五种电泳技术的比较
分子生物学中的电泳技术
分子生物学中的电泳技术电泳技术是分子生物学领域的一种非常有用的工具。
实验室普遍使用它来分离和分析基因和蛋白质。
本文将介绍电泳技术的原理、应用以及最新发展。
一、电泳技术的原理电泳技术利用电场力驱动化学物质在凝胶或缓冲液中移动的原理。
具体来说，将样品装入凝胶或缓冲液中，接上外加电场，然后根据其分子的大小和电荷等特征，在凝胶或缓冲液中发生电泳运动。
运动的速度取决于物种的电荷和面积，因此可以通过电泳技术将样品分离成多个基于大小、电荷和特定的分子特征的带。
二、电泳技术的类型有好几种不同种类的电泳技术。
其中，凝胶电泳是最常见的一种，可以用来分离 DNA、RNA、蛋白质等。
凝胶电泳中，常用的凝胶材料包括聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）和琼脂糖凝胶（agarose）等。
PAGE电泳通常用于分离蛋白质，由于其具有高分辨率和优异的分离能力，常用于研究蛋白质结构的鉴定。
琼脂糖凝胶电泳常用于 DNA 和 RNA 分离，这是因为琼脂糖可以形成空气孔，从而隔开 DNA 和 RNA 的碱基对。
三、电泳技术的应用电泳技术是许多分析基因、蛋白质和其他生物分子的各种实验室技术的核心。
以下是一些电泳技术应用的例子。
1. 分离 DNA 片段电泳技术用于分离 DNA 片段是分子生物学中最基本的应用之一。
通过将 DNA 片段放在琼脂糖凝胶中，可以通过检查带的大小来区分和识别不同的DNA 片段。
这种方法可以用来识别特定的基因，了解基因在不同个体中的表达情况，识别变异对健康的影响等。
2. 分离蛋白质蛋白质凝胶电泳是分离、检测和鉴定蛋白质最广泛的方法。
在凝胶中进行蛋白质电泳后，带上每个带中都含有相同大小和特定蛋白质的不同量。
这种技术可以用于分析蛋白质的组成和克隆纯化鉴定等。
3. 快速核酸定性检测快速核酸定性检测是电泳技术在分子诊断中的重要应用。
如今，已出现了一些新的电泳技术，如毛细管电泳和片段长度分析，这些技术能够更快地分析样品中的 DNA 和 RNA 等分子。
电泳技术
1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；
2）PH中性或易调为中性；
3）浓度大时渗透压不大； 4）对细胞无毒。
1. 速率区带离心度沉降
用途：分离密度相近而大小不等的细胞或颗粒。 特点：介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离 生物颗粒的最小密度。
原理：介质密度梯度平缓，分离物按各自的沉降系数 以不同的速度沉降而达到分离。
二、离心机的结构与分类 (一）分类 1.低速离心机：转速<6kr/min 2.高速离心机：转速10~25kr/min的离心机 称为。 3. 超 速 离 心 机 ： 转 速 >25kr/min ， 离 心 力 >89Kg；最高转速可达100kr/min，离心力 超过500kg。
一、离心技术原理 在离心力场中，颗粒在离心运动中受离心力、 重力、摩擦力及浮力的共同作用。 在离心力场中，如果颗粒的密度大于周围介 质的密度，则颗粒发生沉淀；反之发生漂浮。 无论发生沉降与漂浮，离心力的方向总与浮 力的方向相反，离心力加大时，反向的两个 力也增大，当离心力与反向力达到平衡时， 可人力的沉降（浮力）加速度为零，直到各 组分达到分离目的。
第三节
电泳技术
电泳技术：利用带电粒子在电场作用下 定向移动的特性，对混合物组进行分离、 纯化和测定的一项技术。 电泳：溶液中带电粒子在电场中定向移 动的现象称为电泳
1 电泳：带电粒子在电场中向着与其本身电荷 相反的电极移动的过程。 2 电泳技术优点：快速、准确、重现性好 3 电泳方法分类 按电场分：常压（<500V，适用大分子）、高 压（>500V，适用小分子） 支持体分：自由电泳、区带电泳 仪器装置分：水平式、垂直式、悬架式 4 电泳条件：水溶液（缓冲液）、支持物（区 带电泳）、电场（电泳仪、电泳槽）
电泳高考知识点总结
电泳高考知识点总结电泳是一种常见的生物技术实验方法，广泛应用于基因分析、蛋白质研究以及法医学等领域。
在高考生物考试中，电泳是一个重要的知识点。
本文将对电泳的相关知识进行总结，以帮助考生更好地掌握这一内容。
一、电泳的基本原理电泳是利用物质在电场作用下的迁移运动的原理，通过电场的引导，使待分离的生物分子在凝胶中迁移，从而实现分离和检测。
电泳过程中，需要考虑电场强度、凝胶类型以及DNA的大小等因素。
1. 凝胶电泳凝胶电泳是最常见的电泳方法之一。
凝胶中含有孔隙结构，根据分子的大小差异，使得分子在凝胶中的迁移速度不同，从而实现分离。
常用的凝胶有瓊脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等。
2. 离子电泳离子电泳是利用溶液中带电粒子在电场中的迁移来实现分离的方法。
它主要应用于离子的检测和分离，如常见的离子交换色谱。
二、电泳的应用领域电泳在生物学和医学领域有着广泛的应用。
主要包括基因分析、蛋白质研究和法医学等方面。
1. 基因分析基因电泳是研究DNA序列和变异的重要方法之一。
通过对DNA片段的分离，可以实现基因突变的检测、亲子鉴定等应用。
2. 蛋白质分析蛋白质电泳是研究蛋白质的结构和功能的重要手段。
通过对蛋白质的分离和鉴定，可以了解其复杂的结构和功能特点。
3. 法医学应用电泳在法医学中也有重要应用。
例如，通过DNA电泳可以进行犯罪嫌疑人的DNA比对，从而确定罪犯。
三、常见的电泳技术电泳技术发展迅速，现在有多种不同的电泳方法，常见的有聚合酶链式反应（PCR）电泳、蛋白质凝胶电泳和全基因组扩增片段长度多态性（AFLP）等。
1. PCR电泳PCR电泳是将PCR扩增得到的目的序列通过凝胶电泳进行分离和检测的方法。
它可以用于基因检测、突变鉴定等。
2. 蛋白质凝胶电泳蛋白质凝胶电泳是通过凝胶电泳的方式对蛋白质进行分离和检测的方法。
根据蛋白质的大小和电荷，可以实现对蛋白质的精确分离。
3. AFLPAFLP是一种用于检测DNA序列差异的分子生物学技术。
电泳的原理种类及应用
电泳的原理种类及应用1. 电泳的基本原理电泳是一种重要的生物化学分离和分析技术，它利用物质在电场作用下的运动来实现分离。
电泳的基本原理由两个基本过程组成：电解质迁移和溶质迁移。
•电解质迁移：电解质在电场作用下移动的过程。
当外加电场施加在电解质溶液中时，带电离子（正离子或负离子）会受到电场力的作用而移动。
•溶质迁移：溶质分子或离子在电场作用下移动的过程。
溶质的迁移速率取决于其电荷量、形状和尺寸等因素。
