绿僵菌防治农林害虫研究进展

合集下载

绿僵菌菌剂培养及田间生物防治研究

绿僵菌菌剂培养及田间生物防治研究

绿僵菌菌剂培养及田间生物防治研究作者:杨文彬来源:《农业与技术》2017年第10期摘要:绿僵菌作为重要的生物农药制剂,研究及应用非常广泛。

本研究通过试验探索了固体培养绿僵菌L8500-2x菌株的最佳培养基配方及工艺条件,进行了田间试验示范推广,为有效利用绿僵菌进行田间合理的防治提供了科学参考。

关键词:绿僵菌;菌剂培养;生物防治中图分类号:S476.1 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20170533028绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是重要的昆虫病原真菌之一[1],将其作为主要生物活性成分的制剂,具有不污染环境、无残留、易生产、致病力强、持效期长、应用效果好、对非靶标生物安全等优点,其寄主范围广,可在8目30科200余种农林害虫上寄生,其应用前景非常广阔[2,3]。

近年来,由于化学农药的大量使用,食品安全和健康问题、环境保护问题倍受重视,生物农药的研发及推广具有深刻意义[4]。

目前,绿僵菌生物农药的生产普遍采用液固双相发酵工艺,其固体载体多为大米和稻壳,国外绿僵菌生产的固体载体多为稻米[5]。

绿僵菌制剂的剂型主要有粉剂、可湿性粉剂等,其助剂的成分和配比是当前研究热点。

本研究为了大量生产绿僵菌菌剂用于田间农作物害虫的防治,先采用液体发酵培养绿僵菌L8500-2x菌剂,再采用固体发酵培养绿僵菌L8500-2x菌粉,进行田间试验示范推广,可为有效利用绿僵菌防治农作物病害提供参考,为适应绿色农业的发展要求,减少高毒、高残留化学农药的使用提供科学方法。

1 试验材料与方法1.1 绿僵菌L8500-2x菌株固体发酵培养载体的筛选1.1.1 试验材料绿僵菌培养载体:麦麸、硅藻土、磷酸钙、锯末、谷糠、玉米粉;试验害虫是菜青虫2代幼虫。

1.1.2 试验方法[6]利用麦麸、硅藻土、磷酸钙、锯末、谷糠、玉米粉等廉价物质作为基质进行绿僵菌L8500菌剂的生产,观察不同供试载体对绿僵菌菌丝生长、产孢量和孢子萌发率的影响,经对比试验,确定固体培养绿僵菌L8500-2x菌种的最佳培养基配方及工艺条件[7]。

白僵菌和绿僵菌在农业害虫防治中的应用研究进展

白僵菌和绿僵菌在农业害虫防治中的应用研究进展

迟钝 ; 体 渐 变 为 淡 黄 色 , 肿 胀 , 现 僵 直 症 虫 略 出 状 。死亡 虫体 长 出 白 色菌 丝 , 续 保 湿 培 养 , 继 虫 体将 被 白色分生孢 子覆 盖 l 。 4 在绿 僵 菌 的作 用 下 , 体 活 动 减 弱 , 分 试 虫 部
虫还 抽搐 、 翻腾 , 头部 扬起 亦 左 右 晃动 , 色 逐 渐 体
AbtatT ecnrl bet, x y po tx e hns ma r l i sa dcnrl f c w r s c: h ot jcst i sm tm, i m c ai r oo oc oc m, i f mua o n ot f t e no tn o ee e
a io i o Co t o rc lu a n e t n spl ae t n r lAg iu t r lI s c
L u p ng, AIYo — e ZHANG n —e g De gf n
(ntueo l t rtco , i hi cdm f giu rl n oet , ii Q nh i 0 C ia Istt f a o t n Qn a A a e yo A r ha adF rs y X ng iga 8 hn ) i P nP ei g e r 1 1 0 6,
害生物 , 有益 生 物 包 括 微 生 物 、 类 、 等 植 物 , 藻 高 甚 至 昆虫和 哺乳动 物 。 它 利用 了生物 物种 问 的 ,
相 互关 系 , 以一种或 一 类 生物 抑 制另 一 种或 另 一 类生 物 。 白 17 8 8年 俄 国 人 Me H K B首 次 利 用 qHO 金 龟 子 绿 僵 菌 ( triu ns l e 防 治 奥 地 Me h i a i pi ) a zm o a 利 金 龟 子 ( n ol utaa 和 甜 菜象 甲 ( l — A ipi a s i ) s a rc Ce o r S u ai nr ) t n t ets 以来 , Up v i 昆虫病 原 真 菌在 农林 害虫 的防治 方 面得 到 不 断 的应 用 与 发 展 。本 文 就

绿僵菌毒素的研究进展

绿僵菌毒素的研究进展
Research Progress of M eta rh izium an isopliae D estrux in ZHANG Q iu (Bayuquan Entry2exit Inspection and Quarantine Bureau of Yingkou City in L iaoning Province, Yingkou, L iaoning 115007) Abstract W ith highly toxic infectivity acting on pest,M etarhizium anisopliae destruxin has a wide app lication p rospect in the control of agricul2 tural pests. It can be divided into low2molecular2weight compound and high2molecular2weight p rotein destruxin according to its molecular weight and configuration. The article particularly expatiated its molecular structure, category, extracting method, biology activity and p roducing condition. Key words M etarhizium anisopliae; Destruxin; B iology activity; Pests control
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri. Sci. 2009, 37 ( 30) : 15077 - 15079

海南省椰心叶甲绿僵菌研究的开题报告

海南省椰心叶甲绿僵菌研究的开题报告

海南省椰心叶甲绿僵菌研究的开题报告
一、研究背景和意义
椰心叶甲是一种危害椰树的害虫,它会吸取椰树的汁液导致椰树生长不良或死亡。

以前椰农常用的是农药来控制椰心叶甲,但农药的使用会对环境造成负面影响,因此
需要寻找更加环保的控制方法。

绿僵菌是一种广泛存在于自然界中的真菌,它可以作为生物杀虫剂来对付各种害虫,具有广泛的应用前景。

而海南省属于热带气候,有较高的湿度和温度,适宜绿僵
菌生长繁殖。

因此,通过研究绿僵菌对椰心叶甲的杀虫效果和应用方法,可以为海南
省的椰树生产提供一种新的控制椰心叶甲的方法。

二、研究内容和方法
1. 绿僵菌的筛选:采集海南省不同地区的绿僵菌样本,通过实验室的筛选评估,选出效果最好的绿僵菌菌株。

2. 绿僵菌的培养:选定绿僵菌菌株后进行基本培养,通过不同培养条件的优化,寻找最佳培养条件并提高绿僵菌的菌量。

3. 绿僵菌的杀虫效果评估:通过实验室和田间实验,评估绿僵菌对椰心叶甲的杀虫效果和适用范围。

4. 绿僵菌的应用方法研究:探究绿僵菌在椰树生产中的应用方法和效果,并建立绿僵菌的推广模式。

三、研究预期成果
1. 筛选出具有高杀虫效果的绿僵菌菌株,并通过优化培养条件提高其菌量。

2. 确定绿僵菌对椰心叶甲的杀虫效果,探究其适用范围和有效期。

3. 建立绿僵菌在椰树生产中的应用方法和效果,为椰树生产提供一种环保、可持续的新型控制方法。

绿僵菌与植物的多重关系及其在植物保护中的应用潜力

绿僵菌与植物的多重关系及其在植物保护中的应用潜力

绿僵菌与植物的多重关系及其在植物保护中的应用潜力作者:农向群王广君蔡霓刘蓉张泽华来源:《植物保护》2022年第03期摘要绿僵菌是广为知晓的昆虫病原真菌,被用作生物杀虫剂防治多种农林植物害虫。

近年发现它也是根际微生物群落的一员,且有证据表明它内生于一些植物的根组织中,具有促进植物生长、拮抗植物病原菌、诱导植物抗性等作用。

本文着重综述绿僵菌根际作用和植物内生性研究进展,从对植物的直接作用角度,了解其田间生态适应性及与植物的互作关系,以拓展昆虫病原真菌作为植物保护剂的认识,有助于根据生态学特点制定未来的生物防治应用策略。

