细胞自噬在植物应答盐胁迫中的作用研究_朱峰
植物胁迫响应后的自噬机制分析
植物胁迫响应后的自噬机制分析植物响应胁迫的能力是它们在不同环境中生存的关键。
植物可以通过许多途径抵抗胁迫，其中一个重要的途径是自噬机制。
自噬是一种特殊的细胞内质量控制机制，在应对外界压力时发挥着重要作用。
本文将分析植物胁迫响应后的自噬机制，包括自噬机制的分子调节机制和其在抗胁迫过程中的生理作用。
自噬机制是一种细胞内膜转运过程，可以将细胞中的有害分子清除出去，同时保护细胞未受损害的部分。
植物中的自噬机制主要被两种不同的受体识别：ATG8蛋白和ATG18受体。
ATG8和ATG18的最大区别是它们有特定的结构域，ATG8受体有LC3结构域，而ATG18受体没有。
在一些植物中，ATG8受体参与的自噬过程被认为是microautophagy，而ATG18受体参与的则会被认为是macroautophagy。
自噬的分子调节机制取决于日常细胞代谢和外部环境的变化。
许多胁迫因素会导致自噬的激活，例如光缺乏、营养限制、盐胁迫和热胁迫等。
在自噬的诱导过程中，mTOR复合物被抑制，从而引起受体的活化。
mTOR（mammalian target of rapamycin）被认为是抑制自噬过程的关键分子，它可以通过靶向ATG1蛋白来抑制自噬。
这表明，mTOR在植物中也通过类似的方式调节自噬。
在植物中，多种抗胁迫机制与自噬机制密切相关。
当植物遭受不良环境时，如缺氧、盐度、干旱等，通常会出现细胞死亡和叶片失去活力等现象。
此时，自噬机制将代替与环境的相互作用，并通过清除有害物质和保护健康细胞来促进植物的生长和发展。
尤其是在逆境中，自噬机制的介入可以减轻植物因胁迫而导致的生长制约和病害发生，提高植物的适应性。
自噬在植物抗逆中的作用机制很复杂，主要表现在以下几个方面。
首先，自噬可以激活某些保护基因的表达，并调节不同逆境下植物抗胁迫的信号通路。
例如：ULK1（unc-51 like kinase1）-ATG13（autophagy-related gene 13）复合物的激活可以促进laccase、catalase等保护酶的表达。
盐胁迫对拟南芥Profilins和ADFs转录水平的影响
盐胁迫对拟南芥Profilins和ADFs转录水平的影响倪娇娇;马文佳;曹树青;樊婷婷【摘要】盐胁迫是影响植物生长发育的重要影响因子,是造成农业减产的重要因素之一.因此抗盐基因的功能研究具有重要的理论意义和应用价值.以往的研究表明,肌动蛋白细胞骨架在植物对盐胁迫的响应中起着重要作用,但肌动蛋白结合蛋白在盐胁迫中的作用尚不清楚.文章以拟南芥为试验材料,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术探讨profilins和ADFS基因在盐胁迫处理下的表达.结果表明,用150 mmol/L NaCl处理2周野生型拟南芥幼苗时profilins和ADFs基因的表达量明显升高,说明profilins和ADFs基因可能受到NaCl诱导.该实验结果为进一步研究该基因调控植物抗盐的机制提供了基础.【期刊名称】《合肥工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(041)010【总页数】4页(P1425-1428)【关键词】盐胁迫;ADFs基因;拟南芥;profilins基因;基因表达【作者】倪娇娇;马文佳;曹树青;樊婷婷【作者单位】合肥工业大学食品科学与工程学院,安徽合肥 230009;合肥工业大学食品科学与工程学院,安徽合肥 230009;合肥工业大学食品科学与工程学院,安徽合肥 230009;合肥工业大学食品科学与工程学院,安徽合肥 230009【正文语种】中文【中图分类】Q945.780 引言由于植物固着生长的特性，它们在自然界中会受到各种非生物胁迫的影响，如向重力性、盐胁迫、渗透胁迫和低温胁迫［1－2］等，这些胁迫因子都会造成对植物的伤害而影响植物的生长发育。
盐胁迫是植物非生物胁迫中最为严重的胁迫之一，在盐分胁迫下，植物的外部形态、内部的生理生化过程都发生一定程度的变化，有些变化是植物对逆境条件的消极反应，如破坏生物膜、产生活性氧等，使植物生理紊乱，对植物产生不可逆的迫害，有些变化则是植物对逆境的积极反应，有利于植物对不利环境条件的适应［3］。
植物对盐胁迫的反应
植物对盐胁迫的反应植物对盐胁迫的反应及其抗盐机理研究进展杨晓慧1，2，蒋卫杰1*，魏珉2，余宏军1（1.中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081；2.山东农业大学园艺科学与工程学院，山东泰安271018）REVIEW ON PLANT RESPONSE AND RESISTANCE MECHANISM TO SALT STRESSYANG Xiao-hui1，2,JIANG Wei-jie1*,WEI Min2,YU Hong-jun1（ 1.Institute of Vegetables and Flowers，Chinese Academy of Agricultural Science,Beijing100081，China；2.College of Horticulture Science and Engineering,Shandong Agriculture University，Taian 271018，China）Key words：Iron stress,Osmotic stress,Salt resistant mechanism,Plant摘要：本文从植物形态发育、质膜透性、光合和呼吸作用以及能量代谢等方面概述了盐胁迫下植物的生理生化反应，分析了盐害条件下离子胁迫和渗透胁迫作用机理以及植物的耐盐机制：植物小分子物质的积累、离子摄入和区域化、基因表达和大分子蛋白质的合成等，并简要综述了植物抗盐的分子生物学研究进展。
关键词：离子胁迫；渗透胁迫；耐盐机制；植物中图分类号：S601文献标识码：A文章编号：1000-2324（2006）02-0302-04收稿日期：2005-06-25基金项目：基金项目：国家863项目（2004AA247030，2004AA247010）；国家科技攻关项目（2004BA521B01）；农业部蔬菜遗传与生理重点开放实验室项目．作者简介：杨晓慧（1980-），女，硕士研究生，从事设施园艺与无土栽培．*通讯作者：Author for correspondence．E-mail：jiangwj@1植物对盐胁迫的反应1．1盐胁迫对植物形态发育的影响盐胁迫对植物个体形态发育的整体表现为抑制组织和器官的生长，加速发育过程，缩短营养生长和开花期。
基于转录组和代谢组探究植物应答干旱和植食性昆虫的研究进展
基于转录组和代谢组探究植物应答干旱和植食性昆虫的研究进展冯振;郑春燕;薄玉琨;李烨华;朱峰【期刊名称】《中国生态农业学报（中英文）》【年(卷),期】2024(32)3【摘要】胁迫是制约植物生长发育的重要环境因素,植物应对不同胁迫的反应是复杂多样的。
在面临生物胁迫和非生物胁迫时,植物主要通过重新分配调整一系列的转录调控网络以及代谢网络来维持平衡,以致在转录及代谢水平上都会发生变化。
随着组学技术的发展,转录组学和代谢组学作为新兴学科被广泛应用于植物抗逆相关研究中,进而从转录和代谢水平上揭示植物响应逆境胁迫的机制。
植物生长过程中面临的多种胁迫,其中干旱和虫害尤为严重,给我国农业生产造成巨大损失。
本文针对植物在干旱、植食性昆虫以及双重胁迫下的转录和代谢调控机制相关研究进行了综述,发现在干旱胁迫下植物通过调控合成脱落酸、脯氨酸以及光合作用中间体相关基因表达及其代谢物合成来抵御胁迫,在植食性昆虫胁迫下植物通过调控茉莉酸、水杨酸以及黄酮类等物质相关基因的表达及其代谢物合成进行响应,在双重胁迫下植物通过调控激素相互作用以及一些次生代谢物的产生来影响干旱胁迫下植物的抗虫性。
通过探讨植物在逆境胁迫下转录和代谢差异及其关键调控因子的变化,可以为培育耐受逆境胁迫的品种,提高农作物产量提供理论依据和参考。
【总页数】11页(P369-379)【作者】冯振;郑春燕;薄玉琨;李烨华;朱峰【作者单位】河北省土壤生态学重点实验室/中国科学院农业水资源重点实验室/中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心;中国科学院大学;江苏省农业科学院【正文语种】中文【中图分类】Q943;Q945【相关文献】1.基于代谢组学和转录组学分析工业面包酵母(Saccharomyces cerevisiae)ABY3冷冻胁迫应答机制2.植物在非生物胁迫下代谢组学与转录组学的研究进展3.基于转录组测序筛选新疆野苹果组培苗应答冻害谷胱甘肽代谢相关的基因4.转录组学和代谢组学在植物非生物胁迫中的研究进展5.基于代谢组学和转录组学探究草珊瑚叶和根中黄酮类成分差异积累的转录调控机制因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
拟南芥Athspr新基因的抗盐性及表达调控研究
拟南芥Athspr新基因的抗盐性及表达调控研究拟南芥（Arabidopsis thaliana）是一种常用的模式植物，在植物生物学研究中起着重要的作用。
盐胁迫对于植物生长和发育具有严重影响，因此研究植物对盐胁迫的抗性机制具有重要的生物学意义。
近年来，研究人员发现了一种名为Athspr的新基因，并对其进行了抗盐性及表达调控的研究。
研究表明，Athspr基因在拟南芥中具有重要的抗盐性功能。
通过转基因技术，研究人员发现过表达Athspr基因的拟南芥在盐胁迫下呈现出更好的生长状态，根系生长迅速，叶片颜色健康，与野生型相比有更高的存活率。
这表明Athspr基因可以显著提高拟南芥的抗盐性，对于植物的生长和发育起到重要的保护作用。
进一步的研究发现，Athspr基因的表达受到多种内外界因素的调控。
在盐胁迫下，Athspr基因的表达水平显著增加，表明Athspr基因在植物对盐胁迫的应答中发挥着重要的作用。
此外，研究人员还发现ABA（脱落酸）可以促进Athspr基因的表达，说明ABA可能参与了Athspr基因的调控过程。
为了进一步了解Athspr基因的功能机制，研究人员进行了Athspr基因的遗传分析。
他们发现通过敲除Athspr基因，拟南芥的抗盐性显著降低。
这表明Athspr基因对于拟南芥的抗盐性具有重要影响。
此外，研究人员还发现Athspr基因在拟南芥的分化和发育中也发挥了关键作用。
为了进一步探究Athspr基因的功能机制，研究人员进行了转录组测序分析。
他们发现Athspr基因参与了多个关键途径的调控，如离子逆转运、ROS清除和增强抗氧化能力等。
这些结果揭示了Athspr基因在植物抗盐胁迫机制中的重要角色。
总结起来，Athspr基因是拟南芥中一个新发现的抗盐性基因，它可以显著提高植物的抗盐性。
研究人员通过转录组测序分析和遗传分析揭示了Athspr基因的功能机制，发现其在离子逆转运和ROS的清除中发挥了关键作用。
细胞自噬在植物生长发育中的作用
细胞自噬在植物生长发育中的作用细胞自噬，在生物学领域中被认为是维持生命最为基本、最为重要的一种形式之一。
它是一种通过内源性机制，对损坏、老化甚至是不再需要的细胞器进行清理的过程。
而在植物的生长发育过程中，细胞自噬则发挥着重要的作用。
一、细胞自噬在植物生长发育中的作用自噬是通过一系列的化学物质参与，而最主要的是ATG基因，它们编码出相应的蛋白质，即自噬基因和调节因子，并构成出了相关的复合体，在自噬过程中扮演着重要的作用。
而在植物生长发育过程中，自噬，则通过以下方面发挥着作用：1. 营养平衡通过与淀粉类蓄积颗粒及碳水化合物解脱酶等分子的作用，以及损坏蛋白的降解，细胞自噬保证了植物内部营养物质的平衡和回收，最终从根本上保障植物的健康生长。
2. 抗逆应激在恶劣环境中，通过自噬降解延迟受损组织的死亡，从而提高抗逆能力，同时还能提供 ATP 等能量物质，帮助植物应对外界的不良因素。
3. 反应调控自噬过程中，通过钙离子和激酶等物质的作用，调节内部细胞环境，维持基因表达和细胞功能的正常开展。
4. 优胜劣汰在植物的种子发育、果实成熟等过程中，细胞自噬能够去除那些与种子发育无关或过多的物质，确保种子发育和营养的正常提供，同时也有助于优胜劣汰，从而转化为强壮的植株。
由此可见，细胞自噬发挥着至关重要的作用，对于植物的健康生长和发展具有不可替代的意义。
二、对细胞自噬的研究细胞自噬已经成为了植物生长发育领域中热门的研究课题，而目前，与植物的自噬发育相关的新的分子和信号通路不断发现，为了掌握这些信息和技术，科研人员也开展了一系列基础研究和应用探索。
现在组学、蛋白质解析和分子生物学等技术手段的发展，为自噬及其功能的深入探究提供了广阔的空间。
科研人员也在不断发掘新的自噬基因及其调节因子，产生了更准确的分析和预测手段，以实现对细胞自噬机制与植物生理生态的深入理解和揭示。
三、未来展望细胞自噬的开展逐渐成为了植物生长发育领域中研究的新热点，而在未来的实践探索中，将继续拓展和加强前沿科技的应用，如基因编辑、蛋白质组学和计算机模拟等新技术，以充分发挥细胞自噬在植物生长发育中的作用，最终保障植物生理生态系统健康稳定发展，达到人类和自然和谐共生的目标。
植物化学物诱导肿瘤细胞自噬性死亡及对核受体调节作用研究进展（精编）
与 IM 结合后, IM 开始延伸, 并募集 A tg8 /微管相 关蛋白 1轻 链 3 ( m icrotubule assoc iated pro te in 1 light cha in 3, M A P1 LC3)。该 IM 包被细胞 质中的线粒体等细胞 器, 最 终形成双 层膜结构, 即自噬体。然后 A tg5 复合物 便从膜 上脱离 下来, 只留下膜结 合形 式的 M AP1 LC3 定位 于自 噬体 膜上 [ 3] 。接 着自噬体与溶 酶体融合, 溶酶体酸化以 激活溶酶体 内的水解 酶, 使囊泡中所含的蛋白质等内含物在 封闭的场所 内被溶酶 体酶降解。
色氨酸 天冬氨酸序 列重复蛋白 (W D40) 是指一类含有 W D 40 结构域的蛋白, 提 供一 个 折叠 层平 台, 通过 调节多 蛋白复合体的 组装而影响蛋白质 蛋 白质相互 作用 [8] 。每个 W D40结 构域通 常以 色氨 酸 天冬 氨 酸结 尾, 都 含有 40个 氨
! 152!