2. 电泳的种类电泳技术有多种不同的分类方法，根据分离介质的性质和电泳的原理，我们可以将电泳分为以下几种主要类型：•凝胶电泳：通过凝胶作为分离介质将带电粒子分离的电泳技术。
凝胶可以是聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）或琼脂糖凝胶（agarose）等。
•毛细管电泳：利用毛细管作为分离介质进行电泳，具有高效、快速和高分辨率的特点。
毛细管电泳主要包括毛细管凝胶电泳和毛细管电动色谱。
•等电聚焦电泳：利用电场和溶液pH值差异将带电物质分离的电泳技术。
等电聚焦电泳主要用于蛋白质和肽段的分离和分析。
•二维电泳：结合两种或多种电泳技术进行分离的电泳技术。
常见的二维电泳有二维凝胶电泳（2D-PAGE）和二维液相电泳（2D-LC）等。
3. 电泳的应用电泳作为一种有效的分离和分析技术，在生物医学和生物化学领域得到了广泛的应用。
下面列举一些常见的电泳应用：•蛋白质分离和鉴定：电泳可以有效地将复杂混合物中的蛋白质分离出来，并通过质谱等技术进行准确的鉴定。
•核酸分析：电泳技术可以用于DNA测序、基因突变分析以及核酸杂交等。
•糖类分析：电泳可以用于糖类的定性和定量分析，如糖基化修饰的分析和糖类结构分析等。
•药代动力学研究：利用电泳技术可以有效地研究药物在体内的代谢和转化过程，从而为药物研发和治疗提供依据。
•环境分析：电泳技术可以用于水样、土壤样品等环境样品的污染物分析和监测。
•食品安全检测：电泳可以用于食品中有害物质的检测和分离，如重金属、农药残留和食品添加剂等。
电泳技术
方法类型和操作步骤
（一）双抗体夹心法： 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下： （1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除 去未结合的抗体及杂质。 （2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标 本中的抗原与同相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。 洗涤除去其他未结合的物质。 （3）加酶标抗体：使同相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结 合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量 与标本中受检物质的量正相关。 （4）加底物：酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程 度进行该抗原的定性或定量。 根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结 合物，即可双抗原夹心法测定标本中的抗体。
（四）竞争法
• 竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原 为例，受检抗原和酶标抗原竞争与同相抗体结合，因此结 合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤 如下： • （1）将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤 。 • （2）待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液 ，使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原，则酶标抗 原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原，则 与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合，竞争性地占去 了酶标抗原与固相载体结合的机会，使酶标抗原与固相载 体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原，保温后，酶标 抗原与同相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。 • （3）加底物显色：参考管中由于结合的酶标抗原最多， 故颜色最深，参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代 表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表于标本中抗原 含量越多。
青 衣
（一）醋酸纤维素薄膜电泳法 1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。
酶联免疫技术
酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫 法，或者ELISA法。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后 通过显色来检测。
五种电泳技术的比较
五种电泳技术的比较SDSPAGE名词解释：相对迁移率（Rf）问答题:1.简述SDS-PAGE的基本原理。
2.影响SDS电泳的关键因素有哪些？AGE名词解释1.迁移率2.电渗3.电泳问答题1.影响电泳迁移率的因素有哪些？2.试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。
CAME1.CAME的基本原理是什么？2.CAME分离血清蛋白电泳时应注意哪些问题？PAGE名词解释1.凝胶总浓度2.交联度问答题1.与CAME相比，PAGE有哪些特点。
2.试比较CAME与PAGE操作的区别。
3.简述不连续PAGE的原理。
1.琼脂糖凝胶电泳Agarose Gel ElectrophoresisGel Electrophoresis ：由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳。
特点（characteristic）：1.可以制成非常均匀的凝胶，带电质点在凝胶的孔中泳动。
2. 电泳操作方法简便，电泳速度快。
3. 分辨率高，重复性好，电泳图谱清晰。
4. 适用于生化，免疫等定性定量测定。
（一）优点（advantage)1.因不含硫酸根和羧基，几乎消除了琼脂的电渗。
2.对蛋白质吸附极微，故无拖尾现象。
