色谱知识
色谱知识
第一章气相色谱实验原理和应用领域 (3)第二章、检测器的分类 (4)2.1、（氢）火焰离子化检测器 (4)2.2、电子捕获检测器 (5)2.3、火焰光度检测器 (5)2.4、热导检测器 (5)第三章、检测器的性能指标 (7)3.1灵敏度——应答值 (7)3.2检测限（敏感度） (7)3.3线性范围 (8)第四章、气相色谱分析方法的建立步骤 (8)4.1、样品的来源和预处理方法 (8)4.2、确定仪器配置 (8)4.3、确定初始操作条件 (9)4.4、分离条件优化 (10)4.5、定性鉴定 (10)4.6、定量分析 (10)4.7、方法的验证 (13)第五章安装要求以及故障和操作失误的排除 (13)5.1 气相色谱维修维护经验 (13)5.2 气相色谱故障分析基础 (14)5.3 故障分析的思路 (14)5.4 气相色谱故障的种类 (15)5.5 故障的判别 (15)5.6 气相色谱仪在安装时对环境有一定的要求 (15)5.7 气相色谱仪故障和操作失误的排除 (16)5.8 色谱柱的连接 (17)5.9 各系统的加热控制 (20)5.10 放大器 (20)5.11 检测器 (20)5.12 采集系统 (20)第六章气相色谱仪的操作技巧 (23)第七章加标回收率计算方法的探讨 (26)第一章气相色谱实验原理和应用领域气相色谱是以气体为流动相（载气），由于样品在气相中传递速度快，因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。
根据不同物质在气-液相间的分配系数不同或在气-固相间的吸附能力不同，不同物质在两相中的反复溶解-挥发或吸附-脱附而达到分离的现代分离测定技术。
另外加上可选作固定相的物质很多,比如液体或固体（分别称为气液色谱或气固色谱），因此气相色谱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。
近年来采用高灵敏选择性检测器，使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。
在石油化学工业中大部分的原料和产品都可采用气相色谱法来分析；在电力部门中可用来检查变压器的潜伏性故障；在环境保护工作中可用来监测城市大气和水的质量；在农业上可用来监测农作物中残留的农药；在商业部门可和来检验及鉴定食品质量的好坏；在医学上可用来研究人体新陈代谢、生理机能；在临床上用于鉴别药物中毒或疾病类型；在宇宙舴中可用来自动监测飞船密封仓内的气体等等气相色谱的流程如下：1－载气钢瓶；2－减压阀； 3－净化干燥管； 4－针形阀； 5－稳流阀； 6－压力表；7－进样器和汽化室； 8－色谱柱； 9－检测器；10－放大器； 11－色谱工作站气相色谱流程图载气（流动相）经减压阀、净化器后、以某一稳定的流量进入汽化室，将注射入汽化室的样品带进色谱柱中分离，不同的成分分离后先后进入检测器，检测器将各组分的浓度或质量转化成电信号（电压、电流），并将随时间变化的信号强度输出或记录下来，即得组分流出时间和信号强度的关系图——气相色谱图。
色谱基础知识
紫外检测器使用前需要预热，待基线稳定后再进样，流通池与管路漏液或堵塞时应及时处理。 使用时应关闭检测器前面板，紫外检测器流通池耐压指标为12MPa（12μL），是所有液相检测 器中最高。，两台检测器串联使用时应先经过紫外检测器再串联其他检测器。氘灯的保证使用 时间是2000小时，使用时不要频繁开关，如果2000小时内氘灯故障可以联系厂家更换。如果使 用时间超过2000小时，氘灯能量正常还可以继剂效应：溶剂效应（solvent effect）亦 称“溶剂化作用”。指液相反应中，溶剂 的物理和化学性质影响反应平衡和反应速 度的效应。溶剂化本质主要是静电作用。 对中性溶质分子而言，共价键的异裂将引 起电荷的分离，故增加溶剂的极性，对溶 质影响较大，能降低过渡态的能量，结果 使反应的活化能减低，反应速度大幅度加 快。
荧光检测器具有极高的灵敏度和良好的选择性，比紫外检测器的灵敏度高两个数量级，特别适 用于痕量分析，在环境检测、药物分析、生化分析中有着广泛的用途。多环芳烃、霉菌毒素、 卟啉、儿茶酚氨等都可用荧光检测器检测。对于某些本身不发荧光的物质，如氨基酸、脂肪酸 可利用化学衍生技术使其生成荧光衍生物再进行检测。荧光检测器对温度、流量变化不敏感， 可以使用于梯度洗脱。
