的感染防控，常规进行病原菌监测，落实消毒、隔离和防护措施，提高医疗机构的感染控制水平，从源头上防止ESBLs的扩散和产生。
总之，ESBLs的产生对医疗工作者和公众来说都是一个重大挑战，需要我们加强对其特性和控制手段的认识，同时不断研发和应用新的药物和疗法，提高对抗菌药物和细菌感染的防控水平。
产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性分析
产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性分析发表时间：2019-03-12T09:48:02.243Z 来源：《中国结合医学》2019年第01期作者：周薛英[导读] 现对2007年1月至2009年12月分离得到的产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性进行分析，为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。
无锡市梁溪区南禅寺街道社区卫生服务中心（原无锡市老年病医院检验科）邮编： 214001 随着第三代头孢菌素的广泛大量使用，细菌因产生超广谱β-内酰胺酶致病菌对抗生素的耐药是临床抗感染治疗过程中经常面临的棘手问题。
抗生素耐药不仅仅是一个重要的医学问题，且已经逐渐发展成为一个严重的社会问题。
抗生素的滥用问题造成了耐药菌株的大量出现，给临床消炎和抗感染治疗造成了很大困难。
现对2007年1月至2009年12月分离得到的产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性进行分析，为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。
主要执行过程1 资料与方法1.1 菌株来源菌株为2007年1月至2009年12月住院患者的标本中分离的大肠埃希菌。
1.2 菌种鉴定参照《全国临床检验操作规程》分离培养。
临床标本鉴定方法均经常规鉴定技术鉴定，采用法国Bio-Merieux公司GNB 鉴定卡确认。
1.3 药敏试验方法采用K-B纸片扩散法,培养基采用M-H琼脂。
药敏纸片头孢他啶(CAZ)、头孢他啶+克拉维酸(CD02)、头孢噻肟(CTX)、头孢噻肟+克拉维酸(CD03)均为英国Oxoid公司产品。
GNB鉴定卡、和 MH 培养基 ( 干粉 ) 均为法国Bio-Merieux公司产品。
其他药敏纸片为杭州天和微生物试剂有限公司产品,M-H培养基由本科室自行配制,操作方法与判断标准均严格按美国临床实验室标准化研究所美国临床实验室标准化委员会(CLSI/NCCL S)标准。
1.4 ESBLs检测方法抗生素纸片组合为CAZ和CD02，CTX和CD03。
按标准KB法操作，35 ℃培养过夜。
多重耐药相关知识概念(简要)
多重耐药菌检测与结果解释一多重耐药菌定义1多重耐药细菌：对临床使用的三类或三类以上（每类中一种或以上）抗菌药物同时呈现耐药的细菌。
2泛耐药细菌：细菌对大多抗菌药物不敏感，只有一两种药敏感，临床很少药可选用的细菌。
3全耐药细菌：对所有抗菌药物耐药的细菌。
临床常见多重耐药菌MRSA耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ESBLS 产超广谱β-内酰胺酶阴性杆菌（大肠埃希氏菌、克雷伯氏菌、奇异变形杆菌）VRE 耐万古酶素肠球菌多重耐药铜绿假单胞菌多重耐药鲍氏不动杆菌二各类多重耐药菌知识简介(一）MRS多重耐药葡萄球菌1、葡萄球菌耐药机制（1）.MRS对甲氧西林等耐青霉素酶的葡萄球菌，称为甲氧西林耐药的葡萄球菌（MRS），其耐药机制为葡萄球菌细胞内含有mecA基因，介导产生新的青霉素结合蛋白2a（PBP2a），致使与β-内酰胺类药物亲和力减低所致。
（2）.MSS相应不含有mecA基因的葡萄球菌因对甲氧西林等β-内酰胺类药物敏感，称为甲氧西林敏感葡萄球菌。
2、检测方法（略）3.结果解释苯唑西林敏感：提示对青霉素酶稳定的青霉素（氯唑西林，双氯西林，β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物，头霉素，碳青霉烯类抗生素）敏感。
苯唑西林耐药：提示对所有β-内酰胺类抗生素耐药，即使体外敏感，也不能报告敏感。
MRS对全部β-内酰胺类抗生素耐药，对大环内酯类、氨基糖苷类、喹诺酮类常常同时耐药，糖肽类抗菌药物仍为治疗MRSA、MRSE、MRCNS的最佳选择。
MRSA：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSE：耐甲氧西林表皮葡萄球菌MRCNS：耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（二）ESBLS 产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌（大肠埃希菌，克雷伯氏菌，奇异变形杆菌）1耐药机制质粒介导的β-内酰胺酶，超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）（1）.灭活（水解）超广谱β-内酰胺药物-通过TEM-1、TEM-2、SHV-1的突变产生-ESBLs有很多种不同敏感谱的酶型（TE M≈150种；SHV≈100种；CTX-M≈50种）（2.）不水解头霉素类（3.）可被β-内酰胺酶抑制剂抑制（如克拉维酸）携带ESBL基因的质粒会同时携带多个耐药基因--氨基糖苷类，甲氧苄啶-磺胺甲恶唑，氟喹诺酮类，氯霉素，四环素产ESBL菌株导致的血流感染通常与高的死亡率相关在医院和护理室的爆发流行-对感染控制很重要2、检测方法（略）3、ESBLs检测结果解释一但产生ESBL，即对所有青霉素类、头孢菌素类和氨曲南耐药，但对碳青霉烯类、抑制剂复合类抗菌药物和头霉素类敏感。
