铁皮石斛毛状茎分化和生根试验
铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究
期为进行工厂化育苗提供有效途径。铁皮石斛植株由上海中药研究所引进，
! ! 收稿日期： "##* 8 #& 8 #9 基金项目： 宁德市科技计划项目 （编号为 "##(:%" ） 。 作者简介： 林丛发 （%&** 8 ） ， 男， 副研究员， 从事生物技术研究工作。
江西农业学报! "##$ ， %& （%） ： ’( ) ’* +,-. +/01,23-20.4 51.6/71
铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究
林丛发， 钟爱清， 林云斌， 陈芦根
（福建省宁德市农业科学研究所， 福建 宁德 ;99#%$ ）
摘! 要： 通过单因素浓度试验和正交试验研究了 9 种金属离子、 不同激素组合及不同天然附加物对铁皮石斛类原球茎增 殖、 分化的影响。试验结果表明， 9 种金属离子对类原球茎增殖影响的主次顺序为 </" = ! >4" = ! ?." = ! <6" = ! :6" = ， 类原 球茎增殖的最佳培养基为 % @ "<A = B++ #C 9D/ @ E = %#F 马铃薯汁 = ;F 蔗糖 （含 </" = %C # DDG3 @ E、 ?." = "C # DDG3 @ E、 >4" = #C % DDG3 @ E、 <6" = #C %DDG3 @ E 和 :6" = #C #; DDG3 @ E） 。培养基 % @ "<A = B++ #C 9D/ @ E = "#F 马铃薯汁 = 蔗糖 "#/ @ E = 琼脂 #C ’/ @ E 最适于铁皮石斛类原球茎的分化。 关键词： 铁皮石斛； 类原球茎； 金属离子； 增殖； 分化 中图分类号： H&(&C $%’! 文献标识码： +! 文章编号： %##% 8 ’9’% （"##$） #% 8 ##’( 8 #;
组培条件下铁皮石斛幼芽分蘖和生根的影响因素研究
１ 材料 与方 法
１ ． １ 试 验 材 料
铁皮石斛幼芽 等无 菌材料 是 由该 实验 室培育 。将
色绿 、 无分化 、 呈桑葚状 的原球茎接种于 ＭＳ ＋２ ． ０ ｍｇ ／ Ｉ
ＮＡ Ａ 培养基上 ， 添加琼脂 ７ ｇ ／ Ｌ ， 蔗糖 ３ ０ ｇ ／ Ｌ 。每 处理
接１ ０ 瓶， 每瓶中接 ５ 个芽， 培养 室温度 （ ２ ５ ±２ ） ℃， 以日
进 幼 芽的分 蘖与 生 根 。
关键词 ： 铁皮石斛 ； 组织培养 ； 分蘖 ； 生根
中图分 类号 ： Ｓ ５ ６ ７ 文献标 识码 ： Ａ 文章 编号 ： １ ０ ０ １ －０ ０ ０ ９ （ ２ ０ １ ３ ） ｌ ４ —０ ｌ １ ２ 一Ｏ ３ 铁皮石 斛 （ Ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｏ ｆ ｆ ｉ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｅ Ｋ ｉ ｍｕ ｒ ａ ｅ ｔ Ｍｉ ｇ ｏ ） 属兰科石斛 属多 年生 附生草 本植物 ， 又名环 草石 斛 ， 是
一
选 取分化所得 的长度 １ ． Ｏ ～１ ． ５ ｍ、 具有 ２ ～３片真 叶的 无根幼芽作试验材料 。
１ ． ２ 试 验方 法
种珍稀 的药 用 植物 ， 其 用药 历史 悠 久 ， 药 用 价值 高
野生铁皮石 斛附生 在高海 拔悬崖 峭壁 或林 内树木 和岩 石缝 隙中口 ］ ， 喜 阴凉 、 湿润 的环境 。铁皮 石斛具有 独特 的生物学特性 ， 生长 环境独 特 ， 对小 气候环 境 要求 十分
度（ ２ ５ 士２ ） ℃， 以 日光灯 为光源 ， 光照强 度 ２ ０ ０ ０ ｌ ｘ ， 每 天
生资源 日渐枯 竭 。因此 ， 发 展铁皮 石 斛组织 培 养技术 ， 建立铁皮石斛人工栽培基地迫在眉睫 。 铁皮石斛幼苗在种植 生长过 程中 ， 主要 的繁殖方式 为分蘖繁殖 。企 业在生 产铁 皮石斛 组培苗 时多 采用种 子诱 导愈伤组 织 ， 并进 行继代 繁殖 ， 但 随着继 代 次数增 加， 繁殖的后代有 可能产 生变异 。通过增强 幼芽分蘖 的 方式 ， 既 可保 留母 体 的优 良性状 ， 又 可实 现快 速 繁 殖 。 关于石斛分蘖 的研究较少 ， 蒋 向辉 等［ ３ ３ 研究 发现 ， ６ － Ｂ Ａ、 Ｎ Ａ Ａ和 Ｐ Ｐ ３ 。 。 均可增加 有效分蘖数 ， 但Ｇ Ａ ３ 处 理抑制 分 蘖 。该试 验旨在探讨 组培条 件下 影响幼 苗分蘖 的某 些 因素 ， 并筛选 出适合幼苗分蘖及生根 的培养基 。
铁皮石斛茎段的培养
实验五铁皮石斛茎段的培养
一、实验目的
