过氧化氢酶产生菌的研究
海洋低温过氧化氢酶菌株的筛选及酶学性的研究
ｍｉ ｘ ｔ ｕ ｒ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ｂ ｏ ｈ ａ ｉ Ｂ ａ ｙ ．Ｉ ｔ ｗａ ｓ ｎ ａ ｍｅ ｄ Ｓ ｅ ｒ ｒ ａ ｔ ｉ ａ ｌ ｉ ｑ ｕ ｅ ｆ ａ ｃ ｉ ｅ ｎ ｓ Ｃ Ｚ Ａ１ ２ ０ ２ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｆ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｏ —
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（ １ ． Ｃｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｂｉ ｏ ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ，Ｄａ ｌ ｉ ａ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ，Ｄａ ｌ ｉ ａ ｎ １ １ ６ ６ ２ ２，Ｃｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｌｉ ａ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｃｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｏ ｆ Ｍａ ｒ ｉ ｎ ｅ Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ １ Ｅｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ，Ｄａ ｌ ｉ ａ ｎ １ １ ６ ６ ２ ２ ，Ｃｈ ｉ ｎ ａ ）
保持 ６ Ｏ ｍｉ ｎ条件 下 ， 酶 活 可保 留 ７ Ｏ 。初 始酶 活达 到 １ ０ ７ ． ８ Ｕ／ ｍＬ。
关 键词 ： 海 洋微 生物 ； １ ６ Ｓ ｒ ＤＮＡ； 低 温过氧化 氢酶 ； 酶 学性 质 ； 液 化 沙雷 氏茵
中图分 类号 ： ＴＳ ２ ６ ４ ． ２ 文 献标识 码 ： Ａ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ Ｏ ０ Ｏ 一９ ９ ７ ３ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ３ ． ０ ０ ８ 文 章编 号 ： １ ０ ０ ０ —９ ９ ７ ３ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ —０ ０ ３ １ 一Ｏ ５
植物病原细菌中内源过氧化氢的产生、功能及其在与植物互作中的作用的开题报告
植物病原细菌中内源过氧化氢的产生、功能及其在与植物互作中的作用的开题报告摘要：内源过氧化氢（H2O2）是一种常见的细胞信号分子，可参与调控植物的生长、发育和应对逆境反应。
植物病原细菌在感染植物时，也能够利用内源H2O2来调控其生长、产生致病因子，甚至进一步影响植物的防御反应。
本文主要阐述了植物病原细菌中内源H2O2的产生机制、功能及其与植物互作的相关研究进展，旨在深入了解植物病原细菌与宿主植物之间的交互作用，从而为病害的防治提供理论依据。
关键词：内源过氧化氢、植物病原细菌、致病性、植物互作1. 引言内源过氧化氢（H2O2）是一种重要的氧自由基，是多种细胞信号传递中的关键分子。
近年来的研究表明，植物病原细菌也能够产生内源H2O2，并从中获益。
在与植物互作过程中，病原细菌通过调控H2O2的产生和代谢，影响植物的防御反应，从而实现对宿主的感染和繁殖。
因此，深入了解植物病原细菌中内源H2O2的产生机制、功能及其与植物互作的作用，对探究植物病害的发生机理、防治病害具有重要的理论意义。
2. 植物病原细菌中内源H2O2的产生机制内源H2O2的产生是由细胞内氧化还原反应的平衡状态调控的，与细胞膜的抗氧化能力和细胞内氧气浓度等因素密切相关。
在植物病原细菌中，H2O2的生成主要依赖于两种酶的作用：超氧化物歧化酶（SOD）和NADPH氧化酶（NOX）。
SOD能够将O2-转化为H2O2，而NOX则利用NADPH提供电子将O2还原成H2O2。
此外，还有一些研究表明，细菌的某些代谢通路也能够直接参与H2O2的合成。
3. 植物病原细菌中内源H2O2的功能内源H2O2在细菌生长和代谢过程中具有很多重要的功能。
首先，H2O2能够抑制细菌的生长，这是因为H2O2能够通过氧化蛋白质和脂质，导致氧化应激反应，最终导致细胞死亡。
另外，一些研究也表明，内源H2O2能够调控细菌的致病性，如调控毒力因子的合成和释放、调控生物膜的形成等。
