性病的实验室检测及其意义 ppt课件
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敏感性及特异性：95%～99% • 宫颈标本、无症状男性尿道标本
敏感性：40～70%
• 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌 感染。
如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性 双球菌，需进一步培养确认。
2020/12/27
3
淋球菌培养
培养法为诊断淋病的金标准。
从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。
2020/12/27
21
梅毒螺旋体传代时间为30～33小时，繁殖方式主 要为横断分裂。 1998年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。
2020/12/27
22
梅毒实验室检测的特点
• 不同原理的方法：检测策略 • 临床意义解释复杂：不同方法结果判断、血清固定、前带现象 • 缺乏特殊梅毒的有效检测方法：胎传梅毒、神经梅毒
2020/12/27
17
梅毒螺旋体透明而不易被染色，在普通显微镜 下不易发现，只有在暗视野显微镜、免疫荧光 或Fontana镀银染色等特殊染色下才能观察到
。
2020/12/27
18
梅毒螺旋体在体外不易生存，离开人体很快死 亡，其生存最适温度为37℃。煮沸、干燥、肥 皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。
2020/12/27
24
梅毒螺旋体暗视野检查
材料
暗视野显微镜、钝刀（刮勺）、载玻片、注射器、 注射针头、无菌等渗盐水。
2020/12/27
25
梅毒螺旋体暗视野检查
取材
皮肤粘膜损害取材：首先在载玻片（厚度为1.0～ 1.2mm）上滴加50～100μL盐水备用。然后用棉拭子 取无菌盐水轻轻擦去皮损上的污物。如皮损上有痂 皮，可用钝刀小心除去。再用钝刀轻轻地刮数次（ 避免出血），取组织渗液与载玻片上的盐水混匀， 加盖玻片置暗视野显微镜下检查。
优 点:
敏感性：-98％ 特异性: -99％
缺 点：
实验室条件和技术要求高 成本高、费时、假阳性
2020/12/27
11
生殖器疱疹实验室诊断
HSV实验室诊断的意义
– 临床诊断的准确性：50%～70%，通过实验室检测手段 可帮助诊断
– 亚临床感染: 孕妇、性伴的检测等
进行HSV分型的意义
– HSV-2是该病的主要病原体， – HSV-1约占该病的30% – 两型HSV感染的预后不同
2020/12/27
19
梅毒螺旋体不耐热，加热至42℃ 2个小时可将 它杀死，100℃时立即死亡；但耐低温，在0℃ 时可存活48小时，置于-78℃数年仍具有传染 性。
2020/12/27
20
梅毒螺旋体尚不能在体外培养繁殖，人是其唯 一的自然宿主。梅毒螺旋体可在家兔睾丸中生 长繁殖，用于抗原制备和实验研究。
2020/12/27
12
生殖器疱疹实验室诊断方法
病原学诊断 －病毒检测 －抗原检测 －DNA检测
血清学检测-抗体检测
2020/12/27
13
HSV血清学检测的意义
HSV感染的血清流行病学调查 感染者性伴的HSV感染状况的判断 孕妇产前监测
HSV型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症 状生殖器HSV感染者的最可行手段，对于防止性伴间 和母婴间HSV传播有着重要意义
初步鉴定淋球菌的主要依据
菌落特征 氧化酶试验 革兰染色
2020/12/27
4
淋球菌培养的的临床意义
培养特异性：100%，敏感性 81-100% 。 宫颈、无症状男性尿道、直肠、咽部标本等 应做淋球菌培养 可发现无症状淋球菌感染患者； 可用于进一步作药敏试验； 可用于治疗后的判愈试验。
2020/12/27
缺点： 标本中需要足够数量的沙眼衣 原体抗原，否则有假阴性结果
敏感性 特异性
宫颈标本
50% 98%
阴道标本
33% 99%
2020/12/27
9
衣原体核酸检测
现有的核酸检测方法 • PCR • LCR • SDA • TMA
• Real time PCR
2020/12/27
10
衣原体核酸检测的临床意义
病原学检测
暗视野显微镜检查 银染色镜检 核酸检测
血清学检测
非梅毒螺旋体抗原血清学检测 梅毒螺旋体抗原血清学检测
VDRL
FTA-ABS
USR
TPPA/ APHA
RPR TRUST
ELISA 发光法
胶体金法
2020/12/27
23
梅毒螺旋体暗视野检查
原理
暗视野映光检查是采用一个特殊的聚光器，分为干系 和湿系两种，其中央均为黑漆所遮蔽，仅在圆周边留 有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻 片上。梅毒螺旋体检查一般采用湿系聚光器。倘若斜 射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发 光显现。本法检查梅毒螺旋体对于梅毒有病原学诊断 的价值。