3.凝胶结构均匀，孔径较大，可用来分离酶的复合物、核酸、病毒等大分子物质。
4.透明度较好，可直接或干燥成薄膜后进行染色。
5.不吸收紫外光，可直接利用紫外光吸收法作定量测定。
6.有热可逆性。
（二）缺点(disadvantage)1.机械强度差，易破碎，浓度不能太低。
2.易被细菌污染，不易保存，临用前配制。
3.琼脂糖支持层上的区带易于扩散，电泳后必须立即固定染色。
4.与PAGE相比，分子筛(molecular sieve)作用小，区带少。
应用1. 适用于大分子的核酸、核蛋白等的分离、鉴定及纯化2. 临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的分离与检测3. 为不同类型的高脂蛋白血症、冠心病等提供生化指标影响迁移的因素the size of the moleculeconformation of the moleculethe agarose concentration of a gelVoltage百分浓度和分辨率限制Most agarose gels are made with between 0.7% (good separation or resolution of large 5–10kb DNA fragments) and 2% (good resolution for small 0.2–1kb fragments) agarose dissolved in electrophoresis buffer.Up to 3% can be used for separating very tiny fragments but a vertical polyacrylamide gel 聚丙烯酰胺is more appropriate in this case.Low percentage gels are very weak and may break when you try to lift them. High percentage gels are often brittle and do not set evenly. 1% gels are common for many applications.琼脂糖凝胶分离血浆脂蛋白原理：血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以琼脂糖凝胶为支持介质，在pH8.6巴比妥缓冲液中电泳，根据各脂蛋白的组成、大小、形状分离成不同区带。
药物分析中的电泳技术的新发展
药物分析中的电泳技术的新发展电泳技术是药物分析领域中一种重要的分离与分析方法。
随着科技的不断发展，电泳技术也在不断创新和进步。
本文将介绍药物分析中电泳技术的新发展，包括毛细管电泳、凝胶电泳和电喷雾质谱联用技术等方面。
一、毛细管电泳在药物分析中的应用毛细管电泳是一种基于电荷和大小的分离技术。
在药物分析中，毛细管电泳常用于药物的质量控制和残留分析。
通过调节毛细管的材料和填充剂类型以及优化运行条件，可以有效地分离和定量分析药物中的杂质和成分。
此外，毛细管电泳还可用于药物颗粒的表征与分析，包括粒径测定、表面电荷分析等。
二、凝胶电泳在药物分析中的应用凝胶电泳是一种常用于核酸和蛋白质分析的电泳技术，而在药物分析中也得到了广泛应用。
凝胶电泳可用于药物活性成分的纯度检验、同种物质的分子量测定以及药物的质量控制等方面。
尤其在蛋白质药物的分析中，凝胶电泳可以实现对蛋白质的定性和定量分析，有利于药物的研发和生产。
三、电泳质谱联用技术在药物分析中的应用电泳质谱联用技术是结合了电泳分离技术和质谱分析技术的一种分析方法。
电泳质谱联用技术能够实现对药物中各种成分的高效分离和准确分析。
通过将毛细管电泳或凝胶电泳与质谱仪相连，可以同时获得分子的分离和质量信息，提高分析的选择性和灵敏度。
这在药物研发、临床药代动力学研究以及药物残留检验中具有重要意义。
四、电泳技术在药物分析中的挑战与展望虽然电泳技术在药物分析领域中已取得了显著的成就，但仍然存在一些挑战。
例如，高性能电泳仪器的价格较高，限制了其在某些实验室和机构的应用；毛细管电泳和凝胶电泳的分离效率和分析速度还可以进一步提高；电泳质谱联用的方法开发和数据处理仍然需要不断改进。
未来，我们可以期待通过技术创新和仪器改进来解决这些问题，进一步推动电泳技术在药物分析中的应用。
总结：药物分析中的电泳技术不断创新和发展，为药物研发、质量控制和残留分析提供了有效工具。
毛细管电泳、凝胶电泳和电泳质谱联用技术等成为药物分析中重要的手段。
电泳技术详解
电泳技术概述电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。
例如蛋白质具有两性电离性质。
当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时，该蛋白质带负电荷，在电场中向正极移动，相反则带正电荷，在电场中向负极移动，只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零，在电场中不向任何一极移动。
电泳现象早在1890年就被发现，1907年有人曾在琼脂中电泳，研究白喉毒素； 1937年由Tiselius制成界面电泳仪，并开始用于蛋白质的研究。
从此，人们才逐渐认识到电泳技术对于生物科学研究是一种重要工具。
然而，界面电泳结构复杂。
价格昂贵难于普及。
1940年左右。
以纸为支持物的电泳问世后，电泳技术得到迅速发展。
电泳技术以支持物分，可分为纸电泳，醋酸纤维素薄膜电泳，淀粉凝胶电泳，琼脂（糖）凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
经凝胶形状分有水平平板电泳，园盘柱状电泳及垂直平板电泳。
各种类型的电泳技术概括如表。
表电泳技术的种类各类电泳技术已经广泛地用于基础理论研究，临床诊断及工业制造等方面。
例如用醋酸纤维薄膜电泳分析血清蛋白，用琼脂对流免疫电泳分析病人血清，为早期诊断原发性肝癌提供资料：用高压电泳分离肽段，研究蛋白质一级结构：用高压电泳和层析结合研究核酸的一级结构。
凝胶龟泳技术在分离分析酶。
蛋白质，核酸等生物大分子方面具有较高的分辩力，为生物化学，分子生物学的发展作出了重大贡献。
基本理论不同的带电颗粒在同一电场中泳动的速度不同。
常用泳动度（或迁移率）来表示。
泳动度是指带电颗粒在单位电场强度下泳的速度。
影响泳动度的主要因素有：1、首先决定于带颗粒的性质，即颗粒所带净电荷的数量，大小及形状。