4. 植物病原细菌中内源H2O2在与植物互作中的作用植物病原细菌通过产生内源H2O2来影响植物的抗病能力。
一株产过氧化氢酶细菌的筛选及发酵条件的优化
Ｖｏ ＿ ６ Ｎｏ ２ Ｉ２ ． Ａｐｒ ２ ２ ． ０１
一
株 产 过 氧化 氢 酶 细 菌 的筛 选 及 发 酵 条 件 的优 化
陈 欣 ，甘 国斌 ， 孙敬冉 ，陈黎黎 ， 唐少 宇
（ 江苏科技 大学 生物与化学工程学院 ， 江苏 镇江 ２ ２ １ ） １０ ８
摘
要 ： 中筛选到一株过氧化氢 酶生产 菌株 ， 文 初步鉴定 为枯草芽孢杆 菌 （ ａｉｕ ｐ ） 对葡萄糖浓度 、 ａ Ｏ Ｂ ｃ ｌ ｓ． ． ｌｓ Ｎ Ｎ 浓度 、 培养 第２ ６卷第 来自期 ２１ ０２年 ４月
江苏 科技 大学 学报 （ 自然 科学 版 ）
Ｊｕｎｌ ｆ ｉ ｇｕＵ ｉ ｒｔ ｏ ｃ ｎｅａ ｄＴ ｃｎｌｇ （ ａ ｒｌ ｃ ｎｅＥ ｉｏ ） ｏｒａ ｏ ａ ｓ ｎｖ ｓｙ ｆ ｉ ｃ ｎ ｅｈ ｏ ｙ Ｎ ｔ ａ Ｓｉ ｃ ｄｔ ｎ Ｊｎ ｅ ｉ Ｓ ｅ ｏ ｕ ｅ ｉ
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细菌的氧化应激反应及其基因调控
研究表明，细菌的氧化应激反应及其基因调控与细菌对外界环境的适应能力息息相关。
细菌在自然环境中会受到各种各样的压力，例如氧化应激、温度变化、营养限制等，而氧化应激是其中非常重要的一种。
在氧化应激条件下，细菌内部的氧化还原平衡受到破坏，导致大量的有害氧自由基产生，从而影响细菌的生长、代谢和致病性等。
细菌通过调控氧化应激反应的基因表达，来应对外界环境的挑战。
一、细菌氧化应激反应的基本过程1. 氧自由基的产生及损害氧化应激是指细胞内氧自由基的产生增加，导致细胞内氧化还原平衡被破坏，从而影响细胞内的生化代谢和功能。
氧自由基包括超氧阴离子（O2•-）、过氧化氢（H2O2）、羟基自由基（•OH）等，它们对蛋白质、核酸和脂质等生物大分子都具有一定的损害作用。
2. 抗氧化酶系统细菌通过产生一系列的抗氧化酶来清除氧自由基，包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（catalase）和还原型谷胱甘肽等。
这些酶主要起到清除氧自由基的作用，从而减轻氧化应激对细菌的损害。
3. 氧化应激响应基因的表达在氧化应激条件下，细菌会启动一系列的氧化应激响应基因的表达，以应对氧化应激的挑战。
这些基因编码了一些重要的蛋白质，如抗氧化蛋白、修复蛋白和分解蛋白等，它们可以帮助细菌清除氧自由基、修复受损的生物大分子，并调节细胞内的氧化还原平衡。
二、细菌氧化应激反应的基因调控1. 转录因子的调控在氧化应激条件下，一些转录因子的活性会发生改变，从而调控一些氧化应激响应基因的表达。
这些转录因子包括OxyR、SoxR、PerR等，它们可以感知细菌内氧自由基的水平变化，从而调控相关基因的表达，以适应外界环境的变化。
2. RNA的调控一些非编码RNA和小RNA也参与了细菌氧化应激反应的调控。
这些RNA分子可以通过直接干扰基因的转录和翻译过程，或者间接调控转录因子的活性，从而影响氧化应激响应基因的表达。
总结回顾：细菌的氧化应激反应及其基因调控是一个复杂的过程，它涉及到细菌对外界环境的感知和适应能力，以及对氧化应激的有效应对。
过氧化氢酶
少大量的冲洗次数，从而节省时间和能源。 少大量过氧化氢酶作为一种新型酶制剂，在棉织物的前处 理 工艺中起着重要的作用，纺织热漂步骤使用过氧化氢 酶是实现纺织工业节能减排和可持续发展的有效方法。 目前商品化过氧化氢酶的价格较高，温度和pH 耐受范围 较低，这些都制约着过氧化氢酶在纺织工业的大规模应 用。 过氧化氢酶发酵生产目前的研究主要 集中在菌种筛选、培养基和发酵条件优化、 基因工程菌构建等方面，发酵水平仍需进 一步提高。考虑到纺织加工处理的条件需 要，需要开发出更 加适应高温和碱性条 件的过氧化氢酶用于过氧化氢漂白 的酶 处理。
过氧化氢酶的应用原理
过氧化氢分解酶, 过氧化氢分解酶 能将过氧化氢分解成水和 氧气, 而对纤维和染料没有影响, 氧气 而对纤维和染料没有影响 因而漂白后 染色前, 通过H 染色前 通过 2O2 分解酶去除漂白织物上和 染缸中残留的过氧化氢, 染缸中残留的过氧化氢 以避免纤维的进一 步氧化和染色时染料的氧化。同时能缩短加 步氧化和染色时染料的氧化。同时能缩短加 工时间,减少水洗用水 降低废水量。 减少水洗用水, 工时间 减少水洗用水 降低废水量。尤其对 纱线、筒子纱和针织物更为适用。 纱线、筒子纱和针织物更为适用。
简介： 简介：