中国药理学与毒理学杂志 Chin J P harm acol T ox icol
2008年 4月; 22( 2): 151- 155 2008 A pr; 22( 2): 151- 155
! 151!Leabharlann 植物化学物诱导肿瘤细胞自噬性死亡及 对核受体调节作用研究进展
徐玉英 1, 沈汉明2, 朱心强 1* ( 1. 浙江大学营养与食品安全研究所, 浙江 杭州 310058; 2. D epartm ent of COFM, Yong Loo
除酿酒酵母、秀丽 隐杆线虫和 果蝇外, 人 W IP I 1( hW IP I 1)和 人 W IP I 3 ( hW IP I 3) 也 含 有 LXXLL 模序, 分 别 定 位于 17q24. 3和 17q 25. 3, 而人第 17 号染色体的这一片段等位基因 在乳癌、卵巢癌和前列腺癌中失去调控。有研究 发现, 50% 皮 肤癌病患者的 hW IP I 1和 70% 子宫癌患者 的 hW IP I 3表达明 显增强, 60% 卵巢癌患者的 hW IPI 3表达增强。而 hW IPI 1属 于 W D 40, 其两个重要 的残基 R227和 R226 与磷脂 结合后连 接自噬空泡 [ 12]。糖皮 质激素、性激 素和维 生素 D3 等类固醇 激素 或者一些外源化学 物可以与核受体结合, 诱导核受体发 生变构, 募集 A tg等共活化 因子并与共活化因子 的 LXXLL 模 序结合。核受体 共活化因子 复合体 活化 下游早 期反 应基因 的转录表达。早期反应基因编码的蛋白可以调控晚期反应基 因的转录, 最终导致细胞自噬性死亡 (图 1)。
植物响应非生物胁迫的分子机制
植物响应非生物胁迫的分子机制植物在生长过程中，经常要面临很多非生物胁迫，如低温、高温、干旱、盐碱等，这些胁迫条件都会对植物的生长和发育产生很大的影响。
为了应对这些胁迫条件，植物会通过一些分子机制来响应非生物胁迫，从而保持正常的生长和发育。
1. 激素参与的非生物胁迫响应植物激素是调节植物生长和发育的一种重要分子，不仅在正常生长和发育过程中发挥作用，而且在植物面对非生物胁迫时也会发挥作用。
例如，在植物受到干旱胁迫时，脱落酸、乙烯和ABA等激素的含量会明显增加，从而促进植物的抗旱能力；在植物受到盐胁迫时，植物会产生盐胁迫响应激素（Salt Stress Response Hormones，SSRH）来促进盐离子的转运和分配，以增强对盐胁迫的抗性。
在植物面临非生物胁迫的过程中，细胞内可能会产生很多活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS），如超氧阴离子（O2-）、过氧化氢（H2O2）等。
ROS不仅是一种代表氧化损伤的有毒物质，而且还是植物信号转导中重要的信号分子。
研究表明，植物通过启动ROS信号通路来响应非生物胁迫，以增强植物的抗性。
如在植物受到干旱胁迫时，蛋白激酶OTA1会被激活并随后会触发ROS信号，从而抵御干旱胁迫。
钙是植物生长和发育中重要的离子，植物细胞内的钙离子含量是非常低的，但低量的钙离子可以引发许多植物响应机制。
当植物面临非生物胁迫时，细胞内的钙离子含量会显著增加，并启动钙信号通路。
钙信号通路参与非生物胁迫响应的机制还很不明确，但有研究发现，在植物受到盐胁迫时，细胞内的钙离子浓度会增加，并参与了植物对盐胁迫的响应。
总之，植物的响应非生物胁迫的分子机制是非常复杂的，其中包括激素参与的机制、ROS信号通路参与的机制和钙信号通路参与的机制等。
对于植物的生长和发育，非生物胁迫是不可避免的，但通过深入研究植物响应非生物胁迫的分子机制，可以为植物的生产和改良提供科学依据，进一步提高植物的抗逆性和适应性。
植物对盐胁迫的响应、调控和适应机理
植物对盐胁迫的响应、调控和适应机理胡灵芝;胡江琴;王利琳;张栩佳;陈哲皓【摘要】盐胁迫是世界范围内限制作物产量和农业生产的主要非生物胁迫.探索盐胁迫对植物的影响,研究并利用植物的耐盐机制,选育和开发耐盐作物品种,对于更合理有效地利用有限的耕地具有重要的研究和应用价值.从降低盐胁迫的损伤程度,建立内部渗透平衡和钠离子内稳态,调控自身生长状态这三个方面综述了最新的植物耐盐机制,旨在为进一步推动耐盐作物选育、加快盐土地开发提供参考.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2015(054)001【总页数】7页(P1-7)【关键词】植物;盐胁迫;响应;调控;适应【作者】胡灵芝;胡江琴;王利琳;张栩佳;陈哲皓【作者单位】杭州师范大学生命与环境科学学院,杭州310036;杭州师范大学生命与环境科学学院,杭州310036;杭州师范大学生命与环境科学学院,杭州310036;杭州师范大学生命与环境科学学院,杭州310036;杭州师范大学生命与环境科学学院,杭州310036【正文语种】中文【中图分类】Q948.113在阻碍植物正常生长发育的逆境条件中，盐胁迫是最严重的非生物胁迫之一。
根据联合国粮食及农业组织提供的数据，2005年全世界共有3.97亿hm2的土地受到盐胁迫影响，到2008年受影响的土地已经增加到了8亿hm2，而到2010年，这一数值已达到 9.5 hm2，接近全世界地表面积的 10%［1－3］。
在遭受盐胁迫的土地中，农业用地中的灌溉地受到的影响尤其巨大，统计数据表明全世界约有50%的灌溉地受其影响［3］。
盐胁迫对全球土地的影响越来越严重，包括处于干旱和半干旱状态的土地长期积累的大量盐分，沿海地区土壤中由于雨水和风等自然因素增加的盐分等［4］。
而除此之外，不合理的开荒和灌溉等人为因素也严重造成了农业用地中盐含量的增加［2］。
植物受到盐胁迫的严重影响，土壤中过多的盐分和因此产生的高离子浓度农业用水均会影响植物正常的代谢和生长发育，减少作物的经济产量［5］。
植物质膜H^+-ATPase响应盐胁迫的分子机制
植物质膜H^+-ATPase响应盐胁迫的分子机制
陈敏;王宝山
【期刊名称】《植物生理学通讯》
【年(卷),期】2006(42)5
【摘要】植物细胞质膜质子泵(PMH^+-ATPase)有看家酶之称,是由多基因编码的,其主要功能是向细胞营养物质的吸收和离子跨膜运输提供驱动力。
文章介绍PMH+-ATPase在植物抗盐中的作用及研究进展。
【总页数】7页(P805-811)
【关键词】质膜H^+-ATPase;盐胁迫;分子机制;抗盐性
【作者】陈敏;王宝山
【作者单位】山东师范大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q945.78
【相关文献】
1.盐胁迫下植物质膜和液泡膜H+-ATPase活性的研究进展 [J], 罗以筛
2.盐胁迫下褐环粘盖牛肝菌（sp9）质膜 ATPase 的活性 [J], 李春玲;陈有君;李国光;孙琳;黄蕾
3.植物盐胁迫响应及耐盐的分子机制 [J], 金光德;南桂仙
4.盐胁迫下植物质膜H+-ATPase研究进展 [J], 王莱;杨颖丽;李科文;刘军梅;保颖;王静艳
5.植物质膜水通道蛋白转运及逆境胁迫响应的分子调控机制 [J], 王星;张纪龙;冯秀秀;李洪杰;张根发
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植物病原体中自噬作用的研究进展
植物病原体中自噬作用的研究进展
王俊峰;崔柳青;徐苏丽;谭晓荣
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2012(28)33
【摘要】自噬是真核生物细胞中大分子物质降解的过程。
研究表明自噬在病原体侵染中起重要作用,自噬缺失导致病原体形态异常,包括分生孢子形成和发育,有性繁殖及附孢形成和膨压产生等,同时侵染力降低,且不同病原体与侵染有关的自噬类型不同。
本研究归纳了自噬在稻瘟病菌、炭疽病菌、禾谷镰孢菌等植物病原体中的作用,分析了自噬缺失与侵染缺陷之间的关系,推测其机制为自噬的缺失导致了营养循环失衡,从而影响病菌的生理功能,进而导致侵染异常。
病原体自噬的分子机制、线粒体自噬以及自噬在病原体与宿主互作中的作用可作为今后的研究重点。
【总页数】5页(P223-227)
【关键词】自噬;植物病原体;致病力;侵染;分生孢子
【作者】王俊峰;崔柳青;徐苏丽;谭晓荣
【作者单位】河南工业大学生物工程学院
【正文语种】中文
【中图分类】S432.1
【相关文献】
1.细胞自噬在病原体感染过程中的作用研究进展 [J], 章晟;于长明;殷瑛;陈薇
2.植物化学物诱导肿瘤细胞自噬性死亡及对核受体调节作用研究进展 [J], 徐玉英;
沈汉明;朱心强
3.胞内感染病原体与细胞自噬相互作用的研究进展 [J], 王琦;苏舒;王立新
4.细胞自噬与胞内病原体感染相互作用的研究进展 [J], 李静;李小康;何雷;贾艳艳;余祖华;郁川;陈松彪;颜云飞;张春杰
5.自噬/苄氯素1调节因子1在自噬与凋亡中作用的研究进展 [J], 尚画雨;付玉;马穰桂;夏志
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细胞自噬在植物应答盐胁迫中的作用研究
细胞自噬在植物应答盐胁迫中的作用研究朱峰;简伟;邓星光;林宏辉【摘要】本研究以模式植物拟南芥为材料,利用生理学和遗传学手段分析了盐胁迫下细胞自噬基因和活性氧(ROS)变化的相关性.结果表明野生型拟南芥Col-0在遭受盐胁迫处理3d表现了叶片漂白的症状并且会诱导ROS的产生和积累了大量的细胞死亡.荧光定量PCR实验表明盐胁迫会诱导细胞自噬相关基因的表达,细胞自噬参与了调控植物的防御机制来响应盐胁迫,进一步的实验表明拟南芥细胞自噬突变体atg2和atg 5在遭受盐胁迫处理3d表现了更加严重的叶片漂白症状并且积累大量的细胞死亡和ROS.初步表明细胞自噬主要是通过调控ROS的产生来应答盐胁迫.【期刊名称】《四川大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(053)006【总页数】6页(P1403-1408)【关键词】细胞自噬;活性氧;盐胁迫;拟南芥【作者】朱峰;简伟;邓星光;林宏辉【作者单位】四川大学生命科学学院,成都610064;扬州大学园艺与植物保护学院,扬州225009;四川大学生命科学学院,成都610064;四川大学生命科学学院,成都610064;四川大学生命科学学院,成都610064【正文语种】中文【中图分类】Q945植物在生长发育过程中经常会遭受到营养缺乏等环境胁迫，细胞内完善的蛋白降解机制对于维持细胞稳态和应答环境胁迫是必要的.植物体内主要有两条蛋白降解途径，一条是通过泛素/26S蛋白酶体途径对细胞内一些短周期的、或结构异常的蛋白进行特异性的降解[1]；另外一条主要是通过细胞自噬途径降解蛋白，它能够对细胞内长寿命的蛋白或者功能异常的细胞器进行大批量的降解，其降解蛋白的效率远远高于泛素/蛋白酶体途径.