生化实验室常用试剂配方
生化实验常用溶液配制
生化实验常用溶液的配制一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA 酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
生理生化实验常用试剂【自己整理】
生理生化实验常用试剂【自己整理】培养基LB液体培养基:胰化蛋白胨:1%,酵母抽提物:0.5%,NaCl:1%,pH 7.5LB固体培养基:在LB液体培养基中加入1.5%的琼脂粉YPD液体培养基:酵母抽提物:1%,蛋白胨:2%,葡萄糖:2%,pH自然YPD固体培养基:在YPD液体培养基中加入1.5%的琼脂粉完全极限省却成分培养基(CM):YNB:0.67%,葡萄糖:2%,其中含(mg/L):苏氨酸150 酪氨酸30 缬氨酸150赖氨酸30 谷氨酸100 丝氨酸150天冬氨酸100 甲硫氨酸20 苯丙氨酸50异亮氨酸30 精氨酸20其它营养成分(mg/L):腺嘌呤50 尿嘧啶50 组氨酸100亮氨酸100 色氨酸100省却特定的氨基酸成分,液体培养基pH 5.6,固体培养基加1.5%的琼脂粉,pH 6.510×YNB(13.4%酵母氮源,含硫酸铵不含氨基酸):溶解13.4gYNB于100mL水中,过滤除菌,加热至YNB完全溶解,存于4℃。
500×B(0.02%生物素):溶解20mg生物素于100mL 水中,过滤除菌,放于4℃。
100×AA(0.5%各种氨基酸):溶解各50mg L-谷氨酸,L-蛋氨酸,L-赖氨酸,L-亮氨酸,L-异亮氨酸于100mL 水中,过滤除菌,存于4℃。
10×D(20%葡萄糖):溶解200g D-葡萄糖于1 000mL水中,高压灭菌15min。
500×生物素(0.02%):溶解20mg生物素于100mL水中,过滤除菌,放于4℃,可放1年。
100×H(0.4%组氨酸):溶解400mg L-组氨酸于100mL水中,低于50 度加热以促溶解,过滤除菌,可放1年。
10×D(20%葡萄糖):溶解200g D-葡萄糖于1 000mL水中,高压灭菌15min或过滤除菌,可放1年。
10×M(5%甲醇):混合5mL甲醇与95mL水,过滤除菌存于4℃,可放2个月。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。
3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方1.常用抗生素配制以及使用说明(参考链霉菌室操作手册2019版)抗生素英文名称及缩写抗性基因贮藏液浓度(mg/ml) 10025(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 3525(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)50 50MM使用终浓度(μg/ml)链霉菌2CMYEME大肠杆菌LA或LB氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMPAmpicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprimcat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph-* 10 10 2 5 10 5 100 10-- 25 25 20 25 10 - 50------ 2.5 - 550-100 25 - 25 50 25 25 20 10-30注意事项:(1) –表示无记录或不能使用,贮存液除特别说明外均用无菌水配制,配制过程请确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装;(2)Km 和Am有交叉抗性,同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量,并设置阴性对照;(3)Hyg、Vio易见光分解,配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。
有些抗生素需要在低盐的环境(如DNA培养基)下筛选效率较高,如Hyg, Km, Vio(4)用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并分装;氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装,无需过滤除菌,但需确保配制贮存液所用溶剂(无水乙醇、DMSO)未遭受污染,建议配制氯霉素时使用新的无水乙醇,不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇,以防止污染;DMSO,即二甲亚砜,易挥发,有剧毒;(5)长期不用的抗生素请置于-20℃保存,抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存,经常使用时可以暂置于4℃保存;(6)抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整;(7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末,配制过程中建议穿工作服,戴一次性橡胶手套及口罩,及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具,以避免抗生素及溶剂对自身的损伤及对工作环境的污染。