过氧化氢酶，是催化过氧化氢分解成氧和水的酶， 过氧化氢酶，是催化过氧化氢分解成氧和水的酶，存在于 细胞的过氧化物体内。过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志 细胞的过氧化物体内。过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志 约占过氧化物酶体酶总量的40%。过氧化氢酶存在于所 酶, 约占过氧化物酶体酶总量的 。 有已知的动物的各个组织中，特别在肝脏中以高浓度存在。 有已知的动物的各个组织中，特别在肝脏中以高浓度存在。
一株高产过氧化氢酶的黑曲霉菌株及其应用[发明专利]
![一株高产过氧化氢酶的黑曲霉菌株及其应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/fcfd3980a98271fe900ef9e5.png)
专利名称：一株高产过氧化氢酶的黑曲霉菌株及其应用专利类型：发明专利
发明人：王兴吉,贾仁洁,刘文龙,张杰
申请号：CN201611056550.0
申请日：20161125
公开号：CN106520575A
公开日：
20170322
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一株高产过氧化氢酶的黑曲霉菌株及利用其生产过氧化氢的方法。
本发明提供了一株高产过氧化氢酶的黑曲霉(Aspergillus niger)LDG1，保藏编号为CGMCC No.13167；本发明还公开了利用该菌株生产过氧化氢酶的工业生产方法，用该菌株经种子培养和液体深层发酵可使发酵液酶活达到152000U/mL以上，经提取制得的过氧化氢酶产品，成品低廉，耐碱耐高温，可广泛的应用于食品、造纸和纺织行业，使得这些行业中的生产过程更加绿色环保。
申请人：山东隆科特酶制剂有限公司
地址：276400 山东省临沂市沂水县城北工业园
国籍：CN
代理机构：北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：栗华楠
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过氧化氢酶在植物生长发育和胁迫响应中的功能研究进展
活性氧(reactive oxygen species,ROS)在植物生长发育和胁迫响应中扮演着十分重要的角色,研究其产生和清除机制有着十分重要的意义。
ROS 主要包括超氧阴离子(O 2-·)、过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2O 2)、羟基自由基(·OH)和单线态氧(1O 2)等[1]。
其中,H 2O 2是最稳定的存在形式,也是植物体内重要的信号分子,因此维持体内H 2O 2稳态具有十分重要的意义[2]。
过氧化氢酶(catalase,CAT)是发现最早也是目前研究最透彻的H 2O 2清除酶之一,其功能和相关调控机制仍是当下植物研究DOI:10.16605/ki.1007-7847.2023.01.0110过氧化氢酶在植物生长发育和胁迫响应中的功能研究进展刘聪,邓宇宏,刘选明*,林建中*(湖南大学生物学院植物功能基因组学与发育调控湖南省重点实验室国家耐盐碱水稻技术创新中心,中国湖南长沙410082)收稿日期:2023-01-01;修回日期:2023-03-07;网络首发日期:2023-04-10基金项目:国家自然科学基金资助项目(31871595);湖南省自然科学基金资助项目(2020JJ4004);国家耐盐碱水稻技术创新中心项目(2022PT1005);杂交水稻国家重点实验室(湖南杂交水稻研究中心)开放课题(2019KF02);海南省崖州湾种子实验室揭榜挂帅项目(B21HJ0108)作者简介:刘聪(1991—),男,河南郑州人,博士;刘聪和邓宏宇对本文的贡献相同,为本文共同第一作者;*通信作者:林建中(1975—),男,湖南会同人,博士,湖南大学副教授,主要从事植物生理与分子生物学研究,Tel:*************,E-mail:*****************.cn;刘选明(1963—),男,湖南邵阳人,博士,湖南大学教授,主要从事植物功能基因组学研究,Tel:*************,E-mail:*************.cn 。
过氧化氢酶高产菌株CE-2-A的发酵条件优化
Ｃｈｎ ｓ ａ ｅ ｆＦｓ ｅｙＳｃｅ ｃ ｓ ｉｅ ｅＡｃ ｄ ｍｙｏ ｉｈ ｒ ｉｎ ｅ ，Ｑｉｇ ａ ６ ０ １ ｎ ｄ ｏ２ ６ ７ ）
（ Ｃ ｌ ｇ ｆＦ ｏ ｃｅ ｃ ｎ ｃ ｎ ｌｇ ｏ ｌ ｅ ｏ ｏ ｄ Ｓ ｉｎ ｅ ａ ｄ Ｔｅ ｈ ｏ ｏ ｙ，Ｓ ａ ｇ ａ ｅ ｎ Ｕ ｎ ｖ ｒ ｉ ｅ ｈ ｎ ｈ ｉＯｃ ａ ｉ ｅ ｓｔ ｙ，２ １ ０ ） ０ ３ ６
用 了单 因子试 验 筛选 出 了发 酵培 养基 的麦 芽糖 含 量 、 肉膏含量 、 ａ １和 Ｍｇ １ 量 ， 牛 Ｃ Ｃ Ｃ 含 在此基 础 上采 用 Ｐ ａｋ ｔ— ｕ ｍａ ｌｃ ｅｔ ｒ ｎ设 计 法 ， ８种 影 响 产 酶 的 因素 进 行 评 价 。试 验 结 果表 明 ， 肉膏 含 量 、 始 Ｂ 对 牛 起