本实验以铁皮石斛为材料，学习和掌握以茎段为外植体的植物组织培养方法，熟练掌握灭菌和接种技术。
二、实验原理
铁皮石斛（学名：Dendrobium officinale Kimura et Migo）为兰科石斛兰属多年生草本植物，喜在温暖、潮湿、半阴半阳的环境中生长。
分布于福建、浙江、广西、云南、贵州等地。
铁皮石斛含有多种铁皮石斛素，具有滋阴养血、益胃生津，清热明目的作用。
茎段培养是植物组织培养的常用外植体选择之一，诱导率高，繁殖性强。
以带芽的茎段进行组织培养，易诱导出无菌芽。
三、实验仪器
接种盘，剪刀，接种镊子，三角瓶，培养瓶，超净工作台。
四、实验材料
多年生铁皮石斛茎段
五、实验步骤
1、预处理
取铁皮石斛茎段，去掉叶鞘，剪刀把带腋芽的节剪成1.5cm左右的茎段，放入瓶子中，加入高锰酸钾溶液，浸泡15min。
后用流水冲洗10min。
2、灭菌与接种
预处理后的外植体置于超净工作台上，用75% 酒精灭菌30s，无菌水冲洗3次，后用0.1%升汞浸泡12~17min，然后用无菌水冲洗5次后，备用。
在无菌条件下，芽体朝上接种于诱导培养基上。
3、培养
培养基为MS+2.0mg/L6-BA。
接种结束后，将培养瓶放置培养室进行光照培养。
六、实验结果记录
3~5天后观察接种的外植体，做好污染数据的记录。
铁皮石斛组培苗生根条件优化研究
铁皮石斛组培苗生根条件优化研究作者：彭文书马莉赵苗苗张文杰严亮来源：《热带农业科学》2015年第02期摘要以铁皮石斛无菌幼苗为材料，在不同生根培养基中添加不同配比的生长调节物质、香蕉汁、马铃薯汁以及活性炭，研究其对铁皮石斛组培苗生根效果的影响。
研究结果表明，生根培养基为：1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L+10.0%香蕉汁+10.0%马铃薯汁+NAA 0.4 mg/L+2.0%蔗糖+0.04%活性炭，生根条件为光照强度2 000 lx、琼脂用量7.0 g/L、培养基pH为5.8是最适宜条件。
关键词铁皮石斛；组培苗；生根条件；优化分类号 S567.23+9铁皮石斛（Dendrobium officinale）为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium sw.）植物，是一种十分珍贵的中药材植物，主要分布于我国云南、广西、广东、贵州等南方省区[1]。
铁皮石斛是《中华人民共和国药典》收录的5种石斛属植物之一[2]。
铁皮石斛具有较高的药用价值，《中国药学大词典》称其具有“滋养阴津”功效，清代《药性论》说石斛能补肾积精、养胃阴、益气力和增强体质。
石斛作为益胃生津药在《神农本草经》、《本草再新》中均有记载[3]。
现代医学对铁皮石斛的研究表明，多糖是一种有价值的中药类免疫增强剂。
药理学研究表明，铁皮石斛的多糖、氨基酸、生物碱等成分，具有提高免疫功能、抗氧化、抑制肿瘤和降低血糖等作用[4-9]。
但由于铁皮石斛生长条件十分苛刻，自然产量极少，加上生态破坏和药农的过度采挖，致使铁皮石斛野生资源的有些品种已面临灭绝的境地。
野生石斛在自然条件下的繁殖率很低，林下移栽种植铁皮石斛成活的关键因素却是组培苗的生根壮苗，因此在组织培养过程中提高组培苗生根率尤为重要。
本文选择生长一致的的铁皮石斛组培瓶幼苗，研究不同生长调节物质浓度、不同添加物及浓度对铁皮石斛生根和生长的影响，以确定适合铁皮石斛壮苗生根最适宜的培养基，提高林下移栽铁皮石斛组培苗的成活率。
怎样用铁皮石斛茎段快速繁殖
怎样用铁皮石斛茎段快速繁殖铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生草本植物，又名黑节草，具有益胃生津、滋阴清热、清咽利嗓，提高人体免疫能力、抗肿瘤、抗衰老等功效。
多附生在亚热带人迹罕至的深山密林阴湿悬崖峭壁处、树上或长青苔的岩石上。
铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生草本植物，又名黑节草，具有益胃生津、滋阴清热、清咽利嗓，提高人体免疫能力、抗肿瘤、抗衰老等功效。
多附生在亚热带人迹罕至的深山密林阴湿悬崖峭壁处、树上或长青苔的岩石上。
铁皮石斛的茎段快速繁殖直接取材于幼嫩茎段，具有取材易、速度快、污染率低、繁殖系数高等优点，可在短期内为生产提供大量栽培用苗。
一、外植体的消毒石斛茎段在无菌操作台上用75％的酒精进行表面消毒，去掉灰尘，再用0.1％的升汞灭菌5～8分钟，用无菌水冲洗3次，在此过程中应不断摇晃烧杯，使其充分灭菌。
二、试验过程将已经灭菌的石斛茎段，在无菌条件下切成至少带有一个茎节的茎段，接种于诱导培养基中诱导出芽，将芽再诱导出原球茎，原球茎再分化，再壮苗，便可将生长健壮的植株移栽。
三、培养基基本培养基为N6，附加0.75％琼脂，3％白糖，PH值为5.8，培养基进行常规高温高压灭菌，温度为121℃，1.1Mpa，15分钟即可。