生化实验常用溶液配制
生化实验常用溶液的配制一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA 酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法1.乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中,贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时,每1000mL培养基中参加lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g,蒸馏水l0mL,浓氨水40mL,10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中,然后加浓氨水,最后参加10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g,95% 乙醇760mL,蒸馏水100mL。
5. 吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL,浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g,蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后,微加温使其溶解后,用柠檬酸调节pH 6.1,分装于三角瓶中(30~50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min,备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A 液:(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g,MgCl2·6H2O1g,用双蒸馏水定容至450mL:(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合,加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液:Na2HPO4·12H2O 1.52g,KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL,然后加氯仿1mL,酚红应先置研钵内磨细,然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液:取上述贮存液的A和B液各25mL,加双蒸馏水定容至450mL,113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意:药品必须全部用A.R试剂,并按配方顺序参加,用适量双蒸馏水溶解,待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品,最后补足水到总量。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1.碘液的配制
取2g碘化钾,溶解在5mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2.斐林试剂
试剂A:将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中,加0.5mL硫酸,混合均匀。
试剂B:将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
(贮于带橡皮塞的瓶中)
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3.双缩脲试剂
试剂A:10%氢氧化钠试剂B:1%硫酸铜
4.苏丹Ⅲ试剂
0.1g苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中,因脂肪可溶于酒精中,因此染色脂肪不得超过10分钟。
5.二苯胺试剂:
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中,再加2.75mL浓硫酸(置冰箱中可保存根6个月,使用前在室温下摇匀)。
6.醋酸洋红染液
冰醋酸45mL+55mL蒸馏水+0.5g洋红
先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸10分钟,待冷却后,即可使用。
7.有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。
8.有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合配成染色液
9.卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定)
酒精:冰醋酸=3:1(体积比)。
常用试剂及标准溶液的配制
常用试剂的配制一、常用试剂的配制:1、100g/L钼酸铵溶液:称取100克钼酸铵于500毫升烧杯中加水溶液、移入1升,稀释至刻度,混匀。
(如溶液浑浊,应过滤)。
2、200g/L硫氰酸钾溶液:称取200克硫氰酸钾于500毫升烧杯中,溶解于水,移入1升容量瓶中,稀释至1升体积。
3、50g/L氯化钡溶液:称取50克二氯化钡于500毫升烧杯中,溶解于水,移入1升容量瓶中,稀释至1升体积。
