浮游植物采集
浮游动植物采样方法
浮游动植物采样方法
一、浮游植物定量
用1L的塑料瓶，直接在采样点装满水，加10-15ml的鲁哥试剂，摇匀。
鲁哥试剂即将6g碘化钾溶于20ml水中，待其完全溶解后，将4g碘充分摇动，待其完全溶解后，定容至100ml，即配成鲁哥氏液。
二、浮游植物定性
定性样品用孔径约0.064 mm的25号浮游生物网在水面下约0.5 m处以适当的速度作“∞”字形来回拖动1～3 min，获得的浓缩样，放入50ml的白色方瓶中，添加适量的鲁哥氏液固定。
三、浮游动物定量
表层取水样10L（中层和底层取20L水样）过25号浮游生物网，获得的浓缩样，放入50ml的白色方瓶中，4%添加的福尔马林溶液。
福尔马林溶液即40%的甲醛与蒸馏水按照1：9的比例混合配制而成。
四、浮游动物定性
定性样品用孔径约0.064 mm的25号浮游生物网在水面下约0.5 m处以适当的速度作“∞”字形来回拖动1～3 min，获得的浓缩样，放入50ml的白色方瓶中，添加适量的鲁哥氏液固定。
浮游植物的采集
三、计数方法 将浓缩沉淀后水样充分摇匀后，立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品，注入 0.1ml计数框内（计数框的表面积最好是20×20㎜ 2 ），小心盖上盖玻片（ 22×22㎜2），在盖盖玻片时，要求计数框内没有气泡，样品不溢出计数框。 然后在14×40或16×40倍显微镜下计数。即在400－600倍显微镜下计数。每 瓶标本计数两片取其平均值，每片大约计算50～100个视野，但视野数可按浮 游植物的多少而酌情增减，如平均每个视野不超过1～2个时，要数200个视野 以上，如果平均每个视野有5～6个时要数100个视野，如果平均每个视野有十 几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算结果和平均数之差如不大 于其均数的±15％，其均数视为有效结果，否则还必须测第三篇，直至三片 平均数与相近两数之差不超过均数的15％为止，这两个相近值的平均数，即 可视为计算结果。 在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中，另一部分在视野外，这 时可规定出在视野上半圈者计数，出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞 表示，对不宜用细胞数表示的群体或丝状体，可求出其平均细胞数。 计算时优势种类尽可能鉴别到属，注意不要把浮游植物当作杂质而漏计。 计数时可按下列格式记录，然后再进行整理计算。 视野数 种 类 第一片 第二片 正 小球藻 正正 正正 正 衣 藻 正 正 正正 小环藻 正 正
四、数量与生物量的计算： 1．一升水中的浮游植物的数量（N）可用下列公式计算：
Cs V N = × × Pn Fs Fn U
式中：Cs — 计数框体积（㎜2），一般为400㎜2。 Fs — 每个视野的面积（㎜2），лR2，视野半径r可用台微尺测出 （一定倍数下）。 Fn — 计数过的视野数。 V — 一升水样经沉淀浓缩后的体积（ml） U — 计数框的体积（ml）为0.1ml。 Pn — 计数出的浮游植物个数。 如果计数框、显微镜固定不变，Fn、V、U也固定不变，公式中的 Cs V （ Fs Fn × U ）可视为常数，此常数用K表示，则上述公式可 简化为：N=K×Pn。 Pn代表某种藻类的个数，计算结果N只表示一升水中这种藻类的 数量；Pn若代表各种藻类的总数，计算结果N则表示一升水中浮游 植物的总数。前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可。
浮游植物采集与监测
监测意义
最重要的初级生产者 水中溶解氧的主要供应者 能量流动、物质循环和信息传递 浮游植物的种类组成、群落结构和丰度变化，直接影 响水体水质、系统内能量流、物质流和生物资源变动。 应用： 1）水质监测和环境评价 2）生态学研究 藻类是反映水体环境质 3）水环境治理和修复 量的重要生物指标 4）渔业生产力估算 5）其它:例如法医鉴定、空气污染程 度指示等
现场记录
采集时间
Hale Waihona Puke 采集地点 采集深度 水温 pH 气候条件
常规理化参数
透明度盘
样品固定
1. 鲁哥氏液 作用：浮游生物定量样品的固定及染色。 配方：碘化钾20克，溶于200毫升含冰醋 酸20毫升的蒸馏水中，溶解后加入碘10 克，溶解后贮存于密闭的棕色试剂瓶中。 用量：1L+ 10毫升鲁哥氏液。 长期保存时，再加入福尔马林液 2. 福尔马林液 作用：浮游生物定性样品的固定 配方： 90 mL 40%甲醛 +10mL甘油 用量：100毫升水样+10毫升福尔马林液