一般说来，颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中泳动速度快，反之则慢。
泳动度还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，泳动度与颗表面电荷成正比，与介质粘度及颗粒半径反比。
带电荷的高分子在电解质溶液中把一些带有相反电荷的离子吸引在其周围，形成一离子扩散层。
电泳相关知识点总结
电泳相关知识点总结一、电泳的原理电泳是利用电场对带电粒子进行分离的一种技术。
在电泳过程中，带电粒子在电场的作用下向电极移动，根据其电荷大小、尺寸、形状等特性，不同的带电粒子会在电场中移动的速度不同，从而实现了分离。
电泳技术主要包括凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚丙烯酰胺微球凝胶电泳等。
1. 凝胶电泳凝胶电泳是一种利用凝胶作为固相介质，分离带电粒子的技术。
凝胶电泳具有操作简便、分辨率高、适用范围广等优点，因此被广泛应用于蛋白质、核酸等生物分子的分离和检测。
凝胶电泳主要包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚丙烯酰胺微球凝胶电泳等。
2. 聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳是将聚丙烯酰胺作为凝胶的电泳技术。
聚丙烯酰胺凝胶电泳的凝胶参数可以通过改变丙烯酰胺浓度、交联剂浓度、凝胶电场强度等来控制，从而实现对不同大小、形状的带电粒子实现高分辨率的分离。
3. 聚丙烯酰胺微球凝胶电泳聚丙烯酰胺微球凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳相似，不同之处在于它采用了微小的聚丙烯酰胺微球作为固相介质，具有更高的分辨率和更短的电泳时间。
二、电泳的分类电泳根据其分离原理、手段、用途等不同，可以分为直流电泳、交变电泳、梯度电泳等多种类型。
1. 直流电泳直流电泳是利用直流电场对带电粒子进行分离的一种电泳技术。
在直流电泳中，带电粒子受到电场力的作用，向电场的一侧移动，根据其不同的电荷和尺寸，实现了分离。
直流电泳常用于蛋白质、核酸等生物分子的分离和检测。
2. 交变电泳交变电泳是利用交变电场对带电粒子进行分离的一种电泳技术。
在交变电泳中，交变电场的改变可以改变带电粒子的移动方向和速度，从而实现了更好的分离效果。
3. 梯度电泳梯度电泳是一种利用梯度电场对带电粒子进行分离的电泳技术。
在梯度电泳中，通过改变梯度的大小和方向，可以实现对带电粒子的精确分离。
三、电泳仪器电泳仪器是进行电泳实验的必备设备，主要包括电泳槽、电源、电泳系统等。
1. 电泳槽电泳槽是进行电泳实验的主要设备，主要用于装载凝胶、注入电解液、施加电场等。
电泳法
带电粒子在电场中移动的现象称为电泳。
电泳技术即是利用样品中各种带电粒子的
带电性质、分子大小、形状等的差异，在电场
中的迁移速度不同，从而对样品分子进行分离、
鉴定、纯化和制备。在生物学领域，该技术多 一般要求薄板用的活性为Ⅱ ~ Ⅲ级
用于分离，纯化、鉴定蛋白质、核酸等大分子
物质。
电泳的分类
纸电泳
醋酸纤维素电泳
淀粉凝胶电泳
琼脂糖电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.影响电泳迁移率的因素：
1、影响电泳迁移率的外界因素： 电场强度 溶液的pH值 溶液的离子强度 电渗现象 2.影响电泳迁移率的内在因素： 质点所带净电荷的量 质点的大小和形状
迷你垂双垂直电泳槽
3、操作步骤
1. 准备
醋酸纤维素薄膜的预处理：将薄膜小心放入盛有 缓冲液的培养皿内，使其漂浮在液面；用镊子轻压， 使其全部浸入缓冲液内。待膜完全浸透（约半小时） 后取出，夹在清洁的滤纸中间，轻轻吸去多余的缓 冲液，同时分辨出光滑面和粗糙面。 标记：在粗糙面上用铅笔距薄膜条一端 1.5cm 处 划线即为点样线并作好标记，同时标上学号和正负 极。
3.4 毛细管电泳技术
毛细管电泳：使电泳过程在散热效率极高的毛细 管内进行，使焦耳热效应减小，能使用高电压， 全面改善分离质量和提高分析速度。
uap uos uef
阴离子
uap uos
中性分子
uap uos uef
阳离子
4、 CE 的检测器
CE对检测器的要求： 既能作灵敏检测，又不使谱带展宽。（死体积小） 一般采用柱上检测。 CE 检 测 器 方 法
实验室常见的电泳装置
（ 核水 酸平 电电 泳泳 ） （ 蛋 白垂 质直 电 电泳 泳 ）
阳极电泳、阴极电泳对比介绍
阳极电泳、阴极电泳对比介绍在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。
利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。
胶体有电泳现象，证明胶体的微粒带有电荷。
各种胶体微粒的本质不同，它们吸附的离子不同，所以带有不同的电荷。
利用电泳可以确定胶体微粒的电性质，向阳极移动的胶粒带负电荷，向阴极移动的胶粒带正电荷。
一般来讲，金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子，带正电荷；非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子，带负电荷。
因此，在电泳实验中，氢氧化铁胶体微粒向阴极移动，三硫化二砷胶体微粒向阳极移动。
利用电泳可以分离带不同电荷的溶胶。
例如，陶瓷工业中用的粘土，往往带有氧化铁，要除去氧化铁，可以把粘土和水一起搅拌成悬浮液，由于粘土粒子带负电荷，氧化铁粒子带正电荷，通电后在阳极附近会聚集出很纯净的粘土。
工厂除尘也用到电泳。
利用电泳还可以检出被分离物，在生化和临床诊断方面发挥重要作用。
本世纪40年代末到50年代初相继发展利用支持物进行的电泳，如滤纸电贰，醋酸纤维素膜电泳、琼脂电泳；50年代末又出现淀粉凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
目前，电泳技术已广泛应用于分析化学、生物化学、临床化学、药理学、免疫学、微生物学、遗传学等科学中。
1）由于电泳漆的特点，合成的树脂必须是水溶性的。
为了达到树脂水溶的目的，在聚合物分子链上常需引入一定量的强新水性基团。
如：羧基，羟基，醚基等。
由于酯键、羧基和这些亲水性基团的存在，所以阳极电泳漆的耐碱性、耐盐雾性及耐用水性能均不够理想。