4、100g/L酒石酸溶液:称取100克酒石酸溶于水中,移入1升容量瓶中,稀释至刻度。
5、150g/L氢氧化钾溶液:称取150克氢氧化钾溶于水中,移入1升容量瓶中,稀释至刻度。
6、20g/L二安替比林甲烷(DAM)溶液:称取出20克二安替比林甲烷于烧杯中加水约200毫升,再加1+1盐酸333毫升,搅拌溶解,继续加水稀至1升,混匀,此溶液酸度为2mol/L。
保存于棕色瓶中。
7、氨性缓冲液(PH=10):称取67.5克氯化铵溶于200毫升水中,加入570毫升浓氨水、稀释至1升。
8、醋酸——醋酸钠缓冲液(PH=5.2~5.9)。
O)溶解于水,称取无水乙酸钠79克(或称取150克结晶醋酸钠NaAC˙3H2加7.7毫升乙酸、稀至1升,用间隔为0.2的PH试纸检验其PH值。
9、硫酸——草酸——硫酸亚铁铵混合液:称取30克硫酸亚铁铵于1升烧杯中,加150毫升水,缓缓加入166毫升1+1的硫酸,搅拌使其溶解。
冷却后移入1升的容量瓶中,再称30克草酸于另一烧杯中,加热水溶解,冷却后移入上述容量瓶中,稀释至刻度、混匀。
10、邻菲啰啉—盐酸羟胺—醋酸—醋酸钠缓冲混合液。
称取100克无水醋酸钠(或150克结晶醋酸钠)和5克盐酸羟胺,分别溶于水,另称0.25克邻啡啰啉溶于15毫升醋酸中,将三溶液混合,用水稀释1升、混匀。
11、酒石酸钾钠—三乙醇胺混合液:称取200克酒石酸钾钠,溶解于水,加入100毫升三乙醇胺,稀释至1升。
12、硫酸铜—EDTA溶液:称取2.5克结晶硫酸铜和6.3克EDTA,加入10毫升1+1氢氧化铵,加水溶解后,稀释至1升。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。
配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
生化试验-实验室溶液试剂配制
附录附录1、水稻营养液以及LB培养基的配制1> 水稻营养液的配制编号培养液所加药品名称药品含量(g/L)溶液I NH4NO391.4CaCl2 (或CaCl2·2H2O) 88.6 (117.3) 溶液II NaH3PO4·2H2O 40.3K2SO471.4 溶液III MgSO4·7H2O 324溶液IV MnCl2·4H2O 1.5(NH4)6·Mo7O24·4H2O 0.0745H3BO30.934ZnSO4·7H2O 0.035CuSO4·5H2O 0.031FeCl3·6H2O 7.7柠檬酸(一水合物)11.9注:水稻营养液的工作液是每4L 培养液分别加溶液I、溶液II、溶液III、溶液IV 各5mL,调pH值为 4.5~5.0。
2> LB培养基的配制(1L):称取LB粉末(包括NaCl、酵母提取物、蛋白胨,比例为2:1:2) 25g,加水溶解定容至1L,如需要制备平板加琼脂粉15g/L,经过高温灭菌后,室温冷却,在超净工作台中加入选择抗生素、IPTG、X-gal等,倒入培养皿,制备LB培养基平板。
附录2、DNA提取方法中试剂配制CTAB (1L)制备:试剂和药品用量1mol/L Tris-HCl (pH=8.0) 100 mL5mol/L NaCl 280 mL0.5mol/L EDTA (pH=8.0) 40 mLCTAB 20 g 调pH=8.0 定容至1L,灭菌,室温保存;各试剂的配制如下:1> 1 mol/L Tris-HCl (pH=8.0) 100mL的配制:Tris 称取12.11g,加80mL水溶解,浓HCl (约4.2mL) 调pH=8.0 定容至100mL,灭菌,室温保存;2> 5 mol/L NaCl (pH=8.0) 100mL的配制:NaCl 称取29.22g,加80mL水溶解,定容至100mL,灭菌,4℃保存;3> 0.5mol/L EDTA (pH=8.0) 100mL的配制:Na2EDTA·2H2O 称取18.61g,NaOH (约2g) 调pH=8.0 定容至100mL,灭菌,室温保存;附录3、电泳相关缓冲液和试剂的配制1> 电泳缓冲液10×TBE 配制:药品名称用量Tris 108 gNa2EDTA-H2O 7.44 gBaSO355 g若要配制成0.5×TBE 缓冲液,可将1L的10×TBE 溶液稀释20倍即可。
生化试剂配制实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。
2. 熟悉实验操作规范,提高实验技能。
3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。
二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用,它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。
本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂,加深对实验原理和操作步骤的理解。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。
2. 试剂:氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。
四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮,置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液,备用。