计数框内若干长条中藻类 的数量。
3. 目镜视野法 利用显微镜目镜视野来 选取计数面积。
目镜视野法计数
计数的视野数目应根据浮游植物数量的多少来确定，一 般为100-500个视野，使所得计数值在300以上 同一样品的两片计数结果与其均数之差距如果不大于其 均数的15%，这两个相近的均数即可视为计数结果。
注意事项： 确定某种计数方法后，不要轻易改变，以确保结果的可比性。 计数前应对样品定性观察，以熟悉主要种类及其形态特征。 如遇到浮游植物个体或细胞一部分位于计数区内，可统一规定。 计数单位可以用个体或细胞表示。 采用细胞数表示时， 1. 单细胞藻类直接计数； 2. 群体或丝状藻类采用估算的方法； 3. 水华优势种类如微囊藻，则需要使其散开后计数。
内陆水域浮游植物监测技术规程
内陆水域浮游植物监测技术规程随着人类社会的发展，水资源的利用和保护已经成为了一个重要的问题。
而浮游植物是水生态系统中的重要组成部分，对于水质的监测和评价具有重要的意义。
因此，内陆水域浮游植物监测技术规程的制定和实施对于水资源的保护和管理具有重要的意义。
一、内陆水域浮游植物的定义内陆水域浮游植物是指在内陆水域中漂浮或悬浮的微小植物，包括藻类、细菌和浮游植物等。
这些微小植物对于水生态系统的稳定和健康具有重要的作用，同时也是水质监测和评价的重要指标。
二、内陆水域浮游植物监测的目的内陆水域浮游植物监测的目的是为了了解水生态系统的健康状况，评估水质的优劣，为水资源的保护和管理提供科学依据。
具体包括以下几个方面：1.了解内陆水域浮游植物的种类、数量和分布情况；2.评估内陆水域的富营养化程度和水质状况；3.监测内陆水域的生态系统健康状况，及时发现和预防水生态系统的异常变化；4.为内陆水域的保护和管理提供科学依据。
三、内陆水域浮游植物监测的方法内陆水域浮游植物监测的方法主要包括野外调查和实验室分析两个方面。
1.野外调查野外调查是内陆水域浮游植物监测的重要方法之一。
野外调查的主要内容包括：（1）样品采集：采集内陆水域中的浮游植物样品，包括表层水样、底层水样和沉积物样品等。
（2）样品处理：将采集的样品进行处理，包括过滤、染色和显微镜观察等。
（3）数据记录：记录样品的采集时间、地点、深度和浮游植物的种类、数量和分布情况等。
2.实验室分析实验室分析是内陆水域浮游植物监测的另一种重要方法。
实验室分析的主要内容包括：（1）样品处理：将采集的样品进行处理，包括过滤、染色和显微镜观察等。
（2）数据分析：对样品中的浮游植物进行分类、计数和统计分析等。
（3）结果报告：将实验室分析的结果进行整理和报告，包括浮游植物的种类、数量和分布情况等。
四、内陆水域浮游植物监测的注意事项内陆水域浮游植物监测需要注意以下几个方面：1.采样时要注意样品的代表性，避免采集到不同深度和不同位置的样品混合在一起。
研究浮游植物常用的方法
研究浮游植物常用的方法浮游植物是水中的微型植物群体，主要包括藻类和悬浮植物等。
它们在水生生态系统中起着非常重要的作用，不仅是水中有机物的重要来源，还能够维持水质平衡，并为其他生物提供生活所需的氧气。
因此，研究浮游植物的分布、生态特征及其与环境因素之间的关系，对于理解水生生态系统的结构和功能具有重要意义。
以下是研究浮游植物常用的方法：1. 采样分析法：这是最常见的研究浮游植物的方法之一。
在湖泊、河流或海洋中采集水样，然后通过显微镜观察和计数水中的浮游植物。
这种方法可以获得浮游植物的种类组成和数量分布等信息。
2. 长时间监测法：利用自动水质监测仪器，连续监测水体中的浮游植物。
这种方法可以获得时间序列的数据，揭示浮游植物的季节变化规律，并与环境因素进行关联分析。
3. 光合作用测定法：通过测定浮游植物的光合作用速率和光合色素含量等参数，评估其生长和活性状态。
这种方法可以评估浮游植物对光照强度和营养物质的响应能力，揭示浮游植物的生态适应性。
4. 分子生物学方法：利用分子生物学技术，如PCR和DNA测序，对浮游植物的种类和亲缘关系进行分析。
通过提取和分析浮游植物的DNA，可以鉴定浮游植物的种类，甚至对未知种进行分类鉴定。
5. 滨浅法：该方法是在滨浅区域布置采样设备，如固定附着式采枝器、正接触落水手法、藻类拉网法等。
通过长时间的滨浅观察和采样，可以评估浮游植物的垂直分布和生态特征。
6. 光合与呼吸测定法：该方法基于浮游植物在光合和呼吸过程中产生的氧气和二氧化碳的浓度变化。