关键词绿僵菌;植物内生真菌;根际定殖;真菌-植物互作;植保多功能中图分类号: S476文献标识码: ADOI: 10.16688/j.zwbh.2022215Abstract Metarhizium spp., as well-known entomopathogen fungi, have been used as biological insecticides to control a variety of agricultural and forestry pests. In recent years, it has been found that they are also members of the rhizosphere microbial community, and proved being endophyte in the root tissues of some plants. They can promote plant growth, antagonize plant pathogens and induce plant resistance. In this paper, the research progress on rhizosphere interaction and plant endogeneity of Metarhizium was reviewed. From the perspective of direct effects on plants, the ecological adaptability and interaction with plants were explained, so as to expand the understanding of entomopathogenic fungi as plant protective agents and help to develop future bio-control strategies based on their ecological characteristics.Key words Metarhizium;endophytic fungi in plant;rhizosphere colonization;fungus-plant interaction;multifunctional potential自从1879年俄国学者Metchnikoff成功地将绿僵菌用于田间防治金龟子[1],绿僵菌属Metarhizium就成为了昆虫病原真菌的典型代表被广泛知晓,并作为模式菌激起研究热点。

[3]绿僵菌的研究现状及进展

[3]绿僵菌的研究现状及进展

自从1879年梅契尼柯夫最先从奥地利金龟上分离到金龟子绿僵菌以来,已有100多年的历史。

近20年来,随着巴西和澳大利亚广泛使用金龟子绿僵菌防治甘蔗和牧草害虫取得较大进展,以及在非洲用黄绿绿僵菌(Metarhizium flavoviride )防治蝗虫实验的初步成功,借助于分子生物学技术和基因工程技术的大规模使用,人们在关注绿僵菌的同时,对它的研究领域也在不断深入。

1绿僵菌属的系统分类现状自Sorokin 于1883年建立绿僵菌属Metarhizium 以来,先后发表10余个种,由于不同作者采用的标准不一致,故分类状况比较混乱,目前国际上广泛接受的分类观点是Tulloch 建立的,他将绿僵菌属定为2个种,包括金龟子绿僵菌和黄绿绿僵菌,金龟子绿僵菌包括小孢变种和大孢变种[1]。

近年来,国内相继发表多个新种,但由于对其特征描述不尽完善收稿日期:2009-04-20基金项目:国家科技支撑计划项目(2007BAD30B03);广西科学研究与技术开发计划项目(桂科基0778006-8);广西农业科学院科技发展基金项目[2006004(Z )]作者简介:丁苗苗(1984-),女,安徽淮南人,硕士研究生,主要从事农业昆虫与害虫防治研究工作。

绿僵菌的研究现状及进展丁苗苗1,于永浩2,3,曾涛2(1广西大学农学院,南宁530005;2广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007;3华南农业大学资源环境学院昆虫学系,广州510640)摘要:介绍了近年来国内外在绿僵菌的分类、分离与鉴定方法、生物学特性和应用等方面的研究进展,指出绿僵菌在分子系统学研究、基因遗传育种、剂型的改进和扩大防治对象上已取得较大的进展,但与Bt 等杀虫微生物的研究相比还有较大差距。

提出应加强对高毒力绿僵菌菌株的筛选;在防治害虫时尽量减少湿度、紫外线以及土壤微生物和土壤物理、化学性质等对绿僵菌防效的影响,以提高绿僵菌对靶标害虫的防治效果。

关键词:绿僵菌;分类;分离鉴定;生物学特性;应用;研究进展中图分类号:S476+.12文献标识码:A文章编号:1002-8161(2009)11-1443-05Current situation and development research onMetarhizium spp.DING Miao-miao 1,YU Yong-hao 2,3,ZENG Tao 3(1Agricultural College ,Guangxi University ,Nanning 530005,China ;2Plant Protection Institute ,Guangxi Academy ofAgricultural Sciences ,Nanning 530007,China ;3Department of Entomology ,College of Resources and Environment ,South China Agricultural University ,Guangzhou ,Guangdong 510640,China )Abstract :The present study summarizes the researches on classification ,separation and identification method ,bio-logical characteristics and applications of Metarhizium spp.,at China and abroad during recent years.Recently ,the molec-ular systemic research ,genic inheritance breeding ,improving dosage formulation and enlarging control objects in Metarhizium spp.made a great progress ,but there is still a large gap compared to that of insecticidal microorganism such as Bt .Therefore ,the screening of highly toxic strain of Metarhizium spp.should be explored ,and the influence of humidi-ty ,ultra-violet radiations ,soil microorganism ,and soil physical and chemical characteristics affecting Metarhizium spp.should be studied to enhance the controlling effects of Metarhizium spp.on target insect pests.Key words :Metarhizium spp.;classification ;separation ;identification ;biological characteristics ;application广西农业科学2009年第40卷第11期1443··广西农业科学2009年第40卷第11期和各自所依据分种标准不一,因此也出现了对本属的鉴别性状和颜色变化幅度等特征的描述不够明确具体的现象。

绿僵菌对竹林金针虫的防治效果

绿僵菌对竹林金针虫的防治效果

第49卷第1期2022年3月福建林业科技JourofFujianForestrySciandTechVol 49 No 1Mar ,2022doi:10.13428/j.cnki.fjlk.2022.01.010绿僵菌对竹林金针虫的防治效果陈丽华1,张 威2,张亚波2,华锦欣1,雷亦晨1,黄秀凤3,戴 羚1(1 杭州市林业科学研究院,浙江杭州310022;2 中国林科院亚热带林业研究所,浙江杭州311400;3 杭州富阳国有农林资产经营有限公司,浙江杭州311400)摘要:近年来竹林地下害虫金针虫大面积发生,部分地区爆发成灾,竹笋产量和质量逐年下降。

为了大幅提升竹笋产量和品质,促进竹产业健康可持续发展,于2019—2021年在余杭瓶窑镇塘埠村、余杭径山镇西山村、富阳永昌镇青何村、富阳永昌镇长盘村等4个覆盖早竹林试验样地,遂昌县三仁乡坑口村非覆盖毛竹林试验样地,开展绿僵菌菌剂防治竹林金针虫田间试验。

结果表明:绿僵菌菌剂能够有效防治竹林金针虫,第1年施菌防治率为57 1%;第2年防治率达到85%以上,金针虫虫口密度降低60%以上。

说明绿僵菌连续施用2a对竹林金针虫有较为显著的防治效果。

关键词:竹林;金针虫;绿僵菌;林间试验;防治效果中图分类号:S763 38;S795 文献标识码:A 文章编号:1002-7351(2022)01-0062-04TheControlEffectofMetarhiziumpingshaenseonMelanotuscribricollisinBambooForestCHENLihua1,ZHANGWei2,ZHANGYabo2,HUAJinxin1,LEIYichen1,HUANGXiufeng3,DAILing1(1 HangzhouForestryAcademyofZhejiang,Hangzhou310022,Zhejiang,China;2 ResearchInstituteofSubtropicalForestry,ChineseAcademyofForestry,Hangzhou311400,Zhejiang,China;3 HangzhouFuyangState ownedAgriculturalandForestryAssetsManagementCompanyLimited,Hangzhou311400,Zhejiang,China)Abstract:Inrecentyears,theundergroundpestsofMelanotuscribricollisoccurredinlargeareasinbambooforests,andsomeareasbrokeoutintodisasters,andtheyieldandqualityofbambooshootsdeclinedyearbyyear Inordertosignificantlyimprovetheyieldandqualityofbambooshoots,andpromotethehealthyandsustainabledevelopmentofbambooindustry During2019—2021,thisar ticalcarriedouttheexperimentofMetarhiziumpingshaenscontrolMelanotuscribricollise,attangbuVillage,PingyaoTown,XishanVillage,YuhangJingshanTown,FuyangQingheVillage,YongchangTownandChangpanVillage,YongchangTown,Fuyang,KengkouVillage,SanrenTown,SuichangCounty inbambooforest,TheresultsshowedthatMetarhiziumpingshaensecaneffectivelycontroltheMelanotuscribricollisofbambooforest,Inthefirstyear,thecontrolratewas57 1% Inthesecondyear,thecontrolratewasmorethan85%,andthepopulationdensitywasreducedbymorethan60% TheresultsshowedthatcontinuousapplicationofMetarhiziumpingshaensfor2yearshadasignificantcontroleffectonMelanotuscribricollisinbambooforestKeywords:bambooforests;Melanotuscribricollis;Metarrhiziumpingshaense;experimentofmicrobialagentinforest;controlefficiency 浙江省是全国竹产业核心区域之一。