ＺＨ Ａ ＮＧ ｎ — ｉｎｇ ， Ｗ Ａ Ｎ Ｇ ｅ Ｚｅ ｇ ｘ ａ 。 Ｗ ｉ Ｗ Ａ Ｎ Ｇ ｎｇ Ｆａ ＳＵ Ｎ ｉ Ｍ
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
（ Ｌａ ｏｒ ｔ ｙ ｏ ａ ｉ ｏｄｕ ｔ ｎ ｚ ｂ ａ ｏｒ ｆＭ ｒｎｅ Ｐｒ ｃ ｓ ａ ｄ Ｅｎ ｙｍ ｅＥｎｇｉ ｅ ｉ ｎｅ ｒｎｇ， Ｙｅ ｌｗ ａ Ｆｉｈｅ ｉ ｓＲ ｅ ｅ ｒ ｈ ｎｓ ｉｕｔ ｌｏ Ｓｅ ｓ ｒｅ ｓ ａ ｃ Ｉ ｔｔ ｅ，
张 增 祥 王 伟 王 芳 孙 谧
（ 上 海 海 洋 大 学 食 品学 院 ， ０ ３ ６ 。 ２ １０ ）
（海 洋 产 物 资 源 与 酶 工 程 实 验 室 ， 国水 产 科 学 研 究 院 黄 海水 产研 究 所 ， 岛 ２ ６ ７ ） 中 青 ６０ １
摘
要
为 了提 高气单胞 菌属 菌株 Ｃ 一～ 的 过 氧化 氢酶 产 量 ， 其 发 酵条 件 进 行 优化 。首 先运 Ｅ ２Ａ 对
注射器和酵母菌液在“pH影响过氧化氢酶活性”实验中的应用
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Hale Waihona Puke 161 min5
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10.6
7. 1
pH8.0
4 6 14 22 6 7 7.3 6.8
图1改进的实验装置两通注射器
2.2材料优化——单细胞真菌酵母为解决传统实 验材料鲜肝匀浆和马铃薯匀浆的制备过程中需要研 磨、保存不便的弊端，以及多细胞生物内环境中pH缓 冲对可能引起的对实验变量的干扰，联想到酶的发现 史中早期酶的研究是从酿酒酵母开始，因此选择安琪 干酵母粉,用蒸傳水配制2%酵母溶液备用（不使用葡 萄糖溶液配制是为防止酵母自身呼吸作用产生的co2 影响因变量的检测），酵母菌作为单细胞生物,不存在 内环境中pH缓冲对，可减少对自变量设置的干扰；同
1引言 “影响酶活性的因素”是浙科版高中生物学必修1
《分子与细胞》中第一个探究实验，是引导学生进行探 究性学习、发展科学思维的好材料。浙科版、苏教版、 人教版在“探究pH对酶活性影响实验”的酶种选择上 都采用过氧化氢酶，浙科版建议以猪肝研磨液作为过 氧化氢酶的来源,采用排水集气法测定单位时间内产 生气体的体积定量分析过氧化氢酶活性。是否能改进 装置，使操作更简便，同时可定量且同步测定不同pH 条件下过氧化氢酶的活性；能否优化实验设计,深入探 讨过酸或过碱对过氧化氢酶活性有何影响。笔者结合 教学实践,进行了如下改进。 2实验方法与优化 2.1装置优化——两通注射器50 mL注射器两支， 通过两通管连接，一支注射器加入酶溶液，另一支加入 h202溶液;将h2o2溶液注射到酶溶液中，反应开始记 录单位时间内注射器中气体的变化量作为酶活性的检 测指标。改进后的装置使反应发生和定量测定在同一 个注射器中进行，操作更简便，数据更易获得,同时可 以定量控制酶和底物的用量。装置的气密性检测可通 过一支注射器活塞拔出5 mL,组装成两通注射器后浸 没在水面之下,推动活塞将注射器中气体推入另一支, 此过程若无气泡产生,即装置气密性良好。
(整理)触酶试验氧化酶试验
触酶试验(1)原理：触酶又称过氧化氢酶，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。
(2)方法：取洁净玻片1张，用接种环挑取细菌，加3％H2O2 1滴，立即观察结果。
(3)结果：若立即出现大量气泡为阳性。
无气泡为阴性。
(4)应用：大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌科阴性，故常用此试验来鉴定。
此外，金氏杆菌属的细菌也为阴性。
分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验，结核分枝杆菌为阴性，戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。
注意事项：①3％H2O2溶液要新鲜配制。
②不宜用血琼脂平板上生长的菌落，因红细胞含有触酶，可致假阳性反应。
③取对数生长期的细菌。
氧化酶试验（1）原理：氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
（2）试剂：1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。
（3）方法：常用方法有三种；1）菌落法：直接滴加试剂于被检菌菌落上。
2）滤纸法：取洁净滤纸一小块，沾取菌少许，然后加试剂。
3）试剂纸片法：将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片，取菌涂于试剂纸上。