细胞自噬是指细胞分解细胞质等自身构成成分的现象.首先一些异常蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后送至液泡中进行降解[2].细胞自噬主要有3种形式，巨自噬(macroautophagy)，微自噬(microautophagy)，分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy)[3].细胞自噬在各种生命活动中发挥着重要作用，比如它可以加速细胞内的新陈代谢，或者在细胞处于饥饿状态时从分解产物中获得能量.在动物研究中，虽然大多数研究成果证明细胞自噬是细胞生存的负调控因子，但是人们已经开始认识到细胞自噬也是细胞的一种生存策略[4].在植物中，细胞自噬与植物度过营养危机和叶子的衰老有关[4].最近的研究发现，细胞自噬可以清除氧胁迫下细胞内被氧化的蛋白[5]. 研究表明植物细胞自噬在应答非生物胁迫起着非常关键的作用[6-9].例如一些非生物胁迫会诱导细胞自噬的发生，从而调控相应生理生化机制来抵抗相关胁迫[9].有研究表明活性氧(ROS)可能参与介导诱导细胞自噬应答非生物胁迫[5,8].但也有研究表明ROS可能没有参与介导诱导细胞自噬应答非生物胁迫[6].盐胁迫是限制粮食产量和物种分布的一个十分重要的因子.它可以影响植物一系列的生理过程，从种子萌发到植物发育[10-16].另外，盐胁迫主要影响植物的光合作用，以及光合反应途径上的代谢过程[14-16].在盐胁迫条件下，降低叶绿体基质容量、诱导产生ROS，都被认为是抑制光合作用的关键因素.因此本研究拟开展探讨细胞自噬调控ROS的积累来应答盐胁迫的机制.2.1 材料野生型拟南芥(Col-0)和细胞自噬突变体atg 2和atg 5种子购置拟南芥生物资源中心(Arabidopsis Biological Resource Center).2.2 方法2.2.1 生长条件种子播种在营养土中，浇灌适当的水分，然后放于温室中培养.其中温室中的培养条件为：温度25℃，光照时间16h，黑暗时间8h，光照强度100 μmol·m-2·s-1.待培养3～4w出现4～5片真叶后，选择长势大体一致的幼苗备用.2.2.2 盐胁迫处理对上述三种拟南芥Col、atg 2和atg 5进行盐胁迫处理.将拟南芥幼苗放入160 mM的NaCl溶液中，分别处理3d和5d.2.2.3 活性氧染色通过NBT和DAB染色分别对超氧离子和过氧化氢进行检测.具体可参考Zhu等人[17]的方法.2.2.4 电导率的测定电导率表示水的导电性即水的电阻的倒数，通常用它来表示水的纯净度.具体可参考Cao等人[18]的方法.2.2.5 RNA提取和荧光定量PCR检测选取拟南芥幼苗提取总RNA[19].荧光定量PCR扩增使用TaKaRa公司的SYBR Premix Ex Taq试剂盒，每个循环扩增的目的基因片段通过SYBR-green I荧光来检测，Ct值用于检测目标基因的起始拷贝数，目标基因的相对含量通过相对Ct值来表示，每组试验重复三次.Actin基因作为内参基因.荧光定量PCR反应引物序列见表1.3.1 盐胁迫对拟南芥表型及生理的影响植物在遭受到非生物胁迫如干旱胁迫、冷胁迫、盐胁迫等就会改变自身的生理生化反应，启动相应的防御机制来抵抗这些非生物胁迫.我们利用160 mM 的NaCl溶液处理Col-0幼苗3天，使用蒸馏水作为对照.结果显示NaCl溶液处理后，与对照相比Col-0表现出了胁迫的症状，叶片有明显的漂白现象(图1A).电导率检测结果显示用NaCl溶液处理的Col-0中电导率的含量是对照组的2.29倍(图1B).这些结果表明Col-0在遭受盐胁迫处理后积累了大量的死亡细胞.植物在遭受到非生物胁迫会诱导活性氧(ROS)来应答这些非生物胁迫.ROS是一种重要的信号分子，在调节植物应答非生物胁迫的防御反应起着非常重要的作用.为了分析这一过程是否有ROS的参与，分别利用NBT和DAB染色检测盐胁迫处理的Col-0叶片中ROS的变化.NBT染色显示NaCl溶液处理的Col-0中超氧离子的含量显著升高(图1C).同样DAB染色显示NaCl溶液处理的Col-0中过氧化氢的含量显著升高(图1D).以上结果显示Col-0在遭受盐胁迫处理后会诱导ROS的产生.3.2 盐胁迫诱导细胞自噬基因的表达已有的研究表明植物细胞自噬在应答非生物胁迫起着非常关键的作用[6,7].为了探究植物细胞自噬相关基因是否参与盐胁迫应答，我们利用荧光定量PCR的方法检测了ATG2，ATG5，ATG8，ATG18a基因的表达量，结果如图2所示盐胁迫处理后，Col-0中的细胞自噬相关基因的表达被诱导(图2).其中盐胁迫处理3d后ATG2，ATG5，ATG8，ATG18a基因的表达量分别是对照组的2.2、1.9、2.7、2.8倍，盐胁迫处理处理5天后ATG2，ATG5，ATG8，ATG18a基因的表达量分别是对照组的4.1、4.2、5.2、5.9倍(图2).这一结果说明盐胁迫能诱导细胞自噬基因的表达.3.3 盐胁迫对拟南芥细胞自噬突变体的表型及生理的影响为了进一步探讨细胞自噬是怎样调控植物的防御机制来响应盐胁迫.我们利用160 mM 的NaCl溶液处理拟南芥细胞自噬突变体atg 2和atg 5.结果表明这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后都表现出了胁迫症状，叶片有不同程度的漂白现象(图3A)atg 2和atg 5突变体在经过盐胁迫处理后表现出更加严重的胁迫症状，叶片的漂白现象更加严重(图3A).这就说明了细胞自噬突变体对于盐胁迫的抗性明显减弱，缺少细胞自噬相关基因就会使植物对盐胁迫变得更加敏感.然后我们检测了这三种拟南芥在遭受盐胁迫后电导率的变化.结果表明这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后电导率的含量都有所升高(图3B).atg 2和atg 5在经过盐胁迫处理后电导率的含量比Col-0中更高(图3B).说明了atg 2和atg 5在经过盐胁迫处理后积累了更多的细胞死亡，展示了更加严重的胁迫症状.3.4 细胞自噬突变体在遭受盐胁迫处理后活性氧的变化利用160 mM 的NaCl溶液处理Col-0、 atg 2和atg 5幼苗3d，检测这三种拟南芥的ROS的变化.NBT染色显示这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后超氧离子的含量都有所升高(图4).与Col-0相比， atg 2和atg 5在经过盐胁迫处理后超氧离子的含量显著升高(图4).同样DAB染色表明这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后过氧化氢的含量都有所升高(图4).atg 2和atg 5在经过盐胁迫处理后过氧化氢的含量比Col-0经过盐胁迫处理后更高(图4).综上所述，我们的结果表明了植物缺少细胞自噬在遭受盐胁迫处理后会积累大量的ROS，表现了严重的胁迫症状，抗性显著减弱.说明了细胞自噬可以调控植物的ROS的产生来应答盐胁迫.植物在遭受到非生物胁迫如干旱胁迫、冷胁迫、盐胁迫等就会改变自身的生理生化反应，启动相应的防御机制来抵抗这些非生物胁迫[20].我们的结果表明了拟南芥在遭受盐胁迫处理后表现了胁迫症状，叶片有漂白现象.这说明了拟南芥在遭受到盐胁迫处理后可能改变了自身的生理生化反应，启动相应的防御机制来抵抗盐胁迫.另外通过检测电导率的含量发现拟南芥在遭受盐胁迫处理后电导率的含量上升，说明了植物在遭受盐胁迫处理后质膜通透性发生了改变，植物积累了大量的死亡细胞.植物在遭受到非生物胁迫会诱导ROS来应答这些非生物胁迫.ROS是一种重要的信号分子，在调节植物应答非生物胁迫的防御反应起着非常重要的作用[21-22].盐胁迫会造成细胞氧化损伤，造成ROS和氧化蛋白的积累[23].我们的结果表明拟南芥在遭受盐胁迫处理后会诱导ROS的产生.研究表明植物细胞自噬在应答非生物胁迫起着非常关键的作用[24].例如一些非生物胁迫会诱导细胞自噬的发生，从而调控相应生理生化机制来抵抗相关胁迫.细胞自噬具有清除氧化蛋白、调控ROS水平的作用，细胞自噬很可能与高盐胁迫应答有关.之前有报道某些ATG基因，如拟南芥AtATG8和水稻OsATG10b基因参与到盐胁迫的反应当中[7,9].植物遭受氧化胁迫后，细胞自噬可以降解液泡中的被氧化的蛋白，将拟南芥细胞自噬相关基因AtATG18a沉默后，植物降解氧化蛋白的能力就减弱了[5,8].Bassham等人研究细胞自噬在氧化胁迫中的作用，发现高盐和渗透胁迫可以激活细胞自噬，AtATG18a的表达也会被诱导上升.细胞自噬缺陷的AtATG18a RNAi植株对这两种胁迫变得敏感[6].我们的结果表明了盐胁迫处理会诱导细胞自噬的发生，从而调控相应生理生化机制来抵抗盐胁迫，细胞自噬参与了调控植物的防御机制来响应盐胁迫.我们的结果进一步表明了细胞自噬在调控植物的防御机制来响应盐胁迫与调控ROS的产生有关.细胞自噬突变体在经过盐胁迫处理后表现更加严重的胁迫症状，叶片的漂白现象更加严重.这就说明了拟南芥细胞自噬突变体对于盐胁迫的抗性显著减弱.缺少细胞自噬植物的抗性就会减弱，进一步说明了细胞自噬在植物应答盐胁迫响应起着非常重要的作用.通过电导率测量的实验表明了细胞自噬突变体在经过盐胁迫处理后积累了更多的细胞死亡，展示了更加严重的胁迫症状.最后ROS检测实验表明了植物缺少细胞自噬在遭受盐胁迫处理后会积累大量的ROS，表现了严重的胁迫症状，缺乏抗性.研究表明AtATG18a RNAi植株中氧化蛋白和ROS都高于野生型植株，这就暗示了细胞自噬可以降解氧化蛋白，负责细胞内自身产生的ROS胁迫[8].还有研究也表明了细胞自噬可以调控细胞内ROS的产生，拟南芥细胞自噬突变体atg2、atg5中的ROS水平上升，证实了细胞自噬能够负调控体内ROS的产生[25].综上所述我们的结果表明细胞自噬可能通过负调控植物的ROS的产生来应答盐胁迫.【相关文献】[1] Smalle J, Vierstra R D. 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细胞自噬在植物生长和发育中的作用
细胞自噬在植物生长和发育中的作用在植物中，细胞自噬是一个重要的细胞生理过程，它在植物生长和发育过程中起着重要的作用。
细胞自噬是一种通过溶酶体降解细胞内一些有害的物质的过程，可以使细胞中的损伤组分、受损蛋白质和细胞膜等被降解，从而维持细胞内环境的稳定。
细胞自噬在植物中的具体作用可以从以下几个方面进行探讨。
一、调节植物生长和发育细胞自噬在调节植物生长和发育方面起着关键作用。