通过测量水样中氧气和二氧化碳的浓度变化，可以推导浮游植物的光合速率和呼吸速率，进而评估其生态功能。
总结起来，研究浮游植物的常见方法包括采样分析法、长时间监测法、光合作用测定法、分子生物学方法、滨浅法和光合与呼吸测定法等。
这些方法可以从不同角度了解浮游植物的分布、生态特征和生理过程，为水生生态系统的保护和管理提供科学依据。
浮游植物的采集 计数与定量方法
。如下面的不浓浓缩缩体积稀与释 水透明度（体现水的肥瘦）之间关系大致如下， 仅供参考。
瘦中 肥
透明度 >1m 老水 特老水
>50cm
>30cm
<30cm <20cm 浓2缩020/的3/27标准是以每个视野里有十几个藻类为宜。
三、计数方法
将浓缩沉淀后水样充分摇匀后，立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品，注入
体积公式计算细胞体积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数。
这样体积值（μm-3）可直接换算为重量值（109μm-3）可直接换算
为重量值（109μm-3≈1毫克鲜藻重）。
下列体积公式，可供计算生物量时参考：
圆锥体：V=1/3лR2h
圆柱体：V=лR2h
球 体：V=4/3лR3
椭圆体：V＝4/3ab2л（a为长轴半径，b为短轴半径）
0 . 1 ml 计 数 框 内 （ 计 数 框 的 表 面 积 最 好 是 2 0 × 2 0 ㎜ 2 ） ， 小 心 盖 上 盖 玻 片 （
22×22㎜2），在盖盖玻片时，要求计数框内没有气泡，样品不溢出计数框。
然后在14×40或16×40倍显微镜下计数。即在400－600倍显微镜下计数。每
瓶标本计数两片取其平均值，每片大约计算50～100个视野，但视野数可按浮
入虹吸管内，管口应始终低于水面，虹吸时流速流量不可过大，吸至澄 清液1／3时，应控制流速，使其成滴缓慢留下为宜。
采水时，每瓶样品必须贴上标签，标签上药剂在采集的时间、地点、 采水体积等，其他详细内容应另行做好记录，以备查对，避免错误。
1000m浓l 缩30的ml 体5积0 m视l 浮100游ml 植物的多少而定。也可根据水的肥瘦确定浓缩体积
浮游生物样品采集与分析
浮游生物的种类与分布
浮游生物的种类繁多，分布广泛，几 乎存在于全球各地的水域中。
不同地区和不同水域的浮游生物种类 和数量分布各不相同，受到温度、光 照、盐度、水深等多种因素的影响。
浮游生物的生态作用
浮游植物通过光合作用产生氧气， 是水生生态系统中的主要生产者
采集浮游生物需要使用各种工具和设备，如浮游生物网、采水器、标本瓶、显微 镜、计数板等。这些工具和设备用于捕获、保存和观察浮游生物样品。
样品处理与保存
总结词
对采集到的浮游生物样品进行处理的步骤和方法。
详细描述
对采集到的浮游生物样品需要进行适当的处理和保存，以保持样品的代表性和完整性。处理方法包括洗涤、筛选、 浓缩、固定等，保存则通常采用加入适量固定剂或保存液，以及低温或冷冻等方法。样品处理和保存的步骤对于 保证分析结果的准确性和可靠性至关重要。
计数法
总结词
根据一定体积的浮游生物样品中含有的 个体数量进行计数。
VS
详细描述
计数法是浮游生物分析中最常用的方法之 一，通过在一定体积的样品中计数浮游生 物的个体数量，可以得出该体积内的浮游 生物密度。该方法需要使用计数板或计数 池等工具，操作简便，结果准确。
生物量测定法
总结词
通过测量浮游生物样品的重量、干重或湿重 来推算其生物量。
采样点的选择与布局
采样点选择
在选择浮游生物采样点时，应考虑水 体的类型、流速、水深、水质、底质 等因素，以确保采集到的样品具有代 表性。
采样点布局
采样点的布局应遵循均匀分布的原则 ，尽可能覆盖整个水体，避免出现采 样盲区。
采样时间与频率
浮游动植物的采集和标本保存
浮游动植物的采集和标本保存一、采集用具25号筛绢浮游生物网，13号筛绢浮游生物网，吸管，标本瓶（50毫升小塑料瓶、玻璃吸管和200毫升塑料广口瓶），标本夹，吸水纸，台纸，镊子，采集刀，塑料桶等，固定液：鲁哥氏液（即I一IK溶液）、福尔马林（甲醛）。
浮游生物网制作方法如下：①规格。
网口直径为20厘米，网袋长60厘米，网底应安装一个带阀门的集中杯。
网袋的质地为尼龙筛绢。
筛绢的号码及网孔大小，随采集对象的大小而定。
采集大型浮游动物时，用13号（0.112mm）筛绢，采集小型浮游藻类时，用25号（0.064mm）筛绢。
②制作方法。
取3～4毫米粗的铜丝或铅丝作一个直径20厘米的网口，用以支撑网口始终张开。