金龟子绿僵菌杀虫成效怎么样

金龟子绿僵菌杀虫成效怎么样

农业害虫防治:农业害 虫是农业生产中的一大 难题,金龟子绿僵菌作 为一种生物防治手段, 对于减少化学农药的使 用、保护生态环境具有 积极意义。
国内外研究现状
04
05
国内外研究进展:近年 来,国内外学者对金龟 子绿僵菌的研究不断深 入,对其致病性、杀虫 机制等方面进行了大量 研究。
研究空白:尽管金龟子 绿僵菌的研究取得了一 定进展,但在实际应用 中仍存在一些问题,如 杀虫成效不稳定、致病 力受环境影响等,需要 进一步研究。
03
杀虫作用机制研究
对昆虫的感染过程
01
02
03
接触感染
金龟子绿僵菌通过接触昆 虫体表或口器,进入昆虫 体内。
潜育期
金龟子绿僵菌进入昆虫体 内后,经过一段时间的潜 育期,开始大量繁殖并产 生毒素。
发病期
随着毒素的产生,昆虫出 现病症,表现为行动迟缓 、食欲不振等症状。
对昆虫的致病机制
抑制呼吸
金龟子绿僵菌产生的毒素 能够抑制昆虫的呼吸作用 ,导致昆虫窒息死亡。
02
金龟子绿僵菌概述
定义与分类
定义
金龟子绿僵菌是一种半知菌亚门、链 孢霉目的真菌,具有杀虫活性。
分类
根据其分类地位,金龟子绿僵菌属于 昆虫寄生真菌,能够寄生于多种害虫 体内。
生物学特性
生长条件
金龟子绿僵菌在适宜的温度、湿 度和营养条件下生长繁殖,对环 境具有较强的适应性。
传播途径
金龟子绿僵菌主要通过分生孢子 传播,能够通过气流、昆虫等途 径扩散到其他地区。
金龟子绿僵菌杀虫成效怎么 样
汇报人: 日期:
目录
• 引言 • 金龟子绿僵菌概述 • 杀虫作用机制研究 • 杀虫效果影响因素研究 • 实际应用与效果评估 • 结论与展望

绿僵菌防治蛴螬的应用研究进展

绿僵菌防治蛴螬的应用研究进展

绿僵菌防治蛴螬的应用研究进展
于永浩 ,龙秀珍 ,曾宪儒 ,韦德 卫 ,曾 涛
( 广西农业科学院植物保护研 究所/ 广西作物病虫害生物学重点实验 室,南宁 5 3 0 0 0 7 )
摘要 : 蛴螬是重要的世界性 地下 害虫 , 绿僵菌是防治害虫的重要 昆虫病原真菌 , 对蛴螬 有 良好 的防治效果 。文章 综述 了国内外对绿僵菌防治蛴螬的研究报道及商品制 剂的研 制和应 用现状 , 讨论 了温湿度和紫外线等环境 因素 对绿 僵菌 防治蛴螬效果 的影响 ; 指出助剂 的筛选 、 混合制剂的研 发 、 菌株退化机理和土壤抑 菌作用的研究等是绿僵菌 防治
YU Yo n g - h a o,LONG Xi u— z h e n,ZENG Xi a n— r l l , W EI De - we i ,ZENG Ta o
( I n s t i t u t e o f P l a n t P r o t e c t i o n, Gu a n g x i Ac a d e my o f Ag r i c u l t u r a l S c i e n c e s / G u a n g x i Ke y L a b o r a t o r y f o r B i o l o g y o f P l a n t Di s e a s e s
蛴螬 的研究热物 防治 ;研究进展 中图分类号 : ¥ 4 7 6 . 1 1 2 文献标 志码 : A
文章编 号 : 2 0 9 5 — 1 1 9 1 ( 2 0 1 3 ) 0 1 — 0 0 7 1 — 0 6
R,; Ke s e a r c h 1 1 D r o r g e s s i ‘ n a L ppl PPl i l c C a t i l c o n o f t M 1 1 / e t a r h l l i z Z i l u l l m a ni nt s o p l i t a e a g a i ns t whi t e g r u bs

绿僵菌对田间蔬菜害虫的生物防治实验术

绿僵菌对田间蔬菜害虫的生物防治实验术
年 7月 1 0日 ) 。
1 . 5 实验 处 理
依据。另外 , 绿僵菌生物农药对湿度和温度有要求 , 在使用时 , 一
定要考虑湿度 和温度对其药效的影响。
参 考 文 献
l 1 j B u s t i l l o A E,B e m a l M G, B e n a v i d e s P , e t a 1 . D y n a mi c s o f
B e a u v e i f a b a s s i a n a a n d Me t a r h i z i u m a n i s o p l i a e i n f e c t i o n g
实验设绿僵菌 1 0倍稀释液 、 双效一 B t 3 0 0倍及 清水 对照组共
7 天和 l 0天分别调查试验区残虫数量 ,计算虫 口减退率和防效 。 数据用 S P S S 1 6 . 0软件进行分析 。 虫 口减退率( %) = ( 处理区用药前
菌 目、 绿僵菌属 , 是一种广谱 的昆虫体内寄生菌物 。金 龟子绿僵 菌具 有寄主范 围广 , 致病力强 , 对人 、 畜、 农作物无毒 、 无残毒 , 菌 剂易生产 , 持效期长等优点 , 具有广 阔的应用前景。 2 0世纪 9 0年
甘蓝小菜蛾 、 甘蓝菜青虫 、 马铃薯二十八星瓢虫第一代幼虫 。
1 . 3 供试药 剂
虽有所下降 , 但均高于 6 0 %以上 , 且无农药污染 , 无残 留 , 使用方 便, 说 明绿僵 菌菌剂 l 0倍稀 释液 能有效控 制菜青虫 、 小菜蛾 和
蝗虫的数量。
双效一 B t 杀虫悬乳剂 ( 活孢子量 1 2 0亿" j ' / m L ) 由太原辉煌表 面工程高新技术有 限公 司提供 。