激素添加如下①诱导茎节发芽：N6＋BA2.5毫克／升；②诱导芽形成原球茎：N6＋BA2.5毫克／升＋I－BA 0.5毫克／升；③诱导原球茎分化为植株：N6 BA 1.5毫克／升NAA 1.2毫克／升＋香蕉汁5％；④生根壮苗培养：N6 NAA 2.5毫克／升土豆汁10％。
或基本培养基为MS，附加0.75％琼脂，3％白糖，pH5.8。
1、芽增殖培养基：MS＋NAA 0.1～0.5毫克／升＋BA0.5～2.0毫克／升；2、壮苗培养基：MS无激素培养基；3、生根培养基：1/2MS IBA0.1毫克／升。
四、培养条件温度控制在25±1℃，日光灯照射，每天12小时。
五、移栽移栽时先将已经长大的石斛种苗取出，用清水洗去根部的培养基，洗净为止，动作要轻，避免损伤其根和叶。
铁皮石斛抗寒品种的快速繁殖
铁皮石斛抗寒品种的快速繁殖胡松梅【摘要】以铁皮石斛抗寒品种茎段为外植体,运用组织培养技术建立铁皮石斛无性快繁体系,筛选出铁皮石斛快繁的最佳培养基.结果显示,以铁皮石斛茎段为外植体诱导原球茎,最佳诱导培养基为MS+ 6-BA 2 mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1+ IBA 0.2 mg·L-1,诱导率为66.67％.原球茎最佳分化培养基为MS+ 6-BA 0.5mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1+ IBA 0.1 mg·L-1,苗整齐健壮,叶片大而浓绿.试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS+ IBA 0.2 mg·L-1+ NAA 0.3 mg·L-1,生根率为100％.驯化移栽基质为碎砖瓦15％+松树皮50％+刨花25％+羊屎10％.【期刊名称】《天津农业科学》【年(卷),期】2015(021)012【总页数】3页(P108-110)【关键词】铁皮石斛;快速繁殖;最佳培养基【作者】胡松梅【作者单位】湖南娄底职业技术学院,湖南娄底417000【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9铁皮石斛为兰科石斛属多年生草本植物[1]，史称“中华九大仙草之首”，具有抗衰老、抗肿瘤、增强机体免疫力和扩张血管等作用，在临床与中药复方中被广泛应用[2]。
野生铁皮石斛主要在云南、浙江、广东、广西等地[3]，在湖南省新宁县也有分布。
铁皮石斛对生境要求苛刻，一般生长在高温多湿的热带、亚热带的高山峻岭、悬崖峭壁及岩石缝隙之间，生长速度缓慢、自然繁殖力极低。
通过组织培养快速繁殖铁皮石斛是解决种苗缺乏的有效途径[4]。
1.1 材料本试验用铁皮石斛引种自浙江雁荡山，采用DES诱变与离体培养低温胁迫相结合筛选出抗寒品种，将抗寒品种栽种于湖南省湘乡县试验基地。
1.2 方法取铁皮石斛母株1年生茎段为外植体，去叶后放入低浓度的洗衣粉水中漂洗3～5 min，用流水冲洗1 h。
A 铁皮石斛组培繁殖及其内生真菌的研究
石斛属植物约有四分之一可供观赏，称为石斛兰（Ｄ．ｏｒｃｈｉｄｓ），以花艳丽而著 称，石斛株型美观，茎干奇特，花多而密，花型优美，能给人以超凡脱俗的艺术 感受，多用于盆栽观赏，可用于居室内装饰，摆放在阳台，窗台，或用吊盆悬挂 客室，书房，凌空泼洒，别具一格。吊载或树载多见于公园，植物园，温室和各 类休闲游览区，其模拟石斛兰原生种的野生状态，形成独特的热带附生植物景观， 具有极佳的观赏效果。石斛兰具有秉承刚强，祥和可亲的气质，因此被誉为“成
功之花”。
今年来，石斛作为观赏植物发展迅速，同时它也是良好的杂交亲本，在国际 花卉市场上占有重要的位置，已形成独立产业。当今世界上许多国家都广泛栽培， 尤以东南亚最盛，其中以泰国产量最大。石斛兰在荷兰的总销售额已达３２０万美 元，其中大部分直接销售给法国，德国，美国和意大利的批发商。东南亚国家出 口石斛的主要品种为“蓬皮杜夫人”和“索尼娅”，前者每支价格为０．４１～０．６５美元， 后者每支价格为０。３８～０．５７美元。在亚洲，日本是石斛兰最大的进口国，１９９３ 年市场销售２３０万盆，销售额为２８００万美元（王意成，２００７）。 １．２石斛属植物的药用价值 我国石斛植物中近４０种可作药用，主要有环草石斛（Ｄ．ｃｏｄｄｉｇｅｓｉｓ）、马鞭石 斛（Ｄ．ｆｉｍｂｒｉａｔｕｍ）、铁皮石斛（Ｄ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）、黄草石斛（Ｄ．ｃｈｒｙｓａｎｔｕｍ）和金钗 石斛（Ｄ．ｎｏｂｉｌｅ）等。 现代医学研究表明：石斛含有多种人体所需的微量元素、必需氨基酸、维生 素、多糖、生物碱等，具有滋阴清热、生津益胃、止咳润肺之功效，其主要成分