高效液相色谱柱相关知识
色谱柱通常安装再柱温箱内起到恒温恒压提高柱效延长柱寿命的目的，安装柱子时需要注意流 动相的方向，下进上出以排除气泡，根据分析的目的选择合适的色谱柱。
高效液相色谱柱相关知识
反相模式是第一选择，其中又以C18柱最为常见，反相离子对色谱和正向色谱是第二选择。 色谱柱连接时应避免产生死体积，常用的色谱连接头是peek接头，连接peek接头时如果peek接 头管线伸出的长度不够将产生缝隙，这就是柱外死体积；如果死体积产生再进样器出口处，上样体 积将增加，样品将展宽。如果死体积产生再色谱柱出口，本来分离的样品又混合了，一同进入检测 器，样品分离度将下降。死体积严重时甚至可能会导致漏液、色谱峰形劣化、重复性差。
色谱基础知识
色谱基础知识1.名词狭义：色谱—1903俄国科学家茨维特提出，色谱就是色带。
广义：色谱系统—采用固定相和流动相分离混合物的系统。
载气－气体流动相carrier gas担体－色谱柱中的固定相，可以是颗粒物质，毛细管的管壁也可以起到担体的作用。
支持固定液or分离作用。
DEGS，硅藻土、固定液－涂布在担体表面的高沸点有机物。
OV225并不是每个色谱柱都需要担体和（或）固定液。
柱容量：色谱柱能一次有效分离的物质最大量。
决定了进入色谱柱的样品量。
内因由物质的种类决定，外因主要由色谱柱横断面上分离作用组分的量决定。
脉冲式进样器：分流装置：保留时间：（Rt reserve time）物质在色谱柱中的停留时间。
影响因素：一是固定液或者担体与被分析的物质之间作用力；二是色谱条件，包括使用的温度、载气种类及流速、升温方式（程序升温或者恒温条件）；Porapak Q2m,N2,30ml/min,110℃,140℃。
2.色谱分类固定相：纸色谱，薄层色谱，柱色谱，流动相：液相色谱liquid chromatograph（离子色谱），气相色谱gas chromatograph，电色谱，磁色谱，超临界流体色谱气固色谱－气体流动相和固定相（担体）组成的色谱系统gas solid chromatograph，GSC，担体的极性决定色谱柱的极性。
吸附色谱气液色谱－气体流动相、（担体和）固定液组成的色谱系统gas liquid chromatograph，GLC，固定液的极性决定色谱柱的极性。
分配色谱超临界流体色谱－介于气相色谱和液相色谱之间的一种色谱。
电色谱－毛细管电泳，凝胶电泳磁色谱－有待开发3.几种色谱柱径流效应：分离度：两种物质被分离开的程度。
分子结构相似度（内因），色谱条件（外因）：柱种类，温度，气体，柱长毛细管色谱柱－内径很小的色谱柱（一般在0.20mm，0.25mm，0.32mm，0.52mm左右），对上样操作要求比较高；把固定液直接涂布在色谱柱的（内）管壁上，固定液（se30）厚度一般在微米（0.25µm）数量级。
液相色谱知识总结
• :电源电压为220±10V，频率为
50±0.5Hz·最佳配置稳压器(2kw以上)
• 最佳 试验室有专线，同一线路上不可有大
旳用电机械干扰
• 电源为三相电源，接地必须良好(此条非常
主要)，泵，检测器，工作站，电
• 脑接在同一种合格旳接线板上 (温分每台
仪器带一专用接线板)
示差折光检测器
• 示差折光检测器是根据不同物质具有不同折射率
来进行组分检测旳。但凡具有与流动相折射率不 同旳组分，均能够使用这种 检测器。假如流动相 选择合适，能够检测全部旳样品组分。示差折光 检测器旳优点是通用性强，操作简便；缺陷是敏 捷度低，最小检出限约为10-7g/ml，不能做痕量 分析。另外，因为洗脱液构成旳变化会使折射率 变化很大，所以，这种检测器也不合用于梯度洗 脱。
常见问题及处理
• 1 压力 • 2 基线不稳 • 3 谱图重现性不好 • 4 凝胶负峰旳产生
液相色谱知识总结
液相色谱旳工作原理
• 高效液相色谱（high performance liquid