2020/12/27
14
HPV-DNA检测的意义
HPV感染流行病学调查 HPV DNA定型 高危型HPV病毒负荷的增加可使 女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加
2020/12/27
15
梅毒实验室监测及临床意义
2020/12/27
16
梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)，是一种小而纤细的 螺旋状微生物，长5～15m，直径约0.2m，活体 平均有8～14个规则的螺旋。
性病的实验室检测及其意义
2020/12/27
1
淋病的实验室诊断
淋病的主要实验室诊断方法
— 直接显微镜检查； — 分离培养淋球菌； — 非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原
或DNA（EIA, PCR/LCR）
2020/12/27
2Biblioteka Baidu
显微镜检查的临床意义
• 男性尿道标本: 多形核细胞内见到形态典型的革兰阴性双球菌 具诊断价值
5
淋病其它诊断技术
核酸检测的特点及临床意义
• 不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件； • 敏感性高，不仅适合尿道或宫颈标本，还可以采用
尿液、阴道标本； • 不能进行抗生素敏感性试验； • 用于判愈试验需在治疗后至少3 周以上进行.
2020/12/27
6
沙眼衣原体感染的实验室诊断
• 细胞培养法 • 免疫层析快速抗原检测 • 酶联免疫抗原检测 • 核酸扩增检测
2020/12/27
7
衣原体培养的临床意义
2020/12/27
• 敏感性70％～80％ • 特异性100％ • 可用于判愈 • 可用于确诊
缺点
• 费时（需3～5天），费力，技术要求高 • 不宜作为临床常规检查 • 不宜用于大规模的筛查和流行病学调查
8
衣原体抗原快速检测的临床意义
优点：
简易，方便，快速，尤其 适用于基层单位
敏感性：40～70%
• 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌 感染。
如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性 双球菌，需进一步培养确认。
2020/12/27
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淋球菌培养
培养法为诊断淋病的金标准。
从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。
2020/12/27
21
梅毒螺旋体传代时间为30～33小时，繁殖方式主 要为横断分裂。 1998年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。
2020/12/27
22
梅毒实验室检测的特点
• 不同原理的方法：检测策略 • 临床意义解释复杂：不同方法结果判断、血清固定、前带现象 • 缺乏特殊梅毒的有效检测方法：胎传梅毒、神经梅毒
2020/12/27
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梅毒螺旋体透明而不易被染色，在普通显微镜 下不易发现，只有在暗视野显微镜、免疫荧光 或Fontana镀银染色等特殊染色下才能观察到
。
2020/12/27
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梅毒螺旋体在体外不易生存，离开人体很快死 亡，其生存最适温度为37℃。煮沸、干燥、肥 皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。
2020/12/27
24
梅毒螺旋体暗视野检查
材料
暗视野显微镜、钝刀（刮勺）、载玻片、注射器、 注射针头、无菌等渗盐水。
2020/12/27
25
梅毒螺旋体暗视野检查
取材
皮肤粘膜损害取材：首先在载玻片（厚度为1.0～ 1.2mm）上滴加50～100μL盐水备用。然后用棉拭子 取无菌盐水轻轻擦去皮损上的污物。如皮损上有痂 皮，可用钝刀小心除去。再用钝刀轻轻地刮数次（ 避免出血），取组织渗液与载玻片上的盐水混匀， 加盖玻片置暗视野显微镜下检查。
优 点:
敏感性：-98％ 特异性: -99％
缺 点：
实验室条件和技术要求高 成本高、费时、假阳性
2020/12/27
11
生殖器疱疹实验室诊断
HSV实验室诊断的意义
– 临床诊断的准确性：50%～70%，通过实验室检测手段 可帮助诊断