２．１．２．１培养基的选择
选择合适的培养基是组织培养最关键的一步，不同的培养途径、不同的培养 阶段和目的，所对应的培养基也不同。 曾宋君等发现Ｎ６培养基对石斛胚的萌发和生长最好（１ ９９６），而以茎尖作为 培养材料，Ｎ６培养基诱导愈伤组织能力明显不如ＭＳ。Ｄｅｖｉ Ｊ等利用 Ｄ．ｍｏｓｃｈａｔｕｍ的茎尖在５种培养基上诱导形成拟原球茎，结果以Ｎｉｔｃｈ培养基的 效果最好（高培元等，２００２）。高培元等在金钗石斛芽的诱导过程中发现ＭＳ培养基 对侧芽诱导率最高，Ｂ５次之，ＫＣ最低（２００２）。 ２．１．２．２激素与添加物 植物激素对植物细胞分裂、诱导器官形成和次生产物的合成都有重要作用。 廖福琴等在石斛兰芽增殖培养过程中发现，ＮＡＡ浓度保持不变，当６．ＢＡ浓度 为４．０ｍｇ・Ｌ以时，芽增殖倍数为最高，增殖７～ｌ ２倍；当６－ＢＡ浓度增至５．０ ｍｇ・Ｌ以 时，芽增殖倍数下降，可见较高浓度的６－ＢＡ对芽的分化有抑制作用（廖福琴 等，２００３）。赵天榜等在１／２Ｎ６培养基中加入０～Ｏ．５ｍｇ・Ｌｑ的ＮＡＡ，对石斛种胚苗
黑节铁皮石斛原球茎诱导_再分化以及腋芽萌发和生根的初步研究
第30卷第6期2010年12月 上饶师范学院学报J OURNAL O F SHANGR AO NOR MAL UNIVERSITY Vol 30,No 6Dec 2010收稿日期:2009-12-14基金项目:2009年江西省高校省级教改立项项目(编号:J XJG-09-16-10);上饶师范学院校级教改课题(SR1018)作者简介:李丹(1988-),女,生命科学系06生物科学(1)本科在读学生,研究方向为植物组织培养。
黑节铁皮石斛原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根的初步研究李 丹,王馨彩,尹明华(上饶师范学院,江西上饶334001)摘 要:对黑节铁皮石斛的原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根进行了初步的研究,以期为黑节铁皮石斛的人工繁殖提供理论指导。
采用植物组织培养和单因子试验的方法,获得了黑节铁皮石斛带芽茎段最佳的消毒方式为70%酒精处理30s 后再用0.1%HgCl 2处理20min 。
黑节铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS+KT1mg/L +NAA0.1mg/L 。
黑节铁皮石斛带芽茎段原球茎再分化的最佳培养基为MS+KT2mg /L+NAA0.5mg/L 。
黑节铁皮石斛带芽茎段腋芽萌发的最佳培养基为MS+KT 2mg/L+NAA0.5mg/L 。
黑节铁皮石斛带芽茎段生根的最佳培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L 。
这些实验结果为黑节铁皮石斛试管苗的工厂化生产奠定了技术基础。
关键词:黑节铁皮石斛;原球茎;腋芽;生根中图分类号:S567.23.9 文献标识码:A 文章编号:1004-2237(2010)06-0073-06DOI:10.3969/j.issn.1004-2237.2010.06.015铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.)为兰科石斛属植物,不仅是中国的特有种,也是传统的名贵中药材[1]。
石斛的主要药用成分为石斛多糖和石斛碱[2],具有养阴生津、润肺明目、抗癌防老等功效[3]。
探究铁皮石斛原球茎的生长和分化
探究铁皮石斛原球茎的生长和分化孙一然张晗杜剑峰指导老师：孙红泽一、研究意义铁皮石斛（学名：Dendrobium officinale Kimura et Migo），又名：黑节草、云南铁皮。
属微子目，兰科多年生附生草本植物。
茎直立，圆柱形，长9-35厘米，粗2-4毫米，萼片和花瓣黄绿色，近相似，长圆状披针形，长约1.8cm，宽4~5mm，花期3~6月。
主要分布于中国安徽、浙江、福建等地。
其茎入药，属补益药中的补阴药：益胃生津，滋阴清热。
铁皮石斛适宜在凉爽、湿润、空气畅通的环境生长。
生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。
分布于安徽西南部（大别山）、浙江东部（鄞县、天台、仙居）、福建西部（宁化）、广西西北部（天峨）、四川、云南东南部（石屏、文山、麻栗坡、西畴）。
1987年国务院发布的《野生药材资源保护管理条例》将铁皮石斛列为三级保护品种；1992年在《中国植物红皮书》中被收载为濒危植物。
性味功效：味甘，性微寒。
生津养胃；滋阴清热；润肺益肾；明目强腰。
药理作用:生津作用：铁皮石斛石斛具有生津作用，主要表现为促进腺体分泌和脏器运动。