例如在种子萌发过程中，植物胚乳的细胞会出现自噬，从而释放出大量的营养物质供胚芽发育使用。
此外，在植物中，自噬可以通过调节植物根系发育，控制侧枝分化和植株生长来增加植物适应环境的能力。
因此，细胞自噬在调节植物生长方面有着重要的作用。
二、应对环境胁迫在面临各种环境胁迫的情况下，植物会通过调节自身的生理代谢，抵御环境压力。
在这个过程中，自噬是一种重要的细胞保护机制。
例如，在干旱等环境胁迫下，植物会对细胞内部进行自噬，从而利用已经存在的物质进行应急处理。
在病原菌侵染的情况下，植物也会利用细胞自噬降解一些受感染的细胞，从而减缓病原菌的传播。
三、调节光合作用在植物的光合作用中，叶绿素是一个重要的色素，可以吸收阳光中的能量，驱动光合作用的进行。
然而，当过多的光照射到植物叶片上时，会产生一些有害的化学物质，如过氧化氢，会对叶片造成伤害。
此时，细胞自噬就会调节叶片内过氧化氢及其他有害化合物的降解，从而维持叶片的正常生理功能。
总的来说，细胞自噬在植物生长和发育中具有多方面的作用。
从植物细胞结构出发，它可以降解已经老化或受损的细胞器，从而维持细胞的稳定性；从植物生长和发育出发，它可以通过调节生长和发育过程中的代谢活动，达到适应环境的目的；最后从应对环境胁迫角度出发，它可以帮助植物应对各种外部压力，提高植物的免疫力。
细胞自噬不仅是维持植物细胞稳态的一个重要手段，也是使植物可以在各种环境下顺利生长与发育的关键因素。
植物谷胱甘肽转移酶及其响应非生物胁迫的研究
植物谷胱甘肽转移酶及其响应非生物胁迫的研究植物谷胱甘肽转移酶及其响应非生物胁迫的研究植物作为静止生物体，在其生命周期内常常受到各种胁迫的影响，其中包括生物胁迫和非生物胁迫。
非生物胁迫主要来源于环境中的物理、化学和生理因素，如盐度、干旱、寒冷和热等。
不同的胁迫条件会导致植物的生长和发育遭受到破坏，严重情况下甚至导致植物的死亡。
为了适应和抵御这些非生物胁迫因素，植物在进化过程中逐渐形成了一系列的防御机制。
谷胱甘肽转移酶（glutathione transferase，GST）是一类广泛存在于植物体内的重要酶类。
它们参与植物内源性非生物物质（如有机酸和多酚类化合物）和外源性胁迫物质（如化学农药）的代谢和解毒过程。
GST通过转移胱氨酸残基上的谷胱甘肽（glutathione，GSH）到各种底物上，从而降解这些有害物质并使其排出体外。
研究发现，GST在植物的耐逆性和胁迫防御中发挥着重要的作用。
研究表明，植物谷胱甘肽转移酶家族可分为多个亚类，其中最主要的包括phi、tau、theta和zeta等亚类。
每个亚类GST在植物中的分布位置和功能略有不同。
例如，phi亚类GST主要分布在细胞质和细胞核中，参与一氧化氮（NO）和内源性植物激素茉莉酮（jasmonate，JA）的代谢；tau亚类GST 主要分布在胞间液和细胞质中，参与抗氧化和解毒反应；theta亚类GST主要分布在叶绿体和线粒体中，参与光合作用和呼吸作用的调控等等。
这些亚类GST在植物胁迫响应过程中发挥了不可或缺的作用，但不同植物物种和不同胁迫条件下GST的表达模式和酶活性存在明显的差异。
以温度胁迫为例，研究表明植物谷胱甘肽转移酶能够调节植物对高温的反应。
在高温条件下，植物会产生大量的活性氧（reactive oxygen species，ROS），从而导致氧化应激反应的发生。
过多的ROS会损害细胞的结构和功能，影响植物的正常生理代谢。
研究发现，tau亚类GST在高温胁迫下得到显著上调，并表现出高活性和高耐受性。
盐胁迫对植物的影响及植物耐盐机理研究进展
盐胁迫对植物的影响及植物耐盐机理研究进展孟繁昊;王聪;徐寿军【摘要】盐分是影响植物生长发育的一个重要环境因素，盐胁迫对植物的整个生命进程产生影响，盐分通过渗透胁迫、离子毒害，使植物细胞膜透性改变，造成氧化胁迫、代谢紊乱及蛋白质合成受阻等现象，植物的耐盐性主要体现在离子的选择性吸收和区域化作用、渗透调节、光合作用途径的改变以及活性氧清除机制。
%Salinity is one of the most important environmental factors affecting plant growth and development. Salt stress affects plant the whole life process. Salt makes the plant cell membrane permeability changes by osmotic stress, ion toxicity, cause oxidative stress, metabolism, protein synthesis of hindered and other phenomena. The mechanisms of salt resistance in plants were described from the ion selective absorption and regional effects, osmotic adjustment, changes of photosynthesis pathway and active oxygen scavenging mechanism.【期刊名称】《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】4页(P315-318)【关键词】盐胁迫;活性氧清除;耐盐性【作者】孟繁昊;王聪;徐寿军【作者单位】内蒙古民族大学农学院，内蒙古通辽 028043;内蒙古民族大学农学院，内蒙古通辽 028043;内蒙古民族大学农学院，内蒙古通辽 028043【正文语种】中文【中图分类】Q945土壤盐碱化是指土壤含盐量过高（超过0.3%）导致农作物低产或不能生长的现象，随着工业的高速发展，耕地面积急剧下降，不合理的灌溉、耕作又造成了土壤的次生盐渍化.当前，全球盐碱地面积已达 9.5 亿 hm2〔1〕，我国约有盐碱地 0.27 亿hm2，其中耕地0.06 亿hm2，盐碱荒地0.21 亿hm2，主要分布在东北、华北、西北内陆地区以及长江以北沿海地带，盐碱化程度普遍较高，严重的盐碱土壤地区植物几乎不能生存〔2〕.盐分过多给植物带来包括生理干旱、离子毒害、生理代谢紊乱等多种危害，给农业生产造成了重大损失，综合治理盐渍土已刻不容缓.人们通过物理改良、化学改良和生物改良等技术措施对盐碱地进行改良和利用〔3〕，其中生物改良是开发、利用盐碱地的最佳方法.引种具有一定经济价值的抗盐碱植物，增加地面覆盖以减少地表蒸发，既可改良土壤，扼制土地的盐渍化，又可实现盐荒地的利用.了解盐害对植物的影响，研究植物对盐分的适应性，提高植物的耐盐性，已成为未来农业发展及环境治理亟待解决的重要课题.1.1 盐胁迫对植物生长发育的影响植物在受到盐分胁迫时，最普遍的原初现象即是生长受到抑制〔4〕.叶梅荣等通过不同浓度的 NaCl处理 4 个小麦品种的种子，研究了盐胁迫对不同小麦品种生长的影响，结果显示，在一定浓度范围内，4个品种的发芽率均明显降低，但品种间的耐盐能力有所不同，低盐浓度胁迫下，根系比地上部分的盐害症状更为明显，高盐浓度下则相反〔5〕.申玉香等以苏啤 3 号等大麦品种为试验材料，测定了NaCl 胁迫下不同大麦品种的发芽势、盐害指数、发芽指数、产量及构成因素等指标，结果表明，低盐浓度胁迫对各大麦品种的影响不大，高盐浓度胁迫下，上述指标均显著下降〔6〕.樊秀彩等对国家葡萄资源圃的 30 份砧木进行耐盐性的研究，认为不同种质的耐盐能力不等，研究表明，山葡萄组培苗在盐胁迫下，多数品种（品系）随盐胁迫时间的延长，首先出现叶尖、叶缘干枯、失绿等现象，随后叶片中间出现红色或褐色斑点，有的叶片失水起皱、卷曲，严重者叶片整个枯焦或腐烂，叶柄变黄褐化，但不同种质间盐害指数不同，这一差别在一定程度上反映了植物抗盐性的不同〔7〕.1.2 盐胁迫对植物代谢的影响1.2.1 盐胁迫对植物光合作用的影响光合作用是植物在可见光的照射下，将二氧化碳转化为氧气并合成有机物的过程，是植物基础而重要的生理活动.盐胁迫条件下，植物组织缺水，为减少蒸腾作用而关闭气孔，从而导致叶绿体受损，与光合作用相关的酶类失活或变性，这直接影响了光合速率，其速率的下降造成了同化产物合成的减少〔8〕.目前导致净光合速率下降的原因众说纷纭，但主要包括两方面：第一，由于植物受到某种胁迫时，为保持细胞内的水分，减少蒸腾作用，部分气孔关闭导致气孔导度下降，从而引起 CO2供应不足；第二，由于叶肉细胞光合能力下降，从而引起胞间 CO2含量升高〔9,10〕.金雅琴等通过盆栽试验的结果发现，盐胁迫导致某一种源的净光合速率（Pn）呈先升后降的趋势，其余种源Pn则呈递减趋势，且减小程度与胁迫强度密切相关；在低盐胁迫下，与对照相比两个种源气孔导度（Gs）增大，其余种源Gs呈不同程度降低；在中高盐浓度胁迫下，各种源 Gs普遍低于对照；不同盐胁迫下各种源胞间二氧化碳浓度（Ci）变化趋势不同；三个种源的叶绿素含量随盐胁迫的增加而下降，另外三个种源呈无规律变化；相关分析表明，在盐胁迫条件下，Pn与Gs和Ci呈正相关，与叶绿素含量相关性不明显〔11〕.陈松河等通过盆栽试验探究NaCl胁迫对花叶唐竹、小琴丝竹和刺黑竹3种竹子叶片光合作用的影响，结果表明，低盐胁迫（0.1%NaCl处理）下，小琴丝竹和刺黑竹叶片的净光合速率、气孔导度和蒸腾速率有所提高，而对花叶唐竹并无太大影响；但随着 NaCl胁迫的加剧，3 种竹子叶片的 Pn、Gs和蒸腾速率（Tr）均开始下降，而 Ci则变化规律不明显〔12〕.1.2.2 盐胁迫对植物呼吸作用的影响盐胁迫下，植物呼吸过程的总趋势为呼吸消耗增加，净光合生产率降低，最终导致植物的盐害〔13〕.盐胁迫主要从两个方面影响植物呼吸作用：植物生命活动所需的能量大部分由呼吸作用提供，细胞受到盐害时，抵抗盐胁迫就需要消耗大量由呼吸作用产生的能量；植物在积累盐离子的过程中，会合成一些有机渗透调节物质，而呼吸过程的中间产物是合成很多有机物质的原料.在盐胁迫下，植物呼吸强度因能量的需求量加大而增强，随着盐胁迫的强度和时间的增加，逐渐减弱.植物的呼吸作用和光合作用是对立统一的，盐害对植物的呼吸代谢和光合代谢均有不同程度的影响，造成一系列不良的连锁反应〔14〕.植物受到盐害时，呼吸作用的变化是植物对盐害适应能力的评价指标之一.1.2.3 盐胁迫对植物蛋白质代谢的影响植物体内的可溶性蛋白质包含一些代谢酶，是植物体内重要的渗透调节物质，因此可溶性蛋白质含量与植株体内的代谢强度有关〔15〕.植物受到逆境胁迫时，叶片中的相对含水量会有所减少，提高可溶性蛋白含量有利于维持细胞的渗透调节能力，减少水分蒸发，从而缓解逆境对植物的伤害〔16〕.