– 亚临床感染: 孕妇、性伴的检测等
进行HSV分型的意义
– HSV-2是该病的主要病原体， – HSV-1约占该病的30% – 两型HSV感染的预后不同
2020/12/27
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梅毒螺旋体不耐热，加热至42℃ 2个小时可将 它杀死，100℃时立即死亡；但耐低温，在0℃ 时可存活48小时，置于-78℃数年仍具有传染 性。
2020/12/27
20
梅毒螺旋体尚不能在体外培养繁殖，人是其唯 一的自然宿主。梅毒螺旋体可在家兔睾丸中生 长繁殖，用于抗原制备和实验研究。
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生殖器疱疹实验室诊断方法
病原学诊断 －病毒检测 －抗原检测 －DNA检测
血清学检测-抗体检测
2020/12/27
13
HSV血清学检测的意义
HSV感染的血清流行病学调查 感染者性伴的HSV感染状况的判断 孕妇产前监测
HSV型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症 状生殖器HSV感染者的最可行手段，对于防止性伴间 和母婴间HSV传播有着重要意义
初步鉴定淋球菌的主要依据
菌落特征 氧化酶试验 革兰染色
2020/12/27
4
淋球菌培养的的临床意义
培养特异性：100%，敏感性 81-100% 。 宫颈、无症状男性尿道、直肠、咽部标本等 应做淋球菌培养 可发现无症状淋球菌感染患者； 可用于进一步作药敏试验； 可用于治疗后的判愈试验。
2020/12/27
缺点： 标本中需要足够数量的沙眼衣 原体抗原，否则有假阴性结果
敏感性 特异性
宫颈标本
50% 98%
阴道标本
33% 99%
2020/12/27
9
衣原体核酸检测
现有的核酸检测方法 • PCR • LCR • SDA • TMA
• Real time PCR
2020/12/27
10
衣原体核酸检测的临床意义
病原学检测
暗视野显微镜检查 银染色镜检 核酸检测
血清学检测
非梅毒螺旋体抗原血清学检测 梅毒螺旋体抗原血清学检测
VDRL
FTA-ABS
USR
TPPA/ APHA
RPR TRUST
ELISA 发光法
胶体金法
2020/12/27
23
梅毒螺旋体暗视野检查
原理
暗视野映光检查是采用一个特殊的聚光器，分为干系 和湿系两种，其中央均为黑漆所遮蔽，仅在圆周边留 有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻 片上。梅毒螺旋体检查一般采用湿系聚光器。倘若斜 射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发 光显现。本法检查梅毒螺旋体对于梅毒有病原学诊断 的价值。
2020/12/27
14
HPV-DNA检测的意义
HPV感染流行病学调查 HPV DNA定型 高危型HPV病毒负荷的增加可使 女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加
2020/12/27
15
梅毒实验室监测及临床意义
2020/12/27
16
梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)，是一种小而纤细的 螺旋状微生物，长5～15m，直径约0.2m，活体 平均有8～14个规则的螺旋。
性病的实验室检测及其意义
2020/12/27
1
淋病的实验室诊断
淋病的主要实验室诊断方法
— 直接显微镜检查； — 分离培养淋球菌； — 非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原
或DNA（EIA, PCR/LCR）
2020/12/27
2Biblioteka Baidu
显微镜检查的临床意义
• 男性尿道标本: 多形核细胞内见到形态典型的革兰阴性双球菌 具诊断价值
5
淋病其它诊断技术
核酸检测的特点及临床意义
• 不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件； • 敏感性高，不仅适合尿道或宫颈标本，还可以采用
尿液、阴道标本； • 不能进行抗生素敏感性试验； • 用于判愈试验需在治疗后至少3 周以上进行.
2020/12/27
6
沙眼衣原体感染的实验室诊断
• 细胞培养法 • 免疫层析快速抗原检测 • 酶联免疫抗原检测 • 核酸扩增检测
2020/12/27
7
衣原体培养的临床意义
2020/12/27
• 敏感性70％～80％ • 特异性100％ • 可用于判愈 • 可用于确诊
缺点
• 费时（需3～5天），费力，技术要求高 • 不宜作为临床常规检查 • 不宜用于大规模的筛查和流行病学调查
8
衣原体抗原快速检测的临床意义
优点：
简易，方便，快速，尤其 适用于基层单位