chromatography ）是色谱法旳一种分 支， 分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中旳各组分经过固定相时，因为与 固定相(stationary phase)发生作用（吸附、 分配、离子吸引、排阻、亲和）旳大小、 强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从 而先后从固定相中流出。
荧光检测器
• 在其他条件一定旳情况下，荧光强度与物质旳浓度成正比。
许多有机化合物具有天然荧光活性，另外，有些化合物能 够利用柱后反应法或柱前反应法加入荧光化试剂，使其转 化为具有荧光活性旳衍生物。在紫外光激发下，荧光活性 物质产生荧光，由光电倍增管转变为电信号。荧光检测器 是一种选择性检测器，它适合于稠环芳烃、氨基酸、胺类、 维生素、蛋白质等荧光物质旳测定。这种检测器敏捷度非 常高，检出限达10-12—10-13g/ml，比紫外检测器高2—3 个数量级，适合于痕量分析。而且能够用于梯度洗脱。其 缺陷是合用范围有一定旳不足。
色谱基础知识
色谱的优点
★ 分离效率高 ★ 分析速度快 ★ 应用范围广 ★ 样品用量少 ★ 灵敏度高 ★ 分离和测定同步完成 ★ 易于自动化，可在工业流程中使用
高分子多孔微球：新型的有机合成固定相（苯乙烯/二乙烯苯共聚）。 适用于水、气体及低级醇的分析。
②气液色谱：溶质在固定相和流动相中进行分配，通过分子间作用力
（色散力、静电力、诱导力、氢键）的差异实现分离。
固定相=载体+固定液
对载体的要求：√具有化学惰性
√具有热稳定性
√具有一定的机械强度 √具有适当的比表面
ECD1A, ECD1A, 前部信号(HP5-ECD\STD-50PPB.D)
归一化 325
相交的两点之间的距离，W=1.698644× W ECD1A,ECD1A,前部信号(HP5-ECD\STD-50PPB.D)
300
1/2
归一化
275
800 700
250
600
225
500
200
W1/2
h
400 300
色谱的发展历程
1931年，Kuhn和Lederer重复了Tswett的实验，用氧化铝和碳 酸钙做固定相分离出了3中胡萝卜素（α、β、γ），此后用这种方法 分离了60多种这类色素。
1940年，Martin和Synge提出液液分配色谱法。 1941年， Martin和Synge提出用气体代替液体做流动相的可能。 此后的11年内，James和Martin发表了从理论到实践比较完整的气 液色谱方法，因而获得了1952年的诺贝尔化学奖。 1956年，Van Deemter提出速率理论。1965年Giddings对其进 行了总结和发展。 1957年，Golay开创了毛细管柱气相色谱法。
色谱基础知识
1色谱基本参数§1 保留值(1) 保留时间tr保留时间t r 和死时间t 0示意图(2) 保留体积V R(ml) = t r(min) * F c(ml/min)V R= V m+KV sK--平衡分配系数, Vs--固定相体积, Vm=流动相所占体积溶质在固定相中的浓度(n s/Vs) n s VmK=----------------------------------= ----* ----溶质在流动相中的浓度(n m/Vm) n m Vsn s, n m 溶质在固定相和流动相中的量23(4) 容量因子(k’)固定相中容质的量(n s)k´=------------------------流动相中容质的量(n m)K = k´(Vm/ Vs)V R = Vm +KVs = Vm + k´(Vm/ Vs) Vs = Vm + k´Vm= Vm (1+ k´)tr = to (1+ k´) k´= t r / to -1k´与固定相,流动相性质及柱温有关;与流速,柱尺寸无关.(3) 调整保留时间t r ´= t r -t oV = V R -V m(5) 死体积(V m) 和死时间(t o)1) 采用比流动相溶剂少一个-CH2-基团的同系物（己烷—戊烷）2）甲醇/水------甲醇3）正相--------四氯乙烯，反相---苯甲酸或硝酸4）计算法空柱管体积（Vc) * 总孔隙度（εT)t o=流动相体积流速（F c)= π/4 *d²c*L * εT/F c4计算孔隙度§2 选择性指标(α´)和相对保留值(α)α´= t r(2)/ t r(1) =(1+ k´(2)/(1+ k´(1))α= t r '(2)/ tr' (1)= k´(2)/ k´(1)α´作为选择性指标比α直观与柱温固定相种类流动相组成有关5§3 -1 流动相线速（u)流动相线速u: 通常指平均线速度u = L / t。