（4）结果：细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色，为阳性。
为保证结果的准确性，分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。
（5）应用：主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。
奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。
2.3 耐酸性染色法(萎－倪二氏法)2.3.1 石炭酸品红染色液碱性品红0.3g 95%乙醇 10mL5%酚水溶液 90mL将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。
2.3.2 3%盐酸－乙醇浓盐酸 3mL 95%乙醇 97mL2.3.3 复染液吕氏碱性美蓝染色液。
美蓝0.3g；95%乙醇 30mL；0.01%氢氧化钾溶液 100mL；将美蓝溶解于乙醇中，然后与氢氧化钾溶液混合。
2.3.4 染色法2.3.4.1 将涂片在火焰上加热固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸气出现，但切不可使沸腾。
实验4、植物组织中过氧化氢酶的活力测定
数据处理
02
对实验数据进行处理，绘制了酶活力与吸光度值的关系图，以
便更好地展示实验结果。
数据可靠性分析
03
对实验数据进行了可靠性分析，确保数据的准确性和可靠性。
结果分析
01
酶活力比较
通过比较不同植物组织中过氧化 氢酶的活力，发现不同植物组织 中酶活力存在差异。
02
吸光度值分析
03
实验误差分析
通过对吸光度值的分析，发现吸 光度值与酶活力之间存在一定的 相关性。
过氧化氢酶活力测定的化学反应原理
01
过氧化氢酶能够催化过氧化氢分解 为水和氧气，这个反应可以用化学 方程式表示为：2H2O2 → 2H2O + O2。
02
在实验中，通常加入适量的过氧 化氢作为底物，并观察其分解速 度，通过测量氧气产生的速率来 计算过氧化氢酶的活力。
过氧化氢酶活力测定的计算方法
实验中，可以通过测量一定时间内氧气 产生的体积来计算过氧化氢酶的活力。
过氧化氢酶活力的大小与植物组织的代谢活性、抗逆性和抗病性等密切相关，因 此测定过氧化氢酶活力对于研究植物生理和抗性机制具有重要意义。
学习过氧化氢酶活力测定的方法
实验中采用了分光光度法来测定过氧化氢酶的活力。该方法 基于过氧化氢在过氧化氢酶的作用下分解产生氧气的原理， 通过测定反应体系中氧气含量的变化来计算过氧化氢酶的活 力。
实验4：植物组织中过 氧化氢酶的活力测定
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REPORTING
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与展望
目录
PART 01
实验目的
REPORTING
WENKU DESIGN
细菌淀粉酶和过氧化氢酶的定性测定实验流程
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第三节 实验及酶的专一性
例6、证明“唾液淀粉酶对淀粉有消化作用”，某 同学制订了下列实验方案： 实验方法和步骤： ①取1支试管，注入2ml浆糊。 ②用凉开水漱口后，用小烧杯收集唾液。 ③向试管内加入2ml唾液。 ④往试管中滴加2滴碘液。 ⑤将试管振荡后放十分钟。 ⑥取出试管，观察溶液颜色的变化。 结论：唾液中含有淀粉酶能将淀粉分解成麦芽糖。 该实验的方法和步骤以及结论有没有错误？如果 有，请指出并改正。
因变量
结论
过氧化氢在不同条件下的分解 速率不一样
y=k· x+b
1、与1号试管相比，2号试管出现什么不同的现 象？这一现象说明了什么？
加热能促进过氧化氢的分解,提高反应速率
2、在细胞内，能通过加热来提高反应速率吗？
3、3号和4号试管未经加热，也有大量气泡产生， 这说明什么？
FeCl3中Fe3+和猪肝研磨液的过氧化氢酶都能加快过氧化氢分解的 速率
判断实验设计过程正确与否
（1）看有无对照实验（若有，看对照是否 合理） （2）看实验是否遵循了单一变量原则 （3）看实验步骤的顺序是否合理，步骤是 否完整 （4）看实验仪器、药剂的使用是否合理 （5）看实验（编号分别为A、B、C）、淀粉、 碘液以及控制在37 ℃ 、0 ℃、100 ℃的3个水浴锅。 （1）请根据以上提供的材料及条件，写出实验的步骤④及 其以后的实验步骤，以证明温度对酶的催化活性的影响。 实验步骤： 步骤①：制备6ml淀粉溶液并冷却至常温。
