阴离子交换填料使用说明
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阴离子交换填料使用说明
凝胶型号QAE葡聚糖凝胶A-25DEAE葡聚糖凝胶A-25DEAE葡聚糖凝胶A-50基团-N+(CH2CH3)3Cl--N(CH2CH3)2-N(CH2CH3)2
载量 2.6-3.2mmol/g3-4mmol/g3-4mmol/g
相应产品QAE Sephadex-A25DEAE Sephadex A-25DEAE Sephadex A-50颗粒大小(μm)干粉40-120干粉40-120干粉40-120
应用离子交换层析介质,纯化
蛋白及巨大分子等
离子交换层析介质,纯化
蛋白及巨大分子等
离子交换层析介质,纯化
蛋白及巨大分子等
pH稳定性2-132-132-12
1使用方法
将干粉浸泡于60-70%乙醇中过夜(充分搅拌),去离子水洗净乙醇。
取适量凝胶湿态装柱,绝对不能出现凝胶断层,依次分别用五倍柱体积的0.15M氢氧化钠、水、0.15M盐酸、水、0.15M氢氧化钠、水上柱至中性。
然后用上样的平衡液平衡柱后即可上样。
2上样量
上样的多少取决于分离的要求及漏出的控制,当作饱和吸附时可以多上样,富集时为70-80%的柱体积,需要分离不同组分时应减少上样量,上样量控制在柱体积的25%以内。
柱高严格控制在25cm以内(A-50),因为这是软胶。
3洗脱方法:
上样后用平衡液淋洗三个柱体积,然后在平衡液中加入一定浓度的氯化钠(或其它无机盐)进行洗脱(改变平衡液PH值也是洗脱的方法)。
4在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。
方法是以0.15M氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
请避免使用磷酸,醋酸缓冲液.而可以采用Tris-HCl作为使用Buffer。
5保存
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用过的产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20%乙醇),通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20%乙醇)。
上样之前,样品必须去除色素,否则色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。
在使用过程中,不能使用强酸强碱,酸和碱的浓度应低于0.15摩尔。
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