色谱分析法专业知识培训
俄国植物学家 茨维特
➢ Tswett植物色素分离 试验图示：
样 品：植物色素 固定相：CaCO3颗粒 流动相：石油醚
色谱柱
固定相 碳酸钙
流动相 石油醚
混合色素 叶绿素 叶黄素 胡萝卜素
分离组分
表1 色谱法旳发展简史 年代 发明者 发明旳色谱措施或主要应用
1906 Tswett
用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。最先 提杰出谱概念。
蒂塞利乌斯(Tiselius)因电泳分析和分析措施旳研究，发觉 血清蛋白组分，获1948年诺贝尔化学奖
1941，马丁(Martin)和辛格(Synge)创始分配色谱尤其是纸 色谱而共获1952年诺贝尔化学奖
氨基酸自动分析仪发明人S.穆尔(Stanford Moore)和W.H. 斯坦(William Howard Stein)，定量分析措施处理了有关 氨基酸、多肽、蛋白质等复杂旳生物化学问题，获1972年 诺贝尔化学奖
12.1 概述>>
一、色谱法简介
➢ 1923年，俄国植物学家M.Tswett刊登了他旳试验 成果：为了分离植物色素，他将具有植物色素旳 石油醚提取液倒入装有碳酸钙粉末旳玻璃管中， 并用石油醚自上而下淋洗，因为不同旳色素在 CaCO3颗粒表面旳吸附力不同，伴随淋洗旳进行， 不同色素向下移动旳速度不同，从而形成一圈圈 不同颜色旳色带，使各色素成份得到了分离。他 将这种分离措施命名为色谱法(chromatography)。 在今后旳20数年里，几乎无人问津这一技术。到 了1931年，德国旳Kuhn等用一样旳措施成功地分 离了胡萝卜素和叶黄素，从此色谱法开始为人们 所注重，相继出现了多种色谱措施。
2. 基本术语
➢ 保存值是色谱定性分析 和色谱过程热力学特征 旳主要参数。
气相色谱基本原理、相关知识
❖ 固定液的分类:
1)非极性固定液:它们与待测物质分子的作用力以色散力为主. 组分在此类固定相上按沸点由低到高顺序流出, 适用于非 极性和弱极性化合物的分析.
2)中等极性固定液:它们与待测物质分子间的作用力以色散力 和诱导力为主,组分基本上按沸点顺序出峰, 适用于弱极性 和中等极性化合物的分析。
３）强极性固定液：含有较强的极性基团，它们与待测物质 分子间的作用力以静电力和诱导力为主，组分按极性由小 到大的顺序出峰。适用于极性化合物的分析。
典型色谱图
问题色谱图
#1 #2 #3 #4 #5 #6 #7 #8 #9
毛细管柱问题2
鬼峰：残留或柱污染
典型色谱图
问题色谱图
#1 #2 #3 #4 #5 #6 #7 #8 #9
毛细管柱问题3
RT 和面积完全不同：用错了柱子
典型色谱图
问题色谱图
#1 #2 #3 #4 #5 #6 #7 #8 #9
毛细管柱问题4
2.原理
使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动 的(固定相),另一相(流动相)携带混合物流过此固定相,与固 定相发生作用,在同一推动力下,不同组分在固定相中滞留
的时间不同,依次从固定相中流出,又称色层法,层析法
3.分类
(1)气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱(流动相) (2)柱色谱,纸(PC)色谱,薄层色谱(TLC)(固定相) (3)吸附色谱,分配色谱,离子交换色谱,排阻色谱(物理化学分离
气相色谱基本知识
一、概 述
１.起源：色谱分析法是一种分离技术.它是由俄国
物理学家茨维特(Tswett)在1906年创立的,他在研 究植物叶中的色素时,先用石油醚浸提植物中的色 素,然后将浸提液注入到一根填充CaCO3的直立玻 璃管的顶端(图a),再加入纯石油醚进行淋洗,淋洗结 果使玻璃管内植物色素被分离成具有不同颜色的谱 带(图b),他把这种分离方法称为色谱法;玻璃管称为 色谱柱;管内填充物(CaCO3)是固定不动的,称为固 定相;淋洗剂(石油醚)是携带混合物流过固定相的流 体,称为流动相.