杨颖丽等通过研究盐胁迫对不同品种的小麦叶片蛋白质质量分数及结构的影响，发现盐胁迫下，耐盐性好的小麦品种的可溶性蛋白质有所增加，说明耐盐性好的小麦能够通过调节自身代谢，从而适应一定程度的盐分胁迫〔17〕.2.1 渗透胁迫盐胁迫条件下，土壤水势降低，植物根部细胞不能利用水势差吸取水分，甚至当盐分浓度过高时，还会使植物体内水分外渗，造成植物的生理干旱，形成渗透胁迫.土壤盐分过高还会导致植物细胞渗透势增加，气孔导度下降，叶绿体受损，最终影响光合速率和蒸腾速率，使植物生长发育受到抑制，甚至死亡〔18〕.2.2 离子毒害离子毒害过程中，有毒离子会导致细胞膜透性增加，电解质外渗，从而引起细胞代谢紊乱和失调，Na+含量的增加严重阻碍了植物体内必须离子 K+的运输和吸收，同时导致 HPO缺乏.钾是维持细胞膜静息电位的物质基础，参与多种新陈代谢过程，能够调节植物细胞的渗透压及酸碱平衡，同时参与同化物的运输、气孔的开闭等生理过程，K+亏缺将严重影响到植株的正常生长发育，植物对离子的吸收失衡，使植株营养失调，生长受抑制，甚至死亡.2.3 细胞膜透性改变外界盐浓度的增加使细胞膜的结构受到破坏，膜的功能改变，细胞内电解质外渗率加大.吕庆等通过研究发现，外界的干旱、洪涝、盐害等逆境因素会导致细胞的膜质通透性增大，从而引起膜脂过氧化，破坏细胞膜的结构，最终影响细胞的正常生理机能〔19〕.细胞膜在植物的代谢过程中起着重要的生理作用，它既能使细胞维持相对稳定的胞内环境，又可以接受和传递信息，从而调节和选择物质进出细胞.作为植物在受到胁迫时的原初反应部位，在植物受到盐害时，体内蛋白受到盐分影响，细胞膜质通透性增加，膜质过氧化速度加快，从而损伤了膜的正常生理功能，影响了植物的生理代谢.植物正常生长时，其细胞内活性氧的产生和消除处于稳定的动态平衡状态，当植物受到干旱、洪涝、盐碱胁迫等逆境条件时，植物细胞内原本稳定的代谢平衡被打破，产生了超氧阴离子（O）、H2O2和HO-，它们启动和加速了膜脂过氧化，从而引起生理失调、代谢紊乱.王聪等对耐盐性不同的两个菜用大豆品种进行100mmol·L-1的盐处理，研究其抗氧化系统和渗透调节物质的变化，结果表明耐盐品种具有较强的 O和H2O2清除能力，能够有效减少活性氧（ROS）过量积累〔20〕.丙二醛（MDA）是植物受到胁迫时产生膜脂过氧化的主要产物，其含量的高低在一定程度上可以反映细胞膜脂过氧化的程度，进而间接的反映膜的受损伤程度，膜透性能够直接反映膜受伤害的程度，而 MDA 能够间接表示膜受损伤状况.李倩等通过研究不同盐浓度处理对燕麦生理特性的影响，发现盐处理后，随着胁迫时间及胁迫浓度的增加，MDA逐渐积累，这表明时间及盐浓度的加大导致膜系统受害程度随之增加〔21〕.2.4 氧化胁迫和代谢紊乱土壤盐分过高会引起植物产生初级的渗透胁迫和离子胁迫，使植物体内积累大量的活性氧分子和 H2O2，这些活性氧自由基直接或间接的启动膜脂过氧化进程，产生氧化胁迫，破坏膜质完整性，细胞内电解质外渗，从而影响植物的光合作用、呼吸作用和蒸腾作用，导致一系列的生理代谢紊乱.很多试验结果均能够证明，盐浓度越高，作用时间越长，对植物体内各种代谢的抑制程度就越大〔22〕.2.5 蛋白质合成受阻盐胁迫条件下，植物体内累积了大量的活性氧，造成膜质过氧化，产生氧化胁迫，导致植物体内各种代谢紊乱，代谢酶失活或变性，最终引起植物体内蛋白质的大量降解〔23〕.耐盐性（salt tolerance）是植物在盐分胁迫下，通过生理代谢来适应或抵抗进入细胞的盐分危害.植物通过吸收外界离子，提高内部的离子浓度，使细胞内部水势低于外界，维持高的膨胀压.但细胞质中高浓度的离子会导致各种障碍，例如前文提到过的离子毒害等.3.1 渗透调节盐分胁迫条件下，植物根部细胞不能利用水势差吸取水分从而形成的胁迫，即是渗透胁迫.在盐胁迫下，植物具有自主调节渗透势的能力，这是其耐盐性的最基本特征.主要的渗透调节有两种：一是将大量有害离子累积于液泡内的离子调节；二是在细胞中合成一定数量的氨基酸、脯氨酸、蔗糖等可溶性有机物的有机调节〔24〕.3.2 离子的选择性吸收和离子的区域化作用在高盐环境中，高等植物主要是通过调节细胞内外无机离子的种类和数量，维持一个相对稳定的内环境〔25〕.由于K+能够调节植物体内的渗透压和酸碱平衡，而 Na+会影响体内必须离子的运输，并且维持植物体内较高 K+/Na+值，能够缓解细胞受到盐害时 K+亏缺而引发的生长抑制现象〔25〕，因此大多数植物吸收 K+而排斥 Na+.离子的区域化作用是指在盐分胁迫下，植物自身将大部分离子蓄于细胞液泡中来避免离子大量累积对细胞造成损伤，并且，为了调节液泡的渗透压平衡，开始合成蔗糖等有机物，贮藏在液泡中的现象.3.3 改变光合作用途径盐胁迫条件下，植物体内多项代谢会发生紊乱和失调，水势下降抑制了植物体内的光合、呼吸、蒸腾等作用.植物耐盐的光合途径主要包括两个方面：一是改变碳同化途径，由C3途径变为CAM途径，减少失水，增加水分利用率；二是改变代谢途径，由C3途径改变为C4途径，增强光合作用.3.4 活性氧清除机制盐胁迫等逆境环境会诱导产生活性氧，它们引起膜质过氧化，最终造成膜质损伤.植物在受到盐分胁迫时，自身将产生一系列的抗氧化保护物质，它们组成复杂的活性氧清除系统，活性氧清除系统主要分为酶促防御系统和非酶促防御系统〔26,27〕.超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）均属于酶促防御系统中的保护酶，这些保护酶活性的增强能够有效地提高植物的耐盐能力〔28〕.SOD 是生物体内超氧阴离子自由基的清除剂，能够对各种逆境的生理生化反应做出响应，是酶促防御系统中的重要组成部分.杨艳兵等在多个时间段内利用不同浓度NaCl处理中熟棉品种 N181，研究 NaCl胁迫下棉花幼苗保护酶活性的变化，试验结果表明，处理一定天数后，在高浓度NaCl（0.3%）胁迫下，棉苗体内SOD、POD大量积累，可以看出，棉花幼苗受到一定程度的胁迫时，会诱导保护酶活性升高，进而增强了棉花幼苗对盐胁迫的抵抗能力〔29〕.张勇等研究了盐碱胁迫下红芪的生理特性变化，结果表明，盐碱胁迫下红芪的SOD、POD活性均呈先上升后下降的变化，而从保护酶的活性变化可以看出，在低盐浓度胁迫下，红芪可通过提高保护酶活性来加强自身的耐盐性，但这种能力是很有限的，当盐浓度超出一定范围时，保护酶活性便开始降低.这说明，虽然植物在受到胁迫时能够通过提高其自身保护酶活性来清除有害离子，但也仅是在一定胁迫范围内，超出范围便会导致保护酶活性下降，保护作用大大降低〔30〕.非酶促防御系统主要由抗坏血酸（AsA）、谷胱甘肽（GSH）等小分子抗氧化物组成，大多数植物叶绿体中的 H2O2主要依赖于 AsA-GSH 循环系统来清除.AsA 和GSH是非酶促防御系统中的重要成员，在清除活性氧方面起着重要作用〔31〕.何文亮等用100mmol·L-1的 NaCl处理拟南芥抗坏血酸突变体（vtc-1）和野生型（wt）两个品种，研究盐分胁迫下2个品种的膜质过氧化变化以及抗坏血酸对植物保护的机理，结果显示，两个品种 MDA、H2O2含量均有显著上升，但 vtc-1 的增幅显著大于wt，wt的 SOD、CAT、APX 活性均有所升高，而vtc-1 的 SOD、CAT 活性降低，APX 在24h 后也开始降低，wt的 AsA 含量和GSH/ GSSG比值上升，vtc-1则有所下降，表明植物叶片过氧化作用的减弱有可能是因为抗坏血酸的增加对细胞的抗氧化酶起到了调节作用，从而增强了植物的抗逆能力〔32〕.刘正鲁等测定了100mmol·L-1的 NaCl胁迫下茄子的嫁接苗和自根苗的MDA、H2O2含量以及 APX、GR 活性、AsA、DHA、GSH、GSSG 含量等 AsA-GSH循环的相关指标，结果显示，NaCl胁迫下，嫁接苗和自根苗叶片的 MDA 和H2O2含量均显著增加，但嫁接苗叶片的含量显著低于自根苗，嫁接苗叶片中的APX、GR 活性在NaCl胁迫下有所升高，而自根苗呈下降趋势，胁迫前期，嫁接苗的 AsA、GSH含量以及GSH/GSSG、AsA/DHA 比值上升，GSSG含量下降，自根苗的表现则相反，说明了NaCl胁迫下，嫁接苗较自根苗更耐盐的原因之一是：嫁接苗叶片维持了高效的AsA-GSH 循环，从而有效的抑制了膜质过氧化进程，减轻了盐分对叶片损伤程度〔33〕.〔1〕Malcolm E,SumnerRN.Sodic soils-distribution,properties.Managementand environmentalconsequences 〔M〕.New York:Oxford University Press,1998.〔2〕徐恒刚主编.中国盐生植被及盐渍化生态治理〔M〕.北京:中国农业科学技术出版社,2004.〔3〕朱伟,刘晓静.中国盐碱地改良专利技术发展概述〔J〕.中国知识产权报,2013,007.〔4〕Chanan Helen.Synthesisofplantgrowth regulatorsby roots〔J〕.Plant 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线粒体自噬在植物中的研究进展
early stage. And the mechanism of mitophagy in plants and the proteins involved in autophagy are still unclear. This paper reviews the
构中，这些自噬样结构会与裂解泡融合，介导线粒体
收稿日期：2020-05-15
作者简介：姜雅婷（1995-），女，山西朔州人，在读硕士研究生，研究方向为结构生物学，
（电话）15222517911（电子信箱）3013226004@。
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中的线粒体自噬调控机制以及相关的受体、蛋白酶和生物学功能，为后期对于植物线粒体自噬的研究提
供借鉴。
关键词：线粒体自噬；植物；调控机制；功能
中图分类号：Q94
文献标识码：A
文章编号：0439-8114（2021）08-0012-05
DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2021.08.002
research progress of mitophagy and the regulatory mechanism of mitophagy in plants，as well as related receptors，proteases and biolog⁃
ical functions，so as to provide reference for the research on mitophagy in plants in the future.