2）由于在阳极电泳过程中被涂工件作为阳极，电泳过程中被涂的基体金属及表面处理膜（如磷化膜）在电沉积过程中被析出而混入到漆膜中，这不仅使漆膜色泽变深，而且还降低了漆膜的耐腐性。
3）电泳涂装时，由于在阳极区发生电解产生的氧气对树脂影响很大（主要是对漆液的稳定性），必要时还须加入抗氧剂。
由于阳极电泳存在以上这些问题，于是人们通过研究发明了阳极电泳，那么阴极电泳加工又有什么优点了，我们就一起来看一下吧。
化学分析中的电泳分析技术
化学分析中的电泳分析技术电泳分析技术是一种常用的分离和定量分析方法，广泛应用于分子生物学、药物化学和环境化学等领域。
本文将介绍电泳分析技术的原理、分类、应用和发展趋势。
一、原理电泳分析技术基于带电粒子在电场中的迁移速率不同而进行分离分析。
具体地说，将样品分子或离子溶液放置于电泳缓冲液中，然后通过外加电场，使得样品分子或离子在电场中发生迁移。
根据样品的分子大小、电荷数和电泳缓冲液条件，即可实现分子间的分离。
再通过测量样品的迁移速率或电泳迁移距离，即可定量分析样品中所含的成分。
二、分类根据电泳介质的不同，电泳分析技术可以分为凝胶电泳、毛细管电泳、等电聚焦电泳、两种向电泳等多种类型。
（一）凝胶电泳凝胶电泳是将样品分子在凝胶毛细管或凝胶板上进行分离。
凝胶可以是聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯凝胶、琥珀酸凝胶等，具有分离效率高、分辨率好、方法可靠等优点。
凝胶电泳广泛应用于核酸分离和蛋白质分离等领域。
（二）毛细管电泳毛细管电泳是一种基于微柱形毛细管进行的电泳分析技术。
它具有分离效率高、操作简便、速度快等特点，可以实现超高效毛细管电泳、毛细管等电聚焦电泳、毛细管电泳-电喷雾等多种操作模式。
（三）等电聚焦电泳等电聚焦电泳是一种基于样品分子在pH梯度中进行的电泳分析技术。
它通过电解液中的pH值梯度，在电场中使得样品分子在等电点处停留，实现分离与富集。
等电聚焦电泳不仅可以用于生物大分子如蛋白质和核酸的分析，也可以进行小分子离子的分析。
（四）两种向电泳两种向电泳是一种在同一缓冲液中，通过两种电场方向进行的电泳分析技术。
它不仅可以实现离子、分子迁移的分离分析，还可以通过两种电场方向的变化，探究溶液中的离子迁移速率等物理量，从而更加深入地揭示样品分子性质。
三、应用电泳分析技术广泛应用于分子生物学、药物化学和环境化学等多个领域，包括：（一）核酸分析：电泳技术广泛应用于DNA测序、PCR产物分析、RNA测序等领域。
通过凝胶电泳或毛细管电泳对DNA或RNA进行分离，可以实现DNA测序、切割片段分析等操作。
生物化学中的电泳技术
生物化学中的电泳技术生物化学领域中，电泳技术是一项非常重要的分析工具。
通过电泳技术，我们可以对DNA、RNA、蛋白质等生物大分子进行分离和测定。
本文将介绍电泳技术的原理、种类以及在生物化学中的应用。
一、电泳技术的原理电泳技术是基于生物大分子在电场中的电荷性质而进行的。
生物大分子在电场作用下会向着相反电荷的电极移动。
根据电泳物质的性质不同，电泳技术又可以分为几种不同的类型。
二、琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种常用的DNA和RNA分离方法。
在琼脂糖凝胶中，DNA和RNA根据其大小和形状的不同，会在电场中以不同的速率迁移。
通过对凝胶进行染色，可以观察到DNA和RNA分离的结果。
三、聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳也是常用的一种电泳方法。
与琼脂糖凝胶电泳不同的是，聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用于蛋白质的分离。
在聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质根据其电荷和尺寸的不同，在电场中会形成不同的带状图案。
四、二维电泳二维电泳是一种复杂的电泳技术，常用于蛋白质的分析。
它结合了两种不同的分离方法，通过两个维度上的分离，能够更加准确地确定样品中蛋白质的种类和数量。
五、电泳技术在生物化学中的应用1. DNA测序：电泳技术是测序实验中不可或缺的工具。
通过将DNA片段进行电泳分离，可以确定DNA的序列。
2. 蛋白质研究：电泳技术对于蛋白质的分离和鉴定非常重要。
通过电泳分析，可以得到蛋白质的分子量和电荷性质，为后续的功能研究提供基础数据。
3. 疾病诊断：许多疾病都与DNA或蛋白质的改变有关。
通过电泳技术，可以检测和分析患者体内的特定基因或蛋白质，帮助医生进行疾病的准确诊断。
4. 基因工程：在基因工程领域，电泳技术广泛应用于基因的克隆和转染等实验中，为基因工程的研究提供了重要的实验手段。
六、总结电泳技术作为一项重要的分析工具，在生物化学研究中发挥着不可替代的作用。
通过电泳技术，我们可以对DNA、RNA和蛋白质等生物大分子进行分离和鉴定，从而为生物化学研究提供准确的数据和结果。
电泳技术名词解释
电泳技术名词解释
电泳技术名词解释
1. 常规电泳（Conventional Electrophoresis）：电泳的一种，利用藻糖凝胶中的皂基助溶剂及电场作用，使溶液中的离子及分子被移动，从而实现凝胶中物质的分离及纯化。
2. 表面电泳（Surface Electrophoresis）：一种电泳技术，其原理是利用液滴表面上液体的电分布，使得分子移动，从而实现分子的分离及纯化。
3. 膜电泳（Membrane Electrophoresis）：一种分子离子分离技术，利用电荷交换膜，使溶液中的分子及离子经过离子交换膜，实现其分离及纯化。
4. 层析电泳（Chromatographic Electrophoresis）：一种复合技术，利用层析技术及电场作用实现溶液中分子的分离及纯化。
5. 小孔免疫电泳（Nano-Hole Immunoelectrophoresis）：一种免疫电泳技术，使用超细微孔加以改善，可有效筛选及精细分离物质。
6. 高通量电泳（High Throughput Electrophoresis）：指在一定时间内，可以处理大量样品的电泳技术，提高电泳的采样率及检测速度。
电泳技术的基本原理
电泳技术的基本原理一、电泳技术简介电泳技术是一种常用的分离和分析生物分子的方法，广泛应用于生物学、生物化学、医学等领域。
它基于物质在电场中带电粒子的迁移速率与其电荷量和形状大小成正比的原理，通过电场作用下的迁移来实现分离和分析。
二、电泳的基本原理电泳技术的基本原理是利用电场作用下带电粒子的迁移来实现分离和分析。