色谱理论基础知识
气相色谱实验技术
气相色谱仪
载气系统
分离系统
检测和 记录系统
进样系统
温控系统
（一）载气系统
载气系统
{
气源 净化干燥管 载气流速控制装臵 检测器
常用载气：氮气、氦气、氢气及氩气 载气选择依据
固体吸附剂应用
吸附剂 活性碳 石墨化炭 黑 硅胶 氧化铝 分子筛 主要成 分 C C Tmax 性质 度 300 500 非极性 非极性 氢键型 弱极性 极性 分离对象 永久气体，非极性烃 永久气体，高沸点化合 物 永久气体，非极性烃， 气体硫化物 烃，有机异构体 永久气体，惰性气体
SiO2· 2 400 XH O Al2O3 硅铝酸 盐 400 400
毛细管柱
毛细管柱又叫空心柱：
涂壁空心柱：将固定液均匀地涂在内径0.10.5毫米的毛细管内壁而成。 多孔层空心柱（PLOT）：在管壁涂渍一层多 孔吸附剂颗粒，不涂固定液，实际上毛细 管气固色谱柱。
毛细管柱的优点：
毛细管内没有固体填料，气阻比填充柱小的多， 可以采用较长的柱管和较小的内径，以及较高的 载气流速，既没有涡流扩散，又减小了纵向扩散 造成的谱带展宽。较薄的液膜又在一定程度上抵 消了由于载气流速增大引起的传质阻力增大。
液相传质阻力
固定液粘度及液膜厚度越小 液相传质阻力越小
4) 流动相线速度对板高的影响
四 分离度
定义：
tr2, tr1: 组分2和组分1的保留时间 W2, W1: 组分2和组分1的峰底宽度
R=1.5 完全分离
五 基本色谱分离方程式
对于难分离相邻两组分：
色谱知识点总结
色谱知识点总结色谱技术主要分为气相色谱（GC）和液相色谱（LC）两大类，其中液相色谱又可细分为高效液相色谱（HPLC）、离子色谱（IC）等。
色谱技术还包括薄层色谱（TLC）、柱层析色谱（CC）等其他方法。
色谱技术的发展历史可以追溯到20世纪初，最早的色谱方法是TLC，后来逐步发展为GC、LC等各种技术。
随着仪器和分析方法的不断改进，色谱技术的应用范围和分辨率得到了显著提高，成为现代化学和生物分析的重要手段之一。
在色谱中，流动相是指固定相中的移动液体，固定相是指分离柱或固定载体。
在GC中，流动相通常是惰性气体，如氮气或氦气；在LC中，流动相通常是有机溶剂和水的混合物。
固定相的选择取决于分析物质的性质和分离要求，通常是多孔或多孔薄层材料，如硅胶、聚合物等。
色谱的分离原理主要基于化合物在流动相和固定相之间的分配系数，即K值。
K值是化合物在两相之间的分配比例，分离效果好坏取决于K值的大小。
在色谱中，流动相不断通过固定相，使得不同化合物根据K值的大小在两相之间分配，从而实现分离。
色谱仪器主要包括样品处理系统、分离柱、检测器和数据处理系统。
样品处理系统用于将待分析样品注入色谱仪器中；分离柱是色谱分离的核心部分，不同类型的色谱有各自特定的分离柱，如对于GC来说，分离柱通常是毛细管柱或填充柱，而对于HPLC来说，通常是高效液相分离柱；检测器用于检测分离后的化合物，常见的检测器包括紫外/可见光谱检测器、质谱检测器等；数据处理系统则负责记录、处理和分析检测到的信号，以得出分析结果。
色谱技术在不同领域有着广泛的应用。
在化学领域，色谱被用于分离和分析各种化合物，如有机物、药物、农药等；在生物学领域，色谱被用于蛋白质、核酸等生物大分子的分离和分析；在环境保护领域，色谱被用于水质、大气等环境样品的检测和分析。
色谱技术不仅可以对混合物进行分离，还可以对分离得到的化合物进行鉴定和定量分析。
在色谱分析中，校准曲线是一种常用的定量分析方法。
色谱学堂知识点总结图
色谱学堂知识点总结图一、色谱分析的基本原理1. 色谱基本原理色谱是通过样品和固定相之间的相互作用来进行分离的一种方法。
在色谱中，样品首先与移动相（气相或液相）一起通过色谱柱，其中移动相被固定相吸附或分配，从而实现了分离。
通过控制固定相和移动相的性质，可以实现对不同成分的选择性分离。
2. 色谱柱选择色谱柱是色谱分析中的重要组成部分，不同的色谱柱具有不同的分离机制和适用范围。
常见的色谱柱类型包括气相色谱柱、液相色谱柱和超高效液相色谱柱。
选择合适的色谱柱对于获得良好的分离效果非常重要。
3. 色谱分离机理色谱分离是通过样品成分与固定相之间的相互作用来实现的。
常见的色谱分离机理包括吸附色谱、分配色谱和离子交换色谱。
不同的分离机理适用于不同类型的样品和分析需求。
二、色谱技术1. 气相色谱技术气相色谱是一种常用的色谱分析技术，它适用于易挥发性和热稳定的样品。