细胞自噬在植物发育中的作用探究
细胞自噬在植物发育中的作用探究随着生物技术的不断发展，细胞自噬作为一种重要的细胞代谢调控机制，越来越引起植物科研界的关注。
植物细胞自噬是指细胞内不再需要的蛋白质、细胞器、细胞质等通过 "自噬体" 进行降解、再利用的过程。
在细胞自噬过程中，被吞噬的废旧物质将被包裹成内嵌体膜的小囊泡，随后被运输至赖氨酸体（lysosome）等内质网体内，被降解的物质将再次转化成新的生物大分子。
植物细胞自噬是维持生命和发育的关键过程之一，它能对环境变化进行快速、高效的响应，还能调控多种植物发育进程。
如细胞分裂、分化等。
本文将针对细胞自噬在植物发育中的作用进行探究。
一、促进营养平衡光合作用和呼吸是植物生命活动的核心过程，同时也伴随着生物有机物质的合成和分解。
植物细胞自噬是通过细胞内部的营养平衡来调控这些过程的。
在资源充足时，植物通过调控自噬过程来清除多余的细胞器和蛋白质，以维持稳定的生物物质含量。
而在资源匮乏或压力胁迫时，植物会增强细胞自噬活性，以及时合理地利用内源性营养物，保障植物生长和发育的可持续性。
二、对植物体内信号通路的调控细胞自噬对植物发育的调控不仅仅是对营养平衡的调控，它还可以间接地对植物体内信号通路产生影响。
植物细胞自噬可以通过转录因子的转录水平或功能调控，影响其他植物发育信号通路的激活状态，进而影响其他代谢病理学调控过程。
同时，植物细胞自噬还会与植物激素等代谢物质的信号途径相互作用，影响植物发育过程的各个环节。
三、参与植物花开花落的调控植物开花和凋落这一过程涉及众多的信号传递和调控，植物细胞自噬也是其中一个重要的影响因素。
一些研究发现，细胞自噬通过清除老化或受损细胞器、降解有害物质等，参与了花开花落过程的调控。
例如，植物叶片早期的衰老过程被证明与自噬过程的开启有关。
与此同时，自噬在花瓣凋落过程中的作用也被证实。
它能够调节花朵中的有害代谢物的含量并且降解老化的细胞器，进而确保花开花落的正常进行。
植物生长中的自噬与能量平衡研究
植物生长中的自噬与能量平衡研究自噬是细胞内源性降解和循环利用蛋白质、细胞器以及其他细胞成分的重要细胞过程。
植物中的自噬被广泛研究，并且已经发现自噬对维持植物生长和适应环境胁迫非常重要。
同时，能量平衡是维持植物正常生长和开展生活活动所必需的过程。
本文将探讨植物生长中的自噬与能量平衡之间的关系以及自噬在调节能量平衡中的作用。
首先，自噬是植物细胞中的一种重要的代谢途径，能够通过降解和再利用细胞内的有机物质来维持细胞的能量供应。
自噬过程发生在细胞的溶液泡（vacuole）中，其中涉及到许多关键因子的参与，例如自噬相关基因（Atg）和自噬小体的形成和分解等。
通过自噬，植物细胞可以主动降解和再利用老化和受损的蛋白质、细胞器以及其他细胞成分，提供供应代谢和生长发育所需的能量和有机物质。
其次，自噬对植物在逆境胁迫下的适应起着重要作用。
例如，当植物遭受干旱、高温或者盐胁迫等逆境时，自噬会被激活。
自噬通过降解和再利用细胞内的有机物质，能够为植物提供能量和营养物质，从而增强植物对逆境胁迫的耐受力。
此外，自噬还可以通过清除受损的蛋白质和细胞器，减轻逆境胁迫对细胞的损伤，保护植物细胞的稳态和功能。
然而，自噬与能量平衡之间的关系非常复杂。
植物的能量平衡是通过吸收光能和化学能的合成过程来维持的，其中包括光合作用和呼吸作用。
光合作用通过光能转化为化学能，合成有机物质，而呼吸作用则将有机物质分解为能量。
自噬作为细胞代谢的一个组成部分，会消耗能量和有机物质，同时又会通过提供能量和有机物质来补充细胞的代谢需求。
因此，自噬与能量平衡之间存在着相互影响和调控。
自噬对能量平衡的调节主要通过两个方面实现。
首先，自噬可以通过调控细胞代谢途径的平衡来影响能量供应。
例如，在光能不足的情况下，自噬可以通过降解和再利用细胞的有机物质，提供用于维持基本代谢需求的能量补充。
其次，自噬还可以通过调节蛋白质和能量的合成与降解平衡来影响能量分配。
例如，在光合作用受抑制的情况下，自噬可以降解过剩的蛋白质，以保证能量和有机物质的合理利用和分配。
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２０１６年１１月四川大学学报（自然科学版）Ｎｏｖ．２０１６第５３卷 第６期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＳｉｃｈｕａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．５３ Ｎｏ．６ｄｏｉ：１０３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０４９０－６７５６．２０１６．１１．０３７细胞自噬在植物应答盐胁迫中的作用研究朱 峰１，２，简 伟１，邓星光１，林宏辉１（１．四川大学生命科学学院，成都６１００６４；２．扬州大学园艺与植物保护学院，扬州２２５００９）摘 要：本研究以模式植物拟南芥为材料，利用生理学和遗传学手段分析了盐胁迫下细胞自噬基因和活性氧（ＲＯＳ）变化的相关性．结果表明野生型拟南芥Ｃｏｌ－０在遭受盐胁迫处理３ｄ表现了叶片漂白的症状并且会诱导ＲＯＳ的产生和积累了大量的细胞死亡．荧光定量ＰＣＲ实验表明盐胁迫会诱导细胞自噬相关基因的表达，细胞自噬参与了调控植物的防御机制来响应盐胁迫．进一步的实验表明拟南芥细胞自噬突变体ａｔｇ２和ａｔｇ５在遭受盐胁迫处理３ｄ表现了更加严重的叶片漂白症状并且积累大量的细胞死亡和ＲＯＳ．初步表明细胞自噬主要是通过调控ＲＯＳ的产生来应答盐胁迫．关键词：细胞自噬；活性氧；盐胁迫；拟南芥中图分类号：Ｑ９４５ 文献标识码：Ａ 文章编号：０４９０－６７５６（２０１６）０６－１４０３－０６收稿日期：２０１５－１２－０１基金项目：国家自然科学基金（９１４１７３０５，３１４７０３４２，３１５００２０９）；国家重点基础研究发展计划（９７３计划）（２０１５ＣＢ１５０１００）作者简介：朱峰（１９８５－），男，博士，讲师，主要研究方向为植物病理与分子生物学．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｕｆｅｎｇ＠ｙｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ通讯作者：林宏辉．Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｈｌｉｎ＠ｓｃｕ．ｅｄｕ．ｃｎＳｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓＺＨＵ Ｆｅｎｇ２，ＪＩＡＮ Ｗｅｉ１，ＤＥＮＧ Ｘｉｎｇ－Ｇｕａｎｇ１，ＬＩＮ Ｈｏｎｇ－Ｈｕｉ１（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｉｃｈｕａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６１００６４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ ２２５００９，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ，ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ（ＲＯＳ）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｕｓｉｎｇ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｐｌａｎｔ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｐｈｏｔｏ－ｂｌｅａｃｈｅｄ，ＲＯＳ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｎｄ ａｂｕｎｄａｎｔ ｃｅｌｌｄｅａｔｈ ｗａｓ ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ Ｃｏｌ－０ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ａｆｔｅｒ ３ｄａｙｓ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｒｅ－ａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｓａｌｔｓｔｒｅｓｓ．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅ ｉｎ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｄｅｆｅｎｓｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｉｅｓｓｕｇｇｅｓｔ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｓｅｒｉｏｕｓｌｙ ｐｈｏｔｏ－ｂｌｅａｃｈｅｄ，ａｂｕｎｄａｎｔ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ａｎｄ ＲＯＳ ｗｅｒｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ ｉｎｔｗｏ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｍｕｔａｎｔ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ（ａｔｇ２ａｎｄ ａｔｇ５）ａｆｔｅｒ ３ｄａｙｓ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇ－ｇｅｓｔ ｔｈａｔ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｐｒｉｍａｒｉｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅ ｔｈｅ ＲＯＳ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｕｔｏｐｈａｇｙ；Ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ（ＲＯＳ）；Ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ；Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ１ 引 言植物在生长发育过程中经常会遭受到营养缺乏等环境胁迫，细胞内完善的蛋白降解机制对于维持细胞稳态和应答环境胁迫是必要的．植物体内主要有两条蛋白降解途径，一条是通过泛素／２６Ｓ蛋白酶体途径对细胞内一些短周期的、或结构异常的蛋白进行特异性的降解［１］；另外一条主要是通过细胞自噬途径降解蛋白，它能够对细胞内长寿命的蛋白或者功能异常的细胞器进行大批量的降解，其降 四川大学学报（自然科学版） 第５３卷解蛋白的效率远远高于泛素／蛋白酶体途径．细胞自噬是指细胞分解细胞质等自身构成成分的现象．首先一些异常蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后送至液泡中进行降解［２］．细胞自噬主要有３种形式，巨自噬（ｍａｃｒｏａｕｔｏｐｈａｇｙ），微自噬（ｍｉｃｒｏａｕｔｏｐｈａｇｙ），分子伴侣介导的自噬（ｃｈａｐｅｒ－ｏｎｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｕｔｏｐｈａｇｙ）［３］．细胞自噬在各种生命活动中发挥着重要作用，比如它可以加速细胞内的新陈代谢，或者在细胞处于饥饿状态时从分解产物中获得能量．在动物研究中，虽然大多数研究成果证明细胞自噬是细胞生存的负调控因子，但是人们已经开始认识到细胞自噬也是细胞的一种生存策略［４］．在植物中，细胞自噬与植物度过营养危机和叶子的衰老有关［４］．最近的研究发现，细胞自噬可以清除氧胁迫下细胞内被氧化的蛋白［５］．研究表明植物细胞自噬在应答非生物胁迫起着非常关键的作用［６－９］．例如一些非生物胁迫会诱导细胞自噬的发生，从而调控相应生理生化机制来抵抗相关胁迫［９］．