降血糖作用：铁皮石斛对可降低链脲霉素诱发糖尿血糖值。
增强机体免疫力：铁皮石斛颗粒（TPSH）可促进荷瘤动物巨噬细胞的吞噬功能，增强T 淋巴细胞的增殖和分化及NK细胞的活性，并能明显提高荷瘤动物的血清溶血素值，提示TPSH无论是对非特异性免疫功能，或是特异性细胞免疫以及体液免疫功能，均有一定的提高作用。
自然条件下，铁皮石斛繁殖率低，生长速度缓慢，其种子细如粉尘，必须与真菌共生才能萌发，自然条件下发芽率低，多年来一直靠采挖野生植株供应市场，采挖量远大于生长量。
目前，铁皮石斛已成为濒危植物，被列为国家重点保护的药材品种。
为保护该物种的繁衍，有效利用和开发这一珍稀的名贵中药材，20世纪70年代开始国家相关部门投入了大量科研资金对其进行研究，在总结前人的研究经验下，本文针对扩大繁殖系数，提高瓶苗质量等方面作了研究。
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖摘要：实验以铁皮石斛优良品种的茎段为外殖体，诱导丛生芽，壮苗生根，从而实现大量繁殖。
当NAA 的浓度为0.3mg/L , 6-BA 的浓度为5mg/L 时，铁皮石斛丛生芽的增殖率最高。
在MS 培养基中，铁皮石斛壮苗生根的最好培养基为MS + 6 - BA ( 2mg/L ) + 20 ％香蕉汁。
不同激素浓度的6-BA 对铁皮石斛壮苗生根的影响比较得出，不加6-BA 的培养基小苗生根率低、发根迟、根数少；而加人6-BA 后以大幅度提高生根率，尤以在6-BA 0.4mg/L 的培养基中小苗生根快，根数多。
从不同培养基对铁皮石斛试管苗生长的影响看出，幼苗用MS 培养基比用KC 培养基培养生长好。
铁皮石斛培养60d 左右时生长速度最快。
香蕉提取液能促进生长，从而使苗的生长加快。
以MS ＋香蕉汁20 ％的培养基为最好。
关键词：铁皮石斛；组织培养；丛生芽；壮苗生根铁皮石斛是兰科著名的盆载观花植物，具有很高的观赏价值。
近年来，铁皮石斛培养及快速繁殖技术的研究，取得了很大的成果。
本实验对药用铁皮石斛茎段进行组织培养，提出了一套快速繁殖程序，为快速育苗提供了有价值的技术资料和科学依据。
利用组织培养技术，对药用铁皮石斛进行快速繁殖，是目前解决生产种苗问题的有效方法。
1 材料与方法1.1 试验材料铁皮石斛优良品种，来源于日本。
1.2 试验方法1.2.1 外植体的选取和预处理将从日本引进的生长旺盛的铁皮石斛健康植株，以茎芽为中心剪下，芽的上下各留0.5cm的茎段，用洗衣粉浸泡20min 左右，取出后再用自来水反复冲洗数次，备用。
1.2.2 外植体的灭菌将预处理过的外植体用75 ％的酒精溶液灭菌30 s，然后用无菌水冲洗l 次，将茎段腋芽的苞叶拨去，然后将0.1 ％的HgC12 溶液倒人烧杯中灭菌10 min ，灭菌过程中不断摇动烧杯使灭菌更加彻底，最后用无菌水冲洗5 、6 次将HgCl2溶液冲净并接种到培养基上。
铁皮石斛原球茎分化的研究概述
［ Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ］ Ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｆ ｏ ｉｃ ｆ ｉ ｎ ａ ｌ ｅ ；Ｐ ｒ ｏ ｔ ｏ ｃ ｏ ｒ ｍ；Ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ ３ ３ １ ３ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ － ４ ８ ９ ０ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ４ ． ０ ０ ３
培养基 ，激素 ，附加物等多个条件进行 了概述 ，并提 出了存在的问题及相应对 策。
［ 关键词］ 铁皮石斛 ；原球茎 ；分化
Ｓ ｔ ｕ ｄ ｉ ｅ ｓ ｏ ｎ Ｐ ｒ ｏ ｔ ｏ ｃ ｏ ｒ ｍ Ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ห้องสมุดไป่ตู้ ｏ ｆ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｏ ｆ ｉｃ ｆ ｎ ａ ｌ ｅ
正交试验优选铁皮石斛生根培养基
正交试验优选铁皮石斛生根培养基陈尔; 王华新; 陈宝玲; 杨舒婷; 苏莉花【期刊名称】《《广西林业科学》》【年(卷),期】2019(048)003【总页数】4页(P357-360)【关键词】铁皮石斛; 生根培养; 正交试验【作者】陈尔; 王华新; 陈宝玲; 杨舒婷; 苏莉花【作者单位】广西壮族自治区林业科学研究院南宁 530002【正文语种】中文【中图分类】S682.31铁皮石斛（Dendrobium candidum）又名黑节草、铁皮兰，为兰科（Orchidaceae）石斛属多年生附生型草本植物。