在气相色谱中，样品首先以气体状态注入色谱柱，然后通过气相载气移动，最终被固定相吸附或分配，从而实现分离。
2. 液相色谱技术液相色谱是一种应用广泛的色谱分析技术，它适用于非挥发性和热敏感的样品。
在液相色谱中，样品首先以溶液状态注入色谱柱，然后通过液相流动，最终被固定相吸附或分配，从而实现分离。
3. 超高效液相色谱技术超高效液相色谱是一种高效的色谱分析技术，它利用超高压将样品溶液通过色谱柱，从而实现快速、高分辨率的分离。
4. 色谱联用技术色谱联用是指将色谱分离技术与其他分析技术（如质谱、光谱等）结合起来，从而进行更为全面和准确的分析。
常见的色谱联用技术包括气相色谱-质谱联用、液相色谱-质谱联用、气相色谱-光谱联用等。
三、色谱分析方法1. 样品前处理样品前处理是色谱分析中的重要步骤，它包括样品的提取、浓缩、净化等过程，旨在提高分析的灵敏度和准确性。
2. 色谱条件优化色谱条件的优化对于获得良好的分离效果非常重要。
包括固定相的选择、移动相的配比和流速、色谱柱温度等因素的优化。
气相色谱仪基础知识培训
He
N2
H2
H2
H2
Air Air
2) 对TCD敏捷度最高，而 且可保护W丝
3) 注意安全问题
• 过滤系统: • 除氧. • 活性炭除碳氢化合物。 • 分子筛除水
气体进口及连接
• 两级旳气体压力调整器. • 低压端可从0到100 psig.
• 注意：不要用不洁净旳管路
载气的进口压力 燃烧气的进口压力
著名旳范德母特（Van Deemter）方程
• 综合上述三个峰展宽旳因数
• HEPT : 理论塔板高度 (Height Equivalent to a Theoretical Plate)： HETP = A + B / + C
这里：
A = 涡流扩散 B = 纵向扩散 = 载气旳线流量
低旳 HETP= 高旳色谱柱效率
43
0.5
11
530
ml/min cm/sec
2.8
21
3.4
26
0.9
7
❖ 气体
作用：
• 1）载气：作为色谱旳流动 相
• 2）检测器旳工作气体。
载气：
p 惰性：He, Ar, N2, H2. p 根据检测器, 价格及以便程度来决定 p 采用压力调整器以取得恒定旳仪器
输入压力 p 控制流量来得到恒定旳流速
• 热稳定性 • - 分析时所使用旳温度不应致使色谱柱材质受到破坏 • 化学稳定性 • - 在一定温度下，色谱柱材质不受分析物旳影响
p 注意：用色谱级、洁净旳材料。
填充柱
玻璃、特氟珑及不锈钢材质 (惰性).
填充柱尺寸
材质
内径
不锈钢
2 mm
玻璃
色谱学堂知识点总结
色谱学堂知识点总结一、色谱的分类色谱可以根据不同的分离原理和方法进行分类，常见的色谱包括气相色谱（GC）、液相色谱（LC）、超高效液相色谱（UPLC）、离子色谱（IC）、等等。
气相色谱是指在气相载体的条件下进行分离和分析的色谱方法。
气相色谱广泛应用于石油、化工、医药等领域，适用于分析低沸点、易挥发的样品。
液相色谱是指在液相载体的条件下进行分离和分析的色谱方法。
液相色谱适用于分析高沸点、不易挥发的样品，广泛应用于制药、食品安全、环境监测等领域。
超高效液相色谱是指利用超高压进行分离和分析的色谱方法。
相比传统液相色谱，超高效液相色谱具有分离效率高、分析速度快、分辨率高等优点，适用于分析复杂样品。
离子色谱是指利用离子交换树脂对带电离子进行分离和分析的色谱方法。
离子色谱广泛应用于环境监测、生物医药等领域，主要用于分析水样中的有机和无机阴离子、阳离子。
二、色谱的原理色谱的分离原理主要包括物理吸附、化学吸附、离子交换、分配、凝聚等。
其中，最常用的是分配作用。
色谱分离的关键在于样品成分在色谱柱填料与流动相之间的分配行为。
分配系数与流动相种类及柱温度有关。
在分配作用下，样品成分受到填料的相互作用而被不同程度地阻滞在填料中。
色谱的分离效果受到多种因素的影响，例如填料类型、填料粒径、流动相性能、柱温等。
填料类型不同，选择性也有所不同。
粒径较小的填料分离效率高，但压力较大。
流动相性能影响溶质在填料中的运动速度，与柱温共同影响分配系数。
在设备方面，色谱柱的温度调节对色谱结果的影响尤为重要。
三、色谱的应用色谱在医药、食品安全、环境监测等领域都有着广泛的应用。
在医药领域，色谱被用于药物的分离、纯化和分析。
例如，通过色谱技术可以对药物中的杂质进行检测和分离，确保药物的质量和安全性。