有研究表明活性氧（ＲＯＳ）可能参与介导诱导细胞自噬应答非生物胁迫［５，８］．但也有研究表明ＲＯＳ可能没有参与介导诱导细胞自噬应答非生物胁迫［６］．盐胁迫是限制粮食产量和物种分布的一个十分重要的因子．它可以影响植物一系列的生理过程，从种子萌发到植物发育［１０－１６］．另外，盐胁迫主要影响植物的光合作用，以及光合反应途径上的代谢过程［１４－１６］．在盐胁迫条件下，降低叶绿体基质容量、诱导产生ＲＯＳ，都被认为是抑制光合作用的关键因素．因此本研究拟开展探讨细胞自噬调控ＲＯＳ的积累来应答盐胁迫的机制．２ 材料与方法２．１ 材 料野生型拟南芥（Ｃｏｌ－０）和细胞自噬突变体ａｔｇ２和ａｔｇ５种子购置拟南芥生物资源中心（Ａｒａｂｉ－ｄｏｐｓｉｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ）．２．２ 方 法２．２．１ 生长条件 种子播种在营养土中，浇灌适当的水分，然后放于温室中培养．其中温室中的培养条件为：温度２５℃，光照时间１６ｈ，黑暗时间８ｈ，光照强度１００μｍｏｌ·ｍ－２·ｓ－１．待培养３～４ｗ出现４～５片真叶后，选择长势大体一致的幼苗备用．２．２．２ 盐胁迫处理 对上述三种拟南芥Ｃｏｌ、ａｔｇ２和ａｔｇ５进行盐胁迫处理．将拟南芥幼苗放入１６０ｍＭ的ＮａＣｌ溶液中，分别处理３ｄ和５ｄ．２．２．３ 活性氧染色 通过ＮＢＴ和ＤＡＢ染色分别对超氧离子和过氧化氢进行检测．具体可参考Ｚｈｕ等人［１７］的方法．２．２．４ 电导率的测定 电导率表示水的导电性即水的电阻的倒数，通常用它来表示水的纯净度．具体可参考Ｃａｏ等人［１８］的方法．２．２．５ ＲＮＡ提取和荧光定量ＰＣＲ检测 选取拟南芥幼苗提取总ＲＮＡ［１９］．荧光定量ＰＣＲ扩增使用ＴａＫａＲａ公司的ＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ Ｔａｑ试剂盒，每个循环扩增的目的基因片段通过ＳＹＢＲ－ｇｒｅｅｎ Ｉ荧光来检测，Ｃｔ值用于检测目标基因的起始拷贝数，目标基因的相对含量通过相对Ｃｔ值来表示，每组试验重复三次．Ａｃｔｉｎ基因作为内参基因．荧光定量ＰＣＲ反应引物序列见表１．表１ 荧光定量ＰＣＲ引物Ｔａｂ．１ Ｐｒｉｍｅｒｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ ａｎａｌｙｓｉｓＡＴＧ２Ａｔ３Ｇ１９１９０ＡＡＴＧＴＡＡＴＧＧＴＡＡＣＧＣＣＴＣＣ ＴＧＡＣＴＧＣＧＡＡＡＣＣＣＴＴＧＴＡＴＧ５Ａｔ５ｇ１７２９０ＡＧＡＡＣＣＣＧＡＡＡＧＡＣＣＡ ＣＴＣＡＡＣＡＧＧＧＣＧＡＴＴＡＡＴＧ８ＡＴ４Ｇ２１９８０ＧＧＣＡＡＧＧＡＴＧＡＧＴＧＡＡ ＡＡＣＣＣＡＡＡＧＧＧＡＡＡＧＡＡＴＧ１８ａＡＴ３Ｇ６２７７０ＡＧＧＧＴＧＴＴＧＧＴＴＣＴＡＴＧ ＴＧＧＡＣＣＧＴＴＣＣＴＴＴＧＴＡｃｔｉｎ Ａｔ２ｇ３７６２０ＣＡＴＣＡＧＧＡＡＧＧＡＣＴＴＧＴＡＣＧＧ ＧＡＴＧＧＡＣＣＴＧＡＣＴＣＧＴＣＡＴＡＣ３ 结果与分析３．１ 盐胁迫对拟南芥表型及生理的影响植物在遭受到非生物胁迫如干旱胁迫、冷胁迫、盐胁迫等就会改变自身的生理生化反应，启动相应的防御机制来抵抗这些非生物胁迫．我们利用１６０ｍＭ的ＮａＣｌ溶液处理Ｃｏｌ－０幼苗３天，使用蒸馏水作为对照．结果显示ＮａＣｌ溶液处理后，与对照相比Ｃｏｌ－０表现出了胁迫的症状，叶片有明显的漂白现象（图１Ａ）．电导率检测结果显示用ＮａＣｌ溶液处理的Ｃｏｌ－０中电导率的含量是对照组的２．２９倍（图１Ｂ）．这些结果表明Ｃｏｌ－０在遭受盐胁４０４１第６期朱峰，等：细胞自噬在植物应答盐胁迫中的作用研究迫处理后积累了大量的死亡细胞．植物在遭受到非生物胁迫会诱导活性氧（ＲＯＳ）来应答这些非生物胁迫．ＲＯＳ是一种重要的信号分子，在调节植物应答非生物胁迫的防御反应起着非常重要的作用．为了分析这一过程是否有ＲＯＳ的参与，分别利用ＮＢＴ和ＤＡＢ染色检测盐胁迫处理的Ｃｏｌ－０叶片中ＲＯＳ的变化．ＮＢＴ染色显示ＮａＣｌ溶液处理的Ｃｏｌ－０中超氧离子的含量显著升高（图１Ｃ）．同样ＤＡＢ染色显示ＮａＣｌ溶液处理的Ｃｏｌ－０中过氧化氢的含量显著升高（图１Ｄ）．以上结果显示Ｃｏｌ－０在遭受盐胁迫处理后会诱导ＲＯＳ的产生．图１ ＮａＣｌ胁迫对拟南芥Ｃｏｌ－０幼苗的表型及生理的影响Ａ．盐胁迫对Ｃｏｌ－０表型的影响；Ｂ．盐胁迫对Ｃｏｌ－０电导率的影响，＊表示差异显著（Ｐ＜０．０５）；Ｃ．ＮＢＴ染色；Ｄ ＤＡＢ染色Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ ｏｎ ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ Ｃｏｌ－０ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ３．２ 盐胁迫诱导细胞自噬基因的表达已有的研究表明植物细胞自噬在应答非生物胁迫起着非常关键的作用［６，７］．为了探究植物细胞自噬相关基因是否参与盐胁迫应答，我们利用荧光定量ＰＣＲ的方法检测了ＡＴＧ２，ＡＴＧ５，ＡＴＧ８，ＡＴＧ１８ａ基因的表达量，结果如图２所示盐胁迫处理后，Ｃｏｌ－０中的细胞自噬相关基因的表达被诱导（图２）．其中盐胁迫处理３ｄ后ＡＴＧ２，ＡＴＧ５，ＡＴＧ８，ＡＴＧ１８ａ基因的表达量分别是对照组的２．２、１．９、２．７、２．８倍，盐胁迫处理处理５天后ＡＴＧ２，ＡＴＧ５，ＡＴＧ８，ＡＴＧ１８ａ基因的表达量分别是对照组的４．１、４．２、５．２、５．９倍（图２）．这一结果说明盐胁迫能诱导细胞自噬基因的表达．３．３ 盐胁迫对拟南芥细胞自噬突变体的表型及生理的影响为了进一步探讨细胞自噬是怎样调控植物的防御机制来响应盐胁迫．我们利用１６０ｍＭ的ＮａＣｌ溶液处理拟南芥细胞自噬突变体ａｔｇ２和ａｔｇ５．结果表明这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后都表现出了胁迫症状，叶片有不同程度的漂白现象（图３Ａ）ａｔｇ２和ａｔｇ５突变体在经过盐胁迫处理后表现出更加严重的胁迫症状，叶片的漂白现象更加严重（图３Ａ）．这就说明了细胞自噬突变体对于盐胁迫的抗性明显减弱，缺少细胞自噬相关基因就会使植物对盐胁迫变得更加敏感．然后我们检测了这三种拟南芥在遭受盐胁迫后电导率的变化．结果表明这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后电导率的含量都有所升高（图３Ｂ）．ａｔｇ２和ａｔｇ５在经过盐胁迫处理后电导率的含量比Ｃｏｌ－０中更高（图３Ｂ）．说明了ａｔｇ２和ａｔｇ５在经过盐胁迫处理后积累了更多的细胞死亡，展示了更加严重的胁迫症状．３．４ 细胞自噬突变体在遭受盐胁迫处理后活性氧的变化利用１６０ｍＭ的ＮａＣｌ溶液处理Ｃｏｌ－０、ａｔｇ２和ａｔｇ５幼苗３ｄ，检测这三种拟南芥的ＲＯＳ的变化．ＮＢＴ染色显示这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后超氧离子的含量都有所升高（图４）．与Ｃｏｌ－０相比，ａｔｇ２和ａｔｇ５在经过盐胁迫处理后超氧５０４１四川大学学报（自然科学版）第５３卷图２ 荧光定量ＰＣＲ检测盐胁迫下细胞自噬相关基因ＡＴＧ２，ＡＴＧ５，ＡＴＧ８，ＡＴＧ１８ａ的表达不同字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）Ｆｉｇ．２ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｓＡＴＧ２，ＡＴＧ５，ＡＴＧ８，ＡＴＧ１８ａｄｕｒｉｎｇ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ图３ 盐胁迫对拟南芥细胞自噬突变体的表型（Ａ）及电导率（Ｂ）的影响＊表示差异显著（Ｐ＜０．０５）；＊＊表示差异极显著（Ｐ＜０．０１）Ｆｉｇ．３ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ ｏｎ ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ（Ａ）ａｎｄ ｅ－ｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ ｌｅａｋａｇｅ（Ｂ）ｏｆ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ａｕｔｏｐｈａｇｙｍｕｔａｎｔ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ａｔｇ２ａｎｄ ａｔｇ５离子的含量显著升高（图４）．同样ＤＡＢ染色表明这三种拟南芥在遭受盐胁迫处理后过氧化氢的含量都有所升高（图４）．ａｔｇ２和ａｔｇ５在经过盐胁迫处理后过氧化氢的含量比Ｃｏｌ－０经过盐胁迫处理后更高（图４）．综上所述，我们的结果表明了植物缺少细胞自噬在遭受盐胁迫处理后会积累大量的ＲＯＳ，表现了严重的胁迫症状，抗性显著减弱．说明了细胞自噬可以调控植物的ＲＯＳ的产生来应答盐胁迫．图４ 盐胁迫对拟南芥细胞自噬突变体的活性氧积累的影响Ｆｉｇ．４ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ ｏｎ ｔｈｅ ＲＯＳ ａｃｃｕｍｕｌａ－ｔｉｏｎ ｏｆ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｍｕｔａｎｔｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ａｔｇ２ａｎｄ ａｔｇ５６０４１第６期 朱峰，等：细胞自噬在植物应答盐胁迫中的作用研究 ４ 讨 论植物在遭受到非生物胁迫如干旱胁迫、冷胁迫、盐胁迫等就会改变自身的生理生化反应，启动相应的防御机制来抵抗这些非生物胁迫［２０］．我们的结果表明了拟南芥在遭受盐胁迫处理后表现了胁迫症状，叶片有漂白现象．这说明了拟南芥在遭受到盐胁迫处理后可能改变了自身的生理生化反应，启动相应的防御机制来抵抗盐胁迫．另外通过检测电导率的含量发现拟南芥在遭受盐胁迫处理后电导率的含量上升，说明了植物在遭受盐胁迫处理后质膜通透性发生了改变，植物积累了大量的死亡细胞．植物在遭受到非生物胁迫会诱导ＲＯＳ来应答这些非生物胁迫．ＲＯＳ是一种重要的信号分子，在调节植物应答非生物胁迫的防御反应起着非常重要的作用［２１－２２］．盐胁迫会造成细胞氧化损伤，造成ＲＯＳ和氧化蛋白的积累［２３］．我们的结果表明拟南芥在遭受盐胁迫处理后会诱导ＲＯＳ的产生．研究表明植物细胞自噬在应答非生物胁迫起着非常关键的作用［２４］．例如一些非生物胁迫会诱导细胞自噬的发生，从而调控相应生理生化机制来抵抗相关胁迫．细胞自噬具有清除氧化蛋白、调控ＲＯＳ水平的作用，细胞自噬很可能与高盐胁迫应答有关．之前有报道某些ＡＴＧ基因，如拟南芥ＡｔＡＴＧ８和水稻ＯｓＡＴＧ１０ｂ基因参与到盐胁迫的反应当中［７，９］．植物遭受氧化胁迫后，细胞自噬可以降解液泡中的被氧化的蛋白，将拟南芥细胞自噬相关基因ＡｔＡＴＧ１８ａ沉默后，植物降解氧化蛋白的能力就减弱了［５，８］．Ｂａｓｓｈａｍ等人研究细胞自噬在氧化胁迫中的作用，发现高盐和渗透胁迫可以激活细胞自噬，ＡｔＡＴＧ１８ａ的表达也会被诱导上升．细胞自噬缺陷的ＡｔＡＴＧ１８ａＲＮＡｉ植株对这两种胁迫变得敏感［６］．我们的结果表明了盐胁迫处理会诱导细胞自噬的发生，从而调控相应生理生化机制来抵抗盐胁迫，细胞自噬参与了调控植物的防御机制来响应盐胁迫．我们的结果进一步表明了细胞自噬在调控植物的防御机制来响应盐胁迫与调控ＲＯＳ的产生有关．细胞自噬突变体在经过盐胁迫处理后表现更加严重的胁迫症状，叶片的漂白现象更加严重．这就说明了拟南芥细胞自噬突变体对于盐胁迫的抗性显著减弱．缺少细胞自噬植物的抗性就会减弱，进一步说明了细胞自噬在植物应答盐胁迫响应起着非常重要的作用．通过电导率测量的实验表明了细胞自噬突变体在经过盐胁迫处理后积累了更多的细胞死亡，展示了更加严重的胁迫症状．最后ＲＯＳ检测实验表明了植物缺少细胞自噬在遭受盐胁迫处理后会积累大量的ＲＯＳ，表现了严重的胁迫症状，缺乏抗性．研究表明ＡｔＡＴＧ１８ａＲＮＡｉ植株中氧化蛋白和ＲＯＳ都高于野生型植株，这就暗示了细胞自噬可以降解氧化蛋白，负责细胞内自身产生的ＲＯＳ胁迫［８］．还有研究也表明了细胞自噬可以调控细胞内ＲＯＳ的产生，拟南芥细胞自噬突变体ａｔｇ２、ａｔｇ５中的ＲＯＳ水平上升，证实了细胞自噬能够负调控体内ＲＯＳ的产生［２５］．