7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚,置于烧杯中。
生化实验室常用试剂配方
PBS:我们去买复合片,直接配制。
试剂名称:4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠:40ml500ml 配方操作过程A 液最好在500ml 的三角烧瓶中加热配制(低温比较难溶),至多聚甲醛完全溶解后冷却待 用。
注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B 液和C 液配制好后, 将B 液倒入。
液中,混合后再加入A 液,将pH 调至7.2〜7.4,最后,补充蒸馏水至500ml 充分混合。
或者将多聚甲醛 20g 、Na 2HPO4・2H 2O 3.44g 、NaOH 1.93g 直接溶于500ml 蒸馏水,将pH调至7.2〜7.4即可。
5>Tris-硼酸(TBE )缓冲液(配制1L 溶液各成分的用量)Tris 碱54 g 硼酸27.5 g EDTA 2.92 g实际配 500ml ,那么 Tris 碱 27g ,硼酸 13.75g ,EDTA 1.46gWestern bloting 10%分离胶(两块胶,15ml ) 4%浓缩胶(两块胶 ,5 ml ) 超纯水6ml 超纯水 3.2ml 40%Acr/Bic5.25ml 40%Acr/Bic 0.55ml (37.5: 1)(37.5: 1) LT3.75 HT 1.25 10%AP80 m 10%AP 50 m TEMED 7.6 m TEMED 12.5 mRunning buffer (IX): Trisbase 3.03g;Glycine 18.8g;SDS1.0g 加水至1L所需药品及剂量:A 液:多聚甲醛20g溶于200ml 蒸馏水 B 液:N a HPO4-2H O 3.44g 溶于150ml 蒸馏水 C 液: NaOH1.93g 200ml 蒸馏水可以配成5X(5X电泳缓冲液配方:总量为1L; 15.1g Tris碱;72.0g甘氨酸;5.0gSDS)Transfer Buffer (IX):甘氨酸 2.9gTris (MW121.14) 5.8gSDS 0.37g甲醇200ml,加蒸馏水至1000ml溶解后4°C保存,溶液可重复使用2-3次。
常用的药品试剂和培养基的配制方法
常用的药品试剂和培养基的配制方法药品试剂和培养基在生物化学实验室和微生物实验室中是非常常见而且必需的。
本文将介绍一些常用的药品试剂和培养基的配制方法。
一、药品试剂配制方法1.蒸馏水(distilled water)的制备:将自来水倒入蒸馏水机,设定适当的温度,蒸馏水机将自来水蒸发并再冷凝成蒸馏水,收集蒸馏水即可。
2.缓冲液(Buffer solution)的制备:缓冲液是具有稳定pH值的溶液,常用于生物实验中。
其中一种常见的缓冲液是Tris缓冲液的制备方法:a. 准备50mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.6),称取6.051g Tris粉末,加入适量的蒸馏水,溶解并调节pH到7.6b.将溶液用蒸馏水加至总体积1L。
最后,用自来水稀释至适当浓度即可。
3.乙醇(Ethanol)的制备:乙醇是实验室中常见的抗菌剂,用于消毒和杀死细菌和病毒。
一般来说,70%乙醇是最常见的浓度,可以按以下方法配制:a.取足够的无水乙醇(100%)和蒸馏水。
b.以70/30的体积比例混合乙醇和蒸馏水,搅拌混合均匀。
c.最后,将乙醇溶液过滤并储存在干燥、暗处。
4.洗涤液(Washing buffer)的制备:洗涤液用于洗涤和清洁生物实验中的试剂和器皿。
以下是一种简单的洗涤液的制备方法:a. 称取0.05M Tris-HCl缓冲液(pH 7.4),加入适量的NaCl溶液,混合均匀。
b. 在溶液中加入适量的Tween-20(如0.1%)或Triton X-100(如0.5%),混合均匀。
c.用蒸馏水稀释至适当浓度,最后pH值调整到合适的范围内。
二、培养基配制方法1.琼脂培养基(Agar medium)的制备:以下是一种适用于大部分微生物培养的琼脂培养基的制备方法:a.称取适量的琼脂粉末,并加入适量的蒸馏水中,迅速搅拌均匀,但要避免气泡产生。
b.在生物安全柜下,将混合溶液加热至沸腾,同时不断搅拌,直到琼脂完全溶解。
c.将溶液冷却至接近50℃,然后将适量的细菌营养物(如氨基酸和碳源)加入到培养基中。
关于生物化学常用试剂配制
常规试剂配制和测定方法一、溶液的配制1. Mandels营养盐溶液(1000 mL)名称重量(g)硫酸铵((NH4)2SO4)14磷酸二氢钾(KH2PO4)20尿素(H2NCONH2) 3硫酸镁(MgSO4·7H2O) 3氯化钙(CaCl2·2H2O) 4 注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
2. Mandels微量元素溶液(1000 mL)名称重量(g)氯化钴(CoCl2·6H2O) 3.7硫酸锌(ZnSO4·7H2O) 1.4硫酸锰(MnSO4·H2O) 1.6硫酸亚铁(FeSO4·7H2O) 5.0 注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。