在食品安全领域，色谱可以用于检测食品中的添加剂、农药残留、重金属等有害物质。
色谱技术可以帮助监管部门及时发现问题食品，保障食品安全。
在环境监测领域，色谱可以用于检测环境中的有机污染物、重金属等有害物质。
液相色谱法基本知识
第一节 概 述
等，作为分析时选择余地大；而气相色谱并不可能的。 ③ 液相色谱通常在室温下操作，较低的温度，一般有利
于色谱分离条件的选择。 （3）由于液体的扩散性比气体的小105倍，因此，溶质在液
相中的传质速率慢，柱外效应就显得特别重要；而在 气相色谱中，柱外区域扩张可以忽略不计。 （4）液相色谱中制备样品简单，回收样品也比较容易，而 且回收是定量的，适合于大量制备。但液相色谱尚缺 乏通用的检测器，仪器比较复杂，价格昂贵。在实际 应用中，这两种色谱技术是互相补充的。
组分的差速迁移，从而实现分离。分配系数（K）或分配比
（k）小的组分，保留值小，先流出柱。然而与气相色谱法 不同的是，流动相的种类对分配系数有较大的影响。
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第四节 液—固色谱法
（4）应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时，溶 剂要不吸收紫外光。
（5）容易精制、纯化、毒性小，不易着火、价格尽量便宜 等。
在液-固色谱中，选择流动相的基本原则是 极性大的试 样用极性较强的流动相，极性小的则用低极性流动相。
为了获得合适的溶剂极性，常采用两种、三种或更多种 不同极性的溶剂混合起来使用，如果样品组分的分配比k值 范围很广则使用梯度洗脱。
3
第一节 概 述
的70 ~ 80%。 （2）液相色谱能完成难度较高的分离工作
因为： ①气相色谱的流动相载气是色谱惰性的，不参与分配平衡
过程，与样品分子无亲和作用，样品分子只与固定相相 互作用。而在液相色谱中流动相液体也与固定相争夺样 品分子，为提高选择性增加了一个因素。也可选用不同 比例的两种或两种以上的液体作流动相，增大分离的选 择性。 ②液相色谱固定相类型多，如离子交换色谱和排阻色谱。
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第二节 高效液相色谱仪
色谱知识点总结大全
色谱知识点总结大全色谱是一种用于分离混合物中成分的分析方法。
它是利用物质在固定相和流动相之间相互作用的差异，以及在两相之间传质速率不同的原理进行分离的。
色谱方法已经广泛应用于化学、制药、环境监测、食品安全等领域。
本文将对色谱的相关知识进行总结，包括基本原理、分类、仪器、应用等方面。
一、色谱的基本原理色谱的基本原理是物质在固定相和流动相之间的相互作用，以及在两相之间传质速率不同的原理进行分离。
其中，流动相是指在固定相上流动的液态或气态物质，固定相是指固定在色谱柱或色谱板上的固体或液体。
当混合物中的成分通过色谱柱或色谱板时，由于各成分与固定相和流动相之间的相互作用不同，会导致逐渐分离出来。
具体地说，色谱分离依赖于成分在固定相和流动相之间的分配系数不同。
当混合物通过色谱柱或色谱板时，流动相会与固定相和样品分子发生相互作用，使得在固定相和流动相之间的平衡达到不同的分布系数，从而导致不同成分在流动相中的速度不同，最终实现分离的目的。
二、色谱的分类色谱可以根据流动相的状态分为气相色谱和液相色谱两大类。
1. 气相色谱（Gas Chromatography，GC）气相色谱是利用气体作为流动相的色谱分离方法。
在气相色谱中，样品通过加热蒸发成气相，然后注入气相色谱柱，在高温下，样品成分在固定相上发生分离，再经过检测器进行检测。
气相色谱通常用于分离非极性或低极性物质，比如烃类、酯类、醚类等。
由于气相色谱操作简单、分离效果好，因此在化学、制药、环境监测和食品安全等领域应用广泛。
2. 液相色谱（Liquid Chromatography，LC）液相色谱是利用液体作为流动相的色谱分离方法。
在液相色谱中，样品通过溶解成液态，然后通过色谱柱，在柱内流动相的作用下，不同成分逐渐分离，并通过检测器进行检测。
液相色谱可根据固定相的性质分为几种类型，如反相液相色谱、离子交换色谱、大小分子排阻色谱、亲和色谱等。
液相色谱通常用于分离极性或高极性物质，如酸、碱、氨基酸等。
色谱基础知识
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色谱基础知识