唾液淀粉酶和适量水混合装入一容器内，调整pH 至2.0，保存于37℃的水浴锅内。过一段时间 后，容器内剩余的物质是 ( ) A A、淀粉、胃蛋白酶、多肽、水 B、唾液淀粉酶、麦芽糖、胃蛋白酶、多肽、水 C、唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水 D、唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水
过氧化氢酶
微生物过氧化氢酶是一种重要的工业酶制剂，可以催化分解过氧化氢生成水和氧气。
这一酶制剂在食品、纺织、医药等领域表现出广泛的应用潜力。
生物工程和基因工程技术的进步推动了微生物过氧化氢酶的发酵生产。
以下综述了微生物过氧化氢酶发酵生产的进展及其在纺织工业中的应用，同时讨论了微生物过氧化氢酶的发酵生产和纺织工业应用的未来趋势。
1 过氧化氢酶简介过氧化氢酶 (Hydrogen peroxide oxidoreductase，catalase EC1.11.1.6.) 是一类以过氧化氢为专一底物，通过催化一对电子的转移而最终将其降解为水和氧气的酶。
研究表明几乎所有的需氧微生物中都存在过氧化氢酶，只有少数好氧菌如过氧化醋杆菌Acetobacter peroxydas 不存在过氧化氢酶[1-4]。
除谢氏丙酸杆菌Propionibacterium shermanji 和巨大脱硫弧菌Desulfovibrio gigas 等微生物外，绝大多数厌氧微生物体内不存在过氧化氢酶[5]。
根据过氧化氢酶在结构和序列水平上的异同将其划分为3 个亚群，即单功能过氧化氢酶 (Monofunctional catalase or Typicalcatalase)、双功能过氧化氢酶 (Catalase-peroxidase) 和假过氧化氢酶 (Pseudocatalase or Mn-catalasee)。
大多数的过氧化氢酶由4 个相同的亚单位组成，分子量在240 kDa 左右，在亚基的活性部位各含一个血红素基团[6]。
来自哺乳动物以及某些真菌和细菌的过氧化氢酶还含有4 个紧密结合的NADPH 分子。
过氧化氢酶可被氰化合物、苯酚类、叠氮化物、过氧化氢、尿素及碱等物质所阻抑。
过氧化氢酶主要集中存在于细胞的过氧化物酶体中，另外线粒体和细胞质中也含有少量的过氧化氢酶。
过氧化氢酶能及时分解细胞内产生 (主要为SOD 歧化产物) 或由胞外进入细胞的过氧化氢。
金黄色葡萄球菌菌膜形成过程中过氧化氢酶变化的研究
金黄色葡萄球菌菌膜形成过程中过氧化氢酶变化的研究杨存迪;李忠海;任佳丽【摘要】选择食品工业中出现的典型细菌菌膜(金黄色葡萄球菌菌膜),探讨单一细菌菌膜形成中细菌自身产生的具有氧化还原活性的生物酶在菌膜形成与生长过程中的变化,并将其与菌膜的实时变化相对照,探索菌膜形成过程中的氧化还原活动的变化,以寻求食品工业中可有效地控制菌膜污染的方法.对金黄色葡萄球菌菌膜中过氧化氢酶量的变化进行实时监测,并对不同培养时间段的菌膜所得到的检测峰电流进行作图分析,结果显示:细菌中过氧化氢酶的量随着菌膜形成量的上升而上升,随着菌膜的自溶分解现象而减小.可为金黄色葡萄球菌菌膜中的氧化代谢活动研究提供理论依据与研究基础.%The typical bacterial membrane in the food industry (Staphylococcus aureus film) was chose to explore the single bacterial membrane in the formation of bacteria,and the production of their own activities with redox activity during the membrane for mation and growth process was paring with the real-time changes of the bacterial membrane,the change of the redox activity was also studied to find the mechanism of controlling the bacterial pollution in the food industry.The real-time monitoring of catalase in Staphylococcus aureus membrane was carried out by analyzing the peak current obtained from the bacterial membrane of different culture periods.The results showed that the peroxidation of Staphylococcus aureus changes in the amount of catalase.The amount of catalase in the bacteria increases with the increase of the amount of bacterial membrane,and decreases with the autolysis ofthe membrane.This study would provide a theoretical and research basis for the study of oxidative metabolism in Staphylococcus aureus.