绿僵菌的研究进展

绿僵菌的研究进展

绿僵菌的研究进展2005年4月Apr.2005热带农业科学CHINESEJOURNALOFTROPICALAGRICULTURE第25卷第2期V o1.25,No.2绿僵菌的研究进展①代鹏②宋妍许天委谢玉平黄俊生③(中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南儋州571737)摘要综述了近年来国内外对绿僵菌属的分类,绿僵菌入侵寄主过程中的相关基因的研究,剂型开发等方面的概况.关键词绿僵菌;分类现状;相关基因;剂型开发分类号$432.44;Q949.32;Q78AdvancesofResearchonMetarhiziumspp. DAIPengSONGYanXUTianweiXIEYupingHUANGJunsheng (EnviromentandPlantProtectionInstitute,CATAS,Danzhou,Hainan571737) AbstractThearticlesummarizestheresearchonclassingstatusofMetarhiziumspp.,correlati on geneinthebreakinginsectandthepreparationofMetarhiziumanisopliaeinrecentyears. KeywordsMetarhiziumspp;classifyingstatus;correlationgene;preparation真菌生防制剂具有触杀性,流行性,对环境安全和不易产生抗药性等特点.70%的昆虫真菌性病害,在害虫控制方面有巨大的潜力.对绿僵菌[Metarhiziumanisopliae(Metarhiziumspp.),Ma]的研究已有100多a的历史,但由于在发酵方法,剂型开发及环境制约等方面存在各种各样的问题,导致其防治效果不稳定,影响了其大规模的应用.直到1988年,金龟子绿僵菌制剂应用于澳洲甘蔗和牧草害虫的防治,其应用才算取得较大进展.应用绿僵菌防治地下害虫及非洲蝗虫也已取得初步成效,绿僵菌的研究和应用成了生物防治领域的一个热点.1绿僵菌属的系统分类现状11绿僵菌属的分类地位自从1879年MeqHHKOB首先大量繁殖绿僵菌防治奥地利丽金龟(,4nisopliaaustriacaHerbst)以来,绿僵菌就成为了害虫微生物防治的主角之一. 绿僵菌属(MetarhiziumSorokin)是Soroki13于1883 年建立的,它隶属于真菌门(Eumycota),子囊菌亚门(Ascomycotina),核菌纲(Pyren—mycetes),球壳菌目(Sphaeriales),麦角菌科(Clavisipitetaceae).自Sorokin建立绿僵菌属以来,先后发表10余个种.由于不同作者采用的标准不统一,故分类状况比较混乱.目前国际上被广泛接受的分类观点是Tulloch建立的,他将绿僵菌属定为2个种,即金龟子绿僵菌和黄绿绿僵菌,金龟子绿僵菌包括小孢变种和大孢变种….利用传统的分类方法很难区分绿僵菌属内各种群间的差异,而野生型菌株的遗传特性则提供了菌株间的遗传差异.现有资料表明,利用可溶性蛋白图谱能区分形态学上相似的种;酯酶同工酶区分绿僵菌突变株也明显表现出多态性,这可能与其遗传变异因子及环境因素有密切的关系.另外,分子标记方法用于绿僵菌的鉴定,分类,进化和其它各方面信息的研究,是当前和今后受重视的领域.①收稿日期:2004—12—30责任编辑/凌青根:// / rdnk@②代鹏(1978~),男,硕士,助理研究员.E-mai1:dapen008~163.tom.③通讯作者.一73—2005年4月热带农业科学第25卷第2期近年来,在DNA水平上研究遗传差异的技术早已被认可,并且已经成为研究虫生真菌群落遗传结构的有效方法.1.2绿僵菌属种间分类方法的应用限制性片段长度多态性(RFLP)和聚合酶链式反应(PCR)技术基础上的DNA随机扩增多态性RAPD方法,为研究绿僵菌的分类鉴定,系统发育,种内分型和地理型分布,及其生态学和流行学,提供了重要的检验手段.rDNA基因在进化中的高保守性和相关间隔区的多变性,使其成为研究分子系统中的最重要和应用最为广泛的工具之一.目前这项技术已广泛应用于绿僵菌的研究r2].Leal等用巢式PCR技术,将对不同地理来源和分离自不同寄主或土壤的40株绿僵菌菌株蛋白酶Prl基因扩增出来,然后用3种限制性内切酶(DdeI,HpaII和RsaI)消化扩增产物.酶切图谱共有15种类型,经聚类分析分为4组.在部分组的菌株间,其限制性酶切片断图谱和地理来源有一定的相关性[3].Fegen及Cobb等人于1993年同时首次将RAPD—PCR方法用于虫生真菌的研究.Fegen的研究发现,利用RAPD—PCR分析DNA片段长度的多态性可以得到相应的DNA遗传和进化等信息.Leal等用6种随机引物,对来自4个国家的20株绿僵菌进行RAPD研究.结果表明,多数菌株有特异RAPD—PCR图谱,一些菌株可表现明显的地理性, 另一些不同来源的菌株则不表现出地理差异r4,.我国学者刘兆伟,郭好礼等于1993年率先用Sanger法测定了几个种的绿僵菌的部分rDNA序列.结果表明,25S一635区域比其它2个区域具较高的突变率,可以准确地反映遗传关系[6].Drive和Milne的研究,是迄今为止最为详尽和完整的,基本解决了绿僵菌属的分类难题.他们共测定了121株绿僵菌菌株的ITS卜5.8S—ITS2 rDNA序列,其中26株有代表性菌株的序列数据在文中予以应用.综合Curran和他们的研究结果,建议将37株绿僵菌划分为3个种(金龟子绿僵菌,黄绿绿僵菌和白色绿僵菌),其中黄绿绿僵菌下分5个变种,金龟子绿僵菌下分4个变种.值得一提的是,他们将ITS1和ITS2的序列作为唯一的性状来进一74一行拉丁文描述,使ITS1和ITS2的序列成为绿僵菌分类最可靠的依据Ⅲ.2绿僵茵入侵过程中相关基因的研究昆虫病原真菌约有1000种,其中一些种类已成功用于蝗虫,粉虱,白蚁,蟑螂等害虫生物防治.近年研究较多的是金龟子绿僵菌(Ma),该菌含多种可降解昆虫外表皮的酶,已从中克隆到多种致病相关基因.2.1Prl基因有研究结果表明,Ma产生的昆虫表皮水解酶在高水平情况下与害虫发病机理有很大的关系.胞外弹性凝乳蛋白酶Prl基因是最早被克隆的昆虫表皮降解蛋白基因.该基因表达的2种蛋白PrlA和PrlB具有很强的分解昆虫体壁的功能,它主要降解酪蛋白,凝乳弹性蛋白,降血凝乳蛋白和胶原质蛋白等,在对昆虫的致病力中起着重要的作用.PrlA和PrlB分别位于金龟子绿僵菌不同染色体上,所编码的氨基酸序列有54%的同源性[8--10]. PrlA基因的一级结构和丝氨酸肽链内切酶——枯草杆菌蛋白酶具有相当高的同源性.PrlA与枯草杆菌蛋白酶K的氨基酸序列相似性达61%,但PrlA降解烟草天蛾体壁的能力是蛋白酶K的2倍…]. Screen等分析了PrlA基因启动子的序列,发现存在CREA和AREA结合位点.条带移位实验证实了构巢曲霉GST—CREA融合蛋白能结合CREA上3个位点中的2个.Joshi等利用差异显示RT—PCR得到1个新的类枯草杆菌蛋白酶基因(PrlB),核型分析表明,二者位于不同的染色体上,通过对绿僵菌白僵菌Prl基因的cDNA分析,发现PrlA和PrlB均首先被合成为1个大的前体蛋白,包括1个信号肽,1个前体肽和1个成熟的蛋白分子,它们的前体蛋白和成熟蛋白分子量大小均不相同.StLeger于1987年发现并于1993年克隆到了Prl基因.Prl蛋白一直被认为在绿僵菌侵染昆虫过程中具有不可代替的重要作用,但王成树等人于2000年首次报道了缺失Prl基因的野生型菌株依然保持了其毒力特性.野生型Ma菌株V275在初期单孢分离过程中发现了3株缺失弹性凝乳蛋代鹏等绿僵菌的研究进展白基因PrlA和PrlB的突变株,经嵌套PCR扩增和Southern杂交实验,证明了该基因的确已丢失.28srDNA保守序列分析比对证明了该突变体都是金龟子绿僵菌,但形态学和遗传与野生型差异明显.RAPD分析表明,二者之间的整体遗传相似性低于70%.生物测定发现,突变菌株对Tenebno molitor致死能力仅比野生型菌株低20%,而对Galleriamellone的致死能力却相当.因此,王成树指出,在人造培养基上培养的绿僵菌缺失Prl基因是一种常见现象,应该得到足够的重视[1.2.2Pr2基因在昆虫病原真菌中另一个重要的内切蛋白酶是丝氨酸类胰蛋白酶,也是一组碱性蛋白同工酶. Smithson等从绿僵菌液体培养基中通过阴离子交换色谱得到丝氨酸类胰蛋白酶Pr2,并对N一末端序列进行了测定[1.利用寡脱氧核糖核酸探针,从绿僵菌的基因文库中钓出该蛋白酶基因.经研究发现,该基因编码一个由254个氨基酸组成的蛋白质,含有2个长度分别为94和40bp的内含子.信号序列断裂分析表明,Pr2的同工型Tryl在它的N末端含有21个氨基酸的信号肽,产生一个含226个氨基酸成熟蛋白.Pr2基因编码的丝氨酸蛋白酶可以水解酪蛋白和白蛋白,但不能降解凝乳弹性蛋白.StLeger等人的研究结果表明,Pr2是Prl活性的4%~10%,而Cole等人的研究结果是5.4%~26%.液体培养发现,在接种绿僵菌后48h,即可检测到Pr2的活性,而到72h才检测到Prl的活性,因此认为,Pr2可能在Prl的诱导和激活方面起着重要作用n.2.3Pr3及Pr4基因StLeger在研究过程中发现,Pr3是一种酸性内切水解蛋白酶,pH5.0~5.5,等电点低,目前对其组成及作用机制仍不太清楚.Pr4表现出胰岛素的特性,但根据其特性和活性研究,将其划分为半胱氨酸蛋白酶,其活性是Prl的51%,远高于Pr2.2.4毒素毒素基因是编码"环状六肽毒素"合成酶的基因.通过研究不同来源的绿僵菌的"破坏素"的合成酶的基因序列,发现该类毒素中每一个氨基酸都有一个酶化的区域,每个域内有许多的保守序列.目前已发现了不少昆虫病原真菌毒素,但尚未开发出与毒素相关的商业制剂[1.Mollier将这些毒素分为两大类:低分子量毒素和高分子蛋白毒素.破坏素(destruxin)是Kodaira从金龟子绿僵菌[anisopliae(Metschn.)Sorokin]的培养液中分离到的低分子量的环缩肽.当时从滤液中分离出6 种环缩肽,其中2种的杀虫活性高,分别命名为destruxinA和destruxinB,二者结构类似,均由分丙氨酸,丙氨酸,撷氨酸,异亮氨酸和脯氨酸这5种氨基酸组成.破坏素对竹节虫,大蜡螟等昆虫表现出毒性.用破坏素进行体腔注射后,不同昆虫表现的症状不同,多数鳞翅目(Lepidoptera)昆虫表现为强直性麻痹.从金龟子绿僵菌中分离出的细胞松弛素(cytochalasins)是一种吲哚环结构毒素,细胞松弛素对哺乳动物有急性毒性,可抑制血细胞的运动,降低血细胞的吞噬能力[1.提纯破坏素主要是采用吸附法,即将绿僵菌培养液的滤液用7g/L的活性炭吸附,再用体积分数为50%的丁醛水溶液将活性物质从活性炭上洗脱下来,然后分离黄色相,真空喷雾浓缩,用苯充分萃提.