用金属或玻璃制作一个带阀门的集中杯（或购买），用来收集过滤到的浮游藻类。
在网袋的上下口处接一段白布，使筛绢不与金属直接接触，以免磨损筛绢。
网袋缝合处也应加缝2厘米长的白布条，以加固缝合处。
二、采集方法淡水生物分布很广，其中大多数生活在各种不同的水体中，此外还有些生活在潮湿的土壤表面、树皮、墙壁及石壁上，极少数种类生于长年积雪的高山上；少数种类与其它动植物共生；或寄生在别的生物体中。
因此，各种藻类在其具体的生活状态、藻体的大小、生活环境及每年的发生时期都有很大差异。
因此，采集浮游生物首先需要对以上情况有基本了解，以便确定相应的采集方法。
1．浮游藻类这些藻类个体微小，单细胞或群体，没有鞭毛，完全借水力漂浮在水中或具鞭毛在水体中仅有微弱的运动能力，采集这些藻类可视具体情况进行采集。
①在水面较大、较深的水体中，应用25号浮游生物网采集。
采集时应把网没入水面下并以大八字形（∞）来回缓缓捞取。
水色较清、藻类数量少时可多捞一会，反之可少捞一会。
最后将网垂直提出水面，打开底管阀门，把标本液注入标本瓶中。
特别应注意作好记录，编号并在标本瓶上贴好标签。
在定量采集时分别取水体上、中、下层水在水桶中混合均匀，然后取200毫升装入广口塑料瓶中。
浮游植物的采集、计数与定量方法PPT教学课件
几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算结果和平均数之差如不大
于其均数的±15％，其均数视为有效结果，否则还必须测第三篇，直至三片
平均数与相近两数之差不超过均数的15％为止，这两个相近值的平均数，即
可视为计算结果。
在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中，另一部分在视野外，这
时可规定出在视野上半圈者计数，出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞
第三环节 揣摩意象，领略意境
—理解作品
• 克服了文字障碍，理顺了句子关系，明白了 诗句的大意，再读起作品，注意力就不会受到 疑难字句的羁绊，想象力也不会因句意不通而 阻隔，思维便可以摆脱字面而进入画面了，就 有能力形成整体印象，或分解出一个个意象， 进而再联系起来，统合起来，对作品作出一个 客观的完整的认识。这就是解释作品。其基本 原则是忠于原作，追求本意。如叶老所说： “就是明白作者的意思情感，不误会，不缺漏， 作者表达些什么，就完全领会他那些什么。”
通过对这一个个意象的把握及联缀，我们就可以 把这首词的整体意境描述为：上阙写作者酒后望月 驰思，对天上人间的无限感慨；下阙写辗转不寐思 念亲人，又感悟到万事万物自古难全的道理，由此 得以自慰和宽解，并表达对亲人的美好祝愿。
圆锥体：V=1/3лR2h 圆柱体：V=лR2h 球 体：V=4/3лR3 椭圆体：V＝4/3ab2л（a为长轴半径，b为短轴半径） 圆台体：V＝1/3лH（ R12 + R22 R1 R2 ） 长方体与正方体ab×h或a3
硅藻细胞的计算通式：V＝壳面面积×带面平均高度 不规则性藻类可分可为几个部分计算。
第一章浮游植物的采集、计数 与定量方法
浮游植物（Phytoplankon）又称浮游藻类，是水中悬浮生活的若 干种藻类的总称。
4.实验四__浮游植物采集和定量
将样品倒入量筒中沉淀浓缩 直接在广口瓶中浓缩，但要确定体积
4. 浮游植物定性：浮游植物
样品采集参照文献( 国家环保总 局，2002 )的方法。定性样品用 孔径约0.064 mm的25号浮游生物 网在水面下约0.5 m处以适当的速 度作“∞”字形来回拖动1～3 min，获得的浓缩样分为两份，一 份立即用适量的鲁哥氏液固定， 另一份活体样品于24小时内镜检。
镜头法需量测量镜头的直径d，实验室目前常用的镜头的视野直径： d1=2000um（10x），1000um（20x），500um（40x） d2=1800um（10x），900um（20x），450um（40x） 镜头面积=πr2。
使用的工具有： 100µl移液枪（带有0.1毫 升刻度的小吸管），容量为0.1毫升的计数 框（面积20ⅹ20毫米2）和具有移动台的显 微镜。
5. 计数：计数一定体积内的浮游 植物种类和数量
显微镜计数方法选择： 采用行格法或镜头法，确定计数行格 和镜头内的浮游植物种类和数量。行格法 一般每片计数3、5、8行/列中的植物；镜 头法必须确定观察镜头（即视野光圈）的 直径/面积，通过随机移动镜头，计数所有 镜头内的藻类。