茨维特实验：
1903年，茨维特做了一个植物色素分离实验：在一玻璃管 中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石 油醚倒入管中。 此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的 混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱 带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带， 继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴 定。色谱法也由此而得名。
注射器进样
色谱基础知识
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阀进样
采样状态
放空 样品气 载气
定量管
进样状态
放空 样品气 载气
定量管
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色谱基础知识
色谱柱
色谱柱
色谱基础知识
气相色谱仪的构成：
3）分离系统
分离系统的功能是把需要分析的组分从背景组分 中分离出来。
分离功能主要依赖于色谱柱来实现，但在某些特定 的应用中还需要一些必要的流路系统（如中心切割或反吹 等）。
典型应用：测量某些不需要单独分析的组分，如CH4、 及NMHC（非甲烷总烃）的分析。
第35页，共73页。
分离系统：中心切割
样品气放空 样品气
定量管
色谱柱1
载气1 载气2
样品气放空 样品气
定量管
放空
色谱柱1
载气1 载气2
放空
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色谱柱2
检测器
色谱柱2
检测器
分离系统：反吹
正向
放空 样品气 载气
在分离过程中，待分离物质中的不同组分在流动相和固定相之 间的分配会不同，这使其随流动相运动速度各不相同，随着流动相 的运动，混合物中的不同组分在固定相上相互分离。
化学中的色谱技术与应用知识点
化学中的色谱技术与应用知识点色谱技术是一种常见的化学分析技术，广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。
本文将介绍色谱技术的基本原理和常见的应用知识点。
一、色谱技术的基本原理色谱技术是一种将化学混合物分离为其组分的技术。
它基于物质在固定或流动相中的分配行为进行分离，并通过检测器对分离后的组分进行定性和定量分析。
色谱技术包括气相色谱（GC）、液相色谱（LC）和超高效液相色谱（UHPLC）等几种主要类型。
这些技术在分离原理、仪器设备以及应用范围上有所不同，但基本原理相似。
在色谱技术中，一个色谱柱是必不可少的组成部分。
色谱柱是一个长而细的管状结构，内部填充有固定相或液相。
物质在色谱柱中分离的过程主要是靠固定相或液相与样品之间的相互作用。
例如，在气相色谱中，气体样品通过加热分离柱，被固定在色谱柱内部表面的涂层上。
根据不同的物质对固定相的亲和性，样品中的组分会以不同的速率通过色谱柱，并在检测器中产生不同的峰。
二、常见的色谱应用知识点1. 气相色谱（GC）技术气相色谱技术在许多领域具有广泛应用。
例如，在环境监测中，GC可用于检测空气中的有毒气体，如甲醛、苯等。
在食品分析中，它可以检测食品中的残留农药、防腐剂等有害物质。
此外，GC技术还常用于药物分析。
通过GC分析，可以确定药物的纯度、含量以及质量控制等参数。
2. 液相色谱（LC）技术液相色谱技术是另一种常见的色谱技术。
它广泛应用于医药、化工、食品等领域。
在医药领域，LC技术可用于药物的纯度分析、成分鉴定以及药物代谢产物的检测等。
在化工领域，LC技术可用于检测有机合成产物的纯度和组分。
此外，LC技术在环境监测和食品安全领域也有重要应用。
例如，它可用于检测水中的有机污染物，如苯并芘、对硝基苯酚等。
在食品安全监测中，LC技术可用于检测食品中的添加剂、残留农药等有害物质。
3. 超高效液相色谱（UHPLC）技术UHPLC技术是液相色谱技术的一种改进形式，其主要特点是分离效率更高、分析速度更快。
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