苯液过中性氧化铝柱子,然后分别用含5%和10%(体积分数)乙醇的苯洗脱,分开收集,便可得到破坏素A(简称DA)和破坏素B(简称DB),苯油经重结晶即可得无色的DA和DB的晶体.李农昌以金龟子绿僵菌小孢变种(anisopliaeSorokinvat. anisopliaeTulloch)为材料,将其菌丝体捣碎,过滤浓缩后得黄色粘稠状粗提物,然后对粗提物进行薄层层析,最终也纯化到了破坏素[1.目前对昆虫病原真菌毒素研究较多的是小分子环缩肽类和可降解寄主体壁的酶类,对其研究主要还是集中在实验室内,直接应用于防治田间害虫的实例尚未见报道,主要是因为其发酵含量低,对哺乳动物有急性毒性,并且提取和制造工艺繁琐,目前还不能产生较好的经济效益.3绿僵菌剂型的开发研究3.1绿僵菌生产工艺的研究75—2005年4月热带农业科学第25卷第2期在绿僵菌生产工艺方面,单纯的液体发酵生产的孢子或菌体,因活性和耐储性降低而受到限制.主要采用传统的液固双相发酵生产工艺生产真菌孢子粉,固相发酵阶段存在搅拌不均,通透性差,发酵周期长和设备价格偏贵等问题.国内多采用浅盘,窗纱或无纺布开放式生产模式,空间利用率低,容易感染杂菌,产品质量不稳定,成为阻碍真菌生防制剂产业化发展的重要原因之一.另外,太阳光紫外线是一种影响金龟子绿僵菌田间使用效果的主要影响因子.Drauzio等人的研究结果表明,绿僵菌对紫外线相当敏感,且用PDA,PDAY等人工培养基生长的绿僵菌对紫外线的敏感度要低于直接用昆虫体培养的绿僵菌,其中稻谷类人工培养基能显着提高绿僵菌对紫外线的耐受性[1B]. Braga等提出,即使室外紫外线强度低于致死剂量,也会对真菌孢子的致病力及萌发速率产生一定影响n9j.3.2绿僵菌剂型的开发研究在长期的剂型研究过程中,真菌杀虫剂剂型研究取得了较快的发展.到目前为止,真菌杀虫剂主要剂型有粉剂,可湿性粉剂,乳剂,油剂,干菌丝,微胶囊等.其中,已大面积应用的绿僵菌剂型主要是粉剂,干菌丝和油剂等.据国外报道,醇烷氧基化合物也是一种有效的乳化剂.与水剂相比,油剂在低的相对湿度下更有利于孢子的萌发,同时在高温下也更能延长孢子的寿命.油剂还有利于孢子对疏水基质的吸附,如昆虫体壁或植物表面]. Inyang等研究了溶剂油对黄绿绿僵菌(anisopli oe)分生孢子活性的影响,结果表明,菜子油,花生油或色拉油是较好的溶剂油,制成的油剂(加有抗氧化剂)在17℃下贮藏127周后的孢子萌发率仍达到60%C.目前国外研究的真菌生防制剂大概有100多种,其中主要是真菌杀虫剂.除草剂,杀菌剂和杀线虫剂也在不断增加.杀虫制剂包括白僵菌14个,绿僵菌7个.其中,影响最大且最成功的范例,是英国CABIBioscience蝗虫生物防治国际合作项目(LUBILOSA)研制的杀蝗绿僵菌生物农药,已在非洲注册登记,投产,大面积用于沙漠蝗的防治,一76一施药l0~15d后防效达到90%以上,成为有效的蝗虫生防手段.澳大利亚蝗虫生物防治研究项目(CSIRO)研制出了杀蝗绿僵菌生物农药,并用于大面积草原蝗虫的防治,对蝗虫天敌等非目标生物安全.EcoScience绿僵菌产品(Bio—Path,Bio—Blast)用于防治蟑螂,白蚁;美国Ecoscien的绿僵菌产品(Bio—Path,Bio—Blast)防治蟑螂和白蚁;巴西和委内瑞拉的绿僵菌产品(Metaquino,Cobican)防治甘蔗沫蝉等等.我国对杀虫真菌制剂的研究,主要是重庆真菌农药研制工程中心获得的杀蝗绿僵菌孢子母粉和杀蝗生物制剂"100{L/mL杀蝗绿僵菌油悬浮剂",已在我国北方部分蝗虫发生省区使用和推广.参考文献1TullochM.ThegenusMetarhizium.Transactionof theBritishMycologicalSociety,1976,66:407~4112黄勃,樊美珍,李增智.绿僵菌属系统分类的研究进展.安徽农业大学,2002,29(2):169~1723LealSCM,BertioliDJ,ButtTM,eta1.Amp1ifi—cationandrestrictionendonucleasedigestionof thePrlgeneforthedetectionandcharactization ofMetarhiziumstrains.MycologyResearch,1997,101:257~2654CobbBD,ClarkonJM.Detectionofmolecular variationintheinsectpathogenicfungusMetarhiz—iumusingRAPD-PCR.FEMSMicrobiologyLetter, 1993,112:319~3245LealSCM.Characterizationofisolatesoftheen- tomopathogenicfugusMetarhiziumanisopliaeby RAPD-PCR.MycologyResearch,1994,98(9):1077~10886刘兆伟,郭好礼,KurtzmanCP.由部分核糖体RNA序列确定的绿僵菌属种系统发育关系.真菌,1994,13(2):139~1517DriverF,MilnerRJ,TruemanWH.Ataxonomis revisionMetarhiziumofbasedonaphylogenetic analysisofrDNAsequencedata.MycologyResearch, 2000.104:134~1508裴炎,冀志霞,杨星勇,等.绿僵菌分解昆虫外壳蛋白酶MAP一21的纯化与特性.微生物,2000,40 (3):306~31I代鹏等绿僵菌的研究进展9ColeSCJ,CharnleyAK,CooperRM.Purification andparticalcharacterizationofanoveltrypsiir一1ikecysteineproteasefromMtarhiziumanisopliae. FEMSMicrobio1ogyLetters,1993,113:189~19610StLegerRJ,BidochkaMJ,RobertsDW.Construc—tionofanimprovedmycoinsecticideoverexpress—ingatoxicprotease.ProceedingsoftheNational AcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmeri—ca,1996,93(13):6349~635411StLegerRJ,RobertsDW.Engineeringimproved mycoinsecticides.TrendsinBiotechno1ogy,1997,15(3):83~8512SmithsonSL,PatersonIC,BaileyAM,eta1. Cloningandcharacterizationofageneencodinga cuticle—degradingproteasefromtheinsect pathogenicfungusMetarhiziumanisopliae.Gene, 1995,166(1):161~16513StLegerRJ,JoshiL,RobertsD.AmbientpHisa majordeterminantintheexpressionofcuti—cle—degradingenzymesandbydrophobinby Metarhiziumanisopliae.AppliedandEnvironmental Microbiology,1998,64(2):709~71314WangChengshu,MiItonA,TariqM,eta1.Detec—tionandcharacterizationofPrlvirulentgene deficienciesintheinsectpathogenicMetarhizium anisopliae.FEMSMicrobiologyLetter,2002,213:25l~25515沈坤发,茅绍雄,林光明,等.主要虫生真菌的分子生物学研究概述.江西农业大学,2001,5(23): 140~14416李建庆,张永安,张星耀,等.昆虫病原真菌毒素的研究进展.林业科学研究,2003,16(2):233~23917李农昌,樊美珍,朱玮,等.绿僵菌毒素的提取方法.林业科技通讯,1989(1O):30~3118DrauzsioENRangel,GibertoULBraga,StephanD, eta1.Variationsin[IV—Btoleranceandgermina—tionspeedofMetarhiziumanisopliaeconidiapro—ducedoninsectsandartificalsubstrates.Jour—nalofInvertebratepathology,2004,115:207~21119BragaGUL,F1intSD,Mi1lerCD,eta1.Both solarUV AandUvBradiationconidialculturabi1i—tyanddelaygerminationintheentomopathogenic fugusMetarhiziumanisopliae.Photochemistryand Photobio1ogy,2001,74:734~73920王滨,樊美珍,李增智.真菌杀虫剂剂型的研究与应用.安徽农业大学,2003,30(2):206~20921InyangEN,McCartneyHA,OyejolaB,eta1.Ef—fectofformulation,applicationandrainonthe persistenceoftheentomogenousfungusMetarh~ium anisopliaeonoilseedrape.MycologyResearch,2000,104(6):653~66(上接第52页)27NinS,BenniciA,RoselliG,eta1.Agrobcteri—am—meadiatedtransformationofArtemisiaabsir~hium L.(wormwood)andproductionofsecondarymetabo一1ites.PlantCellReports,1997,16(1O):725~73028赵亚华,何平,高向阳.根癌农杆菌介导的mMT—I cDNA转化枸杞及其表达的研究.中国农业科学, 2000,33(2):92~9729费厚满,梅康凤,沈听,等.发根农杆菌对绞股蓝的转化及毛状根中皂甙的产生.植物,1993,353233(8):626~631盛世红,陈惠明.防风悬浮细胞的原生质再生植株培养.植物,1994,32(4):268~273谭红,龚革,李志东,等.利用原生质体诱变技术筛选脱落酸高产菌株.应用与环境生物,1998, 4(3):281~285周延清,苑保军,张根发,等.决明原生质体的分离与培养研究.华北农,1998,13(3):107~1l1孙如勇,安锡培.植物原生质体培养.北京:科学出版社,1991.108~116—77—。