行格法按照计数玻片上的格子确定技术范围， 玻片样品池长x宽=20mmx20mm，即每列长x宽=20mmx2mm 计数水样体积=0.001mlx计数格数
效结果，否则还必须测第三片，直至三片平均数与相近两 数之差不超过均数的15％为止。
在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中，另一部 分在视野外，这时可规定出在视野上半圈者计数，出现在 下半圈者不计数。数量最好用细胞表示，对不宜用细胞数 表示的群体或丝状体，应分细胞大小分类计数。
计数时记录保持整洁清晰，便于整理计算。应明确记录采 样时间、地点、原水样体积、浓缩体积、计数片数和视野 数。
浮游动植物调查方法
浮游动植物调查方法1.方法与原理1.1采样点水体中浮游生物的分布不是很均匀的，通常因水体形态、深度、水源几出口、风、光照以及其他环境条件而差异，因此必须选择有代表性的地点进行采样。
在一般情况下，湖泊的湖湾和中心部分，沿岸有水草区和无水草区浮游生物的种类和数量都有不同。
当有风引起水流时，浮游生物多聚集在水流冲击的下风向一侧，总量较高。
此外，水源入口处，不同时间各水层的光照和温度条件下浮游生物的种类和数量都会有所不同。
采样点的数目根据水体的具体条件而定。
水体面积大的，条件复杂的，采样点要多些；要有较高人力、时间和经费等条件允许的，采样点也可以多些。
1.2采集采集工具主要有采集网和采水器。
当一般定性采集时，可站在船舱内或甲板上，将采集网系在竹竿或木棍前端，放入水中作∞形循回拖动（网口上端不要露出水面），拖动速度不要超过0.3米/秒。
如若拖动太快，水在网内会发生回流，将使网内的浮游生物冲到网外。
当一般定量采集时，各种类型的采水器均可使用，但一定要能分层采水。
在水深不超过10米的水体采样时，可用自制的采水器。
采水器可以采集到那些易从网孔中漏失的微小浮游生物。
但因采集水量有限，很难采到密度较稀和游动能力强的较大类型种类。
1.3固定和保存采到的样品必须在5分钟以内加以固定。
常用的固定液有福尔马林、刘哥氏液、甘油—福尔马林保存液、Rodhe碘固定液。
福尔马林为含有40%甲醛的药品。
一般按每100毫升水样加入约4毫升福尔马林（含1.6%甲醛），也就是说用4%福尔马林固定。
1.4浓缩化学沉淀法：所才水样用福尔马林加以固定静置1—2昼夜使之沉淀，用宏吸管吸去上面清夜，将下层包括沉淀物的浓液移入小容器中，再静置沉淀。
必要时可反复进行，直到浓缩到10—50毫升为止。
1.5观察与鉴定对所采到的浮游生物种类进行全面的种的鉴定，是一项难度和工作量都很大的工作，常常需要各方面的专家协同进行。
种类鉴定可采用检索表和图鉴相结合的方法。
青岛市区海湾表层海水浮游植物采样准备
1、叶绿素a粒度分析：1.1 物料仪器准备：a) 采水：1L广口瓶（12个），叶绿素采样记录表（表H.1）；b) 抽滤：包括滤器、支架、抽滤瓶和真空泵；滤膜：200µm筛绢、20µm筛绢、2µm 核孔滤膜、0.65µm孔径玻璃纤维滤膜；（滤后滤膜应在1h内提取，若无条件提取测量，可将滤膜对折，用铝箔包好，存放于低温冰箱（-20℃）保存期可为60d或放入液氮中保存期可为一年）；c) 仪器设备：-20℃低温冰箱，荧光分光光度计（激发光波长450nm，发射光波长685nm），分光光度计，提取瓶。
d) 试剂：标准叶绿素a溶液（制备：过滤一定量的生长良好、处于指数生长前期的培养硅藻，用90%丙酮提取其叶绿素a，或者用90%丙酮溶解一定量的市售叶绿素a结晶，浓度大约为ρ＝1mg/dm3）；体积分数为90%的丙酮；体积分数为10%的盐酸；碳酸镁溶液(MgCO3)=10g/dm3。
2、微型、小型浮游植物（2µm~200µm）：2.1 物料仪器准备：a) 采样：1L样品瓶10只（采水不少于500cm3）、200µm筛绢（预过滤）、20µm筛绢b) 固定剂：预固定：鲁哥氏液（Lugol’s solution）：100g碘化钾溶于1 dm3蒸馏水，加入50g碘使其溶解，再加入100cm3冰醋酸；保存固定：缓冲甲醛溶液：商用甲醛（40%）加入同量蒸馏水，1 dm320%的甲醛溶液加100 g六次甲基四胺。