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2017(033)004【总页数】5页(P39-43)【关键词】金黄色葡萄球菌;菌膜;过氧化氢酶;SECM【作者】杨存迪;李忠海;任佳丽【作者单位】中南林业科技大学食品科学与工程学院,湖南长沙410004;中南林业科技大学食品科学与工程学院,湖南长沙410004;稻谷及副产品深加工国家工程实验室,湖南长沙410004;中南林业科技大学食品科学与工程学院,湖南长沙410004;稻谷及副产品深加工国家工程实验室,湖南长沙410004【正文语种】中文根据细菌通过提升自身的抗氧化代谢途径来提升自身耐药性这一理论，抗生素等杀菌型药物会刺激细菌细胞的呼吸作用，从而导致超氧化物的产生以及游离铁的释放[1]。
细菌触酶试验
触酶试验标准操作程序
1.检验目的
规范触酶试验操作
2. 实验原理
具有触酶（过氧化氢酶）的细菌，能催化过氧化氢,可将H2O2分解为无害的水和氧气，产生可见的气泡。
3. 样本要求：
3.1 纯的菌落。
3.2 细菌要求新鲜。
3.3 不宜用血琼脂平板上的菌落做触酶实验，若用血琼脂上的菌落，刮取菌苔时注意不要带有血培养基琼脂，因红细胞内含有触酶，可能出现假阳性。
4. 材料
3%-30％过氧化氢溶液。
5. 操作步骤
5.1 准备清洁玻片、接种环。
5.2 将接种环用酒精灯火焰灭菌，待冷却后刮取适量菌苔置于玻片上。
5.3 5～30% H2O2滴在菌苔上。
6. 结果观察：立即产生大量气泡者为阳性，少量气泡者为弱阳性，无气泡者为阴性。
7. 质控：
7.1 阳性对照：质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923。
7.2 阴性对照：质控菌株肺炎链球菌ATCC49619。
8. 支持文件
8.1 周庭银编著. 临床微生物学诊断与图解. 第二版. 上海：上海科学技术出版社，2007 8.2 王钦升，周正明，高屹主编. 使用医学培养基手册. 北京：人民军医出版社，1999。
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过氧化氢酶产生菌的研究
摘要：过氧化氢酶一类以过氧化氢为专一底物，通过催化一对电子的转移而最终将其降解为水和氧气的酶。
关键字：过氧化氢酶发酵调控
过氧化氢酶简介
过氧化氢酶(Hydrogen peroxide oxidoreductase，catalase EC 1.11.1.6.) 是一类以过氧化氢为专一底物，通过催化一对电子的转移而最终将其降解为水和氧气的酶。
研究表明几乎所有的需氧微生物中都存在过氧化氢酶，只有少数好氧菌如过氧化醋杆菌Acetobacter peroxydas 不存在过氧化氢酶。
除谢氏丙酸杆菌Propionibacterium shermanji 和巨大脱硫弧菌Desulfovibrio gigas 等微生物外，绝大多数厌氧微生物体内不存在过氧化氢酶。
根据过氧化氢酶在结构和序列水平上的异同将其划分为 3 个亚群，即单功能过氧化氢酶(Monofunctional catalase or Typicalcatalase)、双功能过氧化氢酶(Catalase-peroxidase) 和假过氧化氢酶(Pseudocatalase or Mn-catalasee)。
大多数的过氧化氢酶由4 个相同的亚单位组成，分子量在240 kDa 左右，在亚基的活性部位各含一个血红素基团。
来自哺乳动物以及某些真菌和细菌的过氧化氢酶还含有 4 个紧密结合的NADPH 分子。
过氧化氢酶可被氰化合物、苯酚类、叠氮化物、过氧化氢、尿素及碱等物质所阻抑。
过氧化氢酶主要集中存在于细胞的过氧化物酶体中，另外线粒体和细胞质中也含有少量的过氧化氢酶。
过氧化氢酶能及时分解细胞内产生(主要为SOD 歧化产物) 或由胞外进入细胞的过氧化氢。
避免了过氧化氢通过Fenton 和Harber-weiss 反应产生·OH。
同时过氧化氢酶还能对血红蛋白及其他含巯基蛋白质起到保护作用，使它们不被氧化。
人们研究过氧化氢酶的历史可追溯到100 多年前，早在1811 年就已发现动植物组织可以分解过氧化氢产生氧气，到1892 年Jacobson 证明了在动植物组织内有专一分解过氧化氢的酶，即过氧化氢酶的存在。
1901 年Loew 第一次报道了过氧化氢酶的生物化学特性。
到1937 年，Sumner 和Dounce 首次从牛的肝脏中分离得到过氧化氢酶的结晶，这是最早分离得到的高纯度酶之一。