在电场作用下，带电粒子会受到电场力的作用而迁移，迁移速率与电荷量和形状大小成正比。
电泳实验中通常使用凝胶或者溶液作为介质，通过调节电场强度和时间，可以实现不同带电粒子的分离和分析。
1. 凝胶电泳凝胶电泳是最常用的电泳技术之一，它利用凝胶作为分离介质。
凝胶可以是聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶等，通过调节凝胶的浓度和孔隙大小，可以实现对不同大小带电粒子的分离。
凝胶电泳通常分为水平电泳和垂直电泳两种方式，水平电泳适用于较短的DNA片段分离，而垂直电泳适用于较长的DNA片段分离。
2. 液相电泳液相电泳是另一种常用的电泳技术，它利用液相介质进行分离。
液相电泳可以分为毛细管电泳和高效液相色谱等多种形式，通过调节液相介质的性质和流动速度，可以实现对不同性质的带电粒子的分离和分析。
液相电泳通常具有分离效率高、分析速度快等优点。
三、电泳实验步骤电泳实验通常包括样品制备、样品加载、电泳操作等步骤。
下面以凝胶电泳为例，介绍电泳实验的基本步骤。
1. 样品制备样品制备是电泳实验的第一步，它包括DNA、蛋白质等生物分子的提取和纯化过程。
样品制备的好坏直接影响到电泳分离的效果，因此需要严格控制样品制备的条件和方法。
2. 准备凝胶凝胶的准备是电泳实验的关键步骤之一。
根据需要分离的生物分子大小，选择合适的凝胶类型和浓度。
凝胶通常需要在缓冲液中加热溶解，然后倒入电泳槽中，待凝胶完全凝固后即可进行下一步操作。
3. 样品加载样品加载是电泳实验的关键步骤之一，它决定了分离的效果。
样品需要与一定的缓冲液混合后，通过微量注射器或者吸管等工具加载到凝胶的孔隙中。
电泳的种类以及应用领域
电泳的种类以及应用领域一、电泳的三种形式分析：等电聚焦电泳是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽中，当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷，向负极移动；若其处在高于其本身等电点的环境中，则带负电向正极移动。
当泳动到其自身特有的等电点时，其净电荷为零，泳动速度下降到零，具有不同等电点的物质最后聚焦在各自等电点位置，形成一个个清晰的区带，分辨率极高。
移动界面电泳是将被分离的离子（如阴离子）混合物置于电泳槽的一端（如负极），在电泳开始前，样品与载体电解质有清晰的界面。
电泳开始后，带电粒子向另一极（正极）移动，泳动速度最快的离子走在最前面，其他离子依电极速度快慢顺序排列，形成不同的区带。
只有第一个区带的界面是清晰的，达到完全分离，其中含有电泳速度最快的离子，其他大部分区带重叠。
区带电泳是在一定的支持物上，于均一的载体电解质中，将样品加在中部位置，在电场作用下，样品中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速度移动，分离成一个个彼此隔开的区带。
区带电泳按支持物的物理性状不同，又可分为纸和其他纤维膜电泳、粉末电泳、凝胶电泳与丝线电泳。
二、电泳的应用范围：1、环保气溶胶也可发生电泳现象，如在水泥、冶金等工厂中，通高压电于含烟尘的气体时，可除去大量烟尘以减少空气污染，净化环境，保护人民健康。
2、刑侦在公安、政法侦审工作中，利用电泳技术检测的结果，对确定案件性质、提供侦察线索和犯罪证据等，常常起着十分重要的作用。
多年来一直用作案现场留下的污迹与嫌疑分子的血型相核对的方法，遇到了一个以上的嫌疑分子是同样的血型时，这种方法就失灵了。
然而利用电泳技术可以从人的体液和其他组织的样品中分离出代表一个人的独特基因组成的一系列谱带，从而能比较准确地鉴别罪犯。
3、医学在医院临床检验中，利用电泳技术分析血清中的酶及同工酶，可以诊断肾病的综合征、心绞痛、肝硬化、肝癌、多发生骨髓瘤、恶性肿瘤、乙型肝炎、慢性肝炎等疾病；分析血色素组份，可以判定血细胞的正常与异常；；测定体液中可能存在微生物、原虫的特异性抗原成份，在抗原成份分离的基础上，寻找所需的单克隆抗体等等。
电泳的方法及原理
电泳技术原理、分类及分析方法点击次数：2798 发布日期：2008-5-17 来源：本站仅供参考，谢绝转载，否则责任自负电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。
电泳技术的基本原理和分类在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。
F＝QE质点的前移同样要受到阻力（F）的影响，对于一个球形质点，服从 Stoke定律，即：F′＝6πrην式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时：F＝F′即 QE＝6πrην可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。
除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。
电泳法可分为自由电泳（无支持体）及区带电泳（有支持体）两大类。
前者包括 Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。
区带电泳则包括滤纸电泳（常压及高压）、薄层电泳（薄膜及薄板）、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶）等。
自由电泳法的发展并不迅速，因为其电泳仪构造复杂、体积庞大，操作要求严格，价格昂贵等。
而区带电泳可用各种类型的物质作支持体，其应用比较广泛。
本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。
影响电泳迁移率的因素⒈电场强度电场强度是指单位长度（cm）的电位降，也称电势梯度。
如以滤纸作支持物，其两端浸入到电极液中，电极液与滤纸交界面的纸长为 20cm，测得的电位降为 200V，那么电场强度为200V/20cm＝10V/cm。
当电压在500V以下，电场强度在 2-10v/cm 时为常压电泳。
电压在 500V 以上，电场强度在20-200V/cm 时为高压电泳。
电泳技术的基本原理和分类
电泳技术的基本原理和分类电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。
电泳技术的基本原理和分类在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。