c) 保存样品后：总编号、浮游生物海上采样记录表（表H.11）d) 计数和鉴定仪器和物料：落射荧光显微镜、光学显微镜、倒置显微镜、取样管，浮游植物计数框、采水浮游生物标本个数计数记录表或浮游植物细胞个体记录表（表H.14和表H.15）3、微微型浮游植物（<2µm）：3.1 物料仪器准备：a) 采样：小采样瓶（每次采水宜不少于30cm3）、铝箔纸（包裹采样瓶避光）、20μm筛绢（预过滤）、海洋微微型光合浮游生物海上采样记录表（表H.9）、移液管（1ml移液器）、预先贴好标签的冻存管、2μm核孔滤膜b) 仪器：液氮罐、超低温冰箱、流式细胞仪c) 试剂：固定剂：多聚甲醛（10%水溶液，经0.2μm微孔滤膜预过滤），戊二醛(电子显微镜等级，25%水溶液，经0.2μm微孔滤膜预)：多聚甲醛和戊二醛的混合液；液氮；注：10%多聚甲醛水溶液的制备：在通风橱中把10g多聚甲醛放在85cm3蒸馏水中，在70℃加热2h 使其均匀混合；加入少量NaOH溶液（1 mol/dm3）直至溶液澄清；加入10cm310%磷酸缓冲液，调节pH到7.5，溶液体积到100cm3；使用Whatman玻璃纤维滤膜(Grade 113)过滤，将过滤后的多聚甲醛溶液分装于10 cm3试管中，储存于-20℃下。
浮游植物取样测定规范
水体浮游植物分析规范参考淡水生物资源调查技术规范DB43/T 432-2009➢水层设置水深小于3m时，只在中层采样，混合均匀水体，可以只采表层（0.5m）水样；水深3m～6m时，在表层、底层采样，其中表层水在离水面0.5m处，底层水在离泥面0.5m处；水深6m～10m时，在表层、中层、底层采样；水深大于10m时，在表层、5m、10m水深层采样，10m以下除特殊需要外一般不采样，对于深水湖泊，取样的水层可以将取样间隔加大，如0m,10m,20m,50m, 100m。
➢采样定量样品在定性采样之前用采水器采集，每个采样点取水样1L，贫营养型水体应酌情增加采水量。
泥沙多时需先在容器内沉淀后再取样。
分层采样时，取各层水样等量混匀后取水样1L。
大型浮游植物定性样品用25号浮游生物网在表层缓慢拖曳采集，注意网口与水面垂直，网口上端不要露出水面。
➢固定浮游植物样品立即用鲁哥氏液固定，用量为水样体积的1％～1.5％。
如样品需较长时间保存，则需加入37%～40％甲醛溶液，用量为水样体积的4％。
现行的一些规律性的方法为：取水样，500ml,加入5ml鲁格，虹吸到30-50ml,加入1ml甲醛。
➢水样的沉淀和浓缩固定后的浮游植物水样摇匀倒入固定在架子上的1L沉淀器中，2h后将沉淀器轻轻旋转，使沉淀器壁上尽量少附着浮游植物，再静置24h。
充分沉淀后，用虹吸管慢慢吸去上清液。
虹吸时管口要始终低于水面，流速、流量不能太大，沉淀和虹吸过程不可摇动，如搅动了底部应重新沉淀。
吸至澄清液的1/3时，应逐渐减缓流速，至留下含沉淀物的水样20mL～25（或30～40）mL，放入30（或50）mL的定量样品瓶中。
用吸出的少量上清液冲洗沉淀器2次～3次，一并放入样品瓶中，定容到30（或50）mL。
如样品的水量超过30（或50）mL，可静置24 h后，或到计数前再吸去超过定容刻度的余水量。
浓缩后的水量多少要视浮游植物浓度大小而定，正常情况下可用透明度作参考,依透明度确定水样浓缩体积见表3，浓缩标准以每个视野里有十几个藻类为宜。
浮游动植物调查方法
浮游动植物调查方法1.方法与原理1.1采样点水体中浮游生物的分布不是很均匀的，通常因水体形态、深度、水源几出口、风、光照以及其他环境条件而差异，因此必须选择有代表性的地点进行采样。
在一般情况下，湖泊的湖湾和中心部分，沿岸有水草区和无水草区浮游生物的种类和数量都有不同。
当有风引起水流时，浮游生物多聚集在水流冲击的下风向一侧，总量较高。
此外，水源入口处，不同时间各水层的光照和温度条件下浮游生物的种类和数量都会有所不同。
采样点的数目根据水体的具体条件而定。
水体面积大的，条件复杂的，采样点要多些；要有较高人力、时间和经费等条件允许的，采样点也可以多些。
1.2采集采集工具主要有采集网和采水器。
当一般定性采集时，可站在船舱内或甲板上，将采集网系在竹竿或木棍前端，放入水中作∞形循回拖动（网口上端不要露出水面），拖动速度不要超过0.3米/秒。
如若拖动太快，水在网内会发生回流，将使网内的浮游生物冲到网外。
当一般定量采集时，各种类型的采水器均可使用，但一定要能分层采水。
在水深不超过10米的水体采样时，可用自制的采水器。
采水器可以采集到那些易从网孔中漏失的微小浮游生物。
但因采集水量有限，很难采到密度较稀和游动能力强的较大类型种类。
1.3固定和保存采到的样品必须在5分钟以内加以固定。
常用的固定液有福尔马林、刘哥氏液、甘油—福尔马林保存液、Rodhe碘固定液。
福尔马林为含有40%甲醛的药品。
一般按每100毫升水样加入约4毫升福尔马林（含1.6%甲醛），也就是说用4%福尔马林固定。
1.4浓缩化学沉淀法：所才水样用福尔马林加以固定静置1—2昼夜使之沉淀，用宏吸管吸去上面清夜，将下层包括沉淀物的浓液移入小容器中，再静置沉淀。