综上所述我们的结果表明细胞自噬可能通过负调控植物的ＲＯＳ的产生来应答盐胁迫．参考文献：［１］ Ｓｍａｌｌｅ Ｊ，Ｖｉｅｒｓｔｒａ Ｒ Ｄ．Ｔｈｅ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ ２６Ｓｐｒｏｔｅａ－ｓｏｍｅ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｌａｎｔ Ｂｉ－ｏｌ，２００４，５５：５５５．［２］ Ｋｌｉｏｎｓｋｙ Ｄ Ｊ，Ｅｍｒ Ｓ Ｄ．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ａｓ ａ ｒｅｇｕｌａｔｅｄｐａｔｈｗａｙ ｏｆ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０００，２９０：１７１７．［３］ Ｍａｓｓｅｙ Ａ，Ｋｉｆｆｉｎ Ｒ，Ｃｕｅｒｖｏ Ａ Ｍ．Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｕｔｏｐｈａｇｙ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｂｉｏ－ｃｈｅｍ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ，２００４，３６：２４２０．［４］ Ｂａｓｓｈａｍ Ｄ Ｃ．Ｐｌａｎｔ ａｕｔｏｐｈａｇｙ－ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ａ ｓｔａｒｖａ－ｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｌ，２００７，１０：５８７．［５］ Ｘｉｏｎｇ Ｙ，Ｃｏｎｔｅｎｔｏ Ａ Ｌ，Ｎｇｕｙｅｎ Ｐ Ｑ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｇ－ｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｂｙ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｄｕｒｉｎｇｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ．Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００７，１４３：２９１．［６］ Ｌｉｕ Ｙ，Ｘｉｏｎｇ Ｙ，Ｂａｓｓｈａｍ，Ｄ Ｃ．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｓ ｒｅ－ｑｕｉｒｅｄ ｆｏｒ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｏｆ ｄｒｏｕｇｈｔ ａｎｄ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ ｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ，２００９，５：９５４．［７］ Ｓｌａｖｉｋｏｖａ Ｓ，Ｕｆａｚ Ｓ，Ａｖｉｎ－Ｗｉｔｔｅｎｂｅｒｇ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ａｎａｕｔｏｐｈａｇｙ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ａｔｇ ８ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎｔｈｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｏｆ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ｔｏ ｈｏｒｍｏｎａｌｃｏｎｔｒｏｌｓ ａｎｄ ａｂｉｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓｅｓ［Ｊ］．２００８，Ｊ Ｅｘｐ Ｂｏｔ，５９：４０２９．［８］ Ｘｉｏｎｇ Ｙ，Ｃｏｎｔｅｎｔｏ Ａ Ｌ，Ｂａｓｓｈａｍ Ｄ Ｃ．Ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎｏｆ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ［Ｊ］．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ，２００７，３：２５７．［９］ Ｓｈｉｎ Ｊ Ｈ，Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ Ｋ，Ｏｈｓｕｍｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｏｓ－ＡＴＧ１０ｂ，ａｎ ａｕｔｏｐｈａｇｏｓｏｍｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ｉｓ ｎｅｅｄｅｄｆｏｒ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｇａｉｎｓｔ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓｅｓ ｉｎ ｒｉｃｅ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌｓ，２００９，２７：６７．［１０］ 黄立华，梁正伟．不同钠盐胁迫对高冰草种子萌发的影响［Ｊ］．干旱区资源与环境，２００７，２１：１７３．７０４１ 四川大学学报（自然科学版） 第５３卷［１１］ 王素平，郭世荣，李璟，等．盐胁迫对黄瓜幼苗根系生长和水分利用的影［Ｊ］．应用生态学报，２００６，１７：１８８３．［１２］ 段九菊，郭世荣，康云艳，等．盐胁迫对黄瓜幼苗根系生长和多胺代谢的影响［Ｊ］．应用生态学报，２００８，１９：５７．［１３］ Ｗａｎｇ Ｙ Ｎ，Ｚｈａｎｇ Ｗ Ｓ，Ｌｉ Ｋ Ｘ，ｅｔ ａｌ．Ｓａｌｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ ｏｆ ｒｏｏｔ ｈａｉｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｉｏｎｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＲｅｓ，２００８，１２１：８７．［１４］ 韩亚琦，唐宇丹，张少英，等．盐胁迫抑制槲栎２变种光合作用的机理研究［Ｊ］．西北植物学报，２００７，２７：５８３．［１５］ 林莺，李伟，范海，等．海滨锦葵光合作用对盐胁迫的响应［Ｊ］．山东师范大学学报，２００６，２１：１１８．［１６］ Ｆｌｅｘａｓ Ｊ，Ｂｏｔａ Ｊ，Ｇａｌｍéｓ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｋｅｅｐｉｎｇ ａｐｏｓｉ－ｔｉｖｅ ｃａｒｂｏｎ ｂａｌａｎｃｅ ｕｎｄｅｒ ａｄｖｅｒｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ：ｒｅ－ｓｐｏｎｓｅｓ ｏｆ ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｒｅｓｐｉｒａｔｉｏｎ ｔｏ ｗａｔｅｒｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｐｌａｎｔ，２００６，１２７：３４３．［１７］ Ｚｈｕ Ｆ，Ｚｈａｎｇ Ｐ，Ｍｅｎｇ Ｙ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ａｌｐｈａ－ｍｏｍｏｒ－ｃｈａｒｉｎ，ａ ＲＩＰ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｂｉｔｔｅｒ ｍｅｌｏｎ，ｅｎｈａｎｃｅｓｄｅｆｅｎｓｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｔｏｂａｃｃｏ ｐｌａｎｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｄｉｖｅｒｓｅｐｌａｎｔ ｖｉｒｕｓｅｓ ａｎｄ ｓｈｏｗｓ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ，２０１３，２３７：７７．［１８］ Ｃａｏ Ｙ，Ｚｈａｎｇ Ｚ Ｗ，Ｘｕｅ Ｌ Ｗ，ｅｔ ａｌ．Ｌａｃｋ ｏｆ ｓａｌｉ－ｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ＮａｈＧ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ｐｌａｎｔｓ ａ－ｇａｉｎｓｔ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｚ Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ ｃ，２００９，６４：２３１．［１９］ 孙炎锋，吕东，王丽，等．１３－脂氧合酶在拟南芥叶片衰老中的作用分析［Ｊ］．四川大学学报（自然科学版），２０１３，５０：１３９１．［２０］ 滕中秋，付卉青，贾少华，等．邓玉林植物应答非生物胁迫的代谢组学研究进展［Ｊ］．植物生态学报，２０１１，３５：１１０．［２１］ Ｗｒｚａｃｚｅｋ Ｍ，ＢｒｏｓｃｈéＭ，Ｋａｎｇａｓｊ ｒｖｉ Ｊ．ＲＯＳ ｓｉｇ－ｎａｌｉｎｇ ｌｏｏｐｓ－ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｐｅｒｃｅｐｔｉｏｎ，ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｌ，２０１３，１６：５７５．［２２］ Ｂａｘｔｅｒ Ａ，Ｍｉｔｔｌｅｒ Ｒ，Ｓｕｚｕｋｉ Ｎ．ＲＯＳ ａｓ ｋｅｙ ｐｌａｙｅｒｓｉｎ ｐｌａｎｔ ｓｔｒｅｓｓ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．Ｊ Ｅｘｐ Ｂｏｔ，２０１４，６５：１２２９．［２３］ Ｔｓｕｇａｎｅ Ｋ，Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｋ，Ｎｉｗａ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ａ ｒｅｃｅｓ－ｓｉｖｅ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｍｕｔａｎｔ ｔｈａｔ ｇｒｏｗｓ ｐｈｏｔｏａｕｔｏｔｒｏｐｈ－ｉｃａｌｌｙ ｕｎｄｅｒ ｓａｌｔ ｓｔｒｅｓｓ ｓｈｏｗｓ ｅｎｈａｎｃｅｄ ａｃｔｉｖｅ ｏｘｙ－ｇｅｎ ｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ，１９９９，１１：１１９５．［２４］ 王燕，刘玉乐．细胞自噬研究进展［Ｊ］．中国细胞生物学学报，２０１０，３２：６７７．［２５］ Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ Ｋ，Ｊｉｋｕｍａｒｕ Ｙ，Ｋａｍｉｙａ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ａｕｔｏ－ｐｈａｇｙ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｂｙ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇＮＰＲ１－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｄｕｒｉｎｇ ｓｅ－ｎｅｓｃｅｎｃｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ Ａｒａｂｉ－ｄｏｐｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ，２００９，２１：２９１４．８０４１。