实验 血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
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实验血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
【目的】
体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】
葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时,还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于:糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于:胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】
样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下,将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
【器材】
紫外分光光度计,恒温水浴箱,移液器(枪),枪头,试管
【药品】
葡萄糖测定试剂盒,试剂盒主要成分与浓度:
【样本】
新鲜无溶血血清。
【步骤】
将10ml R1与90ml R2混合均匀,即为工作液。
空白管校准管样品管工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml
蒸馏水0.01 ml ————
校准液——0.01 ml ——
样品————0.01 ml
分别混合均匀,37℃水浴10~15分钟(避免太阳光直射),用波长505nm、比色杯光径1.0cm,用空白管调“零”点测定各管的吸光度(A)值。
【计算】
【参考值】
血清/血浆:3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。
此范围仅供参考,各实验室须建立本室的参考值范围。
【参考文献】
1.全国临床检验操作规程(第二版),主编:叶应妩,王敏三,1997,P616.
2.Trinder P. Ann Clin Biochem,1969,6: 24-27.
血糖测定实验所需器材:
1.紫外分光光度计(比色杯光径1.0cm),
2.恒温水浴箱(能调温度的,37℃),
3.移液器(枪)(规格1.0ml 6个,20µl 6个),枪头各100个
4.试管50支,6个试管架
5.烧杯100ml一个,50ml(或25ml)6个
6.记号笔6支
7.蒸馏水1瓶