随后相继报道了哺乳动物的肝脏、红细胞及大多数微生物体内均含有此酶，其中哺乳动物组织中过氧化氢酶的含量差异很大，肝脏中含量最高，
结缔组织中含量最低，在上述组织细胞内过氧化氢酶主要与细胞器如线粒体和过氧化物酶体结合的形式存在，而在红细胞中则以可溶的状态存在。
过氧化氢酶来源丰富，存在于几乎所有好氧生物中和一部分厌氧生物中。
动物过氧化氢酶存在于动物的主要组织中，尤以肝与红细胞为最多，脑、心脏与骨骼肌为最少，动物肝脏是过氧化氢酶的一个很大来源，国内外均已实现这一工艺的工业化生产。
另外，巴西研究者开发了从人胎盘中提取医用过氧化氢酶的技术。
植物方面，主要集中在过氧化氢酶保护植物抗氧化机理方面的研究。
不同来源的过氧化氢酶在细胞中的位置有所不同。
动物红细胞、肝脏以及细菌的过氧化氢酶存在于细胞质中，必须将细胞破碎才能提取到过氧化氢酶，因此酶的分离、提纯较为复杂。
细菌过氧化氢酶的热、碱稳定性虽然可随来源不同而不同，但因为是胞内酶，实现高产和提取均不方便。
酵母的过氧化氢酶主要积累于胞内，而一些丝状真菌的过氧化氢酶则主要分泌于胞外，胞内也含有一定量的过氧化氢酶。
因此选用嗜热丝状真菌来生产过氧化氢酶在应用和产品提取方面具有较大优势。
此外也有研究通过构建基因工程菌来生产过氧化氢酶。
目前商业化的过氧化氢酶以动植物提取和微生物发酵生产为主，本文将重点讨论微生物来源的过氧化氢酶的生产。
自20 世纪80 年代以来，织物和纸张的生产者以及其他工业就已经开始使用过氧化氢代替有毒的氯气来漂白和消毒产品。
过氧化氢可用于消除新鲜水果和蔬菜上有害的细菌，如沙门氏菌和大肠杆菌，还可用于消毒奶制品，为食品的纸包装如果汁盒消毒也不必冷藏储存等。
在去除生产过程中剩余的过氧化氢的过程中，人们将注意力转向了具有非常高的催化效率的过氧化氢酶，因此过氧化氢酶在食品、医药、临床等行业都有着广泛的用途。
目前过氧化氢酶主要的应用领域包括：1) 临床。
在临床分析中，过氧化氢酶对研究自由基代谢失衡、抗衰老和肿瘤发病机理具有一定价值，对某些疾病的诊断、鉴别诊断亦具有重要意义[12,14]。
过氧化氢酶可消除过氧化氢，对超氧化物歧化酶起保护作用，因而具有抗衰老作用[15]。
2) 医药。
由于过氧化氢具杀菌、清洁、漂白及消毒的功效，常用于器械消毒。
如在隐形眼镜消毒过程中添加过氧化氢酶可分解消毒液中残留的过氧化氢。
国内、外均有研究的专利发表[16-18]。
3) 食品加工。
过氧化氢酶可使食品保鲜，并作为消除啤酒、饮料中分子氧、活性氧和自由基的抗氧化剂。
此外过氧化氢酶可与葡萄糖氧化酶并用作为氧的去除剂，还可用于牛乳杀菌及干酪原料乳的杀菌[19]。
4) 其他工业。
与过氧化氢同时使用，用于橡胶成型、塑料及多泡性粘合剂。
纸浆、纤维、毛漂白工艺中除残留的过氧化氢。
加入化妆品中可防止皮肤衰老，还可处理半导体
废水。
近年来随着过氧化氢在纺织、造纸、制浆等行业的普遍应用，市场对过氧化氢酶的需求也呈大幅增长趋势。
PH对酶活力的影响
在25℃的测活体系中,改变不同的pH值,研究pH值对酶催化底物H2O2水解活力的影响将等量的酶液与不同pH值的缓冲液等量混合,室温下放置30min后,然后取出10μL处理的酶液正常的测活体系(25℃,pH7.0)中检
测酶的剩余活力,结果表明pH对酶的碱稳定性范围较宽,在pH7~14区
域较稳定。
温度对酶活力的影响
粗酶在不同温度下(30~100℃)的50mm的磷酸缓冲(PH7.0)热处理10min后,迅速冷却到室温,然后取出10μL处理的酶液在正常的测活体系(25℃,pH7.0）表明酶在85℃以下热处理30min,酶活力基本保持不变,在8 5℃以上酶活力开始下降,随着处理的温度升高,酶活力呈快速下降.实验说明酶在85℃以内都具有较好的热稳定性.高于85 ℃,酶极不稳定。
过氧化氢酶的应用
食品工业：半个世纪以前CAT就开始应用于食品工业。
利用 C A T 能分解 H 2 O2 产生 O2 的性质, 可在烘烤食品制造过程中将 C A T 和过氧化氢一起用作疏松剂。
但 C A T 更广泛的应用是对牛奶等的消毒。
在牛奶保存或奶酪制造前用过氧化氢对牛奶或液体鸡蛋制品进行消毒, 然后用 CAT 去除残余的过氧化氢。
这一过程可以在低温下进行, 从而避免高温处理造成的蛋白质变性和某些营养物质的破坏。
环保行业：目前发达国家环保行业的过氧化氢消费量约占过氧化氢总消费量的 10 % ~ 15 %。
用 CAT 取代化学试剂降解工业废水中含有的 H 2 O2 可以避免二次污染, 同时也可以降解芳环化合物和脂族化合物。
其中辣根过氧化氢酶( H RP) 由于价格便宜且失活慢, 已在很多含酚废水处理中得到了应用。
造纸工业：近年来造纸行业相继以H2O2漂白代替传统漂白方法, 并通常用SO2和亚硫酸氢钠去除漂白后的H2O2。
随着世界各国对环境和安全问题的考虑, 促进了去除H2 O2方法的深入研究, 有研究表明, CAT可在。