必要时可反复进行，直到浓缩到10—50毫升为止。
1.5观察与鉴定对所采到的浮游生物种类进行全面的种的鉴定，是一项难度和工作量都很大的工作，常常需要各方面的专家协同进行。
种类鉴定可采用检索表和图鉴相结合的方法。
浮游植物的采集计数和定量方法
浮游植物的采集计数和定量方法浮游植物是水生态系统中重要的底层生物类群，对于水质评价、生态监测以及环境保护都具有重要的意义。
因此，准确、高效地采集、计数和定量浮游植物是水环境研究的关键步骤。
下面将介绍浮游植物的采集计数和定量方法。
一、浮游植物的采集方法：1.根据采样目的和特定环境条件选择合适的采样方法，常用的采样方法有以下几种：(1)铁丝网挡截式采样：在浮游植物出现较为集中的水域使用，将铁丝网固定在一个框架上，让水流通过铁丝网，实现浮游植物的挡截和收集。
(2)网捞式采样：适用于浮游植物密度较高的水域，用网捞将浮游植物从水中捞出。
(3)浮游植物捕集器的采集：常用的浮游植物捕集器有浮游植物网式捕集器、浮游植物漏斗捕集器、浮游植物湖泊型捕集器等。
2.采样前要选择合适的采样点，宜选择浮游植物密度较高的水域进行采样。
采样容器要先用水冲洗，尽量不带有任何异物，以避免对采样物质的污染。
3.采集浮游植物时应避免过度搅荡水体，以防浮游植物的破碎和污染。
4.采集样本时要注意保持样本的完整性，以确保后续的计数和分析的精确性。
二、浮游植物的计数方法：1.显微镜计数法：将采样的浮游植物样本放入显微镜下，通过目视计数的方式，记录不同种类的浮游植物数量。
2.染色计数法：采用一些常见的染色剂（如碘酒、卡内基氏溴酸可乐定等）将浮游植物样本染色后，在显微镜下对染色后的样本进行计数。
3.流式细胞仪计数法：利用流式细胞仪可以对样本中的细胞进行高效、自动化的计数和分析。
三、浮游植物的定量方法：1.干重法：将采集回来的样本在高温下干燥至恒定重量后，通过测量干物质的质量差值计算浮游植物的生物量。
2.叶绿素-a含量测定法：通过提取样本中的叶绿素-a，利用比色法测定其叶绿素-a的含量。
然后根据叶绿素-a的含量可以推算出浮游植物的生物量。
3.DNA分子量法：通过提取样本中的DNA，利用分子生物学技术测定其DNA的分子量。
再根据已建立的浮游植物DNA分子量和生物量的线性关系，可以推算出浮游植物的生物量。
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2．采样点的选择及采样层次的确定
选择采样点的原则是，采样点在平面上的分布 要有代表性。一般要求湖心、库心、江心必须采样 ，有条件时采样点可适当多设一些，如大的湖湾、
库湾、河流的上、中、下游水体的沿岸带、浅水区
等也要设点采集。
凡水深不超过2米者，可于采样点水下0.5m处
第一章 浮游植物的采集、计数 与定量方法
浮游植物及其生产力是水生态系统的重要成 员与重要功能之一，是鱼类天然饵料的重要 组成部分。由于浮游植物对环境的变化十分 敏感，故在环境监测中，也有重要作用。
在鱼类生长季节，研究水中藻类组成和现存量 （Standing crop），可为养殖鱼类的合理投放
提供重要的科学依据。同时为水生态研究及利 用提供了有用的资料。
四、数量与生物量的计算：
1．一升水中的浮游植物的数量（N）可用下列 公式计算： Cs V N Pn Fs Fn U
Cs — 计数框体积（mm2），一般为400 mm2 。 Fs — 每个视野的面积(mm2)，лR2，视野半径r可用台微尺测出。 Fn — 计数过的视野数。 V — 一升水样经沉淀浓缩后的体积（ml） U — 计数框的体积（ml）为0.1ml。 Pn — 计数出的浮游植物个数。 如果计数框、显微镜固定不变，Fn、V、U也固定不变，则上述公式 可简化为：N=K×Pn。 Pn代表某种藻类的个数，计算结果N只表示一升水中这种藻类的数 量；Pn若代表各种藻类的总数，计算结果N则表示一升水中浮游植 物的总数。前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可。
浮游植物的现存量，指的是某一瞬间单位水体中
所存在的浮游植物的量。这个量有两种表示方法 ，用数目单位表示成为密度，一般用万个／升为 单位，五、六十年代用之；用重量单位（mg/L）
表示的现存量称为生物量（Biomass）。
一、采样：
1.采水器：各种采水器均可，一般浅水（<10m）
湖泊可用玻璃瓶采水器，深水湖泊或水库必须用
⑶湖泊：中心区设一点。进水口和出水口也应设点。
3．采样量及采样次数
每一个采样点应采水1000ml。若系一般性调查，可 将各层采的水等量混合，取1000ml混合水样固定；或 者分层采水，分别计数后取平均值。分层采水可以了