优良杀虫绿僵菌菌株的筛选及其培养研究的开题报告

优良杀虫绿僵菌菌株的筛选及其培养研究的开题报告

优良杀虫绿僵菌菌株的筛选及其培养研究的开题报告一、研究背景农业是我国国民经济的基础,农业生产中,害虫是制约农作物高产的主要因素之一。

化学农药的使用虽然能够在一定程度上控制害虫的数量,但也会带来农产品安全问题和环境污染等问题。

因此,发展绿色农业,采用生物防治技术控制害虫,已成为当前农业发展的重要方向之一。

绿僵菌是一种天然的杀虫菌,对多种害虫具有很高的防治效果,是生物防治中的重要杀虫菌之一。

二、研究内容本研究选取优良的绿僵菌菌株,通过对其进行筛选和培养,研究其对害虫的防治效果及培养条件。

具体内容如下:1. 绿僵菌的筛选通过实验初步筛选出防治效果好、适应性强、繁殖快等优良的绿僵菌菌株。

2. 绿僵菌的培养在优化培养条件的基础上,探究不同生长条件对绿僵菌生长的影响,寻找最佳培养条件。

3. 绿僵菌的防治效果研究通过室内和田间试验,评估优良绿僵菌菌株对多种害虫的防治效果,包括杀虫率、致死速度等指标。

三、研究意义本研究旨在深入探究绿僵菌的优良菌株的筛选、培养和防治效果,为生物防治技术的实施提供科学依据,为推动我国绿色生态农业的发展做出贡献。

同时,也为生物农药的基础研究提供数据支持。

四、研究方法本研究将采用实验室条件下的菌株筛选、单菌发酵、发酵产生杀虫毒素、对害虫防治效果评价和田间试验等多种研究方法,技术路线如下:1. 样品采集和处理在不同地理环境中采集绿僵菌样品,进行初步筛选。

2. 生物学特性研究对筛选出的菌株进行形态与解剖特点、生长周期、生长途径等常规生物学研究,分别观察于普通培养、小试与大试阶段。

3. 杀虫毒素研究将选定的优良菌株进行单菌发酵,提取绿僵菌杀虫毒素。

4. 对害虫防治效果评价将绿僵菌杀虫毒素加入害虫的饲料中,观察杀虫效果、致死速度和残留期等指标。

5. 田间试验在不同害虫发生期,采用不同配方的杀虫剂进行防治,对比绿僵菌对多种害虫的防治效果。

绿僵菌研究的新进展 高 松 (

绿僵菌研究的新进展 高 松 (

中国生物防治CH INESE JOURNAL OF BI OLOGI CAL CONTROL 1996,12(4)182~187 绿僵菌研究的新进展高 松(中国农科院生物防治研究所,北京 100081)CURRENT STATUS OF STUD IES ON M E TARH IZ IUM SPP.GAO Song(In stitu te of B i o logical Con tro l,Ch inese A cadem y of A gricu ltu ral Sciences,B eijing100081)自从1879年Мечников首先大量繁殖绿僵菌防治奥地利丽金龟(A n isop liae austriaca)以来,绿僵菌就成为害虫微生物防治的主角之一。

由于本世纪初人们对绿僵菌防治效果不稳定感到失望,对绿僵菌的研究仅限于分类、培养特性、感染机制及其影响因素等方面。

近20年来,随着巴西和澳大利亚广泛使用金龟子绿僵菌防治甘蔗和牧草害虫取得较大进展,以及在非洲用黄绿绿僵菌防治蝗虫的试验初步成功,对绿僵菌的研究进入了一个高潮。

本文着重总结了1990年以后的研究进展,其它有关绿僵菌的研究成果详见梁宗琦(1992)、樊美珍等(1994)的论著,这里不再赘述。

1 绿僵菌系统学进展1.1 分类现状 自So rok in于1883年建立绿僵菌属M eta rh iz ium以来,先后发表十余个种,由于不同作者采用的标准不统一,故分类状况比较混乱,目前国际上被广泛接受的分类观点是T u lloch(1976)建立的,他将绿僵菌属定为2个种,包括金龟子绿僵菌和黄绿绿僵菌,金龟子绿僵菌包括小孢变种和大孢变种。

1986年,Rom bach等进一步将黄绿绿僵菌分为黄绿变种(M.f lavov irid e var.f lavov irid e)和小孢变种(M.f lavov irid e var.m inus),樊美珍等(1994)依据瓶梗和分生孢子的形状及排列方式,总结了国内发现的新种,将绿僵菌属定为7个种或变种:白色绿僵菌(M.a lbum Petch)、金龟子绿僵菌小孢变种(M.an isop liae M etsch So rok in var.an isop liae T u lloch)、金龟子绿僵菌大孢变种[M.an isop liae M etsch So rok in var.m a j us (John ston)T u lloch]、双型孢绿僵菌(M.bif o m isp orae L iang et L iu)、黄绿绿僵菌黄绿变种(M.f lavov irid e Gam s&Rozsypal var.f lavov irid e Rom bach,H um ber et Roberts)、黄绿绿僵菌小孢变种(M.f lavov irid e Gam s&Rozsyp al var.m inus Rom bach,H um ber et Roberts)、戴氏绿僵菌(M.ta ii L iang et L iu)。

病虫害生物防治中绿僵菌的应用现状

病虫害生物防治中绿僵菌的应用现状

病虫害生物防治中绿僵菌的应用现状王海龙【摘要】因化学杀虫剂相较微生物灭虫剂存在诸多弊端,目前生物防治害虫已成为我国农林牧业的重要途径,其中绿僵菌作为一种重要的真菌制剂,在害虫防治中发挥了出色的作用.绿僵菌作用于害虫表面的蛋白质起到杀菌作用,防治效果明显.不过,我国目前绿僵菌制剂的相关研究还不够深入,相关产品较少.因此要着重注意绿僵菌制剂的研发和合理应用及其商业化生产的条件探索,让绿僵菌能切实发挥其潜在价值.【期刊名称】《农业与技术》【年(卷),期】2017(037)016【总页数】1页(P34)【关键词】绿僵菌;生物防治;研究现状;真菌杀虫剂【作者】王海龙【作者单位】山东大学(威海)海洋学院,山东威海 264209【正文语种】中文【中图分类】S476最早的绿僵菌应用是Metchnikoff在1880年尝试应用的,这使生物防护中生物杀虫剂开始以病原真菌作为材料。

早期的绿僵菌是直接采用发酵产物应用于田间害虫防治,并没有进行下一步的加工。

因此,最初的绿僵菌使用时有诸多不便。

我国是1980年以来开展白僵菌、绿僵菌等真菌在害虫治理上的探讨和实验的。

不过我国一直没有相关产品在国际上注册登记,直到2002年,随着我国农药市场管理的加强,才开始有绿僵菌相关制剂的登记注册。

通过对绿僵菌进行生理性质分析可知,绿僵菌的菌株产孢能力强且生长迅速,虽然不同菌株的产孢量存在显著差异,但基本都能保证生物防治的应用。

这为绿僵菌应用于病虫害的治理提供了基本生产条件。

绿僵菌感染寄主后,会对寄主体内的酶类活性产生影响,尤其对解毒和代谢的酶类影响巨大,会引起新陈代谢的加快,这是昆虫被真菌感染后自身免疫系统的一种保护反应,通过实验研究发现,化学杀虫剂和植物中提取到的杀虫成分对昆虫的具体影响显著不同。