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耐药特点
如果临床出现产ESBLs菌株，则对青霉素类、第三代头孢菌素(头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢曲松等)、单环β-内酰胺类
抗生素(氨曲南)耐药，ESBLs在实验室有一专门的检测方法，如果
病人的药敏报告单已注明为产ESBLs菌株，则表明已经实验室确证。
如果病人药敏报告单未注明为产ESBLs菌株，三代头孢菌素和单环
酰胺类抗生素中有一种MIC≥2ug/ml，或符合CAZ≤22mm、
ATM≤27mm、CTX≤27mm、CRO≤25mm
其中一个，则提示菌株可能产ESBLs，这种情况下，即使实验室报
告为敏感的第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素，在临床也不
推荐使用。
预防
大肠杆菌互传播，导致临床高死亡率及高比率持续性定殖，应充分引起注意。
因此，在治疗时，减少第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的应用，可以显著降低产ESBLs菌株的出现。
选择治疗
哌拉西林/他唑巴坦首先，一旦确定为产ESBLs菌株，应立即停止使用第三代头孢菌素和单环β-内酰胺类抗生素的治疗。
对付产ESBLs菌株，最有效的抗生素为碳青霉烯类，亚胺培南、美罗培南等较为常用。
其次，头霉素类中的头孢西丁、头孢美唑等对其也有效。
因为ESBLs活性可以被克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦等β-内酰胺酶抑制剂所抑制，所以，也可以选择β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂的混合制剂，如替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等，但如果细菌同时产ESBLs和AmpC酶，这种方法就没用了，因为AmpC
酶可以水解以上抗菌药物，且其活性不被克拉维酸、舒巴坦等β-内酰胺酶抑制剂所抑制。
检测方法
目前检测ESBLs的常用方法有双纸片协同试验(即阿莫西林双纸片协同试验与替卡西林双纸片协同试验，以NCCLS纸片表型确证
试验测定结果为标准，筛选出产ESBLs)、纸片表型确证试验、琼脂稀释法确证实验、三维试验等。
折叠扩散法
1.筛选试验:选用头孢泊肟、头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟或头
孢曲松(每片含量均为30μg)药敏纸片中的至少2种,用苗勒-欣顿(MHA)琼脂,标准纸片扩散法测试抑菌环直径,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1997年标准进行判断。
凡头孢泊肟或头孢他啶的抑菌环直径≤22mm,头孢曲松≤25mm,氨曲南或头孢噻肟≤27mm,均
应高度怀疑为ESBLs菌株,应进一步作确认试验来加以确诊。
2.确认试验:用头孢他啶(每片30μg)和头孢他啶加克拉维酸(30μg 和10μg);头孢噻肟(每片30μg)和头孢噻肟加克拉维酸(30μg和
10μg);分别测量2种纸片单独及加克拉维酸的抑菌环直径。
加克拉维酸较不加克拉维酸的抑菌环直径≥5mm可确认为ESBLs菌株。
质控菌株:大肠埃希菌ATCC25922(头孢他啶:头孢他晓+克拉维酸≤2mm;
肺炎克雷伯菌ATCC700603(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸
≥5mm)。
折叠最低浓度
1.筛选试验:选用头孢泊肟、头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟或头
孢曲松至少2种以上,用阳离子增强的MH肉汤(标准肉汤稀释法)稀释至1mg/L,凡被测菌在上述各管中能够生长(MIC≥2μg/ml),均应高度怀疑为ESBLs,应进一步作确认试验来加以确诊。
2.确认试验:用标准肉汤稀释法测定MIC的方法,按NCCLS(1997)推荐的筛选和确认ESBLs的标准进行判断。
选用头孢噻肟单独稀释(范围0.25~64mg/L)及头孢噻肟(稀释范围相同)加克拉维酸(每管
4mg/L);头孢他啶单独稀释(范围0.25~128mg/L)及头孢他啶加克拉
维酸(每管4mg/L),上述2种药物必须同时进行试验,结果加克拉维酸和不加克拉维酸的MIC差值如≥8倍(3个稀释度),可确认为ESBLs
菌株。
质控菌株:大肠埃希菌ATTC25922(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸<8倍);肺炎克雷伯菌ATCC700603(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸≥8倍)。