3. DNS试剂的配制(1000 mL)(1)取:3,5-二硝基水杨酸(C7H4N2O7)7.5 g氢氧化钠(NaOH )14.0 g充分溶解于1000 mL 水中(水预先煮沸10 min)(2)加入:酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)216.0 g苯酚(在50 ℃水浴中融化) 5.5 mL偏重亚硫酸钠(Na2S2O5) 6.0 g(3)充分溶解后盛于棕色瓶中,放置5天后便可使用,平时盛一小瓶(250 mL)使用,要放在冰箱中冷藏。
此溶液每月配制一次。
注意:倒入瓶中时要尽量装满!!4. 考马斯亮蓝G-250的配制(1000 mL)称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中,加入100 mL 85 %磷酸,用蒸馏水稀释至1000 mL ,滤纸过滤。
最终试剂中含0.01 %(w/v)考马斯亮蓝G-250,4.7 %(w/v)乙醇,8.5 %(w/v)磷酸。
5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制(1000 mL)名称分子量Mn 重量(g) 柠檬酸(C6H8O7·H2O)210 210NaOH 40 74.5准确称取柠檬酸210 g,溶于约750 mL煮沸(10 min)蒸馏水中,待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g,完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中,冷却后将容量瓶定容到1000 mL(原始pH4.45)。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方实验室中常用的生化试剂有很多种,下面是一些常见的生化试剂及其配方的介绍:1.磷酸缓冲液(PBS)PBS是一种常用的缓冲液,用于洗涤细胞和组织,以及稀释试剂等。
它的配方通常包括:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.44g-KH2PO4:0.24g将以上试剂溶解于1L去离子水中,调节pH至7.42. Tris缓冲液Tris缓冲液用于调节溶液的pH值,常用于分子生物学实验。
其配方为:- Tris-HCl:12.11 g将Tris-HCl溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
3.氢氧化钠(NaOH)溶液NaOH是一种常用的碱试剂,可用于调节pH、溶解蛋白质等。
其常见配方为:-NaOH:4g将NaOH溶解于1L去离子水中。
4.氯仿/异丙醇提取液氯仿/异丙醇提取液常用于分离DNA或RNA。
其配方为:-氯仿:24mL-异丙醇:25mL-TE缓冲液:1mL将以上试剂混合,并轻轻摇匀。
5.碳酸氢钠(NaHCO3)缓冲液NaHCO3是一种常用的缓冲液,可用于调节溶液的pH值。
其配方为:-NaHCO3:8.4g将NaHCO3溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
6.绿色荧光蛋白(GFP)提取液GFP提取液用于提取含有GFP标记的蛋白质。
其配方为:- Tris-HCl(pH 7.5):50 mM-NaCl:150mM-EDTA:1mM- Triton X-100:1%将以上试剂混合,并用PBS稀释至所需浓度。
7.锌离子(Zn2+)溶液锌离子溶液可用于一些酶活性实验。
其配方为:-ZnSO4·7H2O:2.19g将ZnSO4·7H2O溶解于1L去离子水中。
8.溶血液溶血液常用于红细胞计数等实验。
其配方为:-生理盐水:9mL-甲苯:1mL将以上试剂混合,即可得到溶血液。
这只是一小部分生化试剂配方的介绍,实验室中常用的试剂配方非常多,根据具体实验的需要,需要选择合适的试剂及其配方。
实验室化学试剂配置清单
实验室化学试剂配置清单
1. 引言
本文档旨在提供实验室化学试剂配置清单,以帮助实验室人员准确、安全地配置所需的化学试剂。
2. 配置清单
下面是常见化学试剂的配置清单,包括试剂名称、浓度、配制方法和注意事项:
2.1 氯化铁溶液
- 试剂名称:氯化铁(FeCl3)
- 浓度:10%(质量浓度)
- 配制方法:将20g的氯化铁溶解在200ml的去离子水中,搅拌至溶解完全。
- 注意事项:使用时需戴防护手套,避免接触皮肤和眼睛。
2.2 硫酸溶液
- 试剂名称:硫酸(H2SO4)
- 浓度:1M
- 配制方法:向800ml的去离子水中慢慢加入160ml的浓硫酸,搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:配制过程需小心操作,避免溅出。
2.3 碳酸氢钠溶液
- 试剂名称:碳酸氢钠(NaHCO3)
- 浓度:0.1M
- 配制方法:向800ml的去离子水中慢慢加入5.8g的碳酸氢钠,搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:可溶液产生二氧化碳气体,需在通风橱下操作。
2.4 硝酸银溶液
- 试剂名称:硝酸银(AgNO3)
- 浓度:0.01M(滴定用)
- 配制方法:将1.708g的硝酸银溶解在800ml的去离子水中,
搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:避免接触有机物及皮肤,避免光照。
3. 结论
本文档提供了实验室常见化学试剂的配置清单,方便实验室人员按照正确的方法配制所需的试剂。
在配置试剂时,请严格按照配制方法和注意事项操作,确保安全性和准确性。
生化常用试剂配制
生物化学实验常用试剂的配制方法使用Ctrl+F 组合键可以快速的查找所需的配方。