对害虫使用化学杀虫剂后,杀虫的化学成分会被有关酶逐步降解,而虫害病原真菌侵入虫体后,会利用虫体的营养而繁殖,最终导致相关代谢酶的活性被抑制而逐渐降低,这样的处理不易出现反弹现象,这也是真菌杀虫非常大的优势。

绿僵菌在老圃地土壤消毒中的应用

绿僵菌在老圃地土壤消毒中的应用

6 结论
若长期使用单一药剂进行消毒,老圃地病虫害会因产
因变量
苗木受害率、 苗木受害率降低比率
(双重检验)
苗木受害率
苗木受害率降低比率
Pillai's 轨迹 Wilks' Lambda Hotelling's 轨迹
-
-
-
总计 40 892.950 17
-
-
-
-
上述数据分析表明,在 α=0.05 水平下,不同的绿僵菌 施用量对苗木受害率和苗木受害率降低比率影响的显著 性均为 1(见表 4),差异性 F=57.229 36,大于 F crit=4.493 998,P-value=1.14×10-6,小于 0.05,差异性显著。
2 试验方法与设计 2.1 药剂选择与用量设计 绿僵菌选择水谷欣牌绿僵菌粉剂[江苏省盐城市神 微 微 生 物 菌 种 科 技 有 限 公 司 经 销 ,执 行 标 准 GB/ 125864—2010,规格金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae Sorokin)200 亿/g 活孢子],试验用量分别设计为 0.3、
表 3 描述性统计
组 观测数 求和
平均
方差
列1 9
7.547 9 0.838 656
3.532 245
列2
9
765.998 5 85.110 950
1 113.314 000
因变量:苗木受害率 观 察 值
因变量:苗木受害率降低比率 观 察 值
预 测 值
标 准 残 差
观察值 预测值 标准残差 模型截距
作者简介:陶如利(1977—),男,大专,林业工程师,研究方向:林业。
68 XIANGCUN KEJI 2019 年 10 月(下)

绿僵菌毒素的研究进展

绿僵菌毒素的研究进展

绿僵菌毒素的研究进展
张秋
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2009(037)030
【摘要】绿僵菌毒素是绿僵菌产生的具有杀虫活性的次生代谢物质,在农业害虫防治方面具有广阔的应用前景.根据其分子量和结构分为低分子量毒素和高分子量蛋白毒素两大类,对其分子结构、种类、提取方法、生物活性、产生条件等进行了综述.
【总页数】3页(P15077-15079)
【作者】张秋
【作者单位】辽宁省营口市鲅鱼圈出入境检验检疫局,辽宁,营口,115007
【正文语种】中文
【中图分类】S182
【相关文献】
1.绿僵菌毒素的提取 [J], 李农昌;樊美珍
2.绿僵菌 HC 毒素合成酶基因的生物信息学分析 [J], 张杰;阮先乐;侯小歌;王俊英;胡炳义
3.绿僵菌产毒素能力及产毒素动态分析 [J], 徐金柱;秦长生;杨华;赵丹阳;揭育泽;邱华龙;
4.绿僵菌产毒素能力及产毒素动态分析 [J], 徐金柱;秦长生;杨华;赵丹阳;揭育泽;邱
华龙
5.绿僵菌毒素的提取方法 [J], 李农昌;樊美珍;朱玮;柴长宏
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

第28卷第5期 唐山师范学院学报 2006年9月 Vol. 28 No.5 Journal of Tangshan Teachers College Sep. 2006──────────基金项目:唐山市重点实验室课题(04360701B-4) 收稿日期:2006-01-13作者简介:李春香(1968-)女,河北乐亭人,唐山师范学院生命科学系副教授,理学硕士。

- 4 -绿僵菌防治农林害虫研究进展李春香1,安彦杰1,2,张淑红1(1.唐山师范学院 生命科学系,河北 唐山 063000;2.华中师范大学 生命科学学院,湖北 武汉 430072)摘 要:综述了绿僵菌对农林害虫防治进展,并初步讨论影响其防效的因素。

关键词:绿僵菌;农林害虫;生物防治中图分类号:S43 文献标识码:A 文章编号:1009-9115(2006)05-0004-03绿僵菌是一种应用广泛的虫生真菌,用它制成的生物制剂可防治200多种害虫,且效果良好。

此项技术显示出良好的发展势头,是国际上生物技术开发的热点,受到世界科技领域的高度重视[1-3]。

1 绿僵菌防治农林害虫的应用概况绿僵菌属[Metarhizium (Metsch)Sorokin]是虫生真菌的主要类群之一,是最早用于生物防治的昆虫病原真菌,其寄主范围广,Veen 曾记载过8目42科204种寄主[4],杀虫效果明显。

利用绿僵菌来防治农林害虫的研究与实践已逾百年,自1879年俄国生物学家梅契尼科夫首次在奥国塞金龟(Anisopliuaustriacu )分离出绿僵菌(Metarhiziumamisopliae )后,1882年德国开始用于防治白蚁,上世纪80年代巴西成功生产出绿僵菌产品用于防治甘蔗上的沫蝉,澳大利亚则用绿僵菌防治牧草害虫取得较大进展,在非洲用黄绿绿僵菌防治蝗虫的试验初步成功,对绿僵菌的研究进入了一个高潮[5]。

我国从80年代开始,先后用绿僵菌防治白蚁,农作物地下金龟子曾取得显著的防治效果。

在林业上,用于防治天牛和茶毛虫[6],其校正死亡率亦达70.0%以上[7]。

绿僵菌致病力强、效果好、不污染环境,对人、畜、作物无毒害。

是当今世界上研究和应用最多的虫生真菌之一,利用其进行生物防治具有十分广阔的前景[8]。

2 对14类重要农林害虫的防治作用 2.1 金龟子长期以来,利用化学药剂进行金龟子防治,造成残毒和环境污染等问题。

绿僵菌是一种防治土栖害虫如东北大黑鳃金龟的重要微生物防治剂,如将绿僵菌与倍硫磷混用,则不但可明显提高防治效果,还可加速绿僵菌感染致死幼虫的进程,有明显的增效作用[9]。

陈祝安等[10]发现绿僵菌对暗黑金龟幼龄蛴螬致病力非常强。

黄基荣等[11]证实,绿僵菌对金龟子幼虫防治效果与虫种及施菌方法均有关系。

2.2 蝗虫绿僵菌作为生物杀虫剂,既能迅速控制高密度蝗虫种群,又可实现长期控制蝗虫种群密度在经济受害水平以下。

Bateman [12]报道,田间运用绿僵菌防治蝗虫灭效可达90%以上,Price [13]等用绿僵菌防治褐蝗(Locutanapardalina ),每公顷2×1012个绿僵菌孢子,3w 后田间笼罩效果达98%。

新疆、内蒙等地应用绿僵菌油剂超低量喷雾防治蝗虫的试验结果表明,绿僵菌油剂对主要蝗虫亚洲小车蝗的防效较好。

2.3 马尾松毛虫1985年,李增智等用绿僵菌对马尾松毛虫进行感染试验,证明它对马尾松毛虫具有毒力。

宋漳等报道,与白僵菌相比,绿僵菌具有较强的耐高温和耐旱特性;且绿僵菌防治第1代马尾松毛虫的效果显著优于白僵菌。

2.4 小菜蛾在台湾省,绿僵菌被应用于田间防治小菜蛾已取得初步进展。

马骏等证实绿僵菌对小菜蛾具有较强的致死作用,赵俊生等试验结果表明绿僵菌对小菜蛾的杀虫率为74.48%。

王音等研究小菜蛾感染绿僵菌后的病征及组织病理变化,并证实体壁是绿僵菌侵入小菜蛾的主要途径,消化道是绿僵菌入侵的次要途径。

2.5 蜚蠊德国小蠊对外界有很强的适应能力,危害大。

张刚应等研究证明以绿僵菌制剂制成的灭蟑螂盒灭蠊效果明显,且至少3个月使小蠊的生活力减退率维持在80%以上。

钟伟等以美洲大蠊为材料,采用非致病性的金龟子绿僵菌菌株为供试菌,较系统研究了人工接种绿僵菌后蜚蠊细胞的免疫反应。

发现金龟子绿僵菌的分生孢子不能在美洲大蠊体内繁殖,但较高浓度的孢子仍能导致蜚蠊较高的死亡率。

2.6 鞭角华扁叶蜂肖育贵等[7]林间试验表明,生物制剂可以继续感染未死李春香,安彦杰,张淑红:绿僵菌防治农林害虫研究进展- 5 -幼虫或使幼虫带菌入土,在土中高湿条件下继续感染致死,达到持续控制害虫的目的。