解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类。
采得水样后立即加入10-15ml鲁哥氏液固定，
在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中， 另一部分在视野外，这时可规定出在视野上半圈者计 数，出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞表示， 对不宜用细胞数表示的群体或丝状体，可求出其平均 细胞数。 计算时优势种类尽可能鉴别到属，注意不要把浮游 植物当作杂质而漏计。 计数时可按下列格式记录，然后再进行整理计算。 视野数 正 正 正正 种 类 小球藻 衣 藻 小环藻 第一片 正正 正 正 第二片 正正 正 正
采水时每瓶样品必须贴上标签，标签上药剂在 采集的时间、地点、采水体积等，其他详细内容应
另行做好记录，以备查对，避免错误。
浓缩的体积视浮游植物的多少而定。也可根据水 的肥瘦确定浓缩体积。
浓缩的标准是以每个视野里有十几个藻类为宜。
三、计数方法
将浓缩沉淀后水样充分摇匀后，立即用0.1ml吸量管吸出 0.1ml样品，注入0.1ml计数框内（计数框的表面积最好是 20×20mm2），小心盖上盖玻片在盖盖玻片时，要求计数 框内没有气泡，样品不溢出计数框。然后在显微镜下计数。 每瓶标本计数两片取其平均值，每片大约计算50～100个 视野，但视野数可按浮游植物的多少而酌情增减，如平均 每个视野不超过1～2个时，要数200个视野以上，如果平 均每个视野有5～6个时要数100个视野，如果平均每个视 野有十几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算 结果和平均数之差如不大于其均数的±15％，其均数视为 有效结果，否则还必须测第三片，直至三片平均数与相近 两数之差不超过均数的15％为止，这两个相近值的平均数， 即可视为计算结果。
鲁哥氏液即将6克碘化钾溶于20ml水中，待其完全
溶解后，加入4克碘充分摇动，待碘全部溶解后定 容到100ml即配成鲁哥氏液。泥沙多时沉淀后再取 水样。 采样次数可多可少。有条件时还可逐月采样 一次，一般情况可下及采样一次，最低限度应在 春季、夏季末、秋初各采样一次。
二、沉淀浓缩：
上述水样摇匀后倒入1000ml圆柱形沉淀器中 沉淀24小时。用虹吸管抽出上清液。剩下30-50 ml 沉淀物转入50ml的定量瓶中；再用刚才抽取的上 清液少许冲洗三次沉淀器，冲洗液转入定量瓶中。 凡以碘液固定的水样固定的水样，瓶塞要拧紧。 还要加入2-4％的甲醛固定液（福尔马林），即每 100ml样品需另加4 ml福尔马林，以利于长期保存。
采水，水深2～10米以内，应距底0.5米处另采一个
样，水深超过10米时。应于中层增采一个水样。
⑴池塘：样点可设在距岸边 1m 处。
水深小于 2m 时采一中层水样。若水深 大于 2m 时，最好采上、中、下层水样。
亚表层：水下20cm左右。
中 层：水体中间部分。 下 层：离底20cm左右。
⑵水库及河流：样点可设在上、中、下游。 上游：设十个点（亚表层或中层） 中游：水在2－3米深时设一个点，采2个样（上中 层和中下层） 下游：设2－3个样点。中心点3个样（上、中、下 层），两测点各一个样（中层）
2．生物量一般按体积来换算。这是因为浮游植物个 体积小，直接称重较困难，且其细胞比重多接近于1。 可用形态相近似的几何体积公式计算细胞体积。细 胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数。这样体积
值（μm-3）可直接换算为重量值ห้องสมุดไป่ตู้109μm-3）可直接
换算为重量值（109μm-3≈1毫克鲜藻重）。
每种藻类至少随机测量 20个以上，求出这种 藻类个体重的平均值，一般都制成附表供查找。 此平均值乘上一升税种该种藻类的数量，即得 到一升水中这种藻类的生物量（mg/L）。 由于同一种类的细胞大小可能有较大的差别 ，同一属内的差别就更大了，因此必须实测每 次水样中主要种类（即优势种）的细胞大小并 计算平均重量，其他种类可以参考附表计算。
藻类的生物量可直接作为初级生产力 的一种指标，根据几次定期测算的现存量 之差亦可估计出生产量。 定量结果应列出总生物量、各门生物 量、优势种属。在条件许可时还可以用较 简单的测定叶绿素法，来对照或代替生物 量。但叶绿素法不能反映种类组成情况。