实验7 血糖的测定

已知浓度 葡萄糖液
未知浓度无 蛋白血滤液
蒸馏水
编号 标准葡萄糖液 (0.025mg/mL)
标准管 2.0
测定管 —
空白管 —
无蛋白血滤液 （mL）
蒸馏水 （mL） 碱性铜试剂 （mL)
—
— 2.0
2.0
— 2.0
—
2.0 2.0
充分摇匀，置沸水浴准确煮沸8分钟，取出后切 勿摇动，置于冷水浴冷却
磷钼酸 试剂 （mL)2.02.0源自2.0混匀，放置3分钟
蒸馏水 （mL）
3.0
3.0
3.0
将各试管摇匀后，在620nm波长下，以空白管校零， 测定吸光度值。
空腹血糖正常值
一般空腹全血血糖为3.9～6.1mmol/L(70～110毫克/分
升)，血浆血糖为3.9～6.9mmol/L(70～125毫克/分升)。
空腹全血血糖≥6.7mmol/L(120毫克/分升)、血浆血糖 ≥7.8mmol/L(140毫克/分升)，2次重复测定可诊断为糖尿
当空腹全血血糖在5.6mmol/L(100毫克/分升)以上，血浆
血糖在6.4mmol/L(115毫克/分升)以上，应做糖耐量试验。 当空腹全血血糖超过11.1mmol/L(200毫克/分升)时，表 示胰岛素分泌极少或缺乏。因此，空腹血糖显著增高时， 不必进行其它检查，即可诊断为糖尿病。
思考题
Folin-吴宪法为什么要用无蛋白血滤液？ Folin-吴法测定血糖的优缺点是什么？ 进行比色法测定时，如果测得样品的A值 超过100%，该如何处理，为什么？
实验原理
Cu2O↓ 葡萄糖＋Cu(OH)2 △ CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH+Cu2O↓+2H2O
钼蓝 Cu2O＋磷钼酸 3Cu2O+H3PO4· 2MoO3· 12H2O 6CuO+H3PO4· Mo2O3· 12H2O
钼蓝的蓝色深浅与葡萄糖的含量成正比，所以 可以用比色法来测定钼蓝的光吸收值来测定血 糖的含量（波长620nm)。
实验八 血糖的测定
Folin-吴宪法
Folin-吴宪法
吴宪： 我国著名生物化学家和营养学家 1912年 美国麻省理工学院 主修化学 1917年 哈佛大学医学院 师从美国著名 生物化学家福林(Otto Folin）教授进行血 液化学研究 研究期间改进血糖定量分析方法 吴宪改进的血糖测定法，为我国胰岛素 发现奠定了基础
实验试剂
无蛋白血滤液 标准葡萄糖液 碱性铜试剂 Cu(OH)2 制备：取干试管一支，加入蒸馏水3.5mL，血液 磷钼酸试剂 磷钼酸 0.1mL ，0.33mol/L H SO 0.2mL，10％ Na WO
0.2mL，混匀，待有澄清液出现后，过滤，收集 滤液备用。
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操作
标准管
测定管
空白管