F＝QE质点的前移同样要受到阻力（F）的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即：F′＝6πrην式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时：F＝F′即QE＝6πrην可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。
除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。
电泳法可分为自由电泳（无支持体）及区带电泳（有支持体）两大类。
前者包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。
区带电泳则包括滤纸电泳（常压及高压）、薄层电泳（薄膜及薄板）、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶）等。
自由电泳法的发展并不迅速，因为其电泳仪构造复杂、体积庞大，操作要求严格，价格昂贵等。
而区带电泳可用各种类型的物质作支持体，其应用比较广泛。
本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。
影响电泳迁移率的因素⒈电场强度 电场强度是指单位长度（cm）的电位降，也称电势梯度。
如以滤纸作支持物，其两端浸入到电极液中，电极液与滤纸交界面的纸长为20cm，测得的电位降为200V，那么电场强度为200V/2 0cm＝10V/cm。
当电压在500V以下，电场强度在2-10v/cm时为常压电泳。
电压在500V以上，电场强度在20-200V/cm时为高压电泳。
电场强度大，带电质点的迁移率加速，因此省时，但因产生大量热量，应配备冷却装置以维持恒温。
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五种电泳技术的比较-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII五种电泳技术的比较SDSPAGE名词解释：相对迁移率（Rf）问答题:1.简述SDS-PAGE的基本原理。
2.影响SDS电泳的关键因素有哪些AGE名词解释1.迁移率2.电渗3.电泳问答题1.影响电泳迁移率的因素有哪些？2.试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。
CAME1.CAME的基本原理是什么？2.CAME分离血清蛋白电泳时应注意哪些问题？PAGE名词解释1.凝胶总浓度2.交联度问答题1.与CAME相比，PAGE有哪些特点。
2.试比较CAME与PAGE操作的区别。
3.简述不连续PAGE的原理。
1.琼脂糖凝胶电泳Agarose Gel ElectrophoresisGel Electrophoresis ：由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳。
特点（characteristic）：1.可以制成非常均匀的凝胶，带电质点在凝胶的孔中泳动。
2. 电泳操作方法简便，电泳速度快。
3. 分辨率高，重复性好，电泳图谱清晰。
4. 适用于生化，免疫等定性定量测定。
（一）优点（advantage)1.因不含硫酸根和羧基，几乎消除了琼脂的电渗。
2.对蛋白质吸附极微，故无拖尾现象。
3.凝胶结构均匀，孔径较大，可用来分离酶的复合物、核酸、病毒等大分子物质。
4.透明度较好，可直接或干燥成薄膜后进行染色。
5.不吸收紫外光，可直接利用紫外光吸收法作定量测定。
6.有热可逆性。
（二）缺点(disadvantage)1.机械强度差，易破碎，浓度不能太低。
2.易被细菌污染，不易保存，临用前配制。
3.琼脂糖支持层上的区带易于扩散，电泳后必须立即固定染色。
4.与PAGE相比，分子筛(molecular sieve)作用小，区带少。
应用1. 适用于大分子的核酸、核蛋白等的分离、鉴定及纯化2. 临床生化检验中常用于LDH、CK等同工酶的分离与检测3. 为不同类型的高脂蛋白血症、冠心病等提供生化指标影响迁移的因素the size of the moleculeconformation of the moleculethe agarose concentration of a gelVoltage百分浓度和分辨率限制Most agarose gels are made with between 0.7% (good separation orresolution of large 5–10kb DNA fragments) and 2% (good resolution forsmall 0.2–1kb fragments) agarose dissolved in electrophoresis buffer.Up to 3% can be used for separating very tiny fragments but a verticalpolyacrylamide gel 聚丙烯酰胺is more appropriate in this case.Low percentage gels are very weak and may break when you try to lift them.High percentage gels are often brittle and do not set evenly. 1% gels arecommon for many applications.琼脂糖凝胶分离血浆脂蛋白原理：血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以琼脂糖凝胶为支持介质，在pH8.6巴比妥缓冲液中电泳，根据各脂蛋白的组成、大小、形状分离成不同区带。
pH 8.6 > pI ，各种脂蛋白均带负电，电泳时由负极到正极；VLDL为圆形，受阻力小，LDL形态不规则，受阻力大，所以VLDL跑在前。
加样槽在负极，由负极到正极分别是CM\LDL\VLDL\HDL2.醋酸纤维薄膜电泳Cellulose acetate membrane electrophoresis，CAME特点：低吸附作用，低电渗作用，样本用量少，亲水性1.Low sorption2.Low electroosmosis3.Small sample4.Hydrophilic电泳图谱不齐①点样时血清点加不均匀②薄膜局部干燥③电泳时供给薄膜的液量不均匀或过少④缓冲液变质⑤电泳时薄膜位置不正,与电流方向不平行电泳图谱分理不清①点样时血清点加不均匀②薄膜局部干燥③电泳时供给薄膜的液量不均匀或过少④缓冲液变质⑤电泳时薄膜位置不正,与电流方向不平行电泳速度慢电流过低供给薄膜的液量不足缓冲液离子强度过高薄膜中杂质白蛋白区带中间部分不着色，染色不足染色时间不够、点样过多γ球蛋白向反方向移动电渗现象，可提高缓冲液液面或加大电流量以改进区带一边长一边短呈扭曲现象薄膜未紧压在电泳槽的滤纸桥上，使薄膜接触不良而增大了电阻。