其药用价值独特，是石斛属中的极品。
铁皮石斛自然分布虽广，但生境苛刻且因其种子在自然条件下自我繁殖能力极低，加上过度采挖，导致自然资源日渐枯竭。
目前，通过组织培养技术已成功获得组培苗，但组培苗存在移栽成活率偏低的问题[1-3]。
在铁皮石斛组织培养中，生根培养是一个重要环节，组培苗根系的长势直接影响其移栽成活率，因此，研究影响铁皮石斛生根培养条件的因素，从中优选铁皮石斛生根培养条件，对提高组培苗移栽成活率具有十分重要的意义[4]。
植物生长调节剂、糖源、碳源、天然添加物、培养条件、pH 值及培养基种类等均是影响铁皮石斛组培苗生根的因素。
关于生长素配比、活性炭用量、天然添加物及基本培养基等因素有较多的研究[1-2，5]，且大多限于单一因素的影响作用。
本试验以MS为基本培养基，采用L9（33）正交试验设计，研究生长素NAA、活性炭和香蕉汁对铁皮石斛生根培养的影响，优化铁皮石斛生根培养条件，旨在为铁皮石斛规模化生产提供技术支持。
1 材料与方法1.1 材料试验所用的铁皮石斛组培苗由广西林科院园林花卉与森林旅游研究所自主培育。
1.2 方法1.2.1 试验设计试验采用L9（33）正交设计，选用生长素NAA、活性炭和香蕉汁作为参试因素，不考虑因素间的交互作用，各因素随机排列（表1）。
表1 铁皮石斛生根培养正交设计Tab.1 Orthogonal design of rooting cultureof Dendrobium candidum水平Level B C 1 2 3试验因素Experimental factor A生长素Auxin NAA/（mg/L）1.0 2.0 3.0活性炭Active carbon/（g/L）1.0 3.0 5.0香蕉汁Banana juice/（g/L）50 100 1501.2.2 基本培养基以MS 为基本培养基，所有培养基均加蔗糖2.5%～3.0%、琼脂4.6 g∕L，pH值为5.6～5.8。
黑节铁皮石斛原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根的初步研究
ｌ 材料与方法
１１ 材 料 ： ．
黑节铁皮石斛（ 上饶县翰海生态综合开发有限公司温室大棚种植基地提供 ） 。
１２ 方 法 ．
收 稿 日期 ＂０９—１ —１ ２０ ２ ４
基金项 目：Ｏ９年江西省高校 省级教改立项项 目（ ２Ｏ 编号 ：பைடு நூலகம்Ｊ Ｊ Ｇ一０ ６—１ ）上饶师范学院校级教 改课题 （Ｒ ０８ Ｘ ９—１ ０ ； Ｓ １１）
式为 ７ ％酒精 处理 ３ｓ ０ ０ 后再用 ０ ％Ｈ Ｃ ．１ ｇ Ｉ ２处理 ２ ｍｎ ０ ｉ。黑节铁皮石 斛带芽茎段原球 茎诱 导的最佳培养基 为 Ｍ ＋ ｓ
Ｋ ｎ Ｌ＋Ｎ Ａ ．ｍ ／ 。黑 节铁皮石斛带 芽茎段 原球 茎再分 化的最佳培养基 为 Ｍ ＋Ｋ ２ ｇＬ Ａ ０５ ＴＩｗ＇ Ａ ０ １ ｇ Ｌ ｓ Ｔ ｍ ／ ＋Ｎ Ａ ．ｎ 培养基 为 １２ ＋ Ｎ Ａ ．ｍ／ 。这些 实验结果为 黑节铁皮石斛试管苗的工厂化生产 奠定 了技术基础 。 ／ＭＳ Ａ ０５ ｇ Ｌ
ＤＯ ：０ ３６／．ｓ ．０４ ２７２ １ ．６ ０５ Ｉ１ ．９９ｊｉ ｎ １０ —２３ ．０ Ｏ０ ．１ ｓ
铁皮 石斛 （Ｄ ｎｒｂｕ ｎ ｉ ｍ Ｗａ ． ｘＬｎ１） ｅｄｏｉｍｃ ｄｄ ｌ ｅ ｉｄ．为兰 科石斛 属植 物 ， 仅 是 中国 的特有 种 ， ａ ｕ １ 不 也是传 统 的 名 贵 中药 材… 。石 斛的主要 药用成 分 为石斛 多糖 和石 斛碱 ］具有 养 阴生津 、 ， 润肺 明 目、 抗癌 防老 等功效［ 引。 铁 皮石斛 在我 国仅分 布于南 方诸省 （ 江 、 西 、 建 、 浙 广 福 贵州 、 南 、 南 、 徽等 地 ） 原始 森林 ， 云 河 安 的 主要生 长 在 山谷 半 阴湿 的岩 石上 ， 要求 的生态环 境 比较特 殊 ， 自然 繁殖 率极 低 Ｊ加 上人 们 无休 止 地采 挖 以及 自然 生境 ， 的不 断丧失 ， 野生 铁皮石 斛愈来 愈稀 少 ， 因此对 其繁 殖 方法 进行 研究 显 得 十分 必要 。利 用组 织 培 养技 术 ， 对 药用铁 皮石 斛进行 快速 繁殖 ， 目前 解决生 产 种苗 问题 的有 效方 法 。黑节 铁 皮石 斛 是 由野 生铁 皮石 斛培 育 是
铁皮石斛原球茎分化的研究概述
铁皮石斛原球茎分化的研究概述
张寿文;苏慧慧
【期刊名称】《中国现代中药》
【年(卷),期】2014(016)004
【摘要】综述国内对铁皮石斛原球茎分化组织培养进行的深入研究,系统查阅国内近5年的文献20余篇.从培养基,激素,附加物等多个条件进行了概述,并提出了存在的问题及相应对策.
