2695新用户培训教程

Alliance e2695培训教程

——（用户公司名字）1.e2695色谱系统开机顺序

1)打开电脑进入Windows 7界面；

2)打开e2695，灌注并冲洗系统，保证2998流通池充满液体后再打开检测器；

3)打开色谱软件Empower 3。

2.e2695色谱系统介绍

1)溶剂管理系统：

图1-1 e2695溶剂管理系统

2)进样系统：

图1-2 e2695进样系统

3.e2695标配色谱系统不兼容正相试剂

正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、石油醚等正相溶剂，在使用过程中会对标配的脱气包及密封产生影响，禁止在标配系统中使用上述溶剂（与反相试剂混合后也不可用！！）。若对使用的溶剂存在疑问请咨询400-820-2676（手机）或800-820-2676（座机）。

4.单向阀的清洗

图1-3 2695溶剂输送模块图1-4 单向阀

仪器报错：Lost prime或Bubble found on compression或Bubble found intake时需要对其进行清洗；清洗后如还报相同的错误，需要更换新单向阀700000254。

清洗方法：40~50℃温水（洗盐）→异丙醇（洗乙腈）→甲醇（洗其他杂质）各超声20min。5.在线过滤器及不锈钢溶剂滤头的清洗

图1-5在线过滤器

Wet prime系统压力比经验值大很多或开机自检时报Plunger homing over pressure错误时，建议清洗在线过滤器。经验值：5ml/min时纯甲醇压力100psi左右，纯水150psi左右，纯乙腈85psi左右。清洗后如还报相同错误，需要更换新在线过滤器W AT088084。

清洗：100℃水煮20min→异丙醇超声20min→甲醇超声20min。

6.缓冲盐体系的使用

举例：A路为有机相，B路为缓冲盐，C路为纯水，D路为有机相（一般为甲醇/乙腈）。

另外：Seal wash 要求对流动相的溶解性要好，缓冲盐体系建议用10%有机相溶液；

Needle wash要求对样品的溶解性要好，但不建议有缓冲盐。

1)开机灌注后连接色谱柱，用有机相冲洗系统及色谱柱10~20min；

2)利用10%～30%有机相冲洗系统及色谱柱30min以上；

3)利用实验所需流动相平衡色谱柱至基线稳定或压力稳定（压差<最大压力5%或更小）；

4)进行样品检测；

5)测试完成后将B路放入高比例水相中（70%~90%水），Wet prime后冲洗色谱柱30min以上；

注意：普通的色谱柱不能用100%水冲洗，否则会造成疏水塌陷。

6)将B路放入100%纯水中，Wet prime 5min以上，充分清洗泵头中残留的缓冲盐；

7)将B、C两路放入100%有机相中，Wet prime后冲洗系统，至基线平衡或压力稳定；

8)保证A、B、C、D四路及系统都封存在有机相中后，停流速并关机，完成测试。

7.关于盐析

盐析对分析结果，仪器性能都有很大的影响。在使用缓冲盐时，应当注意：

1)流动相的配比。将缓冲盐与有机相在使用前进行预混，观察是否有盐析出。如发现混合溶

液内有析出，则需要改变流动相的配比。因为流动相在管路内的高压情况下，析出现象会

随压力的增大而严重。

2)每次使用完仪器，都应该冲洗管路，尤其对于走缓冲盐的管路。首先应用纯水将可能析出

的盐排尽，再用甲醇等有机溶剂冲洗，最终保证留在仪器管路内的都是有机溶剂。

8.更换针头清洗密封垫（小抹布）

当测试出现样品残留（空白进样时有样品峰出现）时，建议更换“小抹布”；或半年一更换，视进样频率而定。

9.色谱柱的保存

色谱柱在使用结束后，需用100%乙腈封存后，用堵头（柱盒中原配的堵头，切忌混用）将两端堵好后放入色谱柱盒中，避免碰撞损坏色谱柱，常温保存即可。

10.保护柱的使用

保护柱的目的是保护色谱柱，其具有和相应色谱柱相同的填料，具有专一性，不能混用，否则会影响色谱柱的分离效果。

Empower 3软件培训

1.软件登陆

1)账户：system 密码：manager（不区分大小写）

2)选择登陆界面Quick start

2.软件介绍

1)配置系统：项目/节点/系统各自功能介绍及系统策略的配置。

2)运行样品：运行样品的条件及软件操作方法/方法组概念。

3)浏览项目：数据处理/报告生成/数据导出及新建报告模板等。

3.配置系统

1)项目：新建/备份/还原项目；Defaults项目不允许修改及做样品。

2)节点：单机版Empower 3指仪器连接的电脑，可通过“属性”查看仪器连接状况。

3)系统：指仪器硬件设备，一般在具有多检测器时需要选择。

4.创建项目

1)创建用于存放原始数据、仪器方法、处理方法、报告方法等的“文件夹”。可根据需求按

人、按实验课题、按时间建立项目。

2)子项目及父项目概念。

3)全面审计追踪概念。

4)项目属性介绍（扩展项目空间）。

5.数据生成及处理

1)方法组

方法组（批处理）

方法用途参数生成存放位置仪器方法采集数据梯度、温度等原始数据通道页处理方法积分图谱峰宽、阈值等处理结果结果页报告方法出具报告报告模板报告/pdf/A4 打印报告导出方法导出数据ASCⅡ、AIA .cdf文件指定位置

2)采集数据→处理数据→打印报告：

A．采集数据

①建立一个仅含仪器方法的方法组，即可进行数据采集；

②单针进样：检测仪器方法的合理性&确定运行时间长短；

③序列进样：Ctrl+D；自动填充；进样过程中的修改。

PS：梯度曲线

B．处理数据

①建立处理方法

a.峰宽、阈值、积分区域、最小峰高、最小峰面积、系统适应性等；

b.2D数据——处理方法；3D数据——处理方法组。

②外标法定量

a.用浓度最低标准品的色谱图建立处理方法；

b.赋值；

c.校正定量（①先生成校正曲线再校正；②直接校正定量）。

C．打印报告

①如何选择合适的报告模板；

②如何修改订制自己的报告模板。