区带拖尾或区带过于紧密缓冲液离子强度＜0.05可出现区带拖尾；离子强度＞0.075可出现区带过于紧密。
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳Separate serum protein in cellulose acetate membrane electrophoresis[原理] CAME是以醋纤膜（CAM）作支持物的一种区带电泳技术。
将血清样品点样于醋纤膜上，在pH8.6的缓冲液中电泳时，血清蛋白质均带负电荷移向正极。
由于血清中各蛋白组分等电点不同而致表面净电荷量不等，加之分子大小和形状各异，因而电泳迁移率不同，彼此得以分离。
加样：用加样器蘸取血清约5ul，垂直印在CAM粗糙面，点样区距离边缘约1.5cm，电泳时点样面朝下。
加上槽盖平衡5分钟后再通电。
电压10~15V/cm膜总宽。
电泳40~60分钟，泳动距离约达3.5~4cm时即可断电。
由负极到正极可分为五条条带γβα2 α1 白蛋白3.聚丙烯酰胺凝胶电泳Polyacrylamide Gel Electrophoresis PAGEPAG是由丙烯酰胺（acrylamide，Acr）单体和N，N’-亚甲双丙烯酰胺（N，N，N’，N’-methylene bisacrylamide，Bis）交联剂通过自由基（ free radicals）聚合而成的一种多孔三维网状结构。
过硫酸胺[(NH4)2S2O8]（Ammonium persulfate，AP）作为催化剂，四甲基乙二胺（-N,N,N',N'-tetramethylethylene diamine , TEMED）为加速剂。
¬TEMED量多少都会影响催化作用，须在碱性条件下聚合-分子氧存在，聚合不完全，须去除分子氧，隔绝氧®升高温度能提高聚合，降低温度能延迟聚合PAG孔径的大小主要由Acr和Bis这两种单体的浓度决定。
可以根据要分离物质分子的大小，选择合适的单体浓度。
Acr/Bis：20~40 完全透明且有弹性；＜10 很脆，易碎，不透明；＞100 糊状不成形，易破碎常用的标准凝胶是指浓度为7.5%的凝胶交联度C——Bis占单体与交联剂总量的百分比。
C=b/（a+b）×100%电极槽缓冲液通常为pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液分离原理1. 浓缩效应1）凝胶层的不连续性两层凝胶T与C不同孔径不同浓缩胶孔径大，分离胶孔径小，蛋白质在大孔径浓缩胶中移动，受阻力小，移动速度快。
2）缓冲液离子成分的不连续性甘氨酸（pI=6.0）在pH8.3带负电，朝正极移动，进入浓缩胶（pH6.7），甘氨酸解离度（）很小，有效迁移率（M ）很低，移动速度较慢，称为慢离子。
HCl 是强电解质，=1，Cl-有效迁移率大，移动速度快，称快离子。
蛋白质（pI＜6.0）带负电荷，有效迁移率介于两者之间。
3）pH值的不连续性为了控制慢离子的解离度，从而控制其有效迁移率，必须使浓缩胶与分离胶之间pH值有所区别。
3.分子筛效应与电荷效应进入分离胶后，Gly-成为快离子分离胶只有电荷效应和分子筛效应，根据各蛋白质所带电荷不同、分子大小不同而分离PAGE特点1.具有分子筛效应，分辨率高2.样品不易扩散，用量少，灵敏度可达10-6g3.化学性质稳定，分子结构中富含酰胺基具有稳定的亲水基团4.凝胶不带电荷，消除了电渗现象5.机械强度好，有弹性，在一定浓度范围内无色透明6.网孔可调节4.SDSPAGE十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate,SDS,also called lauryl sulfate)是一种阴离子去污剂(anionic detergent )。
•作用：破坏蛋白质分子之间以及其他物质分子之间的非共价键，使蛋白质变性(denature)而改变原有的构象;•保证蛋白质分子与SDS充分结合而形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物。
原理（一）蛋白质分子的解聚样品介质和聚丙烯酰胺中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(molecular mass of polypeptides )，而电荷因素可以被忽略。
1、SDS阴离子去污剂(anionic detergent )变性剂(denaturant)助溶性试剂断裂分子内和分子间的氢键(hydrogen bond)分子去折叠破坏蛋白质分子的二级和三级结构2、强还原剂巯基乙醇（β-mercaptoethanal）二硫苏糖醇（dithiothreitol，DTT）使半胱氨酸残基之间的二硫键(disulfide bond)断裂。
SDS和还原剂的作用：（1）分子被解聚（2）氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS胶束。
（3）蛋白质-SDS胶束所带的负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，消除了不同分子之间原有的电荷差异。
去污剂的选择无离子去污剂：Lubro W；Brij35， TweenTriton阳离子去污剂：cetyltrimethyl ammoniumbromide （CTAB）cetylpyyridinium （CPC）阴离子去污剂：SDS deoxycholate电泳过程中的不正常现象（1）“微笑”现象指示剂前沿呈现两边向上的曲线形，说明凝胶的不均匀冷却，中间部分冷却不好。
2）“皱眉”现象由于垂直电泳槽的装置不合适引起的，特别是当凝胶和玻璃板组成的“三明治”底部有气泡或靠近隔片的凝胶聚合不完全。
（3）“拖尾”现象样品溶解不佳引起。
（4）“纹理”现象由于样品中的不溶颗粒引起的。
（5）偏斜现象电极放置不平行引起或加样位置偏斜而引起（6）带太宽加样量太多或加样孔泄漏引起分子量测定1、相对迁移率（relative mobility，Rf）Rf即用每个带的迁移距离除以溴酚蓝前沿的迁移距离得到的。