【总页数】3页(P274-276)
【作者】张寿文;苏慧慧
【作者单位】江西中医药大学,江西南昌330004;江西中医药大学,江西南昌330004
【正文语种】中文
【相关文献】
1.铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生 [J], 林江波;王伟英;李海明;吴水金;邹晖;李跃森;戴艺民
2.NAA和KT对铁皮石斛原球茎增殖与分化的影响 [J], 尹明华;聂凤琴;胡文韬;邓小艳;熊文娟
3.铁皮石斛原球茎诱导分化与增殖试验 [J], 石丽敏;卢华兵;胡贤女
4.DcNAC基因调控铁皮石斛原球茎分化发育机理研究 [J], 王万军
5.6-BA和2,4-D对铁皮石斛原球茎增殖、分化和离体保存的影响 [J], 洪森荣;方美玲
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗研究
铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗研究蒋波;杨存亮;黄捷;詹源庆;李喜兵【期刊名称】《玉林师范学院学报》【年(卷),期】2005(026)003【摘要】目的:筛选适宜铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗的培养基,提高继代扩繁系数和组培苗的质量.方法:在相同的培养条件下,把相同发育阶段的原球茎接种于含不同激素比例的培养基中生长;把丛生芽接种于蔗糖浓度不同的培养基中生长;把相同高度的幼苗接种于含不同附加物的培养基中生长;对结果所产生的不同生长状况进行综合分析.结果:原球茎的增殖以1/2MS添加BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L或BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L的激素比例为佳;原球茎分化以1/2MS添加BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L的激素比例为佳;丛生芽的生长中以30%蔗糖浓度的培养基为佳;生根壮苗中最佳的附加物为香蕉.【总页数】4页(P66-69)【作者】蒋波;杨存亮;黄捷;詹源庆;李喜兵【作者单位】玉林师范学院,化学与生物系,广西,玉林,537000;玉林师范学院,化学与生物系,广西,玉林,537000;玉林师范学院,化学与生物系,广西,玉林,537000;玉林师范学院,化学与生物系,广西,玉林,537000;玉林师范学院,化学与生物系,广西,玉林,537000【正文语种】中文【中图分类】Q945【相关文献】1.春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化 [J], 李璐;赖钟雄;翁浩2.不同有机附加物对铁皮石斛原球茎增殖和组培苗生根壮苗的影响 [J], 徐玲;陈自宏;杨晓娜;杨丽华3.黑节铁皮石斛原球茎诱导、再分化以及腋芽萌发和生根的初步研究 [J], 李丹;王馨彩;尹明华4.基于正交实验法的铁皮石斛原球茎分化和生根条件研究 [J], 邵世光;侯北伟;周琪;张潇潇;卢蓓蓓;柏伟娅;丁小余5.悬浮培养的铁皮石斛原球茎在固体培养基上生长和分化的研究 [J], 侯丕勇;郭顺星因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
铁皮石斛组培苗耐盐性研究
铁皮石斛组培苗耐盐性研究李国树;徐成东;李天星;杜富祥;邱璐;李雪玲【期刊名称】《北方园艺》【年(卷),期】2011(000)001【摘要】以铁皮石斛为外植体诱导出愈伤组织后,分别接种到不同盐浓度的愈伤增殖、茎叶分化和生根3种培养基中进行耐盐性筛选,30 d后进行脯氨酸含量测定.结果表明:在培养基中,NaCl浓度在0.2%～1.0%范围内,对铁皮石斛的愈伤增殖、茎叶分化和生根均产生抑制作用,并且盐浓度越高,脯氨酸含量也随之升高,抑制作用越大.盐浓度达0.6%时,愈伤诱导受害明显,脯氨酸含量是对照组的3.60倍;盐浓度高于0.5%时,盐胁迫对不定根和茎叶分化诱导更显著.【总页数】4页(P153-156)【作者】李国树;徐成东;李天星;杜富祥;邱璐;李雪玲【作者单位】楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄,675000;滇中高原生物资源与利用研究所,云南楚雄,675000;楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄,675000;滇中高原生物资源与利用研究所,云南楚雄,675000;楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄,675000;楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄,675000;楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄,675000;滇中高原生物资源与利用研究所,云南楚雄,675000;楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄,675000;滇中高原生物资源与利用研究所,云南楚雄,675000【正文语种】中文【中图分类】S682.31【相关文献】1.16种液体处理剂对铁皮石斛组培苗促生作用研究 [J], 秦建立;杨光宇2.石斛内生真菌固体菌剂对铁皮石斛组培苗促生作用研究 [J], 徐文婷;张雅琼;董文汉;白燕冰;李泽生;孙文丽;杨生超;谢世清;梁泉3.铁皮石斛组培苗生根技术研究 [J], 郜李彬;曹征宇;顾韵莉;周亚辉4.基于正交设计的铁皮石斛组织培养和耐盐性研究 [J], 才真;刘海学;王绪5.铁皮石斛组培苗移栽成活率影响因素研究进展 [J], 朱艳芳; 盛清远; 汪杰; 沈佩华; 邹捷; 张杨巧巧; 薛建平; 盛玮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