1、0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。
2.用去离子水溶解并稀释至2L。
2、0.5mol/L盐酸溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。
2.用去离子水稀释至2L。
3、含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠;配制量1L配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。
2.准确量取氢氧化钠20g。
3.用去离子水稀释至1L。
注意:此溶液供回收纤维素时使用。
4、0.2%葡萄糖标准溶液组份浓度0.2%;配制量1L配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中,在70℃干燥2小时。
2.干燥器中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。
5、250μg/mL牛血清白蛋白标准液组份浓度250μg/mL ;配制量2L配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin试剂甲配置方法1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g无水碳酸钠,溶解,待用。
2.称取0.5g 酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0.25g硫酸铜?5水,溶解。
3.将1:2:去离子水按20:4:1的比例混合即可。
4. 4℃保存,可用一周。
7、Folin试剂乙配置方法:1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g,钼酸钠?2水6.2526g,去离子水175mL,85%磷酸12.5mL,浓盐酸25mL,充分混合。
2.回流10小时,再加硫酸锂37.5g,去离子水12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后定容到250mL。
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PBS:我们去买复合片,直接配制。
试剂名称:4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠:40ml
500ml配方
所需药品及剂量:A液:多聚甲醛20g 溶于200ml蒸馏水
B液:Na2HPO4·2H2O 3.44g溶于150ml蒸馏水
C液:NaOH 1.93g 200ml蒸馏水
操作过程
A液最好在500ml的三角烧瓶中加热配制(低温比较难溶),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。
注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,将pH调至7.2~7.4,最后,补充蒸馏水至500ml 充分混合。
或者将多聚甲醛20g、Na2HPO4·2H2O 3.44g、NaOH 1.93g直接溶于500ml蒸馏水,将pH 调至7.2~7.4即可。
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液(配制1L溶液各成分的用量)
Tris碱 54 g
硼酸 27.5 g
EDTA 2.92 g
实际配500ml,那么Tris碱27g,硼酸 13.75g,EDTA 1.46g
Western bloting
10%分离胶(两块胶,15ml )4%浓缩胶(两块胶,5ml)
超纯水6ml 超纯水 3.2ml
40%Acr/Bic (37.5:1)5.25ml 40%Acr/Bic
(37.5:1)
0.55ml
LT 3.75 HT 1.25 10%AP 80 μl 10%AP 50 μl TEMED 7.6 μl TEMED 12.5 μl
Running buffer(1×): Trisbase 3.03g;
Glycine 18.8g;
SDS1.0g加水至1L
可以配成5×(5×电泳缓冲液配方:总量为1L;15.1g Tris 碱;72.0g 甘氨酸;5.0g SDS)
Transfer Buffer(1×): 甘氨酸2.9g
Tris(MW121.14) 5.8g
SDS 0.37g
甲醇 200ml,加蒸馏水至 1000ml 溶解后4℃保存,溶液可重复使用2-3次。
(可以配制成10×Transfer Buffer进行保存,稀释10倍使用,再加甲醇)
TBS缓冲液(1×): 1 mo l/L Tris·HCl(pH7.5) 10ml NaCl 8.8g 蒸馏水至 1000ml (可以配制成10×TBS缓冲液进行保存,稀释10倍使用)
TBS配方(10*):
Tris 12.1g, NaCl 88 g蒸馏水至 1000ml + 6ml 浓HCl
TBST配方:按照1:1000体积比例加入Tween 20。
封闭液(5%):脱脂奶粉 5g 溶于TBST 100ml
4×Lower Tris, 500ml:90.83g Tris base,20ml 10%SDS,adjust PH to 8.8(浓盐酸12ml)
4×upper Tris, 200ml:12.12g Tris base,8ml 10%SDS,adjust PH to 6.8(浓盐酸8ml)。