实验证明用绿僵菌及其复配制剂用于防治鞭角华扁叶蜂是一可行途径。

2.7 刚竹毒蛾宋漳等[25]用金龟子绿僵菌菌株和球孢白僵菌菌株侵染刚竹毒蛾幼虫,发现其在室内均可对刚竹毒蛾2-3龄幼虫产生毒力且毒力相当。

另外证实,绿僵菌菌株具有较强的耐高温与耐旱特性。

2.8 橄榄星室木虱余春仁等对橄榄星室木虱进行了研究,并引用绿僵菌属于橄榄星室木虱之防治,开辟了该虫防治的新途径。

潘蓉英等发现室内喷洒4种处理浓度的绿僵菌菌液对橄榄星室木虱若虫均有显著毒力,其毒力大小与菌液浓度成正比。

2.9 稻水象甲陈祝安等对37株来源不同的金龟子绿僵菌进行了室内生物测定。

结果发现30d 内感病率达90%以上的有6株,感染率在80%以上有8株。

陈祝安等选取毒力较强的绿僵菌2029和WZW 3菌株,结合田间试验,对防治作出初步评估。

2.10 桃小食心虫樊美珍等调查了金龟子绿僵菌分生孢子和干菌丝在土壤中的延续情况,及对桃小食心虫的侵染力,并在陕北干旱地区进行了大田试验。

2.11 香蕉假茎象甲在已知的绿僵菌中,金龟子绿僵菌小孢变种在防治农业、森林、经济等类害虫中使用最广,目前已有多个商品化制剂被广泛应用[4]。

Wang 等曾报道了香蕉假茎象甲对金龟子绿僵菌具高感病性。

陆永跃等研究了金龟子绿僵菌小孢变种的不同放菌方式对香蕉假茎象甲田间种群的控制作用,试验结果证明,绿僵菌是控制香蕉假茎象甲种群的一种有效措施。

2.12 天牛1983年自青杨天牛上分离出一株金龟子绿僵菌,经致病性测定,发现该菌株对青杨天牛毒力极强。

李农昌等用绿僵菌干菌丝粉于青杨天牛卵孵化盛期林间喷雾或喷粉,发现只要防治时期适当,均可收到良好效果。

2.13 金针虫徐华潮等通过绿僵菌对沟金针虫毒力测定发现,绿僵菌Mf2菌株对沟金针虫寄生力较强。

2.14 白蚁陈红梅等采用绿僵菌和白僵菌对黑翅土白蚁进行室内毒力测定,发现绿僵菌对黑翅土白蚁有明显的致病力,随着用菌量增加和时间的延长,僵死率可逐渐增高。

3 绿僵菌防治效果影响因素 3.1 化学杀虫剂绿僵菌制剂存在着杀虫速率较慢的缺点,有效解决的途径之一是与化学杀虫剂混用。

宋漳对6种化学杀虫剂与金龟子绿僵菌的相容性以及菌药混用的增效作用进行研究,结果表明6种化学杀虫剂对绿僵菌分生孢子均有不同程度的抑制。

3.2 杀菌剂刘作易报道柯赛得和孟加拉红均能显著增加金龟子绿僵菌的产孢量,柯赛得还有缩短产孢时间的作用。

宋漳等试验表明,30%氧氯化铜和耐克铜对金龟子绿僵菌的菌落的形成没有影响,而耐克铜在0.05%~0.15%浓度时能显著的增加金龟子绿僵菌的产孢量,并有缩短产孢时间的作用。

3.3 活性剂刘爱英等报道KL -天然活性剂能提高绿僵菌分生孢子萌发力,对已萌发孢子无促生作用,浓度高时有抑制菌丝生长的作用。

康冀川等报道KL -天然活性剂在真菌病原防治害虫中的增效作用,但其作用机理尚须深入研究。

3.4 高温农向群等报道,高温对分生孢子的萌发和生活力有不利的影响,不同地理来源的菌株对高温的耐受力有差异。

3.5 化学除草剂贾春生等报道了某些除草剂对绿僵菌的菌丝生长有很大影响。

因此,在野外使用绿僵菌时应避免与这些除草剂同时使用或混用。

3.6 病毒意大利蝗痘病毒包涵体在环境中较稳定,能长期保存,可起到长效作用。

将此病毒与绿僵菌混合接种蝗虫具有很强的杀虫效果。

利用生物杀虫剂杀虫的互补性和共同作用防治蝗虫,具有重要的实际意义。

4 绿僵菌防治农林害虫的分子生物学、遗传学研究改良培育具备致病性等优良性状的新菌株并阐明其遗传学特性,是提高绿僵菌防治水平,控制昆虫病害的需要。

真菌原生质体的分离性状及其染色体组型的确立是这一工作的前提。

时连根进行了绿僵菌大孢种原生质体及其染色体组型进行了研究,结果表明实验分离的绿僵菌大孢种原生质体的有核率为74.4%,其中53.6%为单核。

这些性质适合用于原生质体融合技术来培育优良的具有希望性状的菌株。

近年来,国内外学者对绿僵菌的分子生物学技术的研究进行了开发和应用,为分子水平上研究生物防治真菌提供了科学依据。

酶谱的分析、基因的分离及其分子标记的建立有助于虫生真菌的遗传差异性的研究和在基因水平上进行菌株的定向改良。

前人研究指出不同来源的菌株对寄主昆虫的毒力具有明显的差异,这些差异是否具有遗传物质基础需进一步探讨。

张立钦等已应用RAPD 技术对不同来源的4个金龟子绿僵菌菌株的DNA 进行扩增,通过对DNA 图谱的系统聚类,分析了其特异性、多态性以及与原寄主和毒力等指标的相关性。

绿僵菌分子生物学技术的发展促进了其遗传学的研究。

第28卷第5期唐山师范学院学报2006年第5期利用遗传工程技术不仅可以研究其作用机理,而且可以对毒性基因进行定位和定向诱变,以提高它的病原性。

参考文献:[1] 罗于洋,李青丰,金花,等.我国生物农药应用研究的现状及展望[J].内蒙古草业,2002,14(3):25-26.[2] 张一宾,吴霞.微生物源农药[J].上海化工,1998,23(23):26-28.[3] 郑爱萍,李平.微生物防治存在的问题及发展方向[J].中国农学通报,2000,16(6):28-32.[4] 蒲蜇龙,李增智.昆虫真菌学[M].合肥:安徽科学技术出版社,1996,93:378.[5] 高松.绿僵菌研究的新进展[J].中国生物防治,1996,12(4):182-187.[6] 黄基荣,谢佩华,姚丽娟.绿僵菌对金龟子的感病性实验[J].生物防治通报,1994,10(4):175-177.[7] 肖育贵,郭亨孝.绿僵菌防治鞭角华扁叶蜂试验研究[J].四川林业科技,2000,21(3):10-13.[8] 王海川,尤民生.绿僵菌分生孢子对寄主附着机制的研究进展[J].昆虫知识,1999,36(3):189-192.[9] 贾春生,由士江,张少柱.利用绿僵菌与倍硫磷混用防治东北大黑鳃金龟研究[J].北华大学学报(自然科学版),2003,4(1):78-79.[10] 陈祝安,谢佩华,黄基荣,等.绿僵菌对暗黑金龟蛴螬的室内致病力测定[J].中国生物防治,1995,11(2):54-55.[11] 黄勃,樊美珍,李增智.绿僵菌属系统分类的研究进展[J].安徽农业大学学报,2002,29(2):169-172.[12] Bate man R. The Development of A Myco-insecticide for the Control of Locusts and Grasshoppers, International Institute ofBiological Control[J]AUK.outlook on Agriculture,1997,26(1):13-18.[13] Price R E,Bate man R P,Brown H D,et al. Aerial spray trials against brown locust (Locustana pardalina)nymphs in south Africausing oil-based formulations of Metarhizium flavoviride[J].Crop-protection,1997,16(4):345-351.Studies on the Killing Effects of Metarhizium on Farming and ForestryPestsLI Chun-xiang1, AN Yan-jie1,2, ZHANG Shu-hong1(1. Department of Biology Science and Technology, Tangshan Teachers College, Hebei Tangshan 063000, China;2. School of Biology Science and Technology, Central China Normal University, Hubei Wuhan 430072, China )Abstract: The studies on the killing effects of metarhizium on farming and forestry pests were summarized in this paper and effect-affecting factors were discussed.Key words:metarhizium; farming and forestry pests; biological control责任编辑、校对:孙海祥- 6 -。

相关文档
最新文档