黑节草 ，是 传统 的名 贵 中药 材 ，位 于 “ 九大仙草” 之首 ，具 有 滋 阴养 胃、润 肺 止 咳和 清 热 明 目之 功 效 ；另 外 ，铁皮 石 斛 还 具 有 增 强 人 体 免 疫 力 和 抗 肿瘤 等作用 “ 。由于人 为长期 过 度采 摘 野生 石 斛和环 境 的破坏 ，野 生资源 处 于极度 濒危状 态 ，被
的 影 响 。结 果 表 明 ，铁 皮 石 斛 毛状 茎 最 适 宜 分 化 培 养 基 为 ＭＳ＋ ６ － Ｂ Ａ ０ ． ３ ｍｇ・ Ｌ ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ． ０ ３ ｍ ｇ・ Ｌ ‘ 。 ，最 适 宜 分 化 培 养 基 的添 加 物 为 １ ０ ％ 土 豆 提 取 液 ，最 适 宜 生 根 培 养 基 添 加 物 为 熟 香 蕉 皮 。 关 键 词 ：铁 皮 石 斛 ；毛状 茎 ；分 化 中图 分 类 号 ：Ｓ ５ ６ ７ 文 献标 志 码 ：Ｂ 文 章 编 号 ：０ ５ ２ ８ — ９ ０ １ ７ （ ２ ０ １ ４ ）ｏ ２ － ｏ １ ９ ２ － ｏ ３
６ 一 Ｂ Ａ ０ ． １ ｍ ｇ・ Ｌ ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ． １ ０ ｍ ｇ ・Ｌ ～；Ａ ３ 为 ６ － Ｂ Ａ ０ ． ２ ０ ｍ ｇ・ Ｌ ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ． １ ０ ｍ ｇ ・Ｌ ～；Ａ ４ 为 ６ 一 Ｂ Ａ ０ ． ２ ０ ｍ ｇ・ Ｌ～ ＋ Ｎ Ａ Ａ ０ ． ０ ２ ｍ ｇ・பைடு நூலகம் ～；Ａ ５ 为 ６ － Ｂ Ａ ０ ． ３ ０ ｍ ｇ・ Ｌ ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ． ０ ３ ｍ ｇ・ Ｌ～ ；Ａ ６ 为 ６ 一 Ｂ Ａ ０ ． ４ ０ ｍ ｇ・ Ｌ ～ ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ． ０ ４ ｍ ｇ・ Ｌ ～； Ａ ７ 为 ６ 一 Ｂ Ａ ０ ． ４ ０ ｍ ｇ・ Ｌ ‘ 。 ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ． ０ ８ ｍ ｇ ・Ｌ ～；Ａ ８ 为 ６ 一 Ｂ Ａ １ ． ０ ０ ｍ ｇ・ Ｌ ～ ｝Ｎ Ａ Ａ ０ ． ５ ０ ｍ ｇ ・Ｌ ；Ａ ９ 为 ６ － Ｂ Ａ １ ． ２ ０ ｍ ｇ・ Ｌ ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ． ０ ８ ｍ ｇ・ Ｌ ～；Ａ １ ０ 为
国家列 为重 点保 护 的野生珍 贵药 材 品种 。随着 人 民
生活水 平 的不 断提 高 ，难 以满 足 日益增 长 的需 求 ， 亟需 对铁皮 石斛 的挽 救和组 织 培养方 面 的栽培 开展 研究 。铁皮 石斛 种子 在萌发 生 长到一 定 时间后 需及 时转 到新鲜 培养基 中培养 ，否则 原球 茎会 失去 一定 的分化 成 苗能力 ，这 一类原 球茎 为毛 状茎 。有 关铁 皮石 斛 的研 究报 道 中 ，多是 关 于种子 萌发 和分 化配 方 的研 究 ，铁皮 石斛 毛状 茎 的研 究 尚未见 报道 。为
Ｎ Ａ Ａ ０ ． ２ ０ ｍ ｇ・Ｌ ～；Ａ １ １为 Ｎ Ａ Ａ ０ ． ５ ０ ｍｇ・Ｌ ～；
Ａ １ ２为 Ｎ Ａ Ａ １ ． ０ ０ ｍ ｇ ・Ｌ～ ； Ａ １ ３为 Ｎ Ａ Ａ ２ ． ０ ０ ｍｇ・ Ｌ～； Ａ １ ４为 Ｎ Ａ Ａ ３ ． ０ ０ ｍ ｇ ・Ｌ ～； Ａ １ ５ 为 Ｎ Ａ Ａ ４ ． ０ ０ ｍ ｇ・Ｌ ～ ；Ａ１ ６为 Ｎ Ａ Ａ ５ ． ０ ０ ｍｇ・Ｌ ～。
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料
蕉 。处 理 方法 同 １ ． ２ ． １节 。６ ０ ｄ后 观察 不 同外源 添 加物对 毛 状茎分 化 和生 长的影 响 。
特进 行 试 验 ， 以期 利 用 这 一 类 外 植 体 获 得 优 质
成苗 。
将 毛 状茎分 成 ０ ． ５ ｃ ｍ× ０ ． ５ ｃ ｍ大 小 ，接 种 到 以下 培 养 基 中 。设 Ｂ １为 对 照 ，培 养 基 为 Ｍ Ｓ＋
Ｎ Ａ Ａ ０ ． ５ ｍ ｇ・Ｌ ～。 Ｂ ２为 １ ０ ％ 土 豆 ；Ｂ ３为 ８ ％香
铁皮石 斛 （ Ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ｉ ｕ ｍ Ｗａ ｌ １ ．ｅ Ｘ Ｌ ｉ ｎ ｄ Ｌ ． ）是 兰 科 石 斛属 多年 附生 草 本 植 物 ，为 兰
科 第二 大属 。品质最 佳 的铁 皮 石斛 又 称 铁 皮 兰 、
处理 Ａ １为 对 照 ，无 Ｎ Ａ Ａ，无 外 源 物 质 ，ＭＳ为 基 本 培 养 基 。Ａ１为 ６ － Ｂ Ａ ０ ． ５ ０ ｍｇ ・Ｌ ～；Ａ ２ 为
王 菁菁 ，王 红 ，成卓敏
３ １ ５ ０ ０ ０ ） （ 浙 江 省 宁 波华 厦 现代 农 业 研 究 所 ，浙 江 宁波
摘
要 ：以 铁 皮 石 斛 毛状 茎 为 外植 体 ，研 究 不 同 激 素 配 比和 不 同 外 源 添 加 物 对 铁 皮 石 斛 毛 状 茎 分 化 和 生 根
每个处 理 １ ５瓶 ，每瓶 接种 ６个 毛状茎 ，重 复 ３次 ，
６ ０ ｄ后 观察 毛状 茎在 不 同处 理 下分化 和生 长情 况 。
１ ． ２ ． ２ 不 同外 源 添 加 物 对 毛 状 茎 分 化 的 影 响
解决铁 皮石 斛 毛状 茎 难 以分 化成 苗 、分化 率 低 下 ， 分化 苗参 差 不 齐 、生 长缓 慢 ，以及 生 根差 等 问题 ，
田
澎 江 学 种 学 ２ ０ １ ４ 年 第 ２ 期
文献 著 录格 式 ：王 菁 菁 ，王 红 ，成 卓 敏 ．铁 皮 石 斛 毛 状 茎 分 化 和 生根 试 验 ［ Ｊ ］ ． 浙 江 农 业科 学 ，２ ０ １ ４ （ ２ ） ：１ ９ ２—１ ９ ４
铁 皮 石 斛 毛 